抗凝血酶在治疗子痫前期中的应用的利记博彩app

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【专利摘要】在一个方面，本发明提供治疗子痫前期和严重子痫前期的方法，其包括给予抗凝血酶。在一些实施方案中，本发明所示方法中使用的抗凝血酶为
【专利说明】抗凝血酶在治疗子痫前期中的应用
[0001] 相关申请
[0002] 本申请根据35U. S. C. § 119要求2012年3月12日提交的美国临时申请 61/609, 534的权益，其全部内容在此以参考方式并入本文。

【技术领域】
[0003] 本发明涉及子痫前期和严重子痫前期的治疗。

【背景技术】
[0004] 子痛前期（pre-eclampsia)和严重子痛前期（severe pre-eclampsia)为孕期中 可能发生的状况，包括孕期中的预产期前及近预产期阶段。上述疾病的特征是高血压及增 加的尿蛋白量。若未进行适当治疗，子痫前期和严重子痫前期会造成癫痫甚至死亡。因此， 需要针对子痫前期和严重子痫前期提出新的治疗方法。
[0005] 发明概述
[0006] 在一方面，本发明提供治疗子痫前期和严重子痫前期的方法。
[0007] 在一方面，本发明提供在受试者内治疗子痫前期的方法，其包括对患有子痫前期 的受试者给予治疗有效量的抗凝血酶以治疗该子痫前期。在一些实施方案中，该子痫前期 是严重子痫前期。在一些实施方案中，该受试者处于小于24周的孕期。在一些实施方案中， 该受试者处于24周至28周的孕期。在一些实施方案中，该受试者处于28周至32周的孕 期。在一些实施方案中，该受试者处于28周至34周的孕期。在一些实施方案中，该受试者 处于大于34周的孕期。
[0008] 在本文所提供的方法中的部分实施方案中，该抗凝血酶具有高度甘露糖糖基化模 式。在一些实施方案中，该抗凝血酶包括GalNac (N-乙酰半乳糖胺）。在一些实施方案中， 该抗凝血酶具有岩藻糖-GlcNAc糖基化模式。在一些实施方案中，该抗凝血酶为转基因产 生的抗凝血酶。在一些实施方案中，该抗凝血酶在山羊体内以转基因方式产生。在一些实 施方案中，该抗凝血酶是ATry η?。
[0009] 在本文所提供的方法的部分实施方案中，该抗凝血酶以每日1500单位的剂量给 予。在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日3000单位的剂量给予。在一些实施方案中，该 抗凝血酶以每日12, 000单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶通过连续输注的 方式给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶通过团注（bolus)给予。在一些实施方案中，该 抗凝血酶通过团滴注以每日两次3500单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶通 过连续输注以每日10, 500单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶通过连续输注 以每日12, 000单位的剂量给予。
[0010] 本发明的每个限制条件可涵盖本发明的各种实施方案。因此，可预期本发明涉及 任何一元素或元素组合的每个限制条件可包含在本发明的各个方面。本发明不限定其应用 于以下所陈述或图示中所显示的结构细节和构成的配制。本发明可以具有其它实施方案， 且可以各种方式被实施或实行。此外，本文所用的措辞和术语是用于描述而不应该被认为 是限制。
[0011] 图式简单说明
[0012] N/A
[0013] 发明详述
[0014] 在一方面，本发明提供治疗子痫前期的方法。在一些实施方案中，该治疗子痫前期 的方法包括对患有子痫前期的受试者给予治疗有效量的抗凝血酶以治疗该子痫前期。在一 些实施方案中，该子痫前期为严重子痫前期。在一些实施方案中，用于本文所示方法的抗凝 血酶为ATryn?。
[0015] 子痫前期和严重子痫前期
[0016] 子痫前期是一种以高血压和增加的尿蛋白量为特征的疾病。子痫前期可能发生 于孕期且被认为影响所有怀孕情况的约6-8%。子痫前期是通过评估高血压（等于或超过 140/90mmHg的收缩压/舒张压）和蛋白尿（24小时的尿液样本中蛋白质至少为300mg)的 组合来诊断。严重子痫前期一般以血压至少160/110mmHg的收缩压/舒张压为特征且可能 伴随或不伴随其它症状发生。
[0017] 子痫前期的发病通常发生在孕期第32周以后。然而，子痫前期可能早在孕期20周 即发展，且早期发病的子痫前期和增加的患病率有关。子痫前期和严重子痫前期可能发生 于严重早产（一般定义为孕期第28周以前），预产期前（一般定义为孕期第28至34周） 及近预产期（亦称为晚期早产）（一般定义为怀孕第34-37周）。
[0018] 子痫前期及严重子痫前期的成因不甚清楚。若未适当治疗，子痫前期可能造成子 痫症，其接着可造成癫痫甚至死亡。
[0019] 子痫前期和严重子痫前期的治疗
[0020] 子痫前期及子痫症的传统治疗方法包括为降低高血压的抗高血压疗法和为防止 癫痫的硫酸镁输注法。然而，分娩是针对子痫前期的唯一真正解药。
[0021] 子痫前期和严重子痫前期的治疗，如本文中所使用，是指任何与子痫前期和严重 子痫前期疾病相关的生理参数的改善。因此，举例而言，子痫前期的治疗包括血压的降低 及其它表现诸如癜痫机率的抑制。反映子痫前期治疗的生理参数包括纤维连接蛋白、C反 应蛋白、弹性蛋白酶及组织型纤溶酶原激活物的水平的降低（参见例如Paternoster et al. Thromb. Haemost. 2004, 91:283-289)〇
[0022] 现已发现抗凝血酶可用于治疗子痫前期。此外，某些形式的抗凝血酶，例如 ATry n?，可显示出可影响子痫前期和严重子痫前期治疗的不同性质。
[0023] 抗凝血酶和ATryn?
