专利名称：一种紫香益母制剂及其制备方法和检测方法
技术领域：
本发明涉及一种紫香益母制剂及其制备方法和检测方法，属于中药技术领域。
背景技术：
现代医学认为女性生殖系统炎症性疾病的形成，主要是由于诱发感染的因素，使病原微生物乘虚而入，上行感染所致。从中医辨证的“证”型而论，它应为“湿热下注”、“瘀血遏阻”、“热毒蕴结”以及相类似的“肝经湿热”、“气滞血瘀”、“湿毒炽盛”诸证。其病因病机多在妇人产后，流产后或妇科手术处置后，或平素卫生保健不当，或不洁性生活，致使邪毒乘虚侵袭，稽留于冲任及胞宫脉络，与气血相搏结，邪正交争，而发热疼痛，邪毒炽盛则腐肉酿脓，或异致带下异常，或引发下腹胀痛，痛连腰骶，或少腹包块痛而拒按，皆由湿热邪毒侵袭所致。收载于《中国药典》、《部颁标准》和“地标升国标”的中药品种中，属于妇科用药的有数百个品种之多，如妇科止带片、宫炎平片、盆炎净颗粒、抗宫炎片、妇乐冲剂、妇炎净胶囊、妇炎康片、妇炎康复片、妇炎消胶囊、妇康炎胶囊等等。但在现有的同类中药品种中，其病证结合、辨证分型不太清晰。
发明内容
本发明的目的在于提供一种紫香益母制剂及其制备方法和检测方法。本发明所提供的药物组成药味不多，结构严谨，符合中医药辨证施治之大法，疗效确切；且其制备工艺科学、合理，提高了有效成分含量，保证了疗效的稳定性，并能大幅度降低生产成本；其检测方法可有效控制药品质量，从而确保其临床疗效。本发明的技术方案一种紫香益母制剂，由下述重量份的原料药制成杠板归500-700份、紫花地丁 500-700份、红土茯苓500-700份、黄柏400-600份、益母草300-500份、大血藤300-500份、苦参300-500份和香附200-400份。前述的紫香益母制剂，优选由下述重量份的原料药制成杠板归600份、紫花地丁600份、红土茯苓600份、黄柏500份、益母草400份、大血藤400份、苦参400份和香附300份。前述紫香益母制剂可以是以淀粉20-30重量份和微晶纤维素20-30重量份为辅料制成的胶囊剂。以上所述紫香益母制剂的制备方法称取杠板归、紫花地丁、红土茯苓、黄柏、益母草、大血藤、苦参、香附八味药材,杠板归、黄柏、香附回流提取1-3次，每次加10-11倍量65%乙醇、回流提取I小时，滤过，药渣备用；滤液回收乙醇、减压浓缩，微波真空干燥，得干膏，粉碎过80目筛备用；药渣和紫花地丁、红土茯苓、益母草、大血藤、苦参五味药材加水煎煮1-3次，每次加8-9倍量水、煎煮I小时，滤过，滤液离心，用孔径O. 18 μ中空纤维膜滤过，再用孔径O. 05 μ中空纤维膜滤过，滤液减压浓缩至50°C相对密度1. 2的稠膏，微波真空干燥，粉碎过80目筛；将两种膏粉混合，加入辅料制成各种药物制剂。
按照前述制备方法，将两种膏粉混合后，加入淀粉20-30重量份和微晶纤维素20-30重量份，混匀，用90%乙醇制粒，60°C以下烘干，颗粒装入胶囊，即得胶囊剂。优选的紫香益母胶囊剂的制备方法为称取杠板归、紫花地丁、红土茯苓、黄柏、益母草、大血藤、苦参、香附八味药材，杠板归、黄柏、香附回流提取2次，第一次加11倍量65%乙醇，第二次加10倍量65%乙醇，每次回流提取I小时，滤过，药渣备用；滤液60°C以下回收乙醇、减压浓缩，60°C以下微波真空干燥，得干膏，粉碎过80目筛备用；药渣和紫花地丁、红土获考^益母草、大血藤、苦参五味药材加水煎煮2次,第一次加9倍量水,第二次加8倍量水，每次煎煮I小时，滤过，滤液离心，用孔径O. 18 μ (相当于截留分子量18万)中空纤维膜滤过，再用孔径0.05μ (相当于截留分子量5万)中空纤维膜滤过，滤液减压浓缩至50°C相对密度1. 2的稠膏，60°C以下微波真空干燥，粉碎过80目筛；将两种膏粉混合，加入淀粉25重量份和微晶纤维素25重量份，混匀，用90%乙醇制粒，60°C以下烘干，颗粒装入胶囊，即得。以上所述紫香益母制剂的检测方法包括性状、鉴别、检查和含量测定项目；其中鉴别是对制剂中的红土茯苓、紫花地丁、大血藤、香附的薄层色谱鉴别；含量测定是用高效液相色谱法分别测定制剂中黄柏所含盐酸小檗碱和杠板归所含槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸的含量；红土茯苓的鉴别方法是以红土茯苓对照药材为对照，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 I I O.1为展开剂的薄层色谱法；紫花地丁的鉴别方法是以紫花地丁对照药材为对照，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸=20 2.5 5 O.1为展开剂的薄层色谱法；大血藤的鉴别方法是以大血藤对照药材和大黄素对照品为对照，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲 酸=15 5 I的上层溶液为展开剂的薄层色谱法；香附的鉴别方法是以香附对照药材为对照，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 6 I为展开剂的薄层色谱法；黄柏中盐酸小檗碱的含量测定方法是以盐酸小檗碱对照品为对照，以甲醇-水=75 25为流动相的高效液相色谱法；杠板归中槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸的含量测定方法是以槲皮素
3-β-D葡萄糖醛酸对照品为对照，以乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相的高效液相色谱法。前述检测方法中，具体的鉴别方法包括以下项目(I)取本制剂内容物2g,加75%甲醇IOml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残洛加75%甲醇2ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次2ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取红土茯苓对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各
