专利名称：一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种乌头类水解单酯型生物碱的 制备方法。
背景技术：
毛茛科乌头属植物如草乌、川乌、附子，是中医临床常用药。研究表明， 这些屮药发挥药效作用的主要化学成分是其中的生物碱类成分，按化学结构可 将生物碱类成分分为双酯型、单酯型、胺醇型和脂型。其中的单酯型和胺醇型 为双酯型生物碱的一级和二级分解产物[1]。由于乌头属生药中的生物碱以双酯型 为主，而双酯型生物碱对心脏和神经系统有强烈的毒性，由于其有效剂量与中 毒剂量非常接近，稍有不慎，即造成中毒乃至致死事故[2'3]，给临床用药带来了 极大的不便，因此临床应用时主要采用上述中药的炮制品。对炮制品的化学成 分及药理作用研究表明炮制品中双酯型生物碱的含量远低于生品，而单酯型 生物碱的含量有所增加，并且毒性大大降低[4]。但如果双酯型生物碱的含量控制 不当，在临床上仍然会有中毒情况发生。如果可以得到仅含有单酯型生物碱的 提取物，并且将这种提取物应用于临床，即可以保证临床用药的安全性、有效 性。由于单酯类生物碱又分为水解型和热解型两种，并且药理研究表明，二者
的药效并不完全相同[5]，有必要建立仅含有单一类型单酯生物碱的提取方法。 (参考文献[l]马鸿雁，李楠，杨明.乌头碱水解实验和热力学研究.成都中医
药大学学报 [J],2005，28(3):57 59;[2]郭俊玲.乌头碱中毒致恶性心律失常.药物不良反应杂志[J],2003(6); [3]张宏.附子、川乌、草乌、草乌叶煎煮时间、剂量与药效的相关性研究 [D]，2005:14;楚春莲，王萍.生品、制品草乌毒性成分变化分析.Journal of Qiqihar College[J],2004，25(5):546;许庆轩.附子及乌头属植物中二萜类生物碱的电喷雾质谱研究 [D],2004:18。)
发明内容
本发明提供了一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法。其步骤和条件如
下
以乌头属中药为原料，加入原料药的20倍水浸泡，置于高压容器内，在压 力为0.05 0.17MP，温度为110 130。C，时间为10min 6h提取，将提取液浓縮， 调pH二9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有机溶剂层浓縮，干燥，得 到一种乌头类水解单酯型生物碱。
有益效果通过电喷雾质谱检测，用有机溶剂萃取后得到的水解型生物碱 较纯净，用滴定法测得含量可达50%以上并且无脂类生物碱干扰。此方法方便、 高效、易于操作，可用于新药开发。
图la是生草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。
图lb是生草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图。
图2a是制草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。
图2b是制草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图。
具体实施方式
实施例1
将生草乌35g，加水700ml，置于高压容器内，在11(TC、 0.05MP下煎煮3次， 每次2h,合并3次提取液，浓縮，调pH^9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到 的有机溶剂层浓縮干燥，即得较纯净的水解型单酯生物碱，用滴定法测得总碱含 量为57.98%。图la是生草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。可以看出生草乌中 含有的双酯型生物碱包括乌头碱(m/z646)、 3-去氧乌头碱(m/z630)，单酯型 生物碱为去乙酰乌头碱(m/z586)，脂型生物碱包括8-亚油酰-苯甲酰乌头原碱 (m/z866)， 8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱(m/z842)。图lb是生草乌经高压提取后 总生物碱的电喷雾质谱图，未检测到双酯型及脂型生物碱，而主要含有水解型 生物碱-苯甲酰乌头原碱(m/z604)和苯甲酰中乌头原碱(m/z590)。 实施例2
将制草乌35g，加水700ml，置于高压容器内，在115。C、 0.07MP下煎煮3 次，每次1.5h，合并3次提取液，浓縮，调pH:9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取， 得到的有机溶剂层浓縮干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱，用滴定法测得总 碱含量为74.42%。图2a是制草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图，含有的双酯型 生物碱包括乌头碱(m/z646)、 3-去氧乌头碱(m/z630);以及乌头碱的热解产物 -去乙酰乌头碱(m/z586);分子离子峰出现在m/z800 1000区域的为脂型生物 碱，其中包括8-亚油酰-苯甲酰乌头原碱(m/z866)、 8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱 (m/z842)。图2b是制草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图，主要为水 解型单酯型生物碱-苯甲酰乌头原碱(m/z604)、苯甲酰中乌头原碱(m/z5卯)、 苯甲酰次乌头原碱(m/z574)。实施例3
将生川乌35g，加水700ml，置于高压容器内，在12(TC、 0. 1MP下煎煮3次， 每次lh，合并3次提取液，浓縮，调pH:9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到 的有机溶剂层浓縮干燥，即得较纯净的水觯型单酯生物碱，用滴定法测得总碱含 量为76. 11%。 实施例4
将生附子35g，力卩700ml，置于高压容器内，在125'C、 0.14MP下煎煮3次， 每次40min，合并3次提取液，浓縮，调pl^9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得 到的有机溶剂层浓縮干燥，即得较纯净的水解型单酯生物碱，用滴定法测得总碱 含量为96.27%。 实施例5
将黑顺片30g，加水600ml，置于高压容器内，在120。C、 0.1MP下煎煮3次， 每次lh，合并3次提取液，浓縮，调pH-9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到的 有机溶剂层浓縮干燥，即得较纯净的水解型单酯生物碱，用滴定法测得总碱含量 为89.58%。
权利要求
1. 一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法，其步骤和条件如下以乌头属中药为原料，加入原料药的20倍水浸泡，置于高压容器内，在压力为0.05～0.17MP，温度为110～130℃，时间为10min～6h提取，将提取液浓缩，调pH＝9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有机溶剂层浓缩，干燥，得到一种乌头类水解单酯型生物碱。
全文摘要
本发明提供一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法。以乌头属中药为原料，加20倍水浸泡，置于高压容器内，提取压力为0.05～0.17MPa，在提取温度为110～130℃，提取时间为10min～6h的范围内进行提取，将提取液浓缩，调pH＝9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有机溶剂层浓缩，干燥，得到一种乌头类水解单酯型生物碱。通过电喷雾质谱检测，用有机溶剂萃取后得到的水解型生物碱较纯净，用滴定法测得含量可达50％以上并且无脂类生物碱干扰。此方法方便、高效、易于操作，可用于新药开发。
文档编号A61K36/185GK101423495SQ20081005160
公开日2009年5月6日 申请日期2008年12月16日 优先权日2008年12月16日
发明者刘志强, 刘淑莹, 宋凤瑞, 张语迟, 王淑敏, 杨 辛 申请人:中国科学院长春应用化学研究所