[0024] 在一方面，本发明提供用于治疗子痫前期和严重子痫前期的方法，其包括给予抗 凝血酶。在一些实施方案中，该抗凝血酶具有高度甘露糖糖基化模式。在一些实施方案 中，该抗凝血酶包括GalNac (N-乙酰半乳糖胺）。在一些实施方案中，该抗凝血酶具有岩藻 糖-GlcNAc糖基化模式。在一些实施方案中，该抗凝血酶为转基因产生的抗凝血酶，例如在 乳腺中。在一些实施方案中，该抗凝血酶在山羊体内以转基因方式产生。在一些实施方案 中，该抗凝血酶是ATryn? (参见例如美国专利5, 843, 705、美国专利6, 441，145、美国专利 7, 019, 193、和美国专利7, 928, 064,皆以其全文并入作为参考）。
[0025] 抗凝血酶是一种约58kDA的糖蛋白。抗凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，其抑 制凝血酶及Xa因子。抗凝血酶天然存在于包括人类在内的哺乳动物的血清中。来自健康 个体的人类血清中的抗凝血酶生理量为约14_20mg/dL。
[0026] 传统上，术语"抗凝血酶"是关于一类密切相关的蛋白质的家族，包括抗凝血酶I、 抗凝血酶II、抗凝血酶III、抗凝血酶IV。然而，抗凝血酶III是抗凝血酶家族中与显著生 理功能相关的唯一成员且现有文献常将术语抗凝血酶及抗凝血酶III互换地使用。本文所 使用的抗凝血酶是指抗凝血酶III和任何与抗凝血酶III有相同或类似活性的抗凝血酶。
[0027] 抗凝血酶是一种糖蛋白，而人类的抗凝血酶包括四个糖基化位点：Asn96、Asnl35、 Asnl55及Asnl92。抗凝血酶以α型（α-抗凝血酶）及β型（β-抗凝血酶）两者存在， 以α型最为普遍。因为β型抗凝血酶在Asnl35未经糖基化，所以人类β型抗凝血酶可 与α型抗凝血酶区分。在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶包括主要的 α型抗凝血酶和次要的β型抗凝血酶两种。在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的 抗凝血酶为α-抗凝血酶。
[0028] 抗凝血酶在哺乳动物之间是保守的，仅有少量的氨基酸序列差异。人类抗凝血酶 III的长度为432个氨基酸。非人类的抗凝血酶具有相同长度或相似长度（例如，433个氨 基酸）。在一些实施方案中，根据本文所示的方法治疗受试者所使用的抗凝血酶物种是与该 受试者相同的物种。因此，举例来说，人类抗凝血酶是使用在治疗人类的方法中，而牛抗凝 血酶是使用在治疗牛的方法中。
[0029] 应该进一步理解的是，除了氨基酸序列外，抗凝血酶的糖基化也是具体物种所特 定的。因此，例如，人类血浆中分离出的人类抗凝血酶（血浆衍生的人类抗凝血酶）与从山 羊血浆中分离出的山羊抗凝血酶具有不同的糖基化模式。然而，如下所述，人类抗凝血酶， 例如，可于山羊体内产生，其提供的人类抗凝血酶（即，具有人类氨基酸序列的抗凝血酶） 具有模拟山羊抗凝血酶糖基化的糖基化模式。
[0030] 在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶具有高度甘露糖糖基 化模式。本文中所使用的具有高甘露糖糖基化模式的抗凝血酶是指以下抗凝血酶，其 中一个或多个糖基化侧链主要包含寡甘露糖或混合型寡糖（相对于包含双触角复合寡 糖（bi-antennary complex oligosaccharides)的侧链，其为得自血楽的人类抗凝血酶 所发现的主要侧链结构）。在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶包括 GalNac (N-乙酰半乳糖胺）。在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶具有岩 藻糖-GlcNAc糖基化模式。本文中所使用的岩藻糖-GlcNAc糖基化模式是指抗凝血酶在具 有复合寡糖的大多数糖基化位点中于其近侧的GIcNAc上具有岩藻糖。在一些实施方案中， 本文所示的方法中使用的抗凝血酶具有高甘露糖模式，包括GalNac且包括岩藻糖-GlcNAc 糖基化模式。应注意的是于山羊体内以转基因方式产生的人类抗凝血酶（即，具有人类氨 基酸序列的抗凝血酶）具有高甘露糖模式，包括GalNac且包括岩藻糖-GlcNAc糖基化模 式，而从血浆得到的人类抗凝血酶不具有此等糖基化模式（参见例如美国专利5, 843, 705、 美国专利6, 441，145、美国专利7, 019, 193、和美国专利7, 928, 064)。
[0031] 本文所示的方法中使用的抗凝血酶可经由多种方法产生。在一些实施方案中，该 抗凝血酶是从血浆中分离得到的（即，从血浆得到的抗凝血酶）。在一些实施方案中，该抗 凝血酶是重组产生的。在一些实施方案中，该抗凝血酶是转基因方式产生的（参见例如美 国专利5, 843, 705、美国专利6, 441，145、美国专利7, 019, 193、美国专利7, 928, 064、美国专 利6, 268, 487、美国专利7, 045, 676、美国专利7, 939, 317和美国专利7, 521，632,其皆以全 文并入作为参考）。
