专利名称：糙叶败酱苷元提取物及其制备方法和抗结肠癌用途的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及医药、食品、饮料技术领域，具体地说是涉及中药提取物及其制备方法和用途，更具体地说是涉及中药糙叶败酱苷元提取物及其制备方法和用于制备抗结肠癌产品的用途。
背景技术：
(一)糙叶败酱的研究概况1、植物资源和应用概况糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge.)为败酱科败酱属植物，多年生草本，高20～40厘米。茎丛生，茎上部多分枝，分枝处有节纹。叶对生；革质，羽状分裂，裂片倒披针形、狭披针形或长圆形，有牙齿，顶端裂片较侧裂片略大，叶缘及叶面被毛。聚伞花序顶生，呈伞房状排列；花轴及花梗上生细毛；苞片狭窄，寓生；花小，黄色，花冠合瓣，5裂；雄蕊4；子房3室，柱头头状。果实翅状，卵形或近圆形，扁薄如纸，直径约6毫米，有网纹，种子位于中央。产于分布中国河南、河北、山西及东北等地，野生于墓地及荒地边。
始载于《神农本草经》。原名“败酱”。陶弘景注“生江夏川谷，八月采根，暴干。……气如败豆酱，故以为名。《唐新本草》载败酱多生冈岭间。叶似水莨及薇衔，丛生，花黄根紫，作陈酱色。”由此可知，古本草所载败酱用根，秋季刨采，洗净，晒干，生用。干燥根呈不规则的圆柱形，长短不一，根较粗，直径4～12mm；外皮棕褐色或棕黑色，皱缩易剥落，剥去外皮后呈土黄色。体轻质松，根外观断面呈放射状裂纹，外层为黄棕色的环状纹；根的横切面木质部导管群呈放射状排列，皮层及髓射线薄壁组织中簇晶少较大，直径17～28～45μm。以条长、肥实、色棕褐者为佳。
《广西中药志》味辛，性温；入心、肝二经。败毒抗癌、涂湿祛瘀，民间用于治疗伤寒、温症、跌打损伤、妇女崩中、赤白带下等症，临床上糙叶败酱粗提物被用于治疗急慢性白血病、子宫癌、宫颈癌、大肠癌等。
现在中医开方多用败酱草，市场供应的也为全草，其品种较为复杂；败酱草多在民间使用。
为了与败酱草区别起见，将败酱的根茎与根称为败酱根，而不用古本草中“败酱”的名称。商品败酱根仅见于中国河北承德地区药材公司。
糙叶败酱常与其同属植物异叶败酱(P.heterophylla Bunge.)混用，俗称墓头回(异名墓头灰，见《山西中药志》；箭头风，见《广西中药志》，亦称追风箭、脚汗划)，表示有起死回生的功效。异叶败酱(Patrinia heterophylla Bge.)根茎细，直径1～4mm，根茎中不含淀粉粒。
其他的同属植物尚有白花败酱(Patrinia villosa Juss.)根茎细长，直径2～4mm，节间长3～6cm(败酱不超过2cm)。根茎横切面皮层狭窄；木质部无薄壁组织环带；髓部宽，呈圆形；草酸钙簇晶少，存在于韧皮部之间及髓部有的薄壁细胞中。
2、化学成分世界各国学者对糙叶败酱的化学成分进行了广泛研究，发现其含有木脂素类化学成分(参见 李延钊、张卫东、顾正兵等.中成药，2005.36(3)338～340；李延钊、张卫东、顾正兵等.药学学报，2003.38(7)520～522)、环烯醚萜成分(参见Kouno，I.；Yasuda，I.；Mizoshiri，H.et al.Phytochemistry，1994，37(2)，467～472；Kouno，I.；Yasuda，I.；Jiang ZH.et al.Phytochemistry，1995，40(5)，1567～1568；)、多糖成分(参见 扬建萍、何福江、李洪刚.中草药，1996，27(11)660～661)、皂甙及挥发油(挥发油中主成分为β-蒎烯、δ-榄香烯)，另外还含有生物碱、curvularin、黄酮、β-谷甾醇、胡萝卜苷、齐墩果酸、十六烷酸α-单甘酯等(参见顾正兵、杨根金、丛海英.中草药，2002，33(9)781～782；顾正兵、杨根金、丛海英.药学学报，2002，37(11)867～869)。但是其具体抗结肠癌的活性成分还不明确。
3、药理活性中国对糙叶败酱的药理作用进行了较广泛的研究，通过药理研究及临床观察，证明败酱根有明显的镇静作用，现已生产败酱根茎及根的浸膏片应用，收载于中国药典1977年版。还发现糙叶败酱根和根茎的挥发油具有镇静、镇痛作用，其醇提物具有止血作用；研究其抗肿瘤及免疫调节作用发现糙叶败酱的乙醇提取物可增加小鼠巨噬细胞的吞噬作用和细胞毒效应，提高酸性-醋酸萘酚酯酶(简称ANAE)阳性淋巴细胞百分数及Ea玫瑰花环形成百分率，并对小鼠肉瘤S180生长有抑制作用，与其能提高非特异性免疫功能有关(参见王荫棠，王学江，燕玉霞等.兰州医学院学报，1988；4(1)11-14)；其水提液腹腔注射，可使小鼠巨噬细胞吞噬及细胞毒性均明显提高，有促进主动免疫的功能；其水提物瘤内注射，对小鼠S180肉瘤抑制率达62.5％，并观察到是直接杀伤作用(参见张元杏，王惠芬，黄泽菘等.中西医结合杂志，1984；4(2)109-110)。
糙叶败酱能增强机体抗肿瘤的免疫机能，体外试验证明，水提取物不论口服或腹腔注射，对移植性小鼠肉瘤S-180及艾氏腹水癌，均有抑制作用；其中对艾式腹水癌有明显抑制作用和治疗作用，尤以腹腔给药疗效较明显；局部注射可使小鼠实体型腹水癌局部肿瘤逐渐变硬变干，从根部脱落，溃疡面逐渐修复而治愈。
有报道墓头回总甙片对艾氏腹水型肿瘤和S180肉瘤有较强的抑制作用(参见陈金秀.中国中医药科技1999，6(5)299；张立伟，赵春贵，杨频.山西大学学报(自然科学版)1996，19(2)161-164)。临床研究表明墓头回总甙片结合手术、化疗治疗50例大肠癌患者，患者1年、2年、3年的生存率分别为79％、61％、40％；可明显提高大肠癌患者生活质量、近期有效期、生存期，该制剂能明显增强患者的免疫功能，显著降低癌胚抗原(CEA)水平，能够提高T细胞免疫功能，增强体内NK杀伤细胞的活性；与5-氟尿嘧啶合用减毒增效作用明显(参见陈金秀，马培志，王怀璋.中草药，1999；30(7)528-529；王怀章，王迎红，陈金秀，王守章.中国肿瘤临床与康复，2001；8(1)37-39)。但是墓头回总甙仍然是粗提物，成分复杂，具体抗结肠癌的活性成分尚未见报道。
据北京医学院系药理实验表明，本品的挥发油也有镇静作用。糙叶败酱根及根茎中挥发油能显著延长戊巴比妥钠引起的小鼠睡眠时间，但弱于黄花败酱挥发油；对P-450有激活作用。
最新的研究成果表明，糙叶败酱中含有的环烯醚萜苷元PS-I可显著抑制人前列腺癌细胞株DU145和PC3生长，并呈时间、剂量相关，是糙叶败酱抗肿瘤活性成分之一(参见李铁军、邱彦、芮耀诚等.解放军药学学报，2004，20(2)101～102)。但是该研究并未阐明PS-I是否也具有抗结肠癌的活性。
4、单方及复方的临床应用《本草原始》治伤寒，温疟。《河南中药手册》洗脚，治脚痛。《山西中药志》敛肝燥湿，止血。治妇人髋疽，赤白带下。《广西中药志》祛瘀，消肿。治跌打。
(1)《董炳集验方》选方治崩中，赤白带下墓头回一把，酒水各半盏，新红花一捻，煎七分，卧时温服。日近者一服，久则三服。内服煎汤，2～3钱。外用煎水洗。
(2)败毒抗癌，用于癌瘤积毒肝癌墓头回15克，七叶一枝花、半枝莲各30克；切碎，水煎3次分服，日1剂。能使临床症状缓解，肿块软缩，延长生存期。
白血病墓头回15克，羊蹄根30克 水煎服，日1剂。能使规则出血与发热消除，肝、脾肿块软缩，症状缓解。
