阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物中的应用
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及医药领域，具体涉及阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物方面的应用。
【背景技术】：
[0002] 抑郁症（Depression)是以持续情绪低落和认知功能障碍为主要临床特征，包括 焦躁情趣、快感缺乏、睡眠障碍、负罪感和反复自杀念头等，具有高患病率、高复发率、高致 残率和高致死率等特点。世界卫生组织报道称全球范围内，共有超过3. 5亿人患有抑郁症， 到2020年抑郁症可能成为仅次于心脏病的第二大疾病。随着社会经济的快速发展，生活节 奏加快，人们的压力增加，各种情感冲击加大，造成抑郁症的发病率逐年增高。抑郁症被称 为"二十一世纪的流行病"，其危害已越来越引起医药卫生界的重视。
[0003]目前，治疗抑郁症的主流药物主要包括：选择性五羟色胺再摄取抑制剂（SSRIs)， 去甲肾上腺素与特定五羟色胺再摄取抑制剂（NaSSA)，三环类抗抑郁药（TCAs)，单胺氧化 酶抑制剂（MAOIs)和五羟色胺与去甲肾上腺素再摄取抑制剂（SNARI)。这些抗抑郁药物存 在抗抑郁谱窄，起效时间慢，毒副作用大，价格昂贵等缺点，严重影响其临床使用。近年来， 中医中药对于抑郁症的治疗越来越受到人们的广泛关注，从中草药中挖掘具有良好抗抑郁 作用的天然化合物的研究也日益增多，已成为国际制药业开发抗抑郁药物的趋势。
[0004] 阿魏酸松柏酯（Coniferylferulate)，无色油状物，其分子式为C2()H2(j06，分子量为 356. 37,是一种天然活性物质，存在于伞形科植物欧当归、当归、川芎等植物中。现代药理研 究表明阿魏酸松柏酯具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、血管舒张等药理作用。有关阿魏酸松柏酯 在制备预防或和治疗抑郁症药物中的应用还未见报道。本发明分别通过体内外试验对阿魏 酸松柏酯的抗抑郁活性进行了研究，结果表明该单体化合物药理作用清楚，抗抑郁功效强， 可以作为预防和治疗抑郁症的药物。
【发明内容】
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[0005] 本发明的目的在于提供阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物中的新用途。
[0006] 本发明提供阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物中的应用，所述的阿魏酸松柏酯的结 构式为：
[0007]
[0008] -种抗抑郁药物，由阿魏酸松柏酯和药学上可接受的载体组成。
[0009] 所述的载体是聚乙二醇、植物油、淀粉、糊精、环糊精、各种化学修饰的环糊精、蔗 糖等常规药物辅料中的一种或多种。
[0010] 所述药物的剂型是口服制剂、注射剂或局部给药制剂。所述的口服制剂是片剂、泡 腾片、胶囊、脂质体、纳米微胶囊、硬胶囊、纳米口服液或微丸。所述的注射剂是注射液剂型 或注射用冻干粉针剂型。所述的局部给药制剂是软膏剂、喷雾剂或贴剂。
[0011] 本发明的有益效果在于：
[0012] 1.本发明对化合物阿魏酸松柏酯或其药学上可接受的盐发掘出了新的药用价值， 将其用于抗抑郁症，并可制备成预防、调理或治疗抑郁症的药物，从而为当归、川穹等药材 的应用开拓了一个新的领域。
[0013] 2.本发明分别使用体内外试验，采用不同的细胞模型及动物模型对阿魏酸松柏酯 抗抑郁活性进行研究，试验结果表明：（1)阿魏酸松柏酯对皮质酮和谷氨酸损伤的PC12细 胞具有较好的保护活性，并呈明显的量效关系；（2)能明显缩短小鼠强迫游泳和悬尾试验 的不动时间，表明阿魏酸松柏酯具有较强的抗抑郁作用。
