蒲公英中的木质素及其抗菌活性和医药用途的利记博彩app

专利名称：蒲公英中的木质素及其抗菌活性和医药用途的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体而言，本发明涉及从蒲公英中分离得到的具有防治金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌感染疾病的两个木质素及其可药用盐、其抗感染药物用途，以及含有这些化合物的药物组合物。可以预期其用于防治金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌感染引起的疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿。
背景技术：
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是格兰氏阳性球菌，抗甲基西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)是20世纪80年代开始出现的菌株，它是医院内和临床上微生物流行病的主要病源，引起人的主要感染有疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、乳腺炎、膀胱炎、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、咽炎、子宫颈炎、盆腔炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿。故是对人体健康影响极大的致病菌种。链球菌(Streptococcus species)是成链状排列、兼性厌氧的格兰氏阳性杆菌。医学上常见的致病性链球菌大部分属于β溶血型。它们存在于人的皮肤、呼吸道、消化道以及尿殖道的黏膜上，能够引起皮呋、呼吸道以及软组织感染如肺炎、菌血症、心内膜炎、脑膜炎、泌尿道炎症以及关节炎等疾病。
中国传统医药是个资源丰富的宝库。其中许多药用植物都含有很好的抑制金黄色葡萄球菌(简称“金葡菌”)以及乙型溶血性链球菌的功效。蒲公英为菊科植物蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz，也称蒙古蒲公英)或同属数种植物的干燥全草，为清热解毒中药，有清热、解毒、利尿、散结的功能；主治乳痈、疔疮、目赤、咽痛、湿热黄疸和热淋涩痛等。临床上常用于治疗急性乳腺炎、淋巴腺炎、疔毒疮肿、急性结膜炎、感冒发热、急性扁桃体炎、急性支气管炎、肝炎、肿囊炎及尿路感染等疾病。蒲公英主要含有三萜类、植物甾醇类、倍半萜内酯类、香豆素类、黄酮类、酚酸类、胡萝卜素类和脂肪酸类等化合物。其药理作用有抗菌消炎、抗氧化、保肝利胆、免疫调节和抗肿瘤等。目前，利用蒲公英单味药制成的注射剂、片剂和颗粒剂等广泛应用于临床，治疗各种炎症性疾病取得了较好的疗效。
蒲公英具有较强的清热解毒功效，具有较高的研究和开发价值，但国内对蒲公英的研究主要停留在其粗提物上，尤其缺乏药效物质基础相关研究。国内的相关研究报道和专利一般都是以复方形式应用，少有从蒲公英中提取有效成分并针对其抑菌活性进行研究的报道。国外对药用蒲公英(Taraxacum officinale)的化学成分研究比较全面，发现其主要含倍半萜、三萜和黄酮类成分，药理活性报道较少，而未见针对蒙古公英(T.mongolicum)的化学成分研究报道。国内对蒲公英属植物的化学成分研究报道其少，多引用药用蒲公英Taraxacum officinale的化学成分，目前检索结果发现凌云课题组对蒙古蒲公英T.mongolicum的化学成分进行了研究报道[凌云，鲍燕燕，朱莉莉，郑俊华，蔡少青，肖越，蒲公英化学成分的研究中国药学杂志，1997，32，584-586；凌云，鲍燕燕，张永林，蔡少乾，郑俊华，蒲公英化学成分的研究，海军总医院学报，1998，11，167-169]，共分得5个化合物β-谷甾醇，槲皮素，咖啡酸，绿原酸和木犀草素-7-氧-葡萄糖苷，而其它化学成分目前尚不清楚。为了解T.mongolicum各极性部位的化学组成，我们对其进行了系统的植物化学研究。研究结果表明，大极性部位主要组成部分为黄酮苷和多酚类化合物。

发明内容
本发明的目的是提供了一种从菊科蒲公英植物中得到的木质素类化合物蒙古蒲公英酸A和Rufescidride及其可药用盐和抗菌用途；本发明的另一目的是提供了将本发明化合物用于制备预防和治疗由金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌引起的疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿的药物及与上述疾病有关的医药或保健品用途；本发明的另一目的是提供了含有本发明的木质素类化合物的药物组合物。
本发明通过从菊科植物蒲公英中提取制备得到下列的木质素类化合物1和2，具体结构如下
蒙古蒲公英酸A(化合物1)Rufescidride(化合物2)两个木质素类化合物名称分别为化合物1(蒙古蒲公英酸A)6，9，10-三羟基-氧杂蒽-1，2-二羧酸；化合物2(Rufescidride)。