[0032] 在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶是转基因方式产生的。在 一些实施方案中，该转基因方式产生的抗凝血酶是于哺乳动物中产生的。在一些实施方案 中，该转基因方式产生的抗凝血酶是从蹄类动物中产生的。在一些实施方案中，转基因方式 产生的抗凝血酶是从山羊体内产生的。应理解的是由第一物种中所产生的抗凝血酶可为来 自第二物种的抗凝血酶。因此，例如，人类的抗凝血酶可于小鼠和山羊体内转基因方式产 生。类似地，牛的抗凝血酶亦可于小鼠及山羊体内转基因方式产生。再者，抗凝血酶亦可于 起源物种中转基因方式产生。因此，山羊的抗凝血酶可于山羊体内转基因方式产生。
[0033] 在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶是转基因方式产生的。在 一些实施方案中，该转基因方式产生的抗凝血酶有与从血浆中得到的抗凝血酶不同的糖基 化模式。一般而言，该抗凝血酶的糖基化模式取决于在其中产生抗凝血酶的动物物种。因 此，例如，预期于小鼠体内转基因方式产生的抗凝血酶与山羊体内产生的抗凝血酶具有不 同的糖基化模式。
[0034] 在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶具有于山羊体内转基因方 式产生的抗凝血酶的糖基化模式。
[0035] 应理解的是转基因方式产生的抗凝血酶的糖基化模式亦视该蛋白产生于其中的 转基因动物的器官或身体部位的性质而定。因此，即使是在相同物种中产生，可预期产生于 乳腺中的抗凝血酶及产生于血液中的抗凝血酶具有不同的糖基化模式。在一些实施方案 中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶产生于山羊乳腺。
[0036] 应进一步理解的是具有产生于山羊体内的抗凝血酶糖基化模式的抗凝血酶亦可 通过于非山羊的其它物种中产生抗凝血酶且于下游加工中修饰糖基化模式来提供。例如， 糖基化的抗凝血酶可于小鼠体内产生，而产生于小鼠的抗凝血酶的糖基化模式可通过体外 修饰而转变以产生山羊抗凝血酶的糖基化模式。例如，产生于小鼠的抗凝血酶可经由糖基 化酶或转移酶的作用转变。此外，糖基化模式可通过非酶的（即，合成的）方法修饰。
[0037] 具有产生于山羊的抗凝血酶的糖基化模式的抗凝血酶亦可通过在细胞（例如，昆 虫细胞、细菌细胞）中产生抗凝血酶并在下游加工中增加或修饰糖基化模式来提供，或者， 具有产生于山羊的抗凝血酶的糖基化模式的抗凝血酶可通过非山羊物种的血浆分离提供， 并可接着在下游加工中修饰该糖基化模式。
[0038] 在一些实施方案中，本文所示的方法中使用的抗凝血酶为ATryn?。ATryn?是 于山羊乳腺中产生的转基因人类α抗凝血酶（参见例如美国专利5, 843, 705、美国专利 6,441，145、美国专利7, 019, 193、美国专利7, 928, 064)。ATrymS)是经FDA批准用于在遗 传性抗凝血酶缺乏病患中预防围手术期间及围产期的血栓栓塞事件。在欧洲，ATryn?是 经批准用于患有先天性抗凝血酶缺乏的外科病患者，在其临床危险情况时预防深度静脉血 栓形成和血栓栓塞。
[0039]山羊产生的（人类）抗凝血酶ATryn?的糖基化模式不同于从血浆得到的人类抗 凝血酶的糖基化模式。因为糖基化模式不同，ATryn?显示与从血浆中得到的人类抗凝血 酶不同的生化和生理性质。例如，ATryn?显示较从血浆中得到的抗凝血酶高三倍的肝素 亲和力（Edmunds等人，Blood, 1998,91 :4561-4571)。在一些实施方案中，ATryn?结合 硫酸肝素受体的亲和力高于从血浆中得到的抗凝血酶。当比较从血浆中得到的抗凝血酶和 ATryn?的生物分布，循环的ATryn?通过结合至血管壁和分布至肝脏自循环中更快速地 被移除（参见例如 Berry 等人，rhromb. Haemost. 2009,102 :302-308)。
[0040] 受试者
[0041] 在一方面，本发明提供在受试者中治疗子痫前期及严重子痫前期的方法。本文所 使用的"受试者"是人类或其它脊椎哺乳动物，包括但不限于小鼠、大鼠、狗、猫、马、牛、猪、 绵羊、山羊或非人类灵长类动物。
[0042] 子痫前期及严重子痫前期与孕期相关，因此，受试者的性别是雌性。在一些实施方 案中，该雌性处于严重早产、早产或近预产期妊娠中。
[0043] 在一些实施方案中，该受试者为人类雌性，即女性。在一些实施方案中，该女性处 于严重早产妊娠、早产妊娠或近预产期妊娠（亦称为晚期早产妊娠）。在一些实施方案中， 该受试者是处于少于24周的孕期。在一些实施方案中，该受试者是处于24周至28周的孕 期。在一些实施方案中，该受试者是处于28周至32周的孕期。在一些实施方案中，该受试 者是处于28周至34周的孕期。在一些实施方案中，该受试者是处于大于34周的孕期。 [0044] 附加疗法
[0045] 在一些实施方案中，包含给予抗凝血酶的治疗子痫前期及严重子痫前期的方法与 附加疗法结合。在一些实施方案中，附加疗法是用于治疗子痫前期及严重子痫前期或子痫 前期及严重子痫前期相关病变的疗法。附加疗法包括抗高血压药物的给予及硫酸镁的给 予。