[0014] 3.本发明所述的阿魏酸松柏酯来源广泛，能够从天然物质中直接提取分离而得， 提取分离的操作简便，由其生产的抗抑郁药物具有低成本的特点。
【附图说明】：
[0015] 图1.阿魏酸松柏酯在不同浓度下对皮质酮诱发的PC12细胞损伤的细胞存活率
[0016] 图2.阿魏酸松柏酯在不同浓度下对谷氨酸诱发的PC12细胞损伤的细胞存活率
【具体实施方式】：
[0017] 以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仅用于说明本 发明，而不是限制本发明的保护范围。
[0018] 实施例1阿魏酸松柏酯对皮质酮和谷氨酸分别损伤PC12细胞的保护活性
[0019] 1.细胞培养
[0020] PC12细胞购自中科院上海细胞库，培养体系用含5%胎牛血清和10%马血清的 RPMI-1640培养基，于37°C，5%C02细胞培养箱中培养。培养前用多聚L-赖氨酸（O.Olmg/ ml)包被培养瓶和培养皿，每隔3天换液。
[0021] 2?实验步骤
[0022] 本发明采用MTT法，评价了阿魏酸松柏酯对皮质酮和谷氨酸分别损伤PC12细胞的 保护活性。PC12细胞经胰酶消化后用完全培养基制成每毫升含细胞个数为2X105的悬液， 接种于96孔培养板，每孔100yL，放入37°C5%C02孵箱培养。24h后弃去细胞液，空白组 加入无血清培养基，模型组加入含400yM吨1皮质酮（或20mM*L1谷氨酸）的无血清培养 基，给药组加入含400yM，L1皮质酮（或20mM，L1谷氨酸）及浓度分别为2, 10, 20yM，L1 阿魏酸松柏酯的无血清培养基，每个浓度设3个副孔。孵育48h后每孔加入10yLMTT溶 液（5mg/mL，PBS溶液配置），继续培养4h后，用移液枪吸取上清液；然后没孔中分别加入 lOOiiLDMS0,于微量振荡器上振荡至结晶完全溶解，570nm下用酶标仪测定各孔的吸光值 (0D值），计算各组的细胞存活率。
[0023] 3?实验结果
[0024] 阿魏酸松柏酯对皮质酮损伤PC12细胞的保护作用活性结果见图1 (##P〈0.Olvs空 白对照组；*P〈〇. 05，#p〈0.Olvs模型组）。结果表明，在2, 10, 20yM浓度下，给药组的细胞 存活率与模型组细胞存活率之间均存在显著性差异，说明该化合物能有效减少皮质酮诱导 的PC12细胞损伤。
[0025] 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用活性结果见图2广P〈0.Olvs空 白对照组；#P〈〇.Olvs模型组）。结果表明，2, 10, 20yM?L1的阿魏酸松柏酯对谷氨酸损 伤的PC12细胞均具有明显的保护作用，并呈明显的量效关系。
[0026] 体外实验表明阿魏酸松柏酯可作为制备预防及治疗抑郁症的药物，具有良好的开 发前景。
[0027] 下面通过体内药效学实验来进一步说明阿魏酸松柏酯的抗抑郁作用。
[0028] 实施例2阿魏酸松柏酯抗抑郁体内药效学实验
[0029] 1. 1实验材料及分组
[0030] 雄性ICR小鼠，体重18~20g，由北京维通利华动物实验中心提供。每10只/笼 裙养，自由摄食和饮水，室温（22±2) °C，自然光照。将正常小鼠按体重随机分成5组，每组 12只，S卩空白对照组、阳性药氟西汀组（10mg/kg)、阿魏酸松柏酯高（40mg/kg)、中（20mg/ kg)、低（10mg/kg)剂量组。各组均按0? 2mL/10g体重灌胃给药7天。
[0031] 1.2实验方法
[0032] 1.2.1小鼠悬尾试验
[0033] 于第7天给药lh后将单个小鼠尾端（距尾端2cm处）用胶布粘在纸箱上部，使其 成倒挂状态，头部离箱底15cm，中间以隔板隔离小鼠视线。观察6min，记录后4min内小鼠 累计不动时间为绝望时间。每次平行做6只小鼠。
[0034] 1. 2. 2小鼠强迫游泳试验
