含有西洋参的组合物和西洋参茶饮料的利记博彩app

专利名称：：含有西洋参的组合物和西洋参茶饮料的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及一种具有提高免疫力，缓解体力疲劳功能的组合物，尤其涉及一种含西洋参原料制成的组合物。本发明还涉及一种含西洋参的保健饮料。
背景技术：
：现代社会人们的竞争日趋激烈，工作压力日益提高，生活节奏加快，生存环境的污染又越来越严重，机体免疫力低下，处于疲劳或过度疲劳等亚健康状态的人群比例不断上升。疲劳是一种生理现象。疲劳可根据致病原因分为3种类型体力疲劳、病理性疲劳及心理疲劳。其中体力疲劳是由于肌肉过度过久地处于紧张状态，新陈代谢加快、代谢产物二氧化碳和乳酸在血液中的浓度升高而产生的，常表现为感觉肌肉缺乏能量或力量，进行一定的体力活动后容易疲劳，或疲劳不易消失，甚至不同程度地影响日常生活及工作。工作时间长、体力劳动过度、体育锻炼运动量过大，均可造成体力疲劳。短暂的体力疲劳一般休息后可以恢复，如果长期处于疲劳状态又得不到充分休息，就会使身体处于亚健康状态，会使身体抵抗力下降，产生各种疾病。人体运动后产生的身体疲劳是一种综合性的生理过程。它是以中枢作用为主导，在中枢和周围组织相互影响下发生的。它既与神经细胞的变化有关，也与周围组织的反射性和体液性影响有关。疲劳时的生化变化带有全身性的特点，它是伴有机体内环境的变化和不同生理机能的失调。疲劳感是一种保护性反应，这种保护性反应可使与机体生命攸关的机能免于过度衰竭，所以人体在产生疲劳时应及时调整自身的身体状况和精神状态。缓解体力疲劳最根本的措施是通过运动和营养改善体质。免疫力是指机体抵抗外来侵袭，维护机体内部环境稳定性的一种能力。不管是何种原因引起的“亚健康”，不管是那种表现的“亚健康”，最主要、最本质的是人体自身免疫功能下降。只要提高自身免疫功能，“亚健康”就会远离。据世界卫生组织调查，全球约有35%以上的人处于疲劳状态，男性人群疲劳状态者更高达60-70%。疲劳正成为现代人尤其是男性健康的大敌。有统计显示我国大约有2亿人处于亚健康的疲劳状态，疲劳综合症在我国城市发病率为10-20%，而需要提前预防疲劳的人群就更加广泛。专家们指出，持续过度疲劳、长期睡眠不佳后果严重，会引发慢性咽喉炎、颈部或腋窝淋巴结肿痛、肌肉酸痛、多发性非关节炎性关节疼痛、头晕、头痛等病症，并最终导致免疫力下降。因此，如何让人们在现代节奏及压力越来越大的生活环境下增强身体免疫力，缓解人们的体力疲劳，远离亚健康状态，保护人类的正常身体机能和提高人类的生存质量，是保健食品的研发者所要解决的问题。
发明内容本发明的一个目的是提供一种具有缓解体力疲劳、增强免疫力等保健功能的组合物，其由以下重量份原料制成西洋参15_45份左旋肉碱10-30份牛磺酸2.5-7.5份其中西洋参制成乙醇提取物。优选由以下重量份原料制成西洋参30份左旋肉碱20份牛磺酸5份其中西洋参制成乙醇提取物。本发明的另一个目的在于提供一种具有缓解体力疲劳、增强免疫力等保健功能的保健饮料(以下也称西洋参茶饮料)，在上述组合物配方的基础上，将其制成饮料，更利于身体的吸收，能快速达到缓解体力疲劳和提高免疫力的效果。本发明的保健饮料，每升饮料由以下成份组成西洋参1.5-4.5g;制成乙醇提取物左旋肉碱l_3g;牛磺酸0.25-0.75g；余量为调味剂辅料和水。优选每升饮料由以下成分组成西洋参3g；制成乙醇提取物左旋肉碱2g;牛磺酸0.5g；余量为调味剂、辅料和水。其中，原料西洋参是以30%-90%的食用乙醇浸泡西洋参，获得西洋参醇浸液；再将获得的西洋参醇浸液浓缩，获得的西洋参膏，作为制备保健饮料的原料。优化的提取工艺是将西洋参用乙醇浸泡为6-10次，第一次加入西洋参原料重量的3-7倍量(w/w)的乙醇浸泡至少1天，第29次每次分别加入西洋参原料重量的2-4倍量的乙醇浸泡，每次至少1天，获得西洋参醇浸液。浓缩回收乙醇，得西洋参膏，将西洋参膏浓缩至在4555°C测定相对密度彡1.20，总皂苷含量彡18.0%。本发明的组合物可以选择常用的辅料制成片剂、胶囊、口服液等剂型。本发明的保健饮料优选将其制备成罐装饮料。罐装饮料辅料可以选用葡萄糖作为甜味剂，改善口感。葡萄糖用量，每升可加33_99g；优选的用量为，每升饮料加66g。制成饮料的工艺将提取物中加入适量纯水，搅拌使其溶解分散，加入到配液容器内，再将规定量的左旋肉碱、牛磺酸和葡萄糖用适量纯水溶解加入上述配液容器，然后加入适量纯化水至规定量，搅拌、过滤、灌装、灭菌，获得西洋参茶饮料的最终产品。