顽固性癫痫的治疗剂或预防剂的利记博彩app

专利名称：顽固性癫痫的治疗剂或预防剂的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及顽固性癫痫的治疗或预防剂，除了其它癫痫以外，顽固性癫痫是难以用现有抗癫痫剂预防或治疗的。
背景技术：
癫痫是慢性脑部疾病，其中癫痫发作是主要特征。一般来说，大多数癫痫和与之有关的疾病是难以治疗的，因为癫痫在病因学上尚未得到阐明。因此，抗癫痫剂给药是常见的抑制癫痫发作或抑制局灶性癫痫发作向其它部位传播的方法。
目前，在日本可以得到十余种类型的抗癫痫剂。不过，很多不同的顽固性癫痫不能成功地被抗癫痫剂所抑制，包括所谓的“耐受治疗”的癫痫发作和病例，尽管对癫痫发作具有令人满意的抑制作用，然而由于副作用而不能实现药物顺应性。因此对抗癫痫剂仍然存在需求，它应比现有抗癫痫剂更为有效，并且表现出较少的严重副作用(参见“抗癫痫剂的作用机理”《临床精神病学病程》(Clinical Psychiatry Courses)Nakayama-Shoten,Akira TAKAZAWA等著)。
因此，本发明的目的是提供对顽固性癫痫或与之有关的发作有效的药物，对此，现有抗癫痫剂还没有表现出令人满意的功效。
发明的公开本发明人进行了广泛研究，已经发现，由式(Ⅰ)代表的吡咯烷基烷基羧酸酰胺衍生物充当有效治疗或预防顽固性癫痫的药物。在此发现的基础上完成了本发明。
因此，本发明提供顽固性癫痫或与之有关的发作的治疗或预防剂，包含由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)
其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
本发明也提供限制与癫痫有关的运动性发作(在癫痫症状的持续时间方面)的抑制剂；癫痫发作传播的抑制剂；和具有升高癫痫发作感应阈值功能的治疗或预防剂，上述三种类型试剂各自包含由式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分。本发明提供由式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物用于制备顽固性癫痫或与之有关的发作的治疗或预防剂的用途。
本发明也提供由式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物的下列用途用于制备限制与癫痫有关的运动性发作(在癫痫症状的持续时间方面)的抑制剂；癫痫发作传播的抑制剂；和具有升高癫痫发作感应阈功能的治疗或预防剂。
本发明提供用于治疗顽固性癫痫或与之有关的发作的方法，该方法是将由式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药。
本发明也提供抑制与癫痫有关的运动性发作(在癫痫症状的持续时间方面)的治疗方法；预防癫痫发作传播的治疗方法；和涉及升高癫痫发作感应阈的功能的治疗癫痫的方法，该方法是将由式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药。
实施发明的最佳方式下面将描述式(Ⅰ)中的取代基。R1代表吡啶基、取代的吡啶基、苯基或取代的苯基。其中，苯基或取代的苯基是R1所优选的。苯基的一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基、卤原子和羟基。其中，甲基和羟基是优选的。此外，两个甲基或两个甲基与一个羟基的组合是优选的，优选的取代位置是苯基的2-和6-位。因此，2,6-二甲基苯基是特别优选的。吡啶基的一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、C1-C3烷基、酰基等。
R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基。一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、C1-C3烷基和羟基。其中，羟基取代的2-氧代吡咯烷基和2-氧代吡咯烷基是特别优选的。
由式(Ⅰ)代表的化合物的典型例子是N-(2,6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺(通用名奈非西坦)、它的盐和该化合物或盐的水合物。
制备奈非西坦的方法已经公开在日本专利申请未审公开56-2960、61-280470和6-65197中。
奈非西坦的药物用途例如脑血管性痴呆改善剂(日本专利申请未审公开56-163145)、阿耳茨海默型痴呆改善剂(日本专利申请未审公开5-163144)或线粒体膜稳定剂(日本专利申请号8-260649)。奈非西坦的作用机理部分地公开在日本专利申请号9-249131中。
有人已经通过采用EL小鼠作为模型的试验研究了奈非西坦所具有的抗癫痫作用，指出其具有作为抗癫痫剂的潜在用途(日本神经科学会第17次大会，3i,1993；神经科学会第23次大会，1993,11；和神经科学会第26次大会，1996年11月16日，华盛顿特区)。
上述报道中采用EL小鼠进行试验的癫痫模型是由通过突变所形成先天遗传因素导致的癫痫模型。该模型表现出知觉唤起的癫痫发作的继发性普遍化和强直性或阵挛性惊厥后的昏厥。模型的脑电图显示出相应于上述状态的特征变化。另外，癫痫模型是遗传性模型，从而可用于研究由遗传因素诱发的癫痫状态。
不过，尽管通过小剂量给药易于达到抑制EL小鼠癫痫的功效，临床上也没有定义相当于EL小鼠模型的人癫痫类型。因此，即使功效经过EL小鼠证实的药物也不总是在临床上对人有效。特别是由于药物对人顽固性癫痫的临床效果仍然涉及未知的问题，该模型不适合评价临床效果前景。
鉴于上述，本发明人进行了认真的研究，发现由式(Ⅰ)代表的化合物不仅抑制局灶性癫痫模型的局灶性癫痫发作，而且抑制利用常规治疗剂难以治疗的继发性全身发作。因此，本发明的目的是提供局灶性癫痫的抑制剂；继发性普遍化(全身化)的抑制剂；和顽固性癫痫的治疗或预防剂。
因此，本发明涉及顽固性癫痫的治疗或预防剂。首先，下面将给出“顽固性癫痫”的解释。
顽固性癫痫的特征包括1)频繁发生部分发作，继之以全身发作(特别是颞叶性癫痫)；2)频繁发生由脑中器质性损害导致的症状性癫痫；3)从开始发病到接受专家会诊长期缺少治疗，频繁发生癫痫发作；和4)频繁发生既往癫痫持续状态。换句话说，颞叶可能是引起脑中顽固性癫痫的部分。有人指出，由于性质发生变化和随着后天性癫痫的反复，癫痫变得更加顽固。
顽固性癫痫分为三种临床类型，即(a)与定位有关的癫痫和综合征、(b)全身性癫痫和综合征、和(c)不确定的癫痫和综合征，既有局灶性也有全身性。
(a)与定位有关的癫痫和综合征的例子包括颞叶性癫痫、额叶性癫痫和多叶性癫痫。颞叶性癫痫和额叶性癫痫是顽固性癫痫的典型例子。多叶性癫痫被认为是由两叶或多叶导致的。
(b)全身性癫痫和综合征的例子包括Lennox-Gastaut综合征(伦-格综合症)、West综合征(婴儿痉挛)和肌阵挛性癫痫。
(c)既有局灶性也有全身性的不确定的癫痫和综合征的例子包括严重的婴儿期肌阵挛性癫痫，表现出多种癫痫发作类型。特别是强直性-阵挛性癫痫发作频繁地发生，从而常常导致癫痫持续状态。因此迫切需要由癫痫专家进行特殊治疗(Masako WATANABE等《医学进展》(Igakuno Ayumi)183(1):103-108,1997)。
