专利名称：一种治疗肝病的中药组合物及其制备方法和用途的利记博彩app
技术领域：
本发明属于中药领域，具体涉及一种治疗肝病的中药组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
乙型病毒性肝炎是威胁人类健康的一个重大疾病，全世界乙型肝炎病毒(HBV)感 染者约3. 5亿人，约75%分布在亚太地区，每年约100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝 硬化和原发性肝癌。中国大陆HBV感染率高达57. 63%，即全国至少有6亿人感染过HBV。 HBsAg阳性率9. 75%，约有1. 2亿人，占全球的1/3 ;其中约1/4将发展为慢性肝病，部分患 者可发展为肝硬化，甚至演变为肝癌。每年有23. 7万人死于乙型肝炎相关的疾病，其中有 15.6万人死于肝癌。加强病毒性肝炎的预防，研究慢性肝炎的有效治疗药物，是当前亟待解 决的重大问题。 目前对慢性乙型肝炎的治疗包括抗病毒治疗、免疫调节治疗、中医药治疗、"保 肝"药物对症治疗、基因治疗、心理治疗及基础治疗。 世界各国对采用化学药品治疗慢性乙肝作了大量的研究工作，但至今尚无特效药 问世，且由于化学药品具有毒副作用，以及新药的开发耗时长、耗资巨大，发展速度日渐缓 慢，特别是从分子学角度研究乙肝病毒更是困难。 在中医药治疗中，治疗慢性乙肝的单味中药多采用人参、党参、白术、鹿茸等调节 机体免疫功能，北山豆根、虎杖、丹参等可抗HBV达到改善患者症状、增强患者免疫力及加 强抑制HBV的作用。 近年来中成药治疗慢性乙肝的药物也很多，但难尽人意，常用的有云芝肝泰、乙肝 宁冲剂、慢性养阴胶囊、复方虫草珍珠胶囊、香菇多糖片、乙肝散、小柴胡片等。云芝肝泰是 最早用于治疗乙肝的中成药，经过临床应用，疗效欠佳；乙肝宁冲剂是目前对乙肝病毒有一 定疗效的中成药，远期转阴率还有待进一步观察；慢性养阴胶囊是一种以补肝肾健脾祛湿 治疗方法为主的中成药，但对乙肝病毒转阴率有待长期临床验证；香菇多糖片是真菌香菇 菌的提取物，主要成分是甘露醇多肽，具有增强细胞免疫和网状内皮系统功能，调节体液免 疫的作用，其服药时间需较长，疗效及转阴率、有效率和保肝降酶效果才较明显；乙肝散具 有清热解毒、健脾化湿、舒肝利胆、免疫调节的功能，临床显示降酶效果与齐墩果酸类似，对 抑制病毒复制有一定作用。 除了以上列举的中成药品种，还有古蔺肝苏颗粒、疏肝理脾片、速立特、龙胆泄肝 丸、甘草甜素片、乙肝扶正胶囊、乙肝解毒胶囊、逍遥冲剂等在临床上也有使用，但效果均存
在一定局限。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种治疗肝病的中药组合物。 本发明的另一个目的是提供一种制备本发明中药组合物的制备方法。
本发明的再一个目的是提供一种本发明中药组合物在制备用于治疗急性肝损伤 及慢性乙型肝炎的药物中的用途。 为了实现上述目的，本发明的一个技术方案提供了 一种治疗肝病的中药组合物， 其中该中药组合物是主要由按下列配比的下述中药材制成的人参2-4重量份、鹿茸2-4重 量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟丝子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、 蛇床子13-16重量份、吴茱萸9-12重量份、山柰0. 6-0. 9重量份。 中药材的配比优选为人参2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、 蛤阶1-2重量份、菟丝子17-18重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吴茱萸 10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重量份。 优选的是，本发明的中药组合物中所含人参以人参皂苷Rl^计，不少于0. 017重量份。 还优选的是，本发明的中药组合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷计，不少于0. 085重 量份。 本发明的中药组合物优选被制为栓剂。 本发明的另一个技术方案提供了一种制备本发明中药组合物的方法，该方法包括 以下步骤(1)将30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟丝子、15-19重量份的韭菜子、 13-16重量份的蛇床子、9-12重量份的吴茱萸加水煎煮并过滤；(2)将由步骤(1)得到的滤 液浓縮至清膏；(3)将2-4重量份的人参、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、0. 6_0. 9重
