Volvalerelactones A在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及化合物VolvalerelactonesA的新用途，尤其设及Volvalerelactones A在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 屯、脑血管疾病是当代危害人体健康和生命的最严重病症，是中、老年人的常 见病和多发病，在许多国家和地区的发病率和死亡率皆位于重病之首。动脉粥样硬化 (atherosclerosis,A巧是屯、脑血管疾病的主要病理基础，迄今为止其病因和发病机理尚未 完全阐明，故目前没有简明有效地防治措施和治疗药物。
[0003] 本发明设及的化合物VolvalerelactonesA是一个2013年发表（Peng-Qieng Wang,etal.,VolvalerelactonesAandB,TwoNewSesquiterpenoidLactones withanUnprecedentedSkeletonfromValerianaofficinalisvar.latifolia. OrganicLetters，2011，13(12),3036 - 3039.)的新化合物，该化合物拥有全新的骨架类 型（Peng-ChengWang,etal. ,VolvalerelactonesAandB,TwoNewSesquiterpenoid LactoneswithanUnprecedentedSkeletonfromValerianaofficinalisvar. latifolia.OrganicLetters，2011, 13(12),3036 - 3039.)，对于本发明设及的 VolvalerelactonesA在制备治疗动脉粥样硬化药物中的用途属于首次公开，由于属于全 新的结构类型，而且其对于动脉粥样硬化的抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物 给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于动脉粥样硬化的防治显然具有显 著的进步。
【发明内容】
[0004] 本发明就是针对上述问题提供VolvalerelactonesA在制备抗动脉粥样硬化药物 中的应用，用VolvalerelactonesA制备的抗动脉粥样硬化的药物，具有较好的疗效。 阳0化]本发明提供的技术方案是：VolvalerelactonesA在制备抗动脉粥样硬化药物中 的作用。
[0006] 本发明可用作抗人或动物的动脉粥样硬化。本发明所述药物可通过口服或静脉注 射给予。本领域技术人员可根据实际情况容易地确定给药剂量。
[0007] 所述化合物VolvalerelactonesA,结构如式（I)所示：
[0008]
[0009] 所述VolvalerelactonesA在治疗动脉粥样硬化药物中的应用， VolvalerelactonesA降低高脂致动脉粥样硬化大鼠血清中MDA的含量。
[0010] 一种治疗动脉粥样硬化药物，由VolvalerelactonesA为活性成分添加辅料制备 而成，制备方法为取5克化合物VolvalerelactonesA,加入糊精195克，混匀，常规压片制 成1000片。
[0011] -种治疗动脉粥样硬化药物，由VolvalerelactonesA为活性成分添加辅料制备 而成，制备方法为取5克化合物VolvalerelactonesA，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成 1000 粒。
[0012] 对于本发明设及的VoIvalerelactonesA在制备治疗动脉粥样硬化药物中的用途 属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于动脉粥样硬化细胞的抑制 活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同 时用于动脉粥样硬化的防治显然具有显著的进步。
[0013] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
【具体实施方式】
[0014] 本发明所设及化合物VolvalerelactonesA的制备方法参见文献（Peng-Cheng Wang,etal.，VolvalerelactonesAandB,TwoNewSesquiterpeneidLactoneswith anUnprecedentedSkeletonfromValerianaofficinalisvar.latifolia.Organic Letters, 2011, 13(12), 3036 - 3039.)
[0015] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
[0016] 实施例1 :本发明所设及化合物VolvalerelactonesA片剂的制备：
[0017] 取5克化合物VolvalerelactonesA,加入糊精195克，混匀，常规压片机制成 1000 片。
[0018] 实施例2 :本发明所设及化合物VolvalerelactonesA胶囊剂的制备：
[0019] 取5克化合物VolvalerelactonesA，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0020] 下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。 W21] 本发明通过细胞水平的研究及建立动脉粥样硬化模型等技术掲示了VolvalerelactonesA对动脉粥样硬化的作用。
[0022] 本发明经口及静脉注射给予VolvalerelactonesA，可使动脉粥样硬化大鼠斑块 面积/内膜面积（％)、内膜厚度（um)/中膜厚度（％)显著降低；使血中甘油Ξ醋、总胆固 醇及低密度脂蛋白含量下降，表明VolvalerelactonesA可治疗动脉粥样硬化。
[0023] 材料与方法
[0024] 1.实验材料； 阳0巧]1. 1动物和饲料 阳0%] 实验动物：健康大鼠，雌雄各半，体重（200. 0 + 20)g。
[0027] 饲料：基础饲料由江苏省实验动物中屯、提供；高脂饲料由2%的胆固醇、10%的猪 油和88%的基础饲料组成，由江苏省实验动物中屯、加工完成。 阳0測 1. 2药品及试剂
[0029] 胆固醇试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0030] 甘油Ξ醋试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0031] 高密度脂蛋白试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0032] 低密度脂蛋白试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0033] 考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0034] MDA测定试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0035] SOD测定试剂盒：南京建成生物工程研究所；
[0036] 1. 3 器材
[0037] 美国雅培AER0SET全自动生化分析仪；
[0038] JY601电子天平：上海海康电子仪器厂；
[0039] TN-100B型托盘扭力天平：上海上平仪器公司；
[0040] OLYMPUS倒置型系统显微镜；
[0041] WF10X-18MM光学显微镜：重庆光学仪器厂；
[0042] T化-16G离屯、机：上海安亭科技仪器厂 阳0创 1.实验方法：
[0044] 2. 1内皮细胞培养及VolvalerelactonesA作用研究
[0045] 2. 1. 1建立高脂血清损伤的内皮细胞模型
[0046] 取健康日本大耳白兔6只，每日饲喂高脂饲料（2%胆固醇，10%猪油，88%基础饲 料），4周后无菌条件下屯、脏取血5ml，分离血清，合并，56°C水浴30min灭活处理，再W0. 45 及0. 22双层微孔滤膜过滤后，-30冷冻保存备用。
[0047] 2. 1. 2细胞培养和传代
[0048] 将传代培养的人厮静脉内皮细胞株ECV304培养于含20%小牛血清、2臟〇1/化-谷 氨酷胺、1001]/1111青霉素和100邑/1链霉素的0161培养基中。用0,25%膜蛋白酶液与0.02% 邸TA(1:1)消化传代。接种于100ml培养瓶中，送入5%C02培养箱中培养。W备实验用。 VolvalerelactonesA，临用前用无血清培养基稀释。
[0049] 2. 1. 3 分组
[0050] 取对数生长期的细胞用于实验。细胞加处理因素前24h更换无血清培养基，使细 胞同步化至G1期，然后随机分5组：对照组、高脂血清组、A地anamixoidA组0. 4μg/ml组、 AphanamixoidA组 2μg/ml组、AphanamixoidA组 10μg/ml组。其中对照组：加无血清 0161培养基；高脂血清组：加含5%高脂血清01日1培养基。 阳05U 2. 1. 4MTT法检测细胞存活率
[0052] 将生长良好的EVC304细胞制备成5X107个，L-1的细胞悬液，按每孔0. 1ml接种 于96孔板，37°C，5%C02溫育2