专利名称：制备天竺葵提取物的储存稳定性溶液的方法
技术领域：
本发明涉及一种制备天竺葵提取物的储存稳定性溶液的方法，其特征在于用于储存 天竺葵提取物溶液的包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份溶液最多 0.025体积份(优选0.015体积份，尤其优选0.005体积份)，其中在25'C和60%的相对 湿度下储存9个月后，前花青素和2H-l-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多10重量％(优 选最多7重量％，尤其优选最多5重量％，特别是最多3重量％)，所述氧气量是通过以 下方式降低a)用惰性气体进气，和/或b)减小顶部空间的体积，和/或c)加入除氧 剂，所述除氧剂由一种或一种以上物质组成并且具有完全不与液体制剂反应或仅在可忽 略程度上与液体制剂反应的性质。
背景技术：
本发明方法中所用的天竺葵提取物溶液一方面可为提取物制备中直接获得的液体 提取物，或为干燥提取物或浓縮提取物于医药学上可接受的溶剂(尤其是水以及醇和多 元醇(例如甘油和乙醇)水溶液，和其混合物)中的溶液。
可通过本身已知的方法制备液体天竺葵提取物，其也可呈天竺葵提取物溶液形式使 用。 一般来说，任何含有前花青素和2H-l-苯并吡喃-2-酮的液体提取物都可用在本发明 的方法中。在本发明方法中呈液体提取物形式使用的天竺葵提取物溶液例如可通过以下 方法获得首先以常规方式，例如在l(TC到IO(TC的温度下，在选自包含水、醇水溶液、 多元醇水溶液和其混合物的群组的溶剂中，对狭花天竺葵(i^/『gom'wm 和/ 或肾叶天竺葵(Pe/wgo"/ww ^my^me)的经干燥并经粉碎的根进行提取。必要时榨出 药物残余物并且任选地使粗提取物进行过滤。
根据EP 1 429 795，优选用以下方法制备液体天竺葵提取物先任选地用含水乙醇 溶剂捣碎，之后用含水乙醇溶剂渗透。
其它合适的液体天竺葵提取物还描述于DE 10 2004 063910的专利说明书中，例如 尤其在第
段以及实例3和4中。后两个文献内容中就液体天竺葵提取物的制备而
4言都以引用的方式明确包括在本文中。提取物溶液可直接获自制备过程或通过溶解合适 的干燥提取物而获得。
从原产于南非的天竺葵物种狭花天竺葵和/或肾叶天竺葵所获得的制剂在此地区中 传统上用于治疗性处理呼吸病症和胃肠症状。
来自天竺葵物种、尤其狭花天竺葵和/或肾叶天竺葵的提取物可用于药物或食品中并 且一般以固体或液体剂型口服投予。这些提取物的基本组分是前花青素和经取代2H-1-苯并吡喃-2-酮(香豆素)。
然而，天竺葵提取物溶液(例如呈溶液形式的含有这些狭花天竺葵和/或肾叶天竺葵 提取物的液体草本剂型)具有储存稳定性不足的缺点。已发现前花青素和2H-l-苯并吡 喃-2-酮的含量在储存后减少。
发明内容
因此，本发明的目的在于提供天竺葵提取物的储存稳定性溶液。在所述溶液中，前 花青素的含量和2H-l-苯并吡喃-2-酮的含量在规定条件下储存期间各减少最多不应超过 10%。具体来说，在25'C的温度和60°/。的相对湿度下储存9个月后含量减少不应超过10 重量％，优选不超过7重量％，尤其优选不超过5重量％，且特别是不超过3重量％。
本发明通过一种制备天竺葵提取物溶液的方法来达到此目的，所述方法的特征在于 用于储存天竺葵提取物溶液的包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份溶 液最多0.025体积份，其中在25'C和60%的相对湿度下储存9个月后，前花青素和2H-1-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多10重量％，其中所述氧气量是通过以下方式降低a) 用惰性气体进气，和/或b)减小顶部空间的体积，和/或c)加入除氧剂，所述除氧剂由 一种或一种以上物质组成并且具有完全不与液体制剂反应或仅在可忽略程度上与液体 制剂反应的性质。