宫颈癌墓头回、生薏仁、丹皮、黄柏、蚤休各9克，龙胆草6克，土茯苓15克，蜀羊泉、半枝莲、白花蛇舌草各30克。切碎，水煎3次分服。能使白带夹血、小腹坠痛等症状缓解，癌肿缩小，逐渐平复。
胃癌墓头回、红糖各30克，生姜3片。煎汤代茶，日1剂。能使痛胀、呕血等症状减少，癌肿缩小，饮食好转。
食管癌墓头回30克，全瓜蒌15克，山慈姑、莪术、枳壳各9克，红花6克。切碎，浓煎，冲单糖浆，分多次口服，日1剂。能使临床症状显著改善，癌肿逐渐消失，吞咽顺利。
大肠癌墓头回、鱼腥草、山豆根各15克，土茯苓、六月雪各12克，木槿花、黑木耳、槐花、樗根皮各9克，皂刺6克。切碎，水煎2次，早、晚分服，日1剂，每次冲服醒消丸1丸乳香(去油)、没药(去油)各30克，雄黄15克，麝香45克共研细末，用黄米饭约30克，捣和为醒消丸，丸重9克。坚持服用，能使大便下血，肠梗阻导致的诸种症状缓解，癌肿逐渐缩小，溃疡修复。亦可配合其它综合治疗。宜于结肠癌与直肠癌。
(3)除湿祛瘀，用于湿热瘀血湿热白带墓头回15克，红花1.5克 水煎服。
风湿骨痛墓头回9克，水煎服。同时用适量，煎热汤熏洗。赤痢淤滞 墓头回30克，马齿苋、金银花各15克，甘草9克 切碎，水煎服。
崩漏血滞墓头回45克，茜草9克 水煎服。带下夹血 墓头回，石见穿各30克。水煎3次分服，连服1周。
便下脓血墓头回15克，生地炭、地榆、槐角各9克，焦白术、防风各6克。水煎服，日1剂。
(二)常用中草药有效成分的提取分离方法1、溶剂提取法(1)原理溶剂提取法是根据中草药中各种化学成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出的成分溶解度小的溶剂，将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。当溶剂加到中草药原料(需适当粉碎)中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质，而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，如此多次往返，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出，继续多次加入新溶剂，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为亲水性有机溶剂及亲脂性有机溶剂，被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同。有机化合物分子结构中亲水性基团多，其极性大而疏于油；有的亲水性基团少，其极性小而疏于水。各类溶剂的性质，同样也与其分子结构有关。这样，发明人就可以通过对中草药成分结构分析，去估计它们的此类性质和选用的溶剂。总的说来，只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当，就会在其中有较大的溶解度，即所谓“相似相溶”的规律。这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分的依据之一。
(2)溶剂的选择运用溶剂提取法的关键，是选择适当的溶剂。溶剂选择适当，就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等。常见的提取溶剂可分为以下三类①水水是一种强的极性溶剂。中草药中亲水性的成分，如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及苷类等都能被水溶出。为了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及碱水作为提取溶剂。
②亲水性的有机溶剂也就是一般所说的与水能混溶的有机溶剂，如乙醇(又称酒精)、甲醇(又称木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好，对中草药细胞的穿透能力较强。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。难溶于水的亲脂性成分，在乙醇中的溶解度也较大。还可以根据被提取物质的性质，采用不同浓度的乙醇进行提取。用乙醇提取比用水量较少，提取时间短，溶解出的水溶性杂质也少。乙醇为有机溶剂，虽易燃，但毒性小，价格便宜，来源方便，有一定设备即可回收反复使用，而且乙醇的提取液不易发霉变质。由于这些原因，用乙醇提取的方法是历来最常用的方法之一。甲醇的性质和乙醇相似，沸点较低(64℃)，但有毒性，使用时应注意。
③亲脂性的有机溶剂也就是一般所说的与水不能混溶的有机溶剂，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。这些溶剂的选择性能强，不能或不容易提出亲水性杂质。但这类溶剂挥发性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，价格较贵，设备要求较高，且它们透入植物组织的能力较弱，往往需要长时间反复提取才能提取完全。如果药材中含有较多的水分，用这类溶剂就很难浸出其有效成分，因此，大量提取中草药原料时，直接应用这类溶剂有一定的局限性。
(3)提取方法用溶剂提取中草药成分，常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等。同时，原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率，必须加以考虑。
①浸渍提取法(简称浸渍法)浸渍法系将中草药粉末或碎块装入适当的容器中，加入适宜的溶剂(如乙醇、稀醇或水)，浸渍药材以溶出其中成分的方法。本法比较简单易行，但浸出率较差，且如用水为溶剂，其提取液易发霉变质，须注意加入适当的防腐剂。
②渗漉提取法(简称渗漉法)渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断添加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种浸出方法。当溶剂渗进药粉、溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速，在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于原药材重的10倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀浸出液作为另一批新原料的溶剂之用。
③煎煮提取法(简称煎煮法)煎煮法是中国最早使用的传统的浸出方法。所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿，不宜用铁锅，以免药液变色。直火加热时最好时常搅拌，以免局部药材受热太高，容易焦糊。有蒸汽加热设备的药厂，多采用大反应锅、大铜锅、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加热。还可将数个煎煮器通过管道互相连接，进行连续煎浸。
④加热回流提取法应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材约为容量的20％～60％，溶剂浸过药材表面约1～2cm。在水浴中加热回流，一般保持沸腾3～6小时，放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。
