专利名称：富含天冬氨酰胺酶水溶液的生产工艺的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种抗癌药物的生产工艺，属于微生物发酵领域。
癌症是本世纪威胁人类生命最严重的疾病之一，目前主要的治疗手段还是依赖外科手续及放疗、化疗。这些手段虽能起到一定的疗效，但其副作用极大，患者一般都愿意用药物治疗。
在众多抗癌药物中，天冬氨酰胺酶是一种重要的抗癌药物，由于它能分解某些肿瘤细胞繁殖所必需的天冬氨酰胺，从而抑制了这些肿瘤细胞的繁殖，但对正常细胞则无损害，对白血病、急性淋巴肿瘤有较好的疗效。
本发明的目的在于提供一种用微生物发酵的方法来生产富含天冬氨酰胺酶的水溶液，从而可大大降低生产成本，提供给人们较廉价的抗癌、防癌疗效食品。
本发明是这样构成的它是将畜类瘦肉(或肝脏)经四级发酵，再经灭菌处理而得，具体工艺如下①、一级发酵处理选畜类瘦肉(或肝脏)为原料，天然根瘤菌类菌体，灭菌大豆浆；将根瘤菌类菌体清洗、消毒、粉碎后，制成悬液，按1∶10的比例将悬液注入大豆浆培养液中，在PH5、30℃～40℃的条件下发酵2小时，制成一级菌种；如此再反复做两次，制成三级菌种；将畜类瘦肉磨成肉浆，高温高压作灭菌及蛋白质变性处理；然后将等量三级菌种注入到等量肉浆中，在PH5、40℃条件下发酵2小时；再将发酵物高压加热15分钟，杀灭全部微生物；②、二级发酵处理制备畜、禽胃肠腺菌酶混合三级菌种(方法与制备上述三级菌种相同)；按生大豆浆1熟碗豆浆3熟天门冬浆2的比例混合制成培养基，倾注入一级发酵物中；
将混合三级菌种按0.5∶1的比例注入肉浆一级发酵物中；按每公斤加入10毫克VB5、2毫克VB2，在PH5.8、温度40℃条件下发酵1小时；③、三级发酵处理制备原料1/2量的生牛肉浆，倒入二级发酵物中，加入1.2％黄芪浆，在PH6，37℃条件下发酵1小时；每千克加入5毫克VB2，升温至45℃发酵1小时；加入熟葡萄甜酒，反应10分钟，高压加热20分钟，杀灭全部微生物；④、四级发酵处理制取0.5倍三级发酵物的葡萄糖水溶液，将畜、禽胃肠腺菌酶混合悬液按1∶10的比例倒入葡萄糖培养液中，加入37％黄芪浆，在PH6、37℃下发酵24小时，得到高浓度大肠杆菌；将三级发酵物与高浓度大肠杆菌混合，在PH8.5、37℃条件下发酵2小时；最后经过过滤、杀灭大肠杆菌及酵母，即得成品。
本发明与现有技术相比，具有工艺简单，原料及能源消耗低等优点，由于采用了天然组合多菌种和酶联合分阶段连贯式发酵的独特工艺，不需要提纯菌种和酶，不需要单独生产ATP、天冬氨酰胺等多种中间产物，因此生产成本可大大降低。有利于天冬氨酰胺酶作为重要的抗癌药物的推广应用。
具体实施例方式菌种a.天然根瘤类菌体菌种，b.畜、禽胃肠腺分泌物，c.自制高浓度大肠杆菌；原料瘦牛肉培养基大豆浆、豌豆浆、天门冬浆、葡萄糖溶液；催化剂VB6、黄芪浆、VB2；①、一级发酵处理将2克根瘤菌类菌体清洗、消毒、粉碎后，制成悬液，将悬液注入到20克灭菌大豆浆(含水90％)培养液中，在PH5、30℃～40℃的条件下发酵2小时，制成一级菌种；如此再反复做两次，制成2公斤三级菌液；将瘦牛肉磨成2公斤肉浆(含水50％)，在蒸汽压力每平方厘米1公斤、温度121.6℃条件下加热20分钟，作灭菌及蛋白质变性处理；然后将三级菌液注入到肉浆中，在PH5、40℃条件下发酵2小时，再将发酵物在上述蒸汽压力下加热15分钟，杀灭全部微生物，然后冷却至40℃；②、二级发酵处理将2克畜、禽胃肠腺分泌物菌酶混