专利名称：密码子优化的乙型肝炎核酸疫苗的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种乙肝疫苗，特别涉及一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫
苗
背景技术：
在本发明之前，随着科学的发展，核酸疫苗作为一种新型疫苗逐渐受到人们的重视。目前用来构建核酸疫苗的目的基因绝大多数来自于病毒或细菌等原核
生物，而疫苗的研究和应用对象主要为真核生物，例如小鼠，猕猴或人类等高级哺乳动物。问题在于，由于原核生物与真核生物在密码子使用偏好上存在差异，导致用来构建核酸疫苗的外源基因在哺乳动物宿主体内不能有效表达，因此就不能有效的刺激宿主的免疫系统，使之产生较好的免疫保护作用，这是导致目前核酸疫苗免疫原性较低的主要原因。
发明内容
本发明的目的就在于克服上述缺陷，设计、研制一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫苗。
本发明的技术方案是
密码子优化的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗，其主要技术特征在于构建核酸疫苗的表面抗原基因是按照高级哺乳动物密码子使用偏好进行优化的，优化后的目的基因序列如下
ACCTCCAACCACAGCCCTACCAGCTGCCCCCCCATCTGCCCCGGCTACCGGTGGATGTTTTCTGCCCCTGCTGCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA其编码的M酸序列如下
MGGWSSKPRQGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFGANSNNPDWDFNPNKDHWPDANQ
VGAGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTVPAAPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQA
MQ丽STTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPWTTASPISSIFSRTGDPAPNMESTTSG
FLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICP
GYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLLPGTSTTSTGPCKTCTIPAQGTSM
FPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFARFLWEWASVRFSWLSLLVPFVQWFAGLSPTVWLSVI
WMMWYWGPSLYNILSPFLPLLPIFFCLWVYI
本发明的优点和效果在于经密码子优化后的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗显著提高了外源基因在哺乳动物宿主体内的蛋白表达量，有效的刺激了宿主的免疫系统，提高体液免疫反应和细胞免疫反应的水平。
本发明的其他优点和效果将在下面继续描述。
图1一一本发明中各组核酸疫苗质粒在293T细胞中的表达示意图。
图2—一本发明中各组核酸疫苗质粒免疫BALB/c小鼠血清抗-HBs滴度示意图。
图3—一本发明中各组核酸疫苗质粒免疫BALB/c小鼠表面抗原特异性分泌IFN-r脾细胞的比较示意图。
具体实施例方式
本发明是在乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗中引入密码子优化的方法，提高现有疫苗的免疫原性。密码子优化后乙型肝炎表面抗原基因可以用来编码三种蛋白质大蛋白，中蛋白和小蛋白，其中密码子优化的乙型肝炎表面抗原中蛋白核酸疫苗已被构建，并在动物实验中证明密码子优化确实能提高乙型肝炎表面抗原中蛋白核酸疫苗的免疫原性。
具体方法说明
首先说明
优化后乙型肝炎病毒表面抗原命名为HBs/opt，简称S-opt;优化前乙型肝炎病ii面抗原命名为HBs/adr，简称S-adr;密码子优化乙型肝炎表面抗原中蛋白(MHBs )核酸疫苗pSW3891/MHBs/opt,简称opt乙型肝炎表面抗原中蛋白(MHBs )核酸疫苗(adr亚型)pSW3891/MHBs/adr,简称adr
空载体质粒作为对照pSW3891。
第一步
用MacVector 7.2软件分析基因库中乙型肝炎表面抗原(HBs )基因序列，找出其密码子使用偏好与哺乳动物密码子使用偏好不同的密码子位点。例如HBs基因组中编码丝氨酸Ser的三联体密码子主要是AGT或TCT,而在人类、小鼠等高级哺乳动物基因组中则主要是AGC; HBs基因组中脯氨酸Pro主要由CCA编码，而在高级哺乳动物则为CCC。
第二步
按照哺乳动物密码子使用标准，在不改变基因编码蛋白质的基础上，对HBs基因序列的密码子进行替换。例如在编码丝氨酸Ser时，将HBs的密码子AGT或TCT替换为AGC,得到了经密码子优化后的HBs基因序列。
