用于泌尿生殖道和肠道疾病的组合物的利记博彩app

专利名称：用于泌尿生殖道和肠道疾病的组合物的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及用于预防和/或治疗泌尿生殖系统疾病和肠道疾病的组合物。
背景技术：
在温血动物的泌尿生殖道和肠道中，布满了复杂的微观生态系统。数以兆计的微生物中有数以百计的物种，它们占据着哺乳动物的泌尿生殖道和肠道，影响并维持着消化和泌尿功能。占据这些部位的微生物有潜在的致病菌，如大肠杆菌、肠道球菌、念珠菌、加德纳菌(gardnerella)、克雷伯氏菌(klebsiella)和梭状芽胞杆菌，也有较不致病的菌如乳杆菌和双歧杆菌。这种精巧的菌群平衡状态的失衡，在病因学上与多种泌尿生殖道疾病和/或肠胃道疾病是紧密相关的；这种失衡还造成了致病菌种增殖并占据优势。因此，建立和维持这种精巧的菌群平衡，对于维持最佳健康状态是至关重要的。
一种建立或维持身体的菌群方法是服用乳杆菌。促进乳酸菌(如乳杆菌或双歧杆菌)的生长。例如，在1992年4月4日授予Bruce等人的加拿大专利1,298,556,1993年5月27日出版的Reid等人的PCT申请WO 93/09793和1995年1月5日授予Tosi等人的美国专利5,176,911中已提出用乳杆菌来治疗泌尿生殖道和肠道疾病。研究者的假设是，乳杆菌通过粘附于肠道或阴道的上皮细胞来提供宿主保护。
尽管这些建议的一些要素已被确认，但对单独使用乳杆菌来治疗泌尿生殖道和肠道感染也提出了几点疑问。1)乳杆菌的不同菌株间在与上皮细胞表面的粘附程度方面存在差异。Reid,G等，对乳杆菌菌株可能影响其在尿道中细菌干扰作用的特性的研究(Examination of strains of Lactobacillus for properties that mayinfluence bacterial interference in the urinary tract),J.Urol.,138:330-335；1987。2)在病原性侵染之前先建立起乳杆菌菌落才能最可靠地驱除致病微生物。Hawthorn,L.A.等，利用嗜酸乳杆菌排除尿道病原菌与聚合物表面的粘附(Exclusion of uropathogen adhesion to polymer surface by Lactobacillus acidophilus),Jour.Biomed.Mat.Res.,24；39-46；1990；但是，这实际并不存在而仅存在于体外设计中。3)活的有生命的细菌培养物经口服消化后还存在能否存活的活性问题。临床研究发现，并非所有的细菌都能经受胃及上消化道的消化液而存活。而那些确实存活下来的也可能出现因活力太弱或数量太少而无法有效地在下消化道内形成菌落。而且，认识到在本领域需要可靠的临床研究，部分研究者对某几种乳杆菌的效力进一步表示关切。所以，虽然发明了有关乳杆菌的产品，目前仍然有必要设法改善用于泌尿生殖道和胃肠道的含乳杆菌的组合物。
本发明人已发现，将杜鹃花科植物或提取物与微囊化了的乳杆菌和/或双歧杆菌掺合而得的组合物，是通过改变病原体与细胞组织的相互作用而治疗和/或预防泌尿生殖道和肠道疾病的更好的组合物。最近研究也揭示了这些提取物在治疗泌尿道感染方面的价值。研究人员已观察到，越橘属的多个品种(如蔓越橘(cranberry)和乌饭树(blueberry))含有一种聚合物，该化合物会抑制常见泌尿道病原体(如大肠杆菌)粘附于泌尿道内的感染位点。Ofek I等人，“蔓越橘和乌饭树汁的抗大肠杆菌粘附的活性”(Anti-Escherichia coli Adhesin Activity of Cranberry and BlueberryJuices)，《(新英格兰医学杂志》(N Engl J Med),1991；324；1599。出乎意料地是，本发明的组合物能提供更好的环境、更有利于乳酸细胞的定居。所以，本发明的目的之一是提供作为补充饮食的组合物。
本发明的另一目的是提供经改进的组合物，其中包含微囊化乳杆菌和/或双歧杆菌的活菌落。
本发明的另一目的是提供有效预防和/或治疗泌尿生殖道和肠道疾病的组合物。
本发明的另一目的是提供一种阴道使用的局部用的组合物。
本发明的另一目的是提供有效预防和/或治疗泌尿生殖道和肠道疾病的方法。
通过下面的描述，这些及其他目的会变得很清楚。
发明概述本发明涉及治疗或预防泌尿生殖道和肠道疾病的组合物，它包括a．)抗粘附量的的杜鹃花科植物中至少一种或其提取物；和b)选自乳杆菌、双歧杆菌及其混合物中至少一种的微囊化细菌活菌培养物。
本发明还涉及上述组合物另含有促进乳酸菌生长的生长因子(growthfactor)。
如本文所用，术语“泌尿生殖道和肠道组合物”指在常规使用过程中可以被含在口腔中、或吞服、或局部施用而提供泌尿生殖道和/或肠道内的活性的产品。
如本文所用，术语“抗粘附量”指可有效减少泌尿生殖道和/或肠道的上皮和/或粘膜系上病原性微生物数量的量。
