专利名称：：鬼箭羽在抗iv型变态反应药物中的应用的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及医药
技术领域：
，具fr^及鬼箭羽在抗iv型变态反应药物中的应用。背彔技术IV型变态反应又称迟发型变态反应，是以单核细胞浸润和细胞变性坏死为主要特征的局部变态反应性炎症，由致敏T淋巴细胞与相应抗原结合而引起，抗体和补体均不参与。该类反应发生较迟缓，一般需经4872小时。当致敏T淋巴细胞与相应抗原结合后，刺激耙细胞改变细胞膜通透性，使细胞内K+逸出，Na+进入细胞，结果使细胞的渗透压发生改变，细胞膨胀，最后裂解。但参与该反应的致敏T淋巴细胞并未破坏，仍可继续破坏其他靶细胞。另外，致敏T细胞在杀伤靶细胞时，还会释放出各种淋巴因子，弓l起单核细胞浸润为主的炎症变化，甚至坏死。主要病变是以单核细胞为主、由溶酶体酶类引起的组织坏死。除接触性皮炎和某些自身免疫性疾病外，其他W型变态反应都无个体差异。W型变态反应的发病机理与细胞免疫反应基本相同，两者同时并存。由此可见，一方面，因细胞免疫的防护作用而对机体有利，另一方面，导致组织细胞损伤而对机体有害。目前认为，致敏T淋巴细胞的形成是发生本反应的关键。传染性变态反应、接触性皮炎、异体组织移植排斥反应等都属IV型变态反应。鬼箭羽&o/yw肪aiatesr(Th皿b.)Sieb.属卫茅科植物，又叫四棱麻，四方柴，湖北省恩施少数民族自治洲称为八树或鳞片草。是生于山坡灌木林中的特有民间药材，味苦，性寒，有活血、破瘀、杀虫之功效，中药常用之降血糖，主要成份为豆甾-4-稀-3酮、豆^-4-稀-3.6酮、P谷稱醇和0-羟基豆甾-4-稀-3酮四种甾体成份，以及双氢黄酮醇(香橙素)，a-儿茶素和去氢双儿茶素A兰种黄烷成份。恩施民间常用之治疗生漆过敏性皮炎。
发明内容本发明的目的是提供一种鬼箭羽提取物，该提取物具有良好的抗IV型变态反应作用，可用于制备抗W型变态反应的药物。本发明中鬼箭羽的药用部位为茎皮，在制备上述用途的药物时，可以将鬼箭羽的茎皮进行提取，将提取物制成药物。本发明所述的鬼箭羽提取物是以五w;y^wafe加s(Thunb.)Sieb.的茎皮为原料，采用本领域已知的常规化学提取方法制备得到总提取物。根据本发明，将鬼箭羽的茎皮粉碎，用有机溶剂或/和水提取制备得到总提取物，所用的有机溶剂可采用醇类，如乙醇，甲醇等，其中优选50%—80%(体积比)乙醇a将总提取物溶于水后，分别相继用石油醚、酯类(或卤代烃类)溶剂萃取，取酯类(或卣代烃类)溶剂萃取相，回收溶剂后干燥即得到Jill性部位，所用得酯类或卤代烃类溶剂可以采用乙酸乙酯，氯仿或二氯甲烷等，其中,乙酸乙酯。脂溶性部位也可以直接通过二氧化碳(ca)超临界萃取获得，用目前国内外广泛用于筛选抗IV型变态反应的动物模型(绵羊红细胞致小鼠迟发型足跖肿胀橄榄油致小鼠接触性皮炎；5-HT致大鼠腹腔肥大细胞释放组胺；5-HT诱导豚鼠回肠收缩)进行动物实验。证实了本发明鬼箭羽提取物能明显抑制绵羊红细胞诱发的小鼠迟发型足跖肿胀能显著抑制橄椎油致小鼠接触性皮炎剂量依赖性抑制5-HT致大鼠腹腔肥大细胞释放组胺；抑制5-HT诱导豚鼠回肠收缩，由此说明鬼箭羽具有确切的抗IV型变态反应作用，因此可以用于制备抗IV型变态反应的药物。以鬼箭羽提取物为活性部位，配以适当载体或賦形剂可以制成片剂，颗粒剂，胶襄或口服液等常用得药物剂型，具体实旌方式现结合实例，对本发明作详细描述，不限制本发明。实施例1鬼箭羽乙醇总提取物制备取鬼箭羽基皮干品，用药物粉碎机进行粉碎后，用70%乙酵浸泡，6(fC水浴回流提取3次，合并回流液过滤后收集于旋转蒸发瓶中减压蒸馏，回收至无醇味,干燥得棕褐色干浸膏。