一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化工程技术，特别是一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法。
技术背景
[0002]银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶，秋季叶尚绿时采收。银杏叶的功能为活血化瘀，通络止痛。现在临床上主要用于心血管疾病。从银杏叶中提取药物成分始于20世纪，德国Schwabe制药公司研发的产品EGB761及其标准的制备方法则进一步推动了对银杏叶的研宄进程。目前已从银杏叶中分离得到多种化学成分，而黄酮类化合物是银杏叶中含量较高的成分，目前认为是银杏叶提取物中的有效成分之一。因此提高银杏叶提取物中黄酮类成分是决定银杏叶提取物药用效果的关键。
[0003]目前从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法从提取溶剂上分为挥发性有机溶剂和超亚临界CO2提取；从强化方法上分为超声强化和微波强化。有机溶剂提取法是近年来国内外用于提取银杏叶中黄酮应用最为普遍的方法。一般可用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮或者一些极性较大的混合溶液。如尹丽等人以乙醇浓度为75%的乙醇-水提取溶剂作为银杏叶中黄酮提取的最佳溶剂比例，参见:中国实验方剂学杂志，2013，19 (18):260-262。有机溶剂提取虽然操作简便、易于工业化，但溶剂易燃、易爆、挥发性强，存在安全隐患，同时严重污染环境。超亚临界CO2提取，参见:张玉祥，中国中医药科技，2006，13(4):255-256。虽然溶剂绿色安全，但是要求设备耐高压，一次性投入高。超声强化，参见:杨荣华，中国医药导报，2010，7 (20):25-27,和微波强化，参见:陈金娥，光谱实验室，2011，28 (2):623-626,提取黄酮，均采用挥发性有机溶剂，虽然提取时间缩短，溶剂消耗减少，收率提高，但仍存在有机试剂提取普遍的安全与污染问题。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对上述存在问题，提供一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，采用本发明提取黄酮类化合物可有效解决现有黄酮提取技术使用易燃、易爆有机溶剂存在的问题。
[0005]本发明的技术方案:
[0006]一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，以银杏叶为原料，以胆碱类低共熔溶剂为提取剂，以水为降低体系粘度的稀释剂，在超声的强化下提取黄酮类化合物，包括以下步骤:
[0007]I)将干燥银杏叶粉碎，过10-80目筛，加入胆碱类低共熔溶剂和水的混合液，胆碱类低共熔溶剂和水的混合液中胆碱类低共熔溶剂和水的体积比为1:10，干燥银杏叶与胆碱类低共熔溶剂和水的混合液的用量比为lg:5-50mL，在超声功率为1-lOOW/cm2、超声频率为20-80kHz、温度为40-60°C条件下，提取20-40分钟，然后采用离心或过滤进行液-固分离，得到黄酮类化合物的粗制提取液；
[0008]2)将上述黄酮类化合物粗制提取液经0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到黄酮类化合物的精制提取液。
[0009]所述胆碱类低共熔溶剂为乙二醇-草酸-氯化胆碱的室温熔盐液体，室温熔盐液体中乙二醇、草酸和氯化胆碱的摩尔比1:1:1。
[0010]本发明的优点是:
[0011]该提取方法具有提取剂不燃爆、不挥发、损耗小、耗能低、无安全隐患、操作简便、易于工业化、效率高等特点，可用于黄酮类化合物高效绿色规模化生产和实现银杏叶资源的综合利用。
【具体实施方式】
[0012]以下实施例中，所述胆碱类低共熔溶剂为乙二醇-草酸-氯化胆碱的室温熔盐液体，室温熔盐液体中乙二醇、草酸和氯化胆碱的摩尔比1:1:1。
[0013]实施例1:
[0014]一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，包括以下步骤:
[0015]I)干燥银杏叶粉碎，过10目筛，取10克银杏叶粉末加25毫升胆碱类低共熔溶剂和25毫升水，40°C超声提取20分钟，功率100W/cm2，频率20kHz，提取液4000rpm离心分离5分钟后得到黄酮提取液；