与顽固性癫痫有关的发作分为多种类型，例如强直性癫痫发作、强直性-阵挛性癫痫发作、非典型癫痫小发作、无力性(张力缺乏性)癫痫发作、肌阵挛性癫痫发作、阵挛性癫痫发作、简单部分发作、复杂部分发作和继发性全身发作。其中，关于强直性癫痫发作和无力性癫痫发作，必须对因跌倒导致的损伤加以注意。
另外，复杂(复合，complex)部分发作可能在意识混乱过程中导致由行为引起的事故。顽固性癫痫中，与颞叶性癫痫和额叶性癫痫有关的“复杂部分发作”在成人中发生的频率相当高。尽管所述癫痫发作在儿童中发生的频率较低，不过与成人的情况一样，该癫痫发作也是顽固性的(《癫痫学进展》No.2,Haruo AKIMOTO和Toshio YAMAUCHI,Iwanami Gakujutsu Shuppan,1991,p51-85)。
本说明书中，术语“顽固性癫痫”指癫痫或与之有关的发作，相当于下列四种癫痫或与之有关的发作(1)难以治疗的癫痫，其中对与之有关的发作的抑制作用不能通过常规的药物治疗加以控制(Masako WATANABE等《医学进展》183(1):103-108,1997)；(2)相当于下列(a)至(c)的癫痫(a)与定位有关的癫痫，例如颞叶性癫痫和皮质性癫痫；(b)全身性癫痫和综合征，例如Lennox-Gastaut综合征、West综合征和肌阵挛性癫痫；和(c)不确定的癫痫和综合征，既有局灶性也有全身性，例如严重的婴儿期肌阵挛性癫痫；(3)与上述顽固性癫痫有关的发作，包括强直性癫痫发作、强直性-阵挛性癫痫发作、非典型癫痫小发作、无力性癫痫发作、肌阵挛性癫痫发作、阵挛性癫痫发作、简单部分发作、复杂部分发作和继发性全身发作；和(4)例如下述的癫痫，脑手术后癫痫、外伤性癫痫和癫痫手术后的复发性癫痫。
本发明的抗癫痫剂对上述四种类型顽固性癫痫有效。其中，本发明的抗癫痫剂特别对下列癫痫有效相当于(2)(a)的与定位有关的癫痫；相当于(3)的癫痫，例如继发性全身发作、复杂部分发作，和癫痫持续状态；和相当于(4)的脑手术后癫痫、外伤性癫痫和癫痫手术后的复发性癫痫。本发明的抗癫痫剂可能对诸如与定位有关的癫痫、颞叶性癫痫和皮质性癫痫等癫痫具有优异的效果。
下面将描述“颞叶性癫痫”，它是顽固性癫痫的一种类型。
颞叶性癫痫是病灶在颞叶的癫痫，根据癫痫的国际分类，分为症状性癫痫和与定位有关的癫痫，后者也包括额叶性癫痫、顶叶性癫痫和枕叶性癫痫。
颞叶性癫痫综合征因病灶所局限的部位和癫痫发作传播的类型而异，原因在于颞叶具有复杂的解剖学结构，包括新皮质、异形皮质和旧皮质。颞叶性癫痫以前被定义为精神运动性癫痫发作，主要导致如临床上所观察到的复杂部分发作，也导致简单部分发作、继发性全身发作和它们的组合。
简单部分发作包括自主与精神症状和感觉症状，例如嗅觉、听觉或视觉，有时伴发体验症状，例如似曾相识和旧事如新症。复杂部分发作常常表现出运动停止，继之以进食机能的无意识行为，根据定位分为杏仁核-海马体性癫痫发作和侧颞叶性癫痫发作。在颞叶性癫痫的情况下，70-80％的癫痫发作都是海马体性癫痫发作，其中先兆、运动停止、唇的无意识行为和意识模糊连续发展成记忆缺失。当病灶在杏仁核时，导致自主症状，例如上腹部不适；恐怖；和嗅幻觉。侧颞叶性癫痫发作包括听错觉、幻觉和梦样癫痫，当病灶在优势半球时导致语言障碍。除了其它症状以外，颞叶性癫痫表现出长期精神病样状态，认知和记忆机能紊乱比其它癫痫更频繁(南山堂《医学词典》(Nanzando))。颞叶性癫痫的治疗采用最大剂量的药物组合的药物疗法，或者采用手术治疗。
下面将描述“皮质性癫痫”，它是顽固性癫痫的一种。皮质性癫痫是病灶在脑皮质的癫痫，在国际癫痫分类中分为属于与定位有关的(局灶性)癫痫的症状性癫痫和综合征。在国际分类中，与皮质性癫痫有关的发作分为简单部分发作，它是没有意识减退的部分发作。因此，在与皮质性癫痫有关的发作过程中所作的脑电图(不总是在头皮上记录)表现出来自相应皮质区域的局部化对侧放电。与皮质性癫痫有关的发作对全部与癫痫有关的发作的比例为大约15％，其中的2/3是局灶性运动性癫痫发作，包括杰克逊氏癫痫发作(Wada等)。皮质性癫痫主要是由脑肿瘤、脑外伤后果等导致的；或由围产期损害导致的(南山堂《医学词典》)。皮质性癫痫按病灶分为颞叶性癫痫、顶叶性癫痫或枕叶性癫痫。
下面将描述“外伤性癫痫”，它是顽固性癫痫的一种。
外伤性癫痫在广义上分为两种癫痫，即“早期癫痫”和“晚期癫痫”。由遭受外伤后一周内惊厥诱发的脑刺激导致“早期癫痫”，不是真正的癫痫。相形之下，“晚期癫痫”是真正的癫痫，是在遭受外伤后一或数周导致的。日本每年产生100,000-200,000名外伤性癫痫患者(ShinyaMANAKA《急救医疗》(Kyukyu Iryo)17:1076-1077)。
大多数外伤性癫痫是因在皮质外伤部位形成病灶而导致的，它们被认为是典型的部分性癫痫的例子。因此，它的治疗主要基于一般为癫痫治疗所采用的药物疗法。不过，由于个体症状的开始和过程是不同的，在很多情况下因抗癫痫剂的给药而变成顽固性癫痫，该报道见于《日本灾害医学会》，32(6):453-460,1984。同时，现有顽固性症状已经采用手术治疗，其中癫痫发作是难以控制的(Yoshifumi MATSUMOTO《神经外伤学》17:101-106,1994)。
下面将描述“继发性全身发作”，它是一种与顽固性癫痫有关的症状。
继发性全身发作是部分发作的一种类型，它表现出临床综合征，脑电图特征观测到神经元兴奋，说明癫痫发作开始于一个脑半球的有限部位。
继发性全身发作是从简单部分发作(没有意识丧失)或复杂部分发作(有意识丧失)开始的，通过继发性普遍化发展成一般性惊厥。它的主要症状是惊厥，例如强直性-阵挛性癫痫发作、强直性癫痫发作或阵挛性癫痫发作(Kazuyoshi WATANABE，第22次Nou-no医学生物学研究会(Igaku Seibutsugaku Kenkyuukai),1997.1.18)。
下面将描述“复杂部分发作”，它是一种与顽固性癫痫有关的症状。
复杂部分发作指有意识丧失的部分发作，类似于习惯上被称为精神运动性癫痫发作的癫痫发作或与颞叶性癫痫有关的发作。在国际分类草案(198D中，将复杂部分发作定义为“有意识丧失的癫痫发作，在癫痫发作过程中的脑电图表现归属于扩散部位或颞侧或颞前部位的单侧或双侧放电”。
实际上，引起上述类型癫痫发作的神经结构被认为除了额叶和颞叶以外，还包括杏仁核、海马体、下丘脑、嗅旁皮质(parolfactorycortex)等。癫痫发作通常持续1-2分钟或稍长时间，癫痫发作的开始和停止不是突然的，而是渐进的。复杂部分发作的例子包括(1)有意识减退的癫痫发作(逐渐发展为意识丧失、运动、语言和反应停止和记忆缺失)；(2)认知性癫痫发作(似曾相识、旧事如新症、意想性癫痫发作)；(3)情感性癫痫发作(恐惧、愤怒、空虚、奇异、高兴、欢喜)；(4)精神感觉性癫痫发作(幻觉；视觉、听觉、味觉、嗅觉、存在感觉)；和(5)精神运动性癫痫发作(无意识行为、舔唇、咀嚼、刻板症)。癫痫发作主要开始于10-25岁，不过在任何年龄段都可以观察到(《癫痫》Nihon Bunkakagaku-sha,49-51,1996,Haruo AKIMOTO编辑)。
下面将描述“癫痫持续状态”，它是顽固性癫痫的一种。
