专利名称:治疗疼痛的羟苯基－亚哌啶－4－基－甲基－苯甲酰胺衍生物的利记博彩app
发明领域本发明涉及新化合物及其制备方法、应用以及包含所述新化合物的药用组合物。此新化合物用于治疗、尤其是用于治疗疼痛。
发明背景已发现δ受体在许多身体机能如循环和疼痛系统中具有作用。因而δ受体配体具有止痛药物和/或抗高血压药物的潜在用途。还证实δ受体配体有免疫调节活性。
目前充分鉴定了至少三种不同的阿片样物质受体(μ、δ和κ)，三种阿片样物质受体都主要存在于包括人类在内的许多物种的中枢系统和外周神经系统。当在各种动物模型中激活一种或多种这些受体时，可观察到痛觉缺失。
目前可应用的选择性阿片样物质δ配体本质上几乎无一例外地是肽，不适于经全身途径给药。一个非肽类δ激动剂的例子是SNC80(Bilsky E.J.等，Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics，273(1)，pp.359-366(1995))。但是仍然需要选择性提高而副作用减少的选择性δ-激动剂。
因此，本发明要解决的问题是寻找与目前的μ激动剂相比，不仅止痛效果增强而且副作用减少以及提高全身性作用的新止痛药物。
已经鉴定和现有技术领域：
已有的止痛药物存在许多缺点，它们的药代动力学差，当全身途径给药时没有止痛作用。同时，有资料证明，现有技术中所述的优选δ激动剂化合物全身给药时表现出明显的惊厥作用。
现已发现，WO 98/28270包括但未具体公开的某些化合物表现出惊人的δ-激动剂性质及体内效力增强。
发明概述本发明的新化合物用以下结构式I定义 其中R1选自(i)苯基 (ii)吡啶基 (iii)噻吩基
(iv)呋喃基 (v)咪唑基 (vi)三唑基 (vii)噻唑基 其中各R1苯环和R1杂芳环可任选并独立地被选自以下的1、2或3个取代基进一步取代直链和支链C1-C6烷基、NO2、CF3、C1-C6烷氧基、氯、氟、溴和碘。苯环和杂芳环上的取代可发生在所述环系的任何位置。
本发明的一个优选实施方案是依照式I的化合物，其中R1如上定义，每个R1苯环和R1芳香杂环可以独立地被甲基进一步取代。
本发明的一个更优选实施例是依照式I的化合物，其中R1是吡啶基、噻吩基和呋喃基。
式I化合物的盐和对映体也属本发明范围内，包括对映体的盐。
当苯环和芳香杂环被取代时，优选取代基选自CF3、甲基、碘、溴、氟和氯。
在方案1的反应步骤g(见下页)如下进行用钯催化剂如Pd(PPh3)4，在碱如Na2CO3存在下，使通式II中间体化合物 其中PG是氨基甲酸乙酯或苯甲基样保护基团如Boc，与3-羟苯基硼酸反应得到通式III化合物， 然后，在标准条件下此化合物去保护，在还原条件下用通式R1-CHO化合物烷基化，得到通式I化合物。
合适的钯催化剂包括但不限于PdCl2(和磷化氢)、Pd(OAc)2(和磷化氢)、Pd(dba)2、PdCl2(dppf)CH2Cl2、Pd(PPh3)4、Pd/C。
合适的碱包括但不限于三乙基胺、碳酸钾和碳酸钠。
可以使用的合适还原剂包括但不限于氰基硼氢化钠和三乙酰氧基硼氢化钠。
本发明新化合物可用于治疗、尤其是用于治疗各种疼痛，例如慢性疼痛、神经性疼痛、急性疼痛、癌痛、类风湿性关节炎性疼痛、偏头痛、内脏痛等。但所列未能尽述。
本发明化合物可用作免疫调节剂，尤其可用于自身免疫疾病(如关节炎)；皮肤移植、器官移植及类似的外科需要；胶原性疾病；各种变态反应；用作抗肿瘤药和抗病毒药。
本发明化合物可用于所述范例中存在或涉及阿片样物质受体退变或功能障碍的疾病。包括在诊断技术和成像如正电子发射成像术(PET)中应用同位素标记形式的本发明化合物。
本发明化合物可用于治疗腹泻、抑郁症、焦虑症、尿失禁、各种精神疾病、咳嗽、肺水肿、各种胃肠道疾病、脊柱损伤和药物成瘾(包括酒精、尼古丁、阿片样物质和其它药物治疗性成瘾)以及交感神经系统疾病如高血压。
本发明化合物可用作在全身麻醉和监控麻醉护理时使用的止痛药物。常常联合使用不同性质的药物，以达到维持麻醉状态(例如记忆缺失、痛觉缺失、肌肉松弛和镇静)所需的平衡作用。联合用药包括吸入麻醉剂、安眠药、抗焦虑药、神经肌肉阻滞剂和阿片样物质。
应用任何上式I化合物生产治疗上述任何疾病的药物也属于本发明的范围。
本发明再一方面是治疗患有任何上述疾病的患者的治疗方法，其中对需要这种治疗的患者给予有效量的上式I化合物。
本发明另一方面是通式II中间体， 其中PG是氨基甲酸乙酯或苯甲基样保护基，如Boc，
制备方法可按照下述文献描述的方法，制备根据本发明的化合物例如“Advanced Organic Chemistry”，第三版.Jerry March，John Wiley andsons Inc，；New York(1985)步骤(a)第848页；步骤(b)第848页；步骤(c)第657页；步骤(d)第875页；步骤(e)第371-373页；步骤(f)第364-366页；步骤(g)N.Miyaura and A.Suzuki，Chem.Rev，95，2457-2483(1995)；步骤(h)“用于有机合成的保护基团”第327-329页，Theodora W.Greene和Peter G.M Wuts著，第二版，John Wiley和Sons Inc.；New York(1991)。这些参考文献通过引用结合到本文中。
实施例现在通过下列实施例更详细地描述本发明，不应理解为对本发明的限制。
流程1
实施例1N，N-二乙基-4-(3-羟苯基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物7)的制备(i)4-(4-甲氧羰基-苯亚甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物3)的制备将化合物1(11.2g，49mmol)和三甲基亚磷酸酯(25ml)的混合物在氮气下回流5小时。与甲苯共蒸馏除去过量三甲基亚磷酸酯，定量得到化合物21H NMR(CDCl3)δ3.20(d，2H，J＝22Hz)，3.68(d，3H10.8 Hz)，3.78(d，3H，11.2Hz)，3.91(s，3H)，7.38(m，2H)，8.00(d，2H，J＝8Hz)。
