一种以壳聚糖为载体的禽药及其制备方法

一种以壳聚糖为载体的禽药及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种以壳聚糖为载体制备禽药的方法及应用。上述禽药包括下述重量份数的原料：马齿笕提取物粉末2～4份、酸枣仁提取物粉末3～5份、黄芪多糖3～5份、维生素C2～4份。以本发明所述方法制备的以壳聚糖为载体制备禽药：针对家禽类养殖中禽流感、大肠杆菌感染等疾病病原混合感染及抗菌药物的滥用导致大量耐药菌株出现及许多抗生素和化学抗菌药失效的现状，可达到一次给药，同时可达到治疗预防两种或两种以上的禽病。
【专利说明】
一种以壳聚糖为载体的禽药及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种以壳聚糖为载体制备禽药的方法及应 用。
【背景技术】
[0002] 家禽养殖在中国已有5 000多年的历史。自改革开放30多年以来，作为我国畜牧业 支柱产业的家禽养殖业发展迅速，在模式、技术上都有一定的进步，禽类养殖业必然要走规 模化、集约化、产业化的道路。而现阶段，我国的家禽养殖仍以小规模大群体为主，而规模 化、现代化养殖正在兴起。
[0003] 在我国农业生产中，家禽类养殖一直占有着不可或缺的部分，而禽肉类制品阶段 性的成为我国出口创汇的优势产品。现有的，我国家禽类养殖业存在的问题:首先传统的农 业养殖方法根深蒂固，现代的机械化农业的推进缓慢;其次，在实际生产过程中，家禽养殖 受到诸如传染性支气管炎、禽流感、新城疫、大肠杆菌感染等疾病的威胁，使得养殖户在家 禽类养殖的选择上不得不小心谨慎，养殖户的利益得不到保证，以上问题在很大程度上影 响我国的家禽业养殖的发展。
[0004] 目前，随着家禽养殖业集约化程度的不断提高，禽的传染性支气管炎、禽流感、新 城疫、大肠杆菌感染等疾病病原常混合感染使临床症状复杂化或非典型化;饲料添加剂中 抗菌药物的应用，导致大量耐药菌株的出现，许多抗生素和化学抗菌药日趋失效;公共卫生 和食品安全问题日益突出，更增加了临床用药的难度和费用。因此，开发高效、毒性小、副作 用少的天然中草药提取物预防禽类疾病成为国家中兽药创新发展方向，产品的推广和应用 可以解决抗生素药物残留、部分代替抗菌素，控制畜禽重大疫病流行和发生，提高我国畜禽 产品出口的竞争力。

【发明内容】

[0005] 为了解决禽的禽流感、大肠杆菌感染等疾病病原混合感染;抗菌药物的滥用导致 大量耐药菌株出现及许多抗生素和化学抗菌药失效，本发明提供一种以壳聚糖为载体制备 禽药的方法及应用。本发明是通过下述的技术方案来实现的： 一种以壳聚糖为载体的禽药包括下述重量份数的原料：马齿笕提取物粉末2~4份、酸 枣仁提取物粉末3~5份、黄芪多糖3~5份、维生素 C2~4份。
[0006] 优选的，上述马齿笕提取物粉末的制备过程为：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于50~ 60 °C干燥箱中干燥3~5h，后于质量分数为70%的乙醇溶液中浸泡18~24h，质量分数为70% 的乙醇没过马齿笕，将马齿笕与质量分数为70%的乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室 温下以80~120rmp的速度绞碎8~1 Omin，静置2~4 h，制得马齿笕粗提取液；（2 )向步骤（1) 所得马齿笕粗提取液中加质量分数为70%乙醇，调节pH4-7，于搅拌回流机中提取2-4h，制 得马齿笕提取液，所述马齿笕粗提取液与70%乙醇的体积比为1:20~40,所述提取温度为60 ~80°C，所述搅拌速度为60~80rmp; (3)步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液 放入1号离心容器，并将容器放入离心机中于5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液 放入2号离心容器中，室温静置1~2小时，再以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上 清液放入冷库中预冷至-2~-4°C，后置于-40 °C的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂 使物料完全冻结，并保持3~4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度 为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C，干燥 1~2h，得马齿笕提取物粉末。
[0007] 优选的，上述酸枣仁提取物粉末的制备过程为：（1)酸枣仁洗净晾干，于50~60°C 的干燥箱中干燥3~5h，干法粉碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一20°C下 超微粉碎20.0 min，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质量分数为70%的的乙 醇混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以80~120rmp的转速搅拌 8~10min，静置2~4 h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1)中的粗提液中继续加入 70%乙醇，调节pH值为4~7，于搅拌回流机中提取2~4h，得酸枣仁提取液备用，所述酸枣仁 粗提取液与质量分数为70%的乙醇的体积比为1:10~30,所述提取温度为60~80°C，所述搅 拌速度为每分钟60~80rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放入1号 离心容器，并放入离心机中于5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液液放入2号离心 管中，室温静置1~2小时，再以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上清液放入冷库 中预冷至-2~-4°C，后置于-40°C的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻 结，并保持3~4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时 打开加热板，控制加热板温度20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C，干燥1~2h，得酸枣 仁提取物粉末。
[0008] -种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球 的制备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备。
[0009] 其中，上述高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为〇. 5~0.6: 0.3~0.4:0.1，量取1~3g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至为质量分数为1~3%的醋酸+ 柠檬酸+抗坏血酸溶液，记为A; 5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值为4~6，得 质量分数为5%的多聚磷酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧 化钠溶液备用； (2 )向质量分数为1~3%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖， 于37°C下振荡24h，静置除泡，制备壳聚糖质量分数为1~3%的壳聚糖酸溶液，记为B; (3) 马齿笕提取物粉末2~4份、酸枣仁提取物粉末3~5份及去离子水23~25份于25~ 60°C下超声得粉末混合液，记为C，备用； (4) 将B与C混合，并于25~60°C下以15~20r/min的转速下搅拌7~10min，冷却至室温 后加入甘油醛进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所 述交联时间为70~90min; (5) 将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液与多 聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡3~4h，用去离子水 将微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置18-24h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微 球微波辐射2~5min即得高强度壳聚糖载药微球。
