大分子磷脂酰甘油纳米脂质体、制备方法及应用的利记博彩app
【专利摘要】本发明公开了一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体、制备方法及应用，属于脂质体的制备及应用技术。所述的磷脂酰甘油纳米脂质体是用磷脂酰甘油壳聚糖作为主膜材来代替磷脂制备具有脂质双层膜结构的囊泡。磷脂酰甘油壳聚糖的特征为重均分子量大于2000，可溶于氯仿、乙醇等有机溶剂，并含有羧基或氨基。制备方法为脂质体的常用制备方法薄膜分散法和反向蒸发法。该类脂质体表面可连接多种靶向制剂，可同时和分别包载水溶性、油溶性或双亲性物质，包括药物、蛋白、基因、营养物质、维生素、磁性颗粒和量子点等。该种方法具有包封率高、操作简便、适用性强、成本低的优点，包衣后的大分子脂质体粒径分布均匀，可在10-5000nm的范围内进行调节，体系稳定，缓释功能强。
【专利说明】大分子磷脂酰甘油纳米脂质体、制备方法及应用
【技术领域】[0001]本发明涉及一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的制备和应用。属于脂质体的制备及应用技术。
【背景技术】[0002]脂质体作为药物载体是临床应用较早，发展最为成熟的一类新型靶向制剂；它是由脂双分子层组成的颗粒，可介导基因穿过细胞膜，又是一种优良的基因和药物载体。脂质体应用非常广泛，制备工艺简单、方法多样，其粒子大小处于纳米级的介观范围，有许多独特的物理、化学性质，粒径还可根据需要进行控制；可用于纳米粒子的制备、临床检验和诊断、催化反应的控制、模拟膜研究及在体内外将基因或其它物质向细胞内传递等。[0003]但是目前的小分子脂质体技术依然存在如物理化学稳定性差，囊泡易发生融合聚集，药物易泄漏；不易进行表面修饰等缺点。利用高分子物质替代磷脂所制备的高分子脂质体可提高脂质体的物理化学稳定性，其不仅具备小分子脂质体的脂质双层膜结构，且制备方法简单，稳定性高，易进行表面修饰。但是阳离子高分子脂质体仍然存在不少缺点，如细胞毒性偏大、正电性偏高所导致的盐溶液中的不稳定特性等，因此有必要开发一种更加稳定、低毒性的高分子脂质体系统。大分子磷脂酰甘油纳米脂质体则属于中性脂质体的范畴，具有低毒性、高稳定性的优点。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，它具有脂质体的优点，同时具有高分子物质特有的多功能和稳定性，可满足上述应用对脂质体的要求。[0005]本发明为一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征在于所述的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体是用双亲性磷脂酰甘油壳聚糖作为主膜材来代替合成磷脂，小分子磷脂为稳定剂所制备的具有脂质双层膜结构的囊泡。[0006]本发明中用于制备大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的磷脂酰甘油壳聚糖的具体特征为:重均分子量大于2000，可溶于极性有机溶剂氯仿或二氯甲烷，并含有羧基或氨基。[0007]本发明中的小分子磷脂包括胆固醇、二油酰脂酰乙醇胺(DOPE)、3i3- [N_(N’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇、卵磷脂、磷脂(PC、PE、PS、P1、PG)、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一种或2-3种，优选为胆固醇、二油酰脂酰乙醇胺或3β- [Ν-(Ν’，Ν’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇。[0008]本发明提供的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的制备方法为用于制备脂质体的所有方法，包括薄膜分散法、反向蒸发法、复乳法、离心法、pH梯度法、注入法和混溶法。[0009]其中薄膜分散法和反向蒸发法的基本步骤为:先将磷脂酰甘油壳聚糖和小分子磷脂及油溶性物质共溶于氯仿或其它有机溶剂中，混匀得溶液I ;然后配置含有水溶性物质的水溶液II。薄膜分散法为:将溶液I通入氮气并除去有机溶剂使成薄膜；用水溶液II超声使脂质薄膜水化；反向蒸发法为:将溶液I与水溶液II共混超声乳化，再除去有机溶剂。最后全部采用柱过滤法、离心法或透析法进行纯化。
[0010]具体大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的制备流程如下:
[0011](a)先制备磷脂酰甘油壳聚糖:取IOOmg磷脂酰甘油(PG)溶于50mL DMSO中，共混于pH=6的硼酸缓冲液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸锌作为催化剂，再加入组织交联剂Denacol EX521 (质量浓度1%_50%)溶液10ml，搅拌反应24小时后，萃取收集反应产物环氧化物修饰的PG ;将环氧化物修饰的PG与氧羧甲基壳聚糖在pH=6硼酸缓冲液中再进行反应24小时，透析48小时后冻干得磷脂酰甘油壳聚糖。
[0012](b)将磷脂酰甘油壳聚糖和小分子磷脂及油溶性物质共溶于氯仿或其他有机溶剂中，混匀；
[0013](C)将步骤b)中得到的混合溶液通入氮气并除去有机溶剂使成薄膜，然后加入含有水溶性物质的水溶液使脂质水化；或将含有水溶性物质的水溶液与步骤b)得到的混合溶液共混超声乳化，再除去有机溶剂。
