后发性白内障抑制用组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种后发性白内障抑制用组合物及其制备方法，所述后发性白内障抑制用组合物包含亲水性柳氮磺胺吡啶、高含量的透明质酸、以及含有水溶液的载体，所述制备方法中，向亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末并以特定反应条件来混合，从而能够得到上述后发性白内障抑制用组合物。
【专利说明】后发性白内障抑制用组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种后发性白内障抑制用组合物及其制造方法。更详细地说，涉及一种不仅能够降低后发性白内障的发病率，有效地防止由后发性白内障引起的视力丧失及二次手术，而且能够提供更加有效的药效及均匀的制剂的后发性白内障抑制用组合物及其制造方法。
【背景技术】
[0002]已知全部白内障手术患者的约30 %是后发性白内障(After-cataract, Poster1rcapsular opacity),即，剩余的晶状体上皮细胞以不规则的排列向晶状体后囊(poster1rcapsule)内生长，从而患有晶状体再次浑浊的疾病。据报导这种后发性白内障在所有年龄段都能够发生，特别地，与老龄患者相比，在年轻患者中表现出高出2倍以上的发病率。
[0003]更加具体地，如图1及图2所示，如果在白内张手术后暴露于外部环境中，则晶状体上皮细胞会持续地增殖。由此，晶状体上皮细胞会向作为相对空的空间的晶状体后囊迁移，在引起持续的细胞转分化和增殖的同时使光的透过能力及视力降低，这种聚集于后囊的晶状体上皮细胞在完全转分化的同时发生后发性白内障。
[0004]目前为止，已知激光(Nd-YgLaser)手术是后发性白内障治疗的唯一方法，但是在这种激光手术后，会产生视野变窄的问题。由此，预防性治疗后发性白内障相对来说更加有效，但是，目前为止，作为抑制后发性白内障的方法，只提出了在手术时对人工晶状体支持部施加物理性变化或利用晶状体囊张力环的方法。
[0005]在韩国登记专利第0490286号中公开了如下的视网膜损伤治疗用眼药组合物，该组合物将柳氮磺胺吡啶或其水溶性盐作为活性成分从而能够治疗由青光眼引起的视网膜缺血、由糖尿病性视网膜症引起的视网膜损伤、由葡萄膜炎引起的视网膜神经退化等。
[0006]此外，在韩国登记专利第0417623号中公开了将柳氮磺胺吡啶作为有效成分从而能够预防及治疗帕金森氏病、亨廷顿氏病或阿尔茨海默氏病等脑神经疾病的药物组合物。
[0007]然而，利用这些方法仍然不能够有效预防及治疗后发性白内障，对于通过抑制白内障晶状体上皮细胞的增殖及迁移来预防或治疗后发性白内障的方法来讲仍处于完全未知状态。
【发明内容】
[0008]所要解决的课题
[0009]本发明的目的是提供一种后发性白内障抑制用组合物及其制造方法，该后发性白内障抑制用组合物不仅能够降低后发性白内障的发病率，有效地防止由后发性白内障引起的视力丧失及二次手术，而且能够提供更加有效的药效及均匀的制剂。
[0010]课题的解决方法
[0011]本发明提供一种后发性白内障抑制用组合物，其包含亲水性柳氮磺胺吡啶、1.4至
2.0% (w/v)的透明质酸、以及含有水溶液的载体。
[0012]此外，本发明提供一种后发性白内障抑制用组合物的制造方法，其包括使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤；向上述亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末的步骤；及将上述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末在33至42°C混合5至24小时的步骤。
[0013]以下，详细说明根据本发明的【具体实施方式】的后发性白内障抑制用组合物及其制造方法。
[0014]根据本发明的一个实施方式，能够提供一种后发性白内障抑制用组合物，其包含亲水性柳氮磺胺吡啶、1.4至2.0% (w/v)的透明质酸、以及含有水溶液的载体。
[0015]本发明人曾经在韩国登记专利第0894042号中公开，如果使用柳氮磺胺吡啶-透明质酸混合物及包含其的后发性白内障抑制用组合物，则能够通过抑制作为后发性白内障的原因的上皮细胞的增殖及迁移来保持晶状体后囊的透明性，从而能够抑制后发性白内障的发生。