(ii)将上述产物(化合物2)溶于干THF(200ml)中，在-78℃逐滴加入二异丙基氨基化锂(32.7ml 1.5M的己烷溶液，49mmol)。使反应混合物温热至室温，再加入N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(9.67g，49mmol，100ml的THF溶液)。12小时后，反应混合物用水(300ml)猝灭并用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。将合并的有机相用MgSO4干燥并蒸发，得到粗产物，经快速色谱纯化后得白色固体化合物3(5.64g，35％)。
IR(NaCl)3424，2974，2855，1718，1688，1606，1427，1362，1276cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.44(s，1H)，2.31(t，J＝5.5Hz，2H)，2.4.22(t，J＝5.5Hz，2H)，3.37(t，J＝5.5Hz，2H)，3.48(t，J＝5.5Hz，2H)，3.87(s，3H)，6.33(s，1H)，7.20(d J＝6.7Hz，2H)，7.94(d，J，＝6.7Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，29.2，36.19，51.9，123.7，127.8，128.7，129.4，140.5，142.1，154.6，166.8.
(iii)4-溴-4-[溴-(4-甲氧羰基-苯基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物4)的制备将溴(2.9g，18mmol)溶于30ml二氯甲烷中，于0℃加入化合物3(5.2g，16mmol)和K2CO3(1.0g)的二氯甲烷(200ml)溶液中。室温1.5小时后，溶液用K2CO3滤过浓缩。然后用乙酸乙酯(200ml)溶解残留物，用水(200ml)、0.5M HCl(200ml)、盐水(200ml)清洗，用MgSO4干燥。除去溶剂得粗品，置于甲醇中重结晶得白色固体化合物4(6.07g，78％)IR(NaCl)3425，2969，1725，1669，1426，1365，1279，1243cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.28(s，9H)，1.75(m，2H)，1.90(m，2H)，2.1(m，4H)，3.08(br，4H)，3.90(s，3H)，4.08(br，4H)，5.14(s，1H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)7.98(d，J＝8.4Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，36.6，38.3，40.3，52.1，63.2，72.9，129.0，130.3，130.4，141.9，154.4，166.3.
(iv)4-[溴-(4-羧基(caboxy)-苯基)-亚甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物5)的制备化合物4(5.4g 11mmol)溶于甲醇(300ml)和2.0M NaOH(100ml)溶液中，40℃加热3小时。过滤收集固体，真空干燥过夜。此干盐溶解于40％乙腈/水，用浓盐酸调至pH2。过滤分离得白色粉末状目的产物化合物5(3.8g，87％)1H NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.22(dd，T＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，2.64(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.34(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.54(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，7.35(d，J＝6.7Hz，2H)，8.08(d，J＝6.7Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，31.5，34.2，44.0，115.3，128.7，129.4，130.2，137.7，145.2，154.6，170.3；(v)4-[溴-(4-二乙基氨甲酰基-苯基)-亚甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物6)的制备将化合物5(1.0g，2.5mmol)于-20℃溶于无水二氯甲烷(10ml)中，加入异丁基氯甲酸酯(450mg，3.3mmol)。20分钟后于-20℃加入二乙胺(4ml)使反应物温热至室温。1.5小时后蒸干溶剂，残余物在乙酸乙酯和水间分配。有机相用盐水清洗并用MgSO4干燥。除去溶剂得粗品，经快速色谱纯化后得到白色针状化合物6(800mg，73％)IR(NaCl)3051，2975，1694，1633，1416，1281，1168，1115cm-1；1HNMR(CDCl3)δ1.13(br，3H)，1.22(br，3H)，1.44(s，9H)，2.22(t，J＝5.5Hz，2H)，2.62(t，J＝5.5Hz，2H)，3.33(m，4H)，3.55(m，2H).7.31(d，J＝8.0Hz，2H)，7.36(d，J＝8.0Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ12.71，14.13，28.3，31.5，34.2，39.1，43.2，79.7，115.9，126.3，129.3，136.8，137.1，140.6，154.6，170.5.