[0014]本发明所述的水溶性、油溶性或双亲性物质包括药物、蛋白、抗体、基因、维生素、磁性颗粒、量子点、SiO2、磷酸钙无机颗粒，其中优选为抗肿瘤药物紫杉醇、顺钼、阿霉素，RB基因和p53基因，维生素C，Fe304磁性纳米颗粒，CdSe量子点，SiO2纳米球。
[0015]本发明中制备的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的粒径分布均匀，可在10_5000nm的范围内进行调节，分为单层大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，粒径在IO-1OOOnm之间；多层大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，粒径小于5000nm ;和多囊大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，粒径小于5000nm。大分子磷脂酰甘油纳米脂质体具有脂质双层膜结构，磷脂酰甘油壳聚糖为膜的主体，小分子磷脂胆固醇镶嵌其中起稳定作用，其中水溶性物质被包于水相中，油溶性物质分布于双分子膜内，两亲性物质插入双分子膜。且大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在水溶液中具有很好的物理和 化学稳定性，表现在大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的水溶液经冷冻和80°C的高温后结构不会发生变化。大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的Zeta电位可达50.0mV0
[0016]本发明中制备的载有长春新碱的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体对长春新碱的载药率可达14.8%，包封率在90.0%以上，在Tri s-HCl (pH=7.4)缓冲溶液中具有良好的缓控释功能，缓释时间在两周以上，突释现象不明显。
[0017]本发明中制备的磁性大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在水溶液中具有很好的分散性，几乎不发生团聚现象，粒径可达到IOOnm以下，且分布均匀，高聚物脂质体中的磁性粒子保持原Fe3O4的晶型结构，比饱和磁化强度可达40.0emu/g,具有超顺磁性，可满足磁靶向性的需要；磁性长春新碱大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的包封率可达94.0%，在Tris-HCl(pH=7.4)缓冲溶液中具有良好的缓控释功能。
[0018]本发明中制备的量子点标记的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在水溶液中分散性好，粒径可达到IOOnm以下，分布均匀，被包裹的量子点依然保持很高的荧光特性，不会发生荧光淬灭现象，且体系稳定，4°C下可保存6个月以上。
[0019]本发明中的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征是所述的制备方法是对大分子磷脂酰甘油纳米脂质体进行表面修饰或先制备含活性成分的前体物质再进行组装；所用的修饰剂为聚乙二醇、EGFR抗体、叶酸、三苯氧胺、转铁蛋白、甲胎蛋白、表皮生长因子EGF，血管内皮生长因子VEGF，“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸”三肽序列RGD，成纤维细胞生长因子tbFGF,以及单克隆抗体曲妥珠单抗Trastuzumab,西妥昔单抗Cetuximab中的一种或2种以上。所制备的EGFR单克隆抗体介导的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在PBS缓冲溶液中可稳定存在，并可保持EGFR单克隆抗体的活性。[0020]本发明中所述的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在基因和药物载体、临床诊断治疗方面的应用。[0021]与现有产品和技术相比，本发明的特点在于:[0022]1.整个制备过程简单易行，条件要求不高，适合于工业化大生产要求。[0023]2.使用磷脂酰甘油壳聚糖为一种多功能的壳聚糖衍生物。其分子量在2000以上，可根据需要选择不同的分子量。[0024]3.大分子磷脂酰甘油纳米脂质体表面含有羧基和氨基等官能团，不用进行表面改性就可以连接多种靶向物质，省去了传统脂质体必须用含羧基或氨基等制剂进行修饰才能连接靶向物质的过程。[0025]4.大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的粒径可达IOOnm以下，并可根据需要通过不同的制备方法来控制粒径，整个体系的稳定性较高，耐酸碱和高温；载药大分子磷脂酰甘油纳米脂质体制备简单，包封率和载药率高，缓控释功能良好，药物渗漏较少。[0026]5.大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的实用性强，可包裹不同的水溶、油溶和双亲性物质，并可同时包载两种或两种以上的物质，包载后的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体粒径分布均匀，稳定性高，且能发挥所包载物质的功能。