治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备方法

专利名称：治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备方法，特别
是涉及一种可从红曲发酵物中的莫那可林(monacolins)、抗发炎物质与抗 氧化物质来治疗与预防阿兹海默症的组合物，可应用于锭剂、胶嚢剂、颗 粒剂、口服剂等。
背景技术：
阿兹海默症(Alzheimer's disease,简称AD)，又称老人痴呆症，是 一种持续性神经功能障碍。得到阿兹海默症的人会渐渐的丧失记忆并且出 现语言和情绪上的障碍。智力逐渐丧失的情形称为痴呆(dementia )。当这 个疾病越来越严重时，病患在生活各方面都需要他人的协助，像是洗澡、 吃东西、上厕所…等等。由于阿兹海默症患者需要人日夜看护，因此病患 亲友的生活往往也跟着受到很大的影响。记忆的丧失可能是阿兹海默症最 显而易见的的病征，尤其是记不住前不久才发生的事或是最近才获得的讯 息。初始的症状细微而渐次的出现，不易察觉，而且这些症状也可能出现 在其他的失智症并非阿兹海默症特有。例如在熟悉的地方迷路，忘了某 件事做了没，老是旧事重提或是无法学新东西。病情恶化时，患者可能会 在谈话时没办法找到适当的用字或是无法做重大的决定。阿兹海默症其中 一项最令人痛苦的地方是患者有时会没办法认得亲友。患者的性格也可能 变得异常的烦躁，偏执多疑，不喜欢与人互动。到后期，患者可能会出现 在街上游荡，迷路回不了家的情形。新的研究显示阿兹海默症患者脑部处 理视觉和空间讯息的区域可能受到损伤。这可说明患者为何会有没办法认 出自己在哪儿或是搞不清方向的问题。患者也可能变的不专注，因此无法 照料他们自己日常身体的各种需要。阿兹海默症患者脑部其他对记忆很重 要的区域亦受到影响，例如基底前脑(basal forebrain)以及海马回 (hippocampus )。许多为阿兹海默症所苦的人死于其它的原因，像是肺炎 (pneumonia)。由诊断确定日算起，阿兹海默症的病人一4殳可有6-8年的寿 命，但仍许多患者存活超过20年。
目前市面上约有五种治疗阿兹海默症的药物获得美国食品药物管制局 (US Food and Drug Administration ，简称FDA)的认可。这些药物是胆 石咸酯分解酶抑制剂cholinesterase inhibitors (非商标名称分别为 tacrine and donepezil) Cholinesterase是乙酰月旦碱(acetylcholine)分解反应中的关4定酶，这些药物借着阻断胆石成酯分解酶(cholinesterase) 的作用来抑制乙酰胆碱(acetylcholine)的分解。两种药物都可以增加脑 中乙酰胆碱(acetylcholine)的含量。两种药物皆可延緩记忆的丧失，并 且有助于患者执行日常起居所需的动作。但很重要的一点是这些药物并不 能治愈阿兹海默症，它们只能减轻阿兹海默症的症状。此外，此些药品均 会对患者造成一些副作用，如恶心、头痛、腹泻、失眠、疼痛、幻觉或晕 眩等等，因此并非实用的阿兹海默症治疗药品。
如上所述，如有效的治疗以及预防阿兹海默症的患者，使其没有任何 明显的不良副作用，实为一具有实用性的思考方向。

发明内容
本发明的主要目的在于，克服现有的治疗阿兹海默症的药物存在的缺 陷，而提供一种新的治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备方法，所要 解决的技术问题是使其达到确实治疗与预防阿兹海默症的功效，且无明显 毒副作用，从而更加适于实用。
本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据 本发明提出的 一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，从红曲发酵物中进行 提炼而成，其包含莫那可林(monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质。
本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中每1克的组合物中该莫 那可一木(monacolins)含量大于100 yg。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中其中每1克的组合物中 该抗氧化物质含量大于10jug。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中每1克的组合物中该抗 发炎物质含量大于40jug。
前述的治疗与预防阿兹海默症的組合物，其中其中该莫那可林 (Monacolins)、该抗发炎物质与该抗氧化物质的重量比为90-10: 4-2: 1。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中该莫那可林 (Monacolins)、该抗发炎物质与该抗氧化物质的重量比为40: 2: 1。
本发明的目的及解决其技术问题还采用以下技术方案来实现。依据本 发明提出的 一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，其为红曲发酵物。
本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中所述的该组合物包含莫 那可^木(monacolins)与抗发炎物质。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中每1克组合物中该莫那 可林(monacol ins)含量大于200 ju g。前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中每1克组合物中该抗发
炎物质含量大于60jag。
本发明的目的及解决其技术问题另外还采用以下技术方案来实现。依 据本发明提出的一种治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法，其有效成
分的制备方法包含下列步骤清洁一米种并在一高压高温环境下进行灭菌； 将一红曲菌抹接种至一种菌培养基中并在一第一特定温度湿度环境、 一特
定震荡环境与一第一特定时限进行接菌；在该第一特定温度环境中进行搅 拌该种菌培养基并在一第二特定时限内持续提供一特定比例的水分；在一 第三特定时限内与该第 一特定温度环境中每隔一 固定时间进行适当搅拌来 达成后熟；收取完成发酵后的一红曲发酵物并在一第四特定期间内保持一 第二特定温度将其进行干燥化；以及将已干燥的该红曲发酵物磨成粉末状
并进行分析是否符合:成分比例，-:、。力、、4.,,、
前述的制备方法，其中该米种为 一在来米(Oryza satiVa L,， Japcmica)。
前述的制备方法，其中该高压高温环境是指在ln。C以及1 kg/cW的压 力环境中。
前述的制备方法，其中该种菌培养基其组成为至少sg该米种浸泡于蒸
馏无菌水100ml中。
前述的制备方法，其中该第一特定温度保持在3(TC。 前述的制备方法，其中该特定震荡环境是保持在100 - 150rpm之间。 前述的制备方法，其中该第一特定时限是指48小时之后。 前述的制备方法，其中该第二特定时限是指在72小时之内。 前述的制备方法，其中该特定比例的水分是指2(f/。的蒸馏无菌水。 前述的制备方法，其中该第三特定时限内是指在96小时之内。 前述的制备方法，其中该固定时间是指每IO个小时。 前述的制备方法，其中该第四特定期间是指在24小时之内。 前述的制备方法，其中该第二特定温度是指保持在55°C - 6(TC之间。 前述的制备方法，其中该成分比例条件是指该组合物包含莫那可林
(monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质，此三种物质的重量比为90-10:
4-2: 1。
前述的制备方法'其中该莫那可林(Monacolins)、该抗发炎物质与该 抗氧化物质的重量比为40: 2: 1。
前述的制备方法，其中该成分比例条件是指该组合物包含该组合物质 量的至少0. 01。/。的莫那可林(monacolins)、至少0. 004 %抗发炎物质、至 少0. 001%抗氧化物质。前述的制备方法，还包括将粉碎的红曲发酵物里加入药剂学常用辅 料，制备成胶嚢剂、锭剂、口服剂、颗粒剂。
本发明的目的及解决其技术问题另外再采用以下技术方案来实现。本 发明公开一种红曲发酵物在制备治疗阿兹海默症的药物中的应用。
本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。
