专利名称：：蛋白质样品的比较的利记博彩app蛋白质样品的比较相关申请本申请主张于2010年6月16日提交的美国临时申请序列号61/355，269的优先权权益，其全部通过引用并入本文中。
背景技术：
：本发明涉及使用具有带稳定同位素标签參考标准(StableIsotope-TaggedReferenceStandard,SITRS)的自下而上液相色谱-质谱法(LC-MS)来比较两种或两种以上蛋白质样品的分析方法。在蛋白质分析中使用具有质谱法(MS)检测的肽作图以确认ー级序列。已知的分析方法主要定性确认预期肽的存在情況。发明简述在ー个方面，本发明涉及表征蛋白质样品的方法，所述方法包括(i)提供具有已知氨基酸序列的第一蛋白质样品，其中该第一蛋白质中的至少ー个氨基酸被同位素标记的氨基酸取代；(ii)提供未标记的第二蛋白质样品，其包含对应于第一蛋白质中同位素标记变体的未标记的氨基酸；(iii)将第一样品与第二样品混合以形成混合物；(iv)对该混合物进行蛋白质消化以形成第一消化物；(V)对该第一消化物进行自下而上液相色谱-质谱，以形成包括一个或多个双峰或单峰的第一波谱，每一双峰表明存在来自第一样品的同位素标记的肽和来自第ニ样品的相应的未标记的肽，每ー单峰表明存在具有突变、修饰或杂质的肽。在某些实施方案中，该方法进ー步包括(Vi)比较双峰中的峰的相对强度以测定各肽的相对量的步骤，其中1:1峰比率表明第一和第二肽基本上相同，并且其中峰強度的差异反映存在化学上不同的肽。在另ー实施方案中，该方法进ー步包括基于峰强度的相对降低来定量该化学上不同的肽的量的步骤。在另ー实施方案中，该方法进ー步包括(Vii)对消化物进行串联质谱以测定由波谱中的单峰代表的肽序列的步骤。在另一方面，本发明为定性检测蛋白质样品中的突变、修饰或杂质存在情况的方法。该方法允许通过将两种或两种以上蛋白质样品中的各样品与稳定同位素标签參考标准(SITRS)蛋白质比较来相互比较这些样品。该方法包括提供第一蛋白质的样品，其中在具有已知氨基酸序列的第一蛋白质(SITRS)中的至少ー个氨基酸被同位素标记的氨基酸取代；提供未标记的蛋白质样品，其包括对应于第一蛋白质中的同位素标记氨基酸的未标记的氨基酸；将第一蛋白质与未标记的蛋白质标准品混合以形成混合物；对该混合物进行消化，随后通过自下而上液相色谱-质谱法进行分析，以确定波谱是否包括表明各蛋白质中存在该特定肽的双峰。若未观察到双峰，则单峰可能对应于因以下可能性之一而产生的肽(I)该肽不含标记的氨基酸；(2)该肽含有修饰；(3)该肽含有突变、插入或缺失；(4)该肽对应于杂质，且不含蛋白质样品中存在的氨基酸序列。然后可通过MS/MS分析单峰来掲示肽的序列，并确定存在以上所列四种可能性中的哪种。在另一方面，本发明为定量测定蛋白质样品中突变或修饰的存在情况的方法。该方法包括提供具有已知氨基酸序列的第一蛋白(SITRS)的样品，其中在该第一蛋白质中的至少ー个氨基酸被同位素标记的氨基酸取代；提供未标记的蛋白质样品的样品，其包括对应于第一蛋白质中的同位素标记氨基酸的未标记的氨基酸；将第一蛋白质与未标记的蛋白质样品混合以形成混合物；对该混合物进行消化，随后通过自下而上液相色谱-质谱法进行分析，以确定波谱是否包括表明SITRS和未标记的蛋白质样品中都存在该特定肽的双峰；并比较双峰中峰的強度以测定各蛋白质中该特定肽的相对丰度。可通过首先与如上文所述相同的SITRS抗体比较，然后比较各未标记的蛋白质样品的结果，来相互比较另外的未标记的蛋白质样品。本领域普通技术人员在查阅说明书后将会理解并明了本发明的这些和其它方面。附图简述图1为按照本发明的SITRS实验的示意图。图2为按照本发明在存在其SITRS对应物时通过胰蛋白酶消化所产生的MAb-1肽的代表性质谱。图3为按照本发明的SITRS实验的提取离子质谱(extractedionmassspectra),其中将wtmAb_l与掺加突变型达20%的mAb_l进行比较(显示在wt与突变型mAb中都存在的wtHC(255-273)月太)。