莱菔子提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种莱菔子提取物及其制备方法。本发明中提供的莱菔子提取物的制备包括莱菔子的净制、炒制、脱脂、提取与精制工艺和质量控制方法。其制备工艺简单、合理，有效的保存和富集了药效成分，并同时获得了可作为精细化工原料的高芥酸脂肪油。本发明方法制备的莱菔子提取物可使其药效成分得到有效富集，即可保证传统炒莱菔子饮片的药效，并显著减少了服用剂量，使其质量更加稳定可控。
【专利说明】莱菔子提取物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种莱菔子提取物，同时涉及其提取制备方法，属中医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]饮片炮制后入药是中医临床用药的特色，炮制在中药的减毒、增效、缓性、便用等方面发挥了独特的作用，但受历史及学科发展等方面的制约，传统炮制一直处于对中药材整体的简单的加工状态，由于受药材的产地、自然环境等诸多因素的影响，难以保证中药饮片治疗质量科学意义上的稳定和统一。目前，在认识传统炮制机理的基础上，利用现代提取分离技术，对中药有效成分研究已成为创新药物研制的途径之一，在此理论基础上，研究中药饮片如何使有效成分富集，又保证药效的技术问题，是对丰富和完善中药炮制理论实践的有益探索。
莱菔子是中医常用药，具有“生升熟降”、“生熟异治”的药性特点。申报者在完成国家自然科学基金项目(30672665)中证明，莱菔子炒制的一个重要机理是防止萝卜苷在煎煮过程中被酶解，有利于在煎出液中保存萝卜苷。莱菔子中含有30%-40%的脂肪油，按中药传统入煎剂使用只有不足5%被煎出，其余则随药渣废弃。莱菔子脂肪油中含30%以上的芥酸。芥酸长期食用对人体不利，是食用油的限制性标准之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工业利用价值。可用于制造芥酸酰胺、芥醇、山嵛酸、芥酸的各种金属盐类及酯类等各种表面活性剂和塑料助剂。
[0003]目前市场上流通 的炒莱菔子配方颗粒，是炒莱菔子经水提、浓缩，干燥获得的简单提取物。其炒制工艺限于经验控制水平，提取制备中没有精制过程，饮片中95%以上的脂肪油随药渣废弃。炒制质量得不到有效控制，药效成分得不到有效富集，资源得不到综合利用。
【发明内容】
[0004]为了解决上述技术问题，本发明提供了一种莱菔子提取物及其制备方法，是在规范莱菔子炒制工艺的基础上，通过物理脱脂获得75%左右的莱菔子脂肪油部分。并对脱脂后的提取精制工艺进行了优化，使其药效成分得到了有效富集，且保证了炒莱菔子饮片的药效，显著减少了服用剂量，使其质量更加稳定可控。
[0005]本发明的技术方案如下:
一种莱菔子提取物，由以下步骤制备而成:
1.莱菔子的炒制与脱脂
取莱菔子，净制后炒制；炒制时，预热至锅底温度达200-250 °C时投药，快速均匀翻炒I一 1.5 min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压使脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取；
2.脱脂炒莱菔子的提取与精制
经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至无醇味，继续浓缩至近干，真空干燥至含水量为4.0%-5.0%，得到莱菔子提取物。
[0006]由以上制备方法制备成的莱菔子提取物中的主要的有效成分及含量范围如下: 总硫苷含量为:42.39%~45.50% ；
萝卜苷含量为:2(λ 12°~23.14% ；
总生物碱含量为:4.19%~4.80% ；
芥子碱的含量为:3.79%~4.35% ；
总黄酮含量为:6.99%~8.83%。
[0007]莱菔子中含有30%_40%的脂肪油，按中药传统入煎剂使用只有不足5%被煎出，其余则随药渣废弃。且莱菔子脂肪油中含30%以上的芥酸，芥酸长期食用对人体不利，是食用油的限制性标准之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工业利用价值。所以，本发明采用物理脱脂方法获取其脂肪油，既避免了生产过程中使用有机溶媒，难以实际应用，又可使样品中较化学脱脂法留用部分脂肪油，这部分脂肪油在提取物中完全可以达到原有饮片的药效，同时，还具有消泡的作用，使提取过程更安全。压榨出的脂肪油可以作为化工原料使用，从而减少高芥酸脂肪油的浪费，提高莱菔子的利用价值，使资源达到综合利用。同时利于药效成分的富集和减少脂肪油对提取过程的影响。
[0008]炒莱菔子提取物可在使用剂量显著减少，质量更加可控的条件下，发挥炒莱菔子传统饮片的疗效。药效实验表明，炒莱菔子提取物使用传统饮片1/5的剂量，可取得与其相同的抑制实验动物胃排空，促进肠推进的功效。减少实验动物的咳嗽潜伏期和咳嗽次数的作用，祛痰作用也呈现相同的规律性变化。实验还表明，炒莱菔子脂肪油也具有一定的抑制胃排空，促进肠推进，减少实验动物的咳嗽潜伏期和咳嗽次数及祛痰作用，说明采用物理脱月旨，使炒莱菔子提取物中含有符合中医临床使用饮片中的少量脂肪油，更能体现炒莱菔子的中医临床效果。具体药效实验如下:
