含有维生素K₂的药品和类药剂营养品的利记博彩app

专利名称：：含有维生素K₂的药品和类药剂营养品的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及含有维生素K2或维生素K2类化合物范围内的化合物的药品和类药剂营养品(neutraceuticalproduct)，特别是与一种或多种多不饱和脂肪酸、鱼油和磷奸油组合，以及它们在治疗和预防与骨骼、软骨和心血管系统有关的疾病中的应用。具体来说，本发明还涉及这些产品在治疗和/或预防骨质疏松症、动脉粥样硬化和骨关节炎中的应用。
背景技术：
：维生素K2维生素K2是一类被称为甲基萘醌("MK")的化合物，它们都是2-甲基-3-全反式聚异戊烯化的-l,4-萘醌，具有下面的结构式不同的MKs之间在化学上的区别与侧链中异戊二烯单位的数量有关。各种不同的MKs通常被称为MK-2、MK-3、MK-4、MK-6等。数字是指异戊二烯单位的数量(n=2，n=3，n=4，n=6，……)。术语维生素K2是指不同MK物质天然存在的混合物。MK-2到MK-13天然存在于动物和人类组织中。维生素K2的饮食来源通常为发酵的食品，尤其是奶酪和干酪。某些比目鱼和鳗鱼也可含有一些维生素K2。从发酵的大豆生产的"纳豆"，在日本作为"健康产品"，是一种大众化的维生素K2来源。维生素K2的日摄取量在很广的范围内变化，通常从几微克到几毫克，一般低于50昭。维生素K2据称对人类健康有几种有益的作用，主要涉及心血管系统和骨代谢。骨质疏松症骨质疏松症是一种医学病症，其特征为骨质量降低以及骨的微结构改变。据估计，全世界有超过2亿的女性患有骨质疏松症。在全世界范围内骨质疏松症和骨质疏松性骨折不断增加，这主要是由于老龄人口的快速增长。今天，骨质疏松症的治疗包括典型的激素疗法、摄取钙和维生素D、以及使用二磷酸盐的药物治疗。动脉粥样硬化动脉粥样硬化是心血管疾病，可以影响几种重要器官包括脑、心和肾的动脉以及臂和腿的动脉。在大多数西方国家，动脉粥样硬化是死亡的主因。死于动脉粥样硬化的人数是死于所有癌症疾病人数总和的大约两倍。动脉粥样硬化是一种缓慢的、进行性的疾病，可以早在儿童时期就开始。在动脉粥样硬化中，动脉失去其弹性和硬度。有几种状况与疾病的发生和发展相关，包括风险因素如肥胖、糖尿病、高血压和吸烟。然而严格地从医学上来说，动脉粥样硬化一般被定义为动脉内膜的炎性疾病，动脉硬化的定义更为广泛，还包含其它形式的血管疾病，例如门克伯格(m6nckeberg's)动脉中层硬化。关节病和关节炎关节病、炎性关节炎、风湿性关节炎和骨关节炎是软骨疾病，它们的特征为关节变性。病理上，在软骨结构中有改变。这些疾病影响关节，疾病通常容易通过X-射线诊断。目前有几种类型的药物用于治疗这些疾病。它们包括单纯的镇痛药、NSAID、COX2抑制剂、皮质类固醇和葡萄糖胺。维生素K^对骨质疏松症、动脉粥样硬化、关节病和关节炎的作用在过去几年中，几份出版物描述了维生素K2的摄入对骨质疏松症的正面影响；参见，例如，W.Sakamoto等，OsteoporosisInternational16,1604-1610(2005);M.Kaneki，ClinicalCalcium15,605-610(2005);J.Iwamoto等，CurrentPharmaceuticalDesign10,2557-2576(2004);K.Nakayama，HommontoRinsho52,339-349(2004);S.Shiomi等，AmericanJournalofGastroenterology97,978-981(2002)禾口T.Hosoi，Bone(Osaka)14，95-97(2000)。有几份出版物涉及使用维生素K2或纳豆治疗动脉粥样硬化或类似的病症；参见，例如，Y.Ozawa，GifuDaigakulgakubu50，20-26(2002);L.J.Schurgers等，ZeitschriftfiirKardiologie90(Suppl.3),iii57-iii63(2001);Y.Seyama，ClinicalCalcium9,873-878(1999);H.Kawashima等，Jap.JournalofPharmacology75,135-143(1997)禾口J.M.Geleijnse等，JournalofNutrition134，3100-3105(2004)。在最近的文章中，T.Neoqi等(Arthritis&Rheumatism54,1255-1261(2006))报道了低水平的血清维生素K与骨关节炎发病率的增加有关。鱼油、磷虾油和n-3PUFA多不饱和脂肪酸，或PUFAs，是含有两个以上双键的长链脂肪酸。对它们的兴趣是源自它们在治疗性应用以及食品和营养应用中的潜力。它们的存在遍布于动物、植物、藻类、真菌和细菌中，并广泛发现于许多脂类化合物中，例如膜、贮存油、糖脂、磷脂、鞘脂和脂蛋白。它们可以从选定的种子植物和某些海产来源商业化生产。根据末端双键的位置是从脂肪酸链末端碳原子起的3C还是6C，将PUFAs分组成两个系列。一些实例是3-系列的PUFA，也称为ra-3或(n-3)PUFA，包括富含co-3脂肪酸的膳食油，例如鱼油、磷虾油、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、亚麻酸(LA)和a-亚麻酸(ALA)。6-系列的PUFA包括？亚麻酸(GLA)和花生四烯酸(AA)。磷虾是一类生活在北极和南极地区的类似虾的海洋动物。磷虾的大小通常在5到50mm之间。磷虾有几种种类。北极物种包括T.inermis、T.rushii、T.longicauda禾卩M.norvegia，而南极物禾中包括南极磷虫下(E.superba)和E.crystallorphias。磷虾以及与磷虫下相关的产品己经被建议作为鱼类饲料的成分；参见，例如，KR2005031319、KR2004087618、JP2003070426、US6153251、EP729708、SU1784152、JP05030923、JP0465454和JP61274653。