专利名称：一种吉西他滨或其盐脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种吉西他滨或其盐新型制剂及其制备方法，具体来讲是涉及吉西他滨或其盐的脂质体及其制备方法。
背景技术：
吉西他滨是一种破坏细胞复制的二氟核苷类抗代谢物抗癌药，是去氧胞苷的水溶性类似物，对核糖核苷酸还原酶是一种抑制性的酶作用物的替代物，这种酶在DNA合成和修复过程中，对所需要的脱氧核苷酸的生成是至关重要的。具有抗瘤谱广、作用机制独特、与其他化疗药物无交叉耐药且毒性反应无叠加等特点。吉西他滨作为一种前药在细胞内是脱氧胸苷激酶磷酸化的良好底物，在酶的作用 下转化成下列代谢物吉西他滨一磷酸盐(dFdCMP)、吉西他滨二磷酸盐(dFd⑶P)和吉西他滨三磷酸盐(dFdCTP)其中dFd⑶P和dFdCTP为活性产物。dFd⑶P抑制核糖核苷酸还原酶，从而减少了 DNA合成的修复所需的脱氧核苷酸的量(尤其是dCTP)，低水平的dCTP逆转了脱氧苷激酶正常的负反馈抑制，导致dFdCTP更多的积聚。同时dFdCDP抑制了 dCTP诱导的脱氧胞氨酶对dFdCMP的脱氨作用，且dFdCTP直接抑制脱氧胞苷脱酶，从而使更多的dFdCMP转化成活性代谢物dFdCMP的脱氨作用，且dFdCTP直接抑制脱氧胞苷脱氨酶，从而使更多的dFdCMP转化成活性代谢物dFdCDP，dFd-CTP而dFdCTP则与dCTP竞争结合进入DNA链，插入至DNA链中脱氧胞苷的位点，并允许鸟苷与其配对，吉西他滨分子就被此鸟苷“掩蔽”使其免受核糖核酸外切酶的移除修复，然后DNA链合成停止，进而DNA断裂、细胞死亡。现已证实，吉西他滨对多种实体瘤治疗效果显著，尤其是对非小细胞肺癌、胰腺癌和乳腺癌，单一用药或联合其它抗癌药物都取得很高的疗效。吉西他滨在细胞内的半衰期较短(介于32 94min)，必须大剂量(推荐剂量为1000mg/m2)、持续静脉给药来维持其有效的药用浓度和对癌细胞的毒性，但这种毒性同时对正常组织也起作用，这种剂量限制性毒性影响临床疗效。此外，吉西他滨缺乏组织特异性，全身毒副作用大；体内代谢迅速，血浆半衰期短；肿瘤耐药性等缺点。因此，寻找一种能够使药物靶向性更强，毒副作用更小的给药方法是当前研究的重点与难点。含有有效药物的载药纳米粒子是一种新型的缓释系统，可改变常规的给药方式，有极广阔的前景，是近年来医药学领域的研究热点，纳米药在进入体内后，药物在靶区内缓慢释放，以减轻药物的不良反应。黄乐松，王春霞，陈志良等“吉西他滨聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在小鼠脑内的靶向分布”(中国医院药学杂志，2008，28 (16):1332)，及黄乐松，王春霞，陈志良等“吉西他滨聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒对小鼠脑移植胶质瘤的影响研究”(中国药房，2009，20 (19)1457)中介绍了一种吉西他滨的纳米粒及其对动物的影响。黄君勤，孔俐文“盐酸吉西他滨脂质体的制备及含量和包封率的测定学性质”(中国抗生素杂志，2010，35 (1):30)介绍了一种吉西他滨脂质体的制备和含量测定方法。CN101444485B公开了一种吉西他滨脂质体，该脂质体包括吉西他滨、磷脂、胆固醇，但该脂质体的包封率及分散性均表现不佳，对药物的稳定性及生物利用度均有不利影响。CN101926779A公开了一种吉西他滨固体脂质纳米粒及其制备方法，该制剂仍存在药物包封率不高，且稳定性不佳的问题，储藏3个月左右药品即发生部分降解。虽然部分药物的脂质体或纳米药的研究已经获得较大进展甚至在临床中得到了应用。但由于药物理化性质及药理作用的差别，吉西他滨领域应用脂质体或纳米药的技术仍未获得突破。从目前研究的成果中来看，现有方法制备的吉西他滨脂质体存在稳定性差的问题，而且吉西他滨主要毒副作用-血液系统骨髓抑制，血小板和中性粒细胞下降这一问题在吉西他滨的制剂领域一直缺乏深入的研究。