如本文所用，术语“泌尿生殖道”指与尿液生成和排泄以及与生殖有关的器官系统。
如本文所用，术语“肠道(的)”指肠的，或与肠有关。
如本文所用，术语“非病原性”指在健康哺乳动物体内基本上缺乏引起疾病或异常的能力。“健康”指没有潜伏的疾病和/或免疫抑制。
本文中使用的所有百分比和比例都按重量计，除非另有说明。而且，本文中所有的测量都是在25℃进行的，除非另有说明。
发明详述在下面段落中描述本发明的组合物必要组份和任选组份。
必要组份杜鹃花科植物或提取物由约110个属和4000个种所组成的杜鹃花(欧石南)科，是杜鹃花目中最重要的科，包括了众多不同的产果的灌木和常绿植物。在归入杜鹃花科中的属包括越橘属(Vaccinium)、熊果属(Arctostaphylos)、白珠树属(Gaultheria)、和无药芒属(Gaylussacia)。熊果属包括诸如平铺白珠树(checkerberry)和熊果(Uva ursi)之类的物种。其他可食用的果子，如匍匐白珠树或moxie梅(moxie plum)属于白珠树属。黑果木是无药芒属中熟知的物种。因其果实而闻名的越橘属，包括某些最常见的浆果，其中包括乌饭树(如V.australe)、蔓越橘(如V.macrocarpon)和欧洲越橘(如V.myrtillus)。如本文所提到，术语“浆果”指莓子、核果、梅子等果子。
大肠杆菌的粘附作用主要是由微生物上翘起的毛发状的菌毛(或菌发)上的粘附素造成。这些粘附素被分为MS(甘露糖敏感型)和MR(甘露糖耐受型)。与大多数果子相似，杜鹃花科果子含有果糖，这是MS粘附素的抑制物。然而，最近揭示，杜鹃花科物种植物或提取物中还含有一种未被鉴定的、不可透析的聚合化合物，该化合物可抑制与导致肾盂肾炎的(pyelonephritogenic)大肠杆菌菌株相关的MR粘附素。根据在越橘属物种中的研究，已发现这种未被鉴定的聚合化合物可抑制大肠杆菌的尿液和粪便分离株的粘附作用，其中尿道分离株被抑制的程度更大。Ofek,I.等人，“蔓越橘和乌饭树汁的抗大肠杆菌粘附素的活性”，《新英格兰医学杂志》(N Engl.J Med),1991；324；1599。还报道，摄入大量的蔓越橘果汁增加了尿液中马尿酸的含量(一天增加数克)。这种马尿酸排泌增加伴随着尿液pH的小幅下降。体内试验已表明，马尿酸在pH 5.0时，对于常见的尿道病原体有抑菌作用，但该作用随着尿酸pH的上升而明显减小。Papas,N.P.等人“蔓越橘汁在治疗尿道感染中的作用”(Cranberry Juice Inthe Treatment of Urinary TractInfection),Southwestern Medicin,47:No.1(1996年1月)。本发明的杜鹃花科物种可有效地抗其他病原体(如绿脓假单胞菌)，这公开于1995年12月12日授予Walker等的美国专利No.5,474,774中，该文献全部在此引用作为参考；对乳杆菌粘附于细胞的粘附作用则没有观察到。不受任何理论的限制，据信由杜鹃花科植物或提取物造成的病原体抑制作用可导致致病作用的减少，从而给乳杆菌提供更有利，拮抗性更少的环境，以便开始粘附并维持粘附。如本文所用，术语“抗粘附活性”指数量能有效地抑制致病微生物粘附于泌尿生殖道和/或肠道的上皮或粘膜层。
可用于本发明组合物的植物或提取物来自杜鹃花科中范围广大的各属，其中包括但并不限于越橘属(Vaccinium)、熊果属(Arctostaphylos)、白珠树属(Gaultheria)、和无药芒属(Gaylussacia)。优选的物种包括V.australe、伞房花越橘(V.corymbosum)、V.occidentale、卵叶越橘(V.ovatum)、黑果越橘(V.myrtillus)、小叶越橘(V.parviflium)、笃斯(V.uliginosum)、V.macrocarpon、V.oxycoccus、V.erythrocarpum、越橘(V.vitis-idaea)、V.australe、V.macrocarpon。最优选的越橘属中用于本发明的物种是V.australe、V.macrocarpon和黑果越橘。还可以使用杜鹃花科植物和/或提取物的混合物。
本发明的植物或提取物宜为浓缩的，其比例为至少约4磅植物提浓物或提取物浓缩成一磅浓缩物，更佳地约为4-50磅植物提浓物或提取物浓缩成一磅浓缩物。每个单位剂量中杜鹃花科提取物的含量至少为10毫克，较佳地为约100毫克-约18克，最佳地为约250毫克-约4克。每个剂量产品中所含的提取物的量，可根据剂型调节。例如，用于饮用混合物中的粉末形式的提取物量可达每个剂量18克之内，而用于可吞服胶囊中的量可达约4克。杜鹃花科植物或提取物的优选含量，是使尿道和/或肠道中上述未鉴定的、不可透析的聚合化合物的液体浓度达到约12-约25微克/毫升。而且，本发明的植物或提取物宜保留超过2.5％其总含酸量和超过约0.1％其苯甲酸含量。选择这一水平以提供所需程度的抗粘附素活性，该水平也可根据需要进行改变。蔓越橘和蔓越橘提取物可用于治疗和/或预防尿道感染，还可以用作阴道除臭剂。