[0010]特别的，上述壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1) 黄芪多糖3~5份、维生素 C 2~4份，去离子水23~25份于25~40°C下超声混合得混 合液，记为E，备用； (2) 硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3) 将E加入F中并于25~60°C、15~20r/min的转速下搅拌7~lOmin，冷却至室温，加入 甘油醛交联剂及高强度壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的 质量比为1:50,所述交联时间为70~90min; (4) G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖微球，所述 壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球在质量分数 为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡5~7h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将含有硅 胶的壳聚糖微球放入80°C质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离子水清洗3 次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得壳聚糖微多孔 载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-20~_40°C下冷冻120~180min，后于-10~-20 °C下干燥500~600min，升高温度再次于10~20°C下干燥180~240min，既得成品。
[0011]重要的，上述高压脉冲微胶囊成型仪的参数设定为：电压40~45kv，推进速度为 90~95mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液液面为23~25mm。
[0012]更为重要的，述制冷过程中所用制冷剂为氟里昂或氨。
[0013] 本发明的有益效果： 中药提取物纯度高，操作简单，节能;提取效率高，生产周期短，易发现天然植物中新的 活性成分，极少损失易挥发组分或破坏生理活性物质，无溶剂残留，产品质量高。
[0014] 马齿苋性味寒、酸，具有清热解毒、利水祛湿、散血消肿、杀虫灭菌的作用。现代药 理实验证实，马齿苋水煎剂对志贺氏、黄氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌 和大肠杆菌均有显著抑制作用，浓度越高效果越好，可用于各种炎症的辅助治疗，无毒副作 用。这些抗菌作用和含有的化学成分使其治疗和预防肠道疾病、急、慢性菌痢的疗效，与其 它治痢药物如磺胺眯、合霉素等相仿。
[0015] 中药典记载，酸枣仁具有安神助眠、抗焦虑等保健功效。在畜牧生产中应用时，酸 枣仁及其提取物具有提高动物抗热应激能力，增强免疫机能，改善生产性能等特点，同时还 有多种营养成分和生物活性物质，兼有药物和营养的双重作用。
[0016] 维生素 C:壳聚糖携带的维生素 C可通过提高鸡的非特异性免疫应答而治愈鸡禽流 感。
[0017] 黄芪多糖：黄芪多糖是黄芪的主要活性成分之一，经过高科技萃取、分离而得到 的。黄芪中含多糖、皂甙、黄酮、氨基酸等多种有效成分，这些活性成分均有促进抗体生成和 免疫反应的作用。
[0018] 壳聚糖是一种生物可降解高分子聚合物，可以通过化学交联、静电吸附等作用方 式把药物包裹起来，在药物表面形成一层半透膜，使药物释放时间显著延长，从而达到缓释 控释的目的。壳聚糖具有良好的生物相容性，进入人体后可被人体吸收，且不引发免疫排斥 反应，安全无毒。壳聚糖还具有良好的成膜、絮凝、黏膜吸附等特性以及降血压、降血糖、降 血脂、抗菌、抗肿瘤、抗凝血、抗心律失常等作用。另外，壳聚糖来源广泛，价格低廉，是一种 理想的药物载体。
[0019 ]本发明所述方法制得壳聚糖载药微球：制作工艺采用两步法，第一步制备高强度 壳聚糖载药微球，包裹马齿笕酸枣仁提取物;第二步制备壳聚糖多孔载体，装载黄芪多糖， 维生素 C混合物。采用此种制作工艺，具有提高药物的稳定性、提高疏水性药物的溶解度、调 整给药顺序、增加药物的吸收率、提高药物的生物利用度等优点;通过对壳聚糖载体形态的 控制，达到药物缓释、控释的目的。
[0020] 本发明所述的以壳聚糖为载体制备禽药:将马齿笕提取物与酸枣仁提取物相结 合，起到抑制禽的大肠杆菌感染的作用，在制备壳聚糖载药微球的过程中，二者结合产物位 于微球核心，在进入禽类消化系统后，胃先消化吸收外层药物，药物经胃至肠道，壳聚糖载 药微球也消化至核心，马齿笕酸枣仁提取物对禽肠道内大肠杆菌感染起效。
[0021] 本发明所述的以壳聚糖为载体制备禽药:将黄芪多糖与维生素 C相结合治疗禽类 流感，壳聚糖多孔载体可增加载药率，治疗效果明显。
[0022] 以本发明所述方法制备的以壳聚糖为载体制备禽药:针对家禽类养殖中禽流感、 大肠杆菌感染等疾病病原混合感染及抗菌药物的滥用导致大量耐药菌株出现及许多抗生 素和化学抗菌药失效的现状，可达到一次给药，同时可达到治疗预防两种或两种以上的禽 病。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解 本发明，但并不因此限制本发明。
[0024] 实施例1 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为0.5:0.3: 〇. 1的，量取lg醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至质量分数为1%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸 溶液，记为A;5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值4~6,得质量分数为5%的多 聚磷酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%的氢氧化钠溶液，备用； (2)向质量分数为1%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，于37°C 下振荡24h，静置除泡，制备壳聚糖质量分数为1 %的壳聚糖酸溶液，记为B; (3)马齿笕提取 物粉末2份、酸枣仁提取物粉末3份及去离子水23份于25°C下超声得粉末混合液，记为C，备 用；（4)将B与C混合，并于25°C下以15r/min的转速下搅拌7min，冷却至室温后加入甘油醛进 行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联时间为 70min; (5)将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液与 多聚磷酸钠水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡3h，用去离子水将微 球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置18h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球微波 辐射2min即得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖3份、维生素 C 2份，去离子水23份于25°C下超声混合得混合液，记为E，备 用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3)将 E加入F中并于25°C、15r/min的转速下搅拌7min，冷却至室温，加入甘油醛交联剂及高强度 壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联 时间为70min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖 微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球 在质量分数为5.0%的多聚磷酸钠溶液中浸泡5h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再 