组合物及其在抗急性肾衰药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 急性肾功能衰竭（Acute Renal Failure，ARF)是由多种原因引起的临床综合征， 可见于临床各科病人，发病率高且往往带来严重后果，其特点为短期内（数小时至数天）肾 功能急剧下降，临床表现为急性少尿（尿量<400mLPd)或无尿（尿量〈lOOmLPd)，体内氮质 代谢产物排出产生障碍，迅速出现氮质血症，水及电解质、酸碱平衡紊乱，并引起全身各系 统相应功能失调。引起急性肾衰的主要因素是肾血流量的急剧减少，以及由于肾组织缺血 引起的氧化应激和细胞损伤，最终导致肾脏组织结构的破坏和功能的恶化。目前临床上尚 无公认的治疗急性肾衰有效的药物，仅能通过纠正水电解质平衡，纠正酸中毒等对症治疗 措施改善症状，后期还需要通过血液透析维持机体机能。在改善肾脏血流灌注障碍和减轻 肾组织损伤方面有明显疗效的临床药物少见。
[0003] 从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到 高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0004] 本发明涉及的化合物I是一个2011年发表（Antonella Maggio et al.，2011. Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba (Asteraceae) from Sicily. Tetrahedron Letters，52(2011)4543 - 4545)的化合物， 我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化 合物III和化合物IV制备了组合物并对该组合物抗急性肾衰活性进行了评价，其具有抗急 性肾衰活性。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为60%和40%。
[0006]
[0007] 本发明公开的组合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0008] 本发明的目的是提供组合物用于治疗急性肾衰的用途，即用于制备治疗急性肾衰 药物的用途。
[0009] 本发明的组合物对急性肾衰疾病有明显的治疗作用。
[0010] 通过我们的研究发现组合物能够改善肾脏的功能。
[0011] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0012] 实施例1化合物Artalbicacid的制备
[0013] 化合物Artalbicacid(I)的制备方法参照AntonellaMaggio等人发表的 文南犬(AntonellaMaggioetal. , 2011.Artalbicacid,asesquiterpenewithan unusualskeletonfromArtemisiaalba(Asteraceae)fromSicily.Tetrahedron Letters, 52(2011)4543 - 4545)的方法。
[0014]
[0015] 实施例2Artalbicacid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0016] 将化合物I (266mg，1.0 Ommol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（3. 760g，20.0 Ommol)和6mL的50 %氢氧化钠溶液。混合物在40 摄氏度搅拌16h。16h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相 溶液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤5次，再用无水硫酸钠干燥，最后减 压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮 =100:1.0, v/v)，收集棕色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的棕色粉末（272mg， 73% ) 〇
[0017]1HNMR(500MHz，DMS0-d6)S11. 41 (s，1H)，6. 06 (s，1H)，5. 76 (s，1H)，4. 99 (s，1H)，4 .71 (s, 1H), 4. 56 (s, 1H), 3. 86 (s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, 1H), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (s, 1H),I. 64 (s, 3H),I. 54 (s, 1H),I. 44 (s, 2H), 0. 95 (s, 3H).
[0018]13CNMR(125MHz，DMS0-d6)S201. 95 (s)，175. 93 (s)，149. 13 (s)，148. 15 (s)，117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，70. 27 (s)，57. 68 (s)，41. 26 (s)，39. 07 (s)，38. 86 (s)，35. 69 (s) ，33. 36 (s)，30. 72 (s)，20. 44 (s)，18. 42 (s).
[0019] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforC17H26BrO4:373. 1014；found373. 1017.
[0020]
[0021] 实施例3Artalbicacid的0_(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 将化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于15mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 12h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取4次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:0.5, v/v)，收集棕色 集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的棕色粉末（111. 3mg，61% )。
[0023] 1H NMR (500MHz，DMS0-d6) S 11.52 (s，1H), 5 6. 13 (s，1H)，5.81 (s，1H)，4.73 (s，1H) ,4. 62 (d, J = 10. 9Hz, 2H),3. 59 (s, 2H),2. 92 (s, 4H),2. 68 (d, J = 10. 5Hz, 3H),2. 56 (s, 2H), 2. 48 (s, 2H),2. 22 (s, 1H),I. 70 (s, 3H),I. 54 (d, J = 10. 2Hz, 3H),I. 16 (s, 6H),I. 00 (s, 3H).
[0024]13CNMR (125MHz, DMS0-d6) S 201. 95 (s)，175. 93 (s)，149. 13 (s)，148. 15 (s)，117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，67. 06 (s)，57. 68 (s)，52. 53 (s)，47. 72 (s)，41. 30 (s)，39. 06 (s) ，38. 85 (s)，35. 68 (s)，30. 72 (s)，20. 44 (s)，18. 42 (s)，12. 35 (s)?