此外，磷虾和基于磷虾的产品被用作鱼饵(参见，例如CN1820626)，与结合的亚油酸组合，用于疾病的治疗和预防(US2006078625)，作为添加剂抑制脂类的氧化(WO2005075613)，作为肥料(CN1502589)，用于食品(JP2004065152和WO2003/003857)，用于治疗心血管疾病、关节炎、皮肤癌、糖尿病和经期前综合征(WO2002/102394)，作为酶的来源治疗痤拖和其它疾病(US5958406、US5945102、US6030612、WO96/24371和WO93/24142)，以及作为多功能酶的来源(US6030612)。磷虾酶类还被建议用于治疗血栓症(WO95/33471)，以及用于制造牙科用的组合物(WO95/33470)。磷虾或基于磷虾的产品还被建议作为杀真菌剂(JP07033619)，作为抗糖尿病药剂(JP04042369)，来自磷虾的蛋白被建议用于制造健康食品(JP01137952)。涉及磷虾和磷虾成分的其它专利文件是含有磷虾脂肪酸的牙粉(JP2568833)，含有从磷虾提取的蛋白酶的洁肤化妆品(JP63218610)，来自磷虾的抗炎蛋白酶(JP61068419)，溶血栓剂(EP170115)，作为消化促进剂的酶组合物(WO85/04809)，几丁质制品(PL114387)，类胡萝卜素制品(PL113328)，仿蟹肉食品(JP57125677、JP57079863和JP67050848)，抗高血压剂(JP54119011)和基于磷虫下的食品(JP60046947，JP61023987和JP55040218)。磷虾的总脂类含量在物种与物种之间变化。在一年当中总脂类含量也是变化的。对于每个物种来说在一年当中磷虾的脂类组成也是变化的。磷虾中的总脂通常在5%到60%之间。磷虾的总脂中总甘油三酯和蜡酯的百分比可以在广泛的范围内变化；各从几乎为0到70%。除了甘油三酯和蜡酯之外，磷虾脂类、在后文中称为磷虾油，还包含磷脂、固醇、游离脂肪酸和脂肪醇。典型的磷脂包括化合物例如磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺。磷虾油可以是从磷虾获得的原油的形式，或是纯化的或改性的油的形式。不饱和化合物和多不饱和化合物构成的磷虾油中的大部分脂肪化合物。磷虾油中的主要脂肪酸成分是下列脂肪酸14:0、16:0、16:1(n-7)、18:0、18:1、18:1(n-9)、18:1(n-7)、18:215(n-6)、18:3(n-3)、18:4(n-3)、20:1(n-9)、20:5(n-3)、22:1(n-ll)、22:6(n-3)。对于磷虾油组成的参考文献，参见，例如S.Falk-Perdersen等，Can.J.FishAquat.Sci.57(Suppl.3)178-191(2000);F.Alonzo等，MarineEcology:ProgressSeries296，65-79(2005);N.Kusumoto等，J.OleoScience53,45-51(2004)以及本文中的参考文献。尽管市场上有几种治疗骨质疏松症和心血管疾病的药品，但对于可替代的方法仍存在着迫切的需要。发明概述现在，令人吃惊地发现维生素K2和多不饱和脂肪酸(PUFAs)可以配制在一起，成为具有长储存期限的稳定制剂。因此，在第一个方面，本发明提供了药品或类药剂营养品，其中含有维生素K2或维生素K2类(MK)化合物之内的至少一种化合物，与至少一种纯化的或鱼油或磷虾油形式的PUFA相组合。还发现维生素K2、特别是MK-7，不抵消海产油或n-3PUFA的抗凝效应。进一步还发现，较高级的甲基萘醌、特别是MK-7以上，抵消了海产油潜在的动脉钙化诱导效应。进一步还发现，较高级的甲基萘醌、特别是MK-7以上，抵消了海产油(marineoil)对骨骼健康的潜在的负性方面。进一步还发现，较高级的甲基萘醌、特别是MK-7以上，抵消了海产油对软骨健康的潜在的负性方面。在细胞培养研究中还发现，MK-7的摄取比其它K族维生素好。MK-8和MK-9的摄取稍低，但仍在相当的水平，而MK-4和维生素K,的摄取程度低得多。在细胞培养研究中还发现，长链甲基萘醌、特别是MK-8和MK-9，与其它形式的维生素K相比，干扰口服抗凝治疗的可能性较低。因此，在第二个方面，本发明提供了含有MK-7、MK-8、MK-9和MK-10中至少一种的药品或类药剂营养品，优选与至少一种纯化的或者鱼油或磷虾油形式的PUFA组合，用于在人类和动物中促进心血管健康、骨健康和软骨健康的至少一种。在第三个方面，本发明提供了MK-7、MK-8、MK-9和MK-10中至少一种的应用，优选与至少一种纯化的或者鱼油或磷虾油形式的PUFA组合，用于在人类和动物中促进心血管健康、骨健康和软骨健康的至少一种。所述应用的典型和优选的例子是用于制备预防或治疗与心血管、骨和软骨相关的疾病或病症中至少一种的药物。药物可以提供成单一药物或试剂盒。在第四个方面，本发明提供了预防或治疗动脉粥样硬化、动脉硬化、骨质疏松症、骨关节病或软骨的炎性或变性疾病中至少一种的方法，包括给人类或动物施用上文定义的药品或类药剂营养品或药物。在第五个方面，本发明涉及抵消鱼油、磷虾油以及含有PUFA的食物和食品添加剂的某些负面作用，从而增强所述海产油和PUFA对公共健康的有益方面。在第六个方面，本发明提供了试剂盒，其含有维生素K2或维生素K2类化合物(MK)之内的化合物，以及至少一种纯化的或者鱼油或磷虾油形式的PUFA。在本发明的优选实施方案中，本文中使用的PUFA是《-3PUFA，例如二十碳五烯酸(EPA)或二十二碳六烯酸(DHA)。本发明的这些以及其它的方面将在下面的详细描述和实施例中更详细讨论。附图简述图1显示了反映凝血过程中总凝血酶活性的内源凝血酶能力(ETP)。使用基于构象特异性抗体的夹心ELISA监测羧化的和未羧化的基质Gla-蛋白(MGP)种类，以正常的合并血清作为参比。