乳杆菌或双歧杆菌的菌种本发明的另一必需组份是微囊化乳杆菌或双歧杆菌的活菌落。乳杆菌属的细菌的特征是杆形、革兰氏阳性和不形成孢子的细菌。在乳杆菌科中，乳杆菌属寄居在动物和人的泌尿生殖道和肠道中，它们是产乳酸的细菌组中的主要成员。在商业上，各种不同的乳杆菌属菌种被用于生产酸奶、奶酪、和酸乳。乳杆菌还在生产发酵蔬菜制品(如酸菜和泡菜)、饮料(如啤酒、酒和果汁)、酵头面包和某些香肠等方面起重要作用。
适用于本发明的乳杆菌菌种是这样的细菌，它们(1)容易粘附于哺乳动物泌尿生殖道或肠道的上皮细胞；(2)产生过氧化氢；(3)促使低pH值；并产生细菌素。如本文所用，“细菌素”指由细菌合成的蛋白质类型的杀细菌物质，这些物质只有狭窄的活性范围，只抑制相同或紧密相关菌种的菌株。细菌素似乎能够导致取代或抑制其他细菌的生长，因此对于生长于雌性生殖道生态系统中的微生物而言是有利的。优选的乳杆菌属菌种包括嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、L.catenaforme、短乳杆菌(L.brevis)、L.bulgaricus、乳酸乳杆菌(L.lactis)、L.reuterii、L.gasseri、瑞士乳杆菌(L.helveticus)、干酪乳杆菌(L.casei)、胚芽乳杆菌(L.plantarum)、戴尔布吕克氏乳杆菌(L.delbrueckii)、嗜热乳杆菌(L.thermophilis)、L.jensenii、L.crispatus、L.rogosae和发酵乳杆菌(L.fermentum)。最优选用于本发明组合物的乳杆菌菌种是嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、L.crispatus、发酵乳杆菌、和胚芽乳杆菌。较佳地，本发明的乳杆菌属菌种是产过氧化氢的，例如嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、L.catenaforme、干酪乳杆菌(L.casei)、L.crispatus、戴尔布吕克氏乳杆菌(L.delbrueckii)、L.jensenii、L.rogosae。考虑到它们的粘附性能，发酵乳杆菌(L.fermentun)、L.gasseri和胚芽乳杆菌(L.plantarum)也是优选用于此处的。
也寄居在哺乳动物的泌尿生殖道和肠道中并可用于本发明组合物的是双歧杆菌属的菌种(放线菌科)。双歧杆菌菌种是非耐酸(non-acid-fast)的、非能动型(nonmotile)的、革兰氏阴性杆菌。产乳酸和产乙酸的双歧杆菌还被认为是哺乳动物泌尿生殖道和肠道菌群的重要调控者。适用于本发明组合物的菌种包括(但并不限于)B.longum、B.Breve、双叉乳杆菌(Lactobacillus Bifidus)和双叉乳杆菌的宾夕法尼亚亚种(Lactobacillus Bifidus subsp pennsylvanicus)。优选用于本发明组合物的是B.Bifidum，最优选的是B.Bifidum subsp pennsylvanicus。
还可使用乳杆菌和/或双歧杆菌的混合物。上述的任何菌种可以从市场上购得，也可以通过实验室培养而获得。
作为内核和/或包衣组份的乳杆菌和/或双歧杆菌的浓度为每个单位剂量至少约103个细胞，较佳地浓度为每个单位剂量约104-约1012个细胞，最佳地浓度为每个单位剂量约106-约1010细胞。如本文所用，术语“单位剂量”指物理上独立分离的单元，适合作为单元剂型给哺乳动物使用，每个这种单元含有经计算可产生所需治疗效果的预定数量的活性成分和药学上可接受的载体。含量水平可加以选择，以提供所需程度的泌尿生殖道和肠道活性，该含量也可按需要而改变。在室温下和制造过程中，乳杆菌的活力会减低4-6倍，因此根据制造条件，可加入过量的乳杆菌以维持每个最终单位剂型中有合适数目的活微生物。或者，在数值用其他测量值表示(例如用总蛋白浓度表示)时，可给病人施用相当于这些浓度的微生物。
本发明的乳杆菌和/或双歧杆菌还必须是微囊化的。可将去除生长培养基后经低温干燥的活的乳杆菌和/或双歧杆菌加以微囊化。细菌可以购买，也可以由实验室菌株制备。合适的培养基包括MRS,Thayer-Martin培养基，胰蛋白酶大豆培养基、脑-心浸润培养液(Brain-Heart Infusion Broth)，或者任何其它用于培养所述细菌的强化培养基，因为具体的培养基对本栓剂的成功并不是关键性的。唯一重要的因素是通常由标准临床实验室用稀释方法测定的微生物的活力和数量，这些方法例如将定量稀释后的细菌稀释液铺平在血液琼脂培养板或其它强化培养基上，然后在37℃、5-10％二氧化碳氛围中培养24至48小时，然后进行菌落计数。通过在0℃至4℃以14,000xg离心来去除营养培养基，然后在初次离心之后用无菌平衡盐水和5％葡萄糖溶液洗涤至少3次。然后用液氮将细菌“快速冷冻”，然后在高度真空中低温干燥。然后按照常规微囊化技术将细菌微囊化。合适的微囊化方法可参见在此参考的1995年11月4日Ford的美国专利5,466,463和1995年4月18日Tice等的美国专利5,407,609。