[0016]然而，由于透明质酸作为难溶性化合物对水溶剂等的最大溶解度只不过是2%(w/v)，因此即使以相同的比例混合包含了柳氮磺胺吡啶的水溶液和包含了 2% (w/v)的透明质酸的水溶液，制造的组合物相中的透明质酸的浓度也不会达到眼科手术时所要求的浓度,例如，1.4?1.5% (w/v)，而且这种混合物的均匀性也不够充分。
[0017]由此，本发明人持续进行研究并通过实验确认到，如果应用后述的特定的制造方法，则不仅能够以眼科手术时所要求的水平以上的含量包含透明质酸，还能够制造均匀性显著优异的同时具有同等水平以上的后发性白内障抑制效果的后发性白内障抑制用组合物，从而完成了发明。因此，这种后发性白内障抑制用组合物不仅能够显著降低后发性白内障的发病率，有效地防止由后发性白内障引起的视力丧失及二次手术，而且能够提供更加有效的药效及具有均匀分散状态的制剂。
[0018]此外，如后述的实验例A及C中所示，确认到上述后发性白内障抑制用组合物通过有效抑制晶状体上皮细胞的迁移，能够显著降低后发性白内障的发病率。更具体地说，确认到如果应用上述后发性白内障抑制用组合物，则能够抑制NF-k B在作为主活性部位的细胞核中的表达。
[0019]已知上述柳氮磺胺卩比唳(Sulfasalazine, 2-轻基-5-[[4-[(2-卩比唳基氨基)磺酰基]偶氮]苯甲酸(2-Hydroxy-5-[ [4-[ (2-pyridinylanimo) sulfonyl] azo]benzoic acid)或者6-氧代-3-(2-[4-(N-吡啶-2-基磺酰基)苯基]亚肼基)环己-1，4-二烯羧酸)(6_oxo-3-(2-[4-(N-pyridin-2-ylsulfamoyl)phenyl]hydrazono)cyclohexa-1, 4-dienecarboxylic acid))是由横胺批 P定(Sulfapyridine)与 5-氨基水杨酸(5-aminosalicyli cacid,5-ASA)通过偶氮键(azo bond)而形成的化合物,其能够抑制NF_kB(核因子_k B,Nuclear factor kappa B)的活性。由此,包含这种柳氮磺胺卩比唳的上述后发性白内障抑制用组合物抑制在晶状体上皮细胞增殖及迁移时表达出的NF-k B的活性，从而能够抑制后发性白内障的发病。
[0020]由于上述柳氮磺胺吡啶在水溶液中具有难溶性，因此为了能够以药剂使用，需要使其可溶化为亲水性柳氮磺胺吡啶。这种亲水性柳氮磺胺吡啶可以通过向柳氮磺胺吡啶中添加盐酸、氯化钠、氯化钾等以酸加成盐或碱加成盐的形态得到，更加优选地，也可以通过对柳氮磺胺批唳进行聚乙二醇化(PEGylat1n)来得到。
[0021]上述亲水性柳氮磺胺吡啶可以包含聚乙二醇化的柳氮磺胺吡啶。上述聚乙二醇化的柳氮磺胺吡啶可以通过将柳氮磺胺吡啶添加到包含聚乙二醇的平衡盐溶液中来得到。这种平衡盐溶液可以包含多种分子量及浓度的聚乙二醇，优选以1%、优选5% (v/v)以上的浓度包含具有300至500、优选380至420的重均分子量的聚乙二醇。
[0022]上述亲水性柳氮磺胺吡啶的浓度可以是0.1至1.5mM、优选为0.2至1.2mM、更优选为0.3至l.0mM。如果上述浓度小于0.1mM，则有可能难以体现有效的药效，如果大于1.5mM,则在长时间的眼科手术时对晶状体的上皮细胞产生过高的毒性。
[0023]另一方面，由于上述透明质酸(hyaluronic acid)在白内障手术时保持晶状体囊的形状，在植入人工晶状体时起润滑剂的作用，并且提高组合物的透明度及粘度，因此在将上述后发性白内障抑制用组合物应用于眼球时能够给予稳定的手术。
[0024]在本发明的一个实施方式的后发性白内障抑制用组合物中，上述后发性白内障抑制用组合物中的透明质酸的含量可以是1.4至2.0% (w/v)，更优选地可以是1.5至1.8%(w/v)。以往，不仅难以制造以大于1.0% (w/v)的含量包含透明质酸的组合物，而且即使提高透明质酸的含量，组合物的均匀性也显著降低。然而，根据后述的特定的制造方法，能够提供透明质酸的含量为1.4至2.0% (w/v)的同时具有优异均匀性的后发性白内障抑制用组合物。
[0025]在上述后发性白内障抑制用组合物中，在透明质酸的含量小于1.4% (w/v)的情况下，不仅难以保持晶状体的形状，植入人工晶状体时润滑剂的作用有可能降低，不能有效地传递柳氮磺胺吡啶的药效，而且上述组合物的粘度降低，柳氮磺胺吡啶能够与晶状体上皮细胞接触的时间缩短，从而难以以眼球用制剂发挥理想的作用，因此不优选。