[0046] 在一些实施方案中，附加疗法为一般与促进母亲及胎儿在孕期的健康相关的疗 法。在一些实施方案中，附加疗法包括止痛药的给予。在一些实施方案中，附加疗法包括皮 质类固醇的给予，例如，促进胎儿肺的发育。医疗专业人员将知道何种疗法和药物可以安全 地在孕期给予。
[0047] 治疗有效量
[0048] 在一方面，本发明提供用于治疗子痫前期及严重子痫前期的方法，其包括给予抗 凝血酶。在一些实施方案中，抗凝血酶被给予治疗有效量以治疗子痫前期及严重子痫前期。 术语"治疗有效量"和"有效量"可交替使用，其是指达到所需治疗效果（例如，子痫前期和 严重子痫前期的治疗）的必需或足够的量。结合本文所提供的教导，通过挑选活性化合物 和权重因子例如效力、相对的生物利用度、受试者体重、不利的副作用严重性及优选的给药 模式，可选择不会造成实质毒性而仍可有效治疗特定受试者的有效预防或治疗方案。
[0049] 用于任何特定应用的有效量可依据诸如治疗的疾病或状况、拟给予的特定治疗 齐IJ、受试者大小或疾病或障碍的严重性的因子变化。所属【技术领域】中具有常规知识者可评 经验决定抗凝血酶的有效量而不需过度实验。一般而言，优选是使用最大剂量，亦即，依据 某些医学知识判断的最高安全剂量。可考虑每日、每周或每月的多次给药来达成适当的抗 凝血酶的全身量。适当的全身量可通过，例如，测量病患的抗凝血酶的峰值或持续的血浆水 平来决定。
[0050] 抗凝血酶（例如，ATryn? )给予的剂量一般表示为mg/kg、每公斤的抗凝血酶单 位或每天的抗凝血酶的单位。在一些实施方案中，抗凝血酶以每日10单位的剂量或更多、 每日50单位或更多、每日100单位或更多、每日200单位或更多、每日500单位或更多、每日 1000单位或更多、每日1500单位或更多、每日2000单位或更多、每日2500单位或更多、每 日3000单位或更多、每日3500单位或更多、每日4000单位或更多、每日4500单位或更多、 每日5000单位或更多、每日5500单位或更多、每日6000单位或更多、每日6500单位或更 多、每日7000单位或更多、每日7500单位或更多、每日8000单位或更多、每日8500单位或 更多、每日9000单位或更多、每日9500单位或更多、每日10, 000单位或更多、每日10,500 单位或更多、每日11，〇〇〇单位或更多、每日11，500单位或更多、每日12, 000单位或更多、 每日12, 500单位或更多、每日13, 000单位或更多、每日13, 500单位或更多、每日14,000 单位或更多、每日14, 500单位或更多、每日15, 000单位或更多、每日16, 000单位或更多、 每日17, 000单位或更多、每日18, 000单位或更多、每日19, 000单位或更多或每日20,000 单位或更多的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日1500单位的剂量给予。在 一些实施方案中，该抗凝血酶以每日3000单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血 酶以每日7000单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日10, 500单位的剂 量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日12, 000单位的剂量给予。
[0051] 在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日两次，每次3500单位的剂量给予。在一些 实施方案中，该抗凝血酶通过团滴注（IV注射），以每日两次，每次3500单位的剂量给予。 在一些实施方案中，该抗凝血酶以每日10, 500单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗 凝血酶通过连续输注以每日10, 500单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶以每 日12, 000单位的剂量给予。在一些实施方案中，该抗凝血酶通过连续输注以每日12, 000 单位的剂量给予。
[0052] 应理解的是抗凝血酶的量亦可表示为重量（例，mg)而非单位。一般而言，Img的 抗凝血酶相当于6-7单位的抗凝血酶III，取决于批号、制造方法等。
[0053] 在一些实施方案中，抗凝血酶以每千克1单位或更多、每千克1单位或更多、每千 克5单位或更多、每千克10单位或更多、每千克20单位或更多、每千克30单位或更多、每 千克40单位或更多、每千克50单位或更多、每千克100单位或更多、每千克150单位或更 多、每千克200单位或更多、每千克250单位或更多、每千克300单位或更多、每千克350单 位或更多、每千克400单位或更多、每千克450单位或更多、每千克500单位或更多、每千克 600单位或更多、每千克700单位或更多、每千克800单位或更多、每千克900单位或更多或 每千克1000单位或更多的剂量给予。