木质素类化合物1和2主要来源于菊科植物蒲公英的各部位，优选从蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicumKitag)、热河蒲公英(又称白缘蒲公英)(TaraxacumplatypecidumDiels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianmKitag)、反苞蒲公英(Taraxacum grypodon Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobum Kitag)等中国药品市场上常见的蒲公英药材的根茎、叶、花，包括其干品和鲜品中制备而得。优选蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)和/或碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)的全草部分。
本发明的特点是，从菊科植物蒲公英根茎、叶、花部位中分离提纯其有效部位，并从中得到两个单体化合物，经化学测定结构为木质素类化合物1和2，并发现其具有很强的抑制金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌作用，提供了可期待用于制备与格兰氏阳性菌尤其是金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起或有关的生理改变或疾病的治疗药物及预防保健品，包括但不限于疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿。
具体实施方案以往的植化研究发现蒲公英植物中含有三萜类、香豆素类、酚酸类(包括含酚羟基的黄酮类)、倍半萜类、植物甾醇类、胡萝卜素类和长链脂肪酸类化合物。本发明人对该植物提取物的大极性部位，通过多种正、反相层析手段得到该有效抑制金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌活性的两个活性化合物，并经红外、质谱、紫外和核磁共振波谱等综合解析推导出其化学结构为前人未报道过的一个木质素化合物蒙古蒲公英酸A以及其酸酐(Rufescidride)。
本发明中的药材可以是任意一种中国产的蒲公英属植物任一部位，即可以是蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)、热河蒲公英(又称白缘蒲公英)(Taraxacum platypecidum Diels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianumKitag)、、反苞蒲公英(Taraxacum grypodon Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobumKitag)等中国药品市场上常见的蒲公英药材，可以是干品或鲜品，可以是蒲公英药材植物的根、茎、叶、花、种子、皮、果实，也可以是它们的混合物。优选全草。更优选蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)和/或碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinlcum Kitag)的全草部分。本发明之说明书中均简称蒲公英。
本发明人发现，本发明得到的两个木质素类成分具有抑制金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌生长的功能；可以用于防治由金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起的疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿及与上述症状或疾病有关的医药或保健品用途；从而可能开发出抗感染类药物组合物。这种药物组合物可以用制药领域中的常规技术制成各种剂型，如片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、滴丸、注射剂、透皮贴剂、气雾剂等。
