专利名称：一种乌苯美司脂肪乳注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种乌苯美司脂肪乳注射液及其制备方法，属于医药生物技术领域。
背景技术：
目前，征服癌症的有效措施有手术、放疗、化疗等，但都有其局限性，如放疗和化疗普 遍存在杀伤健康红白细胞、肝肾中毒、神经系统受损等毒副作用。因此开发有效的抗癌药物 成为世界各国医药界长期以来重点研究攻关的课题。在癌症的第四种治疗模式-生物疗法受到 关注时，乌苯美司原料药及胶囊(商品名百士欣)，在该领域取得了重大突破，作为生物反应 调节剂，乌苯美司具有疗效确切、作用机制清楚、毒性极低、用药方便的特点。
乌苯美司是从链霉菌属的培养液中分离所得的化合物，可竞争性地抑制氨肽酶 B(aminopeptidase B)及亮氨酸肽酶(leucineaminopeptidase)，增强T细胞的功能，使NK细胞的 杀伤活力增强，且可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓细胞的再生及分化。乌苯美司具有 增强免疫的功能，是临床上唯一的CD13拮抗剂，可全面阻击多种肿瘤细胞的发生和发展， 从而抑制肿瘤转移和复发，抑制肿瘤新生血管形成及肿瘤细胞增生，促进肿瘤细胞凋亡，可 配合化疗、放疗及联合应用于白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移 植后，以及其它实体瘤患者；以及肺癌、胃癌、鼻咽癌、肝癌、食道癌、肠癌、乳腺癌、黑 色素细胞瘤、膀胱癌、阴茎癌等其它实体瘤患者，各种因素引起的免疫功能低下，且能有效 改善患者的生活质量。
然而对患肿瘤的病人进行化疗和放疗时，通常会引起消化系统不良反应是恶性肿瘤化疗 时最常见的不良反应，主要表现为食欲减退、恶心、呕吐、黏膜炎、腹痛和腹泻等，这些不 良反应直接影响患者的生活质量，妨碍化疗的顺利实施和药物剂量的提高，严重时还会危及 生命。用一些抗肿瘤药物进行配合治疗时，化疗造成的恶心呕吐现象直接影响抗肿瘤药物的 口服给药效率，病人的顺应性也很差。因此抗肿瘤药物注射给药很有必要，可提高病人的顺 应性。
目前上市的乌苯美司产品仅有其胶囊剂(百士欣)，作为一种口服制剂，存在一定的局限
性，因为(1)药物经口吞服后，须经过胃肠道内溶化、崩解、溶出，吸收，然后随血液循
环分布到全身，最后作用于病患部位而发挥治疗作用，然而乌苯美司的水溶性很差，对于难 溶性的药物，药物的溶出速度很慢，吸收过程往往受到限制，虽然乌苯美司口服吸收良好， 但是化疗时引起的消化系统不良反应增加了口服给药的难度，恶心呕吐现象使病人不愿直接口服药物。(2)药物易受食物影响，并需经过胃的排空进入小肠后才被吸收，发挥作用较慢， 而消化道内存在各种消化酶和肠道菌丛产生的酶，可使药物尚未被吸收就发生代谢失去活性。 (3)乌苯美司还有一些胃肠道不良反应。
由上可知，开发乌苯美司及其合适的注射剂剂型是市场所需，将乌苯美司口服给药改为
注射给药其优点有(1)作为注射剂，其药效迅速，到临床应用时将液体状态直接注射入人
体的组织、血管或器官内，吸收快，作用迅速。(2)注射给药不经胃肠道，故不受消化系统 及食物的影响，不经过吸收直接入血，生物利用度高，作用可靠，药效也易于控制。(3)对 于不能吞咽或处于昏迷状态的病人，及患消化系统障碍的患者不能口服给药，采用注射剂则 是有效的给药途径。
但是，乌苯美司本身水溶性很差，不易制成一般的注射剂，传统的难溶性抗肿瘤药物注 射剂方法通常采用复合溶媒、增溶剂等，但这会增加处方的刺激性或毒性。如目前常用的抗 肿瘤药物紫杉醇适用于转移性卵巢癌和乳腺癌，对肺癌也有较好的疗效，但由于其几乎不溶 于水(O. 006 pg/ml)，故现用于临床的紫杉醇制剂多为采用聚氧乙基蓖麻油+乙醇各50%制成 的注射剂，该处方给药数分钟后，部分病人会出现药物性皮疹、呼吸急促、支气管痉挛、低 血压等过敏反应，这主要是因处方中聚氧乙基蓖麻油和乙醇引起体内组胺释放所致。多西紫 杉醇水溶性也比较差,目前临床上应用的唯一剂型是由40 mg/mL多西紫杉醇和1040 mg/mL Tween80组成的注射剂，临用前用含乙醇为13%的专用溶剂复溶。由于Tween 80在体内会产 生严重的变态反应，临床上需预先服用抗组胺剂和糖皮质激素，加之Tween 80会干扰DTX 与血清白蛋白以浓度依赖的形式结合，改变药物的体内行为，使其呈非线性药物动力学。这 些给患者和医生都造成了诸多的不便，增加了患者的痛苦和医疗成本。
发明内容
针对现有技术中难溶性抗肿瘤药物注射制剂中增溶剂所带来的毒副作用，本发明提供了 一种乌苯美司脂肪乳注射液，其不含吐温-80和乙醇等增溶剂，无毒副作用，大大提高了其临