本发明的组合物是在传统中药西洋参(别名花旗参RadixPanacisquinquefolii)益气养阴、滋补强壮、养血生津的作用基础上，辅以L-肉碱、牛磺酸，通过L-肉碱、牛磺酸来调节机体各种酶的活性和调节人体各种代谢过程，中西医理念合理结合，通过调节人体整体机能平衡，从而达到增强免疫力和缓解体力疲劳的保健功能。本发明的西洋参提取工艺不同目前常规的一些有机溶剂提取方法，而采用的是乙醇的浸提工艺，通过本工艺提取出的西洋参提取物，既最大限度保留了西洋参的功效成份，同时在制备口服液体剂型时，长时间存放不会出现沉淀，使溶液澄清透明，而且口感纯正。本发明的西洋参茶饮料具有作用温和持久、健康安全无害的特点，除了具有缓解体力疲劳和增强免疫力的功效外，还具有改善心血管功能，调节人体内分泌、抗氧化等多重功效，因此作用面宽广深厚、底蕴丰富，支撑力量大。本发明的西洋参茶饮料在产品剂型上选择了更有利于人体吸收的液体饮料形式，在包装形式上也可以采用了更具时尚感的易拉罐或其他包装形式，为市场带来了差异化产品。在同时兼顾到产品的功效和口感的原则下，甜味剂选择葡萄糖，一方面是葡萄糖口感绵和、纯正，另一方面葡萄糖也可以快速供给能量能够辅助降低疲劳。因本发明的西洋参茶饮料所用原料均来自普通食品原料、食品添加剂、保健食品原料中的可用品种，故本产品对人体健康安全无害。抽检本发明的西洋参茶饮料样品，未发现世界反兴奋剂机构2007年规定禁用的刺激剂、麻醉剂、β-阻断剂、利尿剂和激素类药物。本发明的西洋参茶饮料经毒理试验验证其无毒副作用，雌雄小鼠经口急性毒性最大耐受量(MTD)>20.Og/kgBW，其属于无毒毒类，且无诱变、致畸、致癌等副作用。本发明的西洋参茶饮料经试验验证不会对机体的肝、肾、脾等脏器造成任何的负担，不会对机体产生其他的不良反应，服用本发明的西洋参茶饮料后其机体发育、机体代谢不会受到不良影响。经兴奋剂检测，本发明的西洋参茶饮料也不包含兴奋剂类物质。经过功能实验，本发明西洋参茶饮料在延长小鼠负重游泳时间的试验结果为阳性，降低小鼠运动后血清尿素氮水平的试验结果为阳性，增加小鼠肝糖原贮量试验结果为阳性，依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》缓解体力疲劳功能的标准判断，本品具有缓解体力疲劳功能。本发明的西洋参茶饮料的对小鼠的迟发型变态反应和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖试验的结果均为阳性，表明本发明的西洋参茶饮料具有增强细胞免疫功能的作用；绵羊红细胞免疫受试动物后血清溶血素检测结果阳性，绵羊红细胞免疫受试动物后脾细胞抗体生成试验结果阳性，表明本发明的西洋参茶饮料具有增强体液免疫功能作用，并且本发明的西洋参茶饮料具有增强NK细胞活性作用，依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》增强免疫力功能评价标准判断，本品具有增强免疫力功能作用。具体实施例方式实施例1西洋参茶饮料配制西洋参茶饮料配方西洋参提取物，将西洋参930g制成乙醇提取物；左旋肉碱620g；牛磺酸155g；葡萄糖20.46Kg；1)西洋参的提取西洋参除去杂草、泥土等杂质。将食用乙醇浓度调配成30%，第1次加入5倍量30%的乙醇浸泡时间24小时，第2次至第8次每次分别加入3倍量30%的乙醇，浸泡时间每次24小时(过滤，减压回收乙醇，得总皂苷含量>18.0%的稠膏。出膏率约为50-60%)。2)饮料配制过程采用上述由930g西洋参制成的乙醇提取物，将浸提所得稠膏加入适量纯水，搅拌使其溶解分散，加入到配液容器内，将配方量的左旋肉碱、牛磺酸和葡萄糖用适量纯水溶解加入上述配液容器，加入西洋参香精155g，然后加入纯化水至310L，然后搅拌、过滤、灌装每罐310ml，合计1000罐、灭菌。实施例2西洋参茶饮料的稳定性实验将实施例1所述配方制备的铝易开盖两片罐的西洋参茶饮料进行稳定性实验，其实验条件温度40士1°C，湿度75士10%，三个月，其实验结果见表1。表1.鹰牌西洋参茶饮料稳定性实验结果(三次加速)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>实施例3毒理试验一、30天喂养试验1.