(vi)3-羟苯基硼酸的制备3-溴苯酚(8.65g，50mmol)溶于干THF(150ml)中，用氢化钠(60％，2.4g，60mmol)室温处理。1小时后，于-78℃往反应液中逐滴加入仲丁基锂(1.3M，50ml，65mmol)。相同温度下搅拌反应混合物30分钟，然后加入三甲基硼酸酯(15ml)。温热至室温2小时后，用水(50ml)猝灭反应混合物，用二氯甲烷(2×100ml)萃取。将合并的有机相用MgSO4干燥，蒸干后得到白色固体标题化合物(4.0g，58％)，不经进一步纯化可直接用于Suzuki偶合反应。
(vii)N，N-二乙基-4-(3-羟苯基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物7)的制备氮气下，将化合物6(451mg，1.0mmol)、3-羟苯基硼酸(230mg，1.7mmol)、2M Na2CO3(2.5ml)和四(三苯基磷化氢)钯(O)(20mg)的混合物在甲苯(脱气，5ml)和乙醇(脱气，5ml)中于90℃回流4小时。然后反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用MgSO4干燥合并的有机相并蒸干得粗品。
上述产物于50℃在二噁烷中用4.0M HCl处理2小时。蒸干后用1M HCl(100ml)溶解残渣并用二乙酯(3×100ml)萃取杂质。水相用NH4OH碱化并用二氯甲烷(3×100ml)提取。用盐水清洗合并的有机相，用MgSO4干燥并蒸干得标题化合物7(305mg，88％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.12(3H，br m，CH3CH2-)，1.23(3H，br m，CH3CH2-)，2.33(4H，m，哌啶CH-)，2.89(4H，m，哌啶CH-)，3.29(3H，brm，NH & CH3CH2N-)，3.53(2H，br m，CH3CH2N-)，4.71(1H，s，OH)，6.57(2H，m，ArH)，6.65(1H，m，ArH)，7.09(1H，m，ArH)，7.12(2H，d，J＝8.0Hz，ArH)，7.28(2H，d，J＝8.0Hz，ArH)；其盐酸盐m.p.＞130℃(Dec.)；IR(NaCl)2975，1598，1442，1293cm-1。
实施例2N，N-二乙基-4-(3-羟苯基-N-苄基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物9)的制备(i)N，N-二乙基-4-(溴-N-苄基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物8)的制备室温下在二氯甲烷(25ml)中用TFA(25ml)处理上述实施例1(v)中制备的化合物6(2.26g，5.0mmol)。2小时后，浓缩反应混合物得残余物，将其溶于乙腈(20ml)中，与苄基溴(5.0mmol)室温反应2小时。浓缩反应混合物，然后将其溶于乙酸乙酯(100ml)中。有机溶液用1NNH4OH和盐水冲洗，用MgSO4干燥。除去溶剂得粗品，用快速色谱纯化后得油状化合物8(1.0g，45％)IR(NaCl)2971，1630，1427，1287，1094cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.13(br，3H)，1.23(br，3H)，2.28(m，2H)，2.37(m，2H)，2.55(m，2H)，2.69(m，2H)，3.27(m，2H)，3.53(br，4H)，7.31(m，4H).