得到的密码子优化后的表面抗原基因序列如下TTTCTGCCCCTGCTGCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA其编码的^J^酸序列如下
MGGWSSKPRQGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFGANS丽PDWDFNPNKDHWPDANQ
VGAGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTVPAAPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQA
MQ丽STTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVPTTASPISSIFSRTGDPAPNMESTTSG
FLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICP
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FPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFARFLWEWASVRFSWLSLLVPFVQWFAGLSPTVWLSVI
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第三步
将该基因序列化学合成，密码子优化后的表面抗原基因HBs/S-opt第四步
装入载体pGA4中，得到了质粒pGA4/HBs/opt。以该质粒为母板，经PCR法用上游引物(TACACTCTGCAGATGCAGTGGAACAGCACCACC )， 下游引物(GAGCTCGGATCCTCAGATGTACACCCAC )扩增出乙型肝炎表面抗原中蛋白(MHBs ),PCR条件为:94。C,4min;94。C, 45s, 58。C， 45s， 72°C, lmin, 25个循环；72。C， 7min。将上述PCR产物进行1°/ 琼脂糖凝胶电泳(IOOV， 35min),经割胶回收后得到了经密码子优化的MHBs。第五步
戶WI 、 A/z^I双酶切MHBs基因和载体pSW3891质粒(37。C水浴，2小时)，1°/ 琼脂糖凝胶电泳(100V, 35min)，分别割胶回收后得到了经戶WI 、 &迈#1双酶切消化的MHBs基因和栽体pSW3891。
第六步
配制10ul的连接体系l(kbuffer lul， T4连接酶lul， MHBs基因6ul，载体pSW3891 2ul，加入EP管中混匀，16。C水浴，过夜。将连接产物转化大肠杆菌HBIOI，取200ul转化产物涂具有卡那霉素抗性的LB平板，3rC，过夜。挑取平板上的单克隆于5ml的LB液中，37'C,摇菌12h。用小提试剂盒提取上述菌液中的质粒，即得到了密码子优化后的MHBs核酸疫苗即opt。
得到的密码子优化后的MHBs核酸疫苗，优化后的目的基因序列如下:GCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA 其编码的氨基酸序列如下
MQ丽STTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVPTTASPISSIFSRTGDPAPNMESTTSG
FLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICP
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为了明确显示进行密码子优化的位点，现将密码子优化后的核酸疫苗与密码 子优化前的核酸疫苗目的基因序列进行对比。密码子优化后的核酸疫苗(opt) 与密码子优化前的核酸疫苗(adr )基因序列比较如下(仅提供编码前80个氨基 酸的基因序列)
adr ATGCAGTGGAACTCCACAACATTCCACCMGCTCTGCTAGACCCCAGAGTMGGGGCCTA opt ATGCAGTGGAAC eTTCCAC GCTQPACCCCAGAGT^GGGGCCTg aa MQWNSTTFHQALLDPRVRGL
adr TACTTTCCTGCTGGTGGCTCCAGTTCCGGAACAGTMACCCTGTTCCGACTACTGCCTCA 邻t TACTTCCCTGCCGGCGGMGCAGCAGCGGCACCGTGAACCCCGTGCCCACCACCGCCAGC aa YFPAGGSSSGTVNPVPTTAS
adr CCCATATCGTC雄CTTCTCGAGGACTGGGGACCCTGCACCGAACATGGAGTCCACMCA 卯t CCCATCTCCAGCATCTTCAGCCGGACCGGCGAaXTGCCCCCAACATGGMTCCACCACC aa P I S S I F S R T G D P A P N M E S T T
