蒙药瞿麦中总生物碱超声提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学成分提取领域，特别地，设及总生物碱提取领域。
【背景技术】
[0002] 生物碱是生物体内的碱性含氮有机化合物，广泛分布于动、植物中，大多数为较复 杂环状结构的生物碱，对动、植物的生命至关重要。大量的药理和临床研究表明，生物碱具 有广泛的药理及生物活性，如抗菌、消炎、镇痛等，且作为药物不良反应极少，在食品、卫生、 医药等方面有着巨大的应用潜力，近年来已成为研究热点。
[0003]蒙药崔麦为石竹科植物崔麦DianthussuperbusL.的带花地上部分，表面呈淡绿 色或黄绿色，光滑无毛，无节间，断面中空。分布于内蒙古、山东、江苏、浙江、江西、河南、贵 少H、新疆等地。有利尿通淋、破血通经等功效，蒙医用于治疗热淋、血淋、石淋等病症，多配方 用，味苦。
[0004]对于蒙药崔麦中总生物碱的提取方法，根据传统的正交设计方法是一种用线性数 学模型进行设计的设计方法，可W找出多个因素水平的最佳组合，但只能分析离散型数据， 具有精度不高、预测性不佳等缺点。并不能获得最佳的蒙药崔麦中总生物碱提取方法。同 时，目前尚无对蒙药崔麦中总生物碱提取工艺进行研究的相关报导
【发明内容】
[0005]本发明的目的是为了提供一种最优的蒙药崔麦中总生物碱超声提取方法：
[0006]提取条件为超声溫度53°C、料液比31 (g/mL)、超声时间41miη、超声功率140W。
[0007]根据该提取工艺条件进行蒙药崔麦中总生物碱超声提取，总生物碱提取率可W到 达到 3. 085mg/g。
[0008]本发明通过单因素考察与响应面优化相结合对蒙药崔麦中总生物碱提取工艺进 行优化，提取的总生物碱含量高，节省了大量的时间和溶剂，为开发新药、合理利用资源提 供了新途径、新方法。
[000引附图概要说明
[0010] 图1超声溫度和料液比及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等高 线图
[0011] 图2超声溫度和超声时间及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等 高线图
[0012] 图3超声溫度和超声功率及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等 高线图
[0013]图4料液比和超声时间及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等高 线图
[0014] 图5料液比和超声功率及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等高 线图
[0015] 图6超声时间和超声功率及其交互作用对总生物碱提取率影响的Ξ维曲面和等 高线图
【具体实施方式】[001引实施例1
[0017] 提取工艺参数优化过程
[0018] 1 准备
[0019] 1.1材料与试剂
[0020] 崔麦[内蒙古天立药业，经内蒙古医科大学药学院药用植物学教研室乔俊缠教授 鉴定为石竹科植物崔麦Dianthus superbus L.的带花地上部分]。盐酸小築碱对照品（中 国食品药品检定研究院，批号：110713-201212，供含量测定使用）、盐酸、95%乙醇、Ξ氯甲 烧、石油酸、巧樣酸、巧樣酸钢、漠甲酪绿、邻苯二甲酸氨钟，其他试剂均为国产分析纯。
[0021] 1.2 仪器
[0022] TU-1901型双光束紫外分光光度计（北京普析通用有限责任公司）；皿S-4S型电 子恒溫不诱钢水浴锅（上海宜昌仪器纱筛厂）；畑G-9030A型电热鼓风干燥箱（上海一恒科 学仪器有限公司）；S皿-B95T型循环水式多用真空累（郑州长城科工贸有限公司）；LX-07A 多功能粉碎机（上海江信科技有限公司）；Κ册200DE型数控超声波清洗器（昆山禾创超声 仪器有限公司）；AB135-S分析天平（Made in Switzerland) ;BSA124S型电子天平（北京赛 多利斯科学仪器有限公司）巧-220型恒溫水浴锅（上海亚荣生化仪器厂）；RE52CS型旋转 蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。
