洋橄榄叶素衍生物及其在抗耐药菌和耐药结核分枝杆菌感染中的应用的利记博彩app
【专利摘要】本发明涉及洋橄榄叶素衍生物及其在抗耐药菌及耐药结核分枝杆菌感染中的应用，所述衍生物系源于海洋放线菌链霉菌7-145（Streptomyces?sp.7-145）的发酵产物，实验研究结果证明，所发现的新结构及已知结构化合物，均对所试耐药菌及耐药结核分枝杆菌具有很强的抗菌活性，有望成为临床有用的抗耐药菌及耐药结核分枝杆菌感染新药物。
【专利说明】洋橄榄叶素衍生物及其在抗耐药菌和耐药结核分枝杆菌感染中的应用
【技术领域】:
[0001]本发明涉及从海洋微生物资源获得新化合物；本发明涉及发酵制备所述天然化合物的方法；本发明还涉及所述化合物在抗多种耐药菌以及耐药结核分枝杆菌感染中的应用。
【背景技术】:
[0002]目前，细菌耐药日益严重，研发新的抗生素迫在眉睫。洋橄榄叶素(英文名称:Elaiophylin, Azalomycin B, Gopalamicin,或 Salbomycin)是一类具有双重方定转对称的十六元环大环双内酯抗生素，具有抗菌、抗寄生虫、免疫抑制、促进瘤胃动物增长等广泛的生物活性[严淑玲等，微生物学通报2002，29，103 - 107]。近年来，本实验室从海洋微生物资源中研发出一系列具有生物活性的物质，其中发现几个新结构化合物及已知结构化合物的新用途，尤其是对耐药菌感染有良好抗菌活性的化合物。
[0003]迄今报道的洋橄榄叶素产生菌均为链霉菌，包括生孢链霉菌(Streptomycesmelanosporus) [Arcamone, F.M, et al.Giorn.Microbiol.1959, 7, 207 - 216] > 吸 /JC链霉菌(Streptomyces hygroscopicus) [Arai, M.J.Antibiot.1960,13,46 - 50]>紫黑链霉菌(Streptomyces violaceoniger) [Fiedler, H.P., et al.J.Antibiot.1981,34, 1107 - 1118]> 白色链霉菌(Streptomyces albus) [Klebarobva, E.1.etal.Farmatiya (Sofia), 1972, 22, 3.]等。
[0004]本发明从一株来源于海洋放线菌链霉菌7-145 (Streptomyces sp.7-145)的发酵液活性成分中，获得两个新洋橄榄叶素衍生物，化合物1:11’，12'-脱水洋橄榄叶素(11' , 12 ' -dehydroelaiophylin)和化合物 2:11，11' _0_ 二甲基-14'-去乙基-14'-甲基洋撤揽叶素(11，11' -0-dimethyl-14/ -deethyl-14; -methyIelaiophyIiη),以及四个已知结构洋橄榄叶素类抗生素，化合物3:洋橄榄叶素(elaiophylin)、化合物4:11-0-甲基洋橄榄叶素(ll-0-methylelaiophylin)、化合物 5:11, 11' -O- 二甲基洋橄榄叶素(11，11' -0-dimethylelaiophylin)、化合物6:14'-去乙基-14'-甲基洋橄榄叶素(efomycin G)。体外抗菌活性测试结果表明，这些洋橄榄叶素类化合物对包括MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)、MRSE (耐甲氧西林表皮葡萄球菌)、VRE (耐万古霉素粪肠球菌、屎肠球菌)、广泛耐药(XDR)以及多重耐药(MDR)结核分枝杆菌在内的多种耐药菌具有良好的抗菌活性。涉及化合物I和2的化学结构、制备方法、抗耐药菌和抗结核活性以及化合物3~6等洋橄榄叶素 衍生物对耐药菌和结核分枝杆菌的抗菌活性，迄今为止，尚未见有相关报道。
【发明内容】
:
[0005]本发明目的之一是，提供一株产生洋橄榄叶素衍生物的产生菌；
[0006]本发明目的之二是，提供洋橄榄叶素衍生物，尤其是新洋橄榄叶素衍生物；[0007]本发明目的之三是，提供所述洋橄榄叶素衍生物的制备方法；
[0008]本发明目的之四是，提供所述洋橄榄叶素衍生物在制备抗耐药菌和耐药结核分枝杆菌感染药物中的应用。