任选组份乳杆菌生长因子促进乳酸菌生长的生长因子也是对本发明组合物有助益的。“促进乳酸菌生长的生长因子”在本文中指为促进产乳酸菌生长而提供必需的食物和/或能量来源的营养源或培养基。生长因子最好选择性地确保和维持乳酸菌，最好是乳杆菌和/或双歧杆菌的生长，但是不促使病原菌的过度生长。当生长因子包含可发酵的糖、蛋白胨、肉膏或酵母提取物时，细菌和/或菌落生长所必需的各种营养需求一般能够得以满足。补充以西红柿汁、锰、乙酸盐和油酸酯，特别是吐温80，对于大多数菌种来说具有刺激生长作用或者甚至是必需的，所以，大多数MRS培养基中包含以上成分。适应特殊基质的乳酸菌可能需要特殊的生长因子。
合适的生长因子包括例如，但是不限于，酵母提取物；神经节苷脂；水杨苷；单糖、二糖和多糖，例如糖原、葡萄糖、果糖、鼠李糖、二蔗酮糖、甲基-α-D-甘露糖苷、p-硝基苯酚-α-D-甘露糖苷、麦芽糖、麦芽糖糊精、糊精、葡聚糖、果聚糖、唾液酸和N-乙酰葡糖胺，以及寡聚糖，例如但不限于寡聚果糖、寡聚半乳糖和大豆寡聚糖。纤维或车前草(psyllium)之类的可发酵基质和诸如瓜尔树胶和黄蓍胶之类的树胶一样也可以用于本发明。同样，诸如胨、角蛋白之类的蛋白质类物质；蔬菜；大豆(soy)，诸如月桂酸的不饱和脂肪酸，以脂磷壁酸为例的磷壁酸，以及以甘油磷酸酯或β-甘油磷酸酯为例的酯类也可以用作生长因子。生长因子最好选择性地确保和维持乳酸菌，最好是乳杆菌和/或双歧杆菌的生长。用作本发明组合物中生长因子较好的包括乳糖、二蔗酮糖、鼠李糖、寡聚糖和糖原。也可以使用以上营养素的混合物。
更好的是，本发明的生长因子是寡聚糖，例如但不限于，寡聚半乳糖、大豆寡聚糖和寡聚果糖。寡聚糖具有生物粘附性，这有助于固定这些生长因子的位置，更便于被乳酸菌所接近。最适合在此使用的是寡聚果糖。例如乳杆菌和双歧杆菌的乳酸菌部分地利用寡聚果糖作为能源，即通过发酵将其转化成乳酸或乳酸与乙酸和CO2的混合物。由这一糖发酵产生的乳酸和其它脂肪酸起着维持低pH的作用，低pH是防止病原菌集结的重要调控机制之一。
从化学上说，寡聚果糖是菊糖的寡糖部分。它由GFn和Fn型分子(G=葡萄糖；F=果糖；n=果糖基团的数量)按约2∶1的比例由β(2,1)键连接而成，n=2-6，平均聚合度为4。菊糖是用热水从菊苣根中萃取得到的，由GFn型分子构成，n高达60，平均聚合度为10。适合用于本发明的寡聚果糖可以也可以不以非果糖基单元代替其果糖基末端单元。这对其它寡糖的糖基(osyl)末端单元也一样。非果糖基单元包括，但不限于，多元醇，例如木糖酵、甘露醇和山梨醇。最适合用于本发明组合物的寡聚果糖是菊糖或寡果糖。也可以使用以上营养素的混合物。
除了理论所述之外，据信，随着消化作用，生长因子会增加乳杆菌和/或双歧杆菌的存在数量从而取代上皮细胞表面的病原性微生物。乳杆菌和/或双歧杆菌数量的增加竞争性地驱除病原菌，使得后者被取代并被排泄；结果是宿主病原菌的全面减少。而且，由于阴道感染通常被认为是由病原菌从直肠向阴道迁移造成的，所以，随着迁移性病原菌数量的减少，入侵阴道的病原菌数量也减少了。
在每单位剂量的本发明组合物中，生长因子的含量以约5％至约75％为宜，约20％至约70％更好，约30％至约65％则最好。
包衣物质本发明组合物还可以包含包衣物质。适用于本发明组合物的包衣物质可以是水溶性的和非水溶性的。本发明的包衣物质最好干燥至水活度(water activity(Aw))低于约0.6，低于约0.45更好，低于约0.3则最好。“水活度”是本领域公知的的衡量相同温度下物体例如食物(固体或液体)上方的平衡水蒸气压力与纯水蒸汽压之比的量度。有关水活度更详细的说明可参见UK专利2,014,429。
适用于本发明组合物的水溶性包衣包括糖或有机物包衣。用于本发明组合物的糖包衣可以是糖浆，其中含有单糖或两种或两种以上糖单元的聚合物。有机物包衣也可以用于本发明组合物。可使用的有机聚合物或共聚物包括具有多个羧酸或酯基团的那些。这些基团主要负责与活性成分发生物理或化学相互作用而得到有效的遮味性能。较好的聚合物或共聚物含有乙烯基和丙烯酸和/或酯基团，或者羧酸和/或酯基团。本领域一般技术人员能够容易地确定具体的聚合物/共聚物。一般说来，可以使用就安全性和毒性而言在药学上可接受的聚合物/共聚物。这类聚合物/共聚物宜可溶于某种溶剂或混合溶剂。这类聚合物/共聚物包括聚合或树脂类物质，例如丙烯酸和取代丙烯酸的共聚物；纤维素酯；乙烯基和取代乙烯基酯；多磺酸、其酯和其酰胺。具体的例子包括例如虫漆和玉米蛋白的天然物质和例如乙基纤维素、纤维素乙酸酯、纤维素乙酸邻苯二甲酸酯、乙酸和/或邻苯二甲酸乙基乙烯酯、聚乙酸和/或邻苯二甲酸乙烯酯、甲基丙烯酸乙酯和/或甲酯、酯类和共聚物、羟基烷基纤维素乙酸酯和/或邻苯二甲酸酯之类的合成和半合成物质。这类混合物包括以商品名出售的市售物质例如Eudragit S(Rohm Pharma的商品名)和Phthalavin(Colorcon的商品名)。本发明的包衣物质最好是甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯的聚合物混合物。也可以使用糖和有机物包衣物质的混合物。
