一种磁性纳米微粒及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种新型磁性纳米微粒的制备方法，该方法通过简单，快速的制备过程，获得有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高的高性能磁性纳米微粒，该微粒能够较好的与质粒DNA相结合，起到基因或药物载体的作用，在外加磁场的导向下，可高度浓集、作用于肿瘤细胞，具有靶向治疗肿瘤的临床应用价值。
【专利说明】一种磁性纳米微粒及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种医药载体材料，更具体地说它是一种葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料，本发明还涉及这种磁性纳米材料的制备方法和效应鉴定。
【背景技术】
[0002]随着纳米技术、生物工程技术的不断进步，药物/核酸转运系统已经发展到靶向转运系统。该系统将能携带效应分子，主动或被动地转运到机体的靶部位发挥治疗作用，而对其它部位的毒副作用很低。其中，在四氧化三铁晶粒表面包附一层生物大分子(如蛋白质，脂质体，多糖等)，能够得到良好的生物相容性和生物安全性。且这种磁性微球具有磁响应性，在外加梯度磁场作用下能够趋向运动，可以作为携带药物或核酸分子的载体骨架进行肿瘤的磁控靶向治疗。然而，由于相关的制备方法均较复杂、成本较高，不能较好地兼顾粒径的大小和磁响应性高低的关系，尚没有形成成熟统一的制备方法。因此，探讨简单易行、成本低廉的方法，开发粒径微小、磁响应性高的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并将该磁性纳米微粒与基因分子相结合，在外加磁场的导向下，高度浓集、作用于肿瘤细胞，是一种有效的靶向治疗肿瘤的方法。
【发明内容】
[0003]本发明的任务是提供一种磁性纳米微粒及其制备方法，本发明要解决的技术问题是:克服传统磁性纳米材料造价昂贵，颗粒不足的缺点，研发磁响应性强、粒径小且分布均一的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并系统总结提出该材料制备方法。同时给出其与DNA分子的结合效率，以及在磁场导向下转染肿瘤细胞的能力的检测方法。
[0004]实现本发明的技术方案是:
[0005]本发明提供的磁性纳米微粒具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形，有效粒径为93.1 ±2.2nm，半峰宽为26.7±1.3nm，Zeta电位为正，分散度为0.083±0.011，在外加场强为1040e、温度为18°C的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.lemu/g，撤除磁场时剩磁为零。
[0006]本发明提供的磁性纳米微粒的制备方法包括以下步骤:
[0007]步骤一:在通入氮气的同时，按水合氯化铁(FeC13.6H20):水合氯化亚铁(FeC12.4H20):葡聚糖 T-10 (Dextran T-10)质量比:63:25:400 溶于 20%葡聚糖溶液中；
[0008]步骤二:溶液经超声波，功率200瓦作用3分钟后，加大功率至325瓦，按体积比6%，逐滴滴入25%?30%氨水(NH3.H2O)；
[0009]步骤三:调整超声波功率至300瓦，持续模式作用于反应液30分钟，脉冲模式作用30分钟；
[0010]步骤四:冷却后得到黑色胶体混悬液；
[0011]步骤五:将所得黑色胶体混悬液置于5X 13高斯磁场中作用lh，即得葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。
[0012]在制备完成后，通过电镜观察分析，磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应:该微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高，微粒能够较好的与质粒DNA相结合，起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下，其早期转染效率得到显著提高，见图1、图2。
[0013]本发明方法制备的磁性纳米微粒具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形，有效粒径为93.1 ±2.2nm，半峰宽为26.7±1.3nm，Zeta电位为正，分散度为0.083±0.011，在外加场强为1040e、温度为18°C的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.lemu/g，撤除磁场时剩磁为零。
[0014]本发明葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料具有如下优点:制备方法简单，采用一步法即可制成，成本低廉，有利于推广。微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高。微粒能够较好的与质粒DNA相结合，起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下，其早期转染效率得到显著提高。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒电镜成像图；
[0016]图2为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒光镜成像图。
【具体实施方式】
[0017]实施例1
[0018]制备葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒
[0019]①、在通入氮气的同时，按水合氯化铁(FeCl3.6H20):水合氯化亚铁(FeCl2.4H20):葡聚糖 T-10 (Dextran T-10)质量比:63:25:400 溶于 20%葡聚糖溶液中；
[0020]②、溶液经超声波，功率200瓦作用3分钟后，加大功率至325瓦，按体积比6%，逐滴滴入25%?30%氨水(NH3.H2O)；
[0021]③、调整超声波功率至300瓦，持续模式作用于反应液30分钟，脉冲模式作用30分钟；
[0022]④、冷却后得到黑色胶体混悬液；
[0023]⑤、将所得黑色胶体混悬液置于5X 13高斯磁场中作用lh，即得本发明葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。
[0024]在制备完成后，通过电镜观察分析，磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应:该微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高，微粒能够较好的与质粒DNA相结合，起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下，其早期转染效率得到显著提高，见图1、图2。
【权利要求】
1.一种磁性纳米微粒，其特征在于具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形，有效粒径为93.1 ±2.2nm，半峰宽为26.7±1.3nm，Zeta电位为正，分散度为0.083±0.011，在外加场强为1040e、温度为18°C的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.lemu/g，撤除磁场时剩磁为零。
2.权利要求1所述的磁性纳米微粒的制备方法，包括以下步骤: 步骤一:在通入氮气的同时，按水合氯化铁(FeCl3.6H20):水合氯化亚铁(FeCl2.4H20):葡聚糖 T-1O (Dextran T-10)质量比:63:25:400 溶于 20%葡聚糖溶液中； 步骤二:溶液经超声波，功率200瓦作用3分钟后，加大功率至325瓦，按体积比6%，逐滴滴入25%?30%氨水(NH3.H2O)； 步骤三:调整超声波功率至300瓦，持续模式作用于反应液30分钟，脉冲模式作用30分钟； 步骤四:冷却后得到黑色胶体混悬液； 步骤五:将所得黑色胶体混悬液置于5X 13高斯磁场中作用lh，即得葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。
【文档编号】A61K41/00GK104306970SQ201410591977
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年10月29日 优先权日:2014年10月29日
【发明者】夏泽锋, 王国斌, 罗艳, 陶凯雄, 肖勇, 蔡开琳, 帅晓明, 王继亮, 翟荣林, 蔡明 , 汪庚, 李桉树 申请人:华中科技大学同济医学院附属协和医院