图4为按照本发明的来自图3的HC(255-273)的单同位素峰強度的表格。图5为按照本发明的SITRS实验的提取离子质谱，其中将wtmAb-1与掺加突变型达20%的mAb-1进行比较(显示突变型mAb中经修饰的wtHC(218-247)肽)。图6为按照本发明的来自图5的HC(218-247)的单同位素峰强度的表格。图7为按照本发明的SITRS实验的提取离子质谱，其中将wtmAb-1与掺加突变型达20%的mAb-1进行比较(显示仅存在于突变型mAb中且不存在于SITRS样品中的突变型HC(218-247)月太)。图8为按照本发明的LC色谱图，其显示利用尺寸排阻色谱-高效液相色谱(SEC-HPLC)进行抗体去盐。图9为来自⑷纯的未标记的MAb-1及⑶污染有10%MAb-2的MAb-1的肽的质谱比较。让SITRS以1:1比率与每ー种混合，随后按照本发明进行胰蛋白酶消化及分析。图10为按照本发明的图示，其描绘污染有10%MAb-2的MAb-1样品的定量中所研究的6种肽的SITRS值。图11为按照本发明的来源于人胚肾293细胞与中国仓鼠卵细胞的MAb-1肽的SV比较。图12为按照本发明的SITRS实验的SITRS柱状图，其中将wtmAb-1与掺加突变型达20%的mAb-1进行比较。图13为按照本发明的SITRS实验的SITRS柱状图，其中将wtmAb-1与掺加突变型达2.5%的mAb-1进行比较。图14为按照本发明的掺加突变型的抗体相对于野生型抗体中肽HC(218-247)、HC(344-359)及HC(288-300)的量的图，其如通过各种掺加突变型的mAb_l样品的SITRS分析所测量。图15为按照本发明的用于比较通过使用两种不同方法由两种不同细胞系产生的(CH0产生的(图15A)及HEK产生的(图15B))各批MAb-1样品的SITRS柱状图。图16为按照本发明的用常规分析呈现于图15B中的稳定同位素标签參考标准(SITRS)结果的表格。将来自第2批(CHO产生的)及第3批(HEK产生的)mAb_l的SITRS分析(n=6)的所选结果与通过常规方法(n=3)所获得的结果进行比较。图17为按照本发明的在两种不同配制缓冲液(formulationbuffer)中受到适度压カ的mAb-1样品的比较的SITRS柱状图。图18为按照本发明的DTPA-MAb-1缀合物与未经修饰MAb-1的比较的SITRS柱状图。优选实施方案详述现将详细地提及本发明的实施方案，其中的一个或多个实施例如下文所示。通过解释本发明而非限制本发明的方式提供每ー实施例。事实上，对本领域技术人员明显的是，可在不脱离本发明的范围或精神下对本发明进行各种修改及改变。例如，作为ー个实施方案部分所阐明或阐述的特征可用于另ー实施方案，以得到又一个实施方案。因此，本发明意欲涵盖这样的修改和变化，其同样落入随附权利要求书及其等同物的范围之内。本发明的其它目标、特征及方面在以下详述中公开或根据以下详述而明了。本领域普通技术人员应了解，本发明的讨论仅为说明例示性实施方案，并非意欲限制本发明的更广泛的方面。本文所用术语“蛋白质”或“多肽”指10个或更多个氨基酸(例如50个、100个、200个、300个、400个、500个或更多个氨基酸)的聚合物。本发明的例示性蛋白质包括但不限于重组蛋白质、生物治疗蛋白质、单克隆抗体和其它抗体、抗体-药物缀合物或其它生物缀合物、成像抗体、融合蛋白或聚こニ醇化蛋白(PEGylatedproteins)。本文所用术语“单克隆抗体”指在ー个特定位点(抗原位点)与特定靶分子(抗原)结合的ー类抗体蛋白。由本发明所实现的测量不仅考虑在蛋白水解消化期间所产生的肽的质量，而且亦考虑每种所得肽的丰度。通过利用在蛋白质消化前与未标记的蛋白质混合的SITRS样品使得能够经MS对肽的丰度进行測量。