专利名称：包含生长激素,氨基酸和非离子去污剂的药物配方的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种新的药物配方，此配方包含生长激素，或者生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含有至少一个碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸的肽，以及非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆(Poloxamer)。发明还涉及生产这种配方的方法和使用这种配方的治疗方法。
背景技术：
人和普通家畜的生长激素是由垂体前叶合成和分泌的，约为191个氨基酸的蛋白质。人生长激素包含191个氨基酸。
生长激素不仅是身体生长调节中的主要激素，而且是蛋白质，糖类和脂肪代谢调节中的主要激素。生长激素的主要作用是促进生长。
受生长激素影响的器官系统包括骨骼，结缔组织，肌肉和内脏如肝、肠和肾。
在重组技术和生长激素基因的克隆的发展使例如人生长激素(hGH)和Met-hGH以工业规模的生产增长以前，人生长激素仅能从人类尸体的垂体提取物中获得。尽管已提出生长激素用于治疗矮身材(由于生长激素缺失的矮身材，正常矮小和特纳综合症)，成年人生长激素缺失，不育，烧伤治疗，伤口愈合，营养不良，骨接合，骨质疏松，扩散性胃出血，和假关节，但是生长激素的十分有限的供应限制了其在对侏儒症儿童期和青春期治疗中促进纵向生长的用途。
此外，已提出生长激素用于提高家畜生长率或降低脂肪比例。
生长激素的药物制品有不稳定的倾向。可产生降解产物如脱酰胺基的或磺氧化的产物和二聚体或多聚体形式，尤其在生长激素溶液中产生。
hGH主要的化学降解反应是1)通过直接水解脱酰胺基或经环状琥珀酰胺中间体形成许多L-asp-hGH,L-iso-asp-hGH,D-iso-asp-hGH，和D-iso-asp-hGH(参考文献1到大约3),2)14和125位蛋氨酸残基的氧化作用，以及3)肽键的切割。
脱酰胺作用尤其发生在149位的Asn上。
因为溶液中hGH的氧化作用形成亚枫通常是由于制品中已溶解的氧气引起的，所以hGH在14和125位是相当容易氧化的，尤其在溶液中(4-8)。
目前，不认为这些降解产物有毒性或改变的生物活性或受体结合特征，但是有迹象表明与天然的hGH相比，其效果是亚枫的构象稳定性降低。
生长激素的其它“降解产物”是聚合产物如二聚体和多聚体。已用针对天然hGH的抗体的可测量进行研究来阐明这些形式在诱发免疫应答中的作用。这些研究表明hGH的聚合物是引起病人中免疫原性的主要原因。
因此，由于这些聚合物能够造成不需要的免疫原性或改变的半衰期，所以在药物配方中有必要避免生长激素聚合物的形成。
降解的反应动力学依赖于温度，PH和hGH配方中的各种添加剂或佐剂。
由于不稳定性，为了将降解减至最低限度，目前在重配使用前，生长激素配制物通常被冷冻干燥并且以冷冻干燥形式在2到8℃贮存。含hGH的冷冻干燥的药物制品由病人重配之后，在使用期间以溶液形式保存至多30天，在此期间将发生一些降解。
目前优选的是，在使用前尽可能推迟重配生长激素的时间，并以冷冻干燥状态保存和运输制品。从制造者到药房这一过程应在适于处理制品的可控的例如2-8℃的低温，这种温度允许的上架期为最多三年。
优选地，冷冻干燥的和随后重配的制品应是稳定的，对于药筒的预期使用时间，最终使用物以冷冻干燥状态约为1个月，在钢笔装置中以重配状态还可有1个月。
作为冷冻干燥和重配制品的替代，生长激素可以配制成适合自我药疗法的在小瓶或笔形系统中的液体配制物。自我药疗法的笔形系统的扩展用途及其用途的扩展领域要求制品对于最终使用物稳定足够长的时间。当生长激素给药从诊所转移到没有最佳的保存条件的将要治疗的人的家中时，这种稳定是非常非常重要的。一种“备好即用”配方消除了与重配相关的任何操作问题，因此代表了对病人的方便。
可以生产含生长激素的稳定的可溶的制品以小瓶形式备用，结合传统注射器被病人使用或如与笔装置配合的药筒被病人使用。在这两种情况中，病人可以避免重配制品，因此将不必拥有冷冻干燥的制品，用于重配的合适的载体和无菌重配制品所需的必要技术和无菌设备。安全原因也使在制品使用前避免冷冻干燥制品重配更受欢迎。
从制造者的观点来看，在生长激素制品生产中避免冷冻干燥步骤也是一个优点。真空冷冻干燥是耗时耗资的工序并且由于冷冻干燥器的有限容量，在生产中经常是“瓶颈”。
因此，为了便于病人操作需要更稳定的可溶的生长激素制品。
因此，为了考虑使上架期和至多1个月的使用期期间的可溶hGH制品稳定，也需要减少降解过程速率。现有技术稳定hGH的现有尝试未能完全成功地阻止二聚体的形成。与二聚体形成相关的问题是例如Becker,G.W.，生物技术和应用生物化学9,478(1987)中所述的。
国际专利公开号WO89/09614和澳大利亚专利申请号30771/89公开了一种稳定的含生长激素，甘氨酸和甘露醇的药物配方。这种配方在正常加工和以冷冻干燥状态保存及重配后使用期期间显示了已提高的稳定性。
已公开的欧洲专利申请号303 746公开了用各种稳定剂稳定动物生长激素以减少不溶物的形成和在液体环境中保存溶解活性。这种稳定剂包括某些多元醇，氨基酸，在生理PH下有带电荷的侧链基团的氨基酸多聚体，以及胆碱盐。多元醇选自非还原糖，糖乙醇，糖酸，季戊四醇，乳糖，水溶葡聚糖和Ficoll；氨基酸选自甘氨酸，肌氨酸，赖氨酸或其盐类，丝氨酸，精氨酸或其盐类，甜菜碱，N,N,-二甲基-甘氨酸，天冬氨酸或其盐类，谷氨酸或其盐类；在生理PH下有带电侧链基团的氨基酸多聚体选自多聚赖氨酸，多聚天冬氨酸，多聚谷氨酸，多聚精氨酸，多聚组氨酸，多聚鸟氨酸和其盐类；胆碱衍生物选自氯化胆碱，二氢柠檬酸胆碱，酒石酸氯胆碱，碳酸氢胆碱，柠檬酸三胆碱，抗坏血酸胆碱，硼酸胆碱，葡萄糖酸胆碱，磷酸胆碱，硫酸双(胆碱)和粘酸双胆碱。