adr TCAGGATTCCTAGGACCCCTGCTCGTGTTACAGGCGGGGTTTrTCTTGTTGACMGAATC opt TCgK^grTICTQGGCCCCCTGCTCGTGgi^CAGGCpGgrTCTTCgrGgrGACpGMTC aa S一(TfLGPLLVLQAGFFLLTRI其中，adr:代表密码子优化前的核酸疫苗；opt:代表经密码子优化后的核 酸疫苗；aa:表示氨基酸；序列中用下划线及加黑表示进行优化的基因位点
本发明(经密码子优化的MHBs核酸疫苗)经各项测试 如图1所示
为各组核酸疫苗在293T细胞中的表达示意图，可以看出，opt及adr体外 转染293T细胞后，均可以在细胞内表达，而且可以将表达产物分泌到细胞外。 与adr相对而言，opt在细胞内外的表达量都要高(大约高2倍左右)。说明 了经密码子优化后的核酸疫苗提高了外源基因在宿主细胞中的蛋白表达量。
如图2所示
为各组核酸疫苗质粒免疫BALB/c小鼠血清抗-HBs滴度示意图。可以看出， 四次免疫后，opt免疫组小鼠血清中特异性抗体滴度最高可以达到1: 364500, 显著高于adr免疫组(1: 121500 )。说明了 opt具有较好的抗-HBs的体液免疫 反应。
如图3所示
为各组核酸疫苗质粒免疫BALB/c小鼠表面抗原特异性分泌IFN-r脾细胞的 比專支示意图。ELISP0T的结果显示在相同的特异性多肽刺'激之下，opt免疫组 小鼠的斑点数要明显的高于adr免疫组。说明了 opt具有较好的HBs特异性的细 胞免疫反应。序列表
<U0>邢益平、王世霞、卢山、黄祖瑚
<120>密码子优化的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗
<腾4
<210> 1
<211> 1203
<212> DNA
<213〉人工序列
<220>
<223>根据高级晡乳动物密码子使用偏好而设计。 <400> 1
atgggcggctggtccagcaagccccggcagggcatgggcaccaacctgagcgtgcccaac60 cccctgggcttcttccccga
tcaccagctggaccccgccttcggcgccaa120CCCg3Ctgggacttcaaccccactggcccg3CgCC33CC3ggtgggsgcc180
ggcgccttcggccctggcttC3CCCCtCCCcacggcggactgctgggctggtctcctcag240
gccc鄉gcatcctgaccaccgtgcctgccgcccctcctcccgccagcaccaaccggcag300 agcggcaggc3gcccacccc
catcagcccccctctgcgggacagccacccccaggccatg360cagtgg犯cagcaccaccttccaccaggccctgctggaccccagagtgcggggcctgtac420 ttccctgccggcggaagcag
cagcggcaccgtgaaccccgtgcccaccaccgccagcccc480atctccagcatcttcagccggsccggcgaccctgcccccaC3ccacctcc540 ggctttctgggccccctgct
cgtgctccaggccggcttcttcctgctgacC3g33tCCtg6003CC3tCCCCC卿gcctggactcctggtggaccagcctgaacttcctgggcggcgctccc660 acctgccctggccagaacag
ccagagccccacctcc犯ccacagccctaccagctgcccc720
cccatctgccccggctaccggtggatgtgcctgcggcggttcatcatctttctgttcatc780
ctgctgctgtgcctgatctttctgctggtgctgctggactaccagggcatgctgcccgtg柳
tgccctctgctgcccggcacagcsccggcccctgc朋gacctgcaccatc900 cccgcccaggg幼CC3gC3t
gttccctagctgctgctgcaccaagcccagCg3CggC83C960
tgcacctgceitccccatccctagcagctgggccttcgcccggttcctgtgggagtgggcc1020 agcgtgaggttcagctggct
gtctctgctggtgcccttcgtgcagtggttcgccggcctg1080agccccaccgtgtggctgtccgtgatctggatgatgtggtactggggccctagcctgtac1140 aacatcctgagcccctttct
gcccctgctgcctatcttcttctgcctgtgggtgtacatc1200
tga
<210〉 2 <211> 400
<212> PRT
〈213>乙型肝炎病毒种(H印atitis B) <400> 2
MetGlyGlyTrpSerSerLysProArg GinGlyMetGlyThrAsn Leu
151015
SerValProAsnProLeuGlyPhePhe ProAspHisGinLeuAsp Pro