5μ I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 :1 :1 : O.1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂内容物2g，研细，加水20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液加10%氢氧化钠溶液，调节PH值至8 9，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取紫花地丁对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸=20 : 2.5 : 5 : O.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂内容物lg，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加
2.5mol/L硫酸溶液5ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大血藤对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液和对照药材溶液各4 μ1、对照品溶液I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸=15 5 I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑占. (4)取本制剂内容物lg，加三氯甲烷10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 : 6 :1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在80°C加热I分钟，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。前述检测方法中，具体的含量测定方法为(I)盐酸小檗碱照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水=75 25为流动相，检测波长为265nm，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2000 ;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得；本制剂每粒含黄柏以盐酸小檗碱(C2tlH19CLNO4)计，不得少于O. 3Img ；(2)槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相，检测波长为310nm，理论塔板数按槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取槲皮素3_β -D葡萄糖醛酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含70 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得；本制剂每粒含杠板归以槲皮素3-13-D葡萄糖醛酸(C21H18O13)计，不得少于
3.84mg0详细地说，所述紫香益母制剂的检测方法包括性状本制剂内容物为棕色至棕褐色颗粒及粉末；气微香，味微苦涩；鉴别(1)取本制剂内容物2g，加75%甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加75%甲醇2ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次2ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取红土茯苓对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 I I O.1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂内容物2g，研细，加水20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液加10%氢氧化钠溶液，调节PH值至8 9，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取紫花地丁对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸=20 : 2.5 : 5 : O.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂内容物lg，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加
2.5mol/L硫酸溶液5ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大血藤对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液和对照药材溶液各4 μ1、对照品溶液I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸=15 5 I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑占.(4)取本制剂内容物lg，加三氯甲烷10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 : 6 :1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在80°C加热I分钟，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查应符合《中国药典》2010年版一部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定(I)盐酸小檗碱照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定