量份的山柰与清膏混合。 优选的是，在步骤(3)中，在混合之前，将人参、鹿茸、蛤蚧、山柰制成细粉。所述细 粉指的是全部通过80目筛，并含通过100目筛不少于95%的粉末。 还优选的是，在步骤(3)中，在混合之后，将所得混合物进行干燥并制成最细粉。 所述最细粉指的是全部通过100目筛，并含通过120目筛不少于95%的粉末。
本发明的制备方法优选还包括(4)将由步骤(3)得到的混合物与混合脂肪酸甘 油酯混合；(5)将由步骤(4)得到的混合物制成栓剂。 本发明的再一个技术方案提供了本发明中药组合物在制备用于治疗急性肝损伤 或慢性乙型肝炎的药物中的用途。 本发明的中药组合物具有温补脾肾、疏肝解郁的功效。本发明的中药组合物可用 于急性肝损伤及慢性乙型肝炎脾肾阳虚，肝气郁结证，症见食欲不振，食后腹胀，胁肋胀痛， 畏寒肢冷，腰膝酸软，倦怠乏力，尿清便溏，面色晦暗，舌淡胖苔白，脉沉细或沉迟。本发明的 中药组合物无明显不良反应，且疗效确切。 本发明还提供了一种治疗急性肝损伤或慢性乙型肝炎的方法，该方法包括给需要 治疗的患者施用有效剂量的本发明中药组合物。所述的患者包括人，也包括猫、狗等动物。 所述的有效剂量会随患者的疾病严重程度、体重、体质、年龄、患病历史等因素有所变化。但 是，医师或药剂师有能力为不同的患者确定出合适的施用量。
具体实施例方式
本发明的中药组合物主要由人参、鹿茸、淫羊藿、蛤蚧、菟丝子、韭菜子、蛇床子、吴 茱萸和山柰九味中药材组成，以人参和鹿茸为君药，以淫羊藿和蛤蚧为臣药，以菟丝子、韭菜子、蛇床子、吴茱萸和山柰为佐药。 本发明的中药组合物中的各中药材具有本领域内所使用的相应名称的一般含义。 各中药材的主要成分如下。 人参含皂苷、糖类、酶、氨基酸、蛋白质、多肽、有机酸、生物碱、挥发油等。其中人 参总皂苷为其主要有效成分，具有促进肝内核酸合成、提高机体免疫力、抗肿瘤、抗心律失 常、抗衰老和益智作用。 鹿茸主含磷脂类、酯类、多胺类、前列腺素类化学成分与氨基酸、胆固醇等。
淫羊藿主含黄酮类、木脂体类化学成分以及少量的挥发油、蜡醇、三十一烷、植物 甾醇、鞣质及油脂等。其中淫羊藿苷为其主要有效成分之一，具有促进性腺功能、抗病原微 生物、降血糖、抗炎与提高免疫力等作用。 蛤蚧主含胆固醇、胆固醇酯、甘油酯、糖脂、磷脂和脂肪酸，尚含多肽成分和肌酸 等活性成分。 菟丝子主含香豆精、甾萜、黄酮类化合物、糖树脂、淀粉、蛋白质、糖类、有机酸、脂 肪酸、蛋白酶等。
韭菜子主含生物碱与皂苷类成分。尚含丰富的氨基酸与大量的微量元素。
蛇床子主含挥发油、香豆素类成分。
吴茱萸主含生物碱、挥发油、柠檬苦素类等成分。
山柰主含挥发油、黄酮类成分。 本发明的中药组合物中，淫羊藿、菟丝子、韭菜子、蛇床子和吴茱萸五味中药材的 主要有效成分多为水溶性成分，宜水提；其余人参等四味中药材中有贵细药材，有处方量极 小的药材，有含非水溶性药效成分的药材，宜粉碎入药。 本发明的中药组合物可以被制成各种剂型，例如栓剂、颗粒剂、合剂、片剂、散剂、 蜜丸、胶囊、注射齐U、滴剂、贴剂等剂型。制备这些剂型的方法和所用的助剂是本领域的技术 人员已知的，例如，可参见《中药药剂学》(上海科学技术出版社，1986年11月出版)、《药用 辅料大全》(四川科学技术出版社，1995年1月出版)、《中国药典》2005年版一部(化学工 业出版社，2005年1月出版)等。本发明的中药组合物优选被制为栓剂。
对于本发明中药组合物的给药途径也没有过多的限制，例如可以通过口服、注射、 透皮、鼻腔给药、直肠给药等方式，优选直肠给药方式。 本发明的制备方法包括以下步骤(1)将30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的 菟丝子、15-19重量份的韭菜子，13-16重量份的蛇床子，9-12重量份的吴茱萸加水煎煮并 过滤；(2)将由步骤(1)得到的滤液浓縮至清膏；(3)将清膏与2-4重量份的人参、2-4重量 份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、和0. 6-0. 9重量份的山柰混合。本发明的制备方法还可以包 括(4)将由步骤(3)得到的混合物与混合脂肪酸甘油酯混合；(5)将由步骤(4)得到的混 合物制成栓剂。 在本发明方法的步骤(1)中，加水煎煮过程可进行1-3次，优选2次；每次可进行 2-3小时，例如第1次进行3小时，第2次进行2小时；另外，所加的水量可为步骤(1)中所 用药材的8-14倍(重量)，优选10倍；煎煮温度可为90°C -IO(TC。 在本发明方法的步骤(2)中，可将由步骤(1)得到的滤液在40-8(TC减压浓縮至清 膏，该清膏可为相对密度为1. 10-1. 15(50°C )的清膏。
5