实施例2鬼箭羽总黄烷制备将乙醇提取物用蒸馏水溶解，相继用等体积石油醚，乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，分别回收溶剂，真空，(8(TC)后得到石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、萃取后剩余物。经成分鉴定总黄烷主要存在于乙酸乙酯萃取物。实簏例3m箭羽提取物对绵羊红细胞致小鼠迟发型足跖肿胀的影响1.动物清洁级ICR小鼠，2(W5g,2-3月龄，S早各半，由同济医科大学医学实验动物中心提供，受试动物雌雄分开普通饮食喂养5天后开始实验，控制室温为22土21C,湿度为55±15%。2.药物醋酸泼尼松，江苏淮阴制药厂提供；鬼箭羽提取物，由实例1及2所制备。3.实验方法清洁级ICR小鼠抑只，雌雄各半，随机分为8组。于绵羊红细胞攻击同时及其后16h,两次灌胃鬼箭羽醉提取物或总黄烷，阳性对照组灌胃泼尼松，空白对照组灌胃等容量生理盐水。4.实验结果鬼箭羽醇提取物能明显抑制对200mg和500mgkg皿'，总黄烷50mg，100mg^200mgkg'1及泼泥松5Qm^g-l均能明显抑制绵羊红细胞诱发的小鼠迟发型足跖肿胀,但黄烷作用明显强于醇提取物,其中20011^^时与泼尼私、相当。结果见表l表1鬼箭羽醇提取物及总黄烷对绵羊红细胞致小鼠迟发型足跖肿胀的影响组别剂量(m^cg-l》n跖肿胀度(l(T，mm)抑制率(％)对照组一1048.1土11.3一醇提取物訓1046.7±11.427.52001033.2±12.7*31.85001029.8±15.6*34.6总黄焼501033.4±8.5*#62.8謂1022.9±12.7*#邻.42001016.7±14.6*#100泼尼松501014.8±13.8*#74注:与对照组比较，*:P<0.01与醇提取物组比较弁:P〈0.01实施例4鬼箭羽提取物对橄榄油致小鼠接触性皮炎的影响1.动物清洁级ICR小鼠，20-25g,2-3月龄，$早各半，由同济医科大学医学实验动物中心提供。受试动物雌雄分开普通饮食喂养5天后开始实验，控制室温为22土21C,湿度为55±15%。2.药物赛庚疲，江苏第四制药厂提供鬼箭羽提取物,由实例1及2所制备。3.实验方法清洁级ICR小鼠100只，随机分为10组，每组10只。雄性ICR小鼠，腹部刮毛2他后，用5%PC无水乙醇液1S0nL涂于腹部，4d后用1%PC液橄榄油液20pL涂于小鼠右耳廊两侧攻击，分别于其后2h和24h测量两耳廊厚度差。试验组小鼠于PC功击同时及其后l他两次ig鬼箭羽醇提取物或总黄烷，阳性对照组ig泼尼松或赛庚啶，空白对照组ig等容量生理盐水4.结果实验结果见表2a表2鬼箭羽醉提取物及总黄烷对PC小鼠接触性皮炎的影响(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与对照组比较:AP〈0.05*2:P<0.01由表2可见赛庚啶20ragkg一1明显抑制早期相(2h)无明显后期相抑制作用，泼尼松50mgkg一'无显著作用,其醇提取物IOO、2加、SOOmgkg-1,黄烷100、200mgkg4及泼尼松50呢kg—'具明显抑制后期相反应(24h)。表明鬼箭羽醇提取物，总黄烷及泼尼松对后期相抑制作用强于早期相，而赛庚啶是抑制早期相强于后期相。实施例5鬼箭羽对5-HT致大鼠腹脚E大细胞释放组胺的影响1.动物清洁级SD大鼠，体重(16(M80g)$早各半，由同济医科大学医学实验动物中心提供。受试动物雌雄分开普通饮食喂养5天后开始实验，控制室温为22土21C,湿度为55±15%。2.药物色甘酸二钠，R本funakoshi药品公司提供鬼箭羽提取物,由实例1所制备。3.实验方法清洁级SD大鼠40只，随机分为5组，每组8只。取雄SD大鼠,制备腹腔肥大细胞2.9Xl(f细胞/ml悬乳液,经甲苯胺蓝染色鉴定细胞存活率高于90%后。