[002引2实验方法
[0024] 2. 1缓冲溶液与显色剂的制备
[002引巧樣酸-巧樣酸钢缓冲溶液：取40血0.1mol/L的巧樣酸溶液和85血0.1mol/L的巧樣酸钢溶液置于250M^容量瓶中，用蒸馈水定容至刻度，得pH= 5. 4的缓冲溶液。
[0026] 漠甲酪绿指示液：称取漠甲酪绿0. 125g，用25血0.Imol/L化0H溶液溶解后，加 邻苯二甲酸氨钟2. 55g，用水溶解，转移至250M^容量瓶中，用蒸馈水定容即得。
[0027] 2. 2对照品溶液的制备
[0028] 精密称取盐酸小築碱3.OOmg，用1 %酸乙醇溶解后定容至lOmL容量瓶中，摇匀，得 浓度为0. 327mg/mL的盐酸小築碱对照品溶液。
[0029] 2. 3供试品溶液的制备
[0030] 精密称取崔麦粉末1.Og，按1:10的比例加入石油酸，60°C下水浴回流2.化，取药 渣，加入一定比例1 %酸乙醇，静置30min，在一定超声溫度及超声功率下超声提取一定时 间后，抽滤，滤液浓缩至25血。
[0031] 2. 4测定波长的确定
[0032] 精密量取对照品溶液0. 4mL，加1 %酸乙醇至1血，置分液漏斗中，加入抑=5. 4缓 冲溶液5血，漠甲酪绿指示液2血，振摇Imin，加10血Ξ氯甲烧，振摇Imin，静置30min。另 取供试品溶液ImU同法操作。在200~800nm进行波长扫描，吸收光谱显示对照品和供试 品溶液均在419nm处有最大吸收，故选择419nm作为测定波长。
[0033] 2. 5标准曲线的绘制
[0034] 精密量取对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8血置分液漏斗中，力日1%酸乙醇至 1血，加抑=5. 4缓冲溶液5血，漠甲酪绿指示液2血，振摇Imin，加10血Ξ氯甲烧，振摇 Imin，静置30min。W相应的试剂为空白，在419nm波长处测定吸光度。W吸光度（Α)为纵 坐标，溶液浓度（C)为横坐标，得回归方程为A= 0. 0535C-0. 0325(r= 0. 9999,η= 5)，线 性范围为3. 27~26. 16μg/血。
[0035] 表1盐酸小築碱标准曲线实验数据
[0036]
[0037] 3实验设计
[0038] 3. 1单因素实验
[0039] 按供试品溶液的制备方法，选取不同超声溫度、料液比、超声时间、超声功率进行 单因素实验，得出总生物碱提取率与各因素的关系。
[0040] 3. 1. 1超声溫度对蒙药崔麦总生物碱提取率的影响
[0041] 精密称取蒙药崔麦粉末l.Og，按料液比l:30(g/mL)，超声时间30min，超声功率 200W，超声溫度分别为20°C、30°C、40°C、50°C、60°C进行提取，按"2. 4"项下的方法处理 后测定吸光度。结果见图3,当溫度在40°C、5(rC、6(rC时总生物碱的提取率较高，故选择 40°C、50°C、60°C作为响应面法的考察范围。
[0042] 表2超声溫度对蒙药崔麦总生物碱提取率的实验结果
[0043]
[0044] 3. 1. 2料液比对蒙药崔麦总生物碱提取率的影响
[004引精密称取蒙药崔麦粉末1.Og，按超声溫度50°C，超声时间30min，超声功率200W， 料液比分别为1:20、1:25、1:30、1:35、1:40 (g/mL)进行提取，按"2. 4"项下的方法处理后 测定吸光度。结果见图4,当料液比为1:25、1:30、1:35时提取率较高，故选择1:25、1:30、 l:35(g/mL)作为响应面法的考察范围。
[0046]表3料液比对蒙药崔麦总生物碱提取率的实验结果
[0047]
[0048] 3. 1. 3超声时间对蒙药崔麦总生物碱提取率的影响
[0049] 称取蒙药崔麦粉末1.Og，按超声溫度50°C，料液比1:30 (g/mL)，超声功率200W，超 声时间分别为20min、30min、40min、50min、60min进行提取，按"2. 4"项下的方法处理后测 定吸光度。结果见图5,当时间为30min、40min、50min时提取率较