在本发明方法的步骤(3)中，可在混合之前将人参、鹿茸、蛤蚧、和山柰制成细粉， 例如通过冷冻粉碎的方式制成细粉。在步骤(3)中，可在混合之后将所得混合物进行干燥， 例如在60-8(TC下减压干燥，优选在7(TC下减压干燥。在步骤(3)中，可将干燥后的混合物 粉碎，过IOO目筛，以制得细粉。 在本发明方法的步骤(4)中所用混合脂肪酸甘油酯是月桂酸、硬脂酸与甘油酯化 而成的脂肪酸甘油酯混合物。在本发明方法的步骤(4)中，混合脂肪酸甘油酯与由步骤(3) 得到的混合物的重量之比为20 : 2-20 : 18，优选为20 : 2-20 : 6，最优选为20 : 3。在 本发明方法的步骤(4)中，在混合之前混合脂肪酸甘油酯的温度可保持在45-85t:，优选保 持在55-65 °C。 在本发明方法的步骤(5)中，可将由步骤(4)得到的混合物灌入栓剂模中，冷却 (例如，在ot:冷却30分钟)后取出，脱模，以得到栓剂。 以下参照实施例和试验例来对本发明进行进一步说明，应该理解本发明不限于这 些例子。 实施例1 本实施例的中药组合物各组分用量为人参40g、鹿茸40g、淫羊藿450g、蛤蚧20g、 菟丝子250g、韭菜子250g、蛇床子200g、吴茱萸150g、山柰10g。 步骤取上述用量的淫羊藿、菟丝子、韭菜子、蛇床子、吴茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小时，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小时，合并煎液，滤过，滤 液浓縮至相对密度为1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷却；将人参、鹿茸、蛤蚧、山柰分别冷冻粉 碎成细粉(处方用量以细粉计)；将上述清膏和细粉混匀，干燥，粉碎成最细粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可购自湖南富日医药化工有限公司)，加热溶化，温度保持在6(TC ±5°C， 加入上述药物最细粉300g，搅匀，灌入栓剂模中，冷却后取出，制成1000粒，即得。规格为每 粒2. 3g(含药物细粉(即，最终的药物最细粉)0. 3g或相当于原生药材1. 41g)。
实施例1的成分检测
供试品溶液的制备 取实施例l所得药品5粒，置索氏提取器中，加三氯甲烷50ml，加热回流2小时， 弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水饱和正丁醇100ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨 试液洗涤3次，每次30ml，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶 液。
(1)人参有效成分的鉴别 取人参对照药材0. 2g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rbp人参皂苷Re、 人参皂苷Rgl对照品，加甲醇制成每lml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色 谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5iU，分别点于同一 硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40 : 22 : IO)I(TC以下放置的
下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清
晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相
应位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。 (2)淫羊藿有效成分的鉴别 取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，分别吸取上述两种溶液各2iU，分别点 于同一用0. lmol/L磷酸二氢钠制成的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯_三氯甲烷_甲酸_水
(io : i : i : i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，i05t:加热i5分钟，置紫
