专利名称：：三七叶皀苷的抗抑郁医药用途的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及一种三七叶皀苷的抗抑郁医药用途；三七叶皀苷是从三七叶中用水或乙醇提取的成份，其中含苣苷等化学成份。主要是已知的人参苣苷Rh，Rb3，Rc和七叶胆苷K，以及三七皀苷Fa，Fc,Fe，槲皮素-3-0-槐糖苷。絲駄药物安拿芬尼是一种经典的三环类抗抑郁药，具有效果明显且起效快的特点；但是，三环类药物的缺陷在于副作用大；另一方面，对于双相抑郁症的患者，使用三环类药病情常会向狂躁转变，因此目前对抗双相抑郁的一线方案是抗抑郁药与心境稳定剂合用。
发明内容本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的不足，而提供一种三七叶自苷的抗抑郁医药用途；该三七叶皀苷的抗抑郁医药不但具有抗抑郁作用起效快、效果稳定、副作用小的特点，而且还具有抗癫抗惊厥的作用，并对自主活动有一定的抑制效果，对抗双相抑郁方面亦大有改善的优点。本发明的目的是这样实现的一种三七叶皀苷的抗抑郁医药用途，采用从三七叶中提取的总苣苷或单一成份或复合成份用于制备治疗抗抑郁的药物。上述成份的药效或临床作用为抗抑郁。上述药物可以是在处方中添加三七叶或三七叶皀苷用于抗抑郁。本发明的有益效果如下采用从三七叶中提取的总苣苷或单一成份或复合成份制成药剂，不但具有抗抑郁作用起效快、效果稳定、副作用小的特点，而且还具有抗癫抗惊厥的作用，并对自主活动有一定的抑制效果，对抗双相抑郁方面亦大有改善的优点。图1为三七叶总皂苷对小鼠悬尾实验动物不动时间的影响关系示意图；图2为不同浓度三七叶甙对小鼠强迫游泳实验结果的影响关系示意图；图3为三七叶总皂甙皂甙对小鼠自主活动性的影响关系示意图；图4为不同给药时长三七叶甙对小鼠强迫游泳实验结果的影响关系示意图。具体实施例方式一种三七叶皀苷的抗抑郁医药用途，采用从三七叶中提取的总旨苷或单一成份或复合成份用于制备治疗抗抑郁的药物。所述成份的药效或临床作用为抗抑郁。所述药物可以是在处方中添加三七叶或三七叶鬯苷用于抗抑郁。以下通过实验进一步证明三七叶苣苷的抗抑郁效果(一).小鼠悬尾实验1材料与方法1.1实验动物清洁级NH小鼠，早S各半，体重1824g，购自中山大学医学院实验动物中心。1.2仪器与药品BL-420E生物机能实验系统(成都泰盟电子有限公司)，张力传感器，自制小鼠悬尾架；三七叶总皂甙提取物(广州环球制药有限公司)，安拿芬尼(盐酸氯类帕明片，北京诺华制药有限公司)。1.3药液制备取三七叶总皂甙粉末溶于生理盐水，配成高、中、低(5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml)三种浓度的三七叶总皂甙溶液；取安拿芬尼片，研磨成粉末后溶于生理盐水，配成浓度为3mg/ml的溶液。1.4实验方法小鼠50只，雌雄各半分为五组，每组10只空白对照组(生理盐水)，三七叶总皂甙低浓度组(50mg/kg)，三七叶总皂甙中浓度组(100mg/kg)，三七叶总皂甙高浓度组(200mg/kg)，阳性药安拿芬尼组(30mg/kg)。灌胃给药7d,末次给药30min后进行悬尾测试。小鼠被倒挂一段时间后，会最终放弃挣扎，保持不动，该现象被视作行为绝望的表现。自制悬尾架为一等臂杠杆结构，一端为悬尾端，另一端与连有采集系统的张力传感器相接。将小鼠倒挂，距尾端约lcm处用绝缘胶固定于悬尾架的悬尾端，调节游码位置使两臂平衡。当小鼠挣扎时，采集系统可录得张力变化的曲线；反之，若小鼠静止，则曲线平直。测试前先令小鼠倒悬适应2min,记录随后4min内小鼠的挣扎情况。选取无爬尾现象的个体进行分析，在张力曲线上计算出小鼠处于不动状态的总时长，作为判断小鼠抑郁样行为的指标。1.5统计学方法实验结果使用软件Origen7.5和Excel12003进行统计作图，数据表示为"平均值士标准偏差"。配对t检验用于判断组间差异。2实验结果依据七叶神安片在正常人体发挥安神功能时的用量进行推算，小鼠的正常用量约为100mg/kg，实验还选用了与之相邻的两个浓度进行测量。