⑤连续回流提取法应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成分，不论小型实验或大型生产，均以连续提取法为好，而且需用溶剂量较少，提取成分也较完全。实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器。连续提取法，一般需数小时才能提取完全。提取成分受热时间较长，遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法。
2、分离和纯化方法上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。
(1)溶剂分离法一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。水浸膏或乙醇浸膏常为胶状物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌入适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。
(2)溶剂萃取法①萃取法溶剂提取萃取法又简称萃取法，是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法。萃取时如果各成分在溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高；如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行萃取，如果有效成分是偏于亲水性的物质，在亲脂性溶剂中难溶解，就需要改用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性。提取黄酮类成分时，多用乙酸乙脂和水萃取。提取亲水性强的皂苷则多选用正丁醇、异戊醇和水作萃取。不过，一般有机溶剂亲水性越大，与水作萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大。
②逆流连续萃取法是一种连续的溶剂萃取法。其装置可具有一根、数根或更多的萃取管。管内用小瓷圈或小的不锈钢丝圈填充，以增加溶剂萃取时的接触面。如果一种中草药的水浸液需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取，则需将水提浓缩液装在萃取管内，而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内。萃取是否完全，可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查。
③逆流分配法逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法与溶剂逆流萃取法原理一致，但加样量一定，并不断在一定容量的溶剂中，经多次移位萃取分配而达到混合物的分离。
④液滴逆流分配法液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法。为近年来在逆流分配法基础上改进的溶剂萃取法。对溶剂系统的选择基本同逆流分配法，但要求能在短时间内分离成，并可生成有效的液滴。由于移动相形成液滴，在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面，促进溶质在溶剂中的分配，故其分离效果往往比逆流分配法好。
(3)大孔吸附树脂法大孔吸附树脂是20世纪60年代发展起来的一类有机高聚物吸附剂，具有良好的吸附性能，近十余年来逐渐被应用于中草药化学成分的提取分离和中药新药的开发研制。
大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结合的分离材料。它的吸附性是由于范德华引力或生成氢键的结果。筛选原理是由于其本身多孔性结构所决定。由于吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。这使得有机化合物尤其是水溶性化合物的提纯得以大大简化。大孔吸附树脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯缩聚而生成，由于改性剂的加入，大孔吸附树脂的极性发生改变，按照树脂的表面性质，吸附树脂一般分为非极性、中极性和极性三类。
非极性吸附树脂是由偶极矩很小的单体聚合物制得的不带任何功能基的吸附树脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯体系的吸附树脂，如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附树脂。
中极性吸附树脂指含酯基的吸附树脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯与双甲基丙烯酸酯等交联的一类共聚物。它是在非极性大孔吸附树脂的基础上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈缩聚而成，如中国国内经常使用的AB-8大孔吸附树脂。
极性吸附树脂是指含酰胺基、腈基、酚羟基等含氮、氧、硫极性功能基的吸附树脂。此外，有时把含氮、氧、硫等配体基团的离子交换树脂称作强极性吸附树脂，强极性吸附树脂与离子交换树脂的界限很难区别。极性大孔吸附树脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亚砜类缩聚而成，如日本三菱化工的Diaion HP 2MG、美国Rohm-hass公司的XAD-10，XAD-9大孔吸附树脂。
与活性炭和其它吸附剂相比，大孔吸附树脂具有很多的优点，如对某种物质的吸附选择性较高；物理化学稳定性和机械强度较好；品种规格较多，可根据需要改变树脂物理或化学结构；吸附树脂一般为球状颗粒，流体阻力较小等等。因而被广泛应用于化工、医药等领域，近年来关于大孔吸附树脂在天然产物提取分离中的应用研究报道越来越多。大孔吸附树脂对中草药化学成分如生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些苷类成分都有一定的吸附作用。对糖的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强。
(4)沉淀法是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀，以获得有效成分或除去杂质的方法。如铅盐沉淀法铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一。由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中，能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀，故可利用这种性质使有效成分与杂质分离。然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气体，使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。