(ii)N，N-二乙基-4-(3-羟苯基-N-苄基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物9)的制备氮气下，将上述步骤(i)中制备的化合物8(600mg，1.36mmol)、3-羟苯基硼酸(414mg，3.0mmol)、2M Na2CO3(3.0ml)和四(三苯基磷化氢)钯(O)(20mg)在甲苯(脱气，5ml)和乙醇(脱气，5ml)中的混合物于90℃回流4小时。反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并有机相用盐水洗涤，然后用MgSO4干燥。除去溶剂得粗品，用快速色谱纯化后得所要标题化合物9(482mg，78％)IR(NaCl)3350，2974，1606，1442，1291cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.11(3H，br m，CH3CH2-)，1.24(3H，br m，CH3CH2-)，2.36(4H，m，哌啶CH-)，2.46(4H，m，哌啶CH-)，3.26(2H，brm，CH3CH2N-)，3.53(4H，br m，PhCH2N & CH3CH2N-)，6.53(1H，m，ArH)，6.57(1H，m，ArH)，6.63(1H，m，ArH)，7.07(3H，m，ArH)，7.25(7H，m，ArH)。
实施例3-11实施例3-11的化合物10-18按照以下流程2合成方法制备。
流程21(3)
流程22(3)
流程23(3)
实施例3N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(2-噻吩基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物10)的制备室温下，向溶于甲醇(15ml)的二级胺(600mg；1.65mmol)溶液中加入噻吩-2-甲醛(153.8ul；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物搅拌2小时后加入氰基硼氢化钠(311mg；4.95mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值461.64，(M+1)观测值461.06分析(C28H32N2O2S×1.60 C2HO2F3×0.20 H2O)的计算值C57.95％；H5.30％；N4.33％；实测值C57.90％；H5.34％；N4.36％1HNMR(CD3OD)7.54(dd，1H，J＝5.2，1.6Hz)，7.25(d，2H，J＝8Hz)，7.23-7.24(m，1H)、7.15(d，2H，J＝8Hz)，7.03-7.08(m，2H)，6.58-6.62(dd，1H，J＝8.0，2.8Hz)，6.52-6.55(dd，1H，J＝7.6，1.6Hz))，6.44-6.46(dd，1H，J＝2.8，1.6Hz)，4.50(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.60-2.80(m，2H)，2.35-2.45(m，2H)，1.10-1.15(m，3H)，1.00-1.05(m，3H)实施例4N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(3-噻吩甲基)4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物11)的制备室温下，向溶于甲醇(13ml)的二级胺(500mg；1.37mmol)溶液中加入噻吩-3-甲醛(144.0ul；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物搅拌3小时后加入氰基硼氢化钠(258mg；4.11mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氢钾中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值461.64，(M+1)观测值461.07分析(C28H32N2O2S×1.10 C2HO2F3×0.50 H2O)的计算值C60.96％；H5.78％；N4.71％；实测值C60.97％；H5.78％；N4.65％1HNMR(CD3OD)7.59(dd，1H，J＝3.2，1.6Hz)，7.49(dd，1H，J＝5.2，3.2Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.15(m，1H)，7.07(dd，1H，J＝8.0，7.2Hz)，6.61(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，6.55(d，1H，J＝7.2Hz)，6.47(dd，1H，J＝2.0，1.6Hz)，4.29(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.60-2.80(m，2H)，2.35-2.45(m，2H)，1.15-1.20(t，3H，J＝6.4Hz)，1.00-1.05(t，3H，J＝6.4Hz)实施例5N，N-二乙基-4-[[1-(2-呋喃基甲基)-4-亚哌啶基](3-羟苯基)甲基]苯甲酰胺(化合物12)的制备室温下，向溶于甲醇(13ml)的二级胺(500mg；1.37mmol)溶液中加入2-糠醛(136.0μl；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物搅拌3小时后加入氰基硼氢化钠(258mg；4.11mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氢钾中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值445.57，(M+1)观测值445.13分析(C28H32N2O3×1.30 C2HO2F3×0.10 H2O)的计算值C61.81％；H5.68％；N4.71％；实测值C61.88％；H5.74％；N4.73％1HNMR(CD3OD)7.58(d，1H，J＝1.6Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.07(t，1H，J＝8.0Hz)，6.62-6.64(m，1H)，6.60-6.61.