瓣状盒子草苷c在制备抗肿瘤药物中的应用
【专利说明】瓣状盒子草苷C在制备抗肿瘤药物中的应用 技术领域 技术领域
[0001] 本发明属于医药领域，涉及瓣状盒子草苷C在制备抗肿瘤药物中的应用。 【背景技术】
[0002] 状盒子草苷C来源于萌芦科（Cucurbitaceae) 状盒子草Actinostemma lobatum Maxim.。理实验研究表明，瓣状盒子草苷C具有细胞毒活性。对约60种人型肿瘤 细胞株呈细胞毒活性。其半数生长抑制浓度GI50S 100 μ M。
[0003] 瓣状盒子草苷C (Lobatoside C)是从瓣状盒子草中分离得到的一种三萜苷类化 合物，白色无定形粉末，mp. 262-266°C，分子式C58HmO25，分子量1187. 33,结构式为：
通过文献检索，国内尚未见瓣状盒子草苷C用于制备抗肿瘤药物。
【发明内容】
[0004] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，应用瓣状盒子草苷C制备抗肿 瘤药物。
[0005] 本发明的技术方案如下： 本发明所述的瓣状盒子草苷C，其制备方法包括以下步骤： (1) 取瓣状盒子草粉碎，按固液体积比为5 :1. 5-2加入夹带剂，在压力22-35MPa，温度 35-48°C条件下，通入液态CO2萃取90-180min，在压力7-9MPa，温度30-35°C条件下解析，收 集萃取液； (2) 将步骤（1)中得到的萃取液加硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液； (3) 将步骤（2)中得到的脱色液浓缩至相对密度为I. 12,上中性氧化铝柱，用石油 醚-乙酸乙酯洗脱纯化，得到瓣状盒子草苷C粗品； (4) 粗品经过制备型高效液相色谱精制得到高纯度的瓣状盒子草苷C。
[0006] 所述步骤（1)中，夹带剂为甲醇或乙醇溶液。
[0007] 所述步骤（2)中，硅藻土加入量为药材量的3-4. 5% 所述步骤（3)中，石油醚-乙酸乙酯的体积比为3:14。
[0008] 所述步骤（4)中，制备型高效液相色谱流动相为甲醇-乙腈-水，体积比为 19:38:45。
[0009] 瓣状盒子草苷C在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0010] 通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察瓣状盒子草苷C的抗肿瘤作用，结果表明 瓣状盒子草苷C对GLC4肺癌和COLO结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其 毒副作用小。
[0011] 本发明的有益效果通过以下实验得到了验证： 实验方法： 1、受试提取物：瓣状盒子草苷C提取物 (1)性状：结晶，味苦。
[0012] (2)规格：含瓣状盒子草苷C彡90%。
[0013] (3)溶剂：乙醇或甲醇。
[0014] (4)储存条件：4°C，密封保存。
[0015] 2、细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株C0L0。
[0016] 3、给药剂量和方法 瓣状盒子草苷C组：10mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。
[0017] 阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0018] 阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿啼啶肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0019] 灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。
[0020] 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2 X 10 6细胞悬液，注射 至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对 模型动物存活率的影响。
[0021] (2)肺内种植瘤肺转移模型：取2X 10 6细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15 天取肺，测量瘤重和肺转移数。
[0022] (3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。
[0023] 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，瓣状盒子草苷C组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和 转移的作用，可延长实验小鼠的生存期。
[0024] 表1瓣状盒子草苷C对种植瘤的抑制作用（η=20，? 土S)
表2瓣状盒子草苷C对肿瘤转移发生率的影响（n=20, ％)
表3瓣状盒子草苷C对实验小鼠生存率的影响（n=20, ％)
由表1、表2和表3可以看出，瓣状盒子草苷C组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性 对照组基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。
[0025] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，将瓣状盒子草苷C与医学上可接受的辅料一起制 成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一 种。
[0026] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂 肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。
[0027] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下 列实施方式。 【具体实施方式】
[0028] 实施例1 瓣状盒子草苷C的制备 取500g瓣状盒子草粗粉，置于萃取釜中，按固液体积比为5 :2加入甲醇作为夹带剂，在 压力22MPa，温度38°C条件下，通入液态C02, C02流量为4. 5ml/g生药/min，萃取120min， 在压力7MPa，温度32°C条件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色 液，浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱(柱压为6bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-乙 酸乙酯3:14洗脱纯化，得到瓣状盒子草苷C粗品；以体积比19:38:45甲醇-乙腈-水为流 动相，粗品用流动相溶解，注入制备型高效液相色谱仪，控制流速为20ml/min，收集目标流 分，连续制备，冷冻干燥得高纯度的瓣状盒子草苷C，经HPLC检测，纯度94. 4%。
[0029] 实施例2 片剂：瓣状盒子草苷C40g，淀粉135g，鹅去氧胆酸盐25g，制粒，压片制成1000片。月艮 用方法：成人一次1片，一日2次。
[0030] 实施例3 胶囊：瓣状盒子草苷C40g，淀粉135g，壳聚糖25g，混匀，制成1000粒。服用方法：成人 一次1粒，一日2次。
【主权项】
1. 结构式如下所示的瓣状盒子草巧c在制备抗肿瘤药物中的应用。2. 如权利要求1所述的瓣状盒子草巧C在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，瓣 状盒子草巧C在肺癌药物中的应用。3. 如权利要求1所述的瓣状盒子草巧C在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，瓣 状盒子草巧C在结肠癌药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种瓣状盒子草苷C在制备抗肿瘤药物中的应用，通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察瓣状盒子草苷C的抗肿瘤作用，结果表明瓣状盒子草苷C对肺癌和结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将瓣状盒子草苷C与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
【IPC分类】A61K31/704, A61P35/00, A61K31/7048
【公开号】CN104997796
【申请号】CN201510263406
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年5月22日