合悬液注入20克大豆浆培养液中，在PH5、40℃条件下发酵2小时，制成一级菌种，如此再反复做两次，制成2公斤三级菌种；将2公斤生大豆浆、6公斤熟豌豆浆、4公斤熟天门冬浆(均含水90％)制成混合培养基，再加入180毫克VB6，在PH5.8、40℃条件下发酵1小时；③、三级发酵处理制取1公斤生牛肉浆(含水50％)，注入二级发酵物中，加入230克黄芪浆，在PH6，37℃条件下发酵1小时，加入97毫克VB2，升温至45℃，发酵1小时，加入970克熟葡萄甜酒，反应10分钟，在蒸汽压力每平方厘米1公斤，121.6℃条件下，加热20分钟，杀灭全部微生物，然后冷却至37℃；④、四级发酵处理制取10公斤葡萄糖水溶液，将1公斤畜、禽胃肠腺菌酶混合悬液注入葡萄糖培养液中，加入3.7公斤黄芪浆，在PH6、37℃下发酵24小时，得到高浓度大肠杆菌13.7公斤，将三级发酵物与高浓度大肠杆菌混合，在PH8.5、37℃条件下发酵2小时；将全部发酵物用多层纱布过滤，得到富含L-天冬氨酰胺酶的水溶液；将天冬氨酰胺酶的水溶液恢复至PH8.5，缓慢加热至45℃，立即置于-10℃温度下，杀灭大肠杆菌，用800千赫/秒超声波处理该溶液10分钟，杀灭酵母，冷冻保存。
权利要求
1.一种富含天冬氨酰胺酶水溶液的生产工艺，它是将畜类瘦肉(或肝脏)经四级发酵，再经灭菌处理而得，其特征在于①、一级发酵处理选畜类瘦肉(或肝脏)为原料，天然根瘤菌类菌体，灭菌大豆浆；将根瘤菌类菌体清洗、消毒、粉碎后，制成悬液，按1∶10的比例将悬液注入大豆浆培养液中，在PH5、30℃～40℃的条件下发酵2小时，制成一级菌种；如此再反复做两次，制成三级菌种；将畜类瘦肉磨成肉浆，高温高压作灭菌及蛋白质变性处理；然后将等量三级菌种注入到等量肉浆中，在PH5、40℃条件下发酵2小时；再将发酵物高温高压加热15分钟，杀灭全部微生物；②、二级发酵处理制备畜、禽胃肠腺菌酶混合三级菌种(方法与制备上述三级菌种相同)；按生大豆浆1熟碗豆浆3熟天门冬浆2的比例混合制成培养基，倾注入一级发酵物中；将混合三级菌种按0.5∶1的比例注入肉浆一级发酵物中；按每公斤加入10毫克VB6、2毫克VB2，在PH5.8、温度40℃条件下发酵1小时；③、三级发酵处理制备原料1/2量的生牛肉浆，倒入二级发酵物中，加入1.2％黄芪浆，在PH6，37℃条件下发酵1小时；每千克加入5毫克VB2，升温至45℃再发酵1小时，加入5％熟葡萄甜酒，反应10分钟，高压加热20分钟，杀灭全部微生物；④、四级发酵处理制取0.5倍三级发酵物的葡萄糖水溶液，将畜、禽胃肠腺菌酶混合悬液按1∶10的比例倒入葡萄糖培养液中，加入37％黄芪浆，在PH6、37℃下发酵24小时，得到高浓度大肠杆菌；将三级发酵物与高浓度大肠杆菌混合，在PH8.5、37℃条件下发酵2小时；最后经过过滤、杀灭大肠杆菌及酵母，即得成品。
全文摘要
本发明公开了一种富含天冬氨酰胺酶水溶液的生产工艺，它是将畜类瘦肉(或肝脏)经四级发酵，再经灭菌处理而得，本发明与现有技术相比，具有工艺简单，原料及能源消耗低等优点，由于采用了天然组合多菌种和酶联合分阶段连贯式发酵的独特工艺，不需要提纯菌种和酶，不需要单独生产ATP、天冬氨酰胺等多种中间产物，因此生产成本可大大降低。有利于天冬氨酰胺酶作为重要的抗癌药物的推广应用。
文档编号A61K38/46GK1137064SQ95116140
公开日1996年12月4日 申请日期1995年10月20日 优先权日1995年10月20日
发明者傅责中 申请人:傅责中