剔除在悬尾6min内.出现爬尾的小鼠个体，本实验共得有效数据40个，三七叶皂甙及安拿芬尼给药对爬尾出现的概率无明显影响。以1秒为单位，计数张力曲线上最在张力不超过平均张力三分之一的秒数的总长，记为不动状态时长(表1)。空白组有效数据9个，不动时间在3560s的范围内。给于低浓度的三七叶总皂甙后，小鼠的不动状态时长无明显变化，在4560s范围内。增大三七叶皂甙的给药浓度，不动时间与空白组相比略有縮短，但差异不显著，仍在2060s范围内。与之相比，三环类药安拿芬尼的抗抑郁效果十分明显，使小鼠的不动时间下降到25s以内(图1)。结果证明，三七叶总皂甙在测试浓度下对小鼠悬尾实验中的抑郁样行为无明显改善作用。表i三七叶总皂苷对小鼠悬尾实验动物不动时间的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与空白组相比，"**"表示P〈0.01。见图1所示，为三七叶总皂苷对小鼠悬尾实验动物不动时间的影响关系示意图，其中，X轴表示各给药组及其用量，Y轴表示小鼠的不动时间(单位S);t检验结果表明，与空白组相比，仅阳性给药组小鼠有显著差异;"林"表示P〈0.01。(二).小鼠强迫游泳实验1材料与方法1.1实验动物清洁级昆明小鼠，雄性，体重2328g，购自中山大学医学院实验动物中心。1.2仪器与药品透明玻璃缸，秒表，温度计；三七叶总皂甙提取物(广州环球制药有限公司)，安拿芬尼(盐酸氯类帕明片，北京诺华制药有限公司)。1.3药液制备取三七叶总皂甙粉末溶于生理盐水，配成高、中、低(20mg/ml、50mg/ml、100mg/ml)三种浓度的三七叶总皂甙溶液；取安拿芬尼片，研磨成粉末后溶于生理盐水，配成浓度为3mg/ml的溶液。1.4实验方法小鼠50只，按体重均分成五组，每组10只空白对照组(生理盐水)，三七叶总皂甙低浓度组(200mg/kg)，三七叶总皂甙中浓度组(500mg/kg)，三七叶总皂甙高浓度组(1000rag/kg)，阳性药安拿芬尼组(30mg/kg)。灌胃给药7d,末次给药30min后取体重在24-30g之间的小鼠个体进行强迫游泳实验。当小鼠被置于圆柱形的盛水水缸中时，最初动物迅速游动，企图逃脱，当发现逃脱无望后，会最终放弃挣扎，并以一种不动状态飘浮在水面上，该现象被视作绝望的抑郁行为。取直径19cm高25cm的圆柱形透明玻璃缸，装水至10cm深，将单只小鼠置于缸中进行强迫游泳。测试前先令小鼠在小缸中适应2min，记录随后4min内小鼠不动状态持续时间的总长。整个实验过程中，水温保持在23士1。C。1.5统计学方法实验结果使用软件Origen7.5和Excel12003进行统计作图，数据表示为"平均值土标准偏差"。配对t检验用于判断组间差异。2实验结果测量小鼠于强迫游泳实验后4min内的不动时间，选取不动时间总和在35140s内的个体进行统计，共得有效实验数据35个(表2)。灌胃给药一周后，空白实验组小鼠的强迫游泳不动时间在110130s范围内。安拿芬尼及三七叶总皂甙各浓度给药后，小鼠游泳的平均不动时间均下降至100s以下。其中，阳性药物安拿芬尼的作用效果那为明显，绝望行为减少近50%。与悬尾实验相比，在调高了剂量的三个三七叶总皂甙给药组中，最终测得的游泳不动时间较空白组都有明显的减少。且随着给药量的增大，三七叶总皂甙对抗绝望行为的效果也愈加明显(图2)。当给药浓度达到1000mg/kg后，小鼠的不动时长下降到5090s的范围内，与阳性药物组对比已无明显差异。与悬尾实验相比，三七叶总皂甙200mg/kg的药效在两组实验的结果中不一致。原因可能有以下两方面①两组实验使用的小鼠存在种属和性别差异，导致对药物的敏感性不同。悬尾实验使用的是雌性NH小鼠，强迫游泳实验使用的是雄性昆明鼠。②两种实验方法的敏感性不同。结果说明，调高了三七叶总皂甙的浓度范围后，各给药组都表现了出抗抑郁的作用，且效果的强弱与给药剂量呈正相关性。