外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光 斑点。 (3)吴茱萸有效成分的鉴别 取吴茱萸对照药材O. 6g，同法制成对照药材溶液。再取吴茱萸次碱对照品，加甲醇 制成每lml含0. 2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附 录VI B)试验，吸取上述三种溶液各3ia，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯
甲烷-乙酸乙酯(5 : i : i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置
紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相
同颜色的荧光斑点。 (4)蛇床子有效成分的鉴别 取蛇床子对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取蛇床子素对照品，加甲醇制 成每lml含0. 2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录 VI B)试验，吸取上述三种溶液各3ia，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲 烷-乙酸乙酯(5:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(5)鹿茸有效成分的鉴别 取在供试品溶液的制备过程中得到的滤渣少许，以5%氢氧化钠溶液封片，置显微 镜下观察粉末黄棕色或红棕色，表皮角质层可见，凹凸不平。茸毛脱落后的毛窝呈圆洞状， 边缘较平整。骨碎片棕色或棕黄色，呈不规则碎块，骨陷窝较多，呈类圆形，横断面可见大的 圆形空洞，边缘凹凸不平。 (6)经检查，实施例1所得药品符合《中国药典》2005版一部附录I W栓剂项下有
关的各项规定。 (7)人参含量的测定 人参含量照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动 相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rl^ 峰计算应不低于8000。人参皂苷Rl^主峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
时间(分钟)流动相A(Q/iO流动相B(Q/iO
0 10 10 25 25 3510 10 — 25 2590 90 — 75 75
35 7025 — 3975 — 61 对照品溶液的制备取人参皂苷Rl^对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每lml含0. 4mg的溶液，摇匀，即得。 供试品溶液的制备取实施例1所得药品10粒，精密称定，加三氯甲烷100ml，超 声处理30分钟，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加甲醇100ml，加热回流90分钟，放冷，滤 过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，滤过，滤液通过DIOI型大孔吸附树脂柱(内径1. 5cm， 长18cm)，以水50ml洗脱，弃去水液；再用30%乙醇100ml洗脱，弃去30%乙醇洗脱液；继 用80%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加50%甲醇溶解并定量转移至10ml量瓶 中，加50 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得。 实施例1所得药品每粒含人参以人参皂苷Rt^ (C54H92023)计，不少于0. 25mg。
(8)淫羊藿含量的测定 淫羊藿含量照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈_水 (28 : 72)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于5000。淫 羊藿苷主峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。 对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每lml含 50iig的溶液，摇匀，即得。 供试品溶液的制备取实施例1所得药品10粒，精密称定，剪碎，取约2. 3g，精密 称定，加入三氯甲烷与水各50ml，于8(TC加热回流60分钟，放冷，溶液定量转移至分液漏斗 中，静置分层，分取水层，滤过，滤液蒸干，残渣加50 %甲醇溶解并定量转移至25ml量瓶中， 加50 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得。 实施例1所得药品每粒含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4。015)计，不少于1. 2mg。