美国专利号4,117,685说明书公开了一种设计为将要移植的传运装置，此装置包含用如EP303746中提到的相同稳定剂稳定的生长激素。
已公开的欧洲专利申请号374,120公开了一种包含hGH和有3个羟基的多元醇的稳定配方。提及了甘油和三(羟甲基)氨甲烷。此外，公开了组氨酸氢氯化物和多元醇一起作为缓冲液。
国际专利公开号WO93/12811公开了以冻干粉末或含天冬氨酸的水溶液形式存在的已稳定的生长激素配方。
国际专利公开号WO93/12812公开了以冻干粉末或含组氨酸的以水溶液形式存在的生长激素的稳定配方。在这种配方中，与含磷酸缓冲液的生长激素的相应配方相比，脱酰胺作用减少了25-30％。
国际专利公开号WO96/11703公开了含异亮氨酸的生长激素的稳定配方。
国际专利公开号WO96/11702公开了含缬氨酸的生长激素的稳定配方。
国际专利公开号WO96/11704公开了含亮氨酸的生长激素的稳定配方。
国际专利公开号WO93/19776公开了含生长激素的蛋白质配方，该配方包含柠檬酸为缓冲液物质，比含磷酸缓冲液的配方更稳定。该配方也包含氨基酸如甘氨酸和丙氨酸和/或甘露醇或其它糖乙醇和/或甘油和/或其它碳水化合物和选择性地防腐剂如苯乙醇。
国际专利公开号WO94/03198公开了一种稳定的液态配方，该配方包含人生长激素，缓冲液，非离子表面活性剂，和选择性地，中性盐，甘露醇或防腐剂。缓冲液可以是组氨酸，尽管也可以优选柠檬酸。申请公开了一种优选的配方，包含作为缓冲液的柠檬酸，和氯化钠和用来稳定的聚山梨酯20(Tween20)。这种组合防止了聚合，稳定了上述水溶液配方，但也产生相当数量的脱酰胺基的生长激素。
国际专利公开号WO95/35116公开了一种稳定的冷冻干燥的配方，包含蔗糖和选择性地，甘露醇。
发明描述现有已惊奇地发现一种药物配方显示了抵抗脱酰胺基和聚合反应的高度稳定性，该配方包含生长激素或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu，组氨酸，或组氨酸衍生物的氨基酸，或包含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg。产品的稳定性允许其以冷冻干燥状态或以溶解的或重新溶解的配方形式保存和运输。
根据本发明将要使用的含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽可能是含高达20个氨基酸残基的肽，优选地从3到10个氨基酸残基，更优选地从3到6个氨基酸残基，例如3或4个氨基酸残基(例如Lys-Gly-Asp-Ser)。根据本发明的一个方面，较短肽链的碱性和酸性氨基酸残基被1或2个氨基酸残基分开。肽优选地包括天然产生的α氨基酸残基，氨基酸可以是L型或D型氨基酸或其混合物。“酸性氨基酸残基”是例如Glu或Asp，“碱性氨基酸残基”是例如Lys或Arg。
根据本发明将要使用的组氨酸衍生物可以是组氨酸的酰胺和酯，例如甲基或乙基酯，含His-X或X-His序列的二肽，其中X是天然产生的α-氨基酸残基，和His的相似物或衍生物比如咪唑，脱酰胺基组氨酸或多聚组氨酸。
在优选的方面，发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素(GH)或生长激素的衍生物和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸以及非离子去污剂，其中选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸的量是每mg GH中从大约0.01mg到大约10mg。在另一优选的方面中，本发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素(GH)或生长激素的衍生物和组氨酸，或组氨酸的衍生物，或者含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中肽或组氨酸或组氨酸衍生物的量是每mg GH中从大约0.01到大约10mg。
在以上方面的优选实施方案中，肽，或所选氨基酸，或组氨酸，或组氨酸衍生物的量是每mgGH中从大约0.05到大约5mg，更优选的每mgGH中从大约0.05到大约1mg，甚至更优选的每mgGH中从大约0.05到大约0.7mg，以及更优选的每mgGH中从大约0.05到大约0.5mg。
在以上方面的优选实施方案中，非离子去污剂选自聚山梨酯或泊咯沙姆，例如聚山梨酯20，泊咯沙姆188，或泊咯沙姆407(例如PluronicF68,Lutrol127,Tween20)，最优选的泊咯沙姆188。
另一方面，本发明涉及生长激素或生长激素衍生物的药物配方，包含选自Asp,Ile,Val,leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg。
在优选的方面，本发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素(GH)或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，以及非离子去污剂，其中非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg。在另一个优选方面，发明涉及一种药物配方，包含生长激素(GH)或生长激素衍生物，和组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中非离子去污剂的量是每mgGH中大约从0.1到大约10mg。
在以上方面的优选实施方案中，非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg，更优选的每mgGH中从大约0.05到大约5mg，甚至更优选的每mgGH中从大约0.1到大约3mg，甚至更优选的每mgGH中从大约0.1到大约2mg。