发明内容
本发明的目的在于解决上述技术问题，提供一种可以提高药物包封率、减少副作用，且疗效更好的吉西他滨或其盐脂质体。本发明提供的吉西他滨或其盐脂质体，包含吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化齐Li，所述吉西他滨或其盐的平均粒径为IOnm-1 OOnm。优选的，所述吉西他滨为盐酸盐，盐酸吉西他滨的平均粒径为50-80nm。优选的，所述脂质体中磷脂、胆固醇的重量比为1-8:1 ;以吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂总重量为100%计，其中乳化剂重量占10%-20%。更优选的，所述磷脂与胆固醇的重量比为6:1 ;以吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂总重量为100%计，其中乳化剂重量占10%-15%。优选的，所述磷脂选自卵磷脂、豆磷脂或其混合物；所述乳化剂选自丙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯、聚山梨醇酯、聚乙二醇辛基苯基醚或三乙醇胺。优选的，所述磷脂选自豆磷脂，所述乳化剂选自丙二醇和聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯。本发明的另一目的还在于提供一种制备所述吉西他滨或其盐脂质体的方法，包括如下步骤a)配制吉西他滨或其盐水溶液，用高压匀质机匀化；b)将磷脂、胆固醇及乳化剂溶于适量乙醚中，加入吉西他滨或其盐水溶液，超声，制得乳剂；c)蒸去乙醚，超声，过O. I μ m微孔滤膜。优选的，所述吉西他滨或其盐水溶液的浓度为15-25mg/ml。更优选的，所述吉西他滨或其盐水溶液的浓度为20mg/ml。本发明的制剂开辟了吉西他滨或其盐给药的新途径，通过处方研究，确立了稳定的制剂处方，提高了药物的包封率，降低了药物在使用中的毒副作用，相对于目前临床常用的注射液具有更好的疗效。
具体实施例方式为了更具体地描述该发明，下面将结合具体实施例来进一步说明该发明，但本发明的内容并不局限于具体实施例。实施例一
Ik酸*两他滨 IOg λ.υ:磷脂600g
Bwm· ioog
内二醇90g
注射丨fl水500ml制备方法步骤I、盐酸吉西他滨水溶液的制备。在惰性气体保护下，将盐酸吉西他滨IOg加入到注射用水500ml中，在40°C恒温水浴中高速搅拌20min，将混合溶液转移到高压匀质机中匀化20min，配得浓度为20mg/ml的盐酸吉西他滨溶液。步骤2、称取处方量的大豆磷脂、胆固醇和丙二醇溶于适量乙醚当中，搅拌下将步骤I中的吉西他滨水溶液加入到上述溶液中，超声，50°C减压旋转蒸发除尽乙醚。步骤3、超声,过O. I μ m微孔滤膜。实施例二
盐酸々两他滨 IOg 大A/磷脂600g
胆固醇IOOg
:—i 乙 Il 胺90g
注射)+j水500ml制备方法除处方中丙二醇替换为三乙醇胺外，其余各组分及含量、制备方法与实施例一相同。实施例三
盐酸吉两彳ft滨 IOg 人U磷脂600g
組_醇IOOg
聚氣乙烯铽化蓖麻油酸P 90g注射出水500mi制备方法除处方中丙二醇替换为聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯外，其余各组分及含量、制备方法与实施例一相同。实施例四盐酸吉两 Α滨 IOg人豆磷脂300g
I酬醇IOOg
聚+ 乙烯￥化蓖麻油酸ii 52g 注射川水500mi制备方法与实施例三相比，区别在于处方中各组分含量不同，制备方法与实施例一相同。实施例五
盐酸吉西他滨 IOg 大豆磷脂600g