前花青素是由黄烷-3-醇单元构成的单体、寡聚和多聚黄酮衍生物，优选没食子儿茶 酚(gallocatechol)、表没食子儿茶酚(epigallocatechol)、儿茶酚(catechol)和表儿茶酚 (epicatechol)，并且通常由基团测定法测定，例如根据福林-西奥卡特法(Folin-Ciocalteu)
由光度测定法测定。
天竺葵物种中所含的2H-l-苯并吡喃-2-酮的稳定化所需的是在5位到8位中经羟基、 甲氧基和/或硫氧基双重到四重取代的2H-l-苯并吡喃-2-酮。通常利用UV检测借助于 HPLC进行定量，选择一种或一种以上例如6，8-双(硫氧基)-7-羟基-2H-l-苯并吡喃-2-酮 (化合物I)或7-羟基-5，6-二甲氧基-8-硫氧基-2H-l-苯并吡喃-2-酮(化合物II)的主要物质用于测定。
令人惊讶的是，已发现通过限制或降低用于储存的包装的顶部空间中的氧气体积可 获得所述天竺葵提取物的储存稳定性溶液。特别令人惊讶的是，即使在2H-l-苯并吡喃 -2-酮的情况下，所述稳定化也是成功的，因为认为这些2H-l-苯并吡喃-2-酮不易受氧气 影响。
碱性2H-l-苯并吡喃-2-酮结构在中性或弱酸性介质中通常高度稳定，因此上述经取 代2H-l-苯并吡喃-2-酮的不稳定性可预计最多是由硫酸酯基团的水解分离产生。因此， 应有可能通过相应调节pH值、而并非通过本发明的步骤使化合物I和II稳定化来防止 水解。因此，特别令人惊讶的是，借助于本发明的方法进行稳定化即使在2H-l-苯并吡 喃-2-酮的情况下也是成功的。
本发明用于降低氧气含量的方法包含选择具有适宜小顶部空间的包装；和/或通过 用惰性气体进气来替换氧气；和/或通过除氧剂(氧气清除剂)从包装顶部空间排出氧气。 所述清除剂可由一种或一种以上物质组成并且具有完全不与天竺葵提取物溶液的组分 反应或仅在可忽略程度上与天竺葵提取物溶液的组分反应的性质。
根据本发明，包装顶部空间体积和/或用惰性气体进气的条件应如此选择以致在大气 压力下顶部空间中的氧气体积达到每体积份的天竺葵物种溶液不超过0.025体积份(优 选0.015体积份，尤其优选0.005体积份)的氧气。尤其合适的惰性气体是氮气、二氧 化碳或稀有气体(例如氩气)，以及混合物形式。
除氧剂(氧气清除剂)含有一种或一种以上物质，其单独或彼此组合能够通过吸附 和/或吸收和/或化学反应去除包装顶部空间中截留的氧气。本发明中氧气清除剂的组成 应如此选择以致包装顶部空间中的氧气含量降到每体积份的天竺葵提取物溶液不超过 0.025体积份(优选0.015体积份，尤其优选0.005体积份)的氧气。
举例来说，以下物质是合适的氧气清除剂组分抗坏血酸；抗坏血酸盐，例如抗坏 血酸钠、抗坏血酸钾或抗坏血酸钙；抗坏血酸与例如棕榈酸或硬脂酸的脂肪酸形成的酯； 呈低氧化态的金属或金属盐，例如铁、氧化铁(11)、氢氧化铁(II)或氯化铁(II);或 适于氧化的聚合物，例如MXD6 (间二甲苯二胺与己二酸的縮合聚合物)。
根据文献可知合适的氧气清除剂的众多可能的实施例。
举例来说，JP 301 44 81揭示一种透氧袋，其含有铁以及任选地具有低湿气渗透性
的其它物质，所述透氧袋可用于消除填充有液体的包装中的氧气。
根据JP 2003 081 353已知具有多层结构的粘合，其包括吸氧层，所述粘合片可附着
到打算用于储存易受氧气影响的产品的包装构件内部。举例来说，具有吸氧插入物的螺旋盖描述于EP 1 742 850中。
另一个可能的实施例是多层塑料容器，其中氧气是由例如WO 2005 01 44 10中所揭 示的至少一种可氧化聚合物层结合。
前花青素(=全体酚)和2H-l-苯并吡喃-2-酮I和II的测定描述于下 根据福林-西奧卡特法测定前花青素
类似地根据药典(DAB 2000)中所述的鞣制物质的方法在与钼酸盐钨酸盐试剂反应 之后通过光度测定法测定前花青素。就此来说，将提取物溶解于乙醇水溶液中，用碳酸 钠溶液碱化并且加入钼酸盐钨酸盐试剂。离心后，在720 nm下相对于水测量上清液溶 液的吸光度。对于表儿茶酚进行计算。
2H-l-苯并吡喃-2-酮I和II的测定
用RP 18柱借助于HPLC测定化合物I和II。使用乙腈/水/磷酸梯度(10 : 990 : 4 ■> 205:795:4)作为流动相。在330 nm的UV下进行检测。依据东莨菪素(scopoletine)
进行个别香豆素峰的计算。
