专利名称：知母提取物与黄柏提取物的组合物及其用途的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及知母提取物与黄柏提取物的组合物在制备防治前列腺增生的药物或食品中的应用。
背景技术：
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bunge的根茎，具有滋阴降火，润燥滑肠的功效，临床多用于消渴症。目前知母药用时主要为单位知母饮片或与其他中药配伍煎汤后服用。
知母的化学成分主要为皂苷和黄酮类成分。知母黄酮类成分的的药理作用已经有报道，主要有知母水提取物及其活性成分芒果苷及其糖苷具有抗糖尿病的作用(国外医学中医中药分册，2002，24(6)353；中国发明专利ZL03115509.X)。知母提取物具有抗菌作用(植物病理学报，2006，36(3)267-272；中国发明专利ZL200410037779.0)。
黄柏来源于芸香科黄檗属(Phdlodendron)植物，本品始载于《神农本草经》，原名“檗术”，列上品。为清热燥湿、泻火解毒、退虚热的常用中药。研究发现，黄柏化学成分主要是有生物碱。有抗菌等作用(中国野生植物资源，2001，20(4)，6；中国发明专利ZL200510070578.5)前列腺增生症(BPH)是中老年男性常见病，资料显示，前列腺增生在40岁以前发病率很低，50岁以上占40％，80岁者近90％，90岁时几乎100％患有该病。因此，研究治疗该病的有效药物，是医药界面临的迫切任务，有着重要临床意义。现有技术中抑制及治疗前列腺增生的药物以化学药物为主，主要有抗雄激素类药物，如乙烯雌酚、甲地孕酮等；以及受体阻断剂类药物，如酚卞明、酚妥拉明、高特灵等。以上药物均或多或少有一定程度的毒副作用。当然，也有副作用比较小的中药来治理前列腺增生的，如雪莲前列三、奇康前列宁等，但它们的效果不佳。
目前尚无报道显示知母提取物与黄柏提取物的组合物有前列腺增生(肥大)预防和治疗作用。
发明内容
本发明的目的在于提供知母提取物与黄柏提取物的组合物在制备防治前列腺增生的药物或食品中的应用。
本发明将知母提取物与黄柏提取物的组合物用于预防和治疗前列腺增生的药物或食品，其中的知母提取物是通过如下方法制得的知母粉碎后，用20-95％含水乙醇加热提取或浸泡提取，提取液浓缩后离心或过滤，弃沉淀，上清液或过滤液备用；将上述上清液或过滤液进行聚苯乙烯多孔性吸附树脂吸附，水淋去杂质后，用上样生药质量的5～15倍量体积的15～25％含水的C1～C5低级醇洗脱；洗脱液浓缩至无醇，静置，析出沉淀，离心或过滤，得沉淀提取物1，上清液或过滤液备用；在上清液或过滤液中加入乙醇醇沉，乙醇终浓度为70-95％，弃沉淀，将醇沉后的上清浓缩至干，得固体物为提取物2；或将上清浓缩后，喷雾干燥，也得提取物2；合并提取物1与提取物2并混合均匀，即得知母提取物；其中的黄柏提取物是通过如下方法制得的黄柏粉碎后，用40～80％含水乙醇渗漉提取，其余步骤同知母提取物，既得黄柏提取物。
获得的知母提取物成分分析经硅胶，sephadexLH-20，ODS等反相色谱担体柱色谱获得2个化合物，用化学，波谱法测定了结构，分别为芒果苷(mangiferin)和新芒果苷(neomangiferin)。用HPLC检测定量分析表明，知母提取物中芒果苷和新芒果苷含量之和≥50％，且芒果苷与新芒果苷的含量比为1∶1～5∶1。
获得的黄柏提取物成分分析经硅胶，sephadexLH-20，ODS等反相色谱担体柱色谱获得1个化合物，用化学，波谱法测定了结构，为小檗碱(berberine)。用HPLC检测定量分析表明，黄柏提取物中小檗碱≥50％。
实验结果证明，经知母提取物与黄柏提取物的组合物治疗后，可使前列腺增生大鼠的前列腺湿重和前列腺指数(前列腺指数＝前列腺湿重(g)/大鼠体重(g)×100)降低，且效果优于单独应用知母提取物或黄柏提取物。给药组前列腺组织给药后增生抑制明显。因此，知母提取物与黄柏提取物组合物可用于制备防治前列腺增生的药物或食品。
本发明对知母提取物与黄柏提取物组合物拓展了新的医药用途，也为防治前列腺增生提供了一种新的药物来源。知母提取物与黄柏提取物组合物安全低毒，药理作用较强，其原料来源丰富，价格低廉，制备工艺简单，可用于制备防治前列腺增生的药物或食品。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的实施不限于此。
实施例1知母提取物制备100公斤粉碎后的知母药材，投入提取罐，在90～100℃依次用70％乙醇400升加热提取3次，每次提取时间为90分钟，合并3次提取液，浓缩至80升，过滤，将滤液用蒸馏水调节至100升。再缓缓通过有350升ZTC-1型大孔树脂(天津正天成澄清技术有限公司生产)的吸附柱，用500升蒸馏水淋洗出去杂质；再用1000升20％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至10升，静置24小时，沉淀析出，过滤，干燥粉碎后得浅黄色沉淀0.4公斤，为提取物1；再将滤液再搅拌下缓缓加入100升95％乙醇，静置12小时，离心，并沉淀上清液浓缩至干，干燥粉碎后得黄色粉末1.6公斤，为提取物2；合并提取物1与提取物2混合均匀，即为本发明的知母提取物，共重2.0公斤，按生药量计得率为2.0％。