色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水=75 25为流动相，检测波长为265nm，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2000 ；
对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得；本制剂每粒含黄柏以盐酸小檗碱(C2tlH19CLNO4)计，不得少于O. 3Img ；(2)槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相，检测波长为310nm，理论塔板数按槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取槲皮素3_β -D葡萄糖醛酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含70 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得；本制剂每粒含杠板归以槲皮素3-13-D葡萄糖醛酸(C21H18O13)计，不得少于
3.84mg0本发明组方由杠板归、紫花地丁、红土茯苓、黄柏、益母草、大血藤、苦参、香附共八味中药组成。其中以杠板归、紫花地丁为君药，取其清热解毒、利湿止痛之功；红土茯苓祛瘀止痛、活血通经，黄柏清热凉血，散瘀止痛，此二味为臣药；益母草清热解毒、利湿消肿、散瘀止血；大血藤清热解毒、和中化湿、活血止痛；苦参活血散瘀、解毒、利水、消肿；三者共为佐药，以辅佐君药之效；香附行气解郁、气行则血行，以之为使药。诸药合用，共奏清热解毒、活血化瘀、渗湿散结、消炎止痛之功。适用于湿热下注、瘀血遏阻、热毒蕴结所致的妇人阴痛、阴痒、阴疮溃蚀、带下异常、月经不调、下腹胀痛、痛连腰骶、经行腹痛加剧者；阴道炎、子宫颈炎、宫颈糜烂、附件炎及盆腔炎见上述证候者。为了确保本发明的效果，申请人在确定药物组方之后还对其制备工艺、药效以及制剂的检测方法进行了相应的试验研究，具体如下一、制备工艺研究(一)工艺线路的确定杠板归的脂溶性和水溶性成分均具有较好药理活性，宜先采用醇提，药渣再加水提取；紫花地丁的主要化学成分为水溶性成分，宜采用水提取；红土茯苓的有效成分为水溶性成分，宜采用水提取；黄柏的药理有效成分为脂溶性和水溶性成分，宜采用醇提后药渣水提；益母草中起主要药理作用的有效成分为水溶性成分，宜采用水提；大血藤的有效成分为水溶性成分，宜采用水提；苦参的药理有效成分大多数为水溶性成分，宜采用水提；香附的药理有效成分多为脂溶性成分及挥发油，宜先醇提后水煮。故根据组方中各味药材有效成分及药理研究资料的综合分析，将本发明的工艺路线确定如下(I)杠板归、黄柏、香附醇提，药渣备用；(2)前述药渣与紫花地丁、红土茯苓、益母草、大血藤、苦参五味药材加水提取。(二)提取纯化工艺设计据相关资料报道，中药的主要成分其分子量一般在IOOODa以下，而无需的成分如淀粉、蛋白质、树脂等属于分子量在50000Da以上的高分子物质。为最大限度地保留有效成分，去除与目标功效无关的成分，本发明选用膜分离技术。通过膜的选择，可以有目的地将一些分子量较大的物质截留除去，而保留相对分子量较小的物质，以达到提取纯化的目的。1、醇提工艺的考察( I)吸醇率考察按组方比例称取醇提药材杠板归60g、黄柏50g、香附30g，共140g，加入6倍量65%乙醇，每隔I小时取一部分药材观察药材心是否浸湿，至全部药材心浸湿，滤出药材，称定药材重量245g，求得药材吸醇率为
权利要求
1.一种紫香益母制剂，其特征在于由下述重量份的原料药制成杠板归500-700份、 紫花地丁 500-700份、红土茯苓500-700份、黄柏400-600份、益母草300-500份、大血藤 300-500份、苦参300-500份和香附200-400份。
2.根据权利要求1所述的紫香益母制剂，其特征在于由下述重量份的原料药制成杠板归600份、紫花地丁 600份、红土茯苓600份、黄柏500份、益母草400份、大血藤400份、 苦参400份和香附300份。
3.根据权利要求1或2所述的紫香益母制剂，其特征在于所述制剂是以淀粉20-30重量份和微晶纤维素20-30重量份为辅料制成的胶囊剂。
4.权利要求1或2所述紫香益母制剂的制备方法，其特征在于称取杠板归、紫花地丁、红土茯苓、黄柏、益母草、大血藤、苦参、香附八味药材，杠板归、黄柏、香附回流提取1-3 次，每次加10-11倍量65%乙醇、回流提取I小时，滤过，药渣备用；滤液回收乙醇、减压浓缩，微波真空干燥，得干膏，粉碎过80目筛备用；药渣和紫花地丁、红土茯苓、益母草、大血藤、苦参五味药材加水煎煮1-3次，每次加8-9倍量水、煎煮I小时，滤过，滤液离心，用孔径0.18 μ中空纤维膜滤过，再用孔径O. 05 μ中空纤维膜滤过，滤液减压浓缩至50°C相对密度1.2的稠膏，微波真空干燥，粉碎过80目筛；将两种膏粉混合，加入辅料制成各种药物制剂。
5.根据权利要求4所述紫香益母制剂的制备方法，其特征在于两种膏粉混合后，加入淀粉20-30重量份和微晶纤维素20-30重量份，混勻，用90%乙醇制粒，60°C以下烘干，颗粒装入胶囊，即得胶囊剂。
6.根据权利要求4或5所述紫香益母制剂的制备方法，其特征在于称取杠板归、紫花地丁、红土茯苓、黄柏、益母草、大血藤、苦参、香附八味药材，杠板归、黄柏、香附回流提取2 次，第一次加11倍量65%乙醇，第二次加10倍量65%乙醇，每次回流提取I小时，滤过，药渣备用；滤液60°C以下回收乙醇、减压浓缩，60°C以下微波真空干燥，得干膏，粉碎过80目筛备用；药渣和紫花地丁、红土茯苓、益母草、大血藤、苦参五味药材加水煎煮2次，第一次加9倍量水，第二次加8倍量水，每次煎煮I小时，滤过，滤液离心，用孔径O. 18 μ中空纤维膜滤过，再用孔径O. 05 μ中空纤维膜滤过，滤液减压浓缩至50°C相对密度1. 2的稠膏，60°C 以下微波真空干燥，粉碎过80目筛；将两种膏粉混合，加入淀粉25重量份和微晶纤维素25 重量份，混匀，用90%乙醇制粒，60°C以下烘干，颗粒装入胶囊，即得胶囊剂。