实施例2 本实施例的中药组合物各组分用量为人参45g、鹿茸50g、淫羊藿470g、蛤蚧20g、 菟丝子230g、韭菜子240g、蛇床子190g、吴茱萸155g、山柰10g。 步骤取上述用量的淫羊藿、菟丝子、韭菜子、蛇床子、吴茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小时，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小时，合并煎液，滤过，滤 液浓縮至相对密度为1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷却；将人参、鹿茸、蛤蚧、山柰分别冷冻粉 碎成细粉(处方用量以细粉计)；将上述清膏和细粉混匀，干燥，粉碎成最细粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可购自湖南富日医药化工有限公司)，加热溶化，温度保持在6(TC ±5°C， 加入上述药物最细粉300g，搅匀，灌入栓剂模中，冷却后取出，制成1000粒，即得。规格为每 粒2. 3g(含药物细粉(即，最终的药物最细粉)0. 3g或相当于原生药材1. 41g)。
实施例3 本实施例的中药组合物各组分用量为人参35g、鹿茸38g、淫羊藿452g、蛤蚧22g、 菟丝子247g、韭菜子246g、蛇床子205g、吴茱萸153g、山柰12g。 步骤取上述用量的淫羊藿、菟丝子、韭菜子、蛇床子、吴茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小时，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷却；将人参、鹿茸、蛤蚧、山柰分别冷冻粉 碎成细粉(处方用量以细粉计)；将上述清膏和细粉混匀，干燥，粉碎成最细粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可购自湖南富日医药化工有限公司)，加热溶化，温度保持在60°C ±5°C， 加入上述药物最细粉300g，搅匀，灌入栓剂模中，冷却后取出，制成1000粒，即得。规格为每 粒2. 3g(含药物细粉(即，最终的药物最细粉)0. 3g或相当于原生药材1. 41g)。
以上实施例2、3按照实验例1中所述的方法进行试验，结论如下
实施例1实施例2实施例3
人参有效成分的鉴别检出检出检出
淫羊藿有效成分的鉴别检出检出检出
吴茱萸有效成分的鉴别检出检出检出
蛇床子有效成分的鉴别检出检出检出
鹿茸有效成分的鉴别检出检出检出
栓剂项下有关的各项规定符合规定符合规定符合规定
人参含量的测定0. 31mg/粒0. 33mg/粒0. 27mg/粒
淫羊藿含量的测定2. 0mg/粒2. 4mg/粒1. 5mg/粒 试验例1药效学试验 (1)实施例1所得药品对四氯化碳(CC14)所致大鼠急性肝损伤的影响 连续ig(灌胃)实施例l所得药品O. l、0.2、0.4g/kg.d 7d(天)，按体表等效量推 算，分别相当于临床使用剂量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，对CC14致大鼠急性肝损伤的ALT 和LDH两项指标，实施例1所得药品中、高剂量组与ig联苯双酯0. 05g/(kg. d) —样均有显 著(P < 0. 05)或非常显著(P < 0. 01)的抑制作用，此外实施例1所得药品高剂量组对TBA 亦有降低作用(P〈0.05)，对T-BIL有下降趋势。提示实施例1所得药品能有效减轻肝细 胞的损伤程度，对CC14急性肝损伤有一定保护作用。 (2)实施例1所得药品对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤的影响
连续ig实施例l所得药品O. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 10d，按体表等效量推算，分别相当 于临床使用剂量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，对BCG+LPS所致小鼠免疫性肝损伤的ALT、AST、 T-BIL、肝脾系数升高均有不同程度的抑制作用，且对10h动物存活率有不同程度的提高， 其中高剂量组存活率显著提高，15只小鼠中存活了 9只，而模型组15只小鼠仅存活2只，并 且这2只处于濒临死亡的边缘。病理切片结果显示高剂量组肝巨噬细胞大量增生动物数 较模型对照组明显减少，与阳性对照组相等；而巨噬细胞中等量增生动物数较阳性对照组