在癫痫持续状态中，在长达30分钟或更长时间或反复的与癫痫有关的发作过程中，意识是不可恢复的。任何类型的癫痫发作都可能发展为癫痫持续状态。最常见的情况是强直性-阵挛性癫痫发作，这种癫痫持续状态是致命的，必须立即治疗。在很多情况下，抗癫痫剂的停药会诱发癫痫持续状态。因此，在将抗癫痫剂静脉内给药的同时，还要监测和控制中枢神经系统机能紊乱和全身条件，对其原因和治疗进行阐明(南山堂《医学词典》)。由于癫痫持续状态惊厥已知可导致顽固性癫痫，需要对癫痫持续状态惊厥的诊断和急救采取立即和适当的行动。在早期阶段抑制惊厥发作，是病后调养的重要关键(Teruyuki OGAWA《临床儿科学》(Clinical Pediatrics)47(12):2673-2681,1994)。
人顽固性癫痫的临床模型是利用动物建立的。这样的动物模型的例子包括“诱发(kindling)模型”和“由红藻氨酸诱导的癫痫发作”。
下面将描述充当顽固性癫痫模型的“诱发模型”。当以一定时间间隔对脑中某个部位反复施加弱电刺激时，观测到部分发作发展为全身发作。这种现象称为诱发。癫痫起源是在脑中形成的，刺激停止后，诱发仍持续较长时间，有时导致自发的癫痫发作。尽管诱发是长期现象，不过没有发现脑有大规模的形态学变化。因此，诱发模型充当典型的癫痫实验模型，在该模型中，脑中非特异性癫痫起源不涉及组织损害，并且持续较长时间。利用这样一种模型，能够研究涉及顽固性癫痫的获得性癫痫起源的增强过程，并且能够对特定病理阶段进行研究，例如癫痫发作的开始、延续和停止；癫痫发作后阶段；和癫痫不发作的阶段(Mitsumoto SATO第22次医学生物学研究会(Igaku SeibutsugakuKenkyunkai)，演讲摘要，1997.1.18)。
从诱发模型可以产生各种癫痫模型，其中刺激部位是可选择的。最敏感的部分是杏仁核，当用后放电阈(最小刺激强度)反复刺激时(一般为每天一次)，表现出如下的癫痫发作阶段第1阶段(咀嚼)；第2阶段(点头)；第3阶段(前肢阵挛)；第4阶段(后仰)；和第5阶段(后仰和跌倒)。第1和2阶段相当于人颞叶性癫痫的复杂部分发作，第3至5阶段被认为是继发性全身性癫痫的阶段。第5阶段被视为诱发的建立阶段。一旦诱发建立起来，对电刺激的敏感性几乎保持终生。
诱发与人癫痫的相似之处不仅在于癫痫发作症状，而且在于抗癫痫剂的作用评价等。因此，诱发是理解癫痫现象的有用手段。利用病灶在边缘系统或皮质的诱发模型，可以确保各种现象，例如对部分发作的作用；对从部分发作向继发性全身发作发展的阶段的作用；它们的作用机理(例如致癫痫的获得作用和涉及边缘系统中癫痫发作普遍化的神经结构)；和对临床症状的作用。药物在诱发发展过程中针对建立全身发作的作用被称为“预防作用”，它是通过药物对获得致癫痫的预防作用而进行评价的。药物在建立全身发作后涉及反复刺激的诱发发展过程中的作用被称为“治疗作用”(Juhn.A.Wada,Mitsumoto SATO和KiyoshiMORIMOTO《利用诱发模型研究癫痫的神经科学机理》p225-241,1993)。因此，诱发模型是已知的耐受治疗的颞叶性癫痫的优异动物模型，伴有人的复杂部分发作、继发性全身发作。
本发明人研究了奈非西坦对杏仁样诱发性癫痫发作的发展过程的作用和对通过下述方法建立诱发的作用，测定了奈非西坦的功效。利用大鼠进行诱发的评价过程，将电极置于杏仁核内，为了恢复，以特定时间间隔施加诱发刺激(50Hz正弦波，持续1秒，每天一次)。第一天，在不给药的情况下测定后放电激发阈。从第二天开始，对已按不同剂量方案给药的大鼠施加强度为后放电激发阈的诱发刺激，从而研究给药方案对诱发的发展过程的作用。
在这样的条件下采用奈非西坦作为给药方案，能够研究奈非西坦对下列参数的作用，例如在杏仁核诱发的癫痫发作传播过程中杏仁核被刺激一侧上的癫痫发作阶段和后放电持续时间。
研究结果揭示，180mg/kg奈非西坦给药组大鼠包括很多没有达到第5阶段的大鼠，即使延长后放电时间也是如此，而90mg/kg奈非西坦给药组大鼠表现出对稳定诱发第5阶段的抑制作用。尽管通常“后放电阈”预期会随着诱发的发展而显著降低，不过大约有一半的90mg/kg奈非西坦给药大鼠在第3阶段至第5阶段过程中表现出后放电阈的突然升高。
下面，研究奈非西坦在癫痫发作阶段、后放电持续时间和运动性癫痫发作持续时间方面对建立杏仁核诱发性癫痫发作的作用。为了进一步区分对药物的反应，所用诱发刺激强度是全身发作阈(GST)的1-3倍，在GST下，稳定不变地发展为第5阶段。
研究结果揭示，奈非西坦(120mg/kg)给药在刺激强度等于GST时，对全部参数表现出强烈而显著的抑制作用。在刺激强度等于2倍GST组大鼠中，涉及后放电持续时间的参数恢复至未给药的水平，癫痫发作阶段和运动性癫痫发作持续时间都显著被抑制了。在刺激强度等于3倍GST组大鼠中，后放电持续时间得以恢复，还证实存在癫痫发作阶段和运动性癫痫发作持续时间恢复的趋势。
如上所述，奈非西坦的作用取决于刺激强度。因此，对诱发性癫痫发作的抑制作用涉及两个因素；即癫痫发作诱发部位的后放电阈升高和对癫痫发作向整个脑部传播的抑制作用。
由式(Ⅰ)代表的化合物的抗癫痫作用是利用另一种模型加以研究的，即充当顽固性癫痫模型的“由红藻氨酸诱发的癫痫发作(红藻氨酸盐模型)”。红藻氨酸盐模型是这样一种癫痫模型，其中将红藻氨酸微量注射到边缘系统(limbic system)核(杏仁核、海马体等)内，从而诱发局灶性癫痫，红藻氨酸是在脑中发现的兴奋性氨基酸之一。红藻氨酸盐模型充当癫痫发作的模型；更确切地说，充当由边缘系统诱发的癫痫持续状态的急性期模型，和自发性边缘发作向继发性全身发作发展的慢性期模型。因此，红藻氨酸盐模型被视为顽固性癫痫模型。另外，该模型也被用作顽固性人颞叶性癫痫模型，因为该模型满足下列条件(a)边缘系统组织(杏仁核、海马体等)内存在癫痫病灶；(b)等价于海马体硬化的组织变化；(c)自发性复杂部分发作(边缘系统性发作)的反复和连续形成；和(d)常规药物没有治疗作用(Tatsuya TANAKA编辑《癫痫研究前沿》(Frontier of Epileptic Research)p14,1994，第1次日本冬季脑研究大会，生命科学出版社)。通过将红藻氨酸注射到皮质(感觉运动区)中，红藻氨酸盐模型也可用作皮质性癫痫模型。此外，由于癫痫发作过程中的局部血流增加，因此可以利用该模型，通过放射自显影法研究边缘系统癫痫持续状态过程中的葡萄糖代谢与局部脑血流之间的相互关系，还可以研究癫痫发作对细胞损害的作用。
尽管红藻氨酸盐模型中癫痫发作形成的机理还没有得到完全阐明，仍有人提出了下列机理。也就是说，所提出的机理包括(a)由于红藻氨酸盐与谷氨酸盐受体结合，引起谷氨酸盐的异常蓄积，诱发连续的癫痫刺激；(b)红藻氨酸盐与从前突触末端释放的谷氨酸盐的协同作用；和(c)由于突触前部位中所含有的红藻氨酸盐受体的刺激作用，引起中毒量谷氨酸盐或天冬氨酸盐的释放(Tatsuya TANAKA编辑《癫痫研究前沿》p18,1994，第1次日本冬季脑研究大会，生命科学出版社)。
关于临床癫痫症状，红藻氨酸盐模型相当于顽固性颞叶性癫痫模型(注射到杏仁核或海马体中)和顽固性皮质性癫痫模型(注射到感觉运动区中)(Tatsuya TANAKA《BIO Clinica》11(9),695-697)。