l个月后，MGP羧化的变化是显著的，但是在第3个月和第4个月期间，显著性失去。参见下面的实验2。图2显示了与图1相同的实验中，使用构象特异性骨钙蛋白试剂盒监测的血清中羧化的和未羧化的骨钙蛋白种类。在1个月后，骨钙蛋白羧化的变化是显著的，但是在第3和4个月期间，显著性失去。参见下面的实验3。图3显示了溶解在鱼油和磷虾油中的MK-7的超常稳定性。在密封的玻璃瓶中制备样品，并保存在暗处的分别为室温、40°C和100°C下。定期取样并分析它们的MK-7含量。没有观察到MK-7的损失，即使是在100°C下2周后。参见下面的实验4。图4显示了维生素K卜MK-4、MK-7、MK-8和MK-9在不存在细胞的三种细胞培养基(分别用于生长下面描述的三种不同细胞类型)中的稳定性。参见下面的实验5。图5A-C显示了在三种不同细胞类型中，维生素K的细胞摄取的剂量-反应曲线；细胞生长至80%满底，然后加入不同浓度的维生素K(即K"MK-4、MK-7、MK-8和MK-9)。图5D以同样的标度显示了在三种细胞类型中MK-7摄取的图。参见下面的实验6。图6A-C显示了在三种不同细胞类型中维生素K!、MK-4、MK-7、MK-8和MK-9的细胞摄取作为时间的函数；细胞在实验5中描述的培养基中生长。在所有情况下，在细胞生长至80%满底后，将这些K族维生素的混合物加入到其中。参见下面的实验7。图7A-C显示了不同形式的维生素K绕开华法令效应的程度(通过K环氧化物的形成来测量)。形成的KO越多，通过酶DT心肌黄酶绕开的程度就越高。参见实验8。图8A-C显示了在缺乏华法令但是在细胞饥饿的条件下，各种不同形式的维生素K被利用的程度。形成的KO越多，维生素K物种被再循环得就越少。参见下面的实验9。定义本文使用的术语"多不饱和脂肪酸"是指任何多不饱和脂肪酸，不论是甘油三酯、生理可接受的酯、游离脂肪酸形式或多不饱和脂肪酸的生理可接受盐的形式。更具体来说，该术语被用于指示o-3脂肪酸以及富含co-3脂肪酸的膳食油例如鱼油和磷虾油。在文献中，co-3脂肪酸也被称为(n-3)多不饱和脂肪酸或n-3PUFA。本文使用的术语"磷虾油"是指磷虾中所有的亲脂性成分，可以是磷虾原油、纯化的磷虾油、来自磷虾油的化合物和来自磷虾油成分的衍生物。本文中使用的鱼油和磷虾油被合称为"海产油"。本文中使用的术语"维生素K2"是指天然存在的甲基萘醌类(MKS)或其混合物。本文使用的术语"维生素K2类化合物内的化合物"是指单个甲基萘醌(MK)化合物。本文使用的术语"主要是MK-7"是指根据HPLC分析，组合物中所有维生素K2化合物的至少90%是MK-7的组成。发明详述本发明主要是基于在对维生素K2、特别是较高级甲基萘醌(MK-7、MK-8、MK-9和MK10)的药理性质，以及这些化合物与纯形式或者鱼油或磷虫下油形式的PUFAs组合的药理性质的深入研究中的某些意料之外的发现。这些发现为在药物和营养药物领域中与预防和治疗某些心血管相关的、骨相关的和软骨相关的疾病有关、以及更通常来说对人类和动物的健康产生有益效应的改进产品，提供了新的可能性和挑战。下面将对这些发现进行更详细的讨论。鱼油、磷虫下油和n-3PUFA的健康效应已经报道了n-3PUFA的几种健康的方面，包括对心血管疾病的显著有益效应。正如VanSchoonbeek等所综述(JournalofNutrition133，657-660(2003))，n-3PUFA和海产油的有益效应是基于多种机制的，包括降低血小板活性，更有利的血脂分布情况，以及降低血液凝固性。海产油和n-3PUFA的低凝血效应主要归因于降低肝脏的维生素K状态，并伴随着降低维生素K依赖性凝血因子II、VII、IX和X，导致凝血酶形成潜力降低。C.M.A.Nieuwenhuys等得出结论，"延长施用n-3而不是n-6PUFAs可以通过降低维生素K依赖性凝血酶产生的能力同时不改变抗凝血酶m对凝血酶的失活而导致血浆的低凝结状态"。C.Leray等也报道了特异性抑制维生素K依赖性凝血因子的合成(Arteriosclerosis,Thrombosis,andVascularBiology22，459-463(2001))。这与L丄Schurgers等的观察相一致(JournalofLipidResearch43，878-884(2002))，即某些膳食油可能干扰人类志愿者中维生素K的吸收和代谢。干扰维生素K代谢的直接证据由C.M.A.Nieuwenhuys等给出(ThrombosisResearch104，137-147(2001))，显示鱼油和n-3PUFAs降低了肝脏中(即合成凝结因子的部位)的维生素K水平。此夕卜，M.Andriamampandry等(MedicalSciences321,415-421(1998))证明了鱼油的温和抗凝作用被轻微增加维生素的摄入而完全逆转。现在，意外地发现，维生素K2、尤其是MK-7，不逆转鱼油的有益效应。在通常1到10吗/天的剂量下，MK-7不影响外来凝血酶能力(ETP)，外来凝血酶能力是血栓症风险最灵敏的度量。因此，维生素K2与n-3PUFA或海产油的混合物将这两种化合物的有益效应组合起来，甚至在动物模型中和人类志愿者中协同工作。在每天100吗MK-7以上的剂量下，海产油的ETP降低效应被完全逆转。应该注意到，这些MK-7剂量相对于每天摄取5克海产油。耗用的鱼或磷虾油越多，干扰ETP所需的剂量就越高。心血管健康尽管贫维生素K状态可能具有轻度抗凝(即抗血栓)效应，但从血管健康的另一方面来说维生素K是需要的。基质Gla-蛋白(MGP)是在动脉血管壁中合成的维生素K依赖性蛋白。它由维生素K依赖性羧化所激活，在其羧化形式下，它担当血管钙化的有力抑制剂。使用构象特异性抗体，Schurgers等(Arteriosclerosis,ThrombosisandVascularBiology25，1629-1633(2005))证明动脉粥样硬化和血管钙化与血管壁的贫维生素K状态密切相关，在前瞻性临床试验中，L.A丄L.M.Braam等(Thrombosis&Ha画stasis91,373-380(2004))发现补充高剂量维生素K(1mg/天)对于血管弹性有很大益处。