将含有硅胶的壳聚糖微球放入80°C质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离 子水清洗3次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得 壳聚糖微多孔载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-20°C下冷冻120min，后于-10°C下 干燥500min，升高温度再次于10°C下干燥180min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的 参数设定为：电压40kv，推进速度为90mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液 液面为23_，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于50°C干燥箱中 干燥3h，后于质量分数70%乙醇溶液中浸泡18h，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，将马齿笕 与质量分数70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以80~120rmp的速度绞碎 8min，静置2 h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗提取液中加质量分数为 70%乙醇，调节pH值4,于搅拌回流机中提取2h，制得马齿笕提取液，所述马齿笕粗提取液与 质量分数70%乙醇的体积比为1:20,所述提取温度为60°C，所述搅拌速度为60rmp; (3)步骤 (2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并将容器放入离心机中于 5000rmp下离心5min，取离心上清液放入2号离心容器中，室温静置1小时，再以8000rmp的转 速下离心3min，将上清液放入冷库中预冷至-2°C，后置于_40°C(压力为13.33Pa)的冻干箱 内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3h;打开罗茨真空栗或真空扩散 栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度20 °C，加热5h，后 升温至30°C，干燥lh，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉末的制备：（1)酸枣仁洗净晾 干，于50°C的干燥箱中干燥3h，干法粉碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一 20°C下超微粉碎20.Omin，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质量分数70%的 乙醇中混合，质量分数70%乙醇没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以80rmp的转速搅拌 8min，静置2h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1)中的粗提液中继续加入质量分数 70%乙醇，调节pH值为4，于搅拌回流机中提取2h，得酸枣仁提取液备用，所述酸枣仁粗提取 液与质量分数为70%乙醇的体积比为1:10，所述提取温度为60°C，所述搅拌速度为每分钟 60rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并放入离心 机中于5000rmp下离心5miη，取离心上清液液放入2号离心管中，室温静置1小时，再以 8000rmp的转速下离心3min，将上清液放入冷库中预冷至-2°C，后置于_40°C(压力为13. 33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3h;打开罗茨真空 栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度20 °C，加热5h，后升温至30°C，干燥lh，得酸枣仁提取物粉末，上述制冷过程所用制冷剂为氟里 昂或氨。
[0025] 实施例2 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为ο. 5~0.6: 0.3~0.4:0.1的，量取1~3g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至质量分数为1~3%的醋酸+ 柠檬酸+抗坏血酸溶液，记为A; 5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值4~6，得多 聚磷酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数5%氢氧化钠溶液备用；（2)向 质量分数为1~3%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，37°C振荡 24h，静置除泡，制备壳聚糖质量分数为1~3 %的壳聚糖酸溶液，记为B;(3 )马齿笕提取物粉 末2~4份、酸枣仁提取物粉末3~5份及去离子水23~25份于25~60°C下超声得粉末混合 液，记为C，备用；（4)将B与C混合，并于25~60°C下以15~20r/min的转速下搅拌7~lOmin， 冷却至室温后加入甘油醛进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量 比为1:50,所述交联时间为70~90min;(5)将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪 制备微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠 溶液中浸泡3~4h，用去离子水将微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置18-24h，即得 壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球微波辐射2~5min即得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖3~5份、维生素 C 2~4份，去离子水23~25份于25~40°C下超声混合得混 合液，记为E，备用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量 比为3 :1; (3)将E加入F中并于25~60°C、15~20r/min的转速下搅拌7~lOmin，冷却至室 温，加入甘油醛交联剂及高强度壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳 聚糖的质量比为1:50,所述交联时间为70~90min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶 囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比 为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球在质量分数为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡5~7h，用去 离子水清洗微球直至溶液为中性，再将含有硅胶的壳聚糖微球放入80°C的质量分数为 5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离子水清洗3次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将 壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得壳聚糖微多孔载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球 于-20~_40°C下冷冻120~180min，后于-10~_20°C下干燥500~600min，升高温度再次 于10~20°C下干燥180~240min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的参数设定为：电 压40~45kv，推进速度为90~95mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液液面为 23~25mm，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于50~60°C干燥箱 