[0054] 在一些实施方案中，该治疗有效量以一次给药给予。在一些实施方案中，该治疗有 效量以多次给药给予。可适当地调整剂量来达到所需的局部的或全身的抗凝血酶量，视给 予模式而定。当受试者对于如此剂量反应不足时，可在受试者耐受度允许的范围内使用更 高的剂量（或通过不同、更局部的投递途径的有效较高剂量）。可考虑每日多次给药来达到 适当的化合物全身量。
[0055] 给药
[0056] 在一方面，本发明提供用于治疗子痫前期及严重子痫前期的方法，其包括给予抗 凝血酶。在一些实施方案中，该抗凝血酶是经由团滴注给予。在一些实施方案中，该抗凝血 酶是经由连续输注给予。
[0057] 抗凝血酶通常作为药物组合物给予受试者，该药物组合物通常含有药学上可接受 浓度的盐、缓冲剂、防腐剂（preservatives)、相容载体、辅料及任选的其它治疗成分。药物 载体及药物组合物的其它组分的性质是依赖给药的模式而定。
[0058] 在实现本文所描述的治疗方法时，本领域技术人员可通过已知的任何方法及途径 给予本发明的药物组合物。较佳的给药途径包括但不限于口服、静脉注射、皮下给药、肠胃 外给药、瘤内给药、肌肉内给药、鼻腔给药、颅内给药、舌下给药、气管给药、吸入式给药、目艮 部给药、阴道给药及直肠给药。
[0059] 抗凝血酶，当需要全身地给予时，可配制成通过注射或输注的肠胃外给药（例如， 通过快速浓注（bolus injection)、静脉快速浓注、团滴注或连续输注）。用于注射的制剂 可以单位剂量形式呈现，例如，在添加防腐剂的安瓶中或多剂量容器中。组合物可能采用的 形式有悬浮液、以溶液或油或水为载体的乳剂，并可包含配制剂诸如助悬剂、稳定剂及/或 分散剂。肠胃外给药的药物制剂包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。此外，活性化合 物的悬浮液可制备为适当的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括脂肪油如芝麻 油，或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或三酸甘油脂或脂质体。含水的注射悬浮液可能含有增加 悬浮液粘性的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。任选地，悬浮液亦可含有合 适的稳定剂或增加化合物溶解度的试剂以能够制备高浓度溶液。
[0060] 针对口服给药，抗凝血酶通过结合该化合物和本领域熟知的可接受药物载体可容 易地制备成药剂。该载体使本文所示的化合物能够被制备成片剂、丸剂、糖衣剂、胶囊、液 体、凝胶、糖浆、浆状剂、悬浮液等，以供受治疗受试者口服摄取。口服药物制剂可通过以下 获得，以固体赋形剂，任选研磨所得混合物，并在添加合适的助剂后（如果需要）处理颗粒 混合物，以获得片剂或糖衣剂核。具体而言，合适的赋形剂可为填料，例如糖，包括乳糖、蔗 糖、甘露醇及山梨糖醇；纤维素制备物，例如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明 胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基-纤维素、羧甲基纤维素钠及/或聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)。如需要，可以添加崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐，诸如海 藻酸钠。任选地，口服制剂亦可在生理盐水或缓冲液中配制，例如，用于中和内部酸性情况 的EDTA，或可无须添加任何载体而给药。
[0061] 针对口服给药，药物释放的地点可以是胃、小肠（十二指肠、空肠或回肠）或大肠。 本领域技术人员可获得不会溶解于胃，然而会于十二指肠或肠的其他地方释放的制剂。作 为肠溶性包衣的较普通的惰性成分的实例是乙酸纤维素偏苯三酸酯（cellulose acetate trimellitate, CAT)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP)、HPMCP50、HPMCP55、聚醋 酸乙烯邻苯二甲酸酯（PVAP)、Eudragit L30D、Aquateric、醋酸邻苯二甲酸纤维素（CAP)、 Eudragit UEudragit S及虫胶。这些包衣可用作混合膜。包衣或包衣混合物亦可用于片 齐U，该片剂并非想要用于防止在胃内溶解。此可包括糖包衣或使片剂较容易吞咽的包衣。 胶囊可以由用于干燥治疗粉末的递送的硬壳（如明胶）组成；针对液体形式，可使用软明胶 壳。该囊剂外壳材料可以是粗淀粉或其它可食用纸。针对丸剂、锭剂、模制片或模印片，可 使用湿法聚集技术（moist massing techniques)。
[0062] 抗凝血酶可以细状多颗粒以颗粒或丸粒形式包含于制剂中。用于胶囊给药的材料 制剂亦可为粉末、轻压缩栓剂或甚至为片剂。药物组合物可经由压缩来制备。可通过惰性 物质来稀释或增加药物组合物的体积。此稀释物可包含碳水化合物，尤其是甘露醇、α -乳 糖、无水乳糖、纤维素、蔗糖、修饰过的葡聚糖和淀粉。包括三磷酸钙、碳酸镁和氯化钠的部 分无机盐类可作为填料。部分商业上可获得的稀释剂为Fast-Flo、Emdex、STA-Rx 1500、 Emcompress 和 Avicell0