在以上方面的优选实施方案中，非离子去污剂选自聚山梨酯或泊咯沙姆，例如聚山梨酯20，泊咯沙姆188，或泊咯沙姆407(例如PluronicF68,Lutrol127,Tween20)，最优选的泊咯沙姆188。
本发明的另一方面是一种药物配方，该配方包含生长激素或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸的肽，和非离子去污剂，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是每mg GH中从大约0.01到大约10mg，非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.1到大约2mg。
在优选的方面，发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，及非离子去污剂，其中Asp,Ile,Val或Leu的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg，并且非离子去污剂量是每mgGH中从大约0.1到大约2mg。在另一个优选方面，本发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素或生长激素衍生物、和组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中肽或组氨酸或组氨酸衍生物的量是每mgGH中从大约0.01到大约10mg，非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.1到大约2mg。
在以上方面的优选实施方案中，肽或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是每mgGH中从大约0.05到大约5mg，优选的是每mgGH中从大约0.05到大约1mg，甚至更优选的是每mgGH中从大约0.05到大约0.5mg。
在以上方面的优选实施方案中，非离子去污剂选自聚山梨酯或泊咯沙姆，例如聚山梨酯20，泊咯沙姆188或泊咯沙姆407(例如PluronicF68,Lutrol127,Tween20)，最优选的泊咯沙姆188。
发明的另一方面涉及一种药物配方，该配方含生长激素，或选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽和泊咯沙姆。
在优选的方面，发明涉及包含生长激素(GH)或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸和泊咯沙姆的药物配方。在另一个优选方面中，发明涉及一种药物配方，该配方包含生长激素，或生长激素衍生物，和组氨酸或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和泊咯沙姆。
在以上方面的优选实施方案中，泊咯沙姆选自泊咯沙姆188，或泊咯沙姆407，最优选的泊咯沙姆188(例如PluronicF68)。在另一个优选实施方案中，其配方包含组氨酸，或组氨酸衍生物。在优选实施方案中，肽或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是每mgGH中从大约0.05到大约5mg，更优选的是每mgGH中从大约0.05到大约1mg，甚至更优选的是每mgGH中从大约0.05到大约0.7mg，甚至更优选的是每mgGH中从大约0.05到大约0.5mg。在优选实施方案中，非离子去污剂的量是每mgGH中从大约0.05到大约5mg，更优选的是每mgGH中从大约0.1到大约3mg，更优选的是每mgGH中从大约0.1到大约2mg。
本发明配方可以是以冻干粉末形式存在，之后用传统载体，比如双蒸水或注射用水进行重配，或以含生长激素的水溶液形式存在。这些载体可以包含传统防腐剂比如m-甲酚，酚和苯乙醇。作为冻干法的稀释剂，可以从糖醇，如甘露醇，和双糖如蔗糖中挑选1个或多个。
由于非常高的稳定性，优选含蔗糖的冻干法制品，并且尤其优选含蔗糖和甘露醇的制品，因其结合了非常高的稳定性和非常良好的加工能力，产生稳定的冷冻干燥产品，易于重新溶解并在重新溶解后的延长时期内在溶液内非常稳定。根据本发明的进一步优选的制品是含甘露醇和蔗糖或海藻糖作为冷冻干燥稀释剂的制品。根据本发明含甘露醇和双糖的制品通常包含在重量上相同的两个成份。
本发明制品中蔗糖量可以在较宽范围内变动。生长激素与蔗糖的重量比可在0.005到1.5间变动。因此，蔗糖量可以是从每毫克生长激素中0.67mg到200mg，优选的是每毫克生长激素中1.1mg到50mg。
在本发明的优选实施方案中，生长激素是人生长激素(hGH)，并且药物组合物进一步包含以水性缓冲液形式存在的载体。这种水性制品以备用形式存在，并且可以象这样保存和运输，没有很多的降解。
在生长激素溶液中使用的缓冲液可以是例如组氨酸，柠檬酸，酒石酸或磷酸缓冲液。L-组氨酸的pKA是6.0，相应地其本身适于在pH大约5到大约7之间作为缓冲液。
在另一方面，本发明涉及制备药物配方的方法，该配方包含生长激素，或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，其中适当量的生长激素，或生长激素衍生物溶解在溶液中，使肽，Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量从每毫克GH中大约0.01mg到GH中大约10mg，该溶液在去离子水中包含选自Asp,Ile,val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，选择性地包含防腐剂，选择性地包含一种调节张力的试剂，以及选择性地调节pH值到从大约6.0到大约8.8。