中干燥3~5h，后于70%乙醇溶液中浸泡18~24h，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，将马齿笕 与质量分数为70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以80~120rmp的速度绞碎8 ~lOmin，静置2~4 h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗提取液中加质量 分数为70%乙醇，调节pH值为4-7，于搅拌回流机中提取2-4h，制得马齿笕提取液，所述马齿 笕粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1:20~40,所述提取温度为60~80°C，所述搅 拌速度为60~80rmp; (3)步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容 器，并将容器放入离心机中于5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液放入2号离心容 器中，室温静置1~2小时，再以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上清液放入冷库 中预冷至-2~-4°C，后置于-40°C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂 使物料完全冻结，并保持3~4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度 为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C，干燥 1~2h，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉末的制备：（1)酸枣仁洗净晾干，于50~60°C 的干燥箱中干燥3~5h，干法粉碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一20°C下 超微粉碎20.0 min，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质量分数为70%的乙醇 中混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以80~120rmp的转速搅拌 8~lOmin，静置2~4 h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1)中的粗提液中继续加入 质量分数为70%乙醇，调节pH值4~7,于搅拌回流机中提取2~4h，得酸枣仁提取液备用，所 述酸枣仁粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1:10~30,所述提取温度为60~80°C， 所述搅拌速度为每分钟60~80rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放 入1号离心容器，并放入离心机中于5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液液放入2 号离心管中，室温静置1~2小时，再以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上清液放 入冷库中预冷至-2~_4°C，后置于-40°C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入 制冷剂使物料完全冻结，并保持3~4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa， 温度为_60°C以下时打开加热板，控制加热板温度20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C， 干燥1~2h，得酸枣仁提取物粉末，上述制冷过程所用制冷剂为氟里昂或氨。
[0026] 实施例3 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为〇. 6:0.4: 〇. 1的，量取3g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至质量分数为3%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸 溶液，记为A;5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节PH4~6,得质量分数为5%多聚磷 酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧化钠溶液备用；（2)向质 量分数为3%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，振荡24h，静置除 泡，制备壳聚糖质量分数为3%的壳聚糖酸溶液，记为B，所述震荡温度为37°C ; (3)马齿笕提 取物粉末4份、酸枣仁提取物粉末5份及去离子水25份于60°C下超声得粉末混合液，记为C， 备用；（4)将B与C混合，并于60°C下以20r/min的转速下搅拌10min，冷却至室温后加入甘油 醛进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联时间 为90min;(5)将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液 与多聚磷酸钠水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡4h，用去离子水将 微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置24h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球微 波辐射2~5min即得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖5份、维生素 C4份，去离子水25份于40°C下超声混合得混合液，记为E，备 用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3)将 E加入F中并于60°C、20r/min的转速下搅拌10min，冷却至室温，加入甘油醛交联剂及高强度 壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联 时间为90min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖 微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球 在质量分数为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡7h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将 含有硅胶的壳聚糖微球放入80°C的质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离 子水清洗3次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得 壳聚糖微多孔载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-40°C下冷冻180min，后于-20°C下 干燥600min，升高温度再次于20°C下干燥240min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的 参数设定为：电压45kv，推进速度为95mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液 液面为25_，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于60°C干燥箱中 干燥5h，后于质量分数为70%乙醇溶液中浸泡24h，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，将马齿 笕与质量分数为70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以120rmp的速度绞碎 lOmin，静置4 h，制得马齿笕粗提取液;（2)向步骤(1)所得马齿笕粗提取液中加质量分数为 70%乙醇，调节pH值为7,于搅拌回流机中提取4h，制得马齿笕提取液，所述马齿笕粗提取液 与质量分数为70%乙醇的体积比为1: 40,所述提取温度为80°C，所述搅拌速度为80rmp; (3) 步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并将容器放入离心机 中于8000rmp下离心8min，取离心上清液放入2号离心容器中，室温静置2小时，再以 lOOOOrmp的转速下离心5min，将上清液放入冷库中预冷至-4°C，后置于_40°C (压力13. 