(5)盐析法盐析法是在中草药的水提液中，加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。常用作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。
(6)透析法透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制。
(7)结晶、重结晶和分步结晶法鉴定中草药化学成分，研究其化学结构，必须首先将中草药成分制备成单体纯品。在常温下，物质本身性质是液体的化合物，可分别用分馏法或层析法进行分离精制。一般地说，中草药化学成分在常温下多半是固体的物质，都具有结晶体的通性，可以根据溶解度的不同用结晶法来达到分离精制的目的。
3、常用干燥方法(1)真空干燥是基于这样一基本原理水的饱和蒸气压与温度紧密相关，在真空状态下，水的沸点降低，即在真空下操作也就是在低温下操作，可避免在高温下营养成分如维生素等的破坏，同时提高了干燥速度。真空干燥在食品、制药、化工等行业有广泛的应用，中国也开发和引进了各种真空干燥设备，其结构形式多种多样。常用的形式主要有箱式真空干燥器、双锥式真空干燥器、带式真空干燥器等。这些传统的真空干燥装置主要采用热风，蒸汽或电等加热，利用热传导、对流或辐射原理将热量从外部传到物料内部。真空干燥具有干燥温度低，干燥室内相对缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐变等一系列优点，适合于热敏感性食品物料的干燥，此外设备成本、干燥费用也相对较低。
(2)喷雾干燥是流化技术用于液态物料干燥的一种方法。因是瞬间干燥，特别适用于热敏性物料，故所得产品质量好，保持原来的色香味，且易溶解。利用喷雾干燥来制备微囊的研究正在进行，它是将心料混悬在衣料的溶液中，经离心喷雾器将其喷入热气流中，所得的产品是衣料包心料而成的微囊，这种微囊粉末可采用于直接压片，也可制备胶囊剂、糖浆剂或混悬剂。
(3)冷冻干燥是将干燥液体物料冷冻成固体，在低温减压条件下利用冰的升华性能，使物料低温脱水而达到干燥的一种方法。由于物料在高度真空及低温条件下干燥，故对某些极不耐热物品的干燥很适合。王大林报道了一种喷雾通气冻干新技术，是利用冷的空气或氮气作为介质，迅速流经冻结物使水升华，喷雾冻干制得的产品微粒小、干燥快、时间短、均匀、流动性好，并具良好的速溶性。近年来，对膏状物料和粘稠物料干燥的研究取得了较大进展，流态化技术、喷射技术、惰性载体技术，则是在此研究基础上发展起来的。旋转闪蒸干燥机、热喷射气流干燥机、惰性载体干燥机均适合热敏性物料和膏状物料的干燥。这些新的研究成果用于中药制剂生产，将大大改善中药加工的技术水平，提高生产效率。
(4)远红外加热干燥法是一项新的干燥技术，其干燥原理是将电能转变为远红外辐射，从而被药材的分子吸收，产生共振，引起分子和原子的振动和转动，导致物体变热，经过热扩散、蒸发和化学变化，最终达到干燥的目的。远红外干燥可节省电能20％～50％，效果较好。
(5)微波干燥法是一项20世纪60年代迅速发展起来的新技术，微波干燥实际上是通过感应加热和介质加热，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它转变为热量从而达到干燥的目的。微波干燥可杀灭微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中国生产的微波加热成套设备有915mhz和2450mhz两个频率。
4、超临界CO2萃取方法(1)有关动、植物脂肪油成分的提取方法有水煮法、水媒分离法、分子蒸馏和减压蒸馏法、金属加合法、萃取结晶法、分盘冷冻压榨法和有机溶剂法等。
采用水煮加热法，因加热时间长、温度高，易使对热不稳定的挥发成分发生变化，如一些不饱和脂肪酸的氧化。水媒分离法，此分离法的明显优点是消除了有机溶剂法造成的高费用和公害，但是这种技术的缺点是得到的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的纯度或级别不如有机溶剂分离法高。分子蒸馏和减压蒸馏法为减少热变性，需用尿素加合物等方法来除去大部分饱和脂肪酸，在得到的产品中必须将其除去；虽然可得到较纯的脂肪酸，但需几步才能达到目标，较费时、费力，增加了生产成本。金属加合法分离需要较低的低温处理，最后还要设法去除金属离子，清除不尽还会造成金属离子污染。萃取结晶法得到脂肪酸纯度较高，在较低的温度下进行，能防止脂肪酸的氧化，但时间较长，不太适用于大规模的工业化生产。分盘冷冻压榨法缺点是，安放盘架和液压机的冷冻室需要数千平方米的面积和庞大的冷却系统，大的设施需要多人操作，劳动强度高，分离速度缓慢，效率低，不能连续操作。有机溶剂法是采用石油醚或乙醚有机溶剂在水浴上加热情况下，进行回流循环提取；由于所采用的有机溶剂如石油醚或乙醚等均为一种低沸点物质，易燃易爆，同时，有机溶剂的使用一方面会污染环境，另一方面有机溶剂有可能在提取物中有残留，会影响提取物在医药上的进一步应用。
(2)有关动、植物脂肪油成分的超临界CO2萃取方法一种流体当处在其临界温度和压力状态时，被称为超临界流体。由于超临界流体的密度接近于液体，具有与液体溶剂相当的萃取能力。又具有与气体相当的低粘度，扩散能力比液体要大100倍，因而具有较高的传质性。采用超临界萃取的时候，利用超临界流体的这些性质，使之与待分离的物质相接触穿透基体，从中萃取出目标物质。然后利用降压和/或升温的办法降低其密度，从而降低溶质在其中的溶解度，使被萃取物与溶剂分离。因为不同的物质在相同的萃取条件下溶解度是不同的，因而有可能借助这种差异将它们进一步分开。超临界流体萃取常常选用CO2等临界温度低且化学惰性的物质为萃取剂，它特别适用于热敏物质和易氧化物质的分离，因此非常适用于对于动物油脂的提取分离。因此，本发明采取该方法，能够制备高纯度的被提取物的脂肪油。
超临界CO2萃取方法是这样提取的把干燥的被提取物的粗粉放在超临界萃取设备中用CO2进行萃取，减压后即得被提取物的脂肪油，室温条件下呈浅黄色透明油状；提取的被提取物的脂肪油中总脂肪酸的纯度在40以上，优于其他提取方法；总脂肪酸一般包括油酸、亚油酸、棕榈酸以及余量的其他组分等。
超临界CO2萃取被提取物的脂肪油的方法包括如下步骤(1)将干燥的被提取物粉碎至10～30目后，置于超临界萃取釜中，连续地通入超临界状态下的CO2进行萃取，优选的条件一般是CO2流量10～55kg/h·kg原料、压力5～50Mpa、温度15～75℃、时间0.5～6h；进一步优选的条件一般是CO2流量45kg/h·kg原料、压力35Mpa、温度50℃、时间1h；(2)将萃取了被提取物的脂肪油的CO2减压至1～12MPa，即可获得在室温条件下被提取物的脂肪油，被提取物的脂肪油中总脂肪酸的纯度在40％以上，萃取物的理化性状和脂肪酸纯度都优于其他提取方法。
萃取条件的选择是通过以下办法实现的首先选定四因素、三水平，根据正交设计方法，按L9(34)交设计表安排实验(正交实验设计安排参考郭祖超主编的《医学统计学》，人民军医出版社，1999年第一版)。从正交实验结果，分析得到萃取工艺条件。
对超临界CO2萃取的被提取物的脂肪油进行脂肪酸甲酯化后，进行气相色谱—质谱分析。