[0063]崩解剂可包含于药物组合物的制剂中，诸如在固体剂型中。崩解剂所使用的材料 包括但不限于淀粉，其包括基于淀粉的商用崩解剂Explotab。亦可使用羟基乙酸淀粉钠、 Amberlite、羧甲基纤维素钠、超支链淀粉（ultramylopectin)、藻酸钠、明胶、橙皮、酸性羧 甲基纤维素、天然海绵和膨润土。可使用粘合剂来将治疗剂保持在一起以形成硬式片剂，且 可包括来自诸如阿拉伯胶、西黄蓍胶、淀粉及明胶等天然产物的材料。亦可将抗摩擦剂包括 于药剂制剂中用以在制备过程避免沾粘。可使用润滑剂作为治疗剂与模壁间的层，且其可 包括但不限于硬脂酸（包括其镁盐和钙盐）、聚四氟乙烯（PTFE)、液体石蜡、植物油及蜡。 可添加可改善制备时药物的流动特性和可以帮助压缩时重排的助流剂。该助流剂可包括淀 粉、滑石、热解二氧化硅及水合硅铝酸盐。
[0064] 通过吸入给药时，与合适的推进剂如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、 二氧化碳或其它合适的气体一起使用，可以气溶胶喷雾呈现的形式自加压包或雾化器方便 地递送抗凝血酶。
[0065] 本文亦考虑到抗凝血酶的肺部递送。抗凝血酶可递送至哺乳动物的肺以用 于局部或全身递送。吸入分子的其它报告包括Adjei et al.，1990，Pharmaceutical Research, 7:565-569 ;Adjei et al. , 1990, International Journal of Pharmaceutics, 63:135_144(醋酸亮丙瑞林）；Braquet et al. ,1989, Journal of Cardiovascular Pharmacology, 13(suppl. 5):143-146(内皮素-I) ;Hubbard et al·,1989,Annals of Internal Medicine, Vol. Ill, pp. 206-212(al-抗膜蛋白 酶）；Smith et al·，1989,J. Clin. Invest. 84:1145-1146(a_l_ 蛋白酶）；0swein et al.,1990,^Aerosolization of Proteins"，Proceedings of Symposium on Respiratory Drug Delivery II, Keystone, Colorado, March,(重组人生长激素）；Debs et al·, 1988, J. Immunol. 140:3482-3488(干扰素 -g和肿瘤坏死因子a)和Platz et al·，美国专利 No. 5, 284, 656 (粒细胞集落刺激因子）。用于全身效应的药物肺部递送的方法和组合物描 述于 Wong 等人的 U. S. Patent No. 5, 451，569, 1995 年 9 月 19 日授权。
[0066] 亦考虑到包含抗凝血酶的药物组合物的鼻部递送，鼻腔传递允许组合物给予至鼻 后药物组合物直接通入血液中,此产物无须沉积于肺中。
[0067] 在一些实施方案中，该抗凝血酶为局部给药。局部给药的方法在本领域中是已知 的且依赖于靶点位置或靶器官。局部给药途径包括标准局部给药法的使用，诸如皮肤上 (于皮肤上施用）、通过吸入的、直肠的（通过灌肠剂或塞剂）、通过滴眼剂（至结膜上）、滴 耳剂、鼻内途径及阴道的。
[0068] 抗凝血酶亦可被制备为直肠或阴道组合物，诸如栓剂或保留灌肠剂，例如，含有可 可脂或其它甘油脂的常规栓剂基质。除了此前所描述的制剂，该化合物亦可制备为长效制 齐IJ。此种长效制剂可与合适的聚合或疏水材料（例如，作为可接受油中的乳剂）或离子交 换树脂制备为药剂，或作为难溶类似物，例如，难溶盐。
[0069] 药物组合物亦可含有合适的固或胶态载体或赋形剂。此载体或赋形剂的实例包括 但不限于碳酸钙、磷酸钙、各种糖、淀粉、纤维素类似物、明胶及诸如聚乙二醇的聚合物。
[0070] 合适的液态或固态药剂制备形式为，例如，用于吸入、微胶囊化、螯合、涂布于金微 粒、容置于脂质体内、雾化、气溶胶、植入皮肤用的颗粒或干燥于将刺入皮肤内的尖锐物上 的水或盐水溶液。药物组合物亦包括颗粒、粉末、片剂、包衣片、（微）胶囊、栓剂、糖浆、乳 齐U、悬浮液、膏剂、滴剂或可持久释放活性化合物的制剂，在其制剂中惯常地使用如上所述 的赋形剂及添加剂及/或一或多种辅助剂，诸如崩解剂、粘合剂、包衣剂、膨胀剂、润滑剂、 调味剂、甜味剂或增溶剂。该药物组合物适合用于多种药物递送系统。关于药物递送方法 的简述，参见Langer, 1990, Science 249, 1527-1533,该内容在此并入作为参考。
[0071] 本文所描述的药剂或组合物可以其本身（纯的）给予或以药学上可接受盐的形式 给予。当作为药品时，该盐类应为药学上可接受的，但非药学上可接受的盐可方便地使用 于制备其药学上可接受的盐。该盐类包括但不限于制备自下列的酸：盐酸、氢溴酸、硫酸、 硝酸、磷酸、马来酸、醋酸、水杨酸、对甲苯磺酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、丙二酸、琥珀 酸、萘-2-磺酸及苯磺酸。再者，该盐类可制备为碱金属盐或碱土金属盐，如碳酸基的钠、钾 或钙盐。