前述的应用，其中红曲发酵物中包含
至少0. 01。/。质量百分比的莫那可林(monacolins);以及
至少0. 001%质量百分比的抗发炎物质。
前述的应用，其中红曲发酵物中还包含
至少0. 004 %质量百分比的抗氧化物质。
本发明的目的及解决其技术问题另外再采用以下技术方案来实现。本 发明公开一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，其包含包含如下有效成分 的红曲发酵物至少0. 01 。/。质量百分比的莫那可林(monacolins);至少 0. 004 %质量百分比的抗氧化物质；以及至少0. 001%质量百分比的抗发炎物质。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中该抗氧化物质为红曲抗 氧化酸(dimer，ic acid)、单宁(tannin)、酚化合物(phenol)、单元不饱 和脂肪酸(monounsaturated fatty acid)、超氧歧化酶与固醇类(sterols) 或超氧化物歧化酶(S叩eroxide dismutase; SOD)。
前述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其中该抗发炎物质为y-胺基 丁酸、(y-aminobutyric acid, GABA)、莫那斯辛(monascin)、安卡分拉 命(ankaflavin)、路柏庞克坦汀(rubropimctatin)、莫那斯克布林 (monascorbur i n)、路柏庞克胺 (rubropunctamine)、莫那斯克布胺 (monascorburatiiine) 、 i^各莫刃卩其斤辛A (xanthomonasin A) 、 J山7各莫刃卩其斤辛 B (xanthomonasin B) 、 (+)-莫那斯库糜酸((+)-raonas国ic acid)或(-)-莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid)。
借由上述技术方案，本发明治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备
作用的:力效。^ ' 一 、 、 P ,''''.'、、。、、
上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的 技术手段，而可依照-沈明书的内容予以实施，并且为了让本发明的上述和 其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举较佳实施例，并配合附 图，详细说明如下。


图1为本发明试验装置的示意图。图2为大鼠停留于明室直到进入暗室的时间统计图。
图3为本发明水迷宫装置与分区域示意图。
图4为本发明组合物于对类淀粉样蛋白40 (A (3 40)脑部输注的大鼠于参 考记忆试验与探测性试验(probe test)中的记忆学习能力影响图。
图5为本发明组合物于对脑部输注A (3 40的大鼠于工作记忆试验中的 记忆学习能力。
图6为本发明组合物于对脑部输注AP40的大鼠大脑皮质与海马回组 织中乙酰胆碱酶活性的影响图。
图7为脑部输注AP的大鼠大脑皮质与海马回组织中总抗氧化剂状态 (TAS)比较图。
图8为本发明组合物对于大鼠大脑皮质与海马回组织中丙二醛(MDA)浓 度的影响图。，， 一 ，成 ；人'.。， 一 召' —
(superoxide dismutase, SOD)活寸生的影响图。
图10为本发明组合物于对A (3 40脑部输注的大鼠大脑皮质与海马回组 织中活性氧原子(ROS)含量与海马回组织中 一氧化氮合成酶(iNOS)表现量 的影响。
图11为连续输注A (3 40至大鼠的海马回组织后，A (3 40的沉积示意图。 图12A-图12C为本发明的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法。
10
试验装置 11
明室 闸门
水迷宫装置 休息平台
12:暗室 13:
14:金属线 20:
21:圆形;永〉也 PI:
步骤100:清洁一米种并在一高压高温环境下进行灭菌。
步骤110:将一红曲菌抹接种至一种菌培养基中并在一第一特定温度湿 度环境、 一特定震荡环境与一第一特定时限进行接菌。
步骤120:在该第一特定温度环境中进行搅拌该种菌培养基并在一第二 特定时限内持续提供一特定比例的水分。
步骤130:在一第三特定时限内与该第一特定温度环境中每隔一固定时 间进行适当搅拌来达成后熟。
步骤140:收取完成发酵后的一红曲发酵物并在一第四特定期间内保持 一第二特定温度将其进行干燥化。
步骤150:将已干燥的该红曲发酵物磨成粉末状并进行分析是否符合一
成分比例条件。
步骤160:将制备完成的该红曲发酵物的粉末以一特定比例添加入可食 用的饮料中制备成一具有治疗与预防阿兹海默症的红曲饮品。步骤170:将制备完成的该红曲发酵物的粉末填充至一胶嚢中或是制备
成一锭剂。
具体实施例方式
为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功 效，以下结合附图及较佳实施例，对依据本发明提出的治疗与预防阿兹海默 症的组合物及其制备方法其具体实施方式
、方法、特征及其功效，详细说 明如后。
本发明为 一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，在介绍本发明的组合 物前，先就本发明的观念加以说明。阿兹海默症形成的主要因素为类淀粉
样蛋白(Amyloid (3 -protein, A |3 )于脑部大量沉积所造成，并导致神经传 导物质的缺乏与氧化发炎反应而使病情逐渐加重。A(3的产生即由切割酶 (secretase)只于类;定4分才羊前马区蛋白(Amyloid precursor protein, APP;M乍专 一性位置的切割后所产生的片段蛋白。剪切的酶包含a、 P及y -secretase。而A (3就是经过(3-secretase可以切断连j妄671 、 672的胺基 酸键结，及y-secretase对APP上713附近位置切割后可产生Ap片_|殳。 在酶对胺基酸序列上切割时，除了 1-40、 l-42片段之外也会产生其余的片 段。若APP单被a-secretase切割产生sAPP-cc与p10 kDa的片段，而plO 又可被y-secretase切割产生p3与p7片段，其中p3为一小片段的A (3 。 另外，若APP单被P-secretase切割产生sAPP-P与p12 kDa的片段，pl2 片段也可再次被y-secretase切割产生A (3与p7片段(Evinetal. 2003; Shoji et a1.1992)。这些小片段在脑中虽无聚集的能力，但可以证明不同 型态secretase的切割活性表J见。当APP经过p—secretase及y—secretase 的分解产生各型态的AP，其中可溶性的AP并不具毒性，必须经聚合形成 纤维束(fibrils)后对神经细胞才具有毒性。可溶的A(3并不具毒性，必须 经聚合形成AP fibrils后才可经由破坏胞内钙离子平衡与引发氧化压力 等机转毒杀神经细胞。AP聚合物亦能经由促进胞内tau蛋白的过磷酸化 (hyperphosphorylation)而干扰轴突的延展，造成细胞死亡。此外，A (3纤 维束尚可借由与脑中microglia与astrocyte膜上的特殊受器结合，将其 活化，前者会释放多种神经毒素，包括介白素-l(IL-l)、介白素-6(IL-6)、 肿瘤坏死因子(TNF- cc)等致发炎物质以及一 氧化氮、超氧阴离子等自由基 去攻击神经细胞，造成其死亡。近年发现，位于第19对染色体上的载脂蛋 白E(ApoE，apoIip叩roteinE)基因与阿兹海默症相关，所表现的ApoE与A (3迅速结合并沉积脑中形成老人斑块，会造成神经细胞的坏死。
此外，许多文献中是指出心血管疾病与阿兹海默症两者具有一定的相 关性。Martha等人经研究是指出以65岁以上的老人为调查对象，饮食中富含易导致心血管疾病的饱和脂肪酸的老人，经追踪调查平均在4年后有多
数的老人会罹患阿兹海默症；而相反的饮食中富多元不饱和脂肪酸与单元 不饱和脂肪酸的老人则有逆相关(Freund-Levi et al. 2006)。并有许多 研究证明引起阿兹海默症的AP的产生与细胞内脂质代谢有相关(Frears et al. 1999; Kuo et al. 1998; Roher and Kuo 1999)。近年来研究是指出A P会受到细胞内胆固醇的分布与胆固醇酯化作用而改变(Frears et al.