[0026]另一方面，在上述后发性白内障抑制用组合物中，可以使用具有1.0X 16至
4.0XlO6g/摩尔的重均分子量的透明质酸。
[0027]在上述后发性白内障抑制用组合物中，利用高效液相色谱(HPLC)测量的柳氮磺胺吡啶含量的相对标准偏差可以是2以下。根据以往技术，在包含柳氮磺胺吡啶及透明质酸的混合物的组合物中，如果提高透明质酸的含量，则能够观察到均匀性显著降低且柳氮磺胺吡啶的分散十分不均匀的现象(例如，柳氮磺胺吡啶含量的相对标准偏差变得十分大的现象)，然而，如后述的实验例D中所示，在本发明的一个实施方式的上述后发性白内障抑制用组合物中，确认到柳氮磺胺吡啶及透明质酸分散得十分均匀。因此，在将上述后发性白内障抑制用组合物应用于眼科手术等中的情况下，由于能够在整个晶状体上皮细胞区域中使柳氮磺胺吡啶均匀接触，因此能够解决柳氮磺胺吡啶以过高浓度接触特定部位而对晶状体上皮细胞表现出毒性、或者以低浓度接触而无法表现出有效的药效的问题等，从而能够提供十分稳定的眼科手术用制剂。此外，在将上述后发性白内障抑制用组合物应用于眼科手术等中的情况下，由于将柳氮磺胺吡啶与透明质酸一同使用，因此能够在手术时使二次给药的繁琐及有关附加毒性的风险最小化。
[0028]另一方面，上述包含水溶液的载体可以包含蒸馏水、磷酸缓冲液(PhosphateBuffered Saline)、平衡盐溶液(Balanced Salt Solut1n)、生理盐水(Saline)或者它们的混合物。
[0029]上述后发性白内障抑制用组合物可以进一步包含可药用的盐。上述可药用的盐的具体例子有盐酸、氯化钠、氯化钾或者它们的混合物。
[0030]另一方面，根据本发明的一个【具体实施方式】，能够提供一种后发性白内障抑制用组合物的制造方法，其包括使柳氮磺胺批唳亲水化的步骤；向上述亲水化的柳氮磺胺批唳中添加透明质酸粉末的步骤；及将上述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末在33至42°C混合5至24小时的步骤。
[0031]本发明人持续进行有关后发性白内障抑制用组合物的研究并通过实验确认到，如果向亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末并以特定的反应条件进行混合，则不仅能够提高透明质酸的含量，而且能够提高组合物的均匀性，因此能够提供具有优异的药效及稳定性的后发性白内障抑制用组合物，从而完成了发明。
[0032]上述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末优选在33至42°C、优选35至40°C混合5至24小时、优选10至15小时。在上述混合时的温度小于33°C的情况下，后发性白内障抑制用组合物的成分可能无法均匀混合，在大于42°C的情况下，难以进行制剂的稳定的制造，因此不优选。此外，在上述混合时间小于5小时的情况下，后发性白内障抑制用组合物的成分可能无法均匀混合，在大于24小时的情况下，透明质酸的粘度可能产生变化。
[0033]如后述的实验例D中所示，在35°C (实施例4) ,37°C (实施例1)及40°C (实施例3)的温度，将上述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末混合而制造的后发性白内障抑制用组合物中，柳氮磺胺吡啶含量的相对标准偏差显示出2以下，从而确认到后发性白内障抑制用组合物的成分分散得十分均匀。与之相反，在上述混合温度为25°C (比较例I)的情况下，显示出20%以上的高相对标准偏差，从而确认到后发性白内障抑制用组合物的成分分散得十分不均匀。
[0034]在上述使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤中，作为用于使难溶性化合物可用化的方法，可以无限制地使用通常已知的方法，但优选可以应用使柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化的步骤。具体地，在这种使柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化的步骤中，可以包括将柳氮磺胺吡啶添加到包含聚乙二醇的平衡盐溶液中的步骤。上述平衡盐溶液中所包含的聚乙二醇可以通过将柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化来使其亲水化。如果将柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化来使其亲水化，则能够在没有化学结构改变的情况下用作水溶性液体，从而能够容易地制成注射剂及眼科用制剂。与上述柳氮磺胺吡啶及聚乙二醇有关的具体内容与上述内容相同。