[0072] 本发明的药物组合物含有包含于药学上可接受载体的有效量的抗凝血酶。药学上 可接受载体一词意指适合给药至人类或其它脊椎动物的一或多个相容的固体或液体填料、 稀释剂或包封物质。载体一词可表示为有机或无机成分（天然的或合成的），其与活性成分 结合以方便施用。药物组合物的组分亦能够以不产生将实质削弱所需的药物有效性的相互 作用的方式与本发明的组合物混合，及互相混合。
[0073] 非生物可降解或生物可降解的聚合材料均可使用于制造递送本发明组合物的颗 粒。该聚合物可为天然的或合成的聚合物。该聚合物的选择是基于所需释放的时间长度。特 别感兴趣的生物粘附聚合物包括Sawhney等人，1993,Macromolecules 26,581-587中所描 述的生物侵蚀性水凝胶，其教导在此并入。这些包括聚透明质酸、酪蛋白、明胶（gelatin)、 明胶蛋白（glutin)、聚酸酐、聚丙烯酸、海藻酸盐、壳聚糖、聚（甲基丙烯酸甲酯）、聚（甲基 丙烯酸乙酯）、聚（甲基丙烯酸丁酯）、聚（甲基丙烯酸异丁酯）、聚（甲基丙烯酸己酯）、 聚（甲基丙烯酸异癸酯）、聚（甲基丙烯酸月桂酯）、聚（甲基丙烯酸苯酯）、聚（丙烯酸甲 酯）、聚（丙烯酸异丙酯）、聚（丙烯酸异丁酯）及聚（丙烯酸十八烷基酯）。
[0074] 抗凝血酶可被容置于控制释放系杭。"控制释放"一词意指含有本文所述的任何 试剂或组合物的制剂，其中本文所述的试剂和组合物自该制剂释放的方式及概况是受控制 的。此是指立即和非立即释放制剂，而非立即释放制剂包括但不限于持续释放及延迟释 放制剂。"持续释放（sustained release) "（亦为"延长释放（extended release)) -词 是以其常规的意思使用，其是指药物制剂提供化合物在一段延长的时间内的逐渐释放，而 优选地（但非必要地），其达成在一段延长的时间内的实质恒定的血药浓度。"延迟释放 (delayed release) "是以其常规的意思使用，其是指药物制剂在该药物制剂的给药及化合 物自其释放之间有一时间的延迟。"延迟释放"可或可不涉及在一段延长时间内其化合物的 逐渐释放，而因此可或可不为"持续释放"。长期持续释放的植入物的使用可特别适合用于 慢性疾病的治疗。本文所使用的"长期"释放意指该植入物被构建并设置以递送治疗量的 活性成分至少7天，且最好为30-60天。长期持续释放的植入物是为本领域技术人员所熟 知的且包含部分上述的释放系统。
[0075] 试剂盒
[0076] 在一方面，本发明提供包含抗凝血酶（例如ATryn_?)的试剂盒。在一些实施方案 中，该抗凝血酶于无菌容器中。在一些实施方案中，该试剂盒包含药物载体及各组分的给药 说明书。在一些实施方案中，该试剂盒包括药物制剂的小瓶、药物稀释剂小瓶和抗凝血酶。 该稀释剂小瓶含有稀释剂，诸如用于稀释本发明组合物的浓缩溶液或冷冻干燥粉末的生理 盐水。在一些实施方案中，该说明书包括针对混合特定量的稀释剂及特定量的浓缩药物药 组合物的说明，据此制备用于注射或输注的最终制剂。在一些实施方案中，该说明包括针对 在注射器或其它给药装置中使用的说明。在一些实施方案中，该说明包括针对以有效量的 本发明的组合物治疗病患的说明。应了解的是放置各种制剂的容器（无论该容器为瓶、具 隔膜的小瓶、具隔膜的安瓿、输注袋及等）可包含标记，诸如当制备物经高温杀菌或其他方 式消毒会改变颜色的常规标记。
[0077] 本发明通过下面的实施方案进一步说明，该实施方案无论如何不应视为进一步的 限制。本申请中引用的所有参考文献（包括文学文献、公告的专利、公开的专利申请及审 批期间的专利申请）在此皆以其全部内容明确表示地并入作为参考，特别是上文引用的教 导。然而，任何参考文献的引用并非是指承认该文献为先前技术。 实施例
[0078] 实施例I :ATryn?用于早产子痫前期（preterm pre-eclampsia)的治疗
[0079] 进行多中心、随机、安慰剂对照、双盲的第2期临床试验来检验重组人类抗凝血酶 (ATryn?)在早产子痫前期（PPE)中的安全性及有效性。在本研究中，对ATryn?在母 体及胎儿/新生儿两者中的安全性进行评估，于分娩时在母体与新生儿中评估ATryn?对 PPE的药代动力学，且对分娩时ATryn?用于PPE治疗的有效性（除预期处理以延长孕龄之 夕卜）进行评估。
[0080] 方法：60名年龄彡18岁的女性，均处于24至28周的孕周且患有高血压及蛋白尿 (> 160/ > IlOmmHg 及试纸 1+或蛋白 / 肌酐评估；或〈160/〈1 IOmmHg (> 140/ > 90mm)和 尿蛋白收集> 0. 3g/24h)被招入。排除的标准包含HELLP综合症（丙胺酸转胺酶>70U/L、 血小板〈100xl03/mcl、在血液涂片上的溶血迹象）、少尿症（<500ml/24h)或急性肾功能衰 竭的迹象（肌酐值>2. 5mg/L)或羊水过少（指数<5cm)。