I促进胃肠运动实验
1.1.供试样品的制备
水煎剂:称取5.0Og炒莱菔子药材，捣碎，加入20倍量水加热回流提取，Ih,抽滤，合并水煎液，浓缩定容至25mL，即得含药浓度为0.2g/ mL的水煎液。 [0009]脂肪油部位:参照5.0Og炒莱菔子饮片在水煎剂中的溶出量，称取脂肪油
0.1200g,加入IOmL蒸懼水,超声30min,制成浓度为0.012g/mL混悬液。
[0010]提取物:参照5.0Og炒莱菔子饮片制备成提取物的量，称取亳州提取物1.00g，用蒸馏水定容至25 mL,即得浓度为0.04g/ mL溶液。
[0011]1.1.3实验动物
昆明种小鼠，体重18~22 g，雌雄各半，山东鲁抗医药股份有限公司质监中心实验动物室提供。许可证号:SCXK (鲁)20080002。[0012]实验方法与结果 1.2.1实验方法
昆明种小鼠60只，18~22g，雌雄各半，随机分为5组，分别为空白组、阿托品组、阿托品+水煎剂、阿托品+提取物组、阿托品+脂肪油组。
[0013]实验前禁食10 h，清除垫料，饮水不限。实验时，空白组和阿托品组灌胃0.2 mL蒸馏水，阿托品+水煎剂、阿托品+提取物组和阿托品+脂肪油组灌胃等量的相应药物。
[0014]给药Ih后，除空白组外，其余各组均腹腔注射阿托品(1.5mg.kg—1)。
[0015]给药后2 h,各组均给予半固体营养糊,0.4 mL/只，10 min后脱颈椎处死。解剖，结扎胃贲门和幽门，取胃称重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干称重。同时迅速取出小肠，轻轻剥离后直铺于白纸上，测量幽门至回盲肠部全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。
[0016]胃内残留率=(胃总重一胃净重)/所灌营养糊重X 100%。
[0017]小肠推进率=推进长度/小肠总长X 100%。
[0018]表1供试品小鼠胃排空实验数据
【权利要求】
1.一种莱菔子提取物，其特征在于，其主要有效成分及含量范围如下: 总硫苷及含量范围:42.39%~45.50% ； 总生物碱及含量范围:4.19%~4.80% ； 总黄酮及含量范围:6.99%~8.83%。
2.根据权利要求1所述的莱菔子提取物，其特征在于，总硫苷中萝卜苷在莱菔子提取物中的含量范围为:20.12%~23.14%。
3.根据权利要求1所述的莱菔子提取物，其特征在于，生物碱中芥子碱在莱菔子提取物中的含量范围为:3.79%~4.35%。
4.根据权利要求1、2或3所述的莱菔子提取物，其特征在于，由以下制备方法制备而成: 1)莱菔子的炒制与脱脂 取莱菔子，净制，炒制:炒制时，预热至锅底温度达200-250 °C时投药，快速均匀翻炒1-1.5 min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压使脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取； 2)脱脂炒莱菔子的提取与精制 经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至无醇味，继续浓缩至近干，真空干燥至含水量为4.0%-5.0%，得到莱菔子提取物。
5.一种权利要求1-4中任一项所述的莱菔子提取物的制备方法，其特征在于，步骤如下: 1)莱菔子的炒制与脱脂 取莱菔子，净制，炒制:炒制时，预热至锅底温度达200-250 °C时投药，快速均匀翻炒1-1.5 min，至质地鼓起，易脱皮，有爆裂声和特有香气时，取出，晾凉；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末温度均匀达到90°C，压油机物料室控温95°C ±3°C，投料入压油室，压油机采用渐进式加压使脂肪油溢出后，暂停加压，待油溢出速度显著减慢时，再继续加压至油溢出，如此反复至出油率达到原料中脂肪油含量的75%±3%时，停止压油；脂肪油另器保存，药饼粉碎后供进一步提取； 2)脱脂炒莱菔子的提取与精制 经物理脱脂后的炒莱菔子药饼破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加热回流提取三次，加水量依次为药料的8倍，6倍，6倍，提取时间分别为1.0 h，0.5 h，0.5 h，过滤，合并滤液，减压浓缩至I g/ml，加入95%乙醇，边加边快速搅拌，使得乙醇浓度为80%，静置24 h，过滤，滤液减压浓缩回收乙醇至无醇味，继续浓缩至近干，真空干燥至含水量为4.0%-5.0%，得到莱菔子提取物。
【文档编号】A61P1/00GK103830305SQ201410033131
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年1月24日 优先权日:2014年1月24日
【发明者】吕文海, 任涛, 苏永汶, 孙忠迪 申请人:山东中医药大学