在另一方面，本发明涉及制备药物配方的方法，该配方包含生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸或含至少一个碱性氨基酸残基和一个酸性氨基酸残基的肽，及非离子去污剂，该方法包含溶解一定量生长激素或生长激素衍生物，使肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量从每毫克GH中大约0.05mg到大约0.5mg间变动，在溶液中，该溶液包含在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，在非离子去污剂量是从每毫克GH中大约0.1mg到大约2mg，选择性地包含防腐剂，选择性地包含调节张力的试剂，以及选择性地调节pH值到从大约6.0到大约8.8。
在另一方面，发明涉及制备药物配方的方法，该配方包含生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的一种氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和泊咯沙姆，其中生长激素或生长激素衍生物溶解于一种溶液中，该溶液包含在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和泊咯沙姆，选择性地包含防腐剂，和选择性地包含调节张力的试剂，以及选择性地调节pH值到从大约6.0到大约8.8。
选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸或含至少一个碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸的肽的浓度优选地从大约1mM到大约100mM。更优选的Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸和肽的浓度是从2mM到20mM，最优选的是从5mM到15mM。
本发明的药物配方可为任何合适的给药方式进行配制，例如经非肠道或口腔给药或对粘膜层给药，例如经鼻给药。药物配方可以以在小瓶或药筒，或任何合适容器例如预先注满的注射器或笔形装置中所含的剂量形式存在。
为了便于诸如冷冻干燥或重配的工序，本发明的药物制品可进一步包括传统使用的盐类。
因稳定性原因，溶液pH优选地调节到大约6.0至大约8.8的范围内，优选地从大约6.0到大约7.0，更优选地从大约6.0到约6.8，甚至更优选的从大约6.0到6.3，以及最优选的从大约6.0到6.2(例如，约6.1)。
pH可通过加酸调节，酸对生长激素无副作用，优选地是一种生理上可接受的酸例如矿物酸如盐酸，硫酸或硝酸或有机酸如醋酸或柠檬酸。
为了便于其加工，如冷冻干燥以及使用前重配配方时冷冻干燥配方的快速和完全溶解，本发明的药物配方可进一步包含调节张力的盐类和选择性地，赋形剂。
这些盐类可从传统添加剂，比如金属碱，地球金属碱或有机酸的铵盐如柠檬酸，酒石酸或醋酸，例如柠檬酸钠，酒石酸钠或醋酸钠，或矿物酸比如盐酸，例如氯化钠中挑选。
赋形剂可以从双糖例如乳糖，海藻糖，和蔗糖，糖醇如甘露醇，木糖醇，赤藓糖醇，苏糖醇，山梨醇或甘油，多糖如商品化的多聚体如Dextran产物比如Dextran40,Dextran70或Dextran75和Ficoll以及多价醇例如聚乙二醇或聚乙烯醇或这些种类中的两个或多个组合中挑选。
在本文中“生长激素”或“GH”可以是来自任何来源的生长激素，例如鸟，牛，马，人，羊，猪，鲑，鳟或金枪鱼的生长激素，优选地是牛，人或猪的生长激素，最优选的是人生长激素。根据本发明的所用生长激素可以是从天然来源分离出来的天然生长激素，例如通过传统方式抽提垂体，或通过重组技术生产的生长激素，例如在E.B.Jensen和S.Carlsen在生物技术和生物工程36,1-11(1990)中所描述的。“生长激素衍生物”可以是生长激素的截断形式，其中一个或多个氨基酸残基被删除；其相似物，其中天然分子中的一个或多个氨基酸残基被另一个氨基酸替代，优选地天然产生的氨基酸残基，只要替代不会产生任何副作用，如抗原性或还原作用；或其衍生物，例如生长激素的脱酰胺基或磺氧化的形态或诸如Met-hGH,Met-Glu-Ala-Glu-hGH或Ala-Glu-hGH的N-或C-末端延伸。优选的生长激素是hGH。生长激素可以是从发酵肉汤或重新溶解在合适溶剂的传统的冷冻干燥制品中直接获得的浓缩物。
就现有的目的来说，术语“组氨酸衍生物”用来指定组氨酸的酰胺和酯比如甲基或乙基酯，二肽例如His-Gly,His-Ala,His-Leu,His-Lys,His-Ser,His-Phe,和二肽如Ala-His,Gly-His,Val-His,Glu-His,Met-His,Arg-His,Leu-His,Ser-His，和类似物或His衍生物比如咪唑，脱酰胺基组氨酸或多聚组氨酸。
在本文中“非离子去污剂”或“非离子表面活性剂”可以是聚山梨酯，比如聚山梨酯20或80等，和泊咯沙姆，比如泊咯沙姆188或407，Pluronic多元醇，和其他乙烯/聚丙烯聚合物等。将使用的对提供稳定的水性配方的有效的量通常在每毫克生长激素中从大约0.01mg到大约10mg去污剂的范围内，优选地每毫克生长激素中从大约0.05mg至大约5mg去污剂，更优选地从每毫克生长激素中大约0.1mg至大约2mg去污剂。
非离子去污剂的使用允许配制物暴露于切力和表面张力，不造成蛋白质变性。
配方中非离子去污剂的量可以在每毫克生长激素中从大约0.01mg至大约10mg去污剂的范围内，优选地从每毫克生长激素中0.05mg至5mg去污剂，最优选的是从每毫克生长激素中0.1mg至2mg去污剂。
在本文中“双糖”用于指定天然产生的双糖例如蔗糖，海藻糖，甘露糖，乳糖，琼脂糖，松二糖，昆布二糖，异麦芽糖，龙胆二糖或密二糖。
根据本发明使用的含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽优选地包含天然产生的α-氨基酸残基。氨基酸可以是L型或D型氨基酸或其混合物。优选的含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽是Lys-gly-Asp-Ser。