202530AlaPheGlyAlaAsnSerAsnAsnPro AspTrpAspPheAsnPro Asn
354045
LysAspHisTrpProAspAlaAsnGin ValGlyAlaGlyAlaPhe Gly
505560
ProGlyPheThrProProHisGlyGly LeuLeuGlyTrpSerPro Gin
65707580
AlaGinGlylieLeuThrThrValPro AlaAlaProProProAla Ser
859095
ThrAsnArgGinSerGlyArgGinPro ThrProlieSerProPro Leu
100105110
ArgAspSerHisProGinAlaMetGin TrpAsnSerThrThrPhe His
115120125
GinAlaLeuLeuAspProArgValArg GlyLeuTyrPheProAla Gly
130135
GlySerSerSerGlyThrValAsnPro VslProThrThrAlaSer Pro145150155160
lieSerSer liePhe SerArgThrGlyAspProAla ProAsnMetGlu
165170175
SerThrThr SerGly PheLeuGlyProLeuLeuVal LeuGinAlaGly
180185190
PhePheLeu LeuThr ArglieLeuThrlieProGin SerLeuAspSer
195200205
TrpTrpThr SerLeu AsnPheLeuGlyGlyAlaPro ThrCysProGly
210215220
GinAsnSer GinSer ProThrSerAsnHisSerPro ThrSerCysPro
225230235240
ProlieCys ProGly TyrArgTrpMetCysLeuArg ArgPhelielie
245250255
PheLeuPhe lieLeu LeuLeuCysLeuliePheLeu LeuValLeuLeu
260265270
AspTyrGin GlyMet LeuProValCysProLeuLeu ProGlyThrSer
275280285
ThrThrSer ThrGly ProCysLysThrCysThrlie ProAlaGinGly
290295300
ThrSerMet PhePro SerCysCysCysThrLysPro SerAspGlyAsn
305310315320
CysThrCys liePro lieProSerSerTrpAlaPhe AlaArgPheLeu
325330335
TrpGluTrp AlaSer ValArgPheSerTrpLeuSer LeuLeuValPro
340345350
PheValGin TrpPhe AlaGlyLeuSerProThrVal TrpLeuSerVal
355360365
lieTrpMet MetTrp TyrTrpGlyProSerLeuTyr AsnlieLeuSer
370375380
ProPheLeu ProLeu LeuProliePhePheCysLeu TrpValTyrlie
385385390400
<210> 3
〈211〉 846
<212> <213> <220〉 〈223〉 <400>
腿
人工序列
根据高级哺乳动物密码子使用偏好而设计。 3
atgcagtgga tacttccctg cccatctcca tccggcUtx ctgaccatcc cccacctgcc ccccccatct atcctgctgc gtgtgccctc atccccgccc
肪CtgC3CCt
gccagcgtga ctgagcccca tacaacatcc atctga
8C3gcaccac ccggcgg卿 gcatcttcag tgggccccct cccagagcct ctggccagaa gccccggcta tgtgcctgat tgctgcccgg
3ggg犯CC3g
gcatccccat ggttcagctg ccgtgtggct tgagcccctt
cttccaccag cagcagcggc ccggaccggc gctcgtgctc ggactcctgg cagccaggigc ccggtggatg ctttctgctg caccEigcacc catgttccct
CCCt站C3gC
gctgtctctg gtccgtgatc tctgcccctg
gccctgctgg accgtgaacc gaccctgccc caggccggct tggaccagcc
CCC3CCtCC3
tgcctgcggc gtgctgctgg acaagcaccg agctgctgct tgggccttcg ctggtgccct tggstgstgt ctgcctatct
accccagagt ccgtgcccac ccaacatgga tcttcctgct tgaacttcct 3cc3cagccc ggttcatcat actaccaggg gcccctgcaa gcaccaagcc cccggttcct tcgtgcagtg