检验依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》2.检验结果与评价对健康SPF级SD种大鼠每天给予3.32,6.63、13.27g/kg本发明花旗茶饮料40倍去糖浓缩液，相当于市售产品的132.7,256.3、530.6g/kgBW，为人体推荐量的25、50、100倍，试验时间共30天，终期结果(1)、大鼠一般生理体征、行为、大小便、皮毛等均无异；(2)、体重、摄食量和食物利用率指标正常；(3)、血液常规指标下常；(4)、生化指标正常；(5)、各脏器重量、脏/体比值正常；(6)、病理学检查未发现与受试物有关的特殊病理学改变。二、小鼠经口急性毒性、微核试验、精子畸变、Ames试验1.检验依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》2.检验结果与评价(1)、小鼠经口急性毒性试验雌雄小鼠经口急性毒性最大耐受量(MTD)>20.Og/kgBff,根据急性毒性分级，受试物西洋参茶饮料属无毒级物质。(2)、小鼠骨髓微核试验2.50-10.Og/kgBW剂量的微核试验结果为阴性，受试物对体细胞无诱变作用。(3)、小鼠精子畸形试验2.50-10.Og/kgBff剂量的精子畸变试验结果为阴性，受试物对生殖细胞无诱变作用。(4)、Ames试验用浓度为85000μg/皿的受试物对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102进行平皿掺入试验，无论在加入不加S9混合液时，各剂量组均未引起试验菌株的回复突变菌落数显著增加，Ames试验结果为阴性，受试物无直接或间接的致突变作用。实施例4功能学试验检验依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》一、[缓解体力疲劳功能试验]1、材料1.1受试样品样品本发明茶饮料，浅黄色液体，310ml/罐，具体配方见实施例1。人体推荐日服量为每天一次，每次一罐。按60公斤体重成人计算推荐日服液为5.167ml/kgBW。样品的密度为1.027g/ml，故其推荐量为5.306g/kgBW。本实验采用实施例1西洋参茶饮料40倍的浓缩液(Ikg去糖浓缩液，相当于40kg市售产品)作为受试样品。1.2剂量设计设0.66、1.33,3.98g/kgBW三个剂量组，为推荐日服量的5、10、30倍，另设纯水对照组。剂量如下纯水对照组纯净水低剂量组0.66g/kgBff(5倍推荐量日服量)中剂量组1.33g/kgBW(10倍推荐日服量)高剂量组3.98g/kgBff(30倍推荐日服量)1.3受试物制备每天按设计量分别称取样品浓缩液2.64,5.32、15.92g，用纯净水分别定容至40ml。本实验结果所报告的剂量均为样品40倍去糖浓缩液的剂量。1.4给受试物的方法各剂量组按每日一次，每次以0.10ml/10gBW灌胃量灌胃给予受试物，纯水对照组按同等容量灌胃给予纯净水。1.5动物SPF级昆明种雄性小白鼠，6-8周龄、体重18_22g，由南方医科大学实验动物中心提供(动物生产许可证号2006-0015号，合格证编号N00030765)。颗粒饲料由南方医科大学实验动物中心提供。1.6动物试验室条件动物实验室为SPF级，实验动物使用许可证号SYXK(粤)2003-0011。室温22士2°C，湿度60-80%。1.7仪器游泳箱(50cmX50cmX40cm)，上海7230分光光度计，美国IKA生产的T25高速剪切分散器，日立7060全自动生化分析仪。1.8试剂测定尿素氮用酶法试剂盒，由中生北控生物科技公司提供；测定乳酸用LACTATE-PAP酶法试剂盒，由北京利德曼生化技术公司提供。其他所有试剂为AR级，从广州生化试剂商店购买。2.方法2.1试验方法实验动物在实验室条件下适应3天后，将实验动物随机分成4批，每批按剂量设计分成4组，每组12-13只动物。每日经口灌胃给予西洋参茶饮料受试样品，给样量根据动物每周体重变化调整，共42天。试验结束时测定小鼠负重游泳时间、尿素氮含量、血乳酸曲线下面积和肝糖原含量。2.1.1负重游泳试验给予本发明茶饮料受试样品42天，末次给予受试物30min后，将尾根部负荷5%体重铅皮的小鼠置于水深30cm、水温25士0.5°C的游泳箱中游泳，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳时间。