1999) 。 ApoE会促使血浆中胆固醇的含量提高，是造成心血管疾病发生的危 险因子之一。Puglielli等人于2001年是指出仓鼠的细胞内乙酰胆碱酶的 活性会与胆固醇脂的含量呈正相关(Puglielli et al. 2001; Zhao et al. 2005)。所以心血管疾病与阿兹海默症具有正相关性。
因此，本发明的组合物即着重于降低A p在脑中的沉积以及降低导致心 血管疾病的饱和脂肪酸，用以治疗阿兹海默症。
近年来红曲菌(M7/7^CM species)的相关研究日益增加。于未来的发 展上红曲发酵物将可被发展成为一复合式多功效的保健食品。红曲发酵物 中包含monacolin K、 y-胺基丁酸 (y-aminobutyr ic acid, GABA) 与抗 氧化物质。红曲发酵物(即红曲米)现用于治疗降血脂等的药物，其制备 方法已经非常成熟，如中国专利号971 00245. 2等所公开。
莫那可林K (Monacolin K)的别名包含洛伐史坦汀(lovastatin)，为胆 固醇合成的速率限制酶-羟曱基戊二酸辅酶A环袁酶 (3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase,画G CoA reductase) 的抑制剂，属于史坦汀(statin)类的化合物，临床上也已证实此类化合物 确实能有效改善心血管疾病(cardiovascular disease, CAD)。近年来的流 行病学研究也是指出以statin类药物治疗阿兹海默症病患，确实具有良好 的改善效果。在欧洲医师研究资料库(UK General Practitioners Research Database)中是指出以statin类药物治疗阿兹海默症时，有70%的病患具有 明显改善效果(Jick et al.2000);类似实验尚包含2000年Wolozin等人 以美国三家不同医院中60岁以上罹患阿兹海默症老人做为受试者，其诊断 结果是根据NINCDS-ADRDA (National Institute of Neurological and Communicative Disorders and Stroke and the Alzheimer's Disease and Related Disorders Association)的标准,此试马企是将受试者分为三组，A 组为控制组，B组为使用statins来治疗者，C組为以其他心血管疾病用 药(包含降血压药物)来治疗者，其结果令人惊讶的是以statins治疗病患 时，可使罹患阿兹海默症的程度下降70%，其中又以洛伐史坦汀 (lovastatin)与巴;各j戈史坦打(pravas tat in)的岁文果最好(Wolozin et al.
2000) 。
阿兹海默症患者脑中的烟石威酸(nicotinic)、毒蕈碱(muscarinic)、血清素(serotonin)、麸胺酸(glutamate)受器以及y-胺基丁酸(y -aminobutyric acid, GABA)、新肾上腺素(norepinephrine)等神经沖动传 递因子皆有缺损的现象。大脑在老化过程中体积会减少百分之十，最主要 是大脑皮层神经元的数目减少所致，在某些区域甚至会减少30-50%，另外 神经传导物质亦会减少，如乙酰胆碱、GABA、儿茶酚胺(catecholamine)等。 由于这些物质的减少，使大脑认知功能降低或记忆能力障碍。最早的症状 有记忆力减退，失去对事物的判断能力，容易迷失。到晚期时病人会出现 语言障碍、异常行为、痉挛、生活无法自理(Mohr et al. 1994)。
当粒腺体缺02或HA和OH.过多时，会导致高反应性OH.的形成。而 A P经自由基氧化后又会导致不溶性A生成，使阿兹海默症更加恶化(Hsieh and Tai 2003)。实验发现口服抗氧化剂如维生素C维生素E合并制剂可有 效减缓阿兹海默症引起的现象(Yallampalli et al. 1998; Yamada et al. 1999)。另外像是神经酰胺(ceramlde)， 一种天然的神经鞘质，可对抗A (3 及FeSO,导致海马回神经损伤的作用(Abousalham et al. 2002)红曲的抗氧 化能力于1999年被Aniya等人提出，红曲发酵物中红曲抗氧化酸 (dime濯ic acid)的抗氧化机制可得知其可清除-0H、 02 、 ferryl-Mb、 peroxyl radicals与对脂质过氧化(LP0)的抑制备用，其会提供一个电子 给氧化物使本身氧化为一氧化氮自由基(nitroxide radical),而此一氧化 氮自由基(nitroxide radical)会再被清除掉而达到抗氧化的效果(Taira et al. 2002)。红曲发酵物的抗氧化效果可运用在阿兹海默症的预防上， 以避免病情受氧化自由基的攻击而加重。
实验例 分组及给药
本发明的研究所采用的动物为购自台湾大学医学院实验动物中心的 Wistar品系雄性大鼠，周龄8周，体重约250g，每组7只，饲养于具空调 的空间，温度维持在23土rC灯光控制采12小时亮12小时暗(08: 00灯亮、 20:00灯暗)，食物与水不予限制。大鼠预养至体重达到300 g时进行实验 分组与脑部输注泵植入手术，各组的每日本发明组合物摄取量与A(3 40的 注射量如表一。Vehicle组为进行手术但不输注A (3 40以作为正常记忆学习 能力的大鼠，A P组为进行手术输注A P 40以作为记忆学习能力障碍的阿兹 海默症大鼠，本实验的本发明组合物喂食剂量相当于是成人(170cm, 65kg) 每日食用2g的本发明组合物，RH组为高剂量的本发明组合物喂食组，'而 LS组则为每日喂食与RL组相同剂量的lovastatin(l. 43 mg/kg rat),用 于比较单纯莫那可林K与含莫那可林、抗氧化物与抗发炎物质的本发明组 合物在阿兹海默症治疗与预防的效果。阿兹海默症大鼠以A(3 40连续28天输注于大鼠脑部，使A(3 40直接于 脑部大量沉积而引发阿兹海默症，试验期间每日喂食本发明组合物或与本 发明组合物中的莫那可林K相同浓度的1 ova s ta t i n以探讨本发明组合物对 于已生成A (3毒性的抑制效果并评估对记忆学习能力的影响。
本发明的实验结果显示，以连续28天输注A (3 40于大鼠脑部，会提升 脑部乙酰胆;咸酶活性、活性氧原子(reactive oxygen species, ROS)生成 量与脂质过氧化的程度，并降低总抗氧化力与超氧歧化酶(s叩eroxide dismutase， SOD)活性。而本发明组合物的喂食可显著抑制这些因脑部输注A P40所造成的损伤，并且其效果较lovastatin药物治疗组佳。此外，借由 抑制氧化发炎反应而使输注的A |3 40无法于海马回组织中大量沉积。本发 明组合物被证实具降低阿兹海默症危险因子与改善记忆学习能力的效果， 且其效果会较lovastatin药物更具显著效果。
本发明的试验分组如表一所示
群组Af3本发明组合物Lovastatin
注入(monacolin K) (mg/kg只天)(mg/kg只天)
Vehicle_——
A(3+——
