专利名称：牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗及其制备工艺的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种防治产气荚膜梭菌病的灭活疫苗，尤其是一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗及其制备工艺。
产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)是人和动物重要致病菌之一。根据产生外毒素的差异，把本菌分为6个菌型。除人以外，产气荚膜梭菌主要引起以下动物疫病A型菌易引起牛、绵羊、家兔肠毒血症；B型菌易引起羔羊痢疾；C型菌易引起牛、猪肠毒血症、羊猝狙；D型菌易引起绵羊、山羊、犊牛肠毒血症；E型菌易引起绵羊羔、犊牛肠毒血症。为预防动物产气荚膜梭菌病，我国已有灭活疫苗生产供应，其中有羊快疫、猝狙、羔痢、肠毒血症联合菌；仔猪红痢灭活苗；家兔产气荚膜梭菌(A型)灭活苗；梭菌病多联干粉苗等。各联菌缺乏用于牛的数据，联合组成中缺乏A型菌株。
近年来，产气荚膜梭菌引起牛只发病死亡报导日渐增多，据四川省达县、安徽省光明市、河南省唐河县、吉林省伊通县及中国农科院兰州兽医所、海南省安定县等资料表明，我国近年来牛“猝死症”，是由A、C、D型产气荚膜梭菌单独引起或与巴氏杆菌联合感染引起。为防治牛猝死症，一般用A型产气荚膜梭菌或与巴氏杆菌制造联苗，不浓缩，每牛用量达8ml，其缺点是使用不便，且只对单一A型引起的疾病有效，对C、D型引起的病则无效。
本发明的目有是为了提供一种利用引起牛发病的三个产气荚膜梭菌制成联苗来预防引起牛猝死的各型菌，其预防免疫效果好、可有效预防牛猝死症的发生的牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗。
本发明的另一目的为了提供一种利用独特的培养基培养A型梭菌从而得毒素效价高、且采用浓缩工艺后配苗、用量少、使用方便、安全性好的牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗的制备工艺。
本发明的目的可通过如下措施来实现一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫酶是将重量百分含量分别为30-50％、20-40％、20-40％的产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液混合/分别用硫酸铵盐析，取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.1-0.3倍的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗。其中产气荚膜梭菌病A、C、D型菌种来自中国兽药监察所，其名称代号分别为C57-1、C59-2、C60-2。
本发明的另一目的还可通过如下措施来实现一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗的制备工艺包括下述步骤①将产气荚膜梭菌A型用胰酶消化汤培养5-12小时收获菌液；将产气荚膜梭菌C、D型用肉肝胃酶消化汤培养收获菌液；②收获的产气荚膜梭菌A、C、D型按各自的重量百分含量30-50％、20-40％、20-40％混合/分别用硫酸铵盐析，其混合/分别的菌液与硫酸铵的重量比均为100∶(45-75)；③将盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.1-0.3倍的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗；④再按溶化后总量的0.1-0.3％加入甲醛溶液；⑤然后再将疫苗作防霉处理即可。
本发明相比现有技术具有如下优点1、本发明将引起牛猝死的产气荚膜梭菌A、C、D型联合配苗，从而克服了单一苗的作用单一的的缺陷，发挥了各型菌对引起牛猝死的各型病的联合作用，本发明的预防免疫效果好，经试验证明可有效地预防牛猝死症的发生。
2、本发明的制备工艺中对A型产气荚膜梭菌采用改进的胰酶消化汤来培养，该培养基培养出的A型梭菌的毒力相比肉肝胃酶消化汤培养的毒力高5-10倍，因而培养出的菌苗质量好。
3、本发明将菌苗浓缩后配菌，其用量少(每牛仅用2毫升)因而使用方便、安全。
本发明还将结合实施例作进一步详述实施例一一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗是将重量百分含量分别为36％、32％、32％的产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液混合后用硫酸铵盐析，产气荚膜梭菌A、C、D型混合菌液与硫酸铵的重量比为100∶50，取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.2倍的18％的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗；然后再进行无菌处理即可。