2.1.2尿素氮、血乳酸及肝糖原测定尿素氮测定给予本发明茶饮料受试样品42天，末次给予受试物30min后，各组无负重的小鼠分别在水温30°C水中游泳90min，休息60分钟后采眼球血，4°C冰箱放置3小时后分离血清，用酶法试剂盒测定尿素氮。肝糖原测定采用蒽酮法，末次给予受试物30min后，准确称取50mg肝，加入4mlTCA液，每管勻浆lmin，以3000转/min离心15min，取上清液lml，加入95%乙醇4ml，充分混勻，37°C水浴3h，用2ml蒸馏水溶解糖原，震荡直至糖原完全溶解后将IOml蒽酮试剂加入各管，浸入沸水15min，冷却后用上海7230分光光度计(波长620nm)比色测定。按公式计算肝糖原含量。血乳酸含量测定给予西洋参茶饮料受试样品42天，末次给予受试物30min后，第一次采眼球血后即放于水温30°C游泳lOmin，第二次采眼球血，然后停止安静20min，第三次才眼球血，用LACTATE-PAP试剂盒分别测定游泳前乳酸和游泳后0min、20min的乳酸，根据公式计算三时点乳酸曲线下面积。血乳酸曲线下面积=5X(游泳前血乳酸值+3X游泳后Omin的血乳酸值+2X游泳后休息20min的血乳酸值)2.2统计所有数据用SPSS11.0软件包进行方差分析统计。3.试验结果本发明茶饮料对小鼠负重游泳时间的影响结果见表2，各剂量组的小鼠负重游泳时间延长，其中中剂量组与纯水对照组比较，差异有非常显著性意义(P<0.01)，试验结果阳性。表2本发明茶饮料对小鼠负重游泳时间的影响(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠运动后血清尿素氮含量的影响结果见表3，各剂量组的血清尿素氮水平降低，其中中、低剂量组与纯水对照组比较，差异有非常显著性意义(P<0.01)，试验结果阳性。表3本发明茶饮料对小鼠运动后血清尿素氮含量的影响(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠运动前后血乳酸含量的影响结果见表4、5，各剂量组的三时点血乳酸曲线下面积，与纯水对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)，试验结果阴性。表4小鼠运动前、后血乳酸含量(I土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5对小鼠运动前、后血乳酸含量的影响(士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠肝糖原的影响结果见表6，各剂量组小鼠的肝糖原含量明显增加，其中低、中剂量组与纯水对照组比较，差异有非常显著性意义(P<0.01)，试验结果阳性。表6对小鼠的肝糖原的影响GrtS)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠体重的影响，由表2、3、5、6可见，各剂量组与纯水对照组比较，始重、终重的差异均无显著性意义(P>0.05)，表明受试样品对试验小鼠体重增长物明显影响。4.小结对SPF级昆明种小鼠经口每日分别给予0.66、1.33、3.98g/kgBff剂量的本发明茶饮料40倍去糖浓缩液，相当于市售产品25.7,51.8、155.0ml，为推荐日服量的5,10,30倍，试验时间共42天。结果显示1)受试样品可延长小鼠负重游泳时间，试验结果为阳性。2)受试样品可降低小鼠运动后血清尿素氮水平，试验结果为阳性。3)受试样品不能降低小鼠运动前后三时点乳酸曲线下面积，试验结果为阴性。4)受试样品可增加小鼠肝糖原储量，试验结果为阳性。依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》缓解体力疲劳功能的标准判断，检验样品本发明茶饮料具有缓解体力疲劳功能。二、[增强免疫力功能动物试验]1.实验材料样品本发明茶饮料，浅黄色液体，310ml/罐。样品的人体推荐日服量为每天一次，每次一罐，以成人体重60kg计为5.167ml/kgBW，样品的密度为1.027g/ml，故其推荐量为5.306g/kgBff0由于本发明茶饮料推荐日服量较大，本实验采用40倍的浓缩液作为受试样品，其折算后推荐量为0.133g/kgBW。