我们已经发现，海产油和n-3PUFA不仅有利地降低肝脏中维生素K依赖性蛋白(凝血因子)的产生，而且降低肝外组织的维生素K状态，从而降低肝脏外维生素K依赖性蛋白包括骨钙蛋白和基质Gla-蛋白(MGP)的活化(通过谷氨酸羧化)。这是海产油和n-3PUFA有害的副作用，它对于心血管健康、骨健康和软骨疾病的发生具有潜在的有害结果。例如，血管钙化抑制剂MGP的羧化减少，是血管钙化、高血压、心肌梗塞和心血管死亡的主要风险因子。现在，令人吃惊地发现，较高的甲基萘醌、尤其是MK-7，在1到10ng/天的剂量下，不抵消海产油的轻度抗凝效应(通过ETP测量)，而同时它们有效刺激MGP羧化，水平达到类似于甚或超过未使用海产油的对象中的水平。这描述在下面的实验2中。因此，MK-7是将为了心血管健康而直接应用的含有海产油和n-3PUFA的食品和食品增补剂的益处最大化的必要成分。骨健康已经发现海产油和n-3PUFA对于骨健康具有有益的效应。在实验动物模型中，这些油显著降低了去卵巢小鼠和限食大鼠的骨丢失(D.Sun等，JournalofBoneandMineralResearch18,1206-1216(2003);Sim等，Bioscience,BiotechnologyandBiochemistry68，2613-2615(2004))。许多作者已经报道，维生素K的摄入低、贫维生素K状态和骨钙蛋白羧化受损是骨质疏松症发生和发展的风险因子。参见，例如S.L.Booth等，AmericanJournalofClinicalNutrition77,512-516(2003);P.Szulc等，JournalofClinicalInvestigation91,1769-1774(1993);C.V函eer等，EuropeanJournalofNutrition43，325-325(2004)。已经证实，增加维生素K的摄取在绝经后女性中导致骨丢失率降低(L.A丄L.M.Braam等，CalcifiedTissueInternational73,21-26(2003);M.Shiraki等，JournalofBoneandMineralResearch15,515-521(2000))。在这些研究中使用的剂量范围在Kilmg/天到K245mg/天之间。这样说来，海产油诱导的骨钙蛋白羧化降低必须被当作有害的副作用，可能部分掩盖海产油对骨健康的益处。已报道高剂量维生素K治疗可以抵消这种副作用，但是也会消除据报道对心血管疾病预防有益的轻度抗凝效应。现在，意外地发现，较高的甲基萘醌、尤其是MK-7，在1到10吗/天的剂量下，不抵消海产油的轻度抗凝效应(通过ETP测量)，而同时有效刺激骨钙蛋白羧化，其水平达到类似于甚或超过未使用海产油的对象中的水平。这描述在下面的实验3中。因此，MK-7是将为了骨健康而直接应用的含有海产油和n-3PUFA的食品和食品增补剂的益处最大化的必要成分。软骨健康也已经发现，海产油和n-3PUFA抵制例如在骨关节炎、风湿性关节炎和强硬性脊椎炎中观察到的变性和炎性关节疾病。在细胞培养研究中，证实了补充n-3PUFA而不是n-6PUFA，导致软骨细胞代谢的变性和炎性方面均减少，同时对正常组织稳态没有影响(CL.Curtis等，Proc.Nutr.Soc.61,381-389(2002))。此外，基于群体的研究表明，鱼油和n-3PUFA对骨关节炎、风湿性关节炎和其它软骨疾病的治疗具有正面作用(参见，例如L.G.Cleland等，Drugs63,845-853(2003)和M丄James等，Prostaglandins,LeukotriensandEssentialFattyAcids68，399-405(2003))。如上所述，海产油和n-3PUFA不仅降低肝脏中维生素K依赖性蛋白(凝血因子)的产生，而且降低肝外组织的维生素K状态，从而降低了肝脏外维生素K依赖性蛋白包括骨钙蛋白和基质Gla-蛋白(MGP)的活化(通过谷氨酸羧化)。MGP是软骨合成的最丰富的蛋白之一，它被谷氨酸羧化激活需要维生素K。MGP羧化差与骨关节炎、风湿性关节炎和强硬性脊椎炎有关。显然，需要一种方法来抵消海产油在软骨中诱导的维生素K状态的降低。现在，意外发现，营养相关剂量的MK-7抵消了海产油对软骨健康的潜在负性方面。较高的甲基萘醌、尤其是MK-7，在1到10叫/天的剂量范围下，不抵消海产油的轻度抗凝效应(通过ETP测量)，而同时有效刺激骨钙蛋白羧化和MGP羧化水平，水平达到类似于甚或超过未使用海产油的对象中的水平，这一事实证明了在补充海产油过程中，MK-7能够在骨、包括关节软骨中提供最适的维生素K状态。因此，MK-7是将为了软骨健康而直接应用的含有海产油和n-3PUFA的食品和食品增补剂的益处最大化的必要成分。细胞培养研究在一系列细胞培养实验中，研究了在各种不同条件下维生素K的摄取和代谢。对下面形式的维生素K进行了比较K^、MK-4、MK-7、MK-8和MK-9。在三种不同细胞类型中对它j门进行了测试血管平滑肌细胞，成骨细胞样MG-63细胞系和肝细胞样HepG2细胞系。在所有实验中，使用的维生素为含有每种维生素1pmol/L的混合物。发现在所有细胞中，MK-7的摄取比其它K族维生素好。MK-8和MK-9的摄取略少，IQ和MK-4少得多。还发现，在抗凝剂华法令的存在下，膜结合的酶VKOR被阻断，从而使维生素K不能再循环。在利用后，它保持在氧化形式(K-环氧化物)；环氧化物的量代表了利用的程度。发现长链甲基萘醌、特别是MK-9不能被还原，因此在这些条件下不被用作羧化酶的辅酶。但是，更具水溶性的维生素&和MK-4，可以使用胞质酶DT-心肌黄酶进行还原，并干扰口服抗凝剂治疗。因此，长链甲基萘醌干扰口服抗凝剂治疗的可能性比其它形式的维生素K低。