(m，1H)，6.53-6.55(m，1H)，6.46-6.47(m，1H)，6.43-6.45(m，1H)，4.34(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.55-2.80(m，2H)，2.35-2.50(m，2H)，1.15-1.20(t，3H，J＝6.4Hz)，1.00-1.05(t，3H，J＝6.4Hz)实施例6N，N-二乙基-4-[[1-(3-呋喃基甲基)-4-亚哌啶基](3-羟苯基)甲基]苯甲酰胺(化合物13)的制备室温下，向溶于甲醇(8ml)的二级胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入3-糠醛(214.0μl；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)和氰基硼氢化钠(155mg；2.47mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后用碳酸氢钠猝灭并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值445.57，(M+1)观测值445.15分析(C28H32N2O3×0.5 C2HO2F3×0.10 H2O)的计算值C69.20％；H6.55％；N5.56％；实测值C69.14％；H6.57％；N5.28％1HNMR(CD3OD)7.75(s，1H)，7.61-7.62(m，1H)，7.33(d，2H，J＝8.0Hz)，7.23(d，2H，J＝8.0Hz)，7.13(dd，1H，J＝8.4，8.0Hz)，6.66-6.69(m，1H)，6.57-6.63(m，2H)，6.51-6.53(m，1H)，4.22(s，2H)，3.45-3.55(m，4H)，3.25-3.30(m，2H)，2.95-3.10(m，2H)，2.65-2.85(m，2H)，2.40-2.55(m，2H)，1.15-1.25(m，3H)，1.05-1.15(m，3H)实施例7N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(2-吡啶基甲基)4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物14)的制备室温下，向溶于甲醇(10ml)的二级胺(384.3mg；1.05mmol)溶液中加入2-吡啶甲醛(201.0μl；2.11mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物搅拌30分钟后加入氰基硼氢化钠(199mg；3.16mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氢钠中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值456.60，(M+1)观测值456.12分析(C29H33N3O2×1.70 C2HO2F3×0.40 H2O)的计算值C59.26％；H5.45％；N6.40％；实测值C59.21％；H5.46％；N6.35％1HNMR(CD3OD)8.57(d，1H，J＝5.2Hz)，7.78(dt，1H，J＝8.0，1.2Hz)，7.38(d，1H，J＝8.0Hz)，7.34(dd，1H，J＝8.0，5.2Hz)，7.24(d，2H，J＝8.0Hz)，7.15(d，2H，J＝8.0Hz)，7.05(t，1H，J＝8.0Hz)，6.59(dd，1H，J＝8.0，2.4Hz)，6.54(d，1H，J＝8.0Hz)，6.45(dd，1H，J＝2.4，1.2Hz)，4.39(s，2H)，3.40-3.46(m，2H)，3.26-3.34(m，4H)，3.16-3.22(m，2H)，2.54-2.64(m，4H)，1.13(t，3H，J＝6.4Hz)，1.01(t，3H，J＝6.4Hz)
实施例8N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(4-吡啶基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物15)的制备室温下，向溶于甲醇(8ml)的二级胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入4-吡啶甲醛(236μl；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)。混合物搅拌30分钟后加入氰基硼氢化钠(155mg；2.47mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后用碳酸氢钠猝灭并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值456.60，(M+1)观测值456.10分析(C29H33N3O2×1.80 C2HO2F3×0.40 H2O)的计算值C58.61％；H5.37％；N6.29％；实测值C58.64％；H5.32％；N6.46％1HNMR(CD3OD)8.64(s，2H)，7.61(d，2H，J＝5.2Hz)，7.25(2H，J＝8.0Hz)，7.14(d，2H，J＝8.0Hz)，7.05(t，1H，J＝8.0Hz)，6.59(dd，1H，J＝8.0，1.6Hz)，6.53(d，1H，J＝8.0Hz)，6.43-6.46(m，1H)，4.34(s，2H)，3.42-3.44(m，2H)，3.18-3.24(m，6H)，2.54-2.57(m，4H)，1.13(t，3H，J＝6.4Hz)，1.02(t，3H，J＝6.4Hz)实施例9N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}-苯甲酰胺(化合物16)的制备室温下，向溶于甲醇(8ml)的二级胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入2-咪唑甲醛(237.3mg；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)和氰基硼氢化钠(155mg；2.47mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后用碳酸氢钠猝灭并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值445.58，(M+1)观测值445.16分析(C27H32N4O2×2.10 C2HO2F3×0.50 H2O)的计算值C54.07％；H5.11％；N8.08％；实测值C54.04％；H5.05％；N8.09％