本文所用术语“SITRS样品”或“SITRS标准品”，意为用存在于蛋白质中的至少ー个氨基酸的稳定同位素标记变体来标记的已知序列的蛋白质(例如抗体)。因此，在ー个方面，本发明为比较两种蛋白质(例如抗体)样品以定性和/或定量鉴别这些样品中的差异(例如突变、修饰或杂质)的方法。所述测量可通过利用在蛋白质消化和LC-MS前与未标记的蛋白质(例如未标记的抗体)混合的SITRS样品来进行。引入稳定同位素标记的变体作为内标減少由可能会影响定量的样品处理和MS检测所导致的变化及假象。本发明減少的潜在变化的实例包括蛋白质消化程度、由于样品处理引起的假象形成和/或MS检测期间电离效率的变化。通过利用本方法，所述參数可相对于SITRS样品标准化。在ー个方面，本方法包括制备标记的蛋白质(SITRS样品)和将该标记的蛋白质与未标记的蛋白质样品混合。然后可对混合的样品进行自下而上LC-MS，以定性和/或定量测定未标记的样品中的低水平突变、修饰或杂质。亦可将该分析用于确定表达细胞系的选择不当、生长培养基的效率低下、细胞培养条件的效率低下、纯化过程的效率低下或配制缓冲液的不适当。在ー个例示性实施方案中，未标记的抗体在实验性生长培养基中形成，或由实验性细胞系/克隆产生，将所得未标记的抗体与SITRS样品混合，然后对混合的样品进行蛋白质消化及自下而上LC-MS，其可用于确定该实验性生长培养基细胞系/克隆是否可接受用于产生所需抗体。在标准反相-高效液相色谱(RP-HPLC)条件下，标记的和未标记的肽具有几乎相同的保留时间并因此一起迁移。虽然不可通过色谱将其分离，但可通过MS检测来区分标记的和未标记的肽，产生相当于特定肽中标记的残基数目的道尔顿(Da)差异。因此，当SITRS样品与未标记的抗体或其它蛋白质混合时，表明Da差异的双峰将出现在质谱中，这表明标记的氨基酸掺入到SITRS样品中，以及在SITRS样品和未标记的抗体二者中都存在具有相同氨基酸序列的肽。与其未标记的对应物(在1:1混合物中)的唯一差异为存在标记的氨基酸的SITRS样品，将产生其中各峰具有相同強度的双峰。可使用本领域已知的方法来制备SITRS样品，其中使用重氨基酸代替标准氨基酸。例如，当制备包括精氨酸和赖氨酸残基的蛋白质时，生长培养基可包括由6个13C原子而非天然丰富的12C原子构成的精氨酸及赖氨酸残基(精氨酸_6和赖氨酸-6)。考虑本领域已知的重同位素标记的变体可用于本发明。本领域技术人员将认识至IJ，重同位素标记变体的选择将视所形成的蛋白质和对制备用于LC-MS检测的蛋白质进行的蛋白质消化而定。例如，当所产生的蛋白质包括精氨酸和/或赖氨酸并将经受胰蛋白酶消化时，可能期需重精氨酸和/或赖氨酸。类似地，当所产生的蛋白质包括天冬氨酸并将经受内切蛋白酶AspN消化时，可能期需重天冬氨酸。当所产生的蛋白质包括谷氨酸并将经受内切蛋白酶GluC消化时，可能期需重谷氨酸。当所产生的蛋白质包括天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸链并将经受肠激酶消化吋，可能期需重天冬氨酸和/或重赖氨酸。当所产生的蛋白质包括异亮氨酸-谷氨酸或天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸链并将经受因子Xa消化时，可能期需重异亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和/或精氨酸。当所产生的蛋白质包括精氨酸-X-X-精氨酸链并将经受弗林蛋白酶消化时，可能期需重精氨酸。当所产生的蛋白质包括组氨酸-酪氨酸连接并将经受麦芽糖酶(genease)I消化吋，可能期需重组氨酸及/或酪氨酸。当所产生的蛋白质包括具有芳香族侧链的氨基酸并将经受胰凝乳蛋白酶消化吋，可能期需具有芳香族侧链的重氨基酸。当所产生的蛋白质包括赖氨酸并将经受Lys-C或Lys-N消化时，可能期需重赖氨酸。当所产生的蛋白质包括甲硫氨酸并将经受CNBr消化时，可能期需重甲硫氨酸。当所产生的蛋白质包括精氨酸并将经受内切蛋白酶ArgC消化时，可能期需重精氨酸。本发明并非意欲限于特定同位素标记的变体或特定蛋白质消化方法，并且同位素标记的变体及方法可视蛋白质而变化。本发明可进ー步包括蛋白质纯化步骤。考虑本领域已知的蛋白质纯化方法可用于本发明并可被利用。蛋白质纯化步骤可在蛋白质消化之前进行，在一些实施方案中，可能期需在混合样品之前进行蛋白质纯化步骤。在其它实施方案中，可能期需在混合样品之后但在蛋白质消化之前进行蛋白质纯化步骤。在一些实施方案中，可能需要在蛋白质消化之前使混合样品变性、还原和/或烷基化。可通过本领域已知的方法来实施变性、还原和烷基化步骤。例如，可使用透析、脱机(off-line)固相萃取(SPE)、在线SPE或液相色谱(LC)例如尺寸排阻色谱-高效液相色谱(SEC-HPLC)或反相-高效液相色谱(RP-HPLC))来实施变性步骤。在在线SPE或LC方法中，可控制流速，可监测紫外(UV)信号，并且可定时进行流分收集以仅收集经纯化的蛋白质而非任何残余缓冲液或来自生长过程或样品处理的其它污染物。图1提供示意性SITRS分析。图3和5显示来自对两种混合样品的SITRS分析的质谱，这些混合样品包括未标记的MAb及其相应的SITRS标准品(无修饰或突变)。由此可见，以1:1比率混合SITRS标准品和未标记的MAb，对其进行蛋白质(胰蛋白酶)消化，然后进行自下而上LC-MS。所得到的未标记的样品与SITRS标准品所共有的肽质谱的独特之处在于质荷比(m/z)峰表现为双峰，这是由于SITRS标准品中存在标记的氨基酸。因此，化学组成与其SITRS对应物相同且以与其SITRS对应物相同的量存在的肽，将具有等于标准品的强度(在1:1混合物中)的强度(见例如图3)。其群体部分地由点突变型或位点特异性修饰分子例如脱酰胺化、N-末端焦谷氨酸化(N-terminalpyroglutamate)或差异糖基化构成的肽将具有如下质谱其中与SITRS标准品相比，来自未标记样品的峰強度降低了反映化学上不同的肽的丰度的量，其可如图5中所见。因此，通过将SITRS标准品与未标记的蛋白质制品混合并对混合样品进行蛋白质消化及自下而上LC-MS，可鉴别及定量未标记的蛋白质制品中的突变、修饰和/或位点特异性修饰分子的存在。可利用上述策略比较来自不同细胞系的抗体制品。例如，可采用本发明的方法，来定性鉴别实验性生长培养基中生长或由实验性克隆/细胞系产生的未标记抗体中的突变和/或修饰的存在情况。在本实施方案中，将包括至少ー个同位素标记氨基酸的标准样品(“SITRS标准品”)与由实验细胞系产生的未标记的抗体混合。然后可对混合样品进行蛋白质消化及自下而上LC-MS，以确定实验细胞系是否可接受用于产生所需抗体。类似于上述实施方案，若未标记的抗体和SITRS标准品的差异仅在于SITRS标准品中存在标记的氨基酸，则两种样品将一起迁移通过MS，并且质谱中的唯一显著差异将以双峰形式出现，这表明SITRS标准品中存在标记的氨基酸。若未观察到双峰，则单峰可能对应因以下可能性之一而产生的肽(I)该肽不含标记的氨基酸；(2)该肽含有修饰；(3)该肽含有突变、插入或缺失；(4)该肽对应于杂质，且不含在抗体样品中存在的氨基酸序列。然后可通过MS/MS分析单峰以掲示肽的序列，并确定存在这四种可能性中的哪ー种。例如，图7显示存在突变型肽，其不具有姐妹双峰(sisterdoublet)。因此,可通过将SITRS标准品与未标记的抗体混合,并对混合样品进行蛋白质消化及自下而上LC-MS，来鉴别未标记的抗体中的突变、修饰和/或位点特异性修饰分子的存在情況。然后为了选择最佳克隆，可利用上述相同策略来比较由不同细胞系所制备的若干未标记的MAb。在本发明的另一方面，标记的SITRS标准品使能够通过质谱法来定量蛋白质，其经由比较各双峰中各标记的SITRS标准肽的m/z峰強度与其未标记样品的相应未标记肽的m/z峰強度。这进而使得可比较几乎涵盖整个蛋白质序列的所有肽。然后可利用上述策略对若干未标记的蛋白质进行相互比较。在本发明的这一方面,制备未标记的蛋白质。另外，获得对应于未标记的MAb的SITRS标准品。未标记的蛋白质和SITRS标准品应基本上相同，并且若混合则应在MS中显示1:1双峰，例如在图1中所见。为定量未标记的蛋白质中任何突变或修饰的存在，将相应的SITRS标准品与未标记的样品混合。然后可对相应的SITRS标准品与未标记的样品的混合物进行蛋白质消化和自下而上LC-MS。然后可分析所得波谱以确定双峰的强度是否相同。另外，为验证未标记的MAb与SITRS标准品除了SITRS标准品中的同位素标记变体以外都相同，可将未标记的MAb与SITRS标准品混合在一起，对其进行蛋白质消化并进行自下而上LC-MS。所得质谱图案应产生如图1中所见的基本上1:1的峰。然而，其群体部分地由点突变型或位点特异性修饰分子(例如脱酰胺化、N-末端焦谷氨酸化或差异糖基化)构成的肽将具有如下质谱其中与SITRS标准品相比，来自未标记的标准样品的峰強度降低了反映化学上不同的肽的丰度的量(图1)。当相互比较两种未标记的蛋白质样品时，例如比较未标记的样品A与未标记的样品B时，可能需要进ー步使可能由移液误差及MS检测引起的变化减至最少。为了使这些变化减至最少，如公式I中所示，可将未标记的样品A与SITRS标准品的比率与未标记的样品B与SITRS标准品的比率进行比较。所得值称为SITRS值びの。权利要求1.表征蛋白质样品的方法，所述方法包括(i)提供具有已知氨基酸序列的第一蛋白质样品，其中所述第一蛋白质样品中至少一个氨基酸被同位素标记的氨基酸取代；(ii)提供未标记的第二蛋白质样品，其包含对应于所述第一蛋白质中的同位素标记变体的未标记的氨基酸；(iii)将所述第一样品与所述第二样品混合以形成混合物；(iv)对所述混合物进行蛋白质消化以形成第一消化物；(v)对所述第一消化物进行自下而上液相色谱-质谱以形成包括一个或多个双峰或单峰的第一波谱，各双峰表明存在来自所述第一样品的同位素标记的肽和来自所述第二样品的相应的未标记的肽，各单峰表明存在具有突变、修饰或杂质的肽，藉此表征所述第二蛋白质样品。2.权利要求1的方法，其进一步包括步骤(vi):比较所述双峰中各峰的相对强度以测定各肽的相对量，其中1:1峰比率表明所述第一肽与所述第二肽基本上相同，且其中峰强度的差异反映存在化学上不同的肽。3.权利要求1或2的方法，其进一步包括基于峰强度的相对降低来定量所述化学上不同的肽的量的步骤。4.前述权利要求中任一项的方法，其进一步包括步骤(vii):对所述消化物进行串联质谱以测定由波谱中单峰所代表的肽的序列。5.前述权利要求中任一项的方法，其中在所述第一蛋白质中基本上所有等同的氨基酸都经同位素标记。6.前述权利要求中任一项的方法，其中所述同位素标记的氨基酸包含至少一个重同位素。7.前述权利要求中任一项的方法，其中所述蛋白质消化和所述同位素标记的氨基酸选自(a)胰蛋白酶消化和一个或多个重精氨酸、重赖氨酸及其组合；(b)内切蛋白酶GluC消化和重谷氨酸；(c)肠激酶轻链消化和所述同位素标记变体选自一种或多种重天冬氨酸、重赖氨酸及其组合；(d)因子Xa消化和一个或多个重异亮氨酸、重谷氨酸、重天冬氨酸、重甘氨酸、重精氨酸及其组合；(e)弗林蛋白酶消化和重精氨酸；(f)麦芽糖酶I消化和一个或多个重组氨酸、重酪氨酸及其组合；(g)胰凝乳蛋白酶消化和重芳香族氨基酸；(h)Lys-C或Lys-N消化和重赖氨酸；和(i)内切蛋白酶ArgC消化和重精氨酸。8.前述权利要求中任一项的方法，其进一步包括在蛋白质消化之前纯化所述标记的蛋白质和所述未标记的蛋白质的步骤。9.前述权利要求中任一项的方法，其中所述蛋白质选自重组蛋白质、生物治疗蛋白质、抗体、单克隆抗体、抗体药物缀合物、成像抗体、融合蛋白和聚乙二醇化蛋白质。10.前述权利要求中任一项的方法，其中所述蛋白质为抗体。11.前述权利要求中任一项的方法，其中所述消化物包含肽群，其具有代表所述蛋白质的完整氨基酸序列的至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多的组合序列。12.权利要求11的方法，其中所述组合序列包含所述蛋白质的完整氨基酸序列。13.前述权利要求中任一项的方法，其进一步包括以下步骤(i)提供未标记的第三蛋白质样品，其包含对应于所述第一蛋白质中的所述同位素标记变体的未标记的氨基酸；(ii)将所述第一样品与所述第三样品混合以形成第二混合物；(iii)对所述第二混合物进行第二蛋白质消化以形成第二消化物；和(iv)对所述第二消化物进行自下而上液相色谱-质谱以形成包括一个或多个双峰或单峰的第二波谱，各双峰表明存在来自所述第一样品的同位素标记的肽和来自所述第三样品的相应的未标记的肽，且各单峰表明存在具有突变、修饰或杂质的肽，藉此表征所述第三蛋白质样品。14.权利要求13的方法，其进一步包括步骤(V):比较来自所述第二消化物的波谱中所述双峰的相对强度以测定各肽的相对量。15.权利要求13或14的方法，其进一步包括比较所述第一消化物和所述第二消化物的结果，以测定所述第二蛋白质样品与所述第三蛋白质样品之间的任何差异。16.权利要求13-15中任一项的方法，其中所述比较包括将来自所述第一消化物的波谱的峰信号比率与来自所述第二消化物的波谱的相应峰信号比率进行比较。17.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一蛋白质样品为创新生物制品，而所述第二蛋白质样品为所述创新生物制品的生物相似制品。18.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一蛋白质样品为未缀合的蛋白质，而所述第二蛋白质样品为缀合蛋白质。19.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一蛋白质样品和所述第二蛋白质样品在不同细胞系、不同细胞类型或不同制造方法中产生。20.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一蛋白质样品和所述第二蛋白质样品已在不同储存条件下储存。21.前述权利要求中任一项的方法，其中采用所述方法来检测所述第二蛋白质样品中的突变、修饰或杂质。22.权利要求21的方法，其中所述突变、修饰或杂质选自寡糖含量改变、N-末端谷氨酰胺转化、C-末端赖氨酸去除、焦谷氨酸含量改变和脱酰胺作用或氧化作用增加。23.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一样品和所述第二样品为基本上均质的蛋白质制品。24.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一样品和所述第二样品为药物组合物。全文摘要提供了定性和/或定量检测蛋白质样品中突变、修饰或杂质的存在的方法。该方法利用在蛋白质消化之前将同位素标记的氨基酸变体掺入到蛋白质中，以使得能够在自下而上液相色谱中比较两种蛋白质样品。由本发明所实现的测量不仅考虑蛋白水解消化期间所产生的肽的质量，而且亦考虑各所得肽的丰度。通过在蛋白质消化之前利用与未标记的蛋白质混合的SITR样品，使得可经MS来测量肽的丰度。本文所用术语“SITRS样品”或“SITRS标准品”意为具有已知序列的蛋白质(例如抗体)，其用存在于蛋白质中的至少一个氨基酸的稳定同位素标记的变体来标记。文档编号A61K38/00GK103025342SQ201180038482公开日2013年4月3日申请日期2011年6月16日优先权日2010年6月16日发明者A.V.马努伊洛夫,D.H.李申请人:Abbvie公司