[0035]在上述使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤中，可以包括将柳氮磺胺吡啶的浓度调节为
0.1至1.5mM的步骤。更具体地，向包含聚乙二醇的平衡盐溶液中添加适量的柳氮磺胺吡啶溶液，从而能够将上述柳氮磺胺吡啶的浓度调节为0.1至1.5mM、优选调节为0.2至1.2mM、更优选调节为0.3至1.0mM。
[0036]在上述向上述亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末的步骤中，可以包括在全部组合物相中将上述透明质酸的浓度调节为1.4至2.0% (w/v)，优选调节为1.5至
1.8% (w/v)的步骤。更具体地，可以向上述亲水化的柳氮磺胺卩比唳或者添加有上述柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液中添加适量的透明质酸粉末来调节浓度。对上述透明质酸粉末的物性、形态、大小等没有限制，优选无菌处理的透明质酸粉末。
[0037]另一方面，在上述后发性白内障抑制用组合物的制造方法中，可以进一步包括添加可药用的添加剂、载体或盐的步骤。这种可药用的载体或盐可以在上述后发性白内障抑制用组合物的制造过程中无限制地添加，优选在上述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末完全混合后添加。
[0038]发明效果
[0039]根据本发明，能够提供如下后发性白内障抑制用组合物:不仅能够降低后发性白内障的发病率，从而防止由后发性白内障引起的视力丧失及二次手术，而且能够提供更加有效的药效及稳定的制剂。
【专利附图】
【附图说明】
[0040]图1概略地表示后发性白内障发生过程。
[0041]图2概略地表示后发性白内障发病与晶状体上皮细胞的关系。
[0042]图3表示对根据实施例的后发性白内障抑制用组合物是否抑制了晶状体上皮细胞的迁移进行确认的结果及对该结果的统计数据。
[0043]图4表示通过MTT分析对于不同浓度的柳氮磺胺吡啶对细胞的毒性进行确认的结果O
[0044]图5表示对NF-k B在细胞质及核中是否被活化进行确认的结果及对该结果的统计数据。
[0045]图6表示实施例1、实施例3、实施例4及比较例I的后发性白内障抑制用组合物的均匀性评价结果。
[0046]图7表示实施例2及比较例2的后发性白内障抑制用组合物的均匀性评价结果。
【具体实施方式】
[0047]在下述实施例中更加详细说明本发明。但，下述实施例只是例示本发明，本发明的内容并不局限于下述实施例。
[0048]<实施例及比较例:后发性白内障抑制用组合物的制造>
[0049]实施例1
[0050]向500mL的含有10% (v/v)的聚乙二醇(PEG，Mw.400，商品名:P3265，西格玛公司)的平衡盐溶液(Balanced salt solut1n)中添加柳氮磺胺卩比唳以使其浓度为0.5mM,并且在室温下进行了 2小时左右的混合。
[0051]然后，在37 °C下混合12小时以使透明质酸粉末(Sodium Hyaluronate, NOVAB1tech)在上述含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液中达到15g/L，从而得到柳氮磺胺吡啶-透明质酸混合物的后发性白内障抑制用组合物。
[0052]实施例2
[0053]使柳氮磺胺吡啶的浓度为1.0mM,除此之外，利用与上述实施例1相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0054]实施例3
[0055]将上述含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液及透明质酸粉末的混合温度设为40°C，除此之外，利用与实施例1相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0056]实施例4
