狂犬病病毒免疫原的含佐剂制剂的利记博彩app
【专利说明】
[0001] 本申请还要求2012年3月7日提交的美国临时申请号61/607,975的权益，其全 部内容通过引用纳入本文W用于所有目的。
技术领域
[0002] 本发明设及狂犬病病毒疫苗的领域。
【背景技术】
[000引 RABIPUR产品（也称RABAVERT)是一种针对狂犬病病毒的人疫苗[1]。该疫苗中 的免疫原是灭活的狂犬病病毒。该病毒生长在纯化的鸡胚胎细胞（PCEC)上并使用0-丙 内醋灭活。根据世界卫生组织的要求，每个剂量包括至少2. 5IU灭活的狂犬病病毒（Flu巧 LEP毒株），且不含佐剂。疫苗W冻干粉末的形式提供，使用无菌水（1ml/剂量）进行重建 并随后通过肌肉内或皮内注射。其给药形式是；（i)作为暴露前疫苗用于有感染风险的人， 通常在3-4周期间给予3次剂量；（ii)作为暴露后疫苗，通常在3-4周期间给予4-5次剂 量；或（iii)作为加强疫苗，最初在较早的免疫后一年但之后每隔2-5年。对象还可接受抗 狂犬病免疫球蛋白（例如20IU的人抗狂犬病Ig)，尤其在严重的暴露后疫苗情形中。
[0004] 其他人狂犬病疫苗包括RABIVAC(由人双倍体细胞上生长的病毒制备）、 VAXIRAB(使用纯化的鸭胚胎细胞制备）和多种由vero细胞培养物上生长的病毒所制备的 产品（例如VER0RAB[2]、IM0VAX、C肥NGDA)。该些疫苗通常W与RABIPUR产品类似的方法 使用，例如使用0-丙内醋灭活VER0RAB、制备成冻干物并W不含佐剂的形式进行给药，且 其暴露前、暴露后和增强方案与RABIPUR类似。
[0005] 已使用氨氧化侣作为牛疫苗的佐剂，含或不含阿夫立定巧]，且基于狂犬病病毒糖 蛋白，用于动物使用的RABISIN包括每剂量1. 7mg的氨氧化侣，但人狂犬病疫苗通常是不含 佐剂的。来自领英公司炬Co巧oration)的RVA人疫苗吸附至侣盐佐剂[4]，但参考 文献[引对人狂犬病疫苗是否应包含侣佐剂提出了疑问并发现引入佐剂不会产生优势。因 此，作者推荐应将基于侣的佐剂从用于人的狂犬病疫苗中除去。
【发明内容】
[0006] 本发明的一个目的是提供其他和改良的适用于人的狂犬病疫苗，尤其是提供能够 克服现有疫苗中困难的疫苗。
[0007] 现有的人疫苗的一个问题是人们没有认识到在数周的时期内需要多次剂量。对于 暴露前使用，人们通常在暴露风险前少于4周时（例如出国旅行前少于4周时）开始疫苗 方案，所W全部的方案是不完整的。对于暴露后使用，人们通常不完成全部的方案，尤其是5 剂量方案。因此，在该些情况下，患者没有获得疫苗的全部益处，且无法得到针对狂犬病的 保护。
[000引 目前的疫苗的另一个问题是其没有给予长时间持续的保护，因此每隔5年左右需 要进行加强。
[0009] 此外，狂犬病疫苗的可靠供应能力是有限的，例如在2008年末美国出现了严重的 供应短缺。
[0010] 最后，现有的疫苗具有相对高水平的残留抗生素，虽然该些抗生素是安全的，但按 照一般的产品纯度来说它们是不需要的。
[0011] 发明人意识到所有该些问题均可通过使用适当含佐剂疫苗解决。一些佐剂能够提 供较高的免疫效价，并可较快地达到，从而W较少的剂量在较短的时间尺度上给予良好的 保护。类似地，佐剂可提供长时间持续的反应，从而避免频繁增强的需要。最后，佐剂的使 用可提供一种具有相同免疫原性但包括较少抗原的疫苗，从而在病毒量固定的情况下提供 较多的单个剂量，还使得最终疫苗中使用较少的抗生素。
[0012] 为达到该些目的，可使用TLR激动剂和不溶性金属盐的混合物作为狂犬病疫苗的 佐剂。化R激动剂通常吸附至金属盐，如参考文献6中所公开的，且狂犬病病毒抗原也可吸 附至金属盐。
[0013] 因此，本发明提供了一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、 (ii)TLR激动剂和（iii)狂犬病病毒免疫原。所述组合物优选具有一种或多种W下特征：
[0014] -所述金属盐是侣盐，如氨氧化侣。
[0015] -所述TLR激动剂和化R7激动剂，且在理想情况下是人化R7的激动剂。
[0016] -所述TLR激动剂吸附至所述不溶性金属盐，理想情况下吸附有至少50%的化R 激动剂。