[0035] 小鼠给药lh后进行实验，将其置于高20cm，直径10cm的有机玻璃缸中，其中放 入22±2°C的水，高度15cm，每次操作一只，并用动物行为视频分析系统（上海吉量软件科 技有限公司）记录6min内小鼠的游泳行为，分析后4min内小鼠强迫游泳的累计不对时间 (s)。不动时间判断为动物在水中停止挣扎，呈漂浮状态，只有细小的肢体运动以保持头部 浮在水面上。
[0036] 1. 3实验结果
[0037] 小鼠悬尾试验结果见表1，结果表明，阿魏酸松柏酯各剂量组与空白对照组比较， 不动时间均有所减少，且中剂量组、高剂量组与空白对照组比较，具有统计学意义（P〈〇. 05， P〈0. 01);中剂量组效果与阳性药组相当，高剂量组效果明显优于阳性药组。
[0038] 表1.阿魏酸松柏酯对小鼠悬尾不动时间的影响
[0039]
[0040]与空白组比较：*P〈0. 05, **P〈0. 01
[0041] 小鼠强迫游泳试验结果见表2,结果表明，阿魏酸松柏酯中、高剂量组能明显缩短 小鼠强迫游泳不懂时间（与空白组比较，*P〈〇. 05, #P〈0. 01)，显示阿魏酸松柏酯有较强的 抗抑郁作用。
[0042] 表2.阿魏酸松柏酯对小鼠强迫游泳不动时间的影响
[0043]
[0044]与空白组比较：*P〈0. 05, **P〈0. 01
[0045] 以上实验结果表明，本发明中涉及的阿魏酸松柏酯不仅对皮质酮和谷氨酸损伤的 PC12细胞具有较好的保护作用，还能显著减少小鼠强迫游泳和悬尾试验中的不动时间，因 此可以认为该化合物具有显著的抗抑郁作用，可以用于制备治疗抑郁症的药物。
[0046] 实施例3.阿魏酸松柏酯软胶囊的制备
[0047] 取阿魏酸松柏酯20g，植物油180g，搅拌，充分混匀，作为内容物备用。分别取甘 油、明胶和水（按比例1:3:3)适量，于明胶中加入适量的水使其充分吸水膨胀，甘油及余下 的水混合后置入化胶桶中加热至70~80°C，加入膨胀的明胶及对羟基苯甲酸丙酯适量，搅 拌，作为囊材备用。将内容物和囊材在软胶囊机上压制成软胶囊，干燥定形，即得阿魏酸松 柏酯软胶囊。
[0048] 实施例4.阿魏酸松柏酯片剂的制备
[0049] 将80g聚乙二醇4000加热熔化，边搅拌边加入20g阿魏酸松柏酯，混匀冷却，将冷 却后所得固化物粉碎，加入淀粉185g，混匀制成颗粒，加入羧甲基淀粉钠15g，硬脂酸镁适 量混匀，压片，即得阿魏酸松柏酯片。
【主权项】
1. 阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物中的应用，所述的阿魏酸松柏酯的结构式为：2. -种抗抑郁药物，其特征在于由阿魏酸松柏酯和药学上可接受的载体组成。3. 如权利要求2所述的一种抗抑郁药物，其特征在于，所述药物的剂型是口服制剂、注 射剂或局部给药制剂。4. 如权利要求3所述的一种抗抑郁药物，其特征在于，所述的口服制剂是片剂、泡腾 片、胶囊、脂质体、纳米微胶囊、硬胶囊、纳米口服液或微丸。5. 如权利要求3所述的一种抗抑郁药物，其特征在于，所述的注射剂是注射液剂型或 注射用冻干粉针剂型。6. 如权利要求3所述的一种抗抑郁药物，其特征在于，所述的局部给药制剂是软膏剂、 喷雾剂或贴剂。
【专利摘要】本发明提供了阿魏酸松柏酯在制备抗抑郁药物中的应用，涉及医药领域。本发明通过体外活性试验证明阿魏酸松柏酯对皮质酮和谷氨酸损伤的PC12细胞具有较好的保护活性；体内试验结果显示阿魏酸松柏酯能显著缩短小鼠强迫游泳和悬尾试验的不动时间。实验证明阿魏酸松柏酯具有显著的抗抑郁作用，可用于制备预防和治疗抑郁症的药物。
【IPC分类】A61K31/216, A61P25/24
【公开号】CN105055391
【申请号】CN201510420767
【发明人】周玉枝, 宫文霞, 秦雪梅, 张丽增, 高晓霞, 田俊生
【申请人】山西大学
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年7月16日