9明显减少，低剂量组巨噬细胞大量增生动物数亦显著低于模型对照组和阳性对照组，甚至 低于高剂量组。表明实施例l所得药品防止小鼠免疫性肝损伤的发生效果明显。在该模型 中还做了肛灌给药途经，发现肛灌O. 8g/(kg. d)给药组肝脾系数和肝功的各种指标与ig给 药组比较均无明显差异，提示ig与肛灌给药以免疫性肝损伤的疗效相近。
(3)实施例1所得药品对D-氨基半乳糖(D-GalN)致小鼠急性肝细胞损伤的影响
连续ig实施例1所得药品0. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 7d，按体表等效量推算，分别相当 于临床使用剂量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，对D-GalN所致小鼠急性肝细胞损伤所致的AST、 GGT、 LDH、 T-BIL、 TBA升高均有显著或非常显著的抑制作用(P < 0. 001)，高剂量对ALT的 升高亦有显著抑制作用(P〈0.001)，这些作用与联苯双酯的作用相似。中、小剂量也呈现 出对AKP升高亦有良好抑制作用，而联苯双酯没有对AKP的作用。用药组可见肝组织病变 范围较模型组小，病变程度显著较模型组轻，但较阳性对照组重。中剂量组病理观察与高剂 量组基本相似，表明实施例1所得药品对D-GalN所致肝细胞坏死有一定的保护作用。
(4)实施例1所得药品对异硫氰酸苯酯(APIT)致小鼠阻塞性黄疸型肝损伤的影响
连续肛灌0. 8g/ (kg. d)或ig实施例1所得药品0. 2、0. 4、0. 8g/ (kg. d) 7d，按体表 等效量推算，分别相当于临床使用剂量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，对APIT所致黄疸型肝损 伤小鼠的血清ALT、 AKP、 AST、 LDH、 TBA、 a-HDH均有不同程度抑制作用，且作用显著；联苯双 酯仅对TP、ALT、TBA、AKP有抑制作用，表明实施例1所得药品对APIT致动物的肝损伤的修 复范围更宽，作用更强。提示实施例l所得药品对黄疸型肝炎可能有良好的抑制作用。实 施例1所得药品对防止甲苯异氰酸酯致小鼠黄疸型肝损伤的发生有效，说明实施例1所得 药品具有抑制肝组织阻塞性黄疸的发生，及进一步阻止肝细胞损伤和坏死。
(5)实施例1所得药品对大鼠胆汁分泌量的影响 大鼠利胆试验表明，ig实施例1所得药品0. 1、0. 2、0. 4g/kg 1次后，按体表等效 量推算，分别相当于临床使用剂量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，4小时内，均有明显的促进胆 分泌作用，提示实施例1所得药品良好的利胆作用。
(6)实施例1所得药品对CC14所致大鼠慢性肝损伤的影响 连续ig不同剂量的实施例1所得药品0. 1、0. 2、0.4g/(kg. d)X63d后，按体表等 效量推算，分别相当于临床使用剂量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，实施例1所得药品各组在不 同期对CC14所致慢性肝损伤大鼠肝功能中的ALT、 AST、 GGT、 a-HDH及LDH有不同程度抑制 作用，对T-BIL和TBA亦有不同程度的抑制作用。 (7)实施例1所得药品对二硝基氯苯所致小鼠迟发型皮肤过敏反应和环磷酰胺致 小鼠免疫功能低下症的影响 连续ig不同剂量的实施例1所得药品0. 2、0. 4、0. 8g/(kg. d) 10-12d，按体表等效
量推算，分别相当于临床使用剂量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，对二硝基氯苯致小鼠的迟发
型过敏反应的光密度均有显著提高，提示实施例1所得药品有增强T细胞免疫功能作用，且
对CY所致小鼠免疫低下症有良好保护作用，各种剂量的保护系数均在有效范围内，提示实
施例1所得药品对动物的免疫功能有良好的影响。 (8)实施例1所得药品在2215细胞上对HBsAg、 HBeAg的作用 实施例1所得药品在2215细胞上对HBsAg、HBeAg的作用显示，对HBeAg治疗指数
TI = 8. 22，对HBsAg治疗指数TI = 1. 60。提示该药对HBeAg和HBsAg有一定的抑制作用。
