一种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于人参皂苷生产提取纯化方法，特别涉及一种生产低农残高人参皂苷R〇 含量的人参提取物的方法。
【背景技术】
[0002] 人参Panax ginseng C. A. Mey.是五加科植物人参属的植物，一般指其根莖，具 有大补元气，复脉固脱，补脾益肺等功效，人参中富含各种人参皂苷，是人参中的主要活性 物质，人参皂苷R〇也是其中一种，是齐墩果酸型人参皂苷，具有抗肿瘤、抗炎、抗补体活性 等药理作用。
[0003] MS培养基是用于植物组织培养的基础培养基，可以在市场上买到，其配方如下。
[0004] 经研究人参皂苷Ro含量鲜人参高于干燥人参和红参，平均含量在0. 4%左右，而经 过组培得到的人参根组织中，人参皂苷含量均超过种植参数倍。对比试验发现，MS培养基 中未加入A溶液培养得到的人参根组织，人参皂苷Ro含量在1~2%左右，而按照本发明在 MS培养基中加入A溶液后培养得到的人参根组织，人参皂苷Ro含量均在8%以上。
[0005] A溶液为种植人参根水提液上25号大孔树脂柱纯化人参皂苷时，流出的上柱液和 水洗脱液，这两种溶液在提取纯化人参皂苷时往往都是舍弃不要的，而本发明变废为宝，从 而使得种植参得到了更充分的利用，节约了成本。
[0006] 人参人工种植时，要喷洒大量的农药，这些农药会残留在人参根中，而本发明组 培过程中，并未引入新的农药，而最初残留在组培原始根组织中的农药，随着4次的扩繁增 殖，即使不会在生长过程中降解，也已经被稀释了百倍以上。由此提取得到的提取物，农残 含量也是极低的。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法。
[0008] 本发明的技术方案概述如下。
[0009] 1. -种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法，包括如下步骤： (1) 在超净台上，用消过毒的刀片取任意新鲜人参根组织块5~6mm，经过75%酒精、 0. 1%升汞处理灭菌，然后用无菌的去离子水洗净，放入MS+A的培养基上，放于25°C培养箱 中，避光培养4周，然后切分生长良好的人参根愈伤组织，转换到新的MS+A的培养基上，按 照同样的条件进行愈伤组织扩繁增殖培养，如此共扩繁增殖4次。所述MS+A的培养基，是 在每配制l〇〇〇mL的MS培养基时，用去离子水稀释到1000mL前，加入了 200~300mL的A 溶液； (2) 取扩繁增殖4次后培养得到的人参根组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇，在 55°C回流提取60分钟，人参根组织和95%乙醇的质量（kg)体积比（L)为1:3~5,过滤，如 此提取2遍，合并2次滤液； (3) 将滤液减压浓缩至糖度40%，喷雾干燥，即得人参提取物。
[0010] 2.所述A溶液为种植人参根水提液上25号大孔树脂柱纯化人参皂苷时，流出的 上柱液和水洗脱液，合并后搅拌均匀的溶液。
[0011] 本发明的方法使用组培技术得到人参根的愈伤组织，使得人参皂苷含量显著提 高，农残含量显著降低； 本发明使用提取纯化园参的人参皂苷时，废弃不要的上柱流出液和水洗脱液，不仅变 废为宝，而且还提高了产品中人参皂苷R〇的含量。
【具体实施方式】
[0012] 下面通过具体的实施例说明本发明生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物 的方法，下面的描述仅是为了使本领域的技术人员更好地理解本发明，但不以任何方式限 制本发明。
[0013] 实施例1 生产低农残高人参皂苷R〇含量的人参提取物的方法，包括如下步骤： (1)在超净台上，用消过毒的刀片取任意新鲜人参根组织块5~6mm，经过75%酒精、 0. 1%升汞处理灭菌，然后用无菌的去离子水洗净，放入MS+A的培养基上，放于25°C培养箱 中，避光培养4周，然后切分生长良好的人参根愈伤组织，转换到新的MS+A的培养基上，按 照同样的条件进行愈伤组织扩繁增殖培养，如此共扩繁增殖4次。所述MS+A的培养基，是 在每配制l〇〇〇mL的MS培养基时，用去离子水稀释到1000mL前，加入了 200mL的A溶液； (2) 取扩繁增殖4次后培养得到的人参根组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇，在 55°C回流提取60分钟，人参根组织和95%乙醇的质量（kg)体积比（L)为1:3,过滤，如此提 取2遍，合并2次滤液； (3) 将滤液减压浓缩至糖度40%，喷雾干燥，即得人参提取物。人参皂苷Ro含量为25. 6% 人参皂苷总含量为68. 3%，农残含量检测如下：