在本文中“酸性氨基酸残基”是例如Glu或Asp，以及“碱性氨基酸残基”是例如Lys或Arg。
本发明的方法中使用的溶剂可以是水，醇比如乙醇，n-丙醇或异丙醇，丁醇或其混合物。为阻滞微生物的生长，溶液可以包含防腐剂比如m-甲酚，酚或苯乙醇。
术语生长激素的“剂量”是指在给药方式中提供治疗效果的量。由此配方制备包含hGH的量至少大约0.1mg/ml，优选地高达大约1mg/ml，优选地从大约1mg/ml至大约40mg/ml，更优选地从大约1mg/ml至大约25mg/ml，更优选地从大约2mg/ml至大约15mg/ml，例如根据备好使用的配方计算，从约1mg/ml至约10mg/ml。为在对患垂体机能减退的侏儒症病人给药中使用这些组合物，例如，相应于对所要治疗的目前考虑的剂量规则，这些配方包含从约0.1mg/ml至约10mg/ml的量。浓度范围对本发明不是关键，并且可通过监督给药的医师变动。
本发明的另一方面涉及治疗受生长激素影响的病人的方法，包含用一定量的根据本发明的对治疗上述失调有效量的药物配制物治疗病人。
在下面说明发明的实施例中更加详细地解释了发明。它们不被认为限制了由附加权利要求所规定的发明范围。实验部分实施例1聚合反应的抑制通过将hGH溶解在赋形剂溶液中并用HCl/NaOH调节PH来制备hGH的液体配方。配方成分是hGH 5mg/ml甘露醇 45mg/mlL-组氨酸 0.62mg/ml酚 2.5mg/ml表面活性剂 xmg/mlpH=y(从6.1到6.8)溶液在8℃保存1天和25℃转动19小时后，分别目测溶液外观
>实施例2脱酰胺作用的速率通过在含赋形剂的溶液中添加hGH可以制备下面列出的8个配方。PH调节到6.1。然后制品放置在25℃28天和37℃14天，并且分析hGH的脱酰胺基形式的形成。根据稳定性数据计算脱酰胺基的速率常数。在下表中，给出的hGH和赋形剂的含量以mg/ml表示，速率常数K25℃和K37℃以天数-1表示。
实施例3脱酰胺状态的形成通过在含赋形剂的溶液中添加hGH以及调节PH来制备下表中的配方。然后制品放置在8℃和25℃3个月，并且分析hGH脱酰胺状态的形成。
1)括号内表示表面活性剂的类型F68=Pluronic F68=泊咯沙姆188F127=Lutrol 127=泊咯沙姆407T20=Tween20=泊咯沙姆20实施例4按以下方式制备24种配方hGH 3.33到大约13.1mg/mlL-组氨酸 0.78mg/ml甘露醇22mg/ml蔗糖 21mg/ml泊咯沙姆188 1.33-5.33mg/ml防腐剂苯乙醇(0-20mg/ml)或酚(0-5mg/ml)通过在赋形剂溶液中添加hGH制备配方。pH调节到6.8。配方在25℃保存4周并且以340nm吸收值来测量溶液的透明度。340nm吸收值表示溶液中聚合程度。
权利要求
1．药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素的衍生物，b)选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg。
2．根据权利要求1所述的药物配方，包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物b)选自Asp,Ile,Val,Leu的氨基酸c)和非离子去污剂，其中选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg。
3．根据权利要求1所述的药物配方，包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂，其中肽或组氨酸或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg。
4．根据权利要求1或3所述的药物配方，包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物b)组氨酸或组氨酸衍生物c)和非离子去污剂
5．根据前面权利要求中的任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg到约5mg。
6．根据前面权利要求中的任何一项所述的药物配方，其中肽或Asp,Ile,Val,Leu或His或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg至约1mg。
7．根据前面权利要求中的任何一项所述的药物配方，其中肽或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg至约0.5mg。
8．根据前面权利要求中的任何一项所述的配方，其中去污剂是聚山梨酯例如Tween20。
9．根据前面权利要求1-7中任何一项所述的配方，其中去污剂是泊咯沙姆(Poloxamer)，例如泊咯沙姆188或泊咯沙姆407。
10．根据前面权利要求中的任何一项所述的配方，进一步包含1种或多种等渗性补给剂，例如糖醇和/或盐。
11．根据权利要求10所述的配方，其中等渗性补给剂选自甘露醇，山梨醇，和氯化钠。
12．根据前面权利要求中的任何一项所述的配方，是一种水性配方。
13．根据前面权利要求中的任何一项所述的配方，还包含1种或多种防腐剂，例如酚，苯乙醇。
14．根据前面权利要求中的任何一项所述的配方，其中pH值被调节在6.0和8.8之间。
15．根据前面权利要求中的任何一项所述的稳定的药物配方，其中生长激素是人生长激素。
16．药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂，其中非离子去污剂量是从每毫克GH中约0.01mg至约10mg。
17．根据权利要求16所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，c)和非离子去污剂，其中非离子去污剂量是从每毫克GH中约0.01mg至约10mg。