剂量与分组将动物分为I、II、III、IV批，每批48只动物随机分为四组，分别给予纯净水和低、中、高三个剂量，剂量如表7表7各组剂量m\40倍浓缩液剂量市售样品剂量低剂量0.67g/kgBW26.8g/kgBW相当于推荐量5倍中剂量1.33g/kgBW53.2g/kgBW相当于推荐量10倍高剂量3.99g/kgBW_159.6g/kgBW_相当于推荐量30倍_样品处理实验时称量40倍浓缩液样品1.34,2.66,7.89g，用纯净水配制成20ml的样液，分别供低、中、高三个剂量组动物灌胃使用。以下试验结果标示的剂量均为40倍浓缩液样品的剂量。动物SPF级NIH种雌性小白鼠，6-8周龄(体重18_22g)，由广东省医学实验动物中心提供，合格证号SCXK(粤)2003-0002，质量合格证编号0032206，颗粒饲料由广东省医学实验动物中心提供。动物实验室SPF级，室温22士2°C；湿度60-80%。给予受试物途径每天按0.lml/10gBff量灌胃动物给予受试物。2.试验方法动物在实验室条件下检疫三天后，以下每个实验均随机将48只鼠分成四，每组12只，每日灌胃给予受试物，给样量根据每周体重增减调整，实验时间为4周。2.1小鼠迟发型变态反应试验(足跖厚度增加法)试验结束前第4天免疫动物，用2%(ν/ν)绵羊红细胞腹腔注射0.2ml致敏动物，5天后测定左后足跖部厚度，接着于该处皮下注射20%(ν/ν)绵羊红细胞20ul/鼠，注射后24小时测定左后足跖部厚度三次，得平均值.2.2ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)脾细胞悬液制备无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用嵌子轻轻将脾撕碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，Hanks液洗3次，每次离心IOmins(lOOOr/min)。然后将细胞悬浮于2ml的完全培养液中，用CASYDT细胞计数仪计数脾细胞，调整细胞浓度3XIO6个/ml。淋巴细胞增殖反应将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔75ulConA液(相当于7.5ug/ml)，另一孔作为对照，置5%CO2，37°C培养72h。培养结束前4小时，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml无血清RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/ml)50ul/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入Iml酸性异丙醇，吹打混勻，使紫色结晶溶解，分加于96孔培养板中，作3个孔的平行样，以570nm波长测定光密度值。2.3小鼠血清溶血素滴度测定(血凝法)实验结束前的第4天免疫动物，每只腹腔注射2%的绵羊红细胞0.2ml，5天后摘除眼球采血，分离血清备用。凝集反应用生理盐水将血清倍比稀释于微量反应板内，各50ul，加入0.5%的绵羊红细胞50ul，混勻，装入湿润饭盒内盖好，置于37°C温箱3小时后，观察抗体凝集反应程度。2.4小鼠脾细胞抗体生成试验免疫动物取脱纤维的羊血，用生理盐水洗涤3次，每次离心(2000r/min)IOmin,压积SREC用生理盐水配成2%(ν/ν)的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0.2ml。脾细胞悬浮液制备将SRBC免疫4天后的小鼠颈椎脱经200目筛网过滤，离心(1000r/min)10mins，用Hank，s液洗2遍，最后将细胞悬浮在5mlRPMI1640培养液中，用CASYDT细胞计数仪计数脾细胞，调整细胞浓度5XIO6个/ml。空斑的测定将表层培养基加热熔解后，放4550°C水浴保温，与等量pH7.27.4、2倍浓度的Hank，s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50ul10%SRBC(ν/ν，用SA缓冲液配制)，25ul脾细胞悬液，迅速混勻，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1-1.5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(18)加入到玻片架凹槽内，继续温育1-1.5h后，计数溶血空斑数。