【具体实施方式】[0027]下面的实施例中将对本发明作进一步的阐述，但本发明不限于此。[0028]实施例1:磷脂酰甘油壳聚糖的制备[0029]取100mg磷脂酰甘油(PG)溶于50mL DMSO中，共混于pH=6的硼酸缓冲液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸锌作为催化剂，再加入组织交联剂Denacol EX521 (质量浓度1%_50%)溶液10ml，搅拌反应24小时后，萃取收集反应产物环氧化物修饰的PG ;将环氧化物修饰的PG与氧羧甲基壳聚糖在pH=6硼酸缓冲液中再进行反应24小时，透析48小时后冻干得磷脂酸甘油壳聚糖。[0030]实施例2:本实施例探讨采用反向蒸发法时磷脂酰甘油壳聚糖和胆固醇的不同配比对大分子磷脂酰甘油纳米脂质体粒径产生的影响。[0031]将不同配比的磷脂酰甘油壳聚糖(重均分子量为2万)和胆固醇共溶于二氯甲烷中，混匀得溶液I ;准备去离子水溶液II，其中溶液I和溶液II的比例为1:2 ;将两种溶液混合后，充分超声乳化，在旋转蒸发仪上减压蒸馏除尽二氯甲烷得大分子磷脂酰甘油纳米脂质体溶液。由表1可见，调整磷脂酰甘油壳聚糖和胆固醇的质量配比可以得到不同粒径大小的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，所得的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在水溶液中的粒径大小分布也都比较均匀。[0032]实施例3:本实施例为使用薄膜分散法，利用大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包载水溶性物质的探讨。[0033]称取磷脂酰甘油壳聚糖(重均分子量为2000) 15mg，胆固醇12mg，溶于3ml 二氯甲烷中，振荡均匀得溶液I，然后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发完全，然后室温真空干燥24h;称取3.0mg长春新碱溶于5ml PBS(pH=7.4)缓冲溶液中，摇匀使长春新碱充分溶解得水溶液II ;然后将上述5.0ml长春新碱溶液II加入茄形瓶中，在超声的条件让脂质薄膜充分水化，超声IOmin后，过凝胶分离柱分离游离的药物得载长春新碱的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。使用此方法制备的长春新碱大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包封率可达90.0%以上，且在Tris-HCl (pH=7.4)缓冲溶液中具有良好的缓控释功能。
[0034]用类似方法也可分别制得包载其它水溶性物质的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，只须将需要的水溶性物质溶于相应的水溶液II既可。
[0035]实施例4:本实施例为使用反向蒸发法，利用大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包载水溶性物质的探讨。
[0036]称取磷脂酰甘油壳聚糖(重均分子量为10万)15mg，胆固醇12mg，溶于3ml 二氯甲烷中，振荡均匀得溶液I ;称取3.011^牛血清白蛋白(BSA)溶于5ml PBS (pH=7.4)缓冲溶液中，摇匀使BSA充分溶解得水溶液II ;然后将上述两种溶液I和II共混乳化，超声lOmin，待形成稳定的乳液后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏至二氯甲烷挥发完全，过凝胶分离柱分离未包裹的BSA得载BSA的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。该方法所得大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包封率也可在90%以上，而且粒径较小，可在150nm以下。
[0037]用类似方法也可分别制得包载其它水溶性物质的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，只须将需要的水溶性物质溶于相应的水溶液II既可。实施例5:本实施例为使用大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包载油溶性物质的探讨。 [0038]称取磷脂酰甘油壳聚糖15mg，胆固醇12mg和3.0mg脂溶性维生素E共溶于3ml 二氯甲烷中，振荡均匀，放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发干净，然后室温真空干燥24h后再用5.0mlPBS (pH=7.4)缓冲溶液超声水化；或将二氯甲烷溶液与5.0mlPBS (pH=7.4)缓冲溶液共混乳化，超声lOmin，待形成稳定的乳液后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏至二氯甲烷挥发完全；过凝胶分离柱分离游离的药物得载维生素E的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。所得维生素E大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包封率可在80%以上，粒径可控，并具有缓释效果。