18．根据权利要求16所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物b)组氨酸或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂，其中非离子去污剂的量从每毫克GH中约0.01mg到约10mg。
19．根据权利要求16或18所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸或组氨酸衍生物，c)和非离子去污剂。
20．根据前面权利要求16-19中任何一项所述的药物配方，其中非离子去污剂的量是从每毫克GH中约0.05mg至约5mg。
21．根据前面权利要求16-20中任何一项所述的药物配方，其中非离子去污剂量是从每毫克GH中的约0.1mg至约2mg。
22．根据前面权利要求16-21中任何一项所述的配方，其中去污剂是聚山梨酯，例如Tween20。
23．根据前面权利要求16-21中任何一项所述的配方，其中去污剂是泊咯沙姆，例如泊咯沙姆188或泊咯沙姆407。
24．根据前面权利要求16-23中任何一项所述的配方，进一步包含1个或多个等渗性补给剂，例如糖醇和/或盐类。
25．根据权利要求24所述的配方，其中等渗性补给剂选自甘露醇，山梨醇，和氯化钠。
26．根据前面权利要求16-25中任何一项所述的配方，是一种水性配方。
27．根据前面权利要求16-26中任何一项所述的配方，还包含1种或多种防腐剂，例如酚，苯乙醇。
28．根据前面权利要求16-27任何一项所述的配方，其中pH值调节在6.0与8.8之间。
29．根据前面权利要求16-28中任何一项所述的稳定的药物配方，其中生长激素是人生长激素。
30．药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂，其中肽或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg，并且非离子去污剂量是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg。
31．根据权利要求30所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，c)和非离子去污剂，其中Asp,Ile,Val或Leu的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg，以及非离子去污剂是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg。
32．根据权利要求30所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和非离子去污剂，其中肽或组氨酸或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH0.01mg到10mg，和非离子去污剂量是从每毫克GH0.1mg到2mg。
33．根据权利要求30或32所述的药物配方，包括a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸或组氨酸衍生物，c)和非离子去污剂。
34．根据前面权利要求30-33中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克hGH中约0.05mg到约5mg。
35．根据前面权利要求30-34中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克hGH中约0.05mg到约1mg。
36．根据前面权利要求30-35中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克hGH中约0.05mg到约0.5mg。
37．根据前面权利要求30-36中任何一项所述的配方，其中去污剂是聚山梨酯，例如Tween20。
38．根据前面权利要求30-36中任何一项所述的配方，其中去污剂是泊咯沙姆，例如泊咯沙姆188或泊咯沙姆407。
39．根据前面权利要求30-38中任何一项所述的配方，进一步包含1种或多种等渗性补给剂，例如糖醇和/或盐类。
40．根据权利要求39所述的配方，其中等渗性补给剂选自甘露醇，山梨醇和氯化钠。
41．根据前面权利要求30-40中任何一项所述的配方，是一种水性配方。
42．根据权利要求30-41中任何一项所述的配方，进一步包含1种或多种防腐剂，例如酚，苯乙醇。
43．根据前面权利要求30-42中任何一项所述的配方，其中pH值调节在6.0与8.8之间。
44．根据前面权利要求30-43中任何一项所述的稳定的药物配方，其中生长激素是人生长激素。
45．药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)泊咯沙姆。
46．根据权利要求45所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，c)和泊咯沙姆。
47．根据权利要求45所述的药物配方包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，c)和泊咯沙姆。
48．根据权利要求45或47所述的药物配方，包含a)生长激素(GH)或生长激素衍生物，b)组氨酸或组氨酸衍生物，c)和泊咯沙姆。
49．根据前面权利要求45-48中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.01到约10mg。
50．根据前面权利要求45-49中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg到约5mg。