ggt3Ctgggg
tcttctgcct
gcggggcctg 60
caccgccagc 120
atccaccacc 180
geiccagaatc 240
gggcggcgct 300
tacc鄉tgc 360
cUtctgttc 420
catgctgccc 480
gacctgcacc 540
cagcgacggc 600
gtgggagtgg 660
gttcgccggc 720
ccctagcctg 780
gtgggtgtac 840
〈210〉 4 <211> 281 <212> PRT
〈213〉乙型肝炎病毒种(H印atitis B)<400> 4
MetGinTrpAsnSerThrThrPheHisGinAlaLeuLeuAspProArg
151015
ValArgGlyLeu 20TyrPheProAlaGly 25GlySerSerSerGly 30ThrVal
AsnProVal 35ProThrThrAlaSer 40ProlieSerSerlie 45PheSerArg
ThrGlyAspProAlaProAsnMetGluSerThrThrSerGlyPheLeu
505560
GlyProLeuLeuValLeuGinAlaGlyPhePheLeuLeuThrArglie
65707580
LeuThrlieProGin 85SerLeuAspSerTrp 90TrpThrSerLeuAsn 95Phe
LeuGlyGlyAlaProThrCysProGlyGinAsnSerGinSerProThr
100105110
SerAsnHis 115SerProThrSerCys 120ProProlieCysPro 125GlyTyrArg
TrpMetCysLeuArgArgPhelieliePheLeuPhelieLeuLeuLeu
130135140
CysLeuliePheLeuLeuValLeuLeuAspTyrGinGlyMetLeuPro
145150155160
ValCysProLeuLeuProGlyThrSerThrThrSerThrGlyProCys
165170175
LysThrCysThrlieProAlaGinGlyThrSerMetPheProSerCys
180185190
CysCysThr 195LysProSerAspGly 200AsnCysThrCyslie 205ProliePro
SerSerTrpAlaPheAlaArgPheLeuTrpGluTrpAlaSerValArg
210215220
PheSerTrpLeuSerLeuLeuValProPheValGinTrpPheAlaGly
225230235240
LeuSerProThrVal 245TrpLeuSerVallie 250TrpMetMetTrpTyr 255Trp
GlyProSerLeuTyrAsnlieLeuSerProPheLeuProLeuLeuPro
260265270
liePhePheCysLeuTrpValTyrlie
275 280
权利要求
1. 密码子优化的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗，其特征在于构建核酸疫苗的表面抗原基因是按照高级哺乳动物密码子使用偏好进行优化的，优化后的表面抗原目的基因序列如下ATGGGCGGCTGGTCCAGCAAGCCCCGGCAGGGCATGGGCACCAACCTGAGCGTGCCCAACCCCCTGGGCTTCTTCCCCGATCACCAGCTGGACCCCGCCTTCGGCGCCAACAGCAACAATCCCGACTGGGACTTCAACCCCAACAAGGACCACTGGCCCGACGCCAACCAGGTGGGAGCCGGCGCCTTCGGCCCTGGCTTCACCCCTCCCCACGGCGGACTGCTGGGCTGGTCTCCTCAGGCCCAGGGCATCCTGACCACCGTGCCTGCCGCCCCTCCTCCCGCCAGCACCAACCGGCAGAGCGGCAGGCAGCCCACCCCCATCAGCCCCCCTCTGCGGGACAGCCACCCCCAGGCCATGCAGTGGAACAGCACCACCTTCCACCAGGCCCTGCTGGACCCCAGAGTGCGGGGCCTGTACTTCCCTGCCGGCGGAAGCAGCAGCGGCACCGTGAACCCCGTGCCCACCACCGCCAGCCCCATCTCCAGCATCTTCAGCCGGACCGGCGACCCTGCCCCCAACATGGAATCCACCACCTCCGGCTTTCTGGGCCCCCTGCTCGTGCTCCAGGCCGGCTTCTTCCTGCTGACCAGAATCCTGACCATCCCCCAGAGCCTGGACTCCTGGTGGACCAGCCTGAACTTCCTGGGCGGCGCTCCCACCTGCCCTGGCCAGAACAGCCAGAGCCCCACCTCCAACCACAGCCCTACCAGCTGCCCCCCCATCTGCCCCGGCTACCGGTGGATGTGCCTGCGGCGGTTCATCATCTTTCTGTTCATCCTGCTGCTGTGCCTGATCTTTCTGCTGGTGCTGCTGGACTACCAGGGCATGCTGCCCGTGTGCCCTCTGCTGCCCGGCACCAGCACCACAAGCACCGGCCCCTGCAAGACCTGCACCATCCCCGCCCAGGGAACCAGCATGTTCCCTAGCTGCTGCTGCACCAAGCCCAGCGACGGCAACTGCACCTGCATCCCCATCCCTAGCAGCTGGGCCTTCGCCCGGTTCCTGTGGGAGTGGGCCAGCGTGAGGTTCAGCTGGCTGTCTCTGCTGGTGCCCTTCGTGCAGTGGTTCGCCGGCCTGAGCCCCACCGTGTGGCTGTCCGTGATCTGGATGATGTGGTACTGGGGCCCTAGCCTGTACAACATCCTGAGCCCCTTTCTGCCCCTGCTGCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA其编码的氨基酸序列如下MGGWSSKPRQGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFGANSNNPDWDFNPNKDHWPDANQVGAGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTVPAAPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQAMQWNSTTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVPTTASPISSIFSRTGDPAPNMESTTSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICPGYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLLPGTSTTSTGPCKTCTIPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFARFLWEWASVRFSWLSLLVPFVQWFAGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYNILSPFLPLLPIFFCLWVYI。
2.根据权利要求1所述的密码子优化的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗，构建乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗，其特征在于构建核酸疫苗的表面抗原中蛋白基因是按照高级哺乳动物密码子使用偏好进行优化的，优化后的基因序列如下GCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA其编码的氨基酸序列如下MQWNSTTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVPTTASPISSIFSRTGDPAP画ESTTSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICPGYRWMCLRRFnFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLLPGTSTTSTGPCKTCTIPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFARFLWEWASVRFSWLSLLVPFVQWFAGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYNILSPFLPLLPIFFCLWVYI 。
全文摘要
本发明涉及一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫苗。本发明经分析乙型肝炎表面抗原(HBs)基因序列(adr亚型)，找出其密码子使用偏好与哺乳动物密码子使用偏好不同的密码子位点，对HBs基因序列的密码子进行替换，得到表面抗原基因，再将该基因序列合成，经扩增得到经密码子优化的MHBs，Pst I、BamH I，双酶切MHBs基因和载体pSW3891质粒，配制10ul的连接体系，得到中蛋白基因。本发明解决了原核生物与真核生物在密码子使用偏好上存在差异，导致外源基因在哺乳动物宿主体内不能有效表达，不能产生较好免疫保护作用的缺陷。本发明显著提高了外源基因在哺乳动物宿主体内的蛋白表达量，有效的刺激了宿主的免疫系统，使之产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应。
文档编号A61K39/29GK101502650SQ20091002582
公开日2009年8月12日 申请日期2009年3月10日 优先权日2009年3月10日
发明者山 卢, 王世霞, 邢益平, 黄祖瑚 申请人:邢益平;王世霞