通过将奈非西坦注射到红藻氨酸盐模型大鼠中，证实了其优异的抗癫痫作用，其中红藻氨酸盐模型是顽固性癫痫模型的一种。大剂量奈非西坦在临床上既抑制红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作，也抑制皮质性局灶性癫痫发作，在脑电图中观测到了该抑制作用。对皮质性局灶性癫痫发作的抑制作用程度更强。完全相同的红藻氨酸盐模型证实，奈非西坦给药抑制脑中代谢亢进和癫痫发作从病灶传播。抑制作用在皮质中更强。由于奈非西坦剂量依赖性地抑制与癫痫发作传播有关的代谢亢进，因此奈非西坦的癫痫发作抑制机理是基于对癫痫发作传播的抑制作用的。此外，上述作用相当于主要在皮质内的脑葡萄糖代谢的抑制作用，因为奈非西坦对大鼠表现出镇静作用。
红藻氨酸是一种强烈的神经兴奋性氨基酸，已知它通过系统给药或脑局部给药诱发惊厥发作。将红藻氨酸微量注射到诸如猫或大鼠等动物杏仁体的一侧，诱发急性期边缘系统性癫痫的癫痫持续状态和慢性期自发性边缘系统性癫痫发作，从而实现类似于人颞叶性癫痫的癫痫模型。红藻氨酸盐诱发的急性期杏仁核性癫痫发作的癫痫持续状态是非常严重的，在已知的抗癫痫剂中，只有高浓度的唑尼沙胺证实具有抑制作用。奈非西坦在高达200mg/kg的剂量下，对红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作表现出抑制作用。不过，该抑制作用是暂时性的，仅持续几分钟或几小时，癫痫发作会再次出现。同时，通过以100mg/kg的剂量给药，奈非西坦对全部试验大鼠由红藻氨酸盐诱发的皮质性局灶性癫痫发作表现出显著的抑制作用，并且对癫痫发作的抑制作用从奈非西坦给药后立即开始维持，使癫痫发作再也不出现。因此，揭示了奈非西坦既对红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作、也对红藻氨酸盐诱发的皮质性局灶性癫痫发作表现出抑制作用，并且揭示了该抑制作用对皮质性局灶性癫痫发作更强一些。
另外，在两种模型中，奈非西坦静脉内注射给大鼠后产生镇静作用，观察到四肢algodiapholia和松弛。这说明奈非西坦抑制整个皮质的功能。此外，对癫痫发作过程中局部葡萄糖代谢变化的研究揭示，奈非西坦以100mg/kg的剂量给药降低了整个脑部的葡萄糖代谢，在杏仁核性癫痫发作和皮质性局灶性癫痫发作都是如此。确切地说，在非病灶一侧上的皮质和基底神经节部位，葡萄糖代谢降低至正常水平以下。当增加奈非西坦的剂量时，有癫痫发作传播的代谢亢进区域的形成被剂量依赖性地抑制了。通过以200mg/kg给药，代谢亢进区域被限制在杏仁核内的病灶上。这种对癫痫发作过程中的葡萄糖代谢的作用说明，奈非西坦抑制癫痫发作的传播。另外，对脑葡萄糖代谢和基底神经节的强抑制作用说明，奈非西坦对皮质性局灶性癫痫发作比对边缘系统性癫痫发作更有效，脑电图也观测到了这一点。高浓度下奈非西坦的镇静作用被认为归因于它对皮质的亲和性。
本发明的抗顽固性癫痫剂的给药方式没有特别限制，可以经口或肠胃外方式对人给药。上述由式(Ⅰ)代表的化合物是本发明药物的活性成分，可以直接给药。不过，优选将药物组合物经口或肠胃外方式给药，该药物组合物是利用由式(Ⅰ)代表的化合物和一或多种药学上可接受的添加剂加以制备的。
本发明药物的剂量没有特别限制，可根据给药方式、癫痫或癫痫发作症状的严重性、癫痫发作的频率、给药目的(例如预防或治疗)和患者的年龄或体重加以适当选择。例如，由式(Ⅰ)代表的化合物的成人每日剂量为200-2000mg，优选为约300-900mg，每日剂量可以分次给药。本发明药物的给药时机也可以加以适当选择。如果药物在癫痫症状开始或癫痫发作之前给药，它起到抗癫痫剂的作用。
适合经口给药的剂型例子包括片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、液体制剂和糖浆剂。适合肠胃外给药的剂型例子包括皮下、静脉内和肌内注射；滴剂；吸入剂；经皮或经粘膜吸收的制剂；栓剂；和泥罨剂。药学上可接受的添加剂例子包括赋形剂、崩解剂、崩解助剂、粘合剂、润滑剂、包衣剂、着色剂、稀释剂、基质、增溶剂或溶解助剂、等渗剂、pH调节剂、推进剂和胶粘剂。
例如，可以将药学上可接受的添加剂加入到适合经口给药和经皮或经粘膜给药的制剂中。添加剂的例子包括赋形剂，例如葡萄糖、D-甘露糖醇、淀粉和结晶纤维素；崩解剂或崩解助剂，例如羧甲基纤维素钙；粘合剂，例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和明胶；润滑剂，例如硬脂酸镁和滑石；包衣剂，例如羟丙基甲基纤维素、蔗糖、聚乙二醇和氧化钛；基质，例如凡士林、液体石蜡、聚乙二醇、明胶、高岭土、甘油、纯净水和硬脂。
此外，在制备制剂时可以加入推进剂，例如氟里昂(Fron)、二乙醚和压缩气体；胶粘剂，例如聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、甲基纤维素、聚异丁烯和聚丁烯；基底布料，例如棉布和塑料片。制剂添加剂可以加入到适合注射的制剂和滴剂中，例如增溶剂或溶解助剂充当含水注射剂或必须在使用前溶解的注射剂的组分。其例子包括注射用蒸馏水、注射用氯化钠和丙二醇。也可以加入等渗剂，例如葡萄糖、氯化钠、D-甘露糖醇和甘油，和pH调节剂，例如无机与有机酸和无机与有机碱。
本发明的典型药物奈非西坦的急性毒性为2005mg/kg(雄性小鼠，经口给药)，因此，是非常安全的(日本专利申请未审公开5-163144)。
实施例下面将通过实施例详细描述本发明，不应解释为发明仅限于它们。
采用雄性Wistar大鼠(体重200-250g，东京实验动物)，使用戊巴比妥(50mg/kg,Dinabot)和氯胺酮(50mg/kg,Sankyo Co.,Ltd.)作为麻醉剂。
将每只麻醉后的大鼠置于趋实体性(立体定位，Stereotaxic)仪器(SR-6型，Narishige Ikakiki K.K.)中，剥去大鼠头皮，暴露颅骨。利用电钻(C-201型，Urawa Kohgyo K.K.)在颅骨上钻一小孔。随后，按照Paxinos,G.,Watson,C.的脑图谱(《趋实体性协调中的大鼠脑》Academic Press,New York,1986)，将用于慢性刺激和记录的电极(由聚四氟乙烯涂膜的不锈钢制成，外径约250μm,Nippon Koku Denshi)植入杏仁核(脑图谱左侧所示)，利用牙科胶粘剂牢固地固定在颅骨上，以防止断开。随后，在1-2周恢复期后，开始诱发刺激。诱发刺激每天进行一秒钟，强度为200μA，并使用50Hz正弦波(用于进行电刺激的仪器是由Nihon Kohden Kogyo Co.生产的8-6207A)。表现癫痫发作第5阶段达连续三天或以上的大鼠被认为是完全诱发了的大鼠。从每只完全诱发了的大鼠得到稳定显示癫痫发作第5阶段的全身发作阈(GST)。
实施例1按下列参数评价奈非西坦(15-180mg/kg)关于诱发性癫痫发作诱发的GST刺激强度的剂量反应癫痫发作阶段、受到刺激的杏仁核的后放电持续时间和运动性癫痫发作的持续时间。结果如表1至表3所示。
按照Racine等人的方法(“电刺激的癫痫发作活性的改进Ⅱ型运动性癫痫发作”《脑电图描记法临床神经生理学》1972,32:281-294)，将癫痫发作分为下列五个阶段第1阶段(咀嚼)；第2阶段(点头)；第3阶段(前肢阵挛)；第4阶段(后仰)；和第5阶段(后仰和跌倒)。