本发明的一种特殊实施方式包括含有杜鹃花科中至少一种的内核和含有上述被微囊化细菌中至少一种的活菌培养物的包衣。或者，微囊化的乳杆菌可以位于内核而包以含杜鹃花科的包衣。后一种可用于提供适合乳杆菌存活和生长的酸性的环境。还可以再加上其它包衣层。
或者，可以包含蛋白质样包衣组份。为了用于改善胃肠道疾病，这类组份可以含有被支链氨基酸修饰的蛋白。例如，在氨基酸乙基L-亮氨酸(16.1份)、乙基L-异亮氨酸(7.4份)、乙基L-缬氨酸(10.2份)、盐酸半光氨酸(1.5份)和碳酸钠(26份)存在下，在水中在40℃用木瓜蛋白酶处理乳清粉末20分钟来制造含10％游离氨基酸和43％支链氨基酸的包被粉末。支链氨基酸修饰的粉末可以与脂肪、糊精、盐、维生素等混合制成片剂。
片剂包衣物质的其它例子有可改善片剂口感的沸石和粘土。沸石已被用作牲畜用细菌性饲料的包衣。例如，在畜牧业中，富马酸硫粘菌素被溶解在甲醇中，以丝光沸石或淀粉作为载体，干燥并进一步与载体预混合成缓释型包衣颗粒剂。片剂包衣物质的其它例子还包括复杂的糖和内含复合物。
本发明的糖和/或有机物包衣可以利用常规方法来涂施，其中包括机械方法，例如衣锅包衣法、空气悬浮技术、多孔离心技术和喷雾干燥技术，以及理化方法，例如凝聚-相分离。在本文参考的《雷明顿药物科学》(Remington’s PharmaceuticalSciences)(Alfonso Gennarol,editor),1666-1675(1990)中对包衣过程有更为详细的论述。
缓冲剂本发明组合物中还可以含有缓冲剂。对于口用组合物，可以将pH缓冲至酸性来改善口味。对于用于阴道的产品，适合用作本发明组合物中的缓冲剂是能够维持约3.0至约5.5的泌尿生殖系统pH值的那些。任何温和的药学上可接受的酸，除了在此公开的杜鹃花科中的那些，都可以使用。合适的酸包括硼酸，或有机酸，例如奎尼酸、丙酸、苹果酸、丙酮酸、马尿酸、酒石酸，山梨酸、苯甲酸、乳酸、维生素C、柠檬酸或乙酸，并与其相应的钠盐或其它药学上可接受的盐组合(直至达到所需的pH)。在使用缓冲剂时，本发明组合物最好缓冲至pH约3.5至约5.0，约3.7至约4.7更好，而且最好使用乳酸与乳酸钠，或者乳酸/乳酸钠和苯甲酸的组合，或者乳酸/乳酸钠与丙酸的组合。
其它植物提取物其它治疗性和/或药用植物或提取物也可以加在本发明组合物中。这类植物或提取物包括松果菊属、葱属、bucha、刺柏属、人参属、蒜素、小球藻、藻素等。也可以使用以上其它植物或提取物的混合物。
营养添加剂本发明组合物中还可以加入营养添加剂。这类添加剂包括，但不限于，除了前文提及作生长因子素之外的蛋白质和糖、维生素、矿物质、氨基酸例如甘氨酸、植化物质(phytochemicals)，及其混合物。或者，这些添加剂可以先加到本发明的乳杆菌和/或双歧杆菌中。
药物活性成分本发明组合物还可以与药物活性成分合用。药物活性成分最好选自镇痛剂和/或胃肠道药物中至少一种。当加有药物活性成分时，必需采取适当的措施防止其与本发明的微生物接触。这类措施包括，但不限于，如Ford的美国专利5,466,463中所述改变微囊化过程。
本发明优选的镇痛剂包括例如对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸、吲哚美辛和布洛芬的光学活性异构体或外消旋体、萘普生、氟比洛芬、卡洛芬、噻洛芬酸、环洛芬、酮洛芬、酮咯酸、依托度酸、吲哚美辛、舒林酸、非诺洛芬、双氯芬酸、吡罗昔康、苄达明(benzydomine)、萘丁美酮，其药学上可接受的盐，以及上述的混合物。
本发明优选的胃肠道药物包括抗胆碱药，其中包括抗胆碱药，包括阿托品、克利溴铵(clidinium)和双环维林；抗酸药，包括氢氧化铝、碱式水杨酸铋、碱式柠檬酸铋、二甲硅油、碳酸钙水化铝酸镁；H2受体拮抗剂，包括西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁和雷尼替丁；缓泻剂，包括多库酯钠、酚酞和鼠李蒽吩(casanthol)；胃保护剂，包括硫糖铝和硫糖铝湿凝胶；胃动力药，包括甲氧氯普胺和西沙吡利；质子泵抑制剂，包括奥美拉唑，和止泻药，包括地芬诺酯、白陶土果胶、绿坡缕石(attapulgite)和洛哌丁胺。