51．根据前面权利要求45-50中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg到约1mg。
52．根据前面权利要求45-51中任何一项所述的药物配方，其中肽，或Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的量是从每毫克GH中约0.05mg到约0.5mg。
53．根据前面权利要求45-52中任何一项所述的配方，其中泊咯沙姆是泊咯沙姆188或泊咯沙姆407。
54．根据前面权利要求45-53中任何一项所述的配方，其中泊咯沙姆的量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg。
55．根据前面权利要求45-54中任何一项所述的配方，其中泊咯沙姆的量是从每毫克GH中约0.05mg到约5mg。
56．根据前面权利要求45-55中任何一项所述的配方，其中泊咯沙姆的量是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg。
57．根据前面权利要求45-56中任何一项所述的配方，还包含1种或多种等渗性补给剂，例如糖醇和/或盐类。
58．根据权利要求57所述的配方，其中等渗性补给剂选自甘露醇，山梨醇，和氯化钠。
59．根据前面权利要求45-58中任何一项所述的配方，是一种水性配方。
60．根据前面权利要求45-59中任何一项所述的配方，进一步包含1种或多种防腐剂，例如酚，苯乙醇。
61．根据前面权利要求45-60中任何一项所述的配方，其中pH值调节在6.0与8.8之间。
62．根据前面权利要求45-61中任何一项所述的稳定的配方，其中生长激素是人生长激素。
63．一种制备配方的方法，该配方包含生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解一定量的生长激素，或生长激素衍生物，使溶液中Asp,Ile,Val,Leu，或His，或组氨酸衍生物的量在每毫克GH中约0.01mg与约10mg之间变动，该溶液包括溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu或His或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，选择性地包含一种防腐剂和选择性地包含调节张力的试剂，选择性地调节pH值到从约6.0到约8.8。
64．根据权利要求63所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val，或Leu的氨基酸和非离子去污剂，该方法包括溶解一定量的生长激素，或生长激素衍生物在溶液中，使Asp,Ile,Val或Leu在溶液中的量从每毫克GH中约0.01mg到约10mg，该溶液包含溶在去离子水中的所选氨基酸，和非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，选择性地包含防腐剂和选择性地包含调节张力的试剂，选择性地调节pH至从约6.0到约8.8。
65．根据权利要求63所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素的衍生物，和组氨酸，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及一种非离子去污剂，该方法包括溶解一定量的生长激素，或生长激素衍生物，使肽或组氨酸或组氨酸衍生物在溶液中的量是从每毫克中约GH0.01mg到约10mg，该溶液包含溶在去离子水中的组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，选择性地包含防腐剂，和选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8.8。
66．一种制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素，或生长激素的衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,val,Leu,His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂量是从每毫克GH中约0.01mg到约10mg，选择性地包含防腐剂，以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调整pH值至从约6.0到约8.8。
67．根据权利要求66所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸和非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素，或生长激素的衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu的氨基酸，以及一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂的量是从每毫克GH约0.01mg到约10mg，选择性地包含防腐剂，以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8.8。
68．根据权利要求66所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和组氨酸，或组氨酸衍生物或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素，或生长激素衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，和一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂的量是从每毫克GH中大约0.01mg到10mg，选择性地包含防腐剂，以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择地调节pH值至从约6.0到约8.8。