运动性癫痫发作的持续时间(秒)表示为第3至第5阶段的总持续时间。第1或第2阶段是边缘系统的癫痫发作症状，第3、4或5阶段被视为运动性癫痫发作(Sato,M.,Racine,R.J.,McIntyre,D.C.“诱发基本机理和临床有效性”《脑电图描记法临床神经生理学》1990,76:459-472)。
利用记录电极记录后放电持续时间(秒)，在脑电图中显示为癫痫发作放电持续时间，这是由诱发刺激所诱发的。将奈非西坦溶于溶剂(0.5％羧甲基纤维素)，将该溶液在GST刺激前90分钟口服给药，其中将奈非西坦的给药量分为在15-180mg/kg内的若干阶段。
表1奈非西坦对杏仁核完全诱发的大鼠癫痫发作阶段的作用

阶段的变化(％)奈非西坦给药后癫痫发作阶段的百分率，给药前的癫痫发作阶段取为100。
量奈非西坦的给药量。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。
*指p＜0.05；**指p＜0.01。
表2奈非西坦对杏仁核完全诱发的大鼠运动性癫痫发作持续时间(MSD)的作用

MSD的变化(％)奈非西坦给药后MSD的百分率，给药前的MSD取为100。
量奈非西坦的给药量。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。
**指p＜0.01。
表3奈非西坦对杏仁核完全诱发的大鼠后放电持续时间(ADD)的作用

ADD的变化(％)奈非西坦给药后ADD的百分率，给药前的ADD取为100。
量奈非西坦的给药量。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。
***指p＜0.01。
对奈非西坦给药的大鼠来说，剂量依赖性抑制作用在全部三种参数中都得到确认癫痫发作阶段(表1)、运动性癫痫发作的持续时间(表2)和后放电持续时间(表3)。按照最小平方法，从奈非西坦对癫痫发作阶段的作用得到回归曲线，利用该回归曲线得到ED50为114mg/kg。
实施例2[方法]本例所用大鼠在购买来源、体重和周龄上是相同类型的。对每只大鼠按照与实施例1相同的方法进行麻醉，在杏仁核上放置电极，将电极固定在颅骨上，进行诱发刺激(50Hz，正弦波)。
利用不给药的大鼠和奈非西坦给药的大鼠(120mg/kg)评价给药效果，但将GST刺激强度增加到两倍(GST 2)或三倍(GST 3)。按下列参数评价120mg/kg奈非西坦对由一倍、两倍和三倍GST刺激诱发的诱发性癫痫发作的作用癫痫发作阶段、运动性癫痫发作的持续时间和后放电持续时间。结果如表4至6所示。
表4奈非西坦对在不同刺激强度下的杏仁核完全诱发的大鼠癫痫发作阶段的作用

阶段的变化(％)奈非西坦给药后癫痫发作阶段的百分率，给药前的癫痫发作阶段取为100。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。*指p＜0.05；**指p＜0.01。
表5奈非西坦对在不同刺激强度下的杏仁核完全诱发的大鼠运动性癫痫发作持续时间(MSD)的作用

MSD的变化(％)奈非西坦给药后MSD的百分率，给药前的MSD取为100。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。
*指p＜0.05；**指p＜0.01。
表6奈非西坦对在不同刺激强度下的杏仁核完全诱发的大鼠后放电持续时间(ADD)的作用

ADD的变化(％)奈非西坦给药后ADD的百分率，给药前的ADD取为100。
p值变化率的值关于奈非西坦给药前的值的t-检验值(成对t-检验)。
*指p＜0.05，说明结果是显著的。
在一倍GST刺激强度的情况下，全部参数显示强烈而显著的抑制作用癫痫发作阶段、运动性癫痫发作的持续时间和后放电时间。在两倍GST刺激强度的情况下，癫痫发作阶段和运动性癫痫发作的持续时间都显示显著的抑制作用，但是对后放电持续时间的作用减小了。在三倍GST刺激强度的情况下，癫痫发作阶段和运动性癫痫发作的持续时间都显示显著的抑制作用，但是与一倍GST或两倍GST刺激强度情况下的作用相比，作用还是减小了。在两倍GST强度和三倍GST刺激强度的情况下，有些样本维持非常低的癫痫发作阶段或不显示行为性癫痫发作，不过后放电持续时间几乎恢复至奈非西坦给药前的值。
上述结果揭示了奈非西坦对诱发性癫痫发作的作用可能涉及下列两个机理癫痫发作诱发部位的后放电阈升高，和对癫痫发作向整个脑部传播的抑制作用。
因此，奈非西坦可以升高癫痫发作病灶部位的癫痫发作阈，抑制癫痫发作的传播，从而抑制癫痫发作的表达。因此，本发明药物对从颞叶产生的顽固性继发性全身发作有效。
实施例3本试验评价下列参数杏仁核诱发过程中的癫痫发作阶段和受到刺激的杏仁核的后放电持续时间。
采用雄性Wistar大鼠(5至6周大，体重200-250g，东京实验动物)。每只大鼠按照类似于实施例1的方式进行麻醉，在杏仁核上放置电极，将电极固定在颅骨上。至少恢复两周后，开始诱发刺激。
诱发刺激每天进行一秒钟，为50Hz正弦波。第一天测定后放电阈，从第二天开始，在阈值强度下进行诱发刺激。第一天为了测定阈值，不将奈非西坦给药。从第二天开始的二十天内，将奈非西坦口服给药(45、90或180mg/kg)，给药后进行诱发刺激90分钟。奈非西坦给药二十天后，在不给药的情况下再进行七天的诱发刺激。
表7奈非西坦对诱发性癫痫发作建立的作用(后放电阈的变化)

表8奈非西坦给药(90mg/kg)对癫痫发作阶段发展的作用(典型的例子)

在第22天和以后，带下划线的数字指奈非西坦未给药的情况。
表8显示了本试验中不给药大鼠和奈非西坦给药大鼠(90mg/kg)的典型例子中癫痫发作发展的过程。从表8可以明显看出，在不给药的对照大鼠的情况下，在第三天开始形成阶段，在第九天达到第5阶段。
随后，不给药大鼠维持第5阶段直到第28天，也就是试验的最后一天。不给药大鼠显示没有后放电阈升高的情况(见表7)。
相形之下，在奈非西坦给药大鼠(90mg/kg)的情况下，在第六天开始形成阶段，继续进行的情况与未给药大鼠相同，在第十天达到第5阶段(见表8)。
在奈非西坦给药大鼠的一种情况中，即使进行了后放电阈刺激也没有诱发后放电。在这种情况下，以25μA为进阶提高电刺激，直到显示后放电。在第十一天，后放电显示为150μA，癫痫发作阶段为4。随后，改变后放电阈，阈的升降反复若干次(见表8)。在90与180mg/kg奈非西坦给药的情况下显示后放电阈的升高(见表7)。从表7可以明显看出，即使在后放电阈没有升高的情况下，在一种情况中也间歇性地表达第5阶段。如上所述，在第5阶段完成后，未给药大鼠与奈非西坦给药大鼠之间在阶段变化和阈值上的差异是明显的(见表7)。
本试验没有观测到奈非西坦给药大鼠与未给药对照大鼠之间在刺激直到第5阶段完成的数量上的差异。不过，在第5阶段完成后，奈非西坦给药大鼠表现出癫痫发作阶段的“复发”比对照大鼠更为频繁。在癫痫发作发展的正常过程中，一旦达到第5阶段，该阶段会稳定不变地表现。
后放电阈已知根据癫痫发作发展的正常过程中的癫痫发作的发展而降低。不过，作为奈非西坦给药的结果，后放电阈显然在第3至第5阶段的表现、即运动性癫痫发作的表现过程中升高了。在已知药物给药的情况下还没有表现出这种现象。另外，即使后放电阈没有升高，奈非西坦给药也防止了第5阶段的表达。