这是重要的安全性方面，并与以前已经发表的动物实验一致(Craciun，A.M.,Groenen-vanDooren,M.M.C.L.,Thijssen,H.H.W.,Vermeer,C.(1998),在维生素K缺陷和在溴鼠灵处理的大鼠中比较K族维生素诱导的凝血酶原合成(InductionofprothrombinsynthesisbyK-vitaminscomparedinvitaminK-deficientandinbrodifacoum-treatedrats.)Biochim.Biophys.Acta1380,75-81.)。在不存在华法令并在丰富培养基下，完全没有环氧化物形成。如果培养基中胎牛血清的浓度降低，细胞的营养状态将变得不够最优。此外，在这些条件下主要发现的是MK-4和K^环氧化物。但是，目前的结论与华法令实验的结论不同长链甲基萘醌被优先利用，并在被VKOR还原的水平下与Ki和MK-4成功地竞争。因此，可以得出结论，长链甲基萘醌被优先用于各种不同蛋白的？羧化。这与以前发表的无细胞酶动力学研究相一致，该研究显示，维生素K的米氏常数(Km)随着其侧链长度的增加而降低(Buitenhuis，H.C,Soute,B.A.M.,Vermeer,C.(1990)，维生素K,、K2和K3作为肝脏维生素K依赖性羧化酶的辅因子的比较(ComparisonofthevitaminsK4,K2andK3ascofactorsforthehepaticvitaminK-dependentcarboxylase.)，Biochim.Biophys.Acta1034，170-175)。产品制剂和剂量现在已经发现，可以将维生素K2和多不饱和脂肪酸在配制在一起，成为储存期限长的稳定制剂。例如，MK-7与浓度范围很广的鱼油或磷虾油混合，这些组合物在这些条件下保持的稳定在100°C为至少2周，在40。C为6个月，在室温为3年。这些研究的详细情况显示在下面的实验4中。如上所定义的，术语"多不饱和脂肪酸"(PUFA)是指任何以甘油三酯、生理可接受的酯、游离脂肪酸或其生理可接受的盐的形式的PUFA。本发明的PUFAs和甲基萘醌的优选组合物是PUFAs与主要是MK-7的组合。本发明的PUFA和MK物质的更优选的组合物是根据HPLC分析，其中组合物中所有维生素K2化合物的至少95。/。是MK-7，并且MK-6作为主要的维生素&杂质。本发明的组合物中MK-7和MK-6之间的典型比率在90比10到95比5的范围内。本发明的维生素K2或维生素K2类化合物内的化合物与PUFA的优选组合物是含有选自n-3PUFAs的PUFA的组合物。更优选本发明的n-3PUFAs是20:5酸的二十碳五烯酸(EPA)和22:6酸的二十二碳六烯酸(DHA)。在本发明的产品中更加优选的n-3PUFA组分是EPA和DHA的组合。EPA:DHA的最优选比例在2:1到1:2的范围内。在本发明的最优选组合物中，EPA和DHA是甘油三酯或乙基酯的形式。本发明的产品制剂和试剂盒优选全身性施用(例如口服或肠胃外)。本发明的最优选剂型是口服剂型；特别是胶囊和片剂。给药剂量和途径所取决的因素例如个体的年龄和性别、疾病或病症的严重性和性质，等等，可以由本
技术领域：
的专业人员、通常是医生容易地确定，或者按照通常附于产品的制造商的说明书。片剂和胶囊可以通过本
技术领域：
已知的任何常规方法来制备。胶囊可以是例如软或硬的明胶胶囊，除了维生素K2或维生素K2化合物和多不饱和脂肪酸之外，还含有无活性的可药用成分，例如淀粉。本发明的片剂可以，例如，通过直接压制或通过使用常规压片机压制胶囊来制备。本发明的片剂除了维生素K2或维生素K2化合物和不饱和脂肪酸之外，还含有本
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众所周知的可药用无活性成分。这样的药剂可以是例如纤维素衍生物和硬脂酸镁。本发明的片剂可以用耐胃包衣例如乙酸邻苯二甲酸纤维素进行包被。本发明的口服剂型，胶囊和片剂，每个的重量在100mg到2g之间。每个片剂或胶囊中维生素K2或维生素K2化合物的量可以大范围变化，尤其依赖于例如疾病或病症的严重性和性质、以及患者的状态、性别和年龄的因素。在一个片剂或胶囊中维生素K2或属于维生素K2类化合物内的维生素K2化合物的量，通常在1到500昭之间，尽管更高的量也是可能的。维生素K2、尤其是MK-7的优选剂量在2到300pg之间，更优选为5-50叫，最优选在每天10-20昭之间。每个片剂或胶囊中的不饱和脂肪酸的量，也可以根据不饱和脂肪酸的性质、疾病的严重性和性质、患者的年龄和片剂或胶囊的用药频率而变化。在每个片剂或胶囊中不饱和脂肪酸的量通常在300到1200mg之间，优选在400到1000mg之间，最优选在500到900mg之间。呈现的数据显示，高达每天l(Hig海产油(一剂大约5g)的剂量和MK-7可以组合，而不干扰海产油的轻度抗凝效应。因此，在给药于人类或动物时，大约1到至少10吗之间的MK-7剂量(显然，在所述范围内越高越好)被证明是有益的。高达每天IOO吗的剂量不适用于这里描述的目的，因为发现这些剂量抵消了华法令的效应，而华法令是比n-3PUFAs更强的凝血因子羧化的抑制剂。参见Schurgers,L丄，Teunissen,K丄F.,Hamuly能,K.,Knapen,M.H.J.,Vik,H.,Vermeer,C.，含有维生素K的食品增补剂合成维生素K1与纳豆来源的甲基萘醌-7的比较，(VitaminK國containingdietarysupplements:comparisonofsyntheticvitaminKlandnatto-derivedmenaquinone-7.)，Blood109(2007)3279-3283.)。应该理解，维生素K和海产油的剂量也可以根据海产油的品种和质量而变化。因此推荐使用海产油的混合物以维持组合物中的恒定比率。还应该理解，维生素K2或维生素K2类化合物内的化合物也可以与一种或多种多不饱和脂肪酸(包括鱼油和磷虾油)分开并独立地配制在例如药物组合物或营养药物组合物(食品增补剂)中。适合的药物组合物以及典型的剂量与上述的类似，并且已为本