7.权利要求3所述紫香益母制剂的检测方法，其特征在于所述检测方法包括性状、 鉴别、检查和含量测定项目；其中鉴别是对制剂中的红土茯苓、紫花地丁、大血藤、香附的薄层色谱鉴别；含量测定是用高效液相色谱法分别测定制剂中黄柏所含盐酸小檗碱和杠板归所含槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸的含量；红土茯苓的鉴别方法是以红土茯苓对照药材为对照，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 I I O.1为展开剂的薄层色谱法；紫花地丁的鉴别方法是以紫花地丁对照药材为对照，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸 =20 2.5 5 O.1为展开剂的薄层色谱法；大血藤的鉴别方法是以大血藤对照药材和大黄素对照品为对照，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸=15 5 I的上层溶液为展开剂的薄层色谱法；香附的鉴别方法是以香附对照药材为对照，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 6 I为展开剂的薄层色谱法；黄柏中盐酸小檗碱的含量测定方法是以盐酸小檗碱对照品为对照，以甲醇-水=75 25为流动相的高效液相色谱法；杠板归中槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸的含量测定方法是以槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸对照品为对照，以乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相的高效液相色谱法。
8.根据权利要求7所述紫香益母制剂的检测方法，其特征在于具体的鉴别方法包括以下项目(1)取本制剂内容物2g,加75%甲醇IOml,超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残洛加75%甲醇2ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次2ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取红土茯苓对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各 5 μ I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 I 1: O.1 为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂内容物2g，研细，加水20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液加10%氢氧化钠溶液，调节PH值至8 9，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取紫花地丁对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各 5 μ I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸=20 2. 5 5 O.1 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂内容物lg，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液5ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大血藤对照药材lg， 同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液和对照药材溶液各4 μ1、对照品溶液I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸=15 5 I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑占.(4)取本制剂内容物lg，加三氯甲烷10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液； 照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 6 I为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在80°C加热I分钟，置365nm紫外灯下检视； 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
9.根据权利要求7所述紫香益母制剂的检测方法，其特征在于具体的含量测定方法为(I)盐酸小檗碱照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水=75 25为流动相，检测波长为265nm，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得;本制剂每粒含黄柏以盐酸小檗碱计，不得少于O. 3Img ；(2)槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相，检测波长为310nm，理论塔板数按槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 Iml含70 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75% 甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得;本制剂每粒含杠板归以槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸计，不得少于3. 84mg。