实施例2黄柏提取物制备100公斤粉碎后的黄柏药材，以80％乙醇3∶1(溶剂体积∶药材重量)浸润24小时后渗漉提取，收集24倍量渗漉液，即为提取液。提取液应用旋转薄膜浓缩仪减压浓缩到无醇味；浓缩液离心，上清液即为上柱样品液。将样品液按0.8BV上样量通入装有D101树脂的色谱柱中，依次用的蒸馏水、8BV的20％乙醇、12BV的50％乙醇、8BV的95％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱部分；50％乙醇洗脱液减压浓缩至干燥并粉碎得黄色粉末，其生物碱的总含量为60％以上，即为本发明的黄柏提取物。本工艺从药材到总生物碱成品，平均总得率为3.0％以上。
实施例3药理活性试验试验材料1.动物SD大鼠，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，清洁级(动物合格证号SCXK(沪)2002-0010)2.药物知母提取物、黄柏提取物按实施1、2中方法制备。
3.试剂丙酸睾酮注射液(上海通用药业股份有限公司，1ml/支，批号国药准字H31020524)方法与结果方法1)动物处理动物模型参考上文试验方法部分造模。将SD大鼠随机分组给药组，模型对照和空白对照组。除空白组外，其他组每只大鼠皮下注射丙酸睾酮注射液3mg/(kg·d)，正常对照组皮下注射精制麻油。给药组分别用相应的药材或提取物灌胃，空白对照组和模型对照组给以等量蒸馏水，连续灌胃4周。
2)前列腺湿重及指数的测定最后一次灌胃24h后，颈椎脱臼处死大鼠，剖取前列腺，仔细分离各叶前列腺，用电子天平称大鼠前列腺湿重，并计算前列腺指数。10％福尔马林溶液固定前列腺，石蜡包埋，切片，常规HE染色，镜下进行组织学观察。
前列腺指数＝前列腺湿重(g)/大鼠体重(g)×1003)将前列腺组织放入含有生理盐水的计量管中测定体积。
4)数据及统计学处理各项参数均以X±S表示，显著性差异采用软件spss10.0进行方差分析。
结果各给药组对前列腺增生重量以及体积的影响模型对照组大鼠前列腺增生明显，前列腺指数增加，与空白对照组比较具有统计学意义(P＜0.01)，知母提取物组与知母提取物与黄柏提取物混合物组均能减轻腹叶前列腺系数，但知母提取物与黄柏提取物组效果更优，与模型对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)，抑制率高于单一应用知母提取物。实验结果见表1。从表2中，我们可以看出，模型组体积明显大于对照组体积(p＜0.01)，知母提取物组与知母提取物与黄柏提取物混合物组均能减小前列腺体积，但知母提取物与黄柏提取物混合物组抑制率明显高于单一应用知母提取物组。
表1知母黄柏有效成分对前列腺重量的影响(x±S，n＝10)
△△P＜0.01vs空白对照组，*P＜0.05，**P＜0.01vs模型对照组表2各给药组对前列腺增生体积影响
△△P＜0.01vs空白对照组，*P＜0.05，**P＜0.01vs模型对照组
权利要求
1.知母提取物与黄柏提取物的组合物在制备防治前列腺增生的药物或食品中的应用，其中的知母提取物是通过如下方法制得的知母粉碎后，用20-95％含水乙醇加热提取或浸泡提取，提取液浓缩后离心或过滤，弃沉淀，上清液或过滤液备用；将上述上清液或过滤液进行聚苯乙烯多孔性吸附树脂吸附，水淋去杂质后，用上样生药质量的5～15倍量体积的15～25％含水的C1～C5低级醇洗脱；洗脱液浓缩至无醇，静置，析出沉淀，离心或过滤，得沉淀提取物1，上清液或过滤液备用；在上清液或过滤液中加入乙醇醇沉，乙醇终浓度为70-95％，弃沉淀，将醇沉后的上清浓缩至干，得固体物为提取物2；或将上清浓缩后，喷雾干燥，也得提取物2；合并提取物1与提取物2并混合均匀，即得知母提取物；其中的黄柏提取物是通过如下方法制得的黄柏粉碎后，用40～80％含水乙醇渗漉提取，其余步骤同知母提取物，既得黄柏提取物。
2.根据权利要求1所述的知母提取物，其特征在于知母提取物中芒果苷和新芒果苷含量之和≥50％。
3.根据权利要求2所述的知母提取物，其特征在于知母提取物中芒果苷与新芒果苷的含量比为1∶1～5∶1。
4.根据权利要求1所述的黄柏提取物，其特征在于黄柏提取物中小檗碱的含量≥50％。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域。知母的化学成分主要为皂苷和黄酮类成分，已知有抗糖尿病的药用和抗菌作用。黄柏的化学成分主要是有生物碱，已知有抗菌作用。本发明的目的在于提供知母提取物与黄柏提取物的组合物在制备防治前列腺增生的药物或食品中的应用，本发明的知母提取物中芒果苷和新芒果苷含量之和≥50％，本发明的黄柏提取物中小檗碱含量≥50％。本发明还提供了上述知母和黄柏提取物的具体制备方法。本发明经动物实验证明知母提取物与黄柏提取物的组合物可明显治疗丙酸睾酮引起的大鼠前列腺增生，因此，知母提取物与黄柏提取物的组合物可用于制备防治前列腺增生的药品和食品。
文档编号A61P13/00GK101062249SQ200710040990
公开日2007年10月31日 申请日期2007年5月22日 优先权日2007年5月22日
发明者陈万生, 李铁军, 孙连娜, 孙赫 申请人:中国人民解放军第二军医大学