[0014]实施例2 生产低农残高人参皂苷R〇含量的人参提取物的方法，包括如下步骤： (1) 在超净台上，用消过毒的刀片取任意新鲜人参根组织块5~6mm，经过75%酒精、 0. 1%升汞处理灭菌，然后用无菌的去离子水洗净，放入MS+A的培养基上，放于25°C培养箱 中，避光培养4周，然后切分生长良好的人参根愈伤组织，转换到新的MS+A的培养基上，按 照同样的条件进行愈伤组织扩繁增殖培养，如此共扩繁增殖4次。所述MS+A的培养基，是 在每配制l〇〇〇mL的MS培养基时，用去离子水稀释到1000mL前，加入了 300mL的A溶液； (2) 取扩繁增殖4次后培养得到的人参根组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇，在 55°C回流提取60分钟，人参根组织和95%乙醇的质量（kg)体积比（L)为1:5,过滤，如此提 取2遍，合并2次滤液； (3) 将滤液减压浓缩至糖度40%，喷雾干燥，即得人参提取物。人参皂苷Ro含量为28. 2% 人参皂苷总含量为75. 8%，农残含量检测如下：
[0015]实施例3 生产低农残高人参皂苷R〇含量的人参提取物的方法，包括如下步骤： (1) 在超净台上，用消过毒的刀片取任意新鲜人参根组织块5~6mm，经过75%酒精、 0. 1%升汞处理灭菌，然后用无菌的去离子水洗净，放入MS+A的培养基上，放于25°C培养箱 中，避光培养4周，然后切分生长良好的人参根愈伤组织，转换到新的MS+A的培养基上，按 照同样的条件进行愈伤组织扩繁增殖培养，如此共扩繁增殖4次。所述MS+A的培养基，是 在每配制l〇〇〇mL的MS培养基时，用去离子水稀释到1000mL前，加入了 250mL的A溶液； (2) 取扩繁增殖4次后培养得到的人参根组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇，在 55°C回流提取60分钟，人参根组织和95%乙醇的质量（kg)体积比（L)为1:4,过滤，如此提 取2遍，合并2次滤液； (3) 将滤液减压浓缩至糖度40%，喷雾干燥，即得人参提取物。人参皂苷Ro含量为27. 1% 人参皂苷总含量为70. 2%，农残含量检测如下：
【主权项】
1. 一种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法，其特征是包括如下步骤： (1) 在超净台上，用消过毒的刀片取任意新鲜人参根组织块5~6mm，经过75%酒精、 0. 1%升汞处理灭菌，然后用无菌的去离子水洗净，放入MS+A的培养基上，放于25°C培养箱 中，避光培养4周，然后切分生长良好的人参根愈伤组织，转换到新的MS+A的培养基上，按 照同样的条件进行愈伤组织扩繁增殖培养，如此共扩繁增殖4次；所述MS+A的培养基，是在 每配制1000mL的MS培养基时，用去离子水稀释到1000mL前，加入了 200~300mL的A溶 液； (2) 取扩繁增殖4次后培养得到的人参根组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇，在 55°C回流提取60分钟，人参根组织和95%乙醇的质量（kg)体积比（L)为1:3~5,过滤，如 此提取2遍，合并2次滤液； (3) 将滤液减压浓缩至糖度40%，喷雾干燥，即得人参提取物。2. 根据权利要求1 一种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法，其特征在 于所述A溶液为种植人参根水提液上25号大孔树脂柱纯化人参皂苷时，流出的上柱液和水 洗脱液，合并后搅拌均匀的溶液。
【专利摘要】本发明公开了一种生产低农残高人参皂苷Ro含量的人参提取物的方法，该方法包括如下步骤：（1）取新鲜人参根组织块10～12mm，放入MS+A培养基上，进行人参根组织培养；（2）取培养得到的人参根愈伤组织，洗净培养基后打浆，加入95%乙醇提取、提取液浓缩、喷雾干燥成粉末。本发明的方法生产的人参提取物具有农药残留低，人参皂苷Ro高的特点。
【IPC分类】A61K36/258
【公开号】CN105287672
【申请号】CN201510756647
【发明人】吴巍
【申请人】天津市尖峰天然产物研究开发有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月10日