33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持4h;打开罗茨真空 栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度25 °C，加热8h，后升温至35°C，干燥2h，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉末的制备：（1)酸 枣仁洗净晾干，于60°C的干燥箱中干燥5h，干法粉碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣 仁粗粉在一20°C下超微粉碎20.Omin，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质 量分数为70%的乙醇中混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以 120rmp的转速搅拌10min，静置4 h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1)中的粗提液 中继续加入质量分数为70%乙醇，调节pH值为7，于搅拌回流机中提取4h，得酸枣仁提取液备 用，所述酸枣仁粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1: 30,所述提取温度为80°C，所 述搅拌速度为每分钟80rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放入1号 离心容器，并放入离心机中于8000rmp下离心8min，取离心上清液液放入2号离心管中，室温 静置2小时，再以lOOOOrmp的转速下离心5min，将上清液放入冷库中预冷至-4 °C，后置于-40 °C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持4h;打 开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加 热板温度25°C，加热8h，后升温至35°C，干燥2h，得酸枣仁提取物粉末，上述制冷过程所用制 冷剂为氟里昂或氨。
[0027] 实施例4 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为0.6:0.3: 〇. 1的，量取2g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至质量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸 溶液，记为A;5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值为2,得质量分数为5%多聚磷 酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧化钠溶液备用；（2)向质 量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，37°C下振荡24h， 静置除泡，制备壳聚糖质量分数为2%的壳聚糖酸溶液，记为B; (3)马齿笕提取物粉末3份、 酸枣仁提取物粉末5份及去离子水24份于35°C下超声得粉末混合液，记为C，备用；（4)将B与 C混合，并于500 °C下以19r/min的转速下搅拌9min，冷却至室温后加入甘油醛进行交联，交 联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联时间为85min; (5)将 D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠 水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡4h，用去离子水将微球洗至清洗 液为中性，微球于室温下放置21h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球微波辐射4min即 得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖4份、维生素 C3份，去离子水24份于32°C下超声混合得混合液，记为E，备 用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3)将 E加入F中并于50°C、16r/min的转速下搅拌8min，冷却至室温，加入甘油醛交联剂及高强度 壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联 时间为85min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖 微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球 在5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡6h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将含有硅胶的 壳聚糖微球放入80°C的质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离子水清洗3 次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得壳聚糖微多孔 载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-20~-40°C下冷冻150min，后于-16°C下干燥 570min，升高温度再次于17°C下干燥200min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的参数 设定为：电压44kv，推进速度为91mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液液面 为24mm，上述制冷剂为氟里昂或氨，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕洗净 晾干，于51°C干燥箱中干燥4h，后于质量分数为70%乙醇溶液中浸泡23h，质量分数为70%乙 醇没过马齿笕，将马齿笕与质量分数为70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以 80~120rmp的速度绞碎9min，静置3.5h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗 提取液中加质量分数为70%乙醇，调节pH值为6,于搅拌回流机中提取2-4h，制得马齿笕提 取液，所述马齿笕粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1: 31，所述提取温度为71°C， 所述搅拌速度为71rmp; (3)步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心 容器，并将容器放入离心机中于7000rmp下离心7min，取离心上清液放入2号离心容器中，室 温静置2小时，再以9000rmp的转速下离心4min，将上清液放入冷库中预冷至-3°C，后置于-40°C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持4h; 打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制 加热板温度20°C，加热5-8h，后升温至34°C，干燥lh，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉 末的制备：（1)酸枣仁洗净晾干，于56°C的干燥箱中干燥4h，干法粉碎lmin，过60目筛，得 酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一20°C下超微粉碎20.Omin，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸 枣仁超微粉与质量分数为70%的乙醇中混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温条 件下搅拌机以llOrmp的转速搅拌9min，静置3h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1) 中的粗提液中继续加入质量分数为70%乙醇，调节pH值5,于搅拌回流机中提取2~4h，得酸 枣仁提取液备用，所述酸枣仁粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1:22,所述提取温 度为70°C，所述搅拌速度为每分钟70rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤， 滤液放入1号离心容器，并放入离心机中6000rmp下离心7min，取离心上清液液放入2号离心 管中，室温静置1.5小时，再以8000rmp的转速下离心4min，将上清液放入冷库中预冷至-3 °C，后置于-40°C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻 结，并保持4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开 加热板，控制加热板温度24°C，加热7h，后升温至31°C，干燥2h，得酸枣仁提取物粉末，上述 制冷过程所用制冷剂为氟里昂或氨。
[0028] 实施例5 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为0.5: 0.4: 〇. 1的，量取2g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至质量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸 溶液，记为A;5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值为5,得质量分数为5%多聚磷 酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧化钠溶液备用；（2)向质 量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，振荡24h，静置除 泡，制备壳聚糖质量分数为2%的壳聚糖酸溶液，记为B，所述震荡温度为37°C ; (3)马齿笕提 取物粉末3份、酸枣仁提取物粉末4份及去离子水24份于45°C下超声得粉末混合液，记为C， 备用；（4)将B与C混合，并于45°C下以18r/min的转速下搅拌8min，冷却至室温后加入甘油醛 进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联时间为 80min; (5)将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液与 多聚磷酸钠水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡3.5h，用去离子水将 微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置21h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球微 波辐射2~5min即得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖4份、维生素 C3份，去离子水24份于32°C下超声混合得混合液，记为E，备 用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3)将 E加入F中并于45°C、18r/min的转速下搅拌8min，冷却至室温，加入甘油醛交联剂及高强度 壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联 时间为80min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖 微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球 在质量分数为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡6h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将 含有硅胶的壳聚糖微球放入80°C质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离子 水清洗3次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得壳 聚糖微多孔载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-30°C下冷冻150min，后于-15°C下干 燥550min，升高温度再次于15°C下干燥210min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的参 数设定为：电压42kv，推进速度为93mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液液 面为24_，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于55°C干燥箱中干 燥4h，后于质量分数为70%乙醇溶液中浸泡21h，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，将马齿笕 与质量分数为70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以lOOrmp的速度绞碎9min， 静置3 h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗提取液中加质量分数为70%乙 醇，调节pH值6,于搅拌回流机中提取3h，制得马齿笕提取液，所述马齿笕粗提取液与质量 分数为70%乙醇的体积比为1:30,所述提取温度为70°C，所述搅拌速度为70rmp; (3)步骤(2) 制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并将容器放入离心机中于 7000rmp下离心6min，取离心上清液放入2号离心容器中，室温静置1.5小时，再以9000rmp的 转速下离心4min，将上清液放入冷库中预冷至-3°C，后置于_40°C，压力13.33Pa下的冻干箱 内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3.5h;打开罗茨真空栗或真空扩 散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度22°C，加热7h， 后升温至33°C，干燥1.5h，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉末的制备：（1)酸枣仁洗净 晾干，于55°C的干燥箱中干燥4h，干法粉碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉 在一20°C下超微粉碎20.Omin，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质量分数 为70%的乙醇中混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以lOOrmp的 转速搅拌9min，静置3h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤（1)中的粗提液中继续加入 质量分数为70%乙醇，调节pH值为5,于搅拌回流机中提取3h，得酸枣仁提取液备用，所述酸 枣仁粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1:20,所述提取温度为70°C，所述搅拌速度 为每分钟70rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并 放入离心机中于7000rmp下离心6min，取离心上清液液放入2号离心管中，室温静置1.5小 时，再以9000rmp的转速下离心4min，将上清液放入冷库中预冷至-3°C，后置于_40°C (压力 13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3.5h;打开罗 茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板 温度22°C，加热6h，后升温至32°C，干燥1.5h，得酸枣仁提取物粉末，上述制冷过程所用制冷 剂为氟里昂或氨。