一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗的制备工艺包括下述步骤①将产气荚膜梭菌A型用胰酶消化汤培养10小时按梭菌病多联干粉苗方法收获菌液；将产气荚膜梭菌C、D型用肉肝胃酶消化汤培养基培养后按梭菌病多联干粉苗方法制备收获菌液；②收获的产气荚膜梭菌A、C、D型接各自的重量百分含量36％、32％、32％混合用硫酸铵盐析，其混合菌液与硫酸铵的重量比均为100∶50；③将盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的 产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.2倍的18％的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗；④再按溶化后总量的0.2％加入甲醛溶液；⑤然后再将疫苗加总量的1/2万硫柳汞37℃处理24-48小时即可。所述的胰酶消化汤是将牛肉煮成肉汤与胨水按重量比1∶1配成，其中胨水是将煮过的牛肉渣用胰脏消化液按常规工艺消化而成。
实施例二一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗是将重量百分含量分别为42％、29％、29％的产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液分别用硫酸铵盐析，产气荚膜梭菌A、C、D型分别与硫酸铵的重量比为100∶60，取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素混合用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.3倍的20％的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗；然后再进行无菌处理即可。
其制备工艺与例一同，其中产气荚膜梭菌A、C、D型的重量百分含量及与硫酸铵的比例和氢氧化铝胶的比例按本实施例中要求。
实施例三一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗是将重量百分含量分别为48％、26％、26％的产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液混合后用硫酸铵盐析，产气荚膜梭菌A、C、D型混合菌液与硫酸铵的重量比为100∶72，取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.1倍的25％的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗；然后再进行无菌处理即可。
其制备工艺与例一同，其中产气荚膜梭菌A、C、D型的重量百分含量及与硫酸铵的比例和氢氧化铝胶的比例按本实施例中要求。
权利要求
1.一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗，其特征在于该疫苗是将重量百分含量分别为30-50％、20-40％、20-40％的产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液混含/分别用硫酸铵盐析，取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.1-0.3倍的氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗。
2.一种权利要求1所述的牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗的制备工艺，其特征在于包括下述步骤①将产气荚膜梭菌A型用胰酶消化汤培养5-12小时收获菌液；将产气荚膜梭菌C、D型用肉肝胃酶消化汤培养收获菌液；②收获的产气荚膜梭菌A、C、D型按各自的重量百分含量30-50％、20-40％、20-40％混合/分别用硫酸铵盐析，其混合/分别的菌液与硫酸铵的重量比均为100∶(45-75)；③将盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用未提取时的产气荚膜梭菌A、C、D型菌液体积总量的0.1-0.3倍的氢氧化铝胶溶化得到疫苗；④再按溶化后总量的0.1-0.3％加入甲醛溶液；⑤然后再将疫苗作防霉处理即可。
3.如权利要求2所述的牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗的制备工艺，其特征在于所述的胰酶消化汤是将牛肉煮成肉汤与胨水按重量比1∶1配成，其中胨水是将煮过的牛肉渣用胰脏消化液按常规工艺消化而成。
全文摘要
本发明涉及一种牛产气荚膜梭菌病灭活疫苗,该疫苗是将产气荚膜梭菌A型、C型、D型菌液混合/分别用硫酸铵盐析,取盐析后的悬浮物即产气荚膜梭菌A、C、D型的类毒素用氢氧化铝胶盐水溶化得到疫苗;其制备工艺是将A型菌用胰酶消化汤培养,C、D型按常规工艺培养,将菌液经硫酸铵盐析后的类毒素用氢氯化铝胶溶化再经灭菌、防霉处理即可,本发明用引起牛发病的三个产气荚膜梭菌制成联苗来预防引起牛猝死的各型菌,其预防免疫效果好、可有效预防牛猝死症的发生。
文档编号A61K39/08GK1269243SQ9910194
公开日2000年10月11日 申请日期1999年4月1日 优先权日1999年4月1日
发明者马乐英 申请人:农业部兰州生物药厂