下面通过实施例进一步说明本发明。必须说明下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1蒙古蒲公英酸A和Rufescidride的分离1.1仪器与试剂熔点用显微熔点仪(北京泰克公司生产)测定，温度未校正；旋光在日本产Polax-2L型自动旋光仪上测定；红外光谱IR由Bruker Vector-22红外光谱仪测定，经KBr压片；紫外光谱用Shimdzu UV-240紫外分光光度计测定；核磁共振氢谱1H-NMR，核磁共振碳谱13C-NMR和2D NMR由INOVA型超导核磁共振波谱仪(VARIANINOVA-400MHz)测定(四甲基硅醚TMS为内标)；电喷雾质谱ESI-MS由BrukerEsquire3000+质谱仪测定，柱层析用硅胶(100-200，200-300和300-400目)以及薄层层析用硅胶GF254(10-40目)均由青岛海洋化工厂生产；所用试剂均为分析纯，其中石油醚沸程为60-90℃；薄层制备层析(PTLC)用Merck公司的铝箔硅胶板；柱色谱用聚酰胺(14-30目和100-200目)采用浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂产品；葡聚粮凝胶Sephadex LH-20采用瑞典Amersham Pharmacia Biotech AB公司产品；反相硅胶RP-18采用日本Fuji Silysia Chemical公司的Chromatorex产品；MCI为日本三菱化工公司产品，薄板(TLC)检测用254nm和365nm的紫外灯；显色剂用碘蒸气、10％硫酸-乙醇、2％三氯化铁-甲醇、磷钼酸以及溴甲酚绿溶液。
液相Waters系列高效液相色谱仪，包括2695分离系统(四元泵、柱温箱及自动进样器)，2996紫外二极管矩阵检测器，Empower色谱操作软件。色谱柱SymmetryC18色谱柱(4.6mm×250mm)，5μm。
1.2植物来源与鉴定供提取用蒲公英药材于2001年8月购于安徽亳州，由浙江大学药学院中药与天然药物研究室陈柳蓉副教授鉴定为蒙古蒲公英(Taraxacum mongolicumHand.-Mazz.)的全草。供比较含量用蒲公英(蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicumHand.-Mazz)、碱地蒲公英(华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)、热河蒲公英(白缘蒲公英)(Taraxacum platypecidumDiels)、东北蒲公英(Taraxacumohwianum Kitag)、反苞蒲公英(Taraxacum grypodon Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxcum falcilobum Kitag)干品各20克由中科院昆明植物所彭华教授于2003年8月～2004年7月协助采集并鉴定。供干鲜品含量比较之蒲公英(蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz)和碱地蒲公英(华蒲公英)(Taraxacumsinicum Kitag)鲜品各100克采集自浙江省天目山，由浙江大学药学院陈柳蓉副教授鉴定。
1.3提取与分离样品晒干粉碎(干重5.0公斤)后用75％工业酒精沸水下热提两次，提取液冷却后合并，经减压浓缩得462克棕褐色粘稠状粗提物。将粗提物用甲醇溶解，D-101大孔树脂拌样，在旋转蒸发仪上减压除去甲醇，以变色硅胶为干燥剂，40℃真空干燥过夜，加样到水平衡好的D-101柱中，收集50％甲醇-水洗脱部位，将洗脱液浓缩至干，再用蒸馏水制成悬浮液后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分配萃取。各有机层减压蒸干后分别得3克，32克，127克浸膏，余为水部位。
1.4乙酸乙酯分离纯化取乙酸乙酯部位浸膏82克用硅胶(200-300目)柱(900克)，以氯仿-甲醇(1∶00∶1)为洗脱剂梯度洗脱，根据薄层层析TLC情况共分6个部位(F1-F6)，其中F2(4克)过硅胶柱(100克)，用石油醚-乙酸乙酯(8∶10∶1)洗脱，经薄层层析TLC检查，石油醚-乙酸乙酯(5∶1)洗脱者含有相同组分，经重结晶得到Rufescidride(24.6毫克)，F6(1克)用葡聚糖凝胶Sephadex LH20(100mL)柱层析，以甲醇洗脱，并经水-醇重结晶得到蒙古蒲公英酸A(12.2毫克)。
1.5结构鉴定1.5.1Rufescidride的结构鉴定化合物2为红色无定形粉末，从EI-MS，1H-NMR和13C-NMR谱可以推出化合物的分子式为C18H8O7。其IR光谱(1798，1737cm-1)显示分子中具有两个羰基以酸酐的形式存在；同时在EI-MS谱中m/z264[M-CO-CO2]+的碎片离子峰也证实了化合物中存在酸酐。在1H-NMR谱中，三个单峰芳基氢信号δ8.79(s，H-6’)，8.07(s，H-7)和6.72(s，H-3’)以及两个苯环上邻位氢的双峰信号δ7.63(d，J＝8.8Hz，H-6)和7.44(d，J＝8.8Hz，H-5)，辅以13C-NMR和DEPT谱可以推出化合物(II-31)中具有18个碳5个芳基叔碳，13个季碳[包括5个连氧季碳δ138.6(C-3)，144.0(C-4)，151.8(C-2’)，147.5(C-4’)和142.3(C-5’)]可以看出化合物2具有芳基奈类木脂素的典型特征，通过与文献仔细比对[S A Souza da Silva等，A new arylnaphthalene type lignan from Cordiarufescens A DC(Boraginaceas)，ARKIVOC，2004，54-58]，确定化合物为Rufescidride。2004年SA Souza da Silva等人首次从菊科植物Cordia rufescens中分离得到该化合物。