如上所述，奈非西坦包含影响诱发发展过程的新机理。
实施例4-1利用两种部分发作模型研究奈非西坦的抗癫痫作用；即杏仁核性癫痫发作和皮质性局灶性癫痫发作的模型，二者都是因局部注射红藻氨酸而导致的。具体来说，研究了对临床癫痫发作、对癫痫发作过程中的脑电图观测结果和脑中葡萄糖代谢的作用。
Ⅰ、红藻氨酸诱发的杏仁核性癫痫发作的研究研究了奈非西坦对杏仁核性癫痫发作的抑制作用和脑电图观测结果的变化。
采用19只Wistar雄性大鼠(Japan SLCCo.)进行下列操作，每只体重250-350g。将每只大鼠用戊巴比妥麻醉，固定在趋实体性仪器上。将外径为0.6mm的不锈钢套管插入大鼠的左侧杏仁核，以注射红藻氨酸(Pellegrino,A.S.,Cushman,A.J.《大鼠脑的趋实体性图谱》Plenum Press,New York,1979，插入位置A,+5.0；L,+5/0；D,-3.0)。随后，将直径为0.2mm的两极深度电极插入两侧杏仁核(A,+5.0；L,+-5.0；D,-3.0)和海马体(A,+3.0；L,+-3.2；D,+1.5)。将螺旋电极放置在左侧感觉运动区(A,+1.0(从前囟计算)；L,+-2.5；D,0.5(从硬脑膜计算))、额窦和枕中处。将电极与插座连接，利用牙科胶粘剂将套管、电极和插座固定在颅骨上。操作后七天，通过套管注射1μL红藻氨酸的磷酸缓冲溶液(1mg/ml)(速率0.8-1.0ml/min)(n=12)，以诱发边缘系统性癫痫发作。将电极与脑电描记器连接，观察笼中大鼠的行为。利用充当惰性电极的额窦电极和接地的枕中电极记录脑电图。利用基于脑电描记器的视频脑电图记录仪同时记录行为和脑电图(SYNAFIT 1000；NEC San-eiInstruments,LTD.)。
注射红藻氨酸后一至两小时，边缘系统性癫痫发作处于癫痫持续状态，将奈非西坦的盐水溶液(10mg/ml)缓慢注射到尾静脉内，剂量选自10、50、100和200mg/kg(n=12)。将等量盐水注射到对照组大鼠静脉内(n=7)。随后，连续记录大鼠的行为和脑电图达至少八小时，然后在24小时、48小时和72小时后记录两小时。测量奈非西坦溶液或盐水刚刚给药后的临床性癫痫发作和脑电图观测结果的变化，和24、48和72小时后癫痫发作的发生和脑电图观测结果，比较评价结果。
在休息过程中和休息时失眠过程中将红藻氨酸注射到杏仁核内后，在20分钟内出现低幅度的多峰形，并且继续出现多峰形。在短时间内，临床性癫痫发作出现节律性高幅度峰形，癫痫发作波到达同侧的海马体和另一侧的杏仁核和海马体。临床性癫痫发作是典型的边缘系统性癫痫发作，所表现的症状例如向右转头、注意力反应、运动不能、流涎和面肌痉挛。随后，癫痫发作以5至10分钟间隔反复出现，发展为癫痫持续状态。在大鼠癫痫持续状态过程中静脉内注射10、50或100mg/kg奈非西坦显示发作性行为或脑电图没有明显变化(表9和10)。不过，注射了100mg/kg的大鼠安静下来，眼睛合上了，四肢松弛了。此时，大鼠对疼痫刺激没有反应，注射后该镇静作用持续30-60分钟。8只注射了200mg/kg的大鼠中有5只的癫痫发作从注射后消失了5分钟或4小时或以上，然后再次出现癫痫发作(表9)。
在5只大鼠中有4只的对应于杏仁核的峰形从脑电图中消失了。剩下的大鼠中，对应于另一侧杏仁核和两侧海马体的峰形消失了，对应于注射一侧杏仁核的峰形保留下来。尽管有一只大鼠的癫痫发作在刚注射奈非西坦后消失了，不过该大鼠在25分钟后死亡。有2只大鼠的对应于杏仁核的峰形在24、48和72小时后消失了(表10)。从行为和脑电图来看，在8只大鼠中有3只的癫痫发作没有被抑制，尽管它们注射了200mg/kg奈非西坦。在这3只大鼠中，对应于杏仁核的峰形在24、48和72小时后保留下来。8只注射了200mg/kg的大鼠和注射了100mg/kg的大鼠从刚注射后开始镇静了大约60-90分钟，当脑电图中再次出现癫痫发作波后苏醒过来。在注射10或50mg/kg奈非西坦的情况下没有观察到该镇静作用。
表9奈非西坦对红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作的抑制作用大鼠奈非西坦 静脉内注射后癫痫 静脉内注射后癫痫 镇静作用剂量发作立即消失发作消失期间C1NS - ND -C2NS - ND -C3NS - ND -C4NS - ND -C5NS - ND -C6NS - ND -C7NS - ND -N1 200mg/kg 2h33min +N2200- ND +N3200- ND +N4200- ND +N5200+ (25min后死亡)+N6200+ 5min +N7200+ 4h32min +N8200+ 35min+N9100- ND +N10 100- ND +N11 50 - ND -N12 10 - ND -C1-C7对照组；N1-N10奈非西坦给药组；NS盐水；ND没有数据；(+)有效；(-)无效；h小时；min分钟。
表10奈非西坦对对应于红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作的杏仁核脑电图观测结果变化的作用大鼠 奈非西坦 刚刚静脉内注射后 24h后杏仁 48h后杏仁 72h后杏仁剂量 的杏仁核峰形 核峰形核峰形核峰形C1NS+ ++ +C2NS+ ++ -C3NS+ ++ -C4NS+ ++ +C5NS+ ++ +C6NS+ +- -C7NS+ +- -N1200mg/kg - -- -N2200 + -- -N3200 + ++ +N4200 + ++ +N5200 - ND NDN6200 - ++ +N7200 - -- -N8200 + +ND ND(峰从局灶点消失)N9 100+ +ND NDN10 100+ +ND ND(幅度下倾)N11 50 + +ND NDN12 10 + +ND NDC1-C7对照组；N1-N10奈非西坦给药组；NS盐水；ND没有数据；(+)有效；(-)无效；h小时。
实施例4-21-2、局部脑葡萄糖代谢变化的研究研究了奈非西坦对杏仁核性癫痫发作过程中局部脑葡萄糖代谢的作用。
将红藻氨酸注射套管插入18只雄性Wistar大鼠杏仁核左侧指定位置，按照与实施例Ⅰ-1所述相同程序进行固定。手术后七天，在氟烷麻醉下，放置聚乙烯套管，并固定在一侧的股动脉和静脉中，将每只大鼠身体的下半段放入石膏内，以防止套管脱落。一旦从麻醉中苏醒，通过套管注射与Ⅰ-1所述相同的红藻氨酸溶液(1μL)，以诱发癫痫发作。红藻氨酸注射后经过90分钟后，边缘系统性癫痫发作处于癫痫持续状态，此时静脉内注射50、100或200mg/kg奈非西坦，而将盐水注射给对照组大鼠。60分钟后，静脉内注射25μCi[14C]去氧葡萄糖。注射示踪剂后，连续采集动脉血45分钟。采血结束后，切掉头部。立即摘除脑，并立即在于冰冷却下在己烷(-25℃)中冷冻。将冷冻的脑在低温恒温器(-20℃)中切片，以制成冠状的系列冷冻的切片，厚度为20μm。随后，将切片干燥，放在具有标准[14C]的高速X-射线膜上，然后在暗盒内照射七天，从而得到放射自显影图。将从动脉采集的血样离心，以收集血浆，利用液体闪烁计数器测量[14C]放射性，测量血浆中的葡萄糖浓度。