(9)实施例1所得药品抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究 实施例1所得药品抗鸭乙型肝炎病毒作用的试验研究表明受试药物实施例1所 得药品小、中剂量组(0. 1， 0. 2g/kg/d) 28天疗程各时点血清DHBV-DNA变化差异不显著，但 大剂量组(0. 4g/kg/d)给药14， 21和28天均有抑制血清DHBV-DNA作用，其小、中、大剂量 分别相当于临床使用剂量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，与给药前比较，P值< 0. 05 ;给药中途 21天与对照组相同时间比较P值〈0. 05。大剂量组加拉米夫定(3TC) 20mg/kg/d可显著抑 制血清DHBV-DNA。表明实施例1所得药品中、小二个剂量组在鸭体内对DHBV-DNA抑制作用 不显著，但大剂量组有一定的抑制作用。 以上研究结果表明，实施例1所得药品对CC14、 D-CalN、 APIT、 BCG+PLPS所引起的
急性肝损伤有明显的保护作用；对CCl4所致大鼠慢性肝损伤有不同程度的抑制作用；ig或
肛塞后可迅速抑制转氨酶的升高；对肝损伤动物的免疫功能有明显的增强功能；且有一定
利胆作用；在2215细胞上对HBsAg和HBeAg有一定的抑制作用；大剂量(400mg/kg/d)在鸭
体内对DHBV-DNA有一定的抑制作用。提示实施例l所得药品用于治疗急性肝炎和慢性肝
炎均有一定的疗效。 试验例2—般药理学试验 24只毕格犬随机分为4组，每组6只，雌雄各半，分别直肠给予实施例1所得药品 30、 120、480mg/kg/d三个剂量(分别相当于临床使用剂量的3、 12、48倍，按体表面积计)和 空白栓剂阴性对照组1次，观察对其行为的影响；小鼠灌服实施例1所得药品原料粉200、 400、800mg/kg三个剂量(分别相当于临床使用剂量的4、8、16倍，按体表面积计)1次，进行 小鼠自主活动试验；小鼠灌服实施例1所得药品原料粉200、400、800mg/kg三个剂量(分别 相当于临床使用剂量的4、8、 16倍，按体表面积计)1次，进行小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量 试验；大鼠灌服实施例1所得药品原料粉100、200、400mg/kg三个剂量(分别相当于临床使 用剂量的4、8、16倍，按体表面积计)1次，进行转棒试验；麻醉犬直肠给予实施例1所得药 品30、120、480mg/kg三个剂量(分别相当于临床使用剂量的3、12、48倍，按体表面积计)1 次，观察测定收縮压、舒张压和平均压等血压指标，P波、R波、T波、P-R间期、QRS间期、QT 间期、S-T段等心电指标，呼吸频率和呼吸深度等呼吸指标。 结果显示，在本实验条件下，通过犬一般行为影响试验、小鼠自主活动试验、小鼠 阈下剂量催眠试验和大鼠转棒试验，表明实施例1所得药品对小鼠、大鼠和犬的神经系统 没有明显影响。通过对麻醉犬血压、心电、呼吸试验，表明直肠给予实施例1所得药品30、 120、480mg/kg三个剂量(分别相当于临床使用剂量的3、12、48倍，按体表面积计)1次，对 血压和呼吸没有明显影响，480mg/kg剂量给药90、 120分钟时QRS间期一过性延长，稍后恢 复，对其余心电指标未见明显影响。提示临床用药时要注意对心电的监控。
试验例3急性毒性试验
(1)家兔急性毒性试验 20只家兔随机分为2组，其中阴性对照组10只，给药组10只，雌雄各半，用最大耐 受量法进行单次给药毒性试验。试验结果显示，家兔直肠给予实施例1所得药品的最大耐 受量(MTD)大于5. 76g生药/kg，约为临床使用剂量的250倍。试验期间外观体征未见明显 异常，没有动物死亡，尸检没有发现明显病变。
(2)犬急性毒性试验
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6只毕格犬随机分为2组，其中阴性对照组3只，给药组3只，雌雄兼有，用最大给 药量法进行单次给药毒性试验。试验结果显示，犬直肠给予实施例l所得药品的最大耐受 量(MTD)大于2. 16g/kg，约为临床使用剂量的108倍。试验期间没有动物死亡，外观体征未 见明显异常，尸检没有发现明显病变。
试验例4长期毒性试验 32只毕格犬随机分为4组，每组8只，雌雄各半，分别直肠给予实施例1所得药品 60、240、960mg/kg/d三个剂量(分别相当于临床使用剂量的3、 12、48倍，按体表面积计)和 空白栓剂阴性对照组，连续九个月。分别于给药前(两次)、给药13周、给药20周、给药26 周、给药34周、给药39周及恢复6周做尿液分析检查、心电图检查以及血常规、血凝、生化 指标和电解质指标检查。在末次给药后24小时，每组处理犬4只，雌雄各半，作系统尸检，取 12个脏器称重计算脏器系数，30个脏器作病理学检查。剩余动物停药作恢复期观察6周， 然后处死作如上全部指标检测。 结果显示，在本实验条件下，犬连续39周直肠给予实施例l所得药品60、240、 960mg/kg/d三个剂量(分别相当于临床使用剂量的3、 12、48倍，按体表面积计)，对动物的 外观、一般行为、体重增长和体温均无明显影响。在20周时，三个剂量组动物均出现一过性 P-R间期延长，在以后的检测中未出现该现象；低剂量有一定的升红作用；尿液检查发现有 一定的肾功异常，表现为尿比重降低，尿ra值增高，但血生化检查却未见相关指标的异常。 以上毒副作用在停药6周后基本恢复，是可逆的。中毒的靶器官为肾脏和心脏，临床长期 用药时应注意对尿液和心电的检查。鉴于上述异常指标均是一过性的、无明显剂量关系的 或者没有相应佐证的，因此认为该药的三个剂量基本都是安全的，无毒副反应的安全剂量 《960mg/kg/d(相当于临床使用剂量的48倍，按体表面积计)。