超临界CO2萃取被提取物的脂肪油的制备方法不使用有机溶剂等物质，不会污染环境，也不存在有害溶剂残留等问题，而且操作简便、萃取时间短、产品纯度高，使用的CO2廉价而且可重复循环使用，工业生产成本低廉。
(三)结肠癌的研究进展大肠癌包括直肠癌和结肠癌，是常见恶性肿瘤之一，以40～50岁的壮年人发病率最高。西欧及北美发达国家是发病率最高的国家，发病率高达35/10万～50/10万，其发病率及病死率在恶性肿瘤中居第2位；在东方，大肠癌也不少见，我国的有关资料显示，大肠癌发病率占全部恶性肿瘤的第4～6位，每年大约有14万人新患大肠癌，占全部癌症患者的6.8％；大肠癌死亡率为3.54/10万，占癌症死亡率的5.29％，居第6位。华东地区是大肠癌的高发区，其中上海又是发病率和死亡率最高的城市。1979年时上海市大肠癌粗发病率19.6/10万，为第四位常见癌症(顺序为胃癌、肺癌、肝癌、大肠癌)；1989年起粗发病率已升至28.2/10万以上，仅次于肺癌、胃癌，而成为第三位常见癌症；1997年上海大肠癌的发病率男性高达37.2/10万，女性也达到了35.5/10万。令人不安的是，各国的统计资料均显示大肠癌尤其是其中的结肠癌发病率有增高的趋势，近年来在青年人中发生率也明显升高，约有5％患者的年龄在30岁以下。所以大肠癌尤其是结肠癌是值得大家特别重视的一个疾病。结肠癌的治疗主要是手术切除和化学治疗。化疗药物包括氟尿嘧啶、丝裂霉素、亚硝脲类等，具有较大的毒副作用，给患者带来肉体与精神上的痛苦，因此寻找更加安全有效、毒副作用小的防治结肠癌药物具有极其重要的意义。
经文献检索等，到目前为止，尚未发现有糙叶败酱苷元提取物具有防治结肠癌作用方面的报道。
发明内容
本发明所需要解决的技术问题是公开了一种防治结肠癌的产品即中药糙叶败酱的苷元提取物尤其是药物，该产品以糙叶败酱中所含有的总环烯醚萜苷元为有效成分，并公开该产品的制备方法和用途，以克服现有技术存在的上述缺陷。
本发明的目的之一在于提供一种可以防治结肠癌的产品即糙叶败酱苷元提取物，其中的有效成分是糙叶败酱中的总环烯醚萜苷元，最优选药物及药物组合物。
本发明的另一目的在于提供用于防治结肠癌的该产品的制备方法，特别是糙叶败酱苷元提取物的制备方法。
本发明进一步提供以所述糙叶败酱苷元提取物为活性成分，用于防治结肠癌的制剂和相应的剂型。
也就是说，本发明意在明确一种防治结肠癌的药物及其制备方法，即中药糙叶败酱的活性部位和活性成分及其制备方法；进而将糙叶败酱的苷元提取物用于制备抗结肠癌产品，以糙叶败酱中所含有的总环烯醚萜苷元为有效成分制备抗结肠癌产品尤其是药物及其药物组合物，该有效成分对结肠癌的防治有良好疗效。换句话说，本发明涉及中药糙叶败酱苷元提取物及其制备方法，以及该苷元提取物及其组合物如药物组合物等在制备抗结肠癌产品中的应用。
所述的抗结肠癌产品是指用于诊断、检测、预防、治疗或研究结肠癌及相关病症的产品；其中，所述的抗结肠癌产品是包括医药、食品或饮料领域产品中的一种或多种，优选药物、试剂、食品、保健食品、添加剂或饮料中的一种或多种，进一步优选抗结肠癌药物、抗结肠癌试剂、抗结肠癌食品或抗结肠癌饮料等中的一种或多种，最优选抗结肠癌药物。
(一)技术构思自主开发创新药物是中国目前的一项紧迫任务。中国中医药学具有悠久的历史，用中草药预防和治疗疾病方面也积累了丰富的经验，因此从中药中寻找有效的活性成分是一条有效的途径，也是中国创新药物研制的优势之所在。
发明人检索了《新编国家中成药》、《临床常用方剂手册》、《中国常用中成药大全》等书籍，推测在糙叶败酱中极有可能存在抗结肠癌活性的物质或物质群。但是，由于对其化学成分研究不深入，药理筛选不足，导致活性部位和活性成分不明确以及没有可行的质量标准，限制了糙叶败酱的进一步开发和利用。
因此，本发明通过对单味糙叶败酱药材(根和全草)的苷元提取物进行系统的化学成分研究，并筛选和证明该苷元提取物的活性和用途。
经过化学成分研究，证明糙叶败酱活性部位中的主要成分为总环烯醚萜苷元。而根据文献检索，发明人发现总环烯醚萜苷元大多具有多种显著的药理活性，从而推测糙叶败酱治疗结肠癌的临床药效，应主要是通过活性部位糙叶败酱苷元提取物的药效来发挥的，研究结果也证明和证实了糙叶败酱苷元提取物具有更显著的药理活性，实验证实糙叶败酱苷元提取物比总环烯醚萜苷元中的单体效果更佳。
(二)糙叶败酱苷元提取物1、糙叶败酱苷元提取物的组成发明人通过对糙叶败酱药材(根和全草)进行系统的化学成分分离、纯化和结构鉴定等实验研究，发现糙叶败酱中主要含有大量的挥发油、总环烯醚萜苷元等多种化合物。
本发明所述的糙叶败酱苷元提取物是指由糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge.)或同属植物的根或全草中提取分离出的包含多种环烯醚萜的混合物，该混合物含有8种环烯醚萜苷元成分(PS-I、G7-C、G7-E、G7-Z、BJ3401、G9-A、G9-C和G9-D)中的一种或多种。
该混合物还具有如下特征该混合物与Godin试剂(1％香草醛的乙醇溶液和3％高氯酸水溶液)反应，于281nm处比色，测定吸收度。该吸收度按单体BJ3401与Godin试剂反应于281nm处比色的标准曲线折算，折算出的单体BJ3401含量，应该占该混合物总量的40％以上。
也就是说，糙叶败酱苷元提取物中的成分主要包括总环烯醚萜苷元，还包括其他成分。
其中，总环烯醚萜苷元在该苷元提取物中的含量范围是40％～99.5％(W/W，即重量百分比)，优选40％～90％，进一步优选50％～60％；其他成分在该苷元提取物中的含量范围是0.5％以下，其他成分是包括鞣质、单糖或多糖、呫吨酮类(xanthones)或类胡萝卜素等中的一种或多种。
现有的研究表明，其他成分对药效或药物的使用等方面至少没有负面的影响，而且分离这些成分成本较高，因此目前没有进一步纯化的必要。
2、糙叶败酱苷元提取物中的总环烯醚萜苷元各单体的化学结构 PS-I结构式PS-I中文名称9α-1，7-二氢-1-β-O-(3-甲基-丁酰)-4-[(3-甲基-丁酰)-O-]甲基-6-酮-8-羟基-8-α-羟甲基-环戊二烯并[c]吡喃PS-I英文名称(9α-1，7-dihydro-1-β-O-(3-methylbutanoyl)-4-[(3-methylbutanoyl)-O-]methyl-6-one-8-α-hydroxymethyl-8-β-hydroxycyclopenta[c]pyron)
当R＝H，为1R，3R及1S，3S的外消旋体时，表示G9-C；当R＝H，为1R，3S及1S，3R的外消旋体时，表示G9-A；当R＝COCH2CH(CH3)2，为1R，3S及1S，3R的外消旋体时，表示G7-Z。
G7-E的结构式 G9-D的结构式 BJ3401的结构式G7-C的结构式3、糙叶败酱苷元提取物的活性在筛选具有抗结肠癌作用的天然活性成分过程中，发明人发现中药糙叶败酱(Patriniascabra Bunge.)根或全草的甲醇浸膏具有抗结肠癌作用，通过对其进行以活性为指导的分离，发现甲醇浸膏的氯仿萃取部分活性最强，继续分离发现，氯仿萃取部分经硅胶柱层析，乙酸乙酯洗脱部分为活性部位。该活性部位再反复通过硅胶柱色谱、HPLC、SephdexLH-20色谱分离纯化，发现主要成分为多种环烯醚萜苷元，一共分离出8种环烯醚萜苷元成分(PS-I、G7-C、G7-E、G7-Z、BJ3401、G9-A、G9-C和G9-D)，其中PS-I、G7-C、G7-E、G7-Z、G9-A、G9-C为首次从该植物中发现的新化合物。