床应用价值。
本发明是通过以下技术方案实现的
一种乌苯美司脂肪乳注射液，包括以下组分乌苯美司、注射用油、乳化剂、稳定剂、 等渗调节剂和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司0.05 10mg/ml，注射用油5 30g/ml， 乳化剂0.8 3.0g/ml，稳定剂0.1 2.0g/ml，等渗调节剂2 3g/ml。
所述脂肪酸注射液还包括pH调节剂，其用于调节pH至5.0~9.0,其浓度不宜大于O.l g/ml。所述注射用油为长链甘油三酯或中链甘油三酯或两者任意比例的混合物。
所述长链甘油三酯为大豆油、花生油、麻油、红花油、棉子油、玉米油、藏红花油、蓖 麻油、向日葵油、茶油或椰子油中的一种或任何两种或两种以后任意比例的混合物。
所述乳化剂为大豆磷脂、卵磷脂、合成磷脂、泊洛沙姆、甘油单油酸酯、普朗尼克F68 或聚氧乙烯蓖麻油中的一种或任几种的混合物。
所述稳定剂为油酸、油酸钠、胆酸、胆酸钠、甘胆酸钠或胆固醇中的一种或任几种的混 合物。
所述等渗调节剂为甘油、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化钠中的一 种或任几种的混合物。
所述pH调节剂为盐酸、柠檬酸、氢氧化钠、磷酸盐或碳酸盐中的一种。 一种乌苯美司脂肪乳注射液的制备方法，包括以下步骤-
1) 将注射用油和稳定剂混合，搅拌均匀，制成油相；
2) 将乳化剂和等渗调节剂混合，加入适量水(以20倍体积为宜)，搅拌均匀，制成水相；
3) 将油相在搅拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；
4) 将乌苯美司加入到分散有乳化剂的水中，其中，乳化剂的体积分数为0.3% 0.8%, 高速剪切，得药物混悬液；
5) 将药物混悬液加入到初乳中，高速剪切，得载药初乳，测pH，若pH〈5.0或pH〉9.0， 则用pH调节剂调pH至5.0 9.0;
6) 将上述载药初乳移入高压乳匀机，匀化；
7) 过滤，灌装于安瓿中，通氮，熔封，高压灭菌，即得乌苯美司脂肪乳注射液。 所述高速剪切采用组织捣碎机进行。 所述采用高压匀质机进行高压乳匀的次数为5 30次。 所述高压灭菌为蒸气消毒，温度为100 12rC，时间为10 30min。 本发明将乌苯美司制成油与水能均匀混合的脂肪乳剂，经检测其质量外观均一，平均粒
径在300nm左右，pH5.0 9.0,可供注射使用，制备方法简单，所制得的乌苯美司脂肪乳注 射液具有显著的抗肿瘤作用，根据一般脂肪乳剂特点，本发明的抗肿瘤药物乌苯美司脂肪乳 剂还具有缓释、靶向、为机体提供能量等作用。
本发明提供的注射用乌苯美司脂肪乳剂载药量大，无毒副作用，其具有良好的稳定性和 水溶性，克服了由于乌苯美司水溶性低的缺点。该乳剂制备工艺方法简单易行，可适用于大 量制备和工业化生产。本发明的静脉注射用脂肪乳剂是以长链甘油三酸酯或中链甘油三酸酯为油相，精制天然
卵磷脂为乳化剂，甘油为等渗剂，经高压均质制成的o/w型乳剂。长期以来，脂肪乳剂主要
作为一种浓縮高能量肠外营养液用于临床，为不能进食和严重缺乏营养的患者(如肿瘤患者) 提供热能和必需脂肪酸，能完全被机体代谢与利用。大部分肿瘤患者在应用药物同时需补充 营养，脂肪乳可为患者提供所需能量，因此将乌苯美司制成注射用脂肪乳在治疗癌症的同时 为患者提供一定的营养成分。
乌苯美司本身水溶性很差，不易制成一般的注射剂。在静脉注射剂中改善药物溶解问题
的方法主要有混合溶剂法、形成胶束与脂质体、环糊精包合物和OAV型乳剂等，前3种方法 的主要缺点有溶剂毒性、辅料本身引发的不良反应(如环糊精引发脾肿大和共济失调)及高 昂的造价。0/W乳剂作为静脉注射药物载体具有增加药物溶解度、降低不良反应、造价低、 可经高压灭菌和长期稳定性较高等优点。由于乌苯美司在长链甘油三酸酯或中链甘油三酸酯 中的溶解度很低，因此将乌苯美司开成发脂肪乳注射剂，可大大提高其临床应用价值。
制备时将药物加到一定量分散有大豆磷脂的水中，用组织捣碎机高速剪切之后，然后与 空白脂肪乳混合，然后在高压匀质的作用力下，使药物从溶液中进入乳剂磷脂层，从而得到 载药脂肪乳。该技术是一种借助高压均质技术、无需有机溶剂就能大幅增溶药物的技术，基 本原理在于通过高速均质作用加速药物从溶液中进入乳剂磷脂层的分配过程，而使药物增溶。
本发明的乌苯美司静脉注射用脂肪乳剂不含有机溶剂，对血管剌激性较小；外水相中药 物较少，从而减轻了刺激性反应，以及溶血、过敏副反应，增强患者的顺应性；并具有靶向 作用，提高了药效。此外，乌苯美司静脉注射用脂肪乳性质稳定，可耐高压灭菌操作。同时， 还具有以下优势①已具备扩大生产的条件和技术，更易实现产品化；②有长期临床实践经 验，易为临床所接受；③稳定性大大改进，无需苛刻的贮运条件，使用方便。
