一种基于聚酰胺聚电解质纳米胶束的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种生物可降解的基于聚酰胺聚电解质纳米胶束的制备方法，属于载 体与缓释材料技术领域。
【背景技术】
[0002] 聚电解质复合胶束是由两种带相反电荷的组分通过静电作用形成的，此类胶束的 一个突出优点是可以负载带电荷的药物、基因或酶，且制备条件温和简单。研究人员利用 聚电解质复合物能够直接或间接地参与生命体内一些复杂的生命活动过程的特点而在刺 激响应药物控释、细胞免疫隔离移植、多肽蛋白质药物的控释、基因治疗及人造疫苗等领域 进行了深入的研究并取得了重大进展，这对于聚电解质复合物的实用价值而言具有重要意 义。
[0003] 阿霉素是一种普通的抗癌化疗药物，对多种癌症具有明显疗效。但是阿霉素的毒 副作用也非常大。因此降低其毒副作用，增强疗效是研究中的一个难题。在目前大多数纳 米胶束药物载体的研究中，药物是通过与载体的物理相互作用或者共价连接方式进行负载 的，避免不了载药率和包封率低、药物泄露和控释困难的缺点。
[0004] 谷氨酸（Glu)具有反应性官能团多、来源比较丰富、价格相对低廉等优点，聚谷氨 酸链段含有悬挂羧基，具有与阳离子复合的功能。乳酸（LA)来源广泛，价格低廉，其聚合物 具有良好的生物相容性和降解性，降解产物能参与体内三羧酸循环而被生物体吸收。聚乙 二醇单甲醚具有良好的水溶性、润湿性、润滑性、生理惰性、对人体无刺激、温和。
[0005] 本发明首先设计和制备了一种基于聚酰胺聚电解质纳米胶束的制备方法，通过配 方的设计将聚谷氨酸分子引入共聚物，使共聚物侧链含有阴离子基团，从而能够有效地与 阿霉素分子中的氨基通过阴、阳离子的复合作用形成胶束，共聚物的疏水性链段与阿霉素 分子位于胶束的内核，外层由亲水性的mPEG保护胶束的稳定性，防止药物泄露。将该胶束 进行药物体外释放，具有载药量高、防止药物泄露和控制释放的特点。本发明制备方法简 单、不使用有机溶剂、胶束结构独特、控释性能好。
【发明内容】
[0006] 本发明目的是提供一种基于聚酰胺聚电解质纳米胶束作为药物载体的制备方法， 选用来源广泛、无毒无刺激、生物相容性好的谷氨酸、乳酸和聚乙二醇单甲醚。
[0007] 本发明的技术方案如下：
[0008] (1)含酰胺键聚电解质三元共聚物的合成：控制谷氨酸（Glu)、乳酸（LA)、mPEG 摩尔比为 1 5、1 :0. 5 :0. 5、1 :1 :0. 5、1 :2 :0. 5、1 :3 :0. 5,二水合氯化亚锡为催化剂， IKTC预聚3h，升温130°C，真空度维持0. 085Mpa，反应8h后停止加热，产物用乙醇溶解，过 滤除去未反应的谷氨酸，滤液在50°C减压蒸馏，产物用三氯甲烷溶解，无水乙醚沉淀，得淡 黄色粘稠液体，分别简称为 61^-1005、61^-10505、61^-1105、61^-1205、61^-1305，充分干燥 备用。
[0009] (2)载药胶束的制备：采用聚离子复合法制备载药胶束。将一定质量的 PGlu-c〇-PLA-c〇-mPEG(GLP-10505)溶于水，磁力搅拌至共聚物完全溶解，逐渐滴加阿霉素 水溶液，至溶液呈现红色且有明显的丁达尔现象时停止，随后继续搅拌24h使载药胶束稳 定。将载药胶束溶液转入截留分子量为3500的透析袋中，避光状态下在超纯水中透析8h。
[0010] 本发明的有益效果：
[0011] ①由于聚电解质三元共聚物中主链同时含有聚酰胺链段结构和聚酯链段结构，t匕 起单纯聚酯链段结构的聚合物，在水中降解性能减缓，大大提高了聚合物到稳定性，将其与 抗癌药物阿霉素进行复合后，所得纳米胶束稳定性增强，有利于纳米胶束在体内循环而不 至于出现药物泄露，提高药物的生物利用度。
[0012] ②本发明的含酰胺键聚电解质三元共聚物可用于药剂学领域中，方法为"一步 法"，简单方便，整个反应仅一步，较开环聚合法制备聚氨酯而言，避免了繁琐的合成步骤、 昂贵的单体和有机溶剂的使用，具有"绿色"反应的优点。
[0013] ③采用聚离子复合法制备载药胶束，步骤简单，以超纯水做为溶剂，无毒环保，特 别是药物参与胶束的形成，载药量包括形成胶束内核的药物和物理包裹的药物，不仅提高 了载药量，也保证了药物的稳定性，胶束具有PH值和盐浓度敏感性，从而使其具有优异的 载药和控释效果。
【附图说明】
[0014] 图1基于聚酰胺聚电解质与阿霉素复合纳米胶束的结构示意图。
[0015] 图2含酰胺键聚电解质三元共聚物PGlu-co-PLA-co-mPEG的的红外谱图。
[0016] 图3载药纳米胶束（GLP105-D0X)的SEM照片。
[0017] 图4载药纳米胶束（GLP105-D0X)在PBS缓冲液中药物释放曲线。a :pH=8. OPBS ; b :pH=7. 4PBS ;c :pH=7. OPBS ;d :pH=6. OPBS ;e :pH=5. OPBS。
【具体实施方式】
[0018] 以下结合实例对本发明进一步详细说明，但本发明并不局限于此。
[0019] 实施例1
[0020] 含酰胺键聚电解质三元共聚物的合成：将I. 5gL_谷氨酸、4gmPEG混合均匀，加入 0. 02g二水合氯化亚锡为催化剂，IKTC预聚3h，升温130°C，真空度维持0. 085Mpa，反应8h 后停止加热，产物用乙醇溶解，过滤除去未反应的谷氨酸，滤液在50°C减压蒸馏，产物用三 氯甲烷溶解，无水乙醚沉淀，得淡黄色粘稠液体，充分干燥备用。
[0021] 载药胶束的制备：采用聚离子复合法制备载药胶束。将0. 2g的 PGlu-C〇-PLA-C〇-mPEGG(LP105-D0X)溶于20g水，磁力搅拌至共聚物完全溶解，逐渐滴加阿 霉素水溶液，至溶液呈现红色且有明显的丁达尔现象时停止，随后继续搅拌24h使载药胶 束稳定。将载药胶束溶液转入截留分子量为3500的透析袋中，避光状态下在超纯水中透析 8h〇
[0022] 载药胶束在不同介质中的释放研究：将透析好的载药胶束取5mL于透析袋内，分 别置于250mL介质为0.0 lM pH为5. 0、6. 0、7. 0、7. 4、8. 0的磷酸盐缓冲溶液（PBS)中，与 37±0