本发明所述的糙叶败酱苷元提取物对小鼠结肠癌(C26)移植性肿瘤表现出良好的抑制作用，其高剂量组(800mg/kg)口服抑瘤率达40％以上，具体见实施例。
PS-I和BJ3401是从糙叶败酱苷元提取物分离出的单体，通过体外实验证明其具有抗结肠癌活性，但二者活性均低于糙叶败酱苷元提取物，具体见实施例，说明糙叶败酱苷元提取物是由多种成分综合发挥抗结肠癌作用的，除PS-I和BJ3401外其它环烯醚萜成分也具有活性。
(三)糙叶败酱苷元提取物的制备方法本发明所说的糙叶败酱苷元提取物的制备方法包括如下步骤(1)提取取糙叶败酱原料若干，提取，得提取液，即糙叶败酱苷元提取物；(2)分离纯化将提取液分离纯化，即得糙叶败酱苷元提取物。
所述的糙叶败酱原料包括糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge.)或同属植物的根或根茎。
所述的提取方法包括溶剂提取法等本领域公知的所有可以使用的方法。
(四)糙叶败酱苷元提取物的用途1、概述本发明的进一步目的是提供糙叶败酱苷元提取物的在制备抗结肠癌产品中的新用途，产品是包括药物、试剂、食品或饮料等中的一种或多种，优选药物。
已完成的急性毒性实验证明，小鼠灌胃给药对糙叶败酱苷元提取物的最大耐受量超过2.0g/kg，相当于临床推荐用药剂量的440倍，表明该有效部位安全可靠。
上述实验结果显示本发明所指的糙叶败酱苷元提取物有较好疗效，为该中药提取物临床用于治疗结肠癌及其相关病症提供了更多的药理学依据。该糙叶败酱苷元提取物及其组合物是一种安全的治疗结肠癌及其相关病症的药物，其原料的根、根茎、全草、全草的地上部分或者其他部位等，或其原料的组合物，也可以直接或间接用于制备抗结肠癌产品。
2、糙叶败酱苷元提取物及其组合物的使用方法与要求本发明所述的糙叶败酱苷元提取物可以单独或与其它活性组分联合使用，包括用于制备用于诊断、检测、预防、保护、治疗或研究相关疾病的产品，包括药物、试剂、食品或饮料等，尤其是药物。
在具体使用方面，本发明所述的糙叶败酱苷元提取物能够单独使用，还能够与其他许多化学物质一起使用。无论这些化学物质是否具有生物活性或具有治疗疾病的功能，包括辅助功能如协同放大作用、拮抗或缓解糙叶败酱苷元提取物的副作用等，这些化学物质是包括医药学上可接受的载体、食品、天然产物、化学合成药物或人类用药等中的一种或多种；优选包括医药学上可接受的载体或者食品等中的一种或多种；进一步优选医药学上可接受的载体。
本文使用的“医药学上可接受的载体”包括任何和所有的生理适用的溶剂、分散介质、胞衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂或吸收延迟剂等中的一种或多种。医药学上可接受载体的例子包括一种或多种的水、盐水、磷酸缓冲盐水、葡萄糖、甘油或乙醇等及其组合物中的一种或多种。在许多情况下，在该组合物中最好包括等渗剂，例如，糖、诸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化钠等中的一种或多种。医药学上可接受载体还可以包含少量的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲液等中的一种或多种，它们增强了该糙叶败酱苷元提取物的有效期或效力。
从具体的分类上看，所说的医药学上可接受的载体是指医药学领域常规的药物载体，包括赋形剂，如淀粉或水等中的一种或多种；润滑剂，如甘油或硬脂酸镁等中的一种或多种；崩解剂，如微晶纤维素、琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠等；填充剂，如淀粉或乳糖等中的一种或多种；粘接剂，如预胶化淀粉、糊精、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或多种；渗透压调节剂，如葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一种或多种；稀释剂，如水等；吸收促进剂，如季铵化合物等；表面活性剂，如十六烷醇等；吸附载体，如高岭土或皂粘土等中的一种或多种；润滑剂，如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁或聚乙二醇等中的一种或多种；另外，还可以在组合物中加入其它辅剂，如香味剂或甜味剂等中的一种或多种。
例如，将活性组分糙叶败酱苷元提取物溶解、混悬或乳化于适宜的水性溶剂中(例如，蒸馏水、生理盐水或格林溶液等中的一种或多种)或油性溶剂中(例如，植物油例如橄榄油、芝麻油、棉籽油、玉米油或丙二醇等中的一种或多种)中，即可制得注射制剂，其中溶剂中可含有分散剂(例如，聚山梨酯80、聚氧乙烯硬化蓖麻油60、聚乙二醇、苯甲醇、氯代丁醇或苯酚等中的一种或多种)、渗透压调节剂(例如，氯化钠、甘油、D9-甘露糖、D-山梨醇或葡萄糖等中的一种或多种)。在这种情况下，如有必要，可加入添加剂，例如增溶剂(例如，水杨酸钠或醋酸钠等中的一种或多种)、稳定剂(例如，人血清白蛋白等)、止痛剂(例如，苯甲醇等)等。
本发明所述及的糙叶败酱苷元提取物还可以以组合物的形式联合使用，特别是与用其它化学物质如药物对动物尤其是哺乳动物包括人或其他动物进行治疗所用的组合物或者是类似的组合物。所述哺乳动物，包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、猪、马、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、猕猴或恒河猴等中的一种或多种。例如，可以将本发明糙叶败酱苷元提取物加入适于给与受治疗者的药用组合物中。通常，该药用组合物包含本发明糙叶败酱苷元提取物和药学上可接受的载体。
糙叶败酱苷元提取物的组合物特别是药物组合物可以有各种形式，包括例如液体、半固体和固体等剂量形式中的一种或多种；其中所说的药物组合物包括治疗有效量的糙叶败酱苷元提取物为活性成分，以及一种或多种医药学上可接受的载体。
糙叶败酱苷元提取物的药物组合物可以采用本领域公知的常规生产方法制成各种剂型，例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。所述的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂等中的一种或多种，采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种)、粘膜透析等中的一种或多种给药途径进行以及结肠癌及相关病症的诊断、检测、治疗或科学研究。
药物组合物优选含有重量比为0.5％～99％的活性成分糙叶败酱苷元提取物，进一步优选含有重量比为1％～95％的活性成分糙叶败酱苷元提取物，最优选含有重量比为5％～90％的活性成分糙叶败酱苷元提取物。