+一1. 43
—
RH755 (7.20)一
表一
实验l:
本发明的实验1的装置如图1所示，该试验装置10包含大小相同的明 室11与暗室12,两室中央有一 10(W) x lo(D)cm的闸门13，当闸门13开 启时，明室11与暗室12即可相通。明室ll具有光照，而暗室12不具光 照，且其底部设有间隔1cm平行排列的金属线14 ，并通有电流。实验流程 为先将各组的大鼠轮流置入明室11，且同时开放闸门13。待大鼠进入暗室 12后,立即关闭闸门13，同时于金属线14通以电流(100V, 0. 3mA， 2sec)， 待电刺激后5秒，自暗室取出大鼠，归回饲养笼。如大鼠300秒后未进入 暗室12，则强迫大鼠进入暗室12且关闭闸门13,同时将暗室12底部金属 线14通以电流，再归回饲养笼。测定期于训练后24小时、48小时，再 将大鼠置入明室11,同时并开启闸门13，记录大鼠在明室11的滞留时间 (step-through latency)。当于明室11的滞留时间大于300秒时，则称大 鼠的学习记忆能力正常。
14大鼠停留于明室11直到进入暗室12的时间可视为评估被动回避试验 中记忆学习能力的是指标。如图2所示，所有大鼠因趋暗的特性而在第一
次试验时立即进入暗室12之中，暗室12中所释出的电击刺激使具正常记 忆学习能力的大鼠于下次试验中惧怕再进入暗室12。因此，于第二次试验 中各组实验动物停留在明室11的时间将因记忆学习能力的差异而具显著差 异。第二次试验的结果显示，AP组于明室所停留的时间会显著低于 vehicle组。试验组RL与RH组于明室的停留时间会显著长于A0组 (/K0. 05)。 Lovastatin组的效果虽然不及具相同monacolin K含量的RL 组，但记忆学习的效果依然显著高于A(3组。 实验2:
本发明的另一试验2的装置如图3所示，其为一水迷宫装置20,其圓 形泳池21的直径为140cm，高度45 cm,泳池中含有一可移动的^^息平台 Pl(或称逃逸平台，escape platform)。平台的直径为12cm,高度为25cm。 实验进行前圓形泳池21须加水至27 cm的液面高度。圆形泳池21区分为 四个象限(I、 II、 III与IV区)，并设置5个起始点，休息平台P1放置于 任一 象限的中心点。试验期间并于泳池中心点的正上方架设摄影机以记录 实验动物的游泳路径。
本发明组合物对脑部输注A P的阿兹海默症大鼠的参考记忆学习能力 损伤的影响如图4所示。实验动物自水迷宫装置20起点至寻得休息平台Pl 的时间视为评估参考记忆试验的是指标。由第2次至第9次的记忆训练的 结果显示，AP输注的阿兹海默症大鼠总是较具正常记忆能力的vehicle组 花费较长的时间去找到休息平台Pl，但喂食本发明组合物的阿兹海默症大 鼠(RL与RH组)则可显著降低寻找的时间(/7<t). 05)。 Lovastatin饮食虽 然可较A (3组花费较短的搜寻时间，但是其效果均低于RL组与RH组。相同 的搜寻时间将呈现出相类似的游泳路径长度。此外，各组实验动物之间的 游泳速度均不具显著差异(data not shown) (/7>0. 05)。
空间性探测试验紧接于第24天的最后一次参考记忆试验。休息平台Pl 将在参考记忆试验结束后自水迷宫装置20移出，而实验动物徘徊于原本放 置休息平台Pl的象限中的时间视为空间性探测试验的记忆学习能力是指 标。结果如图4A所示，A P组会于目标象限中搜寻的时间会显著低于vehicle 组OKO. 05) 。RL组与RH组则在目标象限的搜寻时间分别较A P组提高38. 2% (p<t). 05)与48.0% (p<t). 01)，证明本发明组合物确实可改善阿兹海默症大 鼠的记忆学习能力损伤。游泳路径可有助于判断实验动物于空间性探测试 验中记忆学习能力表现的真实性。图4B显示A(3组在空间性探测试验中无 方向性与无目标性的寻找目标象限，且游泳的路径遍及整个圆形泳池21。 相反地，具有较佳记忆学习能力的RL组、RH组与vehicle组会直接游入目标象限中，且花费较长的时间于目标区域徘徊。然而，1 ova s t a t i n 4t食组 依然呈现介于RL组与AM且的效果在记忆学习能力的改善(图4B与图4C)。 工作记忆试验为短期记忆学习能力评估方式的一种，其结果如图5所示，A P组在寻找1木息平台Pl的时间会显著长于vehicle组0 <t). 01)。然而， RL组与RH组在工作记忆试验中可呈现如同正常记忆能力的vehicle组的记 忆学习效果，并分别较A P组缩短57. 3%与58. 9%的搜寻时间(/ <t). 01)。 LS组虽然可较A0组显著缩短26. 7%的搜寻时间(;7<1). 05)，但其效果均较 低于RL组与RH组(p復05)。
A (3已被证实为阿兹海默症病患记忆学习能力不足的主要危险因子 (Hashimoto et al. 2005; Stephan and Phillips 2005)。输注A(3 40于 大鼠脑部的侧脑室的方式已被证实可成功建立阿兹海默症的动物模式 (Stephan and Phillips 2005)。而此种方式建立的模式动物亦具有记忆行 为与学习能力不足的特性(Kar et al. 1998; Schubert et al. 1995; Townsend and Pratico 2005)。输注的A P会诱发自由基与活性氧原子并造 成神经元的损伤与突触延伸受到抑制，进而造成记忆学习能力的不足 (Townsend and Pratico 2005)。因此，目前有数研究均以抗氧化与抗发炎
物质降低这些阿兹海默症脑部中的氧化发炎危险因子与减轻记忆学习能力 的受损(Chauhan et al. 2004; Cordle et al. 2005)。
莫氏(Morr i s)水迷宫试验为评估记忆学习能力的主要方法之一 ，其中 参考记忆试验所代表的是一种长期记忆能力的评估方法，而工作记忆试验 则属于短期记忆能力的评估方式。根据上述记忆学习试验的结果显示，喂 食一倍剂量与五倍剂量本发明组合物的阿兹海默症大鼠可缩短参考记忆试 验与工作记忆试验的搜寻时间(/7<0. 05)。此外，本发明组合物饮食组更可 在空间性探测试验中延长于目标象限的搜寻时间。这些结果可清楚的是指 出喂食本发明组合物可改善记忆学习能力以较短的时间寻得水迷宫的休息 平台。相反地，未治疗的阿兹海默症大鼠则以无目标性的四处搜寻整个水 迷宫，因此在参考记忆与工作记忆试验中均需花费较多的时间。
莫那可林K(Monacolin K)为红曲发酵物降血脂的主要功效成分之一， 而statin类化合物因为具有抑制脑部A |3的生成与抗发炎的效果，已^C认 为是治疗阿兹海默症的新兴药物(Chauhan et al. 2004; Li et al. 2006)。 多数有关阿兹海默症治疗研究均使用statins以降低阿兹海默症的基因转 殖小鼠脑部AP的生成(Yamada et al. 1999)。目前所知的研究中尚未以 1ovastatin去减轻A(3输注的阿兹海默症模式大鼠的记忆学习能力的损伤。 本发明以1 ova s ta U n替代本发明组合物中的monaco 1 in K ，以探讨本发明 组合物中monacolin K是否为减轻阿兹海默症记忆学习能力损伤的唯一物 质。但由上述记忆学习试验的结果是指出，lovastatin喂食组在减轻记忆学习能力损伤的效果均4交弱于具相同monacolin K浓度的RL组。因此，证 实本发明组合物中的monacolin K并非唯一减轻A (3引起记忆能力损伤的功 效性成分。食用monacolin K确实可以有效改善因为A^所造成的阿兹海 默症的症状。