图1为脂肪乳透射电镜照片。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限在这些实施例中。
实施例l 一种乌苯美司脂肪乳剂，其组成为-
乌苯美司 100 mg
注射用大豆油 10 g
中链油 10 g
油酸 l.Og大豆磷脂 1.2 g
甘油 2.2 g
注射用水加至 100 ml 上述脂肪乳剂的制备方法如下
1) 将注射用大豆油和中链油和稳定剂油酸混合，搅拌均匀，制成油相；
2) 将乳化剂大豆磷脂和等渗调节剂甘油混合，加适量水，搅拌均匀，制成水相；
3) 将油相在搅拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；
4) 将乌苯美司加到分散有乳化剂的水中，高速剪切，得药物混悬液；
5) 将药物混悬液加入到初乳中，高速剪切，得载药初乳，观ijpH，若pH".0或pH〉9.0， 则用氢氧化钠调pH至5.0 9.0;加水至100ml;
6) 将上述载药初乳移入高压乳匀机，100 mpa乳匀20次；
7) 以0.45 pm微孔滤膜过滤，灌装于安瓿中，通氮，熔封，高压灭菌(12rC条件下灭 菌20min)，即得乌苯美司脂肪乳注射液，脂肪乳粒径为240.0 nm。
实施例2—种乌苯美司脂肪乳剂，其组成为
乌苯美司 300 mg
注射用大豆油 10 g
中链油 10 g
油酸 l.Og
大豆磷脂' 1.2 g
甘油 2.2 g
注射用水加至 100 ml
制备方法同实施例l，高压乳匀次数20次，得到的脂肪乳粒径为228.4 nm。
实施例3 —种乌苯美司脂肪乳剂，其组成同实施例1,制备方法同实施例1,但pH调 节剂为碳酸氢钠，且高压乳匀次数为5次，得到的脂肪乳粒径为285.6nm，如图1所示。
实施例4 一种乌苯美司脂肪乳剂，其组成同实施例3，制备方法同实施例l，但高压 乳匀次数为5次，得到的脂肪乳粒径为280.0 nm。
实施例5 —种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，花生油，卵磷脂，胆 酸，丙二醇和水；其中，各组分的浓度为乌苯美司0.05mg/ml，花生油20g/ml，卵磷脂0.8g/ml, 胆酸0.7g/ml，丙二醇2g/ml。
制备方法同实施例1 ，制得的脂肪乳粒径为297.0 nm。实施例6 —种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，麻油，泊洛沙姆，胆
固醇，聚乙二醇和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司lmg/ml，麻油30g/ml，泊洛沙姆 3.0g/ml，胆固醇1.5g/ml，聚乙二醇3g/ml。
制备方法同实施例1，制得的脂肪乳粒径为340.0 nm。
实施例7—种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，红花油，甘油单油酸 酯，油酸钠，山梨醇和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司3mg/ml，红花油5g/ml，甘油 单油酸酯1.0g/ml，油酸钠1.0g/ml，山梨醇2.5g/ml。
制备方法同实施例1,制得的脂肪乳粒径为313.3 nm。
实施例8 —种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，棉子油，普朗尼克F68， 胆酸钠，木糖醇和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司5mg/ml，棉子油15g/ml，普朗尼克 F68 2.0g/ml，胆酸钠0.5g/ml，木糖醇2.3g/ml。
制备方法同实施例1，制得的脂肪乳粒径为293.4 nm。
实施例9一种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，玉米油，聚氧乙烯蓖 麻油，甘胆酸钠，葡萄糖和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司7mg/ml，玉米油10g/ml， 聚氧乙烯蓖麻油1.5g/ml，甘胆酸钠2.0g/ml，葡萄糖2.8g/ml。
制备方法同实施例1 ，制得的脂肪乳粒径为268.2 nm。
实施例IO —种乌苯美司脂肪乳剂，由以下组分组成乌苯美司，向日葵油，卵磷脂， 胆固醇，氯化钠和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司10mg/ml，向日葵油25g/ml，卵磷 月旨2.5g/ml，胆固醇0.1g/ml，氯化钠3g/ml。