[0029] 实施例6 一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，包括如下步骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制 备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备， 第一步:高强度壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为0.4: 0.4: 〇. 1的，量取2g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至为质量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血 酸溶液，记为A;5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值为6,得质量分数为5%的多 聚磷酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧化钠溶液备用；（2) 向质量分数为2%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖，振荡24h，静 置除泡，制备壳聚糖质量分数为2%的壳聚糖酸溶液，记为B，所述震荡温度为37°C ;(3)马齿 笕提取物粉末1份、酸枣仁提取物粉末6份及去离子水27份于66°C下超声得粉末混合液，记 为C，备用；（4)将B与C混合，并于66°C下以30r/min的转速下搅拌5min，冷却至室温后加入甘 油醛进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联时 间为20min; (5)将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶 液与多聚磷酸钠水溶液的体积为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡lh，用去离子水 将微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置30h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微球 微波辐射8min即得高强度壳聚糖载药微球； 第二步，壳聚糖微多孔载药微球的制备过程如下： (1)黄芪多糖3份、维生素 C4份，去离子水29份于41°C下超声混合得混合液，记为E，备 用；（2)硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3)将 E加入F中并于30°C、18r/min的转速下搅拌8min，冷却至室温，加入甘油醛交联剂及高强度 壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的质量比为1:50,所述交联 时间为80min;(4)G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖 微球，所述壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球 在质量分数为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡6h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将 含有硅胶的壳聚糖微球放入80°C的质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离 子水清洗3次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得 壳聚糖微多孔载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-30°C下冷冻llOmin，后于-10°C下 干燥700min，升高温度再次于15°C下干燥220min，既得成品，上述高压脉冲微胶囊成型仪的 参数设定为：电压40kv，推进速度为92mm/h，脉宽为5ms，频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液 液面为27_，上述制冷剂为氟里昂或氨，其中，马齿笕提取物粉末的制备：（1)新鲜马齿笕 洗净晾干，于50 °C干燥箱中干燥4h，后于70%乙醇溶液中浸泡20h，质量分数为70%乙醇没过 马齿笕，将马齿笕与质量分数为70%乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以230rmp 的速度绞碎8~lOmin，静置3 h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗提取液 中加质量分数为70%乙醇，调节pH值为8,于搅拌回流机中提取4h，制得马齿笕提取液，所述 马齿笕粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1: 40,所述提取温度为60°C，所述搅拌 速度为60rmp; (3)步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并将 容器放入离心机中于5000rmp下离心8min，取离心上清液放入2号离心容器中，室温静置2小 时，再以9000rmp的转速下离心4min，将上清液放入冷库中预冷至-3°C，后置于-40°C，压力 13.33Pa的条件下冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3.5h;打 开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加 热板温度22°C，加热7h，后升温至31°C，干燥lh，得马齿笕提取物粉末;酸枣仁提取物粉末的 制备：（1)酸枣仁洗净晾干，于50~60°C的干燥箱中干燥3~5h，干法粉碎lmin，过60目筛， 得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一20°C下超微粉碎20.0 min，过300目筛，得酸枣仁超微粉，将 酸枣仁超微粉与质量分数为70%的乙醇中混合，质量分数为70%乙醇没过马齿笕，并在室温 条件下搅拌机以120rmp的转速搅拌lOmin，静置4 h，制得酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤 (1)中的粗提液中继续加入质量分数为70%乙醇，调节pH值为7,于搅拌回流机中提取4h，得 酸枣仁提取液备用，所述酸枣仁粗提取液与质量分数为70%乙醇的体积比为1: 30,所述提 取温度为80°C，所述搅拌速度为每分钟80rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过 滤，滤液放入1号离心容器，并放入离心机中于8000rmp下离心8min，取离心上清液液放入2 号离心管中，室温静置2小时，再以lOOOOrmp的转速下离心5min，将上清液放入冷库中预冷 至-4°C，后置于-40°C (压力13.33Pa)的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全 冻结，并保持4h;打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打 开加热板，控制加热板温度25°C，加热5-8h，后升温至35°C，干燥lh，得酸枣仁提取物粉末， 上述制冷过程所用制冷剂为氟里昂或氨。
[0030] (2)试验1:随机抽取了30000只健康鸡，平均年龄为6个月，随机划分为三组，分别 为A组，B组，C组，每组10000只鸡，确保三组情况基本一致。分别对三组喂食不同的禽药，每 只鸡每天一次，每次5mg，A组每天食用实施例5所得禽药，B组每天食用实施例6所得禽药，C 照组则食用目前常用的禽药，三组的喂食情况除了喂食的禽药不同以外其它完全一致，观 察期限为60天，结果如表1所示：
由表1可以看出，喂食实施例5所得禽药的鸡，其患病次数远远低于喂食实施例6所得禽 药和普通禽药的数量，由B组鸡的患病次数可以看出，原料的配比、利记博彩app不在本发明的 范围中，所得禽药的效果不佳。