10.根据权利要求7、8或9所述紫香益母制剂的检测方法，其特征在于所述的检测方法包括性状本制剂内容物为棕色至棕褐色颗粒及粉末；气微香，味微苦涩；鉴别(1)取本制剂内容物2g，加75%甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加75%甲醇2ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次2ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取红土茯苓对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各 5 μ I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯-甲醇一甲酸=20 :1 :1 : O.1 为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2 )取本制剂内容物2g，研细，加水20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液加10%氢氧化钠溶液，调节PH值至8 9，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取紫花地丁对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各 5 μ I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸=20 2. 5 5 O.1 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂内容物lg，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加,2.5mol/L硫酸溶液5ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次5ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大血藤对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液和对照药材溶液各4 μ1、对照品溶液I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30°C 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸=15 5 I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑占.(4)取本制剂内容物lg，加三氯甲烷10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液； 照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取前述供试品溶液、对照药材溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷一乙酸乙酯一二乙胺=20 6 I为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在80°C加热I分钟，置365nm紫外灯下检视； 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查应符合《中国药典》2010年版一部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定(I)盐酸小檗碱照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水=75 25为流动相，检测波长为265nm，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得;`本制剂每粒含黄柏以盐酸小檗碱计，不得少于O. 3Img ；(2)槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-1. 7%甲酸=10 25 65为流动相，检测波长为310nm，理论塔板数按槲皮素3-β-D葡萄糖醛酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取槲皮素3-3-D葡萄糖醛酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 Iml含70 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂内容物，研细，取O. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75% 甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得;本制剂每粒含杠板归以槲皮素3-β -D葡萄糖醛酸计，不得少于3. 84mg。
全文摘要
本发明公开了一种紫香益母制剂及其制备方法和检测方法，该制剂由下述重量份的原料药制成杠板归500-700份、紫花地丁500-700份、红土茯苓500-700份、黄柏400-600份、益母草300-500份、大血藤300-500份、苦参300-500份和香附200-400份。与现有技术相比，本发明所提供的药物组成药味不多，结构严谨，符合中医药辨证施治之大法，疗效确切；所提供的制备工艺不仅降低了中药提取出膏率，提高了有效成分含量，保证了疗效的稳定性，并解决了制剂过程中吸湿性强稳定性差的问题，还能大幅度地降低生产成本；所提供的检测方法专属性强，测量结果准确，可有效控制药品质量，从而确保其临床疗效。
文档编号A61P15/00GK103028065SQ20121052400
公开日2013年4月10日 申请日期2012年12月7日 优先权日2012年12月7日
发明者周欣, 陈华国, 赵超, 龚小见, 赵杨 申请人:贵州师范大学