利用光密度计，由放射自显影图测量每个切片脑内结构的光密度，利用Sokoloff等式(Sokoloff,L.,Reivich,M.,Kennedy,C.等《神经化学杂志》28:897-916,1977)，根据血浆中的[14C]放射性和葡萄糖浓度计算每个脑内结构的葡萄糖利用率。通过Mann-Whitney U检验，将所得数据与对照组数据进行定量和统计学比较。
表11显示杏仁核性癫痫发作过程中对照组(奈非西坦不给药组)和100mg/kg奈非西坦给药组每个脑内结构的局部葡萄糖代谢率。对照组中，病灶一侧上的枕顶皮质、颞叶皮质、感觉运动区和尾状核-豆状核；两侧的边缘系统，例如杏仁核和海马体；病灶一侧的丘脑和黑质中的葡萄糖代谢比正常大鼠的葡萄糖代谢更受促进。100mg/kg奈非西坦给药下的葡萄糖代谢显示在病灶一侧上的感觉运动区、尾状核-豆状核、杏仁核和海马体中没有变化。相形之下，在几乎所有的非给药组显示较高葡萄糖代谢率的其它区域，葡萄糖代谢的促进作用被抑制了(表12)。此外，葡萄糖代谢在非病灶一侧上的脑皮质、丘脑、下丘脑和脑干网状结构中的所有区域都被抑制了，而在对照组则观测到几乎没有变化，也就是说，在这些区域中的局部葡萄糖代谢低于正常大鼠。奈非西坦对脑葡萄糖代谢的这种抑制作用可以描述如下当50mg/kg奈非西坦给药时，非病灶一侧上的杏仁核、海马体和脑皮质中的葡萄糖代谢被轻微抑制了；当100mg/kg奈非西坦给药时，在病灶一侧上的海马体和脑皮质中也观测到了对葡萄糖代谢的抑制作用；当200mg/kg奈非西坦给药时，病灶一侧上的杏仁核是代谢被促进的唯一区域。换句话说，奈非西坦以剂量-反应方式抑制了高水平葡萄糖代谢区域的扩展。另外，当100或200mg/kg奈非西坦对大鼠给药时，观测到与Ⅰ-1所述相同的镇静作用。
表11红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作过程中每个脑内结构中的局部葡萄糖代谢率(奈非西坦不给药组和给药组的比较)

奈非西坦给药(100mg/kg；1组7只)奈非西坦不给药(1组7只)数据平均±标准误差(μmol/min/g)*:P＜0.05,*:P＜0.01(Mann-Whitney U检验)
表12奈非西坦对红藻氨酸盐诱发的杏仁核性癫痫发作过程中局部脑葡萄糖代谢率的作用

→没有变化→↓较低程度降低↓中等程度降低↓↓较高程度降低实施例5-1Ⅱ、红藻氨酸盐诱发的皮质性局灶性癫痫发作研究研究了奈非西坦对皮质性局灶性癫痫发作的抑制作用和脑电图观测结果的变化。
利用雄性Wistar大鼠，按照与Ⅰ-1所述相同的方式进行趋实体性手术。将套管插入左侧感觉运动区，注射红藻氨酸，套管同时用作电极。将两极深度电极放置在两侧尾状核中，将螺旋电极放置在右侧感觉运动区、额窦和枕骨中。手术后七天，注射1μL红藻氨酸溶液(2mg/ml)，以诱发皮质性局灶性癫痫发作。注射红藻氨酸后经过1-2小时后，静脉内注射与Ⅰ-1所述相同的奈非西坦溶液(100mg/kg)，利用视频脑电图记录仪记录行为和脑电图。与对照组比较奈非西坦刚给药后对癫痫发作的抑制作用、脑电图变化、之后癫痫发作的发生和脑电图观测结果。
在休息过程中和休息时失眠过程中将红藻氨酸注射到左侧感觉运动区的皮质内后，在20分钟内左侧感觉运动区和尾状核-豆状核出现低幅度的多峰形，并且继续出现多峰形。在短时间内，出现节律性高幅度峰形，同时在右上端和面部开始发生阵挛性发作。癫痫发作波立即到达另一侧的感觉运动区和尾状核-豆状核。随后，癫痫发作以5至10分钟间隔反复出现，还观测到右上端的强直性发作和继发性全身发作。当该部分发作处于癫痫持续状态时，给大鼠静脉内注射奈非西坦(100mg/kg)。结果，癫痫发作立即消失，脑电图上峰形的频率显著减少。有一只大鼠对应于另一侧右侧感觉运动区的峰形和对应于右侧尾状核-豆状核的峰形几乎消失(表13)。
另外，刚刚静脉内注射奈非西坦后，大鼠镇静下来，眼睛合上了，四肢松弛了，然后在60分钟内苏醒，与Ⅰ实验相同。不过，苏醒后没有癫痫发作。而且，脑电图中仅出现发作间放电，放电频率逐渐减少。24小时后，与对照组的情况相似，观测到有一只大鼠对应于脑电图上峰形的肌阵挛性癫痫发作。相形之下，另两只大鼠的癫痫发作完全消失了。
表13奈非西坦对红藻氨酸盐诱发的皮质性局灶性癫痫发作的抑制作用

CC1-CC3对照组DC1-DC3奈非西坦给药组(+)有效；(-)无效实施例5-2Ⅱ-2、脑葡萄糖代谢变化的研究研究了奈非西坦对皮质性局灶性癫痫发作过程中局部脑葡萄糖代谢的作用。
按照与Ⅰ-1实验所述相同方式，将套管放置在大鼠左侧感觉运动区中，注射红藻氨酸，以诱发癫痫发作。随后，向每只大鼠静脉内注射奈非西坦溶液(100mg/kg)。60分钟后，静脉内注射[14C]去氧葡萄糖，按照与Ⅰ-2实验所述相同程序生成放射自显影图。与对照组比较每个脑内结构的葡萄糖利用率。
在红藻氨酸盐诱发的皮质性局灶性癫痫发作过程中，局部葡萄糖代谢得以促进的部位是感觉运动区，该区是病灶区；和同侧额叶和顶叶皮质，二者都与感觉运动区连接。脑葡萄糖代谢还在双侧尾状核-豆状核、丘脑和海马体中得以促进。此外，葡萄糖代谢在大鼠非病灶一侧上的感觉运动区也被促进了。在癫痫发作过程中静脉内注射奈非西坦(100mg/kg)的情况下，代谢亢进在非病灶一侧中的感觉运动区、尾状核-豆状核和丘脑以及双侧海马体中都被显著地抑制了。另外，奈非西坦抑制病灶一侧皮质中葡萄糖代谢增加的区域的扩展(表14)。与杏仁核性癫痫发作的情况相似，葡萄糖代谢在整个脑部都被抑制了。尤其是代谢在远距离区域被强烈地抑制了。
表14奈非西坦对皮质性局灶性癫痫发作过程中局部脑葡萄糖代谢率变化的作用奈非西坦(100mg/kg)脑内结构 病灶一侧非病灶一侧额叶皮质→↓↓顶叶皮质↓ ↓↓枕叶皮质→↓↓颞叶皮质→↓↓感觉运动区皮质 →↓↓胼胝体 → →尾状核-豆状核 ↓↓↓杏仁核 →↓→↓海马体 ↓↓↓↓隔区→↓→↓丘脑→↓↓下丘脑↓↓黑质→↓→↓脑干网状结构→↓→↓小脑皮质→ →→没有变化→↓较低程度降低↓中等程度降低↓↓较高程度降低工业实用性本发明药物对人顽固性癫痫是有效的，具体来说是颞叶性癫痫、皮质性癫痫、与定位有关的癫痫、癫痫手术后复发的癫痫、脑手术后癫痫或外伤性癫痫。另外，该药物对与癫痫有关的发作是有效的，例如继发性全身发作、复杂部分发作和癫痫持续状态。
权利要求
1.顽固性癫痫或与之有关的发作的治疗或预防剂，包含由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
2.根据权利要求1的治疗或预防剂，其中该顽固性癫痫是与定位有关的癫痫、全身性癫痫或它们的综合征。
3.根据权利要求2的治疗或预防剂，其中该与定位有关的癫痫和全身性癫痫是自发性或症状性的。
4.根据权利要求3的治疗或预防剂，其中该与定位有关的癫痫是皮质性癫痫或颞叶性癫痫。
5.根据权利要求2的治疗或预防剂，其中该全身性癫痫或其综合征是West综合征、Lennox综合征或儿童症状性综合征。
6.根据权利要求4的治疗或预防剂，其中该皮质性癫痫是额叶性癫痫、顶叶性癫痫或枕叶性癫痫。
7.根据权利要求1的治疗或预防剂，其中该与顽固性癫痫有关的发作是继发性全身发作或复杂部分发作。
8.根据权利要求1的治疗或预防剂，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是癫痫持续状态。
9.根据权利要求1的治疗或预防剂，其中该顽固性癫痫是脑手术后癫痫、外伤性癫痫或顽固性癫痫手术后复发的癫痫。