Refescidride红色无定型粉末；C18H8O7；紫外UVλmax(甲醇)208，222，241，313，393nm；核磁共振氢谱1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.79(1H，单峰，H-6’)，8.07(1H，单峰，H-7)，7.63(1H，双峰，J＝8.8Hz，H-6)，7.44(1H，双峰，J＝8.8Hz，H-5)，6.72(1H，单峰，H-3’)；核磁共振碳谱13C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ163.9(s，C-9)，163.6(s，C-9’)，151.8(s，C-2’)，147.5(s，C-4’)，143.9(s，C-4)，142.3(s，C-5’)，138.6(s，C-3)，133.4(s，C-7’)，128.2(s，C-1)，125.7(s，C-8’)，123.8(s，C-8)，124.6(d，C-7)，122.9(d，C-6)，121.4(d，C-5)，115.0(d，C-6’)，110.8(s，C-2)，109.2(s，C-1’)，103.3(d，C-3’)。
1.5.2蒙古蒲公英酸A的结构鉴定化合物1为红色粉末状固体，UV，1H-NMR和13C-NMR谱与化合物Rufescidride非常相似，ESI-MS显示分子离子峰m/z353[M-H]-，比Rufescidride多18个质量单位，因此可以判断Rufescidride可能为化合物1脱水的产物，即化合物1可能为Rufescidride的9和9’位酸酐水解成两个羧酸的化合物。IR中1721cm-1处的吸收峰以及化合物1溴甲酚绿显蓝色也证明了化合物中具有羧酸基团。13C-NMR和DEPT谱显示化合物1中具有18个sp2杂化的碳，包括5个次甲基，5个连氧季碳和两个羰基；在1H-NMR谱中，显示三个芳基氢的单峰信号δ8.05(单峰，H-7)，7.40(单峰，H-6’)和6.62(单峰，H-3’)以及苯环邻位氢的两个双峰信号δ7.46(双峰，J＝8.8Hz，H-6)和7.25(双峰，J＝8.8Hz，H-5)。下图显示了在HMBC谱图中几个主要的相关信号，其中H-6与C-2，C-4和C-7之间有远程相关；H-5与C-1和C-3之间有远程相关以及H-7与C-2，C-6，C-8，C-9和C-9’之间有远程相关说明化合物1中具有二羧基萘环结构。H-6’与C-4’，C-2和C-7’之间有远程相关以及H-3’与C-1’和C-5’之间存在的远程相关信号说明化合物1中具有一三氧取代的苯环与奈环相连。因此可以确定化合物1为芳基萘类木脂素，最后通过与文献发现的芳基奈类木脂素相对比可鉴定出化合物1为蒙古蒲公英酸A。
图示为化合物1的HMBC相关示意图蒙古蒲公英酸A红色无定型粉末；C18H10O8；紫外UVλmax(紫外)196，226，276，317，373nm；红外IRvmaxKBr(cm-1)3400，1721，1608，1520；ESI-MS m/z353[M-H]-；核磁共振氢谱1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.05(1H，单峰，H-7)，7.46(1H，双峰，J＝8.8Hz，H-6)，7.40(1H，单峰，H-6’)，7.25(1H，双峰，J＝8.8Hz，H-5)，6.62(1H，单峰，H-3’)；核磁共振碳谱13C-NMR(DMSO-d6，100MHz)δ171.6(s，C-9’)，167.8(s，C-9)，148.6(s，C-4’)，146.4(s，C-2’)，142.1(s，C-5’)，141.8(s，C-4)，136.7(s，C-3)，128.4(d，C-7)，126.2(s，C-8)，125.8(s，C-1)，123.3(s，C-2)，123.0(s，C-7’)，122.3(s，C-8’)，121.4(d，C-6)，120.0(d，C-5)，112.5(d，C-6’)，109.7(s，C-1’)，103.9(d，C-3’)。
实施例2木质素类化合物1和2抑制格兰氏阳性菌能力检测2.1原理采用“管碟法”研究试验物的体外抗菌活性，是利用加在牛津杯中试验药物扩散到接种有试验菌的培养基中，从而抑制细菌的生长，通过检测在牛津杯周围形成的抑菌圈的直径大小来确定试验药物的抗菌活性。
2.2检测菌金黄色葡萄球菌26003-23，购自中国药品生物制品检定所。
乙型溶血性链球菌32210，购自中国药品生物制品检定所。
2.3试验药物DMSODMSO溶剂对照；诺氟沙星1.25mg/ml；蒙古蒲公英酸A(化合物1)5.0mg/ml；Rufescidride(化合物2)5.0mg/ml；样品均用DMSO溶解。
2.4方法与步骤2.4.1、M-H琼脂、M-H肉汤及试验菌液的制备。