载体物质本发明组合物可以加到许多不同的载体中，载体主要取决于组合物的最终用途。这些载体是药学上可接受的，包括口用的和局部使用的组合物。它们可以是完全惰性的，或者包含或就是其它活性成分，但是载体必需与在此公开的组合物相容。“相容性”在此指，载体组份可以与本发明组份以及载体组份彼此之间相互混合，要以不发生会在一般使用情况下明显降低组合物的活性或生命活力的相互作用的方式混合。当然，载体物质必须具有足够高的纯度和足够低的毒性，使得它们适合用于被接受治疗的人。较好的是，本发明组合物约含0.01％至约99.99％一种或多种载体物质。
适合本发明组合物局部使用的载体包括栓剂、阴道片剂或胶囊、阴道栓剂、乳膏剂、灌洗用溶液、乳剂、泡沫剂、凝胶、搽剂、油剂和软膏剂、粘膜灌洗剂。
乳膏剂、凝胶剂和其它基础制剂可以用于将本发明组合物局部使用于例如男性或女性的生殖器(包括阴户和阴道)，它们是利用制备半固体组合物的常规方法制备的，使用的赋形剂例如凡士林、石蜡、凡士林油、植物油、动物油、固体和液体的合成甘油酯、蜡、羊毛脂、羊毛醇(lanolin alcohols)、山梨酯、脂肪醇、液体/固体聚乙二醇、丙二醇、聚乙烯、淀粉、丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、纤维素和羧基乙烯基聚合物的衍生物。
阴道栓剂、一般栓剂、阴道胶囊或片剂和泡腾片也可以用在本发明的局部预防使用中。阴道栓剂与一般栓剂类似，呈卵形，主要使用的赋形剂是半合成的甘油酯和聚乙二醇，还有可选性的乳化剂和表面活性剂。
阴道胶囊是凝胶状的药袋或药囊，其中是进一步分开的悬浮液，后者通常是无水的，而且含有液态石蜡、凡士林、植物油和半合成油和增稠剂。其形状适合用于阴道的片剂含有作为主要赋形剂的乳糖、淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮、纤维素衍生物、硬脂酸镁、乙二醇。泡腾片含有为了发生泡腾而产生二氧化碳所必需的化学组份(即碳酸氢钠加柠檬酸或酒石酸)。
本发明组合物还可以加到纺织布或无纺布中并通过后者局部使用，后者例如纸巾、擦手纸、卫生棉、裤衬、绵垫、尿片、失禁症护理产品等。在此，较好的是使用无纺布。适合使用本发明组合物的无纺布可参见在此参考的Thaman等的美国专利4,891,227。
口用剂型也可以作为本发明的载体。这些剂型中含有适合给人或较低级动物口用的相容性固体或液态填料稀释剂或胶囊化物质。
口用液态剂型可包含将本发明组合物溶解或悬浮在可饮用的液体中，例如无菌水或洁净水中。或者，液体或干燥口服剂型包含含有所述剂型的肠衣胶囊。合适的形式包括乳液、悬浮液、溶液、糖浆和酏剂，其中含有本领域常用的惰性稀释剂，例如纯水、糖、多糖、硅胶、明胶或醇。这些惰性稀释剂不积极参与本发明的治疗性作用。但是，对于这类液体形式，当与乳杆菌一起存在有游离水时，可能需要特别注意防止乳杆菌的发酵或降解。除了惰性稀释剂之外，这类组合物还可以含有润湿剂、乳化剂、悬浮剂、和其它治疗性活性成分。有关液体和液体样剂型的更为详细的说明可参见在此参考的《雷明顿药物科学》第17版，Mack出版公司，Easton,Pa(1990)，第1519-1544页。
片剂可以是压制片、模制片、研磨片、肠衣片、糖衣片、膜衣片或多层压制片，其中含有合适的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂和引流剂。
也可以使用软性或硬性明胶胶囊。较好的是，明胶外壳基本上是透明的，这样可以改善胶囊的外观。软性或硬性明胶囊通常含有明胶、增塑剂和水。用于制造这类胶囊的起始明胶物质通常来自胶原物质的部分水解。适合制造胶囊的明胶可以向Sigma Chemical Company,St.Louis,Mo.购买。为了形成明胶壳，可加入一种或多种增塑剂。可用于本发明的增塑剂包括甘油、山梨糖醇酐、山梨醇或类似的低分子量多元醇，及以上物质的混合物。
制造固体口用剂型的技术和配方可参见在此参考的“固体口用剂型”《现代药学》(“Solid Oral Dosage Forms”Modern Pharmaceutics)第7卷，(Banker和Rhodes编辑)，359-427(1979)。制造片剂(压制和模制)、胶囊(软性和硬性)、锭剂和丸剂的技术和配方可参见在此参考的《雷明顿药物科学》(Arther Osol编辑)，1553-1593(1980)和Borkan等的1990年6月19日的美国专利4,935,243。用于配制口用剂型的药学上可接受的载体和赋形剂的具体例子可参见在此参考的1975年9月2日Robert的美国专利3,903,297。