2.5小鼠碳廓清试验末次给药后用14稀释的印度墨汁，按每鼠IOg体重0.1ml尾静脉注射，立即计时，间隔2、10分钟分别从内眦静脉丛取血20ul，加入2mlNa2C03溶液中，用721分光光度计于600nm波长处测OD值，用Na2C03溶液做空白对照，处死小鼠，取肝、脾脏称重，计算吞噬指数。2.6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验小鼠巨噬细胞的激活实验前4天给每只小鼠腹腔注射2%压积羊红细胞0.2ml。用颈椎脱臼法处死小鼠，腹腔注射加小牛血清的Hank’s液4ml/只，轻轻按揉腹部20次，以充分洗出腹腔巨噬细胞，然后将腹腔壁剪开一个小口，用胶头吸管吸取腹腔洗液2ml于试管内。用Iml加样器吸取腹腔洗液0.5ml加入盛有0.5mll%鸡血红细胞悬液的试管内，混勻。用注射器吸取0.5ml混合液，加入玻片的琼脂圈内。放置孵箱内37°C孵育15-20分钟。孵育结束后，迅速用生理盐水将未贴壁细胞冲掉，于甲醇溶液中固定1分钟，Giemsa液染色15分钟。用蒸馏水冲洗干净，晾干，用40倍显微镜计数吞噬率和吞噬指数。吞噬率为每100个巨噬细胞中，吞噬鸡红细胞的巨噬细胞所占的百分率吞噬指数为平均每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的个数。2.7NK细胞活性测定(LDH法)脾细胞悬液的制备(效应细胞)无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，制备单细胞悬液。经200目筛网过滤，Hank’s液洗3次，每次离IOmin(lOOOr/min)，然后将细胞悬浮于2ml的完全培养中，用CASYDT细胞计数仪计数脾细胞，最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2XIO7个/ml。NK细胞活性检测取浓度为4XIO5个/ml的YAC-1靶细胞和效应细胞各IOOul(效靶比501)，加入U型96孔培养板；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各ΙΟΟμΙ，靶细胞自然释放孔加靶细胞和NP4tl各100μ1；上述各项均设三个复孔，于37°C、5%CO2培养箱中培养4h，然后将96也培养板以1500r/min离心5min。每孔吸取上清IOOul置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μ1，反应3min，每孔加入lmol/LHC130y1，在酶联仪492nm处测定光密度值。3.数据处理用SPSS10.0软件包进行统计分析。4.实验结果本发明茶饮料对小鼠体重的影响血清溶血素与迟发性变态反应见表8；淋巴细胞转化、NK活性测定、抗体生成组见表9，碳廓清实验组见表10，吞噬鸡红细胞组见表11。各实验组各期体重与对照组相应得体重比较，差异无显著性意义，表明西洋参茶饮料对小鼠的体重生长物明显影响。表8对小鼠体重的影响(第I批动物，η=12，Szts)组别，/,Mlm、初始体重(g)中期体重(g)终期体重(g)增重(g)_(g/kgBW)_对照组OOO19.2士0.628.1士1.532.7士1.313.5士1.6低剂量组0.6718.9±0.728.6士1.233.3±1.514.4±1.7中剂量组1.3319.2士0.627.5±1.632.4士1.613.2士1.6高剂量组3.9919.0±0.627.9±1.632.2±1.713.3±1.4F值0.9331.2221.1371.517P值_>0.05_>0.05_>0.05_>0.05表9对小鼠体重的影响(第II批动物，η=12J土s)组别，/ι^^^λ初始体重(g)中期体重(g)终期体重(g)增重(g)_(g/kgBW)_对照组OOO19.3士0.927.7±1.633.4±1.714.1士1.6~低剂量组0.6719.3士0.827.2士1.432.8士1.513.4±1.4中剂量组1.3319.1士0.928.2±1.133.6士1.614.5士1.6高剂量组3.9919.1士0.827.4士1.333.4士0.914.3士0.8F值0.1991.