胆_醇IOOg聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯養g注射W水500ml制备方法处方组成及各组分含量与实施例三相同，制备方法除步骤I中将混合溶液转移到高压勻质机中勻化时间改为IOmin外,其余步骤均与实施例一相同。实施例六
盐酸,V叫他滨 Wg 火磷断600g
IOOg
聚+ 乙 +^[化!！麻汕酸_ 90g 注射川水500ml制备方法处方组成及各组分含量与实施例三相同，制备方法除步骤I中将混合溶液转移到高压勻质机中勻化时间改为40min外,其余步骤均与实施例一相同。实验例一包封率的测定采用透析法测定盐酸吉西他滨脂质体的包封率。取各实施例制得的盐酸吉西他滨脂质体Iml置于已处理的透析袋中，将透析袋浸入浓度为200mmol/L的硫酸铵透析液IOOml中，置于磁力搅拌器上搅拌，定时更换透析液，12小时后将透析袋中内容物取出置于IOml量瓶中，加入5%乳化剂OP的乙醇溶液Iml破乳，用水定容至刻度。分别取上述溶液各20 μ 1，进样分析，计算出盐酸吉西他滨脂质体中包裹吉西他滨的量Wil和Wy根据公式包封率=(Wg/Wy X 100%计算盐酸吉西他滨脂质体的包封率，计算结果如下表所示
权利要求
1.一种吉西他滨或其盐脂质体，包含吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂，所述吉西他滨或其盐的平均粒径为10nm-100nm。
2.根据权利要求I所述的 吉西他滨或其盐脂质体，其特征在于，所述吉西他滨为盐酸盐，盐酸吉西他滨的平均粒径为50-80nm。
3.根据权利要求2所述的吉西他滨或其盐脂质体，其特征在于，所述脂质体中磷脂、胆固醇的重量比为1-8:1 ;以吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂总重量为100%计，其中乳化剂重量占10%-20%。
4.根据权利要求2所述的吉西他滨或其盐脂质体，其特征在于，所述脂质体中磷脂与胆固醇的重量比为6:1 ;以吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂总重量为100%计，其中乳化剂重量占10%-15%。
5.根据权利要求I所述的吉西他滨或其盐脂质体，其特征在于，所述磷脂选自卵磷脂、豆磷脂或其混合物；所述乳化剂选自丙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯、聚山梨醇酯、聚乙二醇辛基苯基醚或三乙醇胺。
6.根据权利要求I所述的吉西他滨或其盐脂质体，其特征在于，所述磷脂选自豆磷脂，所述乳化剂选自丙二醇和聚氧乙烯氢化蓖麻油酸酯。
7.一种制备权利要求1-6任意一项所述吉西他滨或其盐脂质体的方法，包括如下步骤 a)配制吉西他滨或其盐水溶液，用高压匀质机匀化； b)将磷脂、胆固醇及乳化剂溶于适量乙醚中，加入吉西他滨或其盐水溶液，超声，制得乳剂； c)蒸去乙醚,用水合介质洗脱,超声,过O.I μ m微孔滤膜。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述吉西他滨或其盐水溶液的浓度为 15_25mg/ml0
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述吉西他滨或其盐水溶液的浓度为 20mg/ml。
全文摘要
本发明涉及一种吉西他滨或其盐脂质体及其制备方法，所述脂质体包括包含吉西他滨或其盐、磷脂、胆固醇和乳化剂，所述吉西他滨或其盐的平均粒径为10nm-100nm。该脂质体包封率、稳定性更好，副作用更低，疗效更佳。
文档编号A61K9/127GK102846547SQ201210260619
公开日2013年1月2日 申请日期2012年7月26日 优先权日2012年7月26日
发明者张春红, 宋阳 申请人:江苏豪森药业股份有限公司