[0017] -所述TLR激动剂和狂犬病免疫原均吸附至所述金属盐，理想情况下吸附有至少 50 %的TLR激动剂和至少50 %的免疫原。
[0018] -所述TLR激动剂是本文中式、'的化合物，且理想情况下是化合物、2'或其药 学上可接受的盐。
[0019] -所述组合物未冻干，且不是通过冻干物的水性重建制备的。
[0020] -所述组合物W水性形式制备W用于分配。
[002U -所述组合物不包括二糖（如庶糖），或二糖（如庶糖）含量小于20mg/ml。
[0022] -所述组合物不含聚明胶肤（一种脈和多肤（来源于降解的明胶）的交联聚合 物）。
[0023] -所述组合物不含新霉素、金霉素和/或两性霉素B中的至少一种，并优选不含抗 生素。
[0024] -所述组合物每单位剂量包括低于2. 5IU，例如对于0. 5ml的剂量体积低于5IU/ ml,或对于1ml的剂量体积低于2. 5IU/ml。
[0025] -所述组合物W快速给药方案给予，如下文所讨论的。
[0026] -所述组合物W 0. 05至0. 9ml的剂量体积给药，例如0. 1ml或0. 5ml的剂量体积。
[0027] -所述组合物的渗透压为200m0sm/kg至400m0sm/kg，
[002引-所述组合物不包括人白蛋白。
[0029] -所述狂犬病病毒免疫原在Vero或MRC-5中生产。
[0030] 例如，本发明提供了：
[0031] - 一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、（ii)人化R7激动剂 和（iii)狂犬病病毒免疫原。
[0032] - 一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性侣盐、（ii)化R7激动剂和 (iii)狂犬病病毒免疫原。
[0033] - 一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)氨氧化侣佐剂、（ii)吸附至氨氧化侣 的化合物、2'或其药学上可接受的盐和（iii)灭活的狂犬病病毒。
[0034] 本发明还提供了一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、（ii) TLR激动剂和（iii)狂犬病病毒免疫原，所述组合物的pH为6至8。
[0035] 本发明还提供了一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、（ii) TLR激动剂、（iii)狂犬病病毒免疫原和（iv)抑缓冲液，例如其地a范围为5至9。
[0036] 本发明还提供了一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、（ii) TLR激动剂和（iii)狂犬病病毒免疫原，所述组合物不含抗生素。
[0037] 本发明还提供了一种免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金属盐、（ii) TLR激动剂和（iii)狂犬病病毒免疫原，浓度低于5IU/ml，例如浓度低于2. 5IU/ml。
[003引本发明还提供了一种单位剂型的免疫原性组合物，所述组合物包括（i)不溶性金 属盐、（ii) TLR激动剂和（iii)狂犬病病毒免疫原，狂犬病病毒免疫原的浓度低于2. 5IU/单 位剂量。
[0039] 本发明还提供了一种制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括混合不溶性金属 盐、TLR激动剂和狂犬病病毒疫苗。所述方法可提供上文所述免疫原性组合物。
[0040] 本发明还提供了一种制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括W下步骤之一： (i)将狂犬病病毒免疫原和包含TLR激动剂与不溶性金属盐的混合物合并；（ii)将不溶性 金属盐和包含TLR激动剂与狂犬病病毒免疫原的混合物合并；或（iii)将TLR激动剂和包 含不溶性金属盐与狂犬病病毒免疫原的混合物合并。
[0041] 本发明也提供