[0057]将上述含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液及透明质酸粉末的混合温度设为35°C，除此之外，利用与实施例1相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0058]实施例5
[0059]使柳氮磺胺吡啶的浓度为0.3mM,除此之外，利用与上述实施例1相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0060]比较例I
[0061]将上述包含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液及透明质酸粉末的混合温度设为25°C，除此之外，利用与实施例1相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0062]比较例2
[0063]向500mL的含有10% (v/v)的聚乙二醇(PEG，Mw.400，商品名:P3265，西格玛公司)的平衡盐溶液中添加柳氮磺胺吡啶以使其浓度为1.0mM,并且在室温下进行I小时左右的混合。
[0064]然后，以50:50的重量比，向上述含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液中配合2%的透明质酸溶液，并且在25°C进行2小时的混合，从而得到柳氮磺胺吡啶-透明质酸混合物的后发性白内障抑制用组合物。
[0065]比较例3
[0066]使柳氮磺胺吡啶的浓度为0.5mM,除此之外，利用与上述比较例2相同的方法得到后发性白内障抑制用组合物。
[0067]在下述表1中记载了上述实施例1至5及比较例I至3中的柳氮磺胺吡啶浓度、透明质酸的使用量(浓度)及含有柳氮磺胺吡啶的平衡盐溶液及透明质酸粉末的混合温度。
[0068][表 I]
[0069]
【权利要求】
1.一种后发性白内障抑制用组合物，其包含亲水性柳氮磺胺吡啶、1.4至2.0% (w/v)的透明质酸、以及含有水溶液的载体。
2.如权利要求1所述的后发性白内障抑制用组合物，所述亲水性柳氮磺胺吡啶包含聚乙二醇化的柳氮磺胺吡啶。
3.如权利要求1所述的后发性白内障抑制用组合物，所述亲水性柳氮磺胺吡啶的浓度是 0.1 至 L 5mM。
4.如权利要求1所述的后发性白内障抑制用组合物，所述含有水溶液的载体包括选自由蒸馏水、磷酸缓冲液、平衡盐溶液及生理盐水组成的组中的一种以上的可药用的载体。
5.如权利要求1所述的后发性白内障抑制用组合物，其进一步包含选自由盐酸、氯化钠及氯化钾组成的组中的一种以上的可药用的盐。
6.一种眼球给药用制剂，其包含权利要求1至5中任一项所述的后发性白内障抑制用组合物。
7.—种后发性白内障抑制用组合物的制备方法，包括: 使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤； 向所述亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末的步骤；及 将所述亲水化的柳氮磺胺吡啶及透明质酸粉末在33至42°C混合5至24小时的步骤。
8.如权利要求7所述的后发性白内障抑制用组合物的制备方法，所述使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤包括使柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化的步骤。
9.如权利要求8所述的后发性白内障抑制用组合物的制备方法，所述使柳氮磺胺吡啶聚乙二醇化的步骤包括将柳氮磺胺吡啶添加到包含聚乙二醇的平衡盐溶液中的步骤。
10.如权利要求7所述的后发性白内障抑制用组合物的制备方法，所述使柳氮磺胺吡啶亲水化的步骤包括将柳氮磺胺吡啶的浓度调节为0.1至1.5mM的步骤。
11.如权利要求7所述的后发性白内障抑制用组合物的制备方法，所述向亲水化的柳氮磺胺吡啶中添加透明质酸粉末的步骤包括将所述透明质酸的浓度调节为1.4至2.0%(w/v)的步骤。
【文档编号】A61K31/4402GK104168901SQ201280069538
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2012年1月9日 优先权日:2011年12月12日
【发明者】白永俊, 朱天基, 李星熙, 崔俊燮, 禹具 申请人:株式会社Bmi韩国, 加图立大学校产学协力团