制备方法同实施例1，制得的脂肪乳粒径为389.9nm。
将制备的脂肪乳剂置具塞离心管中，4000卬m离心20min后，未见分层，也未见药物结 晶析出。将制备的脂肪乳剂置安瓿中于121'C高压灭菌前后，药物成分未见降解。结论本 发明的乌苯美司脂肪乳剂较稳定。
权利要求
1.一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于，包括以下组分乌苯美司，注射用油，乳化剂，稳定剂，等渗调节剂和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司0.05～10mg/ml，注射用油5～30g/ml，乳化剂0.8～3.0g/ml，稳定剂0.1～2.0g/ml，等渗调节剂2～3g/ml。
2. 根据权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于还包括pH调节剂，其 用于调节pH至5.0 9.0。
3. 根据权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述注射用油为长链甘 油三酯或中链甘油三酯或两者任意比例的混合物。
4. 根据权利要求3所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述长链甘油三酯为大豆油、花生油、麻油、红花油、棉子油、玉米油、藏红花油、蓖麻油、向日葵油、茶油或 椰子油中的一种或任何两种或两种以后任意比例的混合物。
5. 根据权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述乳化剂为大豆磷脂、 卵磷脂、合成磷脂、泊洛沙姆、甘油单油酸酯、普朗尼克F68、或聚氧乙烯蓖麻油中的一 种或任几种的混合物。
6. 根据权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述稳定剂为油酸、油酸钠、胆酸、胆酸钠、甘胆酸钠或胆固醇中的一种或任几种的混合物。
7. 根据权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述等渗调节剂为甘油、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化钠中的一种或任几种的混合物。
8. 根据权利要求2所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述pH调节剂为盐酸、柠檬酸、氢氧化钠、磷酸盐或碳酸盐中的一种。
9. 权利要求1所述的一种乌苯美司脂肪乳注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤-1) 将注射用油和稳定剂混合，搅拌均匀，制成油相；2) 将乳化剂和等渗调节剂混合，加水，搅拌均匀，制成水相；3) 将油相在搅拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；4) 将乌苯美司加到分散有乳化剂的水中，高速剪切，得药物混悬液；5) 将药物混悬液加入到初乳中，高速剪切，得载药初乳，测pH，若pH〈5.0或pH〉9.0， 则用pH调节剂调pH至S.0 9.0;6) 将上述载药初乳移入高压乳匀机，匀化；7) 过滤，灌装于安瓿中，通氮，熔封，高压灭菌，即得乌苯美司脂肪乳注射液。
10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于:.所述步骤4)中，分散有乳化剂的水中乳 化剂的体积分数为0.3% 0.8%。
全文摘要
本发明公开了一种乌苯美司脂肪乳注射液，包括以下组分乌苯美司、注射用油、乳化剂、稳定剂、等渗调节剂和水，其中，各组分的浓度为乌苯美司0.05～10g/ml，注射用油5～30g/ml，乳化剂0.8～3.0g/ml，稳定剂0.1～2.0g/ml，等渗调节剂2～3g/ml。本发明的脂肪乳剂，经检测其质量外观均一，平均粒径在300nm左右，pH5.0～9.0，可供注射使用。乌苯美司脂肪乳注射液具有显著的抗肿瘤作用，根据一般脂肪乳剂特点，本发明的抗肿瘤药物乌苯美司脂肪乳剂还具有缓释、靶向、为机体提供能量等作用。
文档编号A61K9/107GK101601649SQ20091001730
公开日2009年12月16日 申请日期2009年7月20日 优先权日2009年7月20日
发明者刘东华, 孙晓利, 娜 张, 徐文方 申请人:山东大学