2600.7751.318P值_>0.05_>0.05_>0.05_>0.05表10对小鼠体重的影响(第III批动物，η=12,x±S)组别t初始体重(g)中期体重(g)终期体重(g)增重(g)_(g/kgBW)_对照组OOO19.3士0.528.2士1.633.6士1.814.3士1.7低剂量组0.6719.1士0.427.5土1.433.0土1.713.9土1.5中剂量组1.3319.3士0.627.7±1.533.1土1.813.8士1.4高剂量组3.9919.4士0.427.6士1.333.2士1.713.8±1.7F值0.4920.6370.2120.215P值_>0.05_>0.05_>0.05_>0.05表11对小鼠体重的影响(第IV批动物，η=12,x±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠脾脏重量和胸腺重量的影响各剂量组脏器/体重比值与对照组比较，差异均无显著意义(见表12)。表明本发明茶饮料对小鼠的脾脏重量和胸腺重量无明显影响。表12西洋参茶饮料对小鼠胸腺、脾脏重量的影响(n=12,^±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠的迟发型变态反应的影响32，中、高剂量组足跖增厚值与对照组比较，差异有显著性意义(见表13)。表明西洋参茶饮料对小鼠的迟发型变态反应试验结果为阳性。表13西洋参茶饮料对小鼠迟发型变态反应的影响(士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>本发明茶饮料对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化反应高剂量组光密度差值高于对照组，差异有显著性意义(见表14)，表明西洋参茶饮料的脾淋巴细胞转化试验结果为阳性。表14对小鼠脾淋巴细胞转化反应的影响士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本发明茶饮料对受试动物血清溶血素抗体滴度水平的影响中、高剂量组的抗体积数均高于对照组，差异有显著性意义(见表15)。表明西洋参茶饮料对受试动物血清溶血素抗体滴度水平测定试验结果为阳性。表15对小鼠血清溶血素抗体滴度水平的影响(x±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本发明茶饮料对受试动物脾细胞抗体生成水平的影响高剂量组的脾细胞抗体生成水平高于对照组，差异有显著性意义(见表16)，表明西洋参茶饮料对受试动物脾细胞抗体生成水平测定结果为阳性。表16对小鼠脾细胞生成水平的影响(x±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠碳廓清吞噬功能的影响各剂量组碳廓清吞噬指数与对照组比较，差异均无显著性意义(见表17)，表明旗参茶饮料的碳廓清吞噬作用试验结果为阴性。表17西洋参茶饮料对小鼠碳廓清吞噬功能的影响(x±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>本发明茶饮料对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬功能的影响见表18，各剂量组吞噬百分率转换值及吞噬指数指标与对照组比较，差异均无显著性意义，表明西洋参茶饮料的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果为阴性。表18对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬功能的影响(η=10,χ±δ)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>本发明茶饮料对受试动物NK细胞活性的影响见表19，高剂量组的NK细胞活性与对照组比较差异有显著性意义，表明西洋参茶饮料对受试动物NK细胞活性试验结果味阳性。表19对小鼠NK细胞活性的影响(η=11，I土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>5.