一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法
【专利摘要】本发明提供了一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法，包括莱菔子原料的炒制、脱脂、及脱脂后的提取、柱分离等工序；本发明方法安全可控，简便实用，使用本发明方法制备的芥子碱提取物的纯度较高。
【专利说明】一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法，属中医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]中药是一个复杂的体系，一味药中不同药效作用成分共存一体。炮制会影响其内在成分的量或质。经过对中药生制品的系统研究，在认识炮制机理的基础上，利用现代科技手段，对不同药效部位、组分进行分离纯化，使药效成分有效富集，资源得到综合利用。可以在剂量减少，质量可控前提下，提高中药的科技含量，实现传统中药饮片功效的优化，也可对分离纯化的部分进行新功效的开发，为创新药物研制提供技术支撑。
莱菔子是中医常用药，其中含有30%-40%的脂肪油，按中药传统入煎剂使用只有不足5%被煎出，其余则随药渣废弃。莱菔子脂肪油中含30%以上的芥酸。芥酸长期食用对人体不利，是食用油的限制性标准之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工业利用价值。莱菔子中的芥子碱含量《中国药典》2010年版规定不得低于0.4%。研究证明，芥子碱具有降血压、降血脂、抗辐射、抗炎、抗腹泻、抗癌、抗雄激素等多种药理作用。上述作用与中医使用莱菔子用于消食除胀，降气化痰没有必然的联系。从莱菔子中获得含量高的芥子碱提取物，可为研发以芥子碱为主要药效成分的新药提供技术支撑。同时可避免化学合成品成本高，副作用明显等问题。从莱菔子中提取出芥子碱提取物，可更好地突出其他成分的药理作用，并且有利于莱菔子中的高芥酸脂肪油、硫苷类成分深度开发和综合利用。
【发明内容】
[0003]为了解决上述技术问题，本发明提供了一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法。
[0004]在规范莱菔子炒制工艺的基础上，通过物理脱脂获得原料75%左右的莱菔子脂肪油部分，可为高芥酸脂肪油的精加工提供原料，使莱菔子资源得到综合利用。
[0005]对脱脂后的部分优化了提取精制工艺，获得了含量超过20%的芥子碱提取物，较莱菔子原料中的芥子碱含量富集了近40倍。发明还对芥子碱提取物的质量控制方法和药效进行了一定的研究。
莱菔子中芥子碱提取物的制备工艺如下:
1.莱菔子的炒制与脱脂
取莱菔子，净制；炒制时，预热至锅底温度达200-250 V时投药，快速均匀翻炒1-1.5min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘1-2h,使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压，当脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取；脂肪油可作为高芥酸脂肪油精加工的原料； 2.脱脂炒莱菔子芥子碱提 取物的制备经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩，回收乙醇至无醇味，用氨水调整pH为8作为上样溶液；
HPD722型大孔树脂，湿法装柱，取2倍柱体积pH8的上样溶液以3 BV.IT1的流速上样，吸附4 h，用3 BV蒸馏水以4 BVf1的流速洗脱，合并洗脱液，另器保存。再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa条件下，减压浓缩得浸膏，浸膏再以70 1:，压力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于5.0%，得到炒莱菔子芥子碱提取物。
[0006]本发明的有益效果如下:
1、本发明优选出的莱菔子炒制工艺，在不影响芥子碱含量与提取的前提下，既能保证有效灭活莱菔子中硫苷分解酶的活性，最大限度的提高炒莱菔子水提液中萝卜苷及其他硫代葡萄糖苷的含量，又可避免不当的炒制温度对莱菔子中萝卜苷等硫代葡萄糖苷的破坏。能显著提高炒莱菔子中以萝卜苷为主的总硫苷成分的含量。
[0007]2、本发明优选出的炒莱菔子物理脱脂工艺，不使用有机溶媒。有效克服了有机溶媒脱脂易燃易爆，产品中存在有机溶媒残留的难题，便于工业生产。又能保证脱脂过程中萝
卜苷不被破坏，并且使芥子碱得到有效富集。该工艺既有效获得了炒莱菔子脂肪油部位，为精细化工业提供了高芥酸脂肪油原料，使炒莱菔子资源得到了综合利用，提高了其附加值。又为炒莱菔子中芥子碱提取物提取分离减少了干扰。
[0008]3、本发明优选出的脱脂炒莱菔子提取精制工艺，简便实用，便于推广。用最小的溶媒量保证了芥子碱的提取率和转移率。