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的专业人员所知。适合的营养药物组合物以及典型的剂量被描述在例如EP1153548中，其公开内容在此引为参考。本发明的组合物可以可任选包含其它的药物或营养药物活性成分，例如维生素像维生素D或维生素D衍生物；活性药物化合物例如二磷酸盐，典型为阿仑膦酸盐(alendronate);或心血管药物，例如ACE抑制剂如依那普利，血管紧张素II受体拮抗剂如氯沙坦，P-阻断剂如普奈洛尔，降血脂成分例如沙汀类、典型为辛伐他汀，以及其它的药物。在较高级甲基萘醌MK-7、MK-8、MK-9和MK-10中，使用MK-7一般是最优选的，这从本文的公开内容就可以理解。还优选MK-9，这即因为其有益的和有希望的性质，又因为其实用性，因为它容易合成制造。,现在，将参考下面的实施例和实验工作对本发明进行进一步描述，但它们的任何方面均不应被解释为对本发明的限制。实施例1、含有EPA乙基酯、DHA乙基酯和MK-7的胶囊将含有97%MK-7和3%MK-6的油与EPA乙基酯和DHA乙基酯混合。加入a-生育酚，并将得到的油装入硬明胶5胶囊中。每个胶囊含有MK-797吗MK-63|igEPA乙基酯463mgDHA乙基酯375mgot-生育酚4mg实施例2、含有维生素K2的鳕鱼肝油将维生素K2溶解在鳕鱼肝油(来自EPAX，挪威)中，并装入带有金属封口的绿色玻璃瓶(250ml)中。瓶子被标上"VitaminK2tran"，用于在挪威市场上销售。该产品的每日剂量(5ml)含有维生素A:250pg维生素D:lOpg维生素K2(MK-7):10|ig鱼油1.2g，其中DHA为0.4g，EPA为0.6ga-生育酚4mg实施例3、含有磷虾油和MK-7的胶囊将含有甘油三酯形式的多不饱和脂肪酸、磷脂和其它天然成分的磷虾油(得自Enzymotec,以色列)与MK-7和a-生育酚混合。将得到的油组合物装入软凝胶或硬明胶胶囊中，或制备成含有油的颗粒或溶剂。每个胶囊含有MK-797jigMK陽63吗磷虫下油700mga-生育酚4mg实施例4、含有维生素K2的磷虾油将维生素K2溶解在磷虾油中，装入带有金属封口的玻璃瓶中(250ml)。瓶子被标注上"KrilloljetranmedVitaminK"，用于在挪威市场上销售，或标注上"含有维生素K的磷虾油(KrilloilincludingvitaminK)"在美国和英国市场上销售。每日剂量(5ml磷虾油)含有5到500吗维生素K2。实施例5、含有磷虾油和维生素K2的鱼饲料将维生素K2(100mg)溶解在磷虾油(1kg)中。将鱼词料(来自SkrettingAS,Stavanger,挪威)碾碎。使用混合器将碾碎的鱼饲料(20kg)与含有维生素K2的磷虾油(1kg)混合。加入水，将半湿的材料过筛(3mm)，在40。C干燥(tried)24小时，以获得鱼饲料颗粒。鱼饲料颗粒含有大约5%磷虾油和2-100ppm维生素K2。实施例6、MK-8胶囊将含有MK-8的油(HPLC分析显示MK-8高于总维生素K2的70%)装入软明胶胶囊。每个胶囊含有5昭的MK-8。实施例7、含有EPA乙基酯、DHA乙基酯和MK-8、MK-9和MK-10掺合物的胶囊将含有MK-8、MK-9、MK-10掺合物的油与EPA乙基酯和DHA乙基酯混合。加入ot-生育酚，然后将得到的油装入硬明胶胶囊中。每个胶囊含有MK-8、MK-9、MK-1050吗EPA乙基酯463mgDHA乙基酯375mga-生育酚4mg实施例8、含有MK-8的鳕鱼肝油将MK8(按照HPLC分析高于65。/。)溶解在鳕鱼肝油中，装入带有金属封口的绿色玻璃瓶(250ml)中。瓶子标注上"VitaminK2tran"，用于在挪威市场销售。该产品的每日剂量(5ml)含有维生素A:250吗维生素D:'10|IgMK-8:IO吗co-3脂肪酸1.2g，其中DHA为0.6g，EPA为0.4gdl-a-乙酸生育酚酯6mg实验l:骨关节炎、骨病和风湿性关节炎中骨钙蛋白的羧化程度召集三组患者，并与年龄和性别相匹配的健康对象进行比较。通过测量羧化和未羧化的骨钙蛋白之间的比率(cOC/ucOC比率)记录每个对象的维生素K状态，该比率是肝外维生素K状态的最灵敏的生物标志物(B.Panis等，Bone2006;39:1123-1129)。罹患骨关节炎和软骨病的患者相对年轻，与年轻参照组(A)进行比较，患有风湿性关节炎的患者年纪较大，因此与老年参照组(B)进行比较。骨钙蛋白的构象特异性分析从Takara(日本)获得。参见下面的表l。本实验证明了在患有骨关节炎、软骨病和风湿性关节炎的对象中，与正常人群相比，维生素K状态(由循环系统骨钙蛋白的羧化程度表示)明显降低。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>实验2:长期摄入鱼油期间MGP羧化和MK-7摄入10pg/天的作用在研究中招募了20个健康男性(年龄为43i8岁)。平均体重指数为25.1±3.5kg/m2。所有对象每天接受5克鱼油(含有35%EPA、25%DHA和10。/。其它n-3PUFA)，为期4个月。在研究的最后3个月期间，所有志愿者每天还接受一颗提供IO昭MK-7的软凝胶胶囊。每个月收集血液样品在柠檬酸中，以制备富血小板的血浆。反映凝血过程中总凝血酶活性的内源凝血酶能力(ETP)，按照H.C.Hemker等的方法进行监测■(PathophysiologyofHaemostasisandThrombosis2003;33:4-15)。使用基于构象特异性抗体的夹心ELISAs监测羧化和未羧化的基质Gla-蛋白(MGP)种类，所述抗体从VitaKBV(Maastricht,荷兰)获得，以正常的合并血浆作为参比。参见图1。取羧化的和未羧化的MGP之间的比率作为血管维生素K状态的度量。