表2不同浓度三七叶甙对小鼠强迫游泳实验结果的影响分组给药量/mg.kg'不动时间/sn/只空白组—121.00±12.69720098.00±18.98.7PnGL给药组50079.14±25.04**7100074.43±23.39**7安拿芬尼组3064.14±25.47"7与空白组相比，"*"表示P〈0.05;"**"表示P〈0.01。见图2所示，为不同浓度三七叶甙对小鼠强迫游泳实验结果的影响关系示意图，其中，Y轴表示强迫游泳实验中小鼠的不动时间，单位S;"*"表示与空白组相比，P<0.05;"**"表示P〈0.01。(三).开场实验1材料与方法1.1实验动物清洁级昆明小鼠，雄性，体重2328g，购自中山大学医学院实验动物中心。1.2仪器与药品自制开场实验箱；三七叶总皂甙提取物(广州环球制药有限公司)，安拿芬尼(盐酸氯类帕明片，北京诺华制药有限公司)。1.3药液制备取三七叶总皂甙粉末溶于生理盐水，配成高、中、低(20mg/ml、50mg/ml、100mg/ml)三种浓度的三七叶总皂甙溶液；取安拿芬尼片，研磨成粉末后溶于生理盐水，配成浓度为3mg/ml的溶液。1.4实验方法小鼠30只，按体重均分成五组，每组6只空白对照组(生理盐水)，三七叶总皂甙低浓度组(200mg/kg)，三七叶总皂甙中浓度组(500mg/kg)，三七叶总皂甙高浓度组(1000mg/kg),阳性药安拿芬尼组(30mg/kg)。灌胃给药8d，末次给药30min后进行开场实验检测。开场法是用于检测动物自主活动强度的常用方法。自制开场实验箱长30cm、宽30cm、高15cm，底部划线将其分成9个边长10cm的正方形区格。将动物放置于开场实验箱中，前2min让其适应环境，记录随后4min内小鼠水平、垂直活动的次数，即跨越区格边界的总次数及前足离地取直立或攀壁动作的总次数。1.5统计学方法实验结果使用软件0rigen7.5和Excel12003进行统计作图，数据表示为"平均值士标准偏差"。配对t检验用于判断组间差异。2实验结果在进行抑郁动物行为模型的实验时，必须同时检验药物对实验动物自主活动水平的影响。只有当药物不增强自主活动强度时，才能认为绝望行为实验中不动时间的减少是由抑郁症状的改变所导致的。三七叶总皂甙灌胃给药8天后，使用开场法对小鼠进行自主活动水平的测量，结果如表3。除1000mg/kg浓度给药组明显减少了小鼠的水平活动外(由平均50次水平运动下降到平均30次左右)，其余各给药组小鼠在开场实验中录得的自主活动强度均无明显改变，水平运动维持在4060次之间，直立运动维持在1040之间。结果说明了三七叶总皂甙不增强小鼠的自主活动水平，且高浓度下使之略有下调(图3)，小鼠在强迫游泳中不动时间的减少并非由于活动水平的提高所致，满足绝望行为实验的要求。表3三七叶总皂式对小鼠自主活动性的影响(『6)自主活动/次分组给药量/邮.kg1n/只水平运动竖直运动空白组-53.83±12.4823.33±5.65620051.83±12.3530.00±13.876PnGL给药组50042.00±10.9714.83±6.376訓33.83±9.60'19.83±6.656安拿芬尼组3055.67±17.2715.83±7.146与空白组相比，"*"表示P〈0.05见图3所示，为三七叶总皂甙皂甙对小鼠自主活动性的影响关系示意图(n=6)，其中，X轴表示不同的计量项(左水平方向活动；右竖直方向活动)；Y轴表示录得小鼠的活动次数；、"表示P〈0.05。(四).给药时间对强迫游泳实验结果的影响1材料与方法1.1实验动物清洁级昆明小鼠，雄性，体重2328g，购自中山大学医学院实验动物中心。1.2仪器与药品透明玻璃缸，秒表，温度计；三七叶总皂甙提取物(广州环球制药有限公司)，安拿芬尼(盐酸氯类帕明片，北京诺华制药有限公司)。1.3药液制备取三七叶总皂甙粉末溶于生理盐水，配成浓度为100mg/ml的溶液；取安拿芬尼片，研磨成粉末后溶于生理盐水，配成浓度为3mg/ml的溶液。1.4实验方法小鼠21只，按体重均分成五组，每组7只空白对照组(生理盐水)，三七叶总皂甙给药组(200mg/kg)，阳性药安拿芬尼组(30mg/kg)。