1HNMR(CD3OD)7.38(s，2H)，7.20-7.22(m，2H)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz)，7.0(t，1H，J＝8.0Hz)，6.55(dd，1H，J＝8.0，3.6Hz)，6.49-6.50(m，1H)，6.42-6.43(m，1H)，4.08(s，2H)，3.41-3.43(m，2H)，3.18-3.20(m，3H)，2.79-2.82(m，4H)，2.39-2.45(m，4H).1.08-1.16(m，3H)，0.96-1.16(m，3H)实施例10N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1H-咪唑-4-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物17)的制备室温下，向溶于甲醇(8ml)的二级胺(300mg；O.82mmol)溶液中加入4(5)-咪唑甲醛(94.9mg；0.99mmol)，然后加入乙酸(O.5ml)。反应混合物搅拌1小时后加入氰基硼氢化钠(62.1mg；O.99mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后用碳酸氢钠猝灭并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值445.58，(M+1)观测值445.16分析(C27H32N4O2×2.20 C2HO2F3)的计算值C54.23％；H4.96％；N8.06％；实测值C54.43％；H4.99％；N7.73％1HNMR(CD3OD)8.54(s，1H)，7.57(s，1H)，7.23(d，2H，J＝8.4Hz)，7.13(d，2H，J＝8.0Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.0，7.6Hz)，6.57-6.59(m，1H)，6.51-6.53(m，1H)，6.43-6.44(m，1H)，4.35(s，2H)，3.41-3.43(m，2H)，3.18-3.23(m，8H)，2.53-2.56(m，4H)，1.08-1.16(m，3H)，0.96-1.04(m，3H)实施例11N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1，3-噻唑-2-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物18)的制备室温下，向溶于甲醇(4ml)的二级胺(143.2mg；0.39mmol)溶液中加入2-噻唑甲醛(41.4μl；0.47mmol)，然后加入乙酸(0.2ml)。反应混合物搅拌1小时后加入氰基硼氢化钠(129.6mg；1.48mmol)。反应混合物搅拌过夜，然后用碳酸氢钠猝灭并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。反相提纯。
(M+1)计算值462.63，(M+1)观测值462.10分析(C27H31N3O2S×1.10 C2HO2F3×1.10 H2O)的计算值C57.79％；H5.70％；N6.92％；实测值C57.75％；H5.60％；N7.13％1HNMR(CD3OD)7.86(d，1H，J＝4.0Hz)，7.68(d，1H，J＝4.0Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.07(dd，1H，J＝8.4，8.0Hz)，6.60-6.62(m，1H)，6.54-6.56(m，1H)，6.46-6.47(m，1H)，4.65(s，2H)，3.21-3.45(m，8H)，2.56-2.58(m，4H)，1.12-1.20(m，3H)，1.00-1.08(m，3H)药用组合物根据本发明的新化合物可口服、肌内、皮下、局部、鼻内、腹膜内、胸腔内、静脉内、硬膜外、鞘内、脑室内给药及注射入关节给药。
优选给药途径为口服、静脉内或肌内给药。
当为具体患者确定最佳个体给药方案和剂量水平时，其剂量取决于给药途径、疾病严重性、患者的年龄和体重以及主治医师通常考虑的其它因素。
为了用本发明化合物制备药用组合物，药学上可接受的惰性载体既可为固体也可为液体。固体制剂包括粉剂、片剂、可分散颗粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。
固体载体可以为能起稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂或片剂崩解剂作用的一种或多种物质；也可为包囊材料。
如果为粉剂，载体为磨成细粉的固体，它可与磨成细粉的活性成分混合。如果为片剂，活性成分与具有必要粘合性的载体按适当比例混合，并压制成需要的形状和规格。
为了制备栓剂组合物，首先熔解低熔点蜡如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物，例如通过搅拌将活性成分分散于其中。然后将熔融的均匀混合物倾入常用规格模型中，使其冷却固化。
合适的载体有碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、乳糖、糖、果胶、糊精、淀粉、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。