[0081] 除了平常的护理标准，病患被随机分配接受ATryn? (BID，即每日两次，团滴注 或连续24小时输注）或安慰剂，预计时间约为7?15天，直到母体/胎儿恶化及/或有预 期处理终止（expectant management cessation)及分娩两者的指示。评估的ATryn?剂量 之一为经由每天连续输注12,000单位的剂量。主要终点为胎龄自随机至分娩的增加。安 全性评估包括不良事件（AEs)、严重不良事件及先验的所关心的并发症（例如，死亡、癫痫、 心血管事件、肺支气管发育不良）。实验室分析用来监测AT活性水平、凝血、尿蛋白及其他 生物标记。产妇及新生儿的并发症评估将继续至出院，新生儿追踪持续到分娩后6个月。 [0082] 实施例2 :ATryn?用于严重子痫前期的治疗
[0083] 处于24-36周的孕周之间的严重子痫前期病患接受ATryn? (1500U/日）。 ATryn?以每日一次静脉给药连续七天。
[0084] 通过决定妊娠中毒症指数来评估治疗效果，该指数是由蛋白尿（克蛋白质/L)、 收缩压及舒张压所组成。通过决定凝血参数（凝血酶-抗凝血酶复合物、血纤维蛋白溶 酶-血纤维蛋白溶酶抑制剂复合物和D-二聚体的水准）来进一步评估治疗效果。此外，亦 评估新生儿的生物物理特性，诸如心率及呼吸运动（SMKobayashietal.Semin.Thromb. Hemost. 2003, 29:645-652)。
[0085] 实施例3 :使用高剂量ATryn?亍子痫前期的治疗
[0086] 子痫前期患者治疗以每天一次高剂量的ATryn? (3, 000单位）持续5天或直到 新生儿出生，或患者以足够维持至少80%的基线抗凝血酶活性的ATryn?剂量治疗。
[0087] 用以决定治疗效果的第一终点为孕期的延长，其定义为从招收到分娩以及分娩 时及分娩后产妇出血间的时间（天数）。第二终点为ATryn?在控制止血作用中作用的 评估，其通过抗凝血酶活性及纤维连接蛋白（FN)、纤维蛋白原、D-二聚体、尿酸血症、24小 时蛋白尿、活性C蛋白、粒细胞弹性蛋白酶及内皮素的水平来决定（参见Paternoster et al. Thromb Haemost 2004,91:283-289)。
[0088] 等同范围
[0089] 以上书面说明被认为足以使本领域技术人员能够实施本发明。本发明不为所提供 实施例的范围所限制，其他功能上等同的实施例亦在本发明的范围内。除了本文所示及描 述的，对本领域技术人员而言，对本发明的各种修改将落入本专利的范围内。本发明的优点 和目的不仅仅为本发明的每个实施例所包含。
【权利要求】
1. 一种在受试者中治疗子痫前期的方法，该方法包括：对患有子痫前期的受试者给予 治疗有效量的抗凝血酶以治疗该子痫前期。
2. 根据权利要求1的方法，其中该子痫前期为严重子痫前期。
3. 根据权利要求1或2的方法，其中该受试者是处于少于24周的孕期。
4. 根据权利要求1或2的方法，其中该受试者是处于24周至28周的孕期。
5. 根据权利要求1或2的方法，其中该受试者是处于28周至32周的孕期。
6. 根据权利要求1或2的方法，其中该受试者是处于28周至34周的孕期。
7. 根据权利要求1或2的方法，其中该受试者是处于大于34周的孕期。
8. 根据权利要求1-7中任一项的方法，其中该抗凝血酶具有高甘露糖糖基化模式。
9. 根据权利要求1-8中任一项的方法，其中该抗凝血酶包括GalNac(N-乙酰半乳糖 胺）。
10. 根据权利要求1-9中任一项的方法，其中该抗凝血酶具有岩藻糖-GlcNAc糖基化模 式。
11. 根据权利要求1-10中任一项的方法，其中该抗凝血酶为转基因产生的抗凝血酶。
12. 根据权利要求11的方法，其中该抗凝血酶在山羊中以转基因方式产生。
13. 根据权利要求1-12中任一项的方法，其中该抗凝血酶为ATryn?。
14. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶以每日1500单位的剂量给 予。
15. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶以每日3000单位的剂量给 予。
16. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶以每日12000单位的剂量给 予。
17. 根据权利要求1-16中任一项的方法，其中该抗凝血酶通过连续输注给予。
18. 根据权利要求1-16中任一项的方法，其中该抗凝血酶通过团注给予。
19. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶通过团滴注以每日两次3500 单位的剂量给予。
20. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶通过连续输注以每日10500 单位的剂量给予。
21. 根据权利要求1-13中任一项的方法，其中该抗凝血酶通过连续输注以每日12000 单位的剂量给予。
【文档编号】A61K38/55GK104321076SQ201380020038
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2013年3月12日 优先权日:2012年3月12日
【发明者】J.弗里林, S.劳里 申请人:Lfb美国股份有限公司