[0039]用类似方法也可分别制得包载其它油溶性物质的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0040]实施例6:本实施例为使用大分子磷脂酰甘油纳米脂质体包载两种或两种以上物质的探讨。
[0041]称取磷脂酰甘油壳聚糖15mg，胆固醇12mg和3.0mg紫杉醇共溶于3ml 二氯甲烷中，振荡均匀，放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发完全，然后室温真空干燥24h ;称取3.0mg阿霉素溶于5ml PBS (pH=7.4)缓冲溶液中，摇匀使阿霉素充分溶解；然后将上述5.0ml阿霉素溶液加入茄形瓶中，在超声的条件让含紫杉醇的脂质薄膜充分水化，超声IOmin后，过凝胶分离柱分离游离的药物得同载紫杉醇和阿霉素的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0042]用类似方法也可分别制得包载其它两种或两种以上药物的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其中油溶性药物溶于油相中，水溶性药物溶于水相中。
[0043]实施例7:本实施例为制备磁性大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的探讨。[0044]称取磷脂酰甘油壳聚糖15mg,胆固醇12mg, 2.5mg维生素E和2.5mg维生素C共溶于3.0ml 二氯甲烷中，振荡均匀得溶液I，放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发完全，然后室温真空干燥24h后再用溶有3.0mg 5-氟尿嘧啶和5.0mg水溶性磁粒子的5.0ml PBS (pH=8.0)缓冲溶液II超声水化；或将溶液I与溶液II共混乳化，超声lOmin，待形成稳定的乳液后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏至二氯甲烷挥发完全；过凝胶分离柱分离游离的药物得同载维生素和5-氟尿嘧啶的磁性大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0045]用类似方法也可分别制得其他同载营养物质维生素和药物的磁性大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0046]实施例8:本实施例为制备CdSe量子点标记的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的探讨。
[0047]称取磷脂酰甘油壳聚糖15mg，胆固醇12mg共溶于3ml 二氯甲烷中，再加入含有0.5mg量子点的二氯甲烷溶液1ml，振荡均匀，放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发完全，然后室温真空干燥24h后再用5.0mlPBS(pH=7.4)缓冲溶液超声水化；或将二氯甲烷溶液与5.0mlPBS (pH=7.4)缓冲溶液共混乳化，超声lOmin，待形成稳定的乳液后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏至二氯甲烷挥发干净；过凝胶分离柱分离后得量子点标记的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0048]实施例9:本实施例提供使用其他小分子磷脂的实例。
[0049]称取磷脂酰甘油壳聚糖(季铵盐取代度为90.0%) 15.0mg，DOPE 12.0mg共溶于
3.0ml 二氯甲烷中，振荡均匀得溶液I，放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏，并不时的通入氮气，直至二氯甲烷挥发完全，然后室温真空干燥24h后再用溶有3.0mg水溶性磁粒子的5.0mlPBS (pH=7.4)缓冲溶液II超声水化IOmin ;或将溶液I溶液II共混乳化，超声IOmin,待形成稳定的乳液后放入茄形瓶中，在旋转蒸发仪上减压蒸馏至二氯甲烷挥发完全；过凝胶分离柱分离游离的药物得磁性大分子磷脂酰甘油纳米脂质体(壳聚糖十八烷基季铵盐/DOPE)。该类脂质体的Zeta电位可达+40.0mV,表面可吸附基因，可作为一种高效的基因转染试剂。
[0050]类似的可用其他小分子脂质代替DOPE制备其他大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0051]实施例10:本实施例提供使用除薄膜分散法和反向蒸发法外的其他方法制备大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的实例。
[0052]pH梯度法:取IOOmg磷脂酰甘油壳聚糖以及60mg胆固醇溶解于15ml乙醇中，减压蒸发制备脂质膜后，假如硫酸铵溶液水化，制备空白大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。将探头超声过的空白大分子磷脂酰甘油纳米脂质体依次通过0.8 μ m、0.65 μ m、0.45 μ m和