灌胃给药，在第1、3、7天给药30min后，分别进行强迫游泳实验检测。对比各组小鼠在4min内不动时间总长的差异。1.5统计学方法实验结果使用软件Origen7.5和Excel12003进行统计作图，数据表示为"平均值土标准偏差"。配对t检验用于判断组间差异。2实验结果为了解三七叶总皂甙抗抑郁作用出现的快慢，本实验选用了在游泳实验中效果最明显的剂量组进行进一步研究，对比在给药第1、3、7天小鼠强迫游泳实验的结果。结果如表4，三七叶总皂甙和安拿芬尼均有抗抑郁的快药效。三七叶总皂甙第一次给药后，与空白组(85s左右)相比小鼠强迫游泳的不动时间已有明显的减少(44s左右)，降幅在45%左右，与安拿芬尼的效果接近。继续给药，各组不动时间的降幅无明显变化(维持在40%50%左右)，说明三七叶总皂甙抗抑郁作用起效快且效果稳定。虽然各组小鼠游泳的不动时间整体上都有所提高，且与实验三中结果有所出入，但可能是动物对游泳条件适应性增强所致。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>见图4所示，为不同给药时长三七叶甙对小鼠强迫游泳实验结果的影响关系示意图(11=7)，其中，X轴表示测量时间；Y轴表示强迫游泳实验中小鼠的不动时间，单位S;"**"表示P〈0.01。本实验得出了以下几个初步结论1.三七叶总皂甙在该实验使用的浓度下不能显著减少小鼠在悬尾实验中的不动时间。除阳性药组外，其余各组与空白组相比，不动时间总长无明显差异。2.调高三七叶总皂甙给药浓度后，小鼠在强迫游泳时的不动状态受到了明显的抑制，且该效果随着给药浓度的增加而提高。三个给药浓度中，1000mg/kg的药效最强，与阳性药物安拿芬尼无明显差异。三七叶总皂甙给药8天后，小鼠的自主活动次数无明显增加。说明三七叶总皂甙不增强小鼠的自主活动水平，满足行为绝望抑郁实验的要求，游泳实验的结果可信。3.在PnGL第一次给药后，小鼠强迫游泳的不动时间已有明显的减少，药效与安拿芬尼的接近。继续给药，虽然各组不动时间整体上都有所提高，但在三个测量时间给药组相对生理盐水组不动时间的降幅无明显变化，说明三七叶总皂甙抗抑郁作用起效快且效果稳定。本实验取用的阳性对照药物安拿芬尼是一种经典的三环类抗抑郁药，具有效果明显且起效快的特点，在本实验中得到的证实。但三环类药物的缺陷在于副作用大，因而相比之下植物药三七叶总皂甙在使用中更具优势。另一方面，对于双相抑郁症的患者，使用三环类药病情常会向狂躁转变，因此目前对抗双相抑郁的一线方案是抗抑郁药与心境稳定剂合用。本实验室已有的实验证明了三七叶总皂甙具有抗癫抗惊厥的作用，并对自主活动有一定的抑制效果，这与大多部分心境稳定剂的作用相似，指示其在对抗双相抑郁方面亦大有可为。本发明的优点如下采用从三七叶中提取的总苣苷或单一成份或复合成份制成药剂，临床具有抗抑郁作用。权利要求1.一种三七叶皀苷的抗抑郁医药用途，其特征是，采用从三七叶中提取的总皀苷或单一成份或复合成份用于制备治疗抗抑郁的药物。2.根据权利要求l所述三七叶鬯苷的抗抑郁医药用途，其特征是，所述成份的药效为抗抑郁。3.根据权利要求l所述三七叶苣苷的抗抑郁医药用途，其特征是，所述成份的临床作用为抗抑郁。4.根据权利要求l所述三七叶苣苷的抗抑郁医药用途，其特征是，所述药物可以是在处方中添加三七叶用于抗抑郁。5.根据权利要求l所述三七叶皀苷的抗抑郁医药用途，其特征是，所述药物可以是在处方中添加三七叶皀苷用于抗抑郁。全文摘要本发明涉及一种三七叶皀苷的抗抑郁医药用途，采用从三七叶中提取的总皀苷或单一成份或复合成份用于制备治疗抗抑郁的药物。该三七叶皀苷的抗抑郁医药不但具有抗抑郁作用起效快、效果稳定、副作用小的特点，而且还具有抗癫抗惊厥的作用，并对自主活动有一定的抑制效果，对抗双相抑郁方面亦大有改善的优点。文档编号A61K36/185GK101548998SQ200810027170公开日2009年10月7日申请日期2008年4月2日优先权日2008年4月2日发明者向飞军,朱颖虹,静郭,辉项,黄掌欣申请人:广东环球制药有限公司