[0009]4、本发明优选出的脱脂炒`莱菔子提取液中芥子碱提取物分离制备工艺，从不同树脂类型中，优化出了大孔吸附树脂柱型号，上样药液的PH值、吸附时间、洗脱液的种类和pH值、洗脱速度、洗脱液体积等关键参数，确保了芥子碱提取物的收率和纯度。使提取物中芥子碱含量高于23%，较莱菔子原料提高了近60倍。简便实用，便于推广。
【具体实施方式】
[0010]下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0011]实施例1
1.莱菔子的炒制与脱脂
取莱菔子，净制。炒制时，预热至锅底温度达200-250 °C时投药，快速均匀翻炒1-1.5min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压使脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取；
莱菔子脱脂前芥子碱含量:0.80% ;脱脂后萝卜苷含量:1.08% ；
2.脱脂炒莱菔子芥子碱提取物的制备
经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至无醇味，用氨水调整pH为8作为上样溶液。
[0012]HPD722型大孔树脂，湿法装柱，取2倍柱体积pH8的药液以3 BV.IT1的流速上样，吸附4 h，用3 BV蒸馏水以4 BV 的流速洗脱，合并洗脱液，另器保存；再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa条件下，减压浓缩得浸膏，浸膏再以70 1:，压力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于
5.0%，得到炒莱菔子芥子碱提取物部位。
[0013]芥子碱提取物中芥子碱含量:23.07%。
[0014]所述莱菔子供试品中芥子碱的测定方法如下:
照《中国药典》2010年版附录VI D高效液相色谱法测定。
[0015]色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%醋酸溶液(15:85)为流动相；检测波长为326nm。理论板数按芥子碱峰计算应不低于5000。
[0016]对照品溶液的制备取芥子碱硫氰酸盐对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加纯净水制成每I ml含40 μ g的溶液，即得。
[0017]供试品溶液的制备取芥子碱提取物粉末0.05 g，精密称定，蒸馏水溶解，超声20min,加蒸懼水定容至100 ml,取适量过0.45 μ m微孔滤膜。
`[0018]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0019]注:《药典》中有芥子碱含测方法，但使用的是苯基硅烷基键合硅胶柱，价格昂贵，本方法使用普通C18柱，方便实用。
【权利要求】
1.一种从莱菔子中提取芥子碱提取物的方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)莱菔子的炒制与脱脂 取莱菔子，净制；炒制时，预热至锅底温度达200-250 °C时投药，快速均匀翻炒1-1.5min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘1-2h,使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压，当脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取； 2)脱脂炒莱菔子芥子碱提取物的制备 经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩，回收乙醇至无醇味，用氨水调整pH为8作为上样溶液； HPD722型大孔树脂，湿法装柱，取2倍柱体积pH8的上样溶液以3 BV.IT1的流速上样，吸附4 h，用3 BV蒸馏水以4 BV 的流速洗脱，合并洗脱液，另器保存；再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa条件下，减压浓缩得浸膏，浸膏再以70 1:，压力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于5.0%，得到炒莱菔子芥子碱提取物。
2.根据权利要求 1所述的方法，其特征在于，所述的炒莱菔子芥子碱提取物中芥子碱的含量大于23%。
【文档编号】A61K36/31GK103768121SQ201410049670
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年2月13日 优先权日:2014年2月13日
【发明者】吕文海, 马山, 孟祥红, 王群, 李书云 申请人:山东中医药大学