糙叶败酱苷元提取物的药物组合物一般必须无菌且在生产储存条件下稳定。可以将该组合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂质体或其它适合于高药物浓度的有序结构。通过将所需量的该糙叶败酱苷元提取物与所需上述成分的一种或组合一起加入适当的溶剂中并接着进行除菌过滤制备无菌注射液。一般而言，通过将该糙叶败酱苷元提取物加入含有基本分散介质和所需的上述其它成分的无菌溶媒中制备分散液。在用于制备无菌注射液的无菌粉剂的情况下，推荐的制备方法是真空干燥和冷冻干燥剂。例如，通过诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过保持所需颗粒大小和通过使用表面活性剂，可以保持溶液的适当流动性。通过在该组合物中包括延迟吸收的药剂(例如单硬脂酸盐或明胶)可以达到注射组合物的延长吸收。
用于患者时，本发明所述的糙叶败酱苷元提取物剂量为1mg～500mg/kg·天(d)，该剂量或用量通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定，优选5mg～40mg/kg·d。
本发明糙叶败酱苷元提取物及其药用组合物可以包括“治疗有效量”或“预防有效量”的本发明糙叶败酱苷元提取物。“治疗有效量”是指在必要的剂量和时间下有效达到所需治疗效果的量。糙叶败酱苷元提取物的治疗有效量可以根据诸如个体的病况、年龄、性别和体重以及该糙叶败酱苷元提取物在该个体引起所需反应的能力等因素而变化。治疗有效量亦指该糙叶败酱苷元提取物的有益治疗效果超过其任何毒性或有害效果的量。“预防有效量”是指在必要剂量和时间下有效达到所需预防效果的量。因为预防剂量用于患病前或疾病早期的受治疗者，预防有效量通常小于治疗有效量。本发明糙叶败酱苷元提取物的治疗或预防有效量的典型的非限制性范围是5mg～40mg/kg，更优选为5mg～20mg/kg。应注意，剂量值将根据欲减轻的疾病类型和严重性变化，也就是说用于患者时，本发明所述的糙叶败酱苷元提取物的剂量或用量，通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定。另外，应理解，对于任何特定受治疗者，应随着时间根据个体需要和给与或监督给与所述组合物的人的专业判断调整特定剂量制度，并且本文设定的剂量范围仅为例证性的，并不会限制要求保护的组合物的范围或实践。
也就是说，需要根据治疗的对象、给药途径、所治疗疾病和状况等，变化本发明糙叶败酱苷元提取物的每次和/或每日的剂量或用量。例如，经静脉给予哺乳动物，尤其是成年人(如体重60kg)，所述糙叶败酱苷元提取物的单剂量约为50mg～200mg，优选约100mg，优选每日给药1～3次。可以调整剂量单位，以提拱最佳所需反应(例如治疗或预防应答)。例如，可以单次大剂量给药，可以在一段时间内给予几个均分量或根据治疗情况的迫切性按比例降低或增加剂量。配制易于给药和剂量统一的剂量单位形式的非肠道组合物尤其有利。本文使用的剂量单位形式，指适于欲治疗的哺乳动物受治疗者的单元剂量的物理分离单位；每个单位含有预定量的计算用于与所需药用载体一同产生所需治疗效果的活性物糙叶败酱苷元提取物。本发明的剂量单位形式的规格，由以下确定并直接取决于以下(a)该糙叶败酱苷元提取物的独特特征和欲达到的特定治疗或预防效果，和(b)在混合这种用于治疗个体敏感性糙叶败酱苷元提取物的技术中的内在限制。
3、糙叶败酱苷元提取物及其组合物的药物剂型和给药途径本发明所述的糙叶败酱苷元提取物及其组合物制备抗结肠癌产品，其中按照饮料、食品技术领域的要求制备的产品能够诊断、检测、预防、保护、治疗或研究结肠癌及其相关病症；按照医药技术领域的要求制备的产品能够用于患者的治疗或保健，既能够单独直接用于制备治疗或保健的药物，也能够与许多化学物质进行混合或组合，直接或间接用于制备治疗或保健的药物。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。
在本发明中，所需物料包括本发明的原料、上述配套使用的化学物质等，均应根据实际情况和需要，采用食品级或药用级的物料。
本发明所述的糙叶败酱苷元提取物及其组合物，可以用本领域已知的各种方法给药，尽管在许多治疗用途中推荐的给药途径/给药方式是喷雾剂或口服给药。但是，技术人员会理解给药途径/给药方式随所需的结果而变化。在某些具体实施中，该活性化合物可以与保护该化合物免于快速释放的载体一同制备例如空释制剂，包括移植物传递系统、透皮贴传递系统或微囊传递系统等中的一种或多种。此外，还可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羟基乙酸、胶原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一种或多种。制备这种制剂的许多方法均已申请专利或一般为本领域技术人员所知(参见例如Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R.Robinson编辑，Marcel Dekker，Inc.，纽约，1978)。
本发明所述的糙叶败酱苷元提取物及其组合物，通常通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药等中的一种或多种方式，施用于需要这种治疗的患者。
也就是说，糙叶败酱苷元提取物制备的药物及其药物组合物可以采用本领域公知的方法制成各种剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、注射剂等，采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射、皮下注射等)、粘膜透析等给药途径进行结肠癌的防治。
用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂或胶囊等中的一种或多种。在实施时，本发明糙叶败酱苷元提取物可以与例如惰性稀释剂或可同化的食用载体一同口服。该糙叶败酱苷元提取物(和共它成分，如果需要)亦可以包于硬或软壳明胶胶囊、压制成片剂或直接加入受治疗者的膳食中。关于口服治疗给药，可以将所述糙叶败酱苷元提取物与赋形剂一起加入并以可食片剂、颊含片剂、酊剂、胶囊、悬液、糖浆或糯米纸囊剂等等中的一种或多种形式使用。
为了以非肠道给药之外给予本发明糙叶败酱苷元提取物，可能需要用防止其失活的材料对该糙叶败酱苷元提取物包衣或与该糙叶败酱苷元提取物一同给予。亦可以将补充的活性化合物加入该组合物中。在具体实施时，将本发明糙叶败酱苷元提取物与一种或多种可以用于治疗疾病的其它治疗药物共配制和/或共给予。这种联合使用，可以优越地利用较低剂量的该给予的治疗药物，因此避免可能的毒性或与各种单一疗法相关的并发症。
制成液体制剂如水剂、油悬浮剂或其它液体制剂中的一种或多种，如糖浆或酏剂等中的一种或多种；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液剂、水剂或油性悬浮剂等中的一种或多种。
以上所述的使用形式中，优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊剂、颗粒剂、栓剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂等中的一种或多种，进一步优选胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂或注射剂等中的一种或多种，特别优选混悬剂、乳剂、溶液剂或注射剂等中的一种或多种。