0.22 μ m的微孔滤膜，进行整粒。整粒后的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体装入透析袋中，用150mmol/L NaCl溶液透析24h。透析后的空白脂质体中加入30mg盐酸环丙沙星，然后置于水浴保温，即得盐酸环丙沙星大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0053]类似的可用制备传统脂质体的复乳法、离心法、注入法和混溶法来获得大分子磷脂酰甘油纳米脂质体。
[0054]实施例11:大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的应用。
[0055]本实施例提供大分子磷脂酰甘油纳米脂质体在基因和药物载体、临床诊断治疗方面的应用。
[0056]本发明公开和揭示的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体、制备方法及应用，可通过借鉴本文公开内容。尽管本发明的一种海藻酸钠免疫磁珠、制备方法及在免疫诊断方面的应用已通过较佳实施例进行了描述，但是本领域技术人员明显能在不脱离本
【发明内容】
、精神和范围内对本文所述的方法改动，更具体地说，所有相类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，他们都被视为包括在本发明精神、范围和内容中。
【权利要求】
1.一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征在于，所述大分子脂质体是以磷脂酰甘油壳聚糖作为主膜材来代替合成磷脂，并以小分子脂质为稳定剂所制备的具有脂质双层膜结构的囊泡。
2.如权利要求1所述大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征在于，磷脂酰甘油壳聚糖的具体特征为:重均分子量大于2000，可溶于极性有机溶剂氯仿或二氯甲烷，并含有羧基或氨基。
3.如权利要求1所述大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征在于，小分子磷脂包括胆固醇、二油酰脂酰乙醇胺(DOPE)、3i3- [N-(N’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇、卵磷脂、磷脂(PC、PE、PS、P1、PG)、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一种或2-3种，优选为胆固醇、二油酰脂酰乙醇胺或3β- [Ν-(Ν’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇。
4.如权利要求1所述大分子磷脂酰甘油纳米脂质体，其特征在于，所述的水溶性、油溶性或双亲性物质包括药物、蛋白、抗体、基因、维生素、磁性颗粒、量子点、SiO2、磷酸钙无机颗粒，其中优选为抗肿瘤药物紫杉醇、顺钼、阿霉素，RB基因和ρ53基因，维生素C，Fe304磁性纳米颗粒，CdSe量子点，SiO2纳米球。
5.一种制备如权利要求书I所述大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的方法，包括以下步骤步骤为: (a)先制备磷脂酰甘油壳聚糖:取IOOmg磷脂酰甘油(PG)溶于50mLDMSO中，共混于pH=6的硼酸缓冲液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸锌作为催化剂，再加入组织交联剂DenacolEX521 (质量浓度1%-50% )溶液10ml，搅拌反应24小时后，萃取收集反应产物环氧化物修饰的PG ;将环氧化物修饰的PG与氧羧甲基壳聚糖在pH=6硼酸缓冲液中再进行反应24小时，透析48小时后冻干得磷脂酰甘油壳聚糖。 (b)将磷脂酰甘油壳聚糖和小分子磷脂及油溶性物质共溶于氯仿或其他有机溶剂中，混匀； (C)将步骤b)中得到的混合溶液通入氮气并除去有机溶剂使成薄膜，然后加入含有水溶性物质的水溶液使脂质水化；或将含有水溶性物质的水溶液与步骤b)得到的混合溶液共混超声乳化，再除去有机溶剂。
6.如权利要求5所述的一种大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的制备方法，其特征在于，所述的制备方法是对大分子磷脂酰甘油纳米脂质体进行表面修饰或先制备含活性成分的前体物质再进行组装；所用的修饰剂为聚乙二醇、EGFR抗体、叶酸、三苯氧胺、转铁蛋白、甲胎蛋白、表皮生长因子EGF，血管内皮生长因子VEGF，“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸”三肽序列RGD,成纤维细胞生长因子tbFGF,以及单克隆抗体曲妥珠单抗Trastuzumab,西妥昔单抗Cetuximab中的一种或2种以上。
7.—种如权利要求1-4所述的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体或依据如权利要求5~6方法制备的大分子磷脂酰甘油纳米脂质体的应用，其特征在于，在基因和药物载体及其制造或临床诊断治疗方面的应用。
【文档编号】A61K47/24GK103565744SQ201210262424
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2012年7月26日 优先权日:2012年7月26日
【发明者】王桂荣, 李国党 申请人:上海晟纳实业有限公司