使用标准方法测定包装顶部空间中的氧气量(用具有导热性检测的分子筛柱实施 GC)。
除非另外说明，否则前述描述和以下实例中的百分比都是以重量计。
无
具体实施例方式
实例
在实例1到4中使用以下乙醇-水性提取物
用两倍重量的乙醇(35重量％)浸软狭花天竺葵的地下根并在室温下储存20小时。 随后，使用8倍重量的乙醇(6重量％)将混合物渗透IO小时并且接着进行过滤。 实例1 (比较实例):
在正常大气条件(21%氧气)下将含有80重量％上述乙醇-水性狭花天竺葵提取物 和20重量％甘油的溶液填充到棕色玻璃瓶中。填充体积是20ml，瓶的顶部空间体积是 5ml。瓶上配备有滴剂分配器并用螺旋盖紧紧密封。顶部空间中的氧气含量是每体积份 溶液0.053体积份氧气。在25。C/60。/。相对湿度下储存9个月后，通过福林-西奥卡特法 测定出的溶液的前花青素含量和通过HPLC测定出的化合物I和II的含量均减少。物质以起始值计的含量
前花青素85.4%
化合物I89.0%
化合物II90.9%
实例2 (顶部空间体积的减小)
在正常大气条件(21%氧气)下将含有80重量％上述乙醇-水性狭花天竺葵提取物 和20重量％甘油的溶液填充到棕色玻璃瓶中。填充体积是23ml，瓶的顶部空间体积是 2ml。在正常大气条件下使瓶上配备有滴剂分配器并用螺旋盖紧紧密封。顶部空间中的 氧气含量是每体积份溶液0.018体积份氧气。在25°(:/60%相对湿度下储存9个月后，通 过福林-西奥卡特法测定出的溶液的前花青素含量和通过HPLC测定出的化合物I和II 的含量在不如实例l(比较实例)明显的程度上减少。
物质以起始值计的含量
前花青素94.0%
化合物I91.3%
化合物II94.5%
实例3(用氮气保护性进气)
在正常大气条件下将含有80重量％上述乙醇-水性狭花天竺葵提取物和20重量％甘 油的溶液倒入棕色玻璃瓶中。填充体积是20ml，瓶的顶部空间体积是5 ml。瓶上覆盖 有氮气层，配备有滴剂分配器并用螺旋盖紧紧密封。密封后所测量的顶部空间中的氧气 含量是7%。顶部空间中的氧气含量是每体积份溶液0.018体积份氧气。在25°。/60%相 对湿度下储存9个月后，通过福林-西奥卡特法测定出的溶液的前花青素含量和通过 HPLC测定出的化合物I和II的含量在不如实例1 (比较实例)明显的程度上减少。
物质以起始值计的含量
前花青素99.0%
化合物I93.5%
化合物II93.3%
实例4(在安瓿中填充氮气进气)
将含有80重量％上述乙醇-水性狭花天竺葵提取物和20重量％甘油的溶液填充到具 有氮气进气的安瓿中。填充体积是5ml。将安瓿熔封。安瓿的顶部空间体积是lml。密
8封后所测量的顶部空间中的氧气含量是1%。顶部空间中的氧气含量是每体积份溶液 0.002体积份氧气。在25°。/60%相对湿度下储存9个月后，通过福林-西奥卡特法测定出 的溶液的前花青素含量和通过HPLC测定出的化合物I和II的含量分别为与起始值相当 或几乎完全未减少。
物质以起始值计的含量
前花青素100.9%
化合物I97.5%
化合物II98.5%
在本发明实例2、 3和4中，在25°(:/60%湿度下储存9个月后，前花青素和化合物 I和II的含量各高于卯％ (顶部空间中的氧气含量为每体积份溶液小于0.025体积份氧 气)，因此满足所需稳定性要求。另一方面，比较实例(实例l，即顶部空间中每体积份 溶液大于0.025体积份氧气)中三种相应含量中的两种低于卯％，因此不满足所需稳定 性要求。
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权利要求
1.一种制备天竺葵提取物的储存稳定性溶液的方法，其特征在于用于储存所述天竺葵提取物溶液的包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份所述溶液最多0.025体积份，其中在25℃和60％的相对湿度下储存9个月后，前花青素和2H-1-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多10重量％，所述氧气量是通过以下方式降低a)用惰性气体进气，和/或b)减小所述顶部空间的体积，和/或c)加入除氧剂，所述除氧剂由一种或一种以上物质组成并且具有完全不与所述液体制剂反应或仅在可忽略程度上与所述液体制剂反应的性质。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述2H-l-苯并吡喃-2-酮选自6,8-双(硫氧基)-7-羟基-2H-l-苯并吡喃-2-酮(化合物I)和7-羟基-5,6-二甲氧基-8-硫氧基-2H-l-苯并吡喃-2-酮(化合物II)。