[0016]2)将步骤I)得到提取液黄酮类化合物提取液经过0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到过滤后的提取液。
[0017]将得到的提取液用高效液相色谱仪进样10 μ L检测，经计算得到目标物的提取量为160毫克/10克。
[0018]实施例2:
[0019]一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，包括以下步骤:
[0020]I)取粉碎并过20目筛的银杏叶粉末10克，加50毫升胆碱类低共熔溶剂和500毫升水，50°C超声提取40分钟，功率10W/cm2，频率20kHz，提取液4000rpm离心分离5分钟后得到黄酮提取液；
[0021]2)将步骤I)得到提取液黄酮类化合物提取液经过0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到过滤后的提取液。
[0022]将得到的提取液用高效液相色谱仪进样10 μ L检测，经计算得到目标物的提取量为200毫克/10克。
[0023]实施例3:
[0024]一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，包括以下步骤:
[0025]I)取粉碎并过80目筛的银杏叶粉末10克，加100毫升胆碱类低共熔溶剂和400毫升水，60°C超声提取40分钟，功率10W/cm2，频率80kHz，提取液4000rpm离心分离5分钟后得到黄酮提取液；
[0026]2)将步骤I)得到提取液黄酮类化合物提取液经过0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到过滤后的提取液。
[0027]将得到的提取液用高效液相色谱仪进样10 μ L检测，经计算得到目标物的提取量为280毫克/10克。
[0028]实施例4:
[0029]一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，包括以下步骤:
[0030]I)取粉碎并过60目筛的银杏叶粉末10克，加100毫升胆碱类低共熔溶剂和200毫升水，60°C超声提取40分钟，功率50W/cm2，频率20kHz，提取液4000rpm离心分离10分钟后得到黄酮提取液。
[0031]2)将步骤I)得到提取液黄酮类化合物提取液经过0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到过滤后的提取液；
[0032]将得到的提取液用高效液相色谱仪进样10 μ L检测，经计算得到目标物的提取量为300毫克/10克。
[0033]以上所述，仅为本发明部分【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，其特征在于:以银杏叶为原料，以胆碱类低共熔溶剂为提取剂，以水为降低体系粘度的稀释剂，在超声的强化下提取黄酮类化合物，包括以下步骤: 1)将干燥银杏叶粉碎，过10-80目筛，加入胆碱类低共熔溶剂和水的混合液，胆碱类低共熔溶剂和水的混合液中胆碱类低共熔溶剂和水的体积比为1:10，干燥银杏叶与胆碱类低共熔溶剂和水的混合液的用量比为lg:5-50mL，在超声功率为1-lOOW/cm2、超声频率为20-80kHz、温度为40-60°C条件下，提取20-40分钟，然后采用离心或过滤进行液-固分离，得到黄酮类化合物的粗制提取液； 2)将上述黄酮类化合物粗制提取液经0.45 μ m过滤膜过滤，去除杂质，得到黄酮类化合物的精制提取液； 所述胆碱类低共熔溶剂为乙二醇-草酸-氯化胆碱的室温熔盐液体，室温熔盐液体中乙二醇、草酸和氯化胆碱的摩尔比1:1:1。
【专利摘要】一种利用低共熔溶剂提取银杏叶中黄酮类化合物的方法，以银杏叶为原料，以胆碱类低共熔溶剂为提取剂，以水为降低体系粘度的稀释剂，在超声的强化下提取黄酮类化合物，所述胆碱类低共熔溶剂为乙二醇-草酸-氯化胆碱的室温熔盐液体，室温熔盐液体中乙二醇、草酸和氯化胆碱的摩尔比1:1:1。本发明的优点是：该提取方法具有提取剂不燃爆、不挥发、损耗小、耗能低、无安全隐患、操作简便、易于工业化、效率高等特点，可用于黄酮类化合物高效绿色规模化生产和实现银杏叶资源的综合利用。
【IPC分类】A61K36/16
【公开号】CN104887723
【申请号】CN201510340067
【发明人】朱涛, 唐为扬
【申请人】天津理工大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月18日