一种穿山龙总皂苷的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药提取分离领域，具体而言，涉及本发明公开了一种穿山龙总皂苷的制备方法。
【背景技术】
[0002]穿山龙是我国传统中药，为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物穿龙薯蓣的根茎，主治风湿痹证，腰腿疼痛，劳损扭伤。主要含薯蓣皂甙(d1scin)等多种留体皂甙，近几年研究发现其具有调节机体免疫、改善心脑血管、抗变态、抗风湿、止咳祛痰等作用，其甙元为合成副肾皮质激素及口服液或注射液避孕的主要原料，其提取物市场需求较大，但是其提取物仅为穿山龙的粗提取，皂苷或苷元含量较低，质量不稳定，而且因为技术等条件限制，能耗损耗大，无合理的质量标准，无法进入国际市场。
[0003]发明人结合穿山龙主要成分的理化性质，通过大量的实验，成功研制了研制一种穿山龙提取物并摸索出其合理的制备参数。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是一种穿山龙总皂苷的制备方法。
[0005]本发明目的是通过以下实现:
[0006]穿山龙药材加10倍量65%的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于Ig药材)。
[0007]将10g DlOl大孔树脂置于径高比1:10_1:4的分离柱中，取60ml_120ml的浓缩液经树脂吸附后，以3-5倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时I倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以4-6倍柱床体积的65%乙醇，采用每小时2倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65°C减压干燥，粉碎即得。
【附图说明】
[0008]图1为采用本工艺制备的穿山龙总皂苷的高效液相色谱图谱
【具体实施方式】
[0009]为更好的理解本发明，下面通过具体的实施例进一步阐述本发明，但不应被理解为对本发明有任何的限制。
[0010]实施例1:穿山龙药材加10倍量65%的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于Ig药材)。将10g DlOl大孔树脂置于径高比I:8的分离柱中，取80ml的浓缩液经树脂吸附后，以4倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时I倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以5倍柱床体积的65%乙醇，采用每小时2倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65 °C减压干燥，粉碎即得。
[0011]样品质量评价:
[0012](I)参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法测定样品中薯蓣皂苷含量，检测条件如下:检测波长:203nm ;流速:1ml / min ;乙腈-水(55:45)为流动相。
[0013]对照品溶液的制备:取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.3mg的溶液，即得。
[0014]供试品溶液的制备:取本品约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入65%乙醇250ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率40kHz) 20分钟，放冷，称定重量，用65%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0015]参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法，精密量取10μ 1，分别注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量，平行测定薯蓣皂苷含量为12.2%，RSD=2.1%，说明工艺稳定可行。
[0016](2)采用紫外法对穿山龙提取物中总皂苷进行检测，实验方法如下:
[0017]对照品溶液的制备:取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.1mg的溶液，即得。
[0018]供试品溶液的制备:精密量取样品适量，加65%乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。
[0019]测定方法:精密吸取对照品溶液l、5ml，供试品溶液1ml，置具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别精密加入高氯酸10ml，于60°C水浴加热15min，冰水终止反应，随行试剂做空白，于406nm处测定吸光度，采用外标两点法测定并计算穿山龙总皂苷含量，平行测定总皂苷含量为67.3%, RSD=2.5%，说明工艺稳定可行。
[0020]实施例2:穿山龙药材加10倍量65%的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于Ig药材)。将10g DlOl大孔树脂置于径高比1:6的分离柱中，取10ml的浓缩液经树脂吸附后，以4倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时I倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以4倍柱床体积的65%乙醇，采用每小时I倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65 °C减压干燥，粉碎即得。
[0021]样品质量评价:
[0022](I)参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法测定样品中薯蓣皂苷含量，检测条件如下:检测波长:203nm ;流速:1ml / min ;乙腈-水(55:45)为流动相。
[0023]对照品溶液的制备:取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.3mg的溶液，即得。
[0024]供试品溶液的制备:取本品约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入65%乙醇250ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率40kHz) 20分钟，放冷，称定重量，用65%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0025]参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法，精密量取10μ 1，分别注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量，平行测定薯蓣皂苷含量为10.9%，RSD=L 7%，说明工艺稳定可行。
[0026](2)采用紫外法对穿山龙提取物中总皂苷进行检测，实验方法如下:
[0027]对照品溶液的制备:取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.1mg的溶液，即得。
[0028]供试品溶液的制备:精密量取样品适量，加65%乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。
[0029]测定方法:精密吸取对照品溶液l、5ml，供试品溶液1ml，置具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别精密加入高氯酸10ml，于60°C水浴加热15min，冰水终止反应，随行试剂做空白，于406nm处测定吸光度，采用外标两点法测定并计算穿山龙总皂苷含量，平行测定总皂苷含量为63.1%，RSD=2.2 %，说明工艺稳定可行。
【主权项】
1.一种穿山龙总皂苷的制备方法，其特点在于，经过以下步骤制成: (1)提取:穿山龙药材加10倍量65%的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于Ig药材)。 (2)分离:将10gDlOl大孔树脂置于径高比I:10-1:4的分离柱中，取60ml_120ml的浓缩液经树脂吸附后，以3-5倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时I倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液,再以4-6倍柱床体积的65%乙醇，采用每小时2倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65 °C减压干燥，粉碎即得。
【专利摘要】本发明公开了一种穿山龙总皂苷的制备方法，属于天然药物的有效成分提取分离领域。其特点在于：穿山龙药材加65％的乙醇提取，提取液回收乙醇，浓缩，浓缩液过D101大孔树脂吸附、分离总皂苷，经干燥，粉碎制成干粉。优点在于：制备过程中以水和乙醇为溶剂，可回收，无污染，操作简单可行，适合于工业大生产，提取物纯度可达到60％以上，可作为食品，药品或化工等方面原料。
【IPC分类】A61K125-00, A61K36-8945
【公开号】CN104547404
【申请号】CN201310478272
【发明人】高文学, 张芳, 于晓, 刁兴斌, 王海燕
【申请人】高文学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年10月14日