目前阿兹海默症的治疗多着重于抑制乙酰胆碱酶活性以提高乙酰胆碱 浓度与改善认知与记忆4亍为(Nabeshima and Nitta 1994)。阿兹海默症才莫 式动物建立的相关研究亦证实以连续输注A(3至大鼠脑部将造成胆;咸神经 功能衰退与不足的神经毒性。研究亦证实脑部输注A P阿兹海默症大鼠的脑 部乙酰胆碱含量会较正常大鼠明显不足(Arendt et al， 1984; Darvesh et al. 2004)。随着乙酰胆碱浓度的下降与乙酰胆碱酶活性的增加将使神经元 的丧失更为严重(Stephan and Phillips 2005)。此外，乙酰胆碱酶活性 增加亦被是指出会造成的聚合程度更为严重，且形成更为安定与毒性更 强的纤维化类淀粉样蛋白(AP fibrils) (St印han and Phillips 2005)。 因此，抑制乙酰胆碱酶的活性被认为是间接减轻引发记忆学习能力不足 的神经保护作用。
图6为本发明组合物于对脑部输注AP40的大鼠大脑皮质与海马回组 织中乙酰胆碱酶活性的影响，图中是指出A P组大脑皮质的乙酰胆碱酶活性 会较vehicle组提高50.5%,而于海马回组织中则提高1". 1%。喂食一倍 与五倍剂量的本发明组合物均可显著抑制受A (3所提高的乙酰胆碱酶活 性，然而lovastatin却对大脑皮质与海马回组织中的乙酰胆石成酶活性不具 抑制效果。此结果证实红曲发酵物中具有抑制乙酰胆碱酶活性的物质，而 此物质应不是monacolin K而是其他功能性代谢物。鲜少研究是指出 1 ovastatin可抑制乙酰胆碱酶的活性，有研究是指出lovastatin对于乙酰 胆碱酶的活性不具有显著的抑制效果。此研究结果与本发明的趋势相符合。 除了 monacolin K外，红曲发酵物的复合性功效代谢物可能包含其他乙酰 胆石咸酶抑制剂。然而，红曲发酵物中的代谢物GABA亦是为一种神经传导 物质，亦有助于改善阿兹海默症的认知与记忆行为能力。
A(3已被证实会引发阿兹海默症患者脑部的氧化压力。因此，抑制A(3 诱发的氧化压力被认为是阿兹海默症药物开发的重要是指标。如图7所示， 脑部输注A P将造成大脑皮质与海马回组织中的总抗氧化剂状态(total antioxidants status, TAS)分别较vehicle组下降20.9°/。与20.4°/。。喂 食lovasUUn仅能提高大脑皮质的TAS 13. 9%，但于海马回组织中则不具 效果。RL组的大脑皮质与海马回组织中TAS则被显著提高24. 6%与46.2%。 然而，本实验结果可见喂食五倍剂量本发明组合物的阿兹海默症大鼠的大 脑皮质与海马回组织中的TAS均显著高于组。
本发明组合物对于大脑皮质与海马回组织中丙二醛(MDA)浓度的影响，
17如图8所示。大脑皮质与海马回组织中MDA浓度于脑部输注A (3后会分别 被显著提高95. 3%与112%,但此MDA浓度的上升可因为提高本发明组合物 的喂食剂量而有效地再度被降低。
RL组与RH组的大脑皮质与海马回组织中超氧歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性亦呈现相类似的神经元保护效果，即如图9所示。 虽然大脑皮质与海马回组织中的SOD活性会受脑部输注AP而分别降低 19.8%与25.2%，但喂食一倍剂量的本发明组合物会分别提高大脑皮质与 海马回组织的海马回组织中的SOD活性27. 2%与52,7%, 5倍的本发明组 合物更可使其分别提升27. 2%与60. 9%。
由上述的结果得知，记忆学习能力受损的阿兹海默症模式大鼠，其大 脑皮质与海马回组织均有严重的氧化压力。但这些氧化压力可因为每曰喂 食本发明组合物而得到改善，且其效果不仅具剂量效应关系，且更胜于 lovastatin喂食组。
红曲发酵产物中的抗氧化物质目前已被提到的有红曲抗氧化酸 (dimerumic aci d)、单宁(tannin)、酚化合物(phenol)、单元不饱和脂肪 酸(mono簡aturated fatty acid)、超氧歧化酶与固醇类(sterols) (Aniya et al. 1999; Wang et al. 2006)。
是故本发明的抗氧化物质可从红曲抗氧化酸(dimerumic acid)、单宁 (tannin)、酚化合物(phenol)、单元不饱和月旨肪酸(monounsaturated fatty acid)、 超氧歧化酶与固醇类(stero Is)与超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase; SOD)中任选一种。
本发明的体内动物试验的结果如图IOA所示，AP的脑部输注会使大鼠 大脑皮质与海马回组织中的活性氧原子(reactive oxygen species, R0S) 浓度分别显著提高39. 8%与28. 7% (p<0. 05)。每日喂食本发明组合物的阿 滋海默症大鼠的大脑皮质与海马回组织中R0S浓度均会降低。其中RL组 可分别降低16. 0% (p<0. 05)与21. 2% (一. 05) ， RH组则可分别降低35. 4% 0 <t). 01)与21.3% 0^0.05)。 Lovastatin饮食会降低大脑皮质中R0S浓 度29.3%，并于海马回組织中降低15.7% ( p<t). 05)。诱发性一氧化氮合 成酶(iN0S)于海马回组织的表现量图10B的免疫组织染色所示，AP的输 注显著增加i冊S的表现量，在RL组与RH组的海马回组织中可发现iNOS 的表现量会被显著受到抑制。但亦可发现对于抗发炎的效果lovastatin喂 食組较差于1倍与5倍剂量的本发明组合物喂食组。
阿兹海默症大鼠的大脑皮质与海马回组织中R0S浓度会因提高喂食本 发明组合物的剂量而有更为显著下降。虽然lovastatin曾经证实可有效于 细胞模式中抑制A |3所引发的发炎反应，但这样的效果并未在动物模式中 被证实，且statins的抗发炎效果亦未被应用于减经脑部输注的阿兹海默症大鼠的记忆学习能力损伤。本研究证实lovastatin的喂食可显著 降低脑组织中的R0S含量与iN0S的表现量，但这些效果稍劣于本发明组 合物饮食组。近年来红曲次级代谢物的保健功效已逐渐被开发研究，因此， 许多抗发炎的物质亦陆续被提出，其中包含多种形式的莫那可林 (monacol ins) 、 6种红曲代谢物(azaphi lones): 莫那斯辛(monascin)、 安 卡分拉命(ankaflavin)、路柏庞克坦汀(rubropunctatin)、莫那斯克布林 (monascorbur in) 、 3各^白庞克胺 (rubropunctamine)与莫刃卩其斤克布胺 (monascorburamine) ， 2种伏瑞喃萨弗莱德(furanoisophthalides): 仙洛 莫刃卩,斤辛A (xanthomonasin A) 与j山》各莫刃(^其斤辛B (xanthomonasin B); 及2种胺基酸(amino acids): (+)-莫那斯库糜酸((+)-monascumic acid) 与(-)-莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid) (Schubert et al. 1995)。