盐包括但不限于药学上可接受的盐。本发明范围的药学上可接受的盐包括乙酸盐、苯磺酸盐、举甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、glucaptate、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、溴代甲烷、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐(embonate)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱(teoclate)、三乙基碘、苯乍生、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、1，2-乙二胺、葡甲胺、普鲁卡因、铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌的盐。
本发明范围中药学上不可接受的盐实例包括氢碘化物、高氯酸盐、四氟硼酸盐。
药学上可接受的盐优选为盐酸盐、二盐酸盐、硫酸盐、酒石酸盐二(三氟乙酸盐)和柠檬酸盐。特别优选盐酸盐和硫酸盐。
术语组合物包括所述活性成分与作为载体的包囊材料的制剂，在包囊材料产生的包囊中活性成分(与或不与其它载体一起)被所述载体所包围，因此载体与活性成分缔合。同样，扁囊剂也包括在内。
片剂、粉剂、扁囊剂和胶囊剂可用作适于口服给药的固体剂型。
液体组合物包括溶液、悬浮液和乳液。适于不经胃肠给药的液体制剂实例有所述活性化合物的无菌水溶液或水-丙二醇溶液。也可将液体组合物制成聚乙二醇水溶液。
通过将活性组分溶解于水中并按要求加入适当的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂，可制备口服给药的水溶液剂。通过将细分散的活性组分和粘性原料如天然合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它药用制剂领域已知的悬浮剂分散于水中，可制备口服用药的水性悬浮液。
优选的药用组合物是单位剂型。单位剂型时，所述组合物分成含适量活性组分的单位剂量。所述单位剂型可为包装制剂，包装制剂包含不同数量的单位制剂，例如包装型片剂、胶囊剂和用管形瓶或安瓿包装的粉剂。单位剂型也可为一粒胶囊剂、一粒扁囊剂或一片药物本身，或者它可为适当数量的任何这类包装形式。
生物学评价体外模型细胞培养A.37℃、5％CO2下，在含有无钙DMEM、10％FBS、5％BCS、0.1％Pluronic F-68和600μg/ml遗传霉素的振摇瓶中，悬浮培养表达克隆的人μ、δ和K受体和新霉素抗性的人293S细胞。
B.称定小鼠大脑和大鼠大脑重，用冰冷的PBS(含有2.5mMEDTA，pH7.4)清洗。在冰冷的裂解缓冲液中(50mM Tris，pH7.0，2.5mMEDTA，临用前用0.5M苯甲磺酰氟的DMSO乙醇储备液加入至0.5mM)用polytron对大脑匀化15秒(小鼠)或30秒(大鼠)。
膜制备沉淀细胞，将其重悬浮于裂解缓冲液中(50mM Tris，pH7.0，2.5mMEDTA，临用前用0.1M PMSF的乙醇母液加入至0.1mM)，在冰上温育15分钟，然后用polytron匀化30秒。在4℃下以1000g(最大)旋转该悬浮液10分钟。将其上清液收集于冰上，重悬浮沉淀后如上旋转。将两次旋转所得的上清液混合，以46,000g(最大)旋转30分钟。将沉淀物重悬浮于冷Tris缓冲液(50mM Tris/Cl，pH7.0)中，再旋转。将最终的沉淀物重悬浮于膜缓冲液(50mM Tris、0.32M蔗糖、pH7.0)中。聚丙烯管中的等份物(1ml)冰冻于干冰/乙醇中并在使用前贮存于-70℃。用SDS通过改良Lowry测定法测定蛋白浓度。
结合测定于37℃解冻膜，并冷却于冰上，通过25-号针头三次，稀释入结合缓冲液(50mM Tris、3mM MgCl2、1mg/ml BSA(Sigma A-7888)，pH7.4，稀释液经0.22m滤纸过滤后贮存于4℃，并向其中加入5μg/ml抑肽酶、10μM苯丁抑制素、10μM diprotinA，无DTT)。将100μl等份液加入冰冻的装有100μl适当放射性配体和100μl各种浓度的试验化合物的12×75mm聚丙烯管中。分别测定包含和不含10μM纳洛酮的总的结合(TB)和非特异性(NS)结合。将所述试管涡旋并于25℃温育60-75分钟，之后，快速真空-过滤内容物，以约12ml/管的冰冷洗涤缓冲液(50mM Tris、pH7.0、3mM MgCl2)通过GF/B滤纸(Whatman)(在0.1％聚环乙亚胺中预浸渍至少2小时)洗涤。将滤纸在包含6-7ml闪烁液的微管中浸渍至少12小时后，用β计数器测量保留在滤纸上的放射性(dpm)。如果所述测定在96-位深孔板中进行，过滤物过滤在96位PEI-浸渍的单滤纸(96-place PEI-soaked unifilters)(用3×1ml洗涤缓冲液洗后)上，并于55℃烤箱中干燥2小时)。加入50μl MS-20闪烁液体/孔后，用TopCount(Packard)计数滤板。
功能分析通过确定化合物受体复合物刺激GTP和与受体偶合的G-蛋白的结合程度来计算本化合物的激动剂活性。在GTP结合分析中，GTP[γ]35S与受试化合物和来自表达克隆的人阿片样物质受体的HEK-293S细胞细胞膜或来自于匀化的大鼠和小鼠大脑的细胞膜相混合。激动剂刺激GTP[γ]35S结合在这些膜上。本化合物的EC50值和Emax值根据剂量-效应曲线确定。δ颉抗剂naltrindole引起的剂量效应曲线右移用来验证激动剂活性是通过δ受体介导的。
数据分析以TB-NS计算出特异性结合(SB)，存在各种测试化合物时的SB表示为对照SB的百分比。根据对数值图或曲线拟合程序例如Ligand、GraphPad Prism、SigmaPlot或ReceporFit计算置换特异性结合放射性配体的配体IC50值和Hill系数(nH)。用Cheng-Prussoff方程计算Ki值。用至少三个置换曲线，反映测试配体的均值±S.E.M的IC50、Ki和nH值。生物学数据列于下表1中。
表1(续)生物学数据受体饱和实验用浓度为0.2-5倍于估计Kδ的适当放射性配体(如果所需放射配体量适宜的话，可高达10倍)对细胞膜进行结合试验，从而测定放射性配体Kδ值。特异性放射性配体结合表示为pmole/mg膜蛋白。根据单点模式(one-site model)由各个试验的特异性结合(B)与nM游离(F)放射性配体的非线性拟合曲线获得具体实验的Kδ和B最大值。