所有的值被表示成在合并的参比血浆中值的百分数。ETP的变化在1个月后是统计学显著的(p<0.05)，并在随后的几个月中保持。MGP羧化的变化在1个月后也是明显的，但是在第2、3和4个月，这种显著性丧失了。本实验证明了鱼油诱导的低凝血性未被为了将MGP羧化维持在其原始水平所需的低剂量MK-7所抵消。实验3:长期摄入鱼油期间的骨钙蛋白羧化和MK-7摄入10吗/天的作用在与上述相同的实验中，同样收集血清，其中使用Takara(日本)的构象特异性骨钙蛋白试剂盒来监测羧化和未羧化的骨钙蛋白种类。骨钙蛋白羧化的变化在l个月后是显著的，但是在第3和4个月期间，显著性丧失了。参见图2。本实验证明了鱼油诱导的低凝血性未被为了将骨钙蛋白羧化维持在其原始水平所需的低剂量MK-7所抵消。实验4:MK-7在鱼油和磷虾油中的稳定性制备实施例2和4中所述的组合物(将MK-7分别溶解在鱼油和磷虾油中)，至终浓度为每克油2pgMK-7。在密封的玻璃瓶中制备样品，放置在暗处，分别为室温、40。C和100°C。定时取样并分析它们的MK-7含量。参见图3。没有观察到MK-7的损失，即使是在100°C2周后。本实验证实了溶解在鱼油和磷虾油中的MK-7的超常稳定性。实验5-9:细胞培养研究本系列细胞培养实验描述了在各种不同条件下维生素K的摄入和代谢。比较了下面形式的维生素K:Kq、MK-4、MK-7、MK-8和MK-9。在三种不同细胞类型中对它们进行测试血管平滑肌细胞，成骨细胞样MG-63细胞系和肝细胞样HepG2细胞系。在所有实验中，使用的维生素为含有每种维生素l^mol/L的混合物。所有的数据为三份重复实验的平均值。各种不同培养基的组成(v/v)是:HepG2VSMCMG63EMEM(来自Sigma)87%78%87%胎牛血清10%20%10%青霉素/链霉素1%1%1%L-谷氨酰胺1%1%1%丙酮酸钠--1%非必需氨基酸1%--实验5这里，我们检查了在不存在细胞的三种细胞培养基中，各种不同形式的维生素K(每种lpM)的稳定性。数据在图4中给出。结论在所有三种生长培养基中，维生素K,、MK-7、MK-8和MK-9在48小时以上仍相当稳定，但MK-4显示出在前24小时降低到基线的70%到80%之间的值，48小时后降低到基线的60%到70%之间的值。这种降低的原因还不清楚，但是必须对条件进行选择，使得MK-4的消失不影细胞摄取响维生素K的数据。为了将MK-4的损失保持到最小，进行的所有实验不超过24小时。实验6使细胞生长到80%满底，然后加入不同浓度的维生素K(参见图5A-C)。加入的维生素K的浓度以nmol/L培养基表示，回收的维生素K以nmol/g细胞蛋白表示。要注意，对于每种维生素的标度不同。结论1.所有维生素的剂量-反应曲线在500和1000nmol/L之间是水平的；因此我们在饱和条件下工作，即使是MK4的降低(目前还不了解)也不影响进一步研究的结果。2.意外的是，不同细胞对维生素K的摄入有极大的差别，血管平滑肌细胞给出最高值，MG63给出最低值。这在图5D中表明，在该图中，我们将三种细胞类型中MK-7的摄入以同样的标度作图。3.在所有系统、但尤其是肝脏外细胞中，MK-7的摄取出人意料地比其它K族维生素好。这在下面的实验中被进一步证明。实验7随时间追踪K族维生素的细胞摄取。在所有情况下，在细胞生长至80%满底后，加入各种K族维生素的混合物(在培养基中终浓度为1(imol/L)。数据在图6中给出。意外的是，MK-7的摄取比其它任何K族维生素都好。细胞这种对MK-7偏好性的潜在机制还不十分清楚。结论1.4小时后摄入水平降低，8小时时达到平台水平；2.对于每种维生素来说，摄取速率和平台水平值不同；3.在所有三种细胞系统中，MK-7的摄取比任何其它的维生素好。实验8在正常条件下，所有形式的维生素K以其醌形式被摄取，它们在被活化成酶Y-谷氨酰羧化酶的辅因子之前被还原成氢醌。在羧化过程中，它们被氧化成环氧化物，环氧化物可以被膜结合的酶VKOR还原。VKOR形成被称为香豆素衍生物的药物的靶，这种药物使酶失活，从而阻断K环氧化物的再循环。维生素K醌(而不是环氧化物)可以被第二个被称为DT心肌黄酶的酶系统还原。因此，过量的维生素K拮抗香豆素衍生物例如华法令的作用。此外，在华法令的存在下使用的每种维生素K分子被转化成相应的环氧化物，其不再能被进一步使用。因此，K环氧化物的浓度是华法令处理过程中使用的维生素K量的直接度量。香豆素衍生物被广泛用作口服抗凝剂；它们的作用方式是基于抑制肝脏中凝血因子的羧化。因而，干扰香豆素衍生物是维生素K补充剂的潜在风险。因此，我们研究了各种不同的K族维生素是否干扰华法令以及干扰的程度。在所述研究中，在加入维生素K之前18小时，在培养基中加入10itmol/L华法令。在与K族维生素温育过程中，该浓度的华法令也存在。结果显示在图7中。在MG63细胞系中我们仅鉴定到MK-4环氧化物(MK4-0)，在其它系统中检测到了更多种其环氧化物形式的K族维生素。在所有情况下，显然水溶性更好的维生素K形式(MK-4和K。能够避开华法令的作用，而随着疏水性增加，对华法令的干扰变弱。在该系列中最重要的细胞类型是HepG2细胞系，因为它代表了肝细胞，是凝血因子被合成的场所。从图7明显看出，在干扰华法令和维生素K种类的疏水性之间存在反相关。几乎没有形成MK-9环氧化物。这时MK-10和MK-ll不能商购到，但通过外推法可以预计这些长链甲基萘醌将完全没有干扰，可以安全地作为补充剂给予即便是进行口服抗凝剂(香豆素)治疗的患者。结论1.短链K族维生素K,和MK-4显著干扰华法令，但是长链甲基萘醌的干扰较弱。2.在华法令的存在下K族维生素的利用与侧链的长度反相关MK-7>MK-8>MK-9。3.在这些实验的基础上，可以预计MK-9和MK-10将不以临床相关的方式干扰口服抗凝剂治疗。实验9在证明了长链甲基萘醌被各种不同细胞良好地摄取、以及它们在华法令处理期间几乎不被利用之后，仍然需要证明这些维生素K种类在非抑制(无华法令)条件下被积极利用。