因此，monacolin K确实并非抑制A |3引起的发炎反应的唯一代谢物。 Akihisa等人(2005)曾于小鼠动物4莫式中以红曲发酵物抑制致发炎物质 (12-0-tetradecanoylphorbo卜13-acetate; TPA)所引起的发炎反应。并 i正实主要的4元发炎物质为 azaphilones类与 furanoisophthalides类的
究，红曲发酵物抑制A (3 "发的发炎反应主要是:自于monadun K与 其他抗发炎物质共同呈现的协同机制。
是故本发明所提的发炎物质可以从Y -胺基丁酸(Y -aminobutyric acid, GABA)、莫那斯辛(monascin)、安卡分拉命(ankafl avin) 、 3各^白^^> i旦汁(rubropunctatin)、 莫那其斤克布冲木(monascorburin) 、 3各才白庞克胺 (rubropimctamine)、莫刃卩其斤克布胺(monascorburamine) 、 4山〉各莫刃卩其斤辛A (xanthomonasin A)与仙洛莫那斯辛B (xanthomonasin B) 、 (+)-莫那斯库 糜酸((+)_monascumic acid)与(-)-莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid) 中任选一种。
经28天连续输注A P 40至大鼠的海马回组织后，由图11中与vehicle 组比较结果得知，A(3组的海马回组织中有大量A(3 40的沉积。由上述结果 与前人研究可得知输注的A0 4O会于脑部中引起氧化压力与发炎反应，进 而造成AP40的沉积。当沉积的A(3 40含量越多时即引发更为严重的氧化 压力与发炎反应，反复不断恶性循环会造成脑部损伤持续加重。Lovastatin 具有抑制A |3 40引起发炎反应的效果，但在对抗氧化压力的能力则较为薄 弱。因此由结果可发现，LS组的海马回组织中的A (3 40虽然些微低于A (3组，但依然可发现大量的A (3 40的沉积。喂食本发明组合物的RL组 与RH组则有较为显著降低Ap40累积量的效果。本发明组合物降低 40于海马回组织的累积量的原因主要归因于其对氧化压力与发炎反应的抑 制。输注至脑部的A (3 40不受氧化发炎物质促进而沉积。使Ap40无法对于脑部造成损伤，进而有效改善记忆学习的能力。
实施例1:
由于本发明的治疗与预防阿兹海默症的莫那可林(Monacolins)、抗发 炎物质与抗氧化物质的组合物均可于红曲发酵物提供改善阿兹海默症的症 状，其中在第一实施例中，每一克的本发明组合物中莫那可林(Monacolins) 有效最低含量至少大于100jLlg，而每一克的本发明组合物中抗氧化物质有 效最低含量至少大于10^g，而每一克的本发明組合物中抗发炎物质有效最 低含量至少大于40|iig;其中莫那可林(Monacolins)、发炎物质与抗氧化物 质的最佳重量比例为40: 2: 1为第一实施例中达到最佳功效，此外莫那可 林(Monacolins)、发炎物质与抗氧化物质的有效重量比例范围为90-10: 4-2: 1均可加以实施，并应用实施在锭剂、胶嚢剂、颗粒剂、口服剂等方 式让消费者服用。
实施例2:
此外，在第二实施例中，使用莫那可林(Monacolins)、抗发炎物质的 组合物，也可治疗与预防阿兹海默症，当每一克的本发明组合物中莫那可 林(Monacolins)有效最低含量至少大于200 |i g与每一克的本发明组合物中 抗发炎物质有效最低含量至少大于60|ig的组合物中，亦可以有上述过程 中的效用；其中莫那可林(Monacolins)与发炎物质的最佳重量比例为10: 1为第二实施例中达到最佳功效者，此外莫那可林(Monacolins)与发炎物质 的有效重量比例范围为45-10: 3-1，均可在第二实施例中加以实施，并 应用实施在锭剂、胶嚢剂、颗粒剂、口服剂等方式让消费者服用。
在红曲发酵物内所含的抗发炎物质为Y -胺基丁酸(Y -aminobutyric acid， GABA),且红曲发酵物为一天然食品，可通过特定的方式加以发酵提 炼，因此对人体不会产生任何明显不良的副作用。故若将红曲发酵物当做 治疗阿兹海默症的调理食品，其效果不但显著，且并无一般药品会令患者 产生多种的副作用，实为一造福人群的发明。
实施例3:本发明组合物的制备
请参照图12A至图12C为应用于本发明的治疗与预防阿兹海默症组合
物的制备方法，说明如下
首先，先要清洁一在来米(Oryza satiVaL. ， Japonica)，并在121。C、 1 kg/ci^的压力环境中下进行灭菌(步骤100);
然后将红曲菌抹接种至种菌培养基，并保持在30°C、 125 rpm振荡培 养约48小时后便可进行接菌，该种菌培养基其组成为至少Sg该米种浸泡 于蒸馏无菌水100ml中；秤取固态培养基500g，清洗后浸水6-8小时。用 棉布滤水后，置于曲布之上，铺平在曲盘中，杀菌(in°C, 20_25min)。 再进行洒水100 raL。进行第二次杀菌(12rC, 20 min)，并于冷却后进行接菌。取种菌液接入固态基质中(5W,并充分搅拌均匀。接着在该第一特 定温度环境中进行搅拌该种菌培养基并在一第二特定时限内持续提供一特
定比例的水分(步骤120),此一第二特定时限是指在72小时之内，此一该 特定比例的水分是指20%的蒸馏无菌水，在72小时内，每隔24小时便搅拌 该种菌培养基并补充20%的蒸馏无菌水并在3(TC恒温箱中培养，然后在一 第三特定时限内与该第 一特定温度环境中每隔一 固定时间进行适当搅拌来 达成后熟(步骤130),后熟是指让代谢物生成的阶段，此一第三特定时限 内是指在96小时之内。此一固定时间是指每10个小时。在96小时之内， 平均每隔IO个小时针对种菌培养基进行适当的搅拌，然后收取完成发酵后 的一红曲发酵物并在一第四特定期间内保持一第二特定温度将其进行干燥 化(步骤140)，此一第四特定期间是指在24小时之内，此一第二特定温度 是指保持在55-60X:。此步骤为收曲，将完成发酵后的红曲发酵物于烘箱内 进行24小时6(TC的干燥程序，接着将已干燥的该红曲发酵物磨成粉末状并 进行分析是否符合一成分比例条件(步骤150)，此一成分比例条件是指该组 合物包含一莫那可林(monacolins)、 一抗发炎物质与一抗氧化物质，此三 种物质的有效重量比例范围为10: 4: l至90: 2: 1，在这范围中，就确认 是符合再该成分比例条件之中，若不是则结束本流程，因为是失败的制备 过程；若确认在范围中，更有步骤A与步骤B,请请参阅图UB与图UC, 步骤A之后，将制备完成的该红曲发酵物的粉末以一特定比例添加入可食 用的饮料中制备成口服剂(步骤160),此一特定比例是指在1. 0-4. 0°/。之间。