3. 根据权利要求1或2所述的方法，其中所述惰性气体选自由氮气、例如氩气的稀有气体和二氧化碳以及所述气体的混合物组成的群组。
4. 根据权利要求1到3中任一权利要求所述的方法，其中所述除氧剂含有一种或一种以上选自由抗坏血酸、抗坏血酸盐、抗坏血酸衍生物、呈低氧化态的金属或金属盐和可氧化聚合物组成的群组的物质。
5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述抗坏血酸盐选自包含抗坏血酸钠、抗坏血酸钾和抗坏血酸钙的群组。
6. 根据权利要求4所述的方法，其中所述抗坏血酸衍生物选自包含抗坏血酸与例如棕榈酸或硬脂酸的脂肪酸形成的酯的群组。
7. 根据权利要求4所述的方法，其中所述呈低氧化态的金属或金属盐选自包含铁、氧化铁(11)、氢氧化铁(II)和氯化铁(II)的群组。
8. 根据权利要求4所述的方法，其中所述可氧化聚合物是间二甲苯二胺与己二酸的縮合聚合物。
9. 根据权利要求1到8中任一权利要求所述的方法，其中所述天竺葵提取物是从狭花天竺葵(Pe/orgo"/ww wWo/tfey)和/或肾叶天竺葵(Pe/argom'W7W ^m/onwe)中取得。
10. 根据权利要求1到9中任一权利要求所述的方法，其中所述天竺葵提取物溶液是水溶液或于水和一种或一种以上醇和/或多元醇中的溶液。
11. 根据权利要求IO所述的方法，其中所述天竺葵提取物溶液是乙醇水溶液、于水和甘油的混合物或于水、甘油和乙醇的混合物中的溶液。
12. 根据权利要求1到11中任一权利要求所述的方法，其中用于储存所述天竺葵提取物溶液的所述包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份所述溶液最多0.015体积份。
13. 根据权利要求1到11中任一权利要求所述的方法，其中用于储存所述天竺葵提取物溶液的所述包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份所述溶液最多0.005体积份。
14. 根据权利要求1到13中任一权利要求所述的方法，其中在25'C和60%的相对湿度下储存9个月后，前花青素和2H-l-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多7重量％。
15. 根据权利要求1到13中任一权利要求所述的方法，其中在25'C和60%的相对湿度下储存9个月后，前花青素和2H-l-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多5重量％。
16. 根据权利要求1到13中任一权利要求所述的方法，其中在25'C和60%的相对湿度下储存9个月后，前花青素和2H-l-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多3重量％。
全文摘要
本发明涉及一种制备天竺葵提取物的储存稳定性溶液的方法，其特征在于用于储存天竺葵提取物溶液的包装的顶部空间中大气压力下的氧气量降到每体积份溶液最多0.025体积份(优选0.015体积份，尤其优选0.005体积份)，其中在25℃和60％的相对湿度下储存9个月后，前花青素(proanthocyanidine)和2H-1-苯并吡喃-2-酮的含量各减少最多10重量％(优选最多7重量％，尤其优选最多5重量％，特别是最多3重量％)。
文档编号A61K36/185GK101674851SQ200880012052
公开日2010年3月17日 申请日期2008年4月4日 优先权日2007年4月17日
发明者斯得凡·桔门, 荷尔曼·豪尔, 马克·斯瓯尔 申请人:威玛舒培博士公司