一种抗抑郁作用的醉马草提取物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药领域，具体涉及一种抗抑郁作用的醉马草提取物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 醉马草为为豆科植物小花棘豆的全草。春季开花前采收。
[0003] 醉马草原形态小花棘豆为多年生草本，高20~30余厘米。多分枝，直立或平铺， 被硬毛。托叶矩圆状卵形，基部连合，与叶柄分离，被稀毛；单数羽状复叶，小叶9~13,矩 圆形，长7~18毫米，宽2~6毫米，先端渐尖，有突尖，基部圆，上面无毛，下面有疏柔毛。 总状花序腋生，花稀疏；总花梗长5~9厘米，通常较叶长；花萼筒状，长约5毫米，宽约2 毫米，疏生长柔毛，萼齿条形；花冠紫色，长约7毫米，旗瓣倒卵形，顶端近截形，浅凹或有细 尖，龙骨瓣长约5毫米，先端有喙；子房、花柱都无毛。荚果下垂，长椭圆形，膨胀，顶端有一 弯喙，长1~1.7厘米，宽约4~7毫米，密生长柔毛，花期6~7月。果期8~9月。
[0004] 醉马草原形态小花棘豆生于沙漠地区的河流滩地、湖盆、草滩及盐演化土壤上。分 布内蒙古、陕西、甘肃、宁夏、青海、新疆、山西等地。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种醉马草提取物，该提取物的制备方法和液相分析方 法，含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备抗抑郁的药物的用途。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] -种醉马草提取物，该提取物由以下方法制备：
[0008] (a)以重量计，每100份药材包含干燥的醉马草80~90份和干燥的甘草10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；（c)对步骤 (b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20~30%乙醇冲洗 7~9个柱体积除去多糖，再用55~65%乙醇洗脱9~11个柱体积，收集55~65%乙醇 洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0009] 进一步地，步骤（d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0010] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为65~75%。
[0011] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70%。
[0012] 进一步地，步骤（d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25%乙醇冲洗8个 柱体积除去多糖，再用60 %乙醇洗脱10个柱体积，收集60 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干 燥。
[0013] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次药材制备的醉马草提取物 批间差异，所述提取物的液相分析方法为：
[0014] 色谱柱：Agilent ZorbaxSB C18 柱（4. 6mmX250mm，5ym);
[0015] 流动相：A为乙腈，B为0. 1%磷酸水溶液；
[0016] 梯度洗脱程序：0? 01 ~15min，A25% ~35% ;15 ~25min，A35% ~50% ;25 ~ 32min，A50% ;32 ~35min，A50%~25% ;35 ~40min，A25%;
[0017]流动相流速：1.OmL?minS
[0018] 检测波长：260nm;
[0019] 柱温：30°C;
[0020] 进样量：10yL。
[0021] 药物制剂，含有治疗有效量的所述醉马草提取物和药学上可接受的载体。
[0022] 所述的醉马草提取物在制备抗抑郁的药物中的应用。
[0023] 所述的药物制剂在制备抗抑郁的药物中的应用。
[0024] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0025] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明醉马草提取物，其余为药物学上可接受 的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0026] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0027] 本发明的优点：本发明通过对醉马草药材进行提取、除杂、富集处理，能得到抗抑 郁的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱，用于控制不 同产地、批次药材制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0028] 图1为醉马草提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0029] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0030] 实施例1 :醉马草提取物制备
[0031] 药材来源：醉马草和甘草购自安徽亳州中药材市场。
[0032] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA;85 %磷酸为HPLC级，购于TEDIA; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0033]将8. 5kg干燥的醉马草和1.5kg干燥甘草混合粉碎，用70 %乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂 (2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱10个柱 体积（15L)，收集60 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得醉马草提取物浸膏粉约155g。
[0034] 实施例2:醉马草提取物②制备（80份醉马草，20份甘草）
[0035] 制备方法：将8. 0kg干燥的醉马草和2. 0kg干燥甘草混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得醉马草提取物浸膏粉约155g。
[0036] 实施例3 :醉马草提取物③制备（90份醉马草，10份甘草）
[0037] 制备方法：将9. 0kg干燥的醉马草和1. 0kg干燥甘草混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得醉马草提取物浸膏粉约155g。
[0038] 实施例4:醉马草提取物④制备（75份醉马草，25份甘草）
[0039] 制备方法：将7. 5kg干燥的醉马草和2. 5kg干燥甘草混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富