10.根据权利要求1的治疗或预防剂，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是顽固性与定位有关的癫痫、顽固性继发性全身发作、顽固性复杂部分发作或顽固性癫痫持续状态。
11.限制癫痫发作(运动性发作)持续时间的抑制剂，该抑制剂包含由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
12.抗癫痫发作传播的抑制剂，该抑制剂包含由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
13.癫痫发作的治疗或预防剂，该试剂具有升高发作激发阈的功能，包含由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物作为活性成分R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
14.根据权利要求11-13任意一项的抑制剂、治疗剂或预防剂，其中该癫痫发作是顽固性癫痫发作。
15.根据权利要求1-14任意一项的治疗剂、预防剂或抑制剂，其中由式(Ⅰ)代表的化合物是N-(2,6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺、它的盐或该化合物或盐的水合物。
16.由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物在顽固性癫痫或与之有关的发作的治疗或预防剂制备中的用途R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
17.根据权利要求16的用途，其中该顽固性癫痫是与定位有关的癫痫、全身性癫痫或它们的综合征。
18.根据权利要求17的用途，其中该与定位有关的癫痫和全身性癫痫是自发性或症状性的。
19.根据权利要求17或18的用途，其中该与定位有关的癫痫是皮质性癫痫或颞叶性癫痫。
20.根据权利要求17的用途，其中该全身性癫痫或其综合征是West综合征、Lennox综合征或儿童症状性综合征。
21.根据权利要求19的用途，其中该皮质性癫痫是额叶性癫痫、顶叶性癫痫或枕叶性癫痫。
22.根据权利要求16的用途，其中该与顽固性癫痫有关的发作是继发性全身发作或复杂部分发作。
23.根据权利要求16的用途，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是癫痫持续状态。
24.根据权利要求16的用途，其中该顽固性癫痫是脑手术后癫痫、外伤性癫痫或顽固性癫痫手术后复发的癫痫。
25.根据权利要求16的用途，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是顽固性与定位有关的癫痫、顽固性继发性全身发作、顽固性复杂部分发作或顽固性癫痫持续状态。
26.由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物在限制癫痫发作(运动性发作)持续时间的抑制剂制备中的用途R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
27.由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物在抗癫痫发作传播的抑制剂制备中的用途R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
28.由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物在癫痫发作的治疗或预防剂制备中的用途，该试剂具有升高发作感应阈的功能R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
29.根据权利要求26-28任意一项的用途，其中该癫痫发作是顽固性癫痫发作。
30.根据权利要求16-29任意一项的用途，其中由式(Ⅰ)代表的化合物是N-(2,6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺、它的盐或该化合物或盐的水合物。
31.顽固性癫痫或与之有关的发作的治疗方法，其特征是将由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
32.根据权利要求31的治疗方法，其中该顽固性癫痫是与定位有关的癫痫、全身性癫痫或它们的综合征。
33.根据权利要求32的治疗方法，其中该与定位有关的癫痫和全身性癫痫是自发性或症状性的。
34.根据权利要求33的治疗方法，其中该与定位有关的癫痫是皮质性癫痫或颞叶性癫痫。
35.根据权利要求32的治疗方法，其中该全身性癫痫或其综合征是West综合征、Lennox综合征或儿童症状性综合征。
36.根据权利要求34的治疗方法，其中该皮质性癫痫是额叶性癫痫、顶叶性癫痫或枕叶性癫痫。
37.根据权利要求31的治疗方法，其中该与顽固性癫痫有关的发作是继发性全身发作或复杂部分发作。
38.根据权利要求31的治疗方法，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是癫痫持续状态。
39.根据权利要求31的治疗方法，其中该顽固性癫痫是脑手术后癫痫、外伤性癫痫或顽固性癫痫手术后复发的癫痫。
40.根据权利要求31的治疗方法，其中该顽固性癫痫或与顽固性癫痫有关的发作是顽固性与定位有关的癫痫、顽固性继发性全身发作、顽固性复杂部分发作或顽固性癫痫持续状态。
41.抑制癫痫发作(运动性发作)持续时间的治疗方法，其特征是将由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
42.抑制癫痫发作传播的治疗方法，其特征是将由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
43.癫痫的治疗方法，该方法是以升高发作感应阈为基础的，该方法包括将由下式(Ⅰ)代表的化合物、它的盐或该化合物或该盐的水合物给药R2-CH2CONH-R1(Ⅰ)其中R1是苯基或吡啶基，二者都可以具有一个或多个取代基，取代基可以是彼此相同或不同的，选自C1-C3烷基和羟基，R2是可以具有一个或多个取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，其中所述一个或多个取代基可以是彼此相同或不同的，选自卤原子、羟基和C1-C3烷基。
44.根据权利要求31-33任意一项的治疗方法，其中该癫痫发作是顽固性癫痫发作。
45.根据权利要求31-34任意一项的治疗方法，其中由式(Ⅰ)代表的化合物是N-(2,6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺、它的盐或该化合物或盐的水合物。
全文摘要
顽固性癫痫的治疗和预防剂,含有由通式(Ⅰ)R
文档编号A61K31/4015GK1311677SQ9980940
公开日2001年9月5日 申请日期1999年8月6日 优先权日1998年8月6日
发明者田中达也, 高泽彰, 吉井光信, 村岛善也 申请人:第一制药株式会社