用Von Frey试验测定机械-异常性疼痛用Chaplan等(1994)所述的方法在08:00及16:00进行试验。将大鼠置于金属丝网底(可接触到其爪)之上的Plexiglas笼中，让其适应10-15分钟。试验区域为左后爪的足底中部，避开较不敏感的足垫部分。用一系列呈对数递增硬度(0.41、0.69、1.20、2.04、3.63、5.50、8.51和15.14克；Stoelting，III，USA)的8 Von Frey毛发接触其爪。从网状底板的下面，垂直于足底表面使用Von Frey毛发，其用力足以使Von Frey毛发对爪产生轻微弯曲并保持约6-8秒。如爪急剧缩回则为阳性反应。毛发一移开立即退缩也认为是阳性反应。走开是不明确的反应，需要重复刺激。
试验方案FCA处理组在手术后一天对动物进行试验。用Dixon(1980)的上-下方法确定50％缩回阈值。用2.04g(处于毛发系列刺激中间)毛发开始试验。无论刺激强度是上升或下降，一直连续刺激。爪对最初选定的毛发刺激无回缩反应时，就逐渐增强刺激；若爪回缩，则选择更弱的刺激。应用这种方法计算最优阈值需要6个极为接近50％阈值的反应，当反应发生第一个变化时，例如首次与阈值交叉，才开始计数这6个反应。如果阈值落在刺激范围之外，各确定出其值为15.14(正常敏感度)或0.41(最大异常性疼痛)。常规(X＝未缩回；O＝缩回)对阳性和阴性反应产生模式制表，用以下公式
50％阈值(g)＝10(Xf+kδ)/10,000内推出50％缩回阈值，其中Xf＝最后使用的Von Frey毛发值(对数单位)；k＝阳性/阴性反应模式的表格数值(Chaplan等(1994)；而δ＝刺激的平均差值(对数单位)。此处δ＝0.224。
根据Chaplan等(1994)，将Von Frey阈值转化为最大可能作用的百分比(％MPE)。下列方程用于计算％MPE 试验物质的给药在Von Frey试验前将试验物质注射(皮下、腹膜内、静脉内或口服)给予大鼠，试验化合物给药与Von Frey试验时间间隔取决于所试验的化合物的性质。
扭体试验对小鼠腹膜内给药时，乙酸会引起腹部收缩。然后呈现典型的机体伸展。用了止痛药后，则较少观察到所述运动，则该药选作潜在的良好侯选物。
只有出现下列情况才认为是完全典型的扭体反射所述动物未运动；后背略微降低；双爪足底表面可观察到。在该测定时，口服给予1-100μmol/kg本发明化合物后，证实其明显抑制扭体反应。
(i)溶液制备乙酸(AcOH)将120μl乙酸加入19.88ml的蒸馏水中以得到最终体积为20ml、最终浓度为0.6％的AcOH。再将该溶液混合(涡旋)以备注射用。
化合物(药物)根据标准方法制备各化合物并溶解于最适当的载体中。
(ii)溶液剂的给药在试验前20、30或40分钟(根据化合物的种类及其特性)，以10ml/kg(考虑平均小鼠体重)将所述化合物经口、腹膜内(i.p.)、皮下(s.c.)或静脉内(i.v.)给药。当所述化合物中枢性脑室内(i.c.v.)或鞘内(i.t.)给药时，给药量为5μl。
临试验前以10ml/kg(考虑平均小鼠体重)AcOH在两侧腹膜内(i.p.)给药。
(iii)试验观察所述动物(小鼠)20分钟，记录(扭体反射)发生次数，实验结束时进行数据汇集。将小鼠放置在带接触衬垫的单个“鞋盒”状笼中。通常同时观察4只小鼠一只为对照，三只为三个剂量的药物。
权利要求
1.一种式I化合物或其盐， 其中R1选自以下任一基团(i)苯基 (ii)吡啶基 (iii)噻吩基 (iv)呋喃基 (v)咪唑基 (vi)噻唑基
2.根据权利要求
1的化合物或其盐，其中R1是吡啶基、噻吩基或呋喃基。
3.根据权利要求
1的化合物或其盐，它选自以下任何一种化合物或其盐●N，N-二乙基-4-(3-羟苯基-N-苄基-亚哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(2-噻吩基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(3-噻吩基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-[[1-(2-呋喃基甲基)-4-亚哌啶基](3-羟苯基)甲基]苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-[[1-(3-呋喃基甲基)-4-亚哌啶基](3-羟苯基)甲基]苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(2-吡啶基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(4-吡啶基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1H-咪唑-4-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羟苯基)[1-(1，3-噻唑-2-基甲基)-4-亚哌啶基]甲基}苯甲酰胺。
4.根据权利要求
1-3中任一项的化合物或其盐，它为其盐酸盐、二盐酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、二(三氟乙酸)盐或柠檬酸盐形式。
5.一种制备权利要求
1的式I化合物的方法，该方法包括用钯催化剂在碱存在下，使通式II化合物 其中PG是氨基甲酸乙酯或叔丁氧羰基，与3-羟苯基硼酸反应，得到通式III化合物， 然后使通式III化合物去保护，在还原条件下用通式R1-CHO的化合物烷基化，得到所述通式I化合物，其中R1的定义与权利要求
1中相同。
6.权利要求
1-4任一权项的式I化合物或其盐在制备治疗疼痛、胃肠道疾病、脊柱损伤或交感神经系统疾病的药物中的用途。
7.一种药用组合物，它包含作为活性成分的权利要求
1-4任一权项的式I化合物或其盐以及药学上可接受的载体。
专利摘要
本发明公开并要求保护以下通式(I)化合物，其中R
文档编号C07D211/68GKCN1185228SQ01810593
公开日2005年1月19日 申请日期2001年3月30日
发明者W·布朗, C·沃波尔, Z·韦 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan