专利名称：一种特异性碱基修饰反义核苷酸链及其应用的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种特异性碱基修饰反义核苷酸链及其应用。
背景技术：
近些年来，许多不同种类的RNA分子在科学研究中逐渐被发现，其中最为重要的是小RNA分子。小RNA是长度为22nt左右的RNA分子，主要包括微RNA(microRNA，miRNA) 和小干涉RNA (small interfering RNA,siRNA)两类，其中的miRNA成为继siRNA之后科学界新的研究热点，名列2002年和2003年美国《科学》杂志评出的年度十大科学成就之一。miRNA首先由RNA聚合酶III家族负责转录形成primary miRNA,primary miRNA由 dorsha 禾口 DGCR8 所形成复合体切割，形成 precursor miRNA, precursor miRNA 由 Exportin 5将其由细胞核转运入细胞质，在细胞质中加工形成成熟体miRNA。miRNA通过与靶基因 mRNA 3’端非翻译区(3’ UTRs)碱基配对，进而抑制靶mRNA翻译或诱导剪切，从而在转录后水平上对基因的表达进行负调控。一种miRNA可以靶向多种基因的mRNA，而一种基因的 mRNA也可能会受到多种miRNA的共同调节。迄今为止，生物界发现和鉴定的miRNA已经超过1000种，从病毒到高等脊椎动物的基因组中都含有miRNA的编码信息。这些miRNA在生物系统发育、物质代谢、防御反应、肿瘤发生等众多生命过程发挥着不可或缺的作用，因此受到研究者的重视。在科学实验中，降低miR在体内和细胞的含量是验证miR作用通路的必要手段，但是如何降低miR在细胞或者活体里面的含量成为一个技术难题，因此有必要对miRNA的敲低技术作一个深入的研究。
发明内容
本发明目的是提供一种可用于miRNA-100 (即miR-100)敲低的特异性碱基修饰反义核苷酸链及其应用。本发明采用的技术方案是一种特异性碱基修饰反义核苷酸链，其核苷酸序列为AtCggAtcTacGggTt，其碱基修饰方式为(1)第1 16位碱基硫代修饰、(2)第3、6、9位碱基LNA修饰和( 第12、15 位碱基2’ OME修饰。全硫代修饰后，DNA酶就不容易识别修饰后的短链分子，防止合成的片段在体内被
降解，延长作用时间。全硫代修饰结构如下
权利要求
1.一种特异性碱基修饰反义核苷酸链，其核苷酸序列为ttCggAtchcGggTt，其碱基修饰方式为(1)第1 16位碱基硫代修饰、( 第3、6、9 位碱基LNA修饰和( 第12、15位碱基2’ OME修饰。
2.如权利要求1所述的反义核苷酸链在制备降低miR-100表达量的试剂中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述试剂为用于降低虾、小鼠细胞或人癌细胞内的miR-100表达量的药物。
全文摘要
本发明提供了一种特异性碱基修饰反义核苷酸链，其核苷酸序列为ttCggAtcTacGggTt，其碱基修饰方式为(1)第1～16位碱基硫代修饰、(2)第3、6、9位碱基LNA修饰和(3)第12、15位碱基2’OME修饰。本发明的有益效果主要体现在(1)本发明通过特异性的碱基修饰，选择16nt的短链DNA，能够有效阻止其被体内的DNA酶所降解，延长作用时间；(2)本发明短链DNA能够特异性敲低miRNA-100的表达，而不影响其他miRNA的表达量；(3)本发明方法为活体miR敲低提供了新的思路，有利于推进关于miR的研究，也为肿瘤药物研发提供了基础。
文档编号A61K48/00GK102311956SQ20111027955
公开日2012年1月11日 申请日期2011年9月20日 优先权日2011年9月20日
发明者杨璐, 杨耿, 王佳佳, 章晓波 申请人:浙江大学