[0025] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC21H36NO4:366. 2644 ;found:366. 2640。
[0026]
[0027] 实施例4 Artalbic acid的0_(四氢吡咯基）乙基衍生物（IV)的合成
[0028] 将化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于15mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (34511^，2.5_31)，碘化钾（8411^，0.5_31)和吡略烧（142〇11^，20_31)，混合物加热回流 8h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取3次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 0, v/V)，收集棕色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物IV的棕色粉末（107. lmg，59% )。
[0029] 1HNMR(500MHz,DMS〇-d6) 8 14. 01 (s, 1H), 6. 15 (s, 1H), 5. 83 (s, 1H), 4. 7 5 (s, 1H),4. 63 (s, 1H),3. 96 (s, 1H),3. 58 (s, 2H),2. 70 (d, J = 6. 1Hz, 3H),2. 56 - 2. 49 (m, 8H),2. 09 (s, 1H), I. 68 (d, J = 10. 0Hz, 7H), I. 58 (s, 2H), I. 44 (s, 1H), I. 02 (s, 3H).
[0030] 13CNMR(125MHz,DMS0-d6) S 201. 85 (s)，175. 85 (s)，149. 07 (s)，148.ll(s), 117. 0 3 (s)，109. 33 (s)，81. 78 (s)，67. 00 (s)，57. 64 (s)，54. 44 (d，J= 17. 1Hz)，41. 20 (s)，38. 98 ( s)，38. 79 (s)，35. 64 (s)，30. 70 (s)，25. 21 (s)，20. 35 (s)，18. 36 (s)?
[0031] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C21H34NO4:364. 2488 ;found:364. 2491。
[0032]
[0033] 实施例5组合物对急性肾衰大鼠的治疗作用
[0034] (一）实验方法
[0035] 组合物的制备：将60mg化合物III的粉末和40mg化合物IV的粉末装入带盖的小 管中并用涡轮搅拌仪混合即得到IOOmg组合物。
[0036] 采用肌肉注射甘油致急性肾功能衰竭大鼠动物模型。选用180~220g健康雄性 SD大鼠30只，随机分为5组：假手术组（肌肉注射生理盐水）；模型组（肌肉注射甘油）； 给药干预组（组合物、化合物III或者化合物IV 0. 6mg/Kg，肌肉注射甘油），各组大鼠在甘 油造模后立即尾静脉注射生理盐水或待试药物，12和24小时后再给药一次。
[0037] (二）观察指标
[0038] 大鼠末次给药或生理盐水后放入代谢笼收集24小时尿，留尿后6小时用4%水合 氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流仪测定造模后及治疗后双侧肾脏血流量，取平均 值作为单只动物肾血流量；取血制备血清，测定血BUN和Cre (均按试剂盒说明书操作）。
[0039] (三）实验结果
[0040] 1.组合物可增加急性肾衰小鼠肾血流量
[0041] 组合物可显著增加急性肾衰小鼠肾血流量，而化合物III和化合物IV无此作用。
[0042] 表1组合物对急性肾衰小鼠肾血流量的影响
[0043]
[0044] *P〈0. 05vs急性肾衰模型组
[0045] 2.组合物对急性肾衰小鼠肾功能具保护作用
[0046] 急性肾衰大鼠静脉注射生理盐水24小时后，血清BUN和Cre见表2。急性肾衰模 型组明显高于假手术组，说明模型组动物肾功能损害严重。组合物能改善急性肾衰大鼠的 肾功能（P〈〇. 05)，而化合物III和化合物IV无此作用。见表2。
[0047] 表2各试验组大鼠肾功能指标比较
[0048]
[0049] *P〈0. 05vs急性肾衰模型组
[0050] 结论：组合物能够保护肾脏的功能，可以用来制备抗急性肾衰药物。而化合物III 和化合物IV不能够保护肾脏，不可用来制备抗急性肾衰药物。
[0051] 实施例6本发明所涉及组合物片剂的制备
[0052] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0053] 实施例7本发明所涉及组合物胶囊的制备
[0054] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100 粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为60%和40%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为：将化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照质量百分数分别为60%和40%充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在治疗急性肾衰药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在治疗急性肾衰药物中的应用，其特征为：所述组合物 改善急性肾衰所引起的肾脏血流量的降低。5. 如权利要求3所述的组合物在治疗急性肾衰药物中的应用，其特征为：所述组合物 改善急性肾衰引起的血清BUN的升高。6. 如权利要求3所述的组合物在治疗急性肾衰药物中的应用，其特征为：所述组合物 改善急性肾衰引起的血清化e的升高。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其在制备抗急性肾衰药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗急性肾衰的作用，具有开发抗急性肾衰药物的价值。
【IPC分类】A61K31/40, A61K31/195, A61P13/12
【公开号】CN105193793
【申请号】CN201510421019
【发明人】丁秋菊
【申请人】南京海澳斯生物医药科技有限公司
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年7月16日