小结对SPF级NIH种小鼠经口每日分别给予40倍浓缩的本发明茶饮料0.67、1.33、3.99g/kgBff0相当于本发明茶饮料26.8、53.2、159.6g/kgBW，即推荐日服量的5、10、30倍，共4周，结果显示绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应试验(足跖增厚法)阳性，ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖试验阳性，受试样品具有增强细胞免疫功能的作用；绵羊红细胞免疫受试动物后血清溶血素检测结果阳性，绵羊红细胞免疫受试动物后脾细胞抗体生成试验结果阳性，受试样品具有增强体液免疫功能作用；受试动物NK细胞活性试验阳性，受试样品具有增强NK细胞活性作用。受试动物碳廓清试验阴性，受试动物巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验阴性，受试样品不具有增强单核_巨噬细胞功能作用。依据《保健食品检验与评价技术规范》增强免疫力功能评价标准判断，本发明的西洋参茶饮料具有增强免疫力功能作用。实施例5西洋参片剂的制备取西洋参药材155g，将食用乙醇浓度调配成40%，第1次加入5倍量40%的乙醇浸泡时间24小时，第2次至第8次每次分别加入4倍量40%的乙醇，浸泡时间每次24小时，过滤，减压回收乙醇，得总皂苷含量>18.0%的稠膏，约90g。以稠膏为为黏合剂，加原料左旋肉碱103.3g，牛磺酸25.8g，葡萄糖510g，制粒，烘干，加润滑剂硬脂酸镁6.7g压片，共制成1000片，每片重0.7g，每日服用6片。以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明做出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求所限定的范围。权利要求一种具有提高免疫力，缓解体力疲劳功能的组合物，其特征在于由以下重量份原料制成西洋参15-45份左旋肉碱10-30份牛磺酸2.5-7.5份其中西洋参制成乙醇提取物。2.权利要求1所述的组合物，其特征在于由以下重量份原料制成西洋参30份左旋肉碱20份牛磺酸5份其中西洋参制成乙醇提取物。3.权利要求1或2所述的组合物，其中所述将西洋参制成乙醇提取物的方法为1)以30-90%的食用乙醇浸泡西洋参，获得西洋参醇浸液；2)将获得的西洋参醇浸液浓缩，获得西洋参膏，即为所述乙醇提取物。4.权利要求3所述的组合物，其中步骤1)所述的乙醇浸泡为6-10次，第一次加入西洋参原料重量的3-7倍量(w/w)的乙醇浸泡至少1天，第29次每次分别加入西洋参原料重量的2-4倍量的乙醇浸泡，每次至少1天，获得所述西洋参醇浸液；步骤2)所述的西洋参膏浓缩至在4555°C测定相对密度>1.20，总皂苷含量>18.0%。5.一种具有提高免疫力，缓解体力疲劳功能的保健饮料，其特征在于每升饮料由以下成份组成西洋参1.5-4.5g；制成乙醇提取物左旋肉碱l_3g;牛磺酸0.25-0.75g；余量为调味剂、辅料和水。6.如权利要求5所述的保健饮料，其特征在于每升饮料由以下成分组成西洋参3g;制成乙醇提取物左旋肉碱2g;牛磺酸0.5g；余量为调味剂、辅料和水。7.权利要求5所述的保健饮料，其中的调味剂为葡萄糖33-99g。8.权利要求6所述的保健饮料，其中的调味剂为葡萄糖66g。9.权利要求5至8任一所述的保健饮料，其中所述乙醇提取物的制备方法为1)以30-90%的食用乙醇浸泡西洋参，获得西洋参醇浸液；2)将获得的西洋参醇浸液浓缩，获得西洋参膏，即为所述乙醇提取物。10.权利要求9所述的保健饮料，其中步骤1)所述的乙醇浸泡为6-10次，第一次加入西洋参原料重量的3-7倍量(w/w)的乙醇浸泡至少1天，第29次每次分别加入西洋参原料重量的2-4倍量的乙醇浸泡，每次至少1天，获得所述西洋参醇浸液；步骤2)所述西洋参膏浓缩至在4555°C测定相对密度>1.20，总皂苷含量>18.0%。全文摘要本发明提供一种具有提高免疫力，缓解体力疲劳功能的组合物，其由以下重量份原料制成西洋参15-45份，左旋肉碱10-30份，牛磺酸2.5-7.5份，其中西洋参制成乙醇提取物。本发明也提供根据上述配方制成的保健饮料。文档编号A61K31/205GK101810657SQ20091010548公开日2010年8月25日申请日期2009年2月20日优先权日2009年2月20日发明者余孝云,张蕴,张薇申请人:深圳太太药业有限公司