[0009]本发明首次从海洋放线菌链霉菌(Streptomyces sp.)7_145的发酵产物中发现了
两个结构新颖的洋橄榄叶素衍生物I和2，其结构如式1、式II所示:
[0010]
【权利要求】
1.一种洋橄榄叶素类衍生物，其特征是，所述衍生物来源于一株保藏编号为 CGMCC N0.7914的海洋放线菌链霉菌7-145发酵产物，其结构如式I所示:
2.一种洋橄榄叶素类衍生物，其特征是，所述衍生物来源于一株保藏编号为 CGMCC N0.7914的海洋放线菌链霉菌7-145发酵产物，其结构如式II所示:
3.制备权利要求1或2所述衍生物的方法，其特征是，所述方法可适用于能产生该化合物的任何微生物尤其是链霉菌的发酵产物，主要包括以下步骤: 1)将活化的微生物，优选链霉菌7-145菌种接种于配方为淀粉-葡萄糖-棉籽饼粉-蛋白胨-无机盐的发酵培养基，在摇瓶中，28°C，摇床培养120h ； 2)发酵液经固液分离后，菌丝体部分使用丙酮超声提取，液体部分经大孔吸附树脂柱吸附，依次用水、50%、100%丙酮洗脱，50%、100%丙酮洗脱液部分与菌丝体丙酮提取物合并，减压浓缩后用乙酸乙酯萃取，得到发酵液浸膏； 3)所得浸膏利用正向硅胶柱色谱分离，依次用石油醚-乙酸乙酯(9:1、4:1、1:1)、乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(1:1)和甲醇梯度洗脱；其中，乙酸乙酯-甲醇(1:1)洗脱部分再经正向硅胶柱色谱分离，依次用二氯甲烷-甲醇(20:1、9:1、4:1、1:1与0:1)梯度洗脱，得到7个流份(A~G);流份C和流份D分别经S^hadex LH - 20柱色谱脱色，二氯甲烷-甲醇1:1洗脱，得到活性组份；脱色后的活性组份分别经HPLC制备和半制备纯化，得到式1、式II所示化合物I和化合物2。
4.权利要求1或2所述化合物在制备抗耐药菌感染药物中的应用。
5.权利要求1或2所述化合物在制备抗结核分枝杆菌包括广泛耐药XDR、多重耐药MDR结核分枝杆菌感染药物中的应用。
6.以权利要求1或2所述衍生物为有效成分，与药学上可接受的一种或多种载体组成的药物组合物。
7.权利要求6所述组合物在制备抗耐药菌和耐药结核分枝杆菌感染药物中的应用。
8.一组洋橄榄叶素衍生物在制备抗耐药菌和耐药结核分枝杆菌感染药物中的应用，所述衍生物，来源于一株保藏编号为CGMCC N0.7914的海洋放线菌链霉菌7-145发酵产物，系式III所示R1 = R2 =羟基、R3 = R4 =甲基、R5=氢的化合物3:洋橄榄叶素况=甲氧基、R2 =羟基、R3 = R4 =甲基、R5 =氢的化合物4:11-0-甲基洋橄榄叶素况=R2 =甲氧基、R3=R4 =甲基、R5 =氢的化合物5:11, 11' -0-二甲基洋橄榄叶素；以及R1 = R2 =羟基、R3= R5=氢、R4=甲基的化合物6:14'-去乙基-14'-甲基洋橄榄叶素。
9.一组洋橄榄叶素衍生物在制备抗耐药菌和结核分枝杆菌感染药物的应用，所述衍生物含有式III所示以下取代基团: R1, R2 =氣或羟基，包括但不限于甲氧基、乙氧基等Cl~C5烷氧基取代基，乙稀氧基、丙烯氧基等C2~C6烯氧基取代基，C2~C6炔氧基、C3~C6环烷氧基、甲酰氧基、乙酰氧基等Cl~C5酰氧基；苯氧基等C6~C12芳环氧基； C-1l - C-12:可以是单键或双键； C-1l' - C-12/:可以是单键或双键； R3J R4 =氣或甲基，包括但不限于乙基、丙基等C2~C5饱和烷基取代基，乙稀、丙稀等C2~C6烯基取代基，C2~C6炔基、C3~C6环烷基； R5 = S?包括但不限于甲基、乙基、丙基等Cl~C5饱和烷基取代基，乙稀、丙稀等C2~C6烯基取代基，C2~C6炔基、C3~C6环烷基、甲酰基、乙酰基等Cl~C5酰基；苯基等C6~C12芳环基团。
【文档编号】A61K31/7048GK103665071SQ201310658925
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年12月9日 优先权日:2013年8月30日
【发明者】甘茂罗, 王以光, 肖春玲, 谭亿, 吴春彦, 周红霞 申请人:中国医学科学院医药生物技术研究所