2.4.2、双碟的制备(1)、M-H琼脂底层取灭菌M-H琼脂液体自然冷却凝固。
(2)、M-H琼脂菌层取菌液150μl与30mlM-H琼脂混匀。取约5ml含菌液琼脂，均匀摊布在具有M-H琼脂底层的平皿内。
2.4.3、待培养基凝固后，在每个平皿中均匀放立加满试验药液牛津杯。
2.4.4、置37℃培养24小时。
2.4.5、用游标卡尺测量抑菌圈直径。
表2蒙古蒲公英酸A(化合物1)和Rufescidride(化合物2)对标准致病菌的抑菌圈直径(mm)

2.5实验结论通过采用“微量稀释法”研究化合物1和2对金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌的体外抗菌活性。结果表明化合物1和2金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌有较好的抗菌活性。说明其为潜在的抑制格兰氏阳性菌活性物质，具有进一步开发价值。
本发明所述的木质素蒙古蒲公英酸A和Rufescidride可以与药学上常用的辐料或载体结合，制备得到具有预防和治疗由金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起的感染之药物及药物组合物或保健品。上述各类药物组合物或者保健品可以采用片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。
本发明的木质素蒙古蒲公英酸A和Rufescidride还可以与现已上市的金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌抑制剂和/或其他治疗类似格兰氏阳性菌感染相关病症的治疗药物及其原料药如头孢类、大环内酯类、以及磺胺类如沙星等药物品种联合使用，制备得到具有治疗格兰氏阳性菌感染相关病症功效活性的组合物或复方制剂，可预期成为治疗格兰氏阳性菌感染疾病药品或者保健品。上述各类物组合物或者保健品可以采用片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。
实施3五种蒲公英属植物根茎与地上部分茎叶中化合物1和2的比较蒲公英(蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)、热河蒲公英(白缘蒲公英)(Taraxacumplatypecidum Diels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianum Kitag)、反苞蒲公英(Taraxacum grypodn Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobum Kitag)干品各20克由中科院昆明植物所彭华教授采集并鉴定。
用沃特斯高效液相色谱(Waters HPLC，2695分离系统包括四元泵、柱温箱自动进样器；2996紫外二极管矩阵检测器，Empower色谱操作软件和SymmetryC18色谱柱(4.6mm×250mm)，5μm)对化合物1和2进行了含量检测。
供试样品处理阴干粉碎后的样品各称取0.5克(±0.1毫克)，置25毫升容量瓶，加20毫升甲醇，25～30℃下超声60分钟，加甲醇至刻度，用0.45μm滤膜滤过。
标准溶液的制备准确称取化合物1和2各10.0毫克，分别加入8毫升甲醇超声溶解，再各自加入甲醇配成0.5毫克/毫升的标准储备液。用甲醇按照1∶1，1∶10，1∶50，1∶100配制成标准溶液，冷藏备用。同法各自制备出化合物1和2的标准溶液。试剂甲醇为HPLC级(Merk生产)，水为二次蒸馏水。色谱条件使用SymmetryC18色谱柱(4.6mm×250mm)，5μm，柱温30℃，检测波长254nm，流速0.8毫升/分钟，进样量20μl。流动相甲醇/0.1％HAc＝75∶25等度洗脱。
含量测试将提取溶媒、标准品溶液、供试样品分别进样，记录色谱图。以峰面积对应标准溶液浓度绘制曲线，计算线性范围，相关系数≥0.998。从标准曲线分别计算出化合物1和2的含量。
发现含量如下表所示表3常见蒲公英中蒙古蒲公英酸A(化合物1)和Rufescidride(化合物2)含量

结果表明蒙古蒲公英根茎和地上部分都含有本发明所述的化合物，并且碱地蒲公英、热河蒲公英、东北蒲公英、反苞蒲公英、兴安蒲公英中都含有不同含量的化合物1和2，说明蒙古蒲公英酸A和Rufescidride是菊科蒲公英属植物中的特征性成分，所以运用本属植物包括并不限于蒙古蒲公英、碱地蒲公英、热河蒲公英、东北蒲公英、反苞蒲公英、兴安蒲公英等都可以制备本发明所要求的含有蒙古蒲公英酸A和Rufescidride的抗格兰氏阳性菌药物。
实施例4两种蒲公英属植物茎叶(鲜品和干品中)化合物1和2的比较蒲公英(蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)鲜品各100克由浙江大学陈柳蓉教授鉴定。