因为在标准细胞培养条件下没有环氧化物形成，我们通过将培养基中的胎牛血清降低到1%(v/v)，使用了亚最适生长条件。这导致显著的环氧化物形成。结果显示在图8中。同样地，发现短链维生素K环氧化物的积累，尤其是在血管平滑肌MG63细胞中。我们将这些数据解释为长链甲基萘醌在细胞饥饿条件下的优先再循环。或者，这些数据也可以解释为没有利用长链甲基萘醌。这被VSMC和MG63在含有1%FCS和仅存在单一形式的维生素K(lnmol/L)的情况下可以生长的实验所否决。使用羧化骨钙蛋白的构象特异性测试试剂盒(Takara,日本)和羧化Gla-蛋白(VitaK,荷兰)，发现在血管平滑肌细胞中，MGP的羧化被维生素K,、MK-4和MK-7刺激，在温育24小时后使培养基中的MGP达到下面的水平>羧化的基质Gla-蛋白，在K1存在下12.4ng/mL，MK-4存在下10.7ng/mL，MK-7存在下13.5ng/mL。>羧化的骨钙蛋白，在K1存在下3.2ng/mL，MK-4存在下4.1ng/mL，MK-7存在下3.9ng/mL。这些数据证明，长链甲基萘醌以及Kl和MK-4是维生素K依赖性羧化酶的活性辅因子，缺乏环氧化物一定是优先再循环的结果。权利要求1.药品或类药剂营养品，含有维生素K2或至少一种维生素K2类化合物、与至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸相组合。2.药品或类药剂营养品，含有至少一种维生素K2类化合物,选自MK-7、MK-8、MK-9和MK-10，用于促进人类和动物心血管健康、骨健康和软骨健康的至少一种。3.权利要求2的药品或类药剂营养品，其还含有至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸。4.维生素K2或至少一种维生素K2类化合物，与至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸相组合，在促进人类和动物心血管健康、骨健康和软骨健康的至少一种中的应用。5.选自MK-7、MK-8、MK-9和MK-10的至少一种维生素&类化合物，在促进人类和动物心血管健康、骨健康和软骨健康的至少一种中的应用。6.选自MK-7、MK-8、MK-9和MK-10的至少一种维生素K2类化合物，在抵消含有鱼油、磷虾油和多不饱和脂肪酸的食品和食品增补剂的某些负性方面、从而增强所述海产油和多不饱和脂肪酸对公共健康的有益方面中的作用。7.权利要求5或6的应用，其中所述MK-7、MK-8、MK-9和MK-10的至少一种与至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸相组合。8.前述权利要求任一项的应用，其中所述应用被用于制备预防或治疗与心血管、骨和软骨相关的疾病或病症的至少一种的药物。9.预防或治疗动脉粥样硬化、动脉硬化、骨质疏松症、骨关节炎或软骨的炎性或变性疾病中至少一种的方法，其包括给人类或动物施用有效量的维生素K2或至少一种维生素K2类化合物，任选与有效量的至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸相组合。10.权利要求9的方法，其包括给人类或动物施用有效量的选自MK-7、MK-8、MK-9和MK-10的至少一种维生素K2类化合物。11.权利要求10的方法，其中维生素K2类化合物是MK-7或MK-9。12.权利要求9-11任一项的方法，其中待施用的有效量的至少一种多不饱和脂肪酸是鱼油或磷虾油的形式。13.试剂盒，包含维生素K2或维生素K2类化合物和至少一种纯化或海产油形式的多不饱和脂肪酸。14.权利要求1的产品或权利要求4的应用，其中所述至少一种维生素K2类化合物选自MK-7、MK-8、MK-9和MK-IO。15.权利要求1到3任一项的产品或权利要求4到8任一项的应用，其中所述多不饱和脂肪酸是鱼油或磷虾油的形式。16.权利要求1到3任一项的产品或权利要求4到8任一项的应用，其中所述多不饱和脂肪酸是n-3多不饱和脂肪酸。17.权利要求16的产品，其中所述多不饱和脂肪酸是EPA或DHA或其混合物。18.权利要求l的产品，其中所述维生素K2或至少一种维生素K2类化合物和所述脂肪酸提供在相同的药物组合物中。19.前述权利要求任一项的产品，其中所述产品用于口服给药。20.权利要求19的产品，其中所述产品是片剂或胶囊制剂。21.权利要求17的产品，其中所述脂肪酸是EPA和DHA以其甘油三酯或乙基酯形式的组合。22.维生素K2或至少一种维生素K2类化合物以及至少一种n-3多不饱和脂肪酸在制备预防或治疗动脉粥样硬化、动脉硬化、骨质疏松症、骨关节炎或软骨的其它炎性或变性疾病的药物中的应用。23.前述权利要求任一项的维生素K2或至少一种维生素K2类化合物的应用或者包括施用维生素K2或至少一种维生素K2类化合物的治疗或预防方法，其中维生素K2或至少一种维生素K2类化合物、优选为MK-7或MK-9的剂量，在每天1到500pg之间、优选在2到300ng之间、更优选在5到50ng之间、并最优选在10到20pg之间。全文摘要本发明提供了含有维生素K₂或维生素K₂类化合物内的化合物、任选并优选与一种或多种纯化形式或作为海产油(即鱼油和/或磷虾油)的多不饱和脂肪酸相组合的药品和类药剂营养品。还提供了维生素K₂或维生素K₂类化合物内的化合物，优选与一种或多种纯化形式或作为海产油的多不饱和脂肪酸组合，在治疗和预防与骨、软骨和心血管系统有关的疾病中的应用。优选的维生素K₂类化合物内的化合物是MK-7、MK-8、MK-9和MK-10，特别是MK-7或MK-9。海产油优选为磷虾油或鱼油。文档编号A61K31/122GK101534807SQ200780032693公开日2009年9月16日申请日期2007年7月13日优先权日2006年7月14日发明者塞斯·弗美尔,安娜·比约内比埃·维克,斯泰因·韦斯特比埃,约·克拉韦内斯,莱昂·J·许尔格斯,霍格内·维克申请人:纳多制药股份公司