69．一种制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解一定量的生长激素，或生长激素衍生物，使肽，或Asp,Ile,Val,Leu,或His，或组氨酸在溶液中的量从每毫克GH中约0.05mg到约0.5mg，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和酸性氨基酸残基的肽，和一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂的量是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg，选择性地包含防腐剂，和选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8.8。
70．根据权利要求69所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素的衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，和非离子去污剂，该配方包括溶解一定量的生长激素，或生长激素衍生物，使Asp,Ile,Val或Leu在溶液中的量从每毫克GH中约0.05mg到约0.5mg间变动，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，和一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂的量是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg，选择性地包含防腐剂，和选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8.8。
71．根据权利要求69所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解一定量的生长激素或生长激素衍生物，使肽或组氨酸或组氨酸衍生物在溶液中的量从每毫克GH中约0.05mg到约0.5mg，该溶液包含溶在去离子水中的组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，及一定量的非离子去污剂，例如聚山梨酯或泊咯沙姆，非离子去污剂的量是从每毫克GH中约0.1mg到约2mg，选择性地包含防腐剂以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8.8。
72．一种制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val,Leu或His，或组氨酸衍生物的一种氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素或生长激素衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val,Leu或His或组氨酸衍生物的氨基酸，或含至少一个碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸的肽，以及泊咯沙姆，例如泊咯沙姆188或407，选择性地包含防腐剂，以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调节pH值至从约6.0到约8。
73．根据权利要求72所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，以及非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素，或生长激素衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的选自Asp,Ile,Val或Leu的氨基酸，和泊咯沙姆，例如泊咯沙姆188或407，选择性地包含防腐剂，以及选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调整pH值至从约6.0到约8。
74．根据权利要求72所述的制备配方的方法，该配方包括生长激素，或生长激素衍生物，和组氨酸或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及非离子去污剂，该方法包括溶解生长激素，或生长激素衍生物在溶液中，该溶液包含溶在去离子水中的组氨酸，或组氨酸衍生物，或含至少一个碱性氨基酸残基和至少一个酸性氨基酸残基的肽，以及泊咯沙姆，例如泊咯沙姆188或407，选择性地包含防腐剂和选择性地包含调节张力的试剂，及选择性地调整pH值至从约6.0到约8。
75．在受生长激素影响的病人中治疗失调的方法，包括用对治疗失调有效量的权利要求1-62中任何一项所述的药物配方治疗病人。
全文摘要
本发明涉及一种药物配方,该配方包含生长激素,选自Asp,Ile,Val,Leu或His,或组氨酸衍生物的氨基酸,或含至少一种碱性氨基酸和至少一个酸性氨基酸的肽,以及非离子去污剂,例如聚山梨酯或泊咯沙姆(Poloxamer)。该配方可抵抗脱酰胺基作用和聚合反应保持稳定,该配方可以是含水的配方。生长激素可以是人生长激素。
文档编号A61P19/00GK1216472SQ97194040
公开日1999年5月12日 申请日期1997年4月24日 优先权日1996年4月24日
发明者S·比约恩, H·H·索伦森, P·朗巴勒, S·M·拉尔森, K·爱比霍, B·L·汉森 申请人:诺沃挪第克公司