取腹腔肥大细胞悬液1.8ml,经10min371C预温孵加入自药物0.1ml(浸试药物用PBS,PH-7.0),37t孵l(tein，再加入10ug/迈lC卿ound48/80.0.经37t!温孵后，冷却终止反应.在5"以下,2000rpm离心5min后,取上清液荧光法测定组胺量。于沉淀物中加入PBS2ml(磷酸缓冲液)冰冻并超声融化三次再离心沉淀(2000rpa,5min),取上清液荧光法测定组胺，并计算出组胺释放率,公式为组胺释放率％=释5，自^，量x腿释放量+残余量4.实验结果结果见表3表3鬼箭羽醇提取物对coi^mind4g^0诱导SD大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响(灶s，『8)组别浓渡释放率％抑制率％—肌2t4.5醇提取物20069.壯7.921.850052.5±5.6*38.8100038.7±6.9*49J色甘酸二钠5加62.2±5.1*22.4与对照组比较由表3可知鬼箭羽醉提取物200,500和lOOOjifi/ml,浓度能依赖性抑制组胺释放。其200|ig/ml与色甘酸二钠相当。实攄例5鬼箭羽对&~1^致离体麻||回肠^1的彩响1.动物清洁级展鼠，体重(7(KK50g)4早各半，由同济医科大学医学实验动物中心提供，受试动物雌雄分开普通饮食喂养5天后开始实验，控制室温为22土21C,湿度为55土15%。2.药物赛庚啶，江苏第四制药厂提供；鬼箭羽提取物，由实例1所制备。3.实验方法取豚鼠回肠标本，悬于双层台氏液溶糟中，32t!恒温(保持通气)，肠上端经张力换能器与台式平衡记录仪连接，20min后，加入12fiM5-HT,测得最大收缩反应(100%),洗去5-HT加入50，100,200,500ng/ml鬼箭羽醇提取物或赛庚啶，每次给药10秒后再加入5-HT,测定收缩最大幅度，并计算出收缩百分率。4.实验结果结果见表4由表4可知，鬼箭羽醇提取物Sft"500pg/m1,赛庚腚5ng/mi,均有依赖性抑制5"HT所致豚鼠回肠收缩作用，但当鬼箭羽醇提取物浓度增至100jjgtol时，抑制作用再也不会增强，表明此时已达最大效应浓度。表4鬼箭羽醇提取物对5^HT诱导豚鼠回肠收缩的影响(Xfcs，n-8)组别浓渡(ng/ml)释放率％抑制率％对照组100醇提取物5025.8l加61.3±19.836.820058.歸8.738.750050.4±汰135.8赛庚啶519.3±13.283.权利要求1.一种鬼箭羽提取物，其特征在于所述提取物为由鬼箭羽茎皮提取得到的鬼箭羽总提取物或脂溶性部位。2.权利要求1所述的鬼箭羽提取物在制备抗IV型变态反应药物中的用途。3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所有的剂型。全文摘要本发明涉及医药
技术领域：
，是卫茅科植物鬼箭羽提取物用于制备抗IV型变态反应药物中的用途。用目前国内外广泛用于筛选抗IV型变态反应的动物模型(绵羊红细胞致小鼠迟发型足跖肿胀；橄榄油致小鼠接触性皮炎；5-HT致大鼠腹腔肥大细胞释放组胺；5-HT诱导豚鼠回肠收缩)，证实了本发明鬼箭羽提取物能明显抑制绵羊红细胞诱发的小鼠迟发型足跖肿胀；能显著抑制橄榄油致小鼠接触性皮炎；剂量依赖性抑制5-HT致大鼠腹腔肥大细胞释放组胺；抑制5-HT诱导豚鼠回肠收缩，由此说明鬼箭羽具有确切的抗IV型变态反应作用，因此可以用于制备抗IV型变态反应的药物。文档编号A61P37/00GK101422501SQ20071016581公开日2009年5月6日申请日期2007年10月31日优先权日2007年10月31日发明者刘可云,刘杰书,罗洪斌,胡泽华,黄德斌申请人:黄德斌;胡泽华;刘可云