试验例5剌激性试验 用家兔在GLP实验条件下，对实施例1所得药品进行直肠局部剌激试验。试验结 果显示在本实验条件下，家兔直肠给药，每日给药1次，连续七天，O. 3g/粒规格(相当于临 床使用剂量的5倍)对家兔直肠及肛周无明显剌激作用，而1.2g/粒规格(相当于临床使 用剂量的20倍)对家兔直肠及肛周有一定剌激作用，可引起直肠和肛管粘膜急慢性炎症反 应。 尽管结合优选例子对本发明进行了说明，但本发明并不局限于上述例子，应该理 解，在本发明构思的引导下，本领域技术人员可进行各种修改和改进，所附权利要求概括了 本发明的范围。
权利要求
一种治疗肝病的中药组合物，其中该中药组合物是主要由按下列配比的下述中药材制成的人参2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟丝子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吴茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。
2. 根据权利要求1所述的中药组合物，其中所述中药材的配比为人参2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、蛤阶1_2重量份、菟丝子17-18 重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吴茱萸10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重 量份。
3. 根据权利要求2所述的中药组合物，其中该中药组合物中所含人参以人参皂苷Rbl 计，不少于0.017重量份。
4. 根据权利要求2所述的中药组合物，其中该中药组合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷 计，不少于O. 085重量份。
5. 根据权利要求1-4中任一项所述的中药组合物，其中，该中药组合物被制为栓剂。
6. —种制备权利要求1所述的中药组合物的方法，该方法包括以下步骤(1) 将30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟丝子、15-19重量份的韭菜子、13-16 重量份的蛇床子、9-12重量份的吴茱萸加水煎煮并过滤；(2) 将由步骤(1)得到的滤液浓縮至清膏；(3) 将2-4重量份的人参、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤阶、0. 6-0. 9重量份的山 柰与所述清膏混合。
7. 根据权利要求6所述的方法，其中在步骤(3)中，在所述混合之前，将人参、鹿茸、蛤 蚧、山柰制成细粉。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中在步骤(3)中，在所述混合之后，将所得混合物进 行干燥并制成最细粉。
9. 根据权利要求6-8中任一项所述的方法，该方法还包括(4) 将由步骤(3)得到的混合物与混合脂肪酸甘油酯混合；(5) 将由步骤(4)得到的混合物制成栓剂。
10. 权利要求1-4中任一项所述的中药组合物在制备用于治疗急性肝损伤或慢性乙型 肝炎的药物中的用途。
全文摘要
本发明提供一种治疗肝病的中药组合物及其制备方法和用途。本发明的中药组合物是主要由按下列配比的下述中药材制成的人参2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟丝子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吴茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。本发明的中药组合物具有温补脾肾、疏肝解郁的功效。本发明的中药组合物可用于治疗急性肝损伤及慢性乙型肝炎等病症。
文档编号A61K35/56GK101721598SQ20081016734
公开日2010年6月9日 申请日期2008年10月22日 优先权日2008年10月22日
发明者陆擎天 申请人:维康力(国际)有限公司