一种防治水产动物水霉病的方法
【专利摘要】本发明涉及一种防治水产动物水霉病的方法，所述的方法主要应用于防治鱼类、虾类等受精卵和成鱼的水霉病，其特征在于，所述的方法采用药物治疗水霉菌；所述的方法采用泼洒和浸泡两种方式用药分别在预防和治疗草鱼和鲫鱼伤口处的水霉菌，所述的水霉菌为寄生水霉菌。本发明的优点：用药简单，预防和治疗效果显著。
【专利说明】一种防治水产动物水霉病的方法
[0001]【【技术领域】】
本发明涉及微生物【技术领域】，具体地说，是一种防治水产动物水霉病的方法。
[0002]【【背景技术】】 水霉菌广存于世界各地的淡水或半咸水水域及潮湿土壤中，于死亡的有机物上腐生，为一种常在的霉菌，主要有水霉目(Saprolegniales)、霜霉目(peronosporales)及水节霉目(Leptomitales)等,又以水霉菌(Saprolegnia)最为常见，于15~25°C时最适合生长，25°C以上时各中的游孢子(zoospore)繁殖力减弱,较不易感染。
[0003]水霉病的发生主要因为紧迫造成的二次性感染，鱼体因拥挤、移动或其他不良环境因素的影响，造成体表组织受伤，水中的水霉病游孢子即伺机附着，在坏死组织上开始发芽形成菌丝，菌丝除寄生于坏死组织外，尚可漫延侵入附近的正常组织，分泌消化酵素分解周围组织，更而贯穿真皮深入肌肉，使皮肤与肌肉坏死崩解。表层的菌丝则向外延伸，形成如棉絮状的覆盖物，并于末端形成孢子囊，放出游孢子到水中，经由水而传播各处。症状主要为感染部位形成灰白色棉絮状覆盖物；病变部位初期呈圆形，后期则呈不规则的斑块，严重时皮肤破损肌肉裸露；鳃组织亦会被侵犯感染，造成死亡。
[0004]中国专利文献CN10229383IA公开了一种防治水产动物水霉病的复方粉剂及制备方法，由五倍子、大黄、溴硝醇、分散剂一定重量百分比的原料制成。中国专利文献CN101708187A公开了一种用于防治水产动物水霉病的干粉制剂及其制备方法，组分组成为:7广79%生化黄腐酸、10-15%偏重亚硫酸钠、10-15%溴硝醇。但是关于以“立达霉”为主要药物防治水产动物水霉病的专利目前还未见报道。
[0005]【
【发明内容】
】
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种用药简单、治疗效果明显的防治水产动物水霉病的方法。
[0006]为实现上述目的，本发明采取的技术方案是:
一种防治水产动物水霉病的方法，所述的方法主要应用于防治鱼类、虾类等受精卵和成鱼的水霉病，所述的方法采用药物治疗水霉菌；所述的方法采用泼洒和浸泡两种方式用药分别在预防和治疗草鱼和鲫鱼伤口处的水霉菌，所述的水霉菌为寄生水霉菌。
[0007]所述的药物为立达霉。
[0008]所述的药物为立达霉加工后的复方立达霉粉。
[0009]所述的复方立达霉粉为固体颗粒药物。
[0010]所述的复方立达霉粉由45%立达霉、10%的硅藻土、20%的无水硫酸钠、24.5%的硫酸亚铁和0.5%的抗结剂组成。
[0011]所述的药物采用泼洒和浸泡方式预防和治疗水霉菌效果的最佳浓度分别是8mg/L和 20mg/L。
[0012]本发明的优点:
用药简单，预防和治疗效果显著。
[0013]【【具体实施方式】】实施例1
复方立达霉粉药物的制备
采用以下重量配比:取45%的立达霉(又名甲霜灵,英文通用名称metalaxyl,分子式C15H21NO4, CAS号57837-19-1)、10%的硅藻土、20%的无水硫酸钠、24.5%的硫酸亚铁、0.5%的抗结剂(气相白炭黑)混合后制成抗水霉制剂“复方立达霉粉”。
[0014]生产工艺如下:
1抗水霉制剂“复方立达霉粉”各组分常温下混合:
1)先将娃藻土、硫酸亚铁和抗结剂投入混匀机中预混10~15min,转速50~60 r/
min ；
2)再将无水硫酸钠投入混匀机与上述混合物一起混合10~15min，转速50~60 r/
min ；
3)最后将立达霉投入混匀机与上述混合物一起混合30~40min。转速50~60 r/
min。
[0015]2抗水霉制剂“复方立达霉粉”常温下包装:
I)将上述混合物进行分装，准确称取200 g每份，装入可以封口的内包装带内，进行封
Π ；
2)然后将内包装袋放入外包装袋中，并打印生产日期；