用沃特斯高效液相色谱(Waters HPLC，2695分离系统包括四元泵、柱温箱自动进样器；2996紫外二极管矩阵检测器，Empower色谱操作软件和SymmetryC18色谱柱(4.6mm×250mm)，5μm)对化合物1和2进行了含量检测。
含量测试将提取熔媒、标准品溶液、供试样品分别进样，记录色谱图。以峰面积对应标准溶液浓度绘制曲线，计算线性范围，相关系数≥0.998。从标准曲线分别计算出化合物1和2的含量。具体操作同实施例3。
表4两种蒲公英干品与鲜品中蒙古蒲公英酸A(化合物1)和Rufescidride(化合物2)含量对比

结果表明蒙古蒲公英和碱地蒲公英的干品和鲜品中都含有不同含量的化合物1和2，含量并无大的差异。说明蒙古蒲公英酸A和Rufescidride在菊科蒲公英属植物中存在和含量较为稳定，所以运用本属植物的干品和鲜品都可以制备本发明所要球的含有蒙古蒲公英酸A和Rufescidride的抗格兰氏阳性菌药物。
权利要求
1.具有下面结构的木质素及其可药用盐或其溶剂化物 化合物1(蒙古蒲公英酸A)。
2.权利要求1所述之化合物，其名称为6，9，10-三羟-氧杂蒽-1，2-二羧酸。
3.根据权利要求1或2所述之木质素化合物，及其具有如下结构的类似物(化合物2Rufescidride)用于制备预防或治疗金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌感染的相关症状或疾病的药物之用途 Rufescidride。
4.根据权利要求3的用途，其中金黄色葡萄菌感染的相关症状或疾病是指疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、乳腺炎、膀胱炎、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、咽炎、子宫颈炎、盆腔炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿；乙型溶血性链球菌感染所致相关炎症是指皮扶、呼吸道以及软组织感染如肺炎、菌血症、心内膜炎、脑膜炎、泌尿道炎症以及关节炎疾病。
5.一种用于预防或治疗金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌感染的相关症状或疾病的药物组合物，其含有作为活性成分的治疗有效量的权利要求1～3所述之木质素化合物或它们的可药用盐，以及其混合物和可药用载体。
6.根据权利要求5的药物组合物，其是预防和治疗金黄色葡萄球菌和/或乙型溶血性链球菌感染引起的疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿。
7.根据权利要求5或6的药物组合物，其可以是片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、洗剂、栓剂、擦剂、注射剂、透皮贴剂或气雾剂，还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。
8.根据权利要求1～3所述之化合物的制备途径，其主要来源于任意一种中国产的蒲公英属植物任一部位，即可以是蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacummongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicumKitag)、热河蒲公英(又称白缘蒲公英)(Taraxacum platypecidumDiels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianumKitag)、反苞蒲公英(Taraxacum grypodonDahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobum Kitag)等中国药品市场上常见的蒲公英药材；可以是干品或鲜品；可以是蒲公英药材植物的根、茎、叶、花、种子、皮、果实，也可以是它们的混合物及全草部分。
全文摘要
本发明涉及从蒲公英中分离得到的具有防治金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌感染疾病的木质素类化合物及其可药用盐、其抗感染药物用途，以及含有这些化合物的药物组合物。本发明的两个木质素蒙古蒲公英酸A和Rufescidride具有明显的抑制金葡菌和乙型溶血性链球菌生长的功效，可以预期用于防治此二者感染引起的疖子、脓疱、毒性表皮腐解、肺炎、骨髓炎、急性心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、乳腺炎、膀胱炎、盆腔炎、泌尿道炎症、前列腺炎、菌血症、中毒性休克综合症、淋巴结炎、关节炎、咽炎、子宫颈炎，以及肌肉、皮肤、尿殖道、中枢神经系统的脓肿。
文档编号A61P31/00GK101024640SQ200710067458
公开日2007年8月29日 申请日期2007年3月13日 优先权日2007年3月13日
发明者李校堃, 施树云, 徐艳, 陶巧凤, 约阿施·史托克希特, 赵昱 申请人:温州医学院