步骤B之后，将制备完成的该红曲发酵物的粉末填充至一胶嚢中或是 制备成一锭剂(步骤170)。
本实施制备方式可通过传统曲盘进行培养，制备较小型的曲盘，长、 宽、高各约20 x 30 x 5 cm;培养时底层放置曲布包裹固态基质，此有 利于翻曲，同时可以保持湿度；上层再盖上一层曲布以隔绝外界的污染， 同时并可保持发酵过程红曲发酵物的湿度。整个培养过程于开放式空间进 行，是故，通过本制备方式将可以实施本发明的组合物，并可应用在锭剂、 胶嚢剂、颗粒剂、口服剂等。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式 上的限制，虽然本发明已以较佳实施例公开如上，然而并非用以限定本发 明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利 用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但 凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所 作的任何简单修改、等同变化与修饰，如其他利用含有莫那可林 (Monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质来治疗阿兹海默症的任何物品均 仍属于本发明技术方案的范围内。
权利要求
1. 一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，从红曲发酵物中进行提炼而成，其包含莫那可林(monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质。
2. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中每1克的组合物中该莫那可林(monacolins)的含量大于100jug。
3. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中每1克的组合物中该抗氧化物质的含量大于10)ig。
4. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中该抗氧化物质为红曲抗氧化酸(dimerumic acid)、单宁(tannin)、 酚化合物(phenol)、单元不饱和月旨肪酸(mo訓nsaturated fatty acid)、 超氧歧化酶与固醇类(sterols)或超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase; S0D)。
5. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中每1克的组合物中该抗发炎物质的含量大于40j^g。
6. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中该抗发炎物质为Y-胺基丁酸、(Y -aminobutyric acid， GABA)、莫 那斯辛(monascin)、 安卡分拉命(ankaf lavin)、 路柏庞克坦汀 (rubropunctatin)、 莫那其斤克布4木(monascorburin) 、 3各柏庞克胺 (rubropunctamine)、莫刃卩-斤克布胺(monascorburamine) 、 ^山》各莫刃卩其斤辛A (xanthomonasin A)、仙洛莫那斯辛B (xanthomonasin B) 、 (+)-莫那斯库 糜酸((+)-monascumic acid)或(-)-莫那斯库糜酸((-)-画ascuraic acid)。
7. 根据权利要求1所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中该莫那可林(Monacolins)、该抗发炎物质与该抗氧化物质的重量比 为90 - 10: 4 - 2: 1。
8. 根据权利要求7所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中该莫那可林(Monacolins)、该抗发炎物质与该抗氧化物质的重量比 为40: 2: 1。
9. 一种治疗与预防阿兹海默症的组合物，其为红曲发酵物。
10. 根据权利要求9所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中该组合物包含莫那可林(monacolins)与抗发炎物质。
11. 根据权利要求9所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中每1克组合物中该莫那可林(monacolins)含量大于200jag。
12. 根据权利要求9所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在 于其中每1克组合物中该抗发炎物质含量大于60"g。
13. 根据权利要求9所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征在于其中该抗发炎物质为Y-胺基丁酸、(y-aminobutyric acid， GABA)、莫 那其斤辛(monascin)、 安卡分^立命(ankaf lavin) 、 ^各^白庞克iE打 (rubropunctat in)、 莫刃卩其斤克布4木(monascorbur in) 、 3各#白庞克胺 (rubropimctamine)、莫刃卩其斤克布胺(monascorburamine) 、 ^山〉各莫刃卩其斤辛A (xanthomonasin A)、仙洛莫那斯辛B (xanthomonasin B) 、 (+)-莫那斯库 糜酸((+)-monascumic acid)或(-)-莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid)。
14. 一种治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法，其有效成分的制 备方法包含下列步骤清洁一米种并在一高压高温环境下进行灭菌；将一红曲菌株接种至一种菌培养基中并在一第一特定温度湿度环境、 一特定震荡环境与一第一特定时限进行接菌；在该第一特定温度环境中进行搅拌该种菌培养基并在一第二特定时限内持续提供一特定比例的水分；在一第三特定时限内与该第 一特定温度环境中每隔一 固定时间进行适当搅拌来达成后熟；收取完成发酵后的一红曲发酵物并在一第四特定期间内保持一第二特 定温度将其进行干燥化；以及将已干燥的该红曲发酵物磨成粉末状并进行分析是否符合一成分比例 条件。
15. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该米种为一在来米(Oryza satiVa L. , Japonica)。
16. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该高压高温环境是指在ln。C以及l kg/cW的压力环境中。
17. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该种菌培养基其组成为至少5g该米种浸泡于蒸馏无菌水 100ml中。
18. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第一特定温度保持在30°C。
19. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该特定震荡环境是保持在10 0 - 15 0 r pm之间。
20. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第一特定时限是指化小时之后。
21. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第二特定时限是指在72小时之内。
22. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该特定比例的水分是指20%的蒸馏无菌水。
23. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第三特定时限内是指在96小时之内。
24. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该固定时间是指每IO个小时。
25. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第四特定期间是指在24小时之内。
26. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该第二特定温度是指保持在55°C - 6(TC之间。
27. 根据权利要求14所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该成分比例条件是指该组合物包含莫那可林 (monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质，此三种物质的重量比为90-10: 4-2: 1。
28. 根据权利要求27所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于其中该莫那可林(Monacolins)、该抗发炎物质与该抗氧化物质 的重量比为40: 2: 1。
29.其特征在于该成分比例条件是指该组i物包;该组合物质量的至少0. 01%的莫那可林(monacolins)、至少0. 004 %抗发炎物质、至少0.001%抗氧化 物质。
30.根据权利要求29所述的治疗与预防阿兹海默症组合物的制备方法， 其特征在于还包括将粉碎的红曲发酵物里加入药剂学常用辅料，制备成 胶嚢剂、4t剂、口服剂、颗粒剂。
31 、红曲发酵物在制备治疗阿兹海默症的药物中的应用。
32、 如权利要求31所述的应用，其特征在于，其中红曲发酵物中包含 至少0. 01 。/。质量百分比的莫那可林(monacolins);以及至少0. 004 %质量百分比的抗发炎物质。
33、 如权利要求31所述的应用，其特征在于，其中红曲发酵物中还包含至少0. 001%质量百分比的抗氧化物质。
34、 如权利要求31所述的应用，其特征在于，该抗氧化物质为红曲抗 氧化酸(dimer腦ic acid)、单宁(tannin)、酚化合物(phenol)、单元不饱 和脂肪酸(monounsaturated fatty acid)、超氧歧化酶与固醇类(sterols) 或超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase; SOD)。
35、 如权利要求31所述的应用，其特征在于，该抗发炎物质为y-胺 基丁酸、(y -aminobutyric acid, GABA)、莫那斯辛(monascin)、安卡分 拉命(ankaf lavin)、路柏庞克坦汀(rubropunctat in)、莫那斯克布林(monascorburin) 、 3各柏庞克胺 (rubropunctamine)、 莫那其斤克布胺 (monascorburamine) 、 ^f山〉各莫刃卩4斤辛A (xanthomonasin A) 、 j山〉各莫刃P其斤辛 B (xanthomonasin B) 、 (+)_莫那斯库糜酸 ((+)-monascumic acid)或(_) -莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid)。
36. —种治疗与预防阿兹海默症的组合物，其包含包含如下有效成分 的红曲发酵物至少0. 01。/o质量百分比的莫那可林(monacolins); 至少0. 001%质量百分比的抗氧化物质；以及 至少0. 004 %质量百分比的抗发炎物质。
37. 根据权利要求1项所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征 在于其中该抗氧化物质为红曲抗氧化酸(dimerumic acid)、单宁(tannin)、 酚化合物(phenol)、单元不饱和月旨肪酸(mo謂nsaturated fatty acid)、 超氧歧化酶与固醇类(sterols) 或超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase; SOD)。
38. 根据权利要求1项所述的治疗与预防阿兹海默症的组合物，其特征 在于其中该抗发炎物质为Y-胺基丁酸、(Y-aminobutyric acid, GABA)、 莫那斯辛(monascin)、安卡分拉命(ankaflavin)、路柏庞克坦汀 (rubropunctatin)、 莫刃卩其斤克布4木(monascorburin) 、 3各^白庞克胺 (rubropunctamine)、莫刃卩其斤克布胺(monascorburamine) 、 ^f山〉各莫刃卩其斤辛A (xanthomonasin A)、仙洛莫那斯辛B (xanthomonasin B) 、 (+)-莫那斯库 糜酸 ((+)-monascumic acid)或(-)-莫那斯库糜酸((-)-monascumic acid)。
全文摘要
本发明公开一种治疗与预防阿兹海默症的组合物及其制备方法，其为一包含莫那可林(monacolins)、抗发炎物质与抗氧化物质的组合物。利用包含此三类物质的组合物来治疗与预防阿兹海默症，并通过本发明的制备方法加以实施，可达到确实治疗与预防以及不会产生明显毒副作用的功效。
文档编号A61K36/06GK101468046SQ20071030612
公开日2009年7月1日 申请日期2007年12月28日 优先权日2007年12月28日
发明者李俊霖, 潘子明 申请人:晨晖生物科技股份有限公司