专利名称：中药复方二仙汤提取物改善更年期认知功能的利记博彩app
技术领域：
本发明属于药学领域的现代中药药理学的研究。具体涉及中药复方二仙汤提取物提高老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平，同时能促进NMDA受体之表达，从而改善更年期引起的学习和认知功能衰退。
背景技术：
女性步入更年期后体内雌激素水平随之下降，而雌激素水平下降被认为与各种更年期综合症之征状有关，包括记忆力及学习能力等认知功能的衰退。其中一些与认知功能关系密切的分子，包括脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、TrkB受体及N-methyl-D-aspartate (NMDA)受体等与衰老的关系亦曾被报导。二仙汤(EXD)由上海中医药大学张伯讷教授于50年代首先创立的中药复方，临床广泛应用于治疗更年期综合症。
发明内容
本研究组在大鼠实验证明了二仙汤能激活芳香环转化酶(Aromatase)之表达，藉此产生雌激素，所以减轻更年期综合症之症状，研究也发现，二仙汤不仅能帮助更年期女性产生雌激素，也能帮助增加BDNF分泌，同时促进NMDA受体之表达，从而改善更年期引起的学习和认知功能衰退。本发明首次通过体内实验证明，中药复方二仙汤提取物能提高老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平，二仙汤同时能增加NMDA受体之表达。所以中药复方二仙汤可进一步开发用于女性因年纪增加而引致的学习和认知功能衰退，特别是对学习、记忆和思考的影响。本发明的目的是为二仙汤提取物用于改善更年期引起的学习和认知功能衰退提供动物研究水平的依据。发明人经过多次药理学实验，发现中药复方二仙汤仙茅、淫羊藿、巴戟天、当归、黄柏、知母以12 12 10 10 9 9比例提取时，可有效对抗老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平和NMDA受体之表达下降。该药理作用在本发明以前尚无文献报道。
具体实施例方式I)药材制备二仙汤(EXD)由以下六种植物材料制成仙茅，淫羊藿，巴戟天，当归，黄柏，知母(成分比例12 : 12 : 10 : 10 : 9 : 9)。煎2次，每次煎一小时，把两次煎液混合。2)实验动物十二个月龄雌性SD(SD)大鼠被用作研究。雌性SD-大鼠，年龄8个月，购自香港大学动物实验室。动物被安置在有空调的房间，温度为24°C，相对湿度为 50-65%,自动12h光照黑暗照明周期。大鼠饲养4个月至所需12个月月龄后喂药。3)药物治疗大鼠随机分为EXD组、普力马林(Premarin)组及对照组,每组4只。EXD组以EXD提取物灌(4.1g/kg)灌胃给药。普力马林组以西药胶囊普力马林(每粒含
0.3mg雌激素)灌胃给药(31.25mg/kg)。对照组喂服同等体积的水代替EXD。每天喂药一次，连续8周后处死大鼠。取脑部海马区及前额叶皮质等部份并存放于-80°C作进一步分析。4) BDNF酶联免疫吸附试验BDNF酶联免疫吸附试验使用ChemikineTM BrainDerived Neu rotrophic Factor (BDNF) Sandwich ELISA Kit (Millipore)试剂。大脑海马体及前额叶皮质中BDNF水平测定方法根据试剂盒内之说明进行。5)西方墨点法提取药物治疗组及对照组之大脑海马体及前额叶皮质中之蛋白并测定浓度。15mg的变性蛋白在8%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离并转移到聚二氟乙烯膜(PVDF)上，浸泡在5 %牛血清蛋白中(Sigma)摇晃I小时，然后在4°C环境中与初级抗体培育过夜。是次检测所用抗体包括、Anti-NR2A(Millipore)及Anti-GADPH(Millipore)。培育完毕后用TBS-T泡洗PVDF膜三次，再以次级抗体室温培育I小时。培育完毕后用TBS-T额外泡洗PVDF膜三次后利用Bio-Rad ChemiDoc系统以化学发光法进行西方墨点印迹检测。光带强度由Quantity-One (Bio-Rad)软件量化再以GAPDH带修正。6)统计分析上述实验之数据以GraphPad Prism 4软件作统计学分析。如图I所示前额叶皮质中BDNF水平，数值以总前额叶皮质中总蛋白水平修正。药效组对比年老对照组以t-test检测(N ^ 4, *p < O. 05)。如图2所示大脑海马体中BDNF水平，数值以总前额叶皮质中总蛋白水平修正。药效组对比年老对照组以t-test检测(N ^ 4, *p < O. 05)如图3所示前额叶皮质中NMDAR GluN2A亚单位水平，数值以前额叶皮质中GAPDH蛋白水平修正。各组对比年老对照组以t-test检测(N ^ 4, *p < O. 05)结论I) 二仙汤能提高老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平，二仙汤同时能增加NMDA受体之表达。2) 二仙汤提高大脑海马体及前额叶皮质中BDNF蛋白水平经8周喂饲二仙汤后，老年大鼠前额叶皮质及海马体中BDNF水平与老年对照组相比明显提高(η = 4，P < O. 05)。3) 二仙汤对前额叶皮质中NR2A水平之影响，经8周喂饲二仙汤后，老年大鼠前额叶皮质中NR2A水平与老年对照组相比明显提高(η = 4，P < O. 05)。
权利要求
1.本发明中药复方二仙汤提取物改善更年期认知功能，其特征在于提高老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平的作用。
2.中药复方二仙湯提取物能提高老年大鼠中前額葉皮質之NMDARGluN2A亞單位水平。
3.中药复方二仙湯提取物能改善因年纪增加而引致的学习和认知功能衰退。
4.中药复方二仙汤提取物能提高更年期学习、记忆和思考能力。
5.如权利要求1-4任一项中的应用，其中所述的中药复方二仙汤提取物体内实验各成分(仙茅、淫羊藿、巴戟天、当归、黄柏、知母)比例为12 : 12 : 10 : 10 : 9 : 9。
全文摘要
本发明涉及中药现代药理学的研究，尤其是对中药复方二仙汤提取物改善更年期认知功能，首次通过体内实验证明，中药复方二仙汤提取物能提高老年大鼠中海马体及前额叶皮质之BDNF水平，二仙汤同时能增加NMDA受体之表达。所以中药复方二仙汤可进一步开发用于女性因年纪增加而引致的学习和认知功能衰退，特别是对学习、记忆和思考的影响。
文档编号A61P25/28GK102641411SQ20121014680
公开日2012年8月22日 申请日期2012年5月14日 优先权日2012年5月14日
发明者叶俊伟, 张浩斌, 张艳波, 施祖荣, 童瑶 申请人:童瑶