或者，本发明组合物可以制成含于冷冻干燥或低温干燥的片剂中。冷冻干燥或低温干燥可以通过将干燥的组合物形成开放性基质网络结构而有助于组合物的崩解。在大多数情况中，这样可造成液体介质的快速浸润，促进产品的及时释药传递。合适的冷冻干燥方法是本领域熟知而且常用的。任何合适的常规冷冻干燥方法均可使用。较好的方法之一是快速冷冻组合物然后干燥至最终含水量为约2％至约5％。合适的冷冻干燥和生产方法可参见在此参考的1987年2月17日Dacies的美国专利4,642,903，1990年8月7日Blank等的美国专利号分别为4,946,684，1981年12月15日和1983年2月1日Gregory等的美国专利4,303,502和4,371,516，和1993年2月23日Iles等的美国专利5,188,825。
同样，本发明组合物也可以真空干燥。真空干燥包括在组合物的皱缩(collapse)温度以上至少部分干燥组合物。相反，冷冻干燥涉及在组合物皱缩温度以下干燥组合物。任何合适的真空干燥方法均可使用。合适的真空干燥方法可参见在此参考的1994年3月29日Pebley等的美国专利5,298,261。
另一种可用于本发明的制片技术是Janssen Pharmaceutica Inc.开发的液/液萃取，其商品名为QuicksolvTM。在此参考的美国专利5,215,756对此技术进行了全面的说明。
本发明组合物还可以包含制药行业熟知的其它可选组份，各自的相应含量也是公知的，这类组份例如用于使最终成品可口和美观的天然或人造甜味剂、调味剂、色素、香精、缓冲剂等，用于延长保存期的例如丁羟基茴香醚或丁羟基甲苯的抗氧化剂和例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯、山梨酸钾或苯甲酸钠等防腐剂。优选的可选组份还包括咖啡因。
本领域一般技术人员通过常规实验将很快认识到或确定其它合适的组份、稀释剂和剂型。而且，各种组合物的给药可以通过本领域一般技术人员熟知的标准方法进行。
实施例以下实施例进一步说明了本发明范围内的实施方式。这些实施例仅以说明为目的，而不应被理解成是对本发明的限定，因为可能有许多改变也是在以上所述的本发明的精神和范围之内。
实施例Ⅰ可以将乳杆菌和/或双歧杆菌的培养物冷冻干燥(或者购买冻干制品)。为了提供冷冻干燥的培养物，在无菌营养培养基(例如胰蛋白酶大豆琼脂培养液)中培养乳杆菌和/或双歧杆菌的接种物。离心去除培养基。分离后的细菌用平衡盐水和5％葡萄糖溶液洗涤。然后用液氮“快速冷冻”细菌，并真空冷冻干燥。然后对冻干产品进行细菌平板计数检测，然后稀释，使得单位剂量组合物的平板计数为约103至约1012。
实施例Ⅱ在0至4℃，将如上所述新鲜制得的、洗涤过的低温干燥的细菌在10毫升5％葡萄糖生理盐水溶液中悬浮成每毫升含1至1010个细菌的浓悬浮液。为了维持会在室温下失活的乳杆菌的生命活性，所有步骤均在0至4℃范围内进行，除非另作说明。快速而温和搅拌细菌悬浮液，同时加入0.2-0.4毫升藻酸钠溶液(1.5％(重量/体积))。然后利用氮气流通过一带套管的14号针头将上述混合物转移到4升园底烧瓶中。4升园底烧瓶事先用5％白蛋白溶液洗涤，然后在65℃至少加热了10小时，过程中使用的针头和试管也用相同的方法处理过。
然后，利用一大注射器和氮气流令上述混合物在加压条件下通过一30号多研磨针头。很小的液滴在针头端形成，被30号针头周围的氮气和空气流干燥，然后这些液滴被收集在1.3-2％的氯化钙水溶液中，并在此胶凝。然后，用0.08-0.13％的2-(N-环己基-氨基)乙磺酸(CHES)溶液和1.0-1.5％氯化钙溶液至少洗涤3次。
胶凝后的液滴或小球再用至少5倍过量的0.1％CHES和1.1％氯化钙和生理盐水溶液洗涤。然后将洗涤后的小球“快速冷冻”在液氮中，然后低温干燥。完成以上步骤后，胶囊化了的微生物就可用在本发明的制剂中了。
实施例Ⅲ利用常规混合方法和制片技术混合以下组份制成本发明的片剂。
成分 ％(重量)蔓越橘浓缩提取物 37.300％乳杆菌129.900％K2932(5％乙醇溶液)213.400％
Avicel(pH101)313.400％Explotab41.8％滑石粉3.600％硬脂酸镁 0.600％1微囊化的干酪乳杆菌(Lactobacillus Caseii var.rhamnosus)(108cfu/g)2聚乙烯基吡咯烷酮3微晶纤维素的商品名，是一种高度纯化的颗粒状的纤维素4一种淀粉乙二酸钠的品牌蔓越橘提取物用一半Acicel和K2932的乙醇溶液制成颗粒。然后通过一12目的筛，并在120°F干燥。将干燥后的颗粒过20目的筛。在过筛后的颗粒中加入乳杆菌，剩余的Acicel、Explotab和滑石粉，混合至均匀。然后在均匀的混合物中搅拌加入硬脂酸镁。然后利用常规压片技术将形成的颗粒化混合物压片。
实施例Ⅳ利用常规混合技术混合以下组份制成本发明的口服胶囊。
成分％(重量)蔓越橘浓缩提取物29.900％双歧杆菌115.000％寡聚果糖229.900％Avicel322.400％Ac Di Sol42.800％1微囊化的双歧乳杆菌(Lactobacillus bifidus subsppennsylvanicus)(108cfu/g)2按NutraFlora FOS名称购自Golden Technologies Company,Inc.