[0031] 试验2:随机抽取了30000只患病的鸡，平均年龄为6个月，随机划分为三组，分别为 A组，B组，C组，每组10000只鸡，确保三组情况基本一致。分别对三组喂食不同的禽药，每只 鸡每天两次，每次15mg，A组每天食用实施例5所得禽药，B组每天食用实施例6所得禽药，C照 组则食用目前常用的禽药，三组的喂食情况除了喂食的禽药不同以外其它完全一致，观察 期限为10天，结果如表2所示：
由表2可以看出，喂食实施例5所得禽药的鸡，其康复率远远高于喂食实施例6所得禽药 和普通禽药的鸡，由B组鸡的康复率可以看出，原料的配比、利记博彩app不在本发明的范围中， 所得禽药的效果不佳。
[0032] 由两组试验可以看出，本发明所述的禽药，不仅可以治疗家禽的疾病，还可有效预 防家禽的患病，防患于未然。
【主权项】
1. 一种以壳聚糖为载体的禽药，其特征在于，所述禽药包括下述重量份数的原料:马齿 笕提取物粉末2~4份、酸枣仁提取物粉末3~5份、黄芪多糖3~5份、维生素 C2~4份。2. 如权利要求1所述的一种以壳聚糖为载体的禽药，其特征在于，所述马齿笕提取物 粉末的制备过程为：（1)新鲜马齿笕洗净晾干，于50~60°C干燥箱中干燥3~5h，后于质量分 数为70%的乙醇溶液中浸泡18~24h，质量分数为70%的乙醇没过马齿笕，将马齿笕与质量分 数为7 0 %的乙醇的混合液放入搅拌机中混合，并于室温下以8 0~12 0 r m p的速度绞碎8~ lOmin，静置2~4 h，制得马齿笕粗提取液；（2)向步骤（1)所得马齿笕粗提取液中加质量分 数为70%乙醇，调节pH值为4-7,于搅拌回流机中提取2-4h，制得马齿笕提取液，所述马齿笕 粗提取液与70%乙醇的体积比为1:20~40,所述提取温度为60~80°C，所述搅拌速度为60~ 80rmp; (3)步骤(2)制得的马齿笕提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并将容器放 入离心机中于5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液放入2号离心容器中，室温静置 1~2小时，再以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上清液放入冷库中预冷至-2~-4 °C，后置于-40°C的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3~4h; 打开罗茨真空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制 加热板温度20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C，干燥1~2h，得马齿笕提取物粉末。3. 如权利要求1所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征在于，所述酸枣仁 提取物粉末的制备过程为：（1)酸枣仁洗净晾干，于50~60°C的干燥箱中干燥3~5h，干法粉 碎lmin，过60目筛，得酸枣仁粗粉，酸枣仁粗粉在一20°C下超微粉碎20.0min，过300目 筛，得酸枣仁超微粉，将酸枣仁超微粉与质量分数为70%的的乙醇混合，质量分数为70%乙醇 没过马齿笕，并在室温条件下搅拌机以80~120rmp的转速搅拌8~10min，静置2~4 h，制得 酸枣仁粗提取液，备用；（2)向步骤(1)中的粗提液中继续加入70%乙醇，调节pH值为4~7,于 搅拌回流机中提取2~4h，得酸枣仁提取液备用，所述酸枣仁粗提取液与质量分数为70%的 乙醇的体积比为1:10~30，所述提取温度为60~80°C，所述搅拌速度为每分钟60~80rmp; (3)步骤(2)制得的酸枣仁提取液经过滤机过滤，滤液放入1号离心容器，并放入离心机中于 5000~8000rmp下离心5~8min，取离心上清液液放入2号离心管中，室温静置1~2小时，再 以8000~lOOOOrmp的转速下离心3~5min，将上清液放入冷库中预冷至-2~-4 °C，后置于-40°C的冻干箱内，关闭冻干箱，迅速通入制冷剂使物料完全冻结，并保持3~4h;打开罗茨真 空栗或真空扩散栗，调节压力为1.33Pa，温度为-60°C以下时打开加热板，控制加热板温度 20~25°C，加热5-8h，后升温至30~35°C，干燥1~2h，得酸枣仁提取物粉末。4. 如权利要求1所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征在于，包括如下步 骤:第一步:高强度壳聚糖微球的制备;第二步:壳聚糖微多孔载药微球的制备。5. 如权利要求4所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征在于，所述高强度 壳聚糖微球的制备过程如下： (1)配置醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液，其中醋酸，柠檬酸，抗坏血酸体积比为0.5~0.6: 0.3~0.4:0.1，量取1~3g醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液稀释至为质量分数为1~3%的醋酸+ 柠檬酸+抗坏血酸溶液，记为A; 5g多聚磷酸钠溶于100ml的去离子水中，调节pH值为4~6，得 质量分数为5%的多聚磷酸钠溶液;取5g氢氧化钠溶于100ml去离子水得质量分数为5%氢氧 化钠溶液备用； (2 )向质量分数为1~3%的醋酸+柠檬酸+抗坏血酸溶液中加入脱乙酰度>80%的壳聚糖， 于37°C下振荡24h，静置除泡，制备壳聚糖质量分数为1~3%的壳聚糖酸溶液，记为B; (3) 马齿笕提取物粉末2~4份、酸枣仁提取物粉末3~5份及去离子水23~25份于25~ 60°C下超声得粉末混合液，记为C，备用； (4) 将B与C混合，并于25~60°C下以15~20r/min的转速下搅拌7~lOmin，冷却至室温 后加入甘油醛进行交联，交联后的物质记为D，所述甘油醛与B中壳聚糖的质量比为1:50,所 述交联时间为70~90min; (5) 将D与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备微球，所述壳聚糖酸溶液与多 聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，微球在所述多聚磷酸钠溶液中浸泡3~4h，用去离子水 将微球洗至清洗液为中性，微球于室温下放置18-24h，即得壳聚糖载药微球，壳聚糖载药微 球微波辐射2~5min即得高强度壳聚糖载药微球。6. 如权利要求4所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖 微多孔载药微球的制备过程如下： (1) 黄芪多糖3~5份、维生素 C 2~4份，去离子水23~25份于25~40°C下超声混合得混 合液，记为E，备用； (2) 硅胶加入B中搅拌均匀，混合物记为F，所述硅胶与B中壳聚糖的质量比为3:1; (3) 将E加入F中并于25~60°C、15~20r/min的转速下搅拌7~lOmin，冷却至室温，加入 甘油醛交联剂及高强度壳聚糖载药微球，交联后的物质记为G，所述甘油醛和B中壳聚糖的 质量比为1:50,所述交联时间为70~90min; (4) G与多聚磷酸钠溶液用高压静电微胶囊成型仪制备成含有硅胶的壳聚糖微球，所述 壳聚糖酸溶液与多聚磷酸钠水溶液的体积比为2:1，将含有硅胶的壳聚糖微球在质量分数 为5.0%多聚磷酸钠溶液中浸泡5~7h，用去离子水清洗微球直至溶液为中性，再将含有硅 胶的壳聚糖微球放入80°C质量分数为5.0%氢氧化钠溶液中浸泡1.8h，用去离子水清洗3 次，晾干，即得壳聚糖多孔微载体，将壳聚糖多孔微载体与E混合液相容，即得壳聚糖微多孔 载药微球，将壳聚糖微多孔载药微球于-20~_40°C下冷冻120~180min，后于-10~-20 °C下干燥500~600min，升高温度再次于10~20°C下干燥180~240min，既得成品。7. 如权利要求5或6所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征在于，所述高 压脉冲微胶囊成型仪的参数设定为：电压40~45kv，推进速度为90~95mm/h，脉宽为5ms， 频率为90Hz，距多聚磷酸钠溶液液面为23~25mm。8. 如权利要求2、3、5、6中任一项所述的一种以壳聚糖为载体禽药的制备方法，其特征 在于，所述制冷过程中所用制冷剂为氟里昂或氨。
【文档编号】A61K47/36GK105832841SQ201610352667
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年5月25日
【发明人】张玉晗, 孙福道, 庄学昌, 林丽
【申请人】山东锐基生物科技有限公司