3)将上述生产好的复方立达霉粉每50包装成一箱。
[0016]实施例2 I材料与方法
1.1试验药物和试剂
“复方立达霉粉”，长沙拜特生物科技研究所有限公司
1.2菌株来源
水霉菌株ATCC200013为上海海洋大学国家水生动物病原库提供。
[0017]1.3对水霉体外作用效果实验
1.3.1水霉抱子悬液制备
挑取保藏于试管的水霉菌丝转接于马铃薯葡萄糖琼脂培养基(马铃薯块200~300g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL)平板上，在平板上滴加适量无菌水25°C培养48h，期间适量增添无菌水。待铺满整个培养皿后，倒出诱生有孢子的无菌水，再用无菌水轻轻冲洗平板I次合并，经8层纱布过滤，分别调整孢子浓度为IO2个/mL、IO3个/mL、IO4个/mL待实验用。
[0018]1.3.2待试药物母液配制及梯度稀释
将抗水霉制剂“复方立达霉粉”用蒸馏水配制成1000mg/L的药物母液。通过倍释法将该母液依次稀释十个梯度:1000、500、250、125、62、31、16、8、4mg/L。
[0019]1.3.3水霉孢子抑制实验
以不同梯度浓度的药物倍释液2mL加至18mL经融化56°C的PDA (马铃薯葡萄糖琼脂培养基:马铃薯块200~300g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL)使之均匀，迅速倾倒于培养皿中待凝固用于实验，即药物PDA平板浓度为原浓度的1/10。
[0020]取0.1mL水霉孢子菌悬液涂布于凝固的培养基上。设空白对照组，25°C培养5d。孵育期每24h观察一次，肉眼判定无菌落生长的最低药物培养皿的药物浓度为MIC。每个浓度设两个对照，同时设不加药液的空白PDA培养基为对照。
[0021]1.3.4水霉菌丝杀灭实验
将经马铃薯葡萄糖琼脂培养基(马铃薯块200~300g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL)，25°C培养48h后，铺满平板的水霉用无菌刀片切成约1、2、3 cm2的小块。将切好的水霉小块放入盛有上述各浓度的药物倍释液的离心管中分别浸泡0.17,0.5、l、2h.用无菌镊子取出浸泡过的水霉小块置于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，25°C培养观察5d。孵育期每24h观察一次，肉眼判定无水霉菌落生长的，表示此种药物在该浓度该作用时间下对水霉菌丝具有杀灭作用。每个浓度设两个对照，同时设经蒸馏水浸泡过的水霉块空白对照。
[0022]2 结果
2.1抗水霉制剂“复方立达霉粉”对水霉孢子MIC影响(表1)
表1抗水霉制剂“复方立达霉粉”对水霉孢子的MIC
【权利要求】
1.一种防治水产动物水霉病的方法，所述的方法主要应用于防治鱼类、虾类等受精卵和成鱼的水霉病，其特征在于，所述的方法采用药物治疗水霉菌；所述的方法采用泼洒和浸泡两种方式用药分别在预防和治疗草鱼和鲫鱼伤口处的水霉菌；所述的水霉菌为寄生水霉菌。
2.根据权利要求1所述的防治水产动物水霉病的方法，其特征在于:所述的药物为立达霉。
3.根据权利要求1所述的防治水产动物水霉病的方法，其特征在于:所述的药物为立达霉加工后的复方立达霉粉。
4.根据权利要求1所述的防治水产动物水霉病的方法，其特征在于:所述的复方立达霉粉由45%的立达霉、10%的硅藻土、20%的无水硫酸钠、24.5%的硫酸亚铁、0.5%的抗结剂组成。
5.根据权利要求1所述的防治水产动物水霉病的方法，其特征在于:所述的复方立达霉粉为固体颗粒药物。
6.根据权利要求1所述的防治水产动物水霉病的方法，其特征在于:所述的药物采用泼洒和浸泡方式在预防和治 疗草鱼和鲫鱼水霉菌效果 的最佳浓度分别是8mg/L和20mg/L。
【文档编号】A61P31/10GK103536586SQ201310442736
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年9月26日 优先权日:2013年9月26日
【发明者】李浩然, 杨先乐, 胡鲲 申请人:上海海洋大学