3微晶纤维素的商品名，是一种高度纯化的颗粒状的纤维素4一种交联羧甲基纤维素钠的品牌在一V-混合仪中将蔓越橘提取物、寡聚果糖、乳杆菌培养物、Avicel和AcDi Sol混合均匀。然后将单位剂量的形成的混合物装入大小合适的硬明胶胶囊中。
实施例Ⅴ利用常规混合技术混合以下组份制成本发明的局部使用凝胶剂。
成分 ％(重量)蔓越橘浓缩提取物 0.50％乳杆菌12.50％
寡聚果糖26.00％聚丙烯酰胺和C13-14异链烷烃和Lauteth-734.00％PPG-14丁基醚48.00％纯水 余量1微囊化的干酪乳杆菌(Lactobacillus Caseii var.rhamnosus)(108cfu/g)2按NutraFlora FOS名称购自Golden Technologies Company,Inc.
3按Speigel名称购自Seppic Coporation。
在一大小合适的容器中加入水。在中速(300rpm)搅拌的同时，在水中加入聚丙烯酰胺和C13-14异链烷烃和Lauteth-7，形成水相。将PPG-14丁基醚置于另一容器中，并加盖。使用Lightnin三叶搅拌器在PPG-14丁基醚中加入蔓越橘提取物和寡聚果糖，并低速(100rpm)搅拌直至蔓越橘提取物和寡聚果糖溶解。将乳杆菌加入水相并低速(100rpm)搅拌直至形成均匀的溶液。将PPG-14丁基醚缓慢加入水相形成凝胶。形成的凝胶用中速搅拌至均匀。
权利要求
1．一种用于治疗或预防泌尿生殖系统和肠道疾病的组合物，它包含a)抗粘附量的杜鹃花科植物中至少一种或其提取物；和b)选自乳杆菌、双歧杆菌及其混合物中至少一种的微囊化细菌的活菌培养物。
2．根据权利要求1所述的组合物，它还包含选自二蔗酮糖、鼠李糖、寡糖、糖原及其混合物的生长因子。
3．根据权利要求1或2所述的组合物，它还包含Aw约低于0.6并有微囊化细菌悬浮于其中的包衣物质。
4．根据前述权利要求中任一项所述的组合物，它还包含选自栓剂、片剂、锭剂、口服液、悬浮剂、胶囊、明胶胶囊的载体。
5．根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、L.gasseri、L.catenaforme、干酪乳杆菌、L.crispatus、德尔布吕克氏乳杆菌、L.jensenii、L.rogosae、发酵乳杆菌、胚芽乳杆菌及其混合物，其中所述菌种的含量为每单位剂量组合物104至102个乳杆菌细胞，每单位剂量组合物106至1010个乳杆菌细胞则更好。
6．根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所用植物或提取物选自越桔属。
7．根据前述权利要求中任一项所述的组合物，它还包含选自维生素、矿物质、氨基酸、植化成份(phytochemicals)及其混合物的营养添加剂和/或选自松果菊属、葱属、bucha、刺柏属、人参属、蒜素、小球藻、藻素及其混合物的其它植物提取物和/或选自镇痛剂、胃肠道药及其混合物的药物活性成分。
8．一种治疗或防止泌尿生殖系统疾病的局部使用组合物，它包含a)抗粘附量的杜鹃花科植物中至少一种植物或其提取物；和b)选自乳杆菌、双歧杆菌及其混合物中至少一种的微囊化细菌的活菌培养物。
9．根据权利要求8所述的组合物，它还包含选自寡聚半乳糖、大豆寡糖、寡聚果糖及其混合物的寡糖生长因子和/或选自硼酸、马尿酸、酒石酸，山梨酸、苯甲酸、乳酸、维生素C、柠檬酸、乙酸、丙酸、其药学上可接受的盐，以及它们的混合物的缓冲剂。
10．根据权利要求8或9所述的组合物，它还包含选自栓剂、阴道片剂、阴道明胶胶囊、阴道锭剂、乳膏剂、凝胶剂、软膏剂、洗液、灌洗剂、粘膜灌洗剂、纸巾、擦手纸、裤衬、卫生棉、绵垫、尿片和失禁症护理产品等的载体。
全文摘要
本申请涉及用于预防和/或治疗泌尿生殖系统和肠道疾病的组合物,它包含有效量的杜鹃花科植物中至少一种植物或其提取物和选自乳杆菌、双歧杆菌及其混合物中至少一种的微囊化细菌。
文档编号A61K36/00GK1211188SQ97192254
公开日1999年3月17日 申请日期1997年2月6日 优先权日1996年2月14日
发明者P·J·萨格尔, A·M·卡雷拉 申请人:普罗克特和甘保尔公司