此外，糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料在某些情况下也能够单独直接用于制备抗结肠癌产品，也能够与许多化学物质进行混合或组合，以组合物的形式直接或间接用于制备抗结肠癌产品。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。
例如，糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末用于制备抗结肠癌产品特别是药物的各种剂型，或者是糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的辅料用于制备抗结肠癌产品尤其是药物的各种剂型，或者是糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的制备抗结肠癌产品如药物一起用于制备抗结肠癌产品如药物的各种剂型，或者是糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的辅助药物一起用于制备抗结肠癌产品如药物的各种剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂或混悬剂等中的一种或多种，优选胶囊剂。
所述的方法之一是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末灌装为胶囊剂，方法之二是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的制备抗结肠癌产品如药物一起灌装为胶囊剂，方法之三是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的辅助药物一起灌装为胶囊剂；方法之四是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末与有关的辅料一起按常规方法直接压为片剂或颗粒剂，方法之五是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末、有关的制备抗结肠癌产品如药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂或颗粒剂，方法之六是将糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的粉末、有关的辅助药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂或颗粒剂等。
除上述的六种基本方法外，还能够选择糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的其他形式或对糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料进行本领域公知的方法处理后，制备各种剂型的含有糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的产品如药物。但是，需要注意的是，在上述直接使用糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的时候，应先根据所使用的糙叶败酱苷元提取物的剂量要求，换算得到所需要使用的糙叶败酱苷元提取物所使用的药材原料的用量。
综上所述，本发明糙叶败酱苷元提取物及其组合物可用于制备抗结肠癌产品，优选药物和食品，进一步优选药物。
(五)技术特长本发明有针对性地研究糙叶败酱苷元提取物，拓展了新的医药用途，也为预防、诊断、检测、保护、治疗和研究结肠癌提供了一种新的药物来源。该原料安全低毒，药理作用较强，其原料来源广泛、价廉，制备工艺简单、得率高，可用于制备预防、诊断、检测、保护、治疗和研究结肠癌的产品，易于推广应用。
也就是说，本发明的研究结果可被进一步深入开发为具有临床应用前景的防治结肠癌的产品尤其是新药。该产品具有疗效确切、有效剂量低、无毒副作用的优点，与中国国内、国际上的同类产品相比具有显著的优势。结肠癌为临床常见病、多发病，随着全球环境的日益恶化，预计结肠癌等疾病的发病率将不断攀升。因此，本发明还可为后续的新药研究打下良好的基础，并进一步产生较大的经济效益和社会效益。
经过长期的药理学试验，糙叶败酱苷元提取物具有治疗结肠癌及其相关病症的活性，直接使用糙叶败酱苷元提取物，无须经过胃肠道细菌的代谢，使作用更直接，避免个体之间的胃肠道菌群活性有差异造成代谢产物的差异而产生药效上的差异，从而克服了中药给药剂量难以控制的问题，并提高了生物利用度。
实验证明，本发明所述及的糙叶败酱苷元提取物以及组合物特别是药物组合物是一种安全、高效、稳定、价廉的防治结肠癌的药物。其制备成本低廉，活性成分明确；活性高，糙叶败酱苷元提取物口服抑瘤率大于40％；毒性较低，糙叶败酱苷元提取物的最大耐受量＞2g/kg。
直接使用糙叶败酱苷元提取物，药物的生物利用度高，可以准确控制用药剂量。糙叶败酱苷元提取物性质稳定，治疗结肠癌及其相关病症的效果明显，使用糙叶败酱苷元提取物制备的制剂质量稳定，故其更适于治疗结肠癌及其相关病症药物的工业化生产。
总之，本发明积极适应了现代医疗、食品、饮料和科研领域的工作需要和人性化服务的需要，是用于制备抗结肠癌产品的安全原料，可直接或间接以及诊断、检测、预防、保护、治疗或研究结肠癌及其相关病症。
图1表示对照品的紫外吸收图谱横坐标表示波长(Wavelength)；单位纳米(nm)；纵坐标表示吸收度(Abs)；Samplle Namebzp-2Collection Time2005-6-20 16:10:57Peak TablePeak Style PeaksPeak Threshold 0.0100Range 500.00nm to 200.00nmWavelength(nm) Abs281.00 0.8176209.00 0.4317中文翻译如下样本名称bzp-2收集时间2005-6-20 16:10:57峰表峰形式 峰峰阈值 0.0100范围 500.00纳米到200纳米波长(纳米)吸收度281.000.8176209.000.4317图2表示糙叶败酱药材苷元的紫外吸收图谱横坐标表示波长(Wavelength)；单位纳米(nm)；纵坐标表示吸收度(Abs)；Sample Namesample2Collection Time 2005-6-20 16:36:49Peak TablePeak Style PeaksPeak Threshold 0.0100Range500.00nm to 200.00nmWavelength(nm)Abs282.001.2420208.002.7341
中文翻译如下样本名称样本2收集时间 2005-6-20 16:36:49峰表峰形式 峰峰阈值 0.0100范围 500.00纳米到200纳米波长(纳米)吸收度282.001.2420208.002.73具体实施方式
本发明研究了糙叶败酱苷元提取物的用途，提供了一种能够用于制备抗结肠癌产品如药物等或者是抗结肠癌产品特别是药物的原料，便于医疗行业和相关行业如食品、饮料等领域的安全使用，包括疾病的诊断、检测、治疗或科学研究等。
下面详细阐述制备糙叶败酱苷元提取物的具体操作方法。
(1)提取取干燥的糙叶败酱原料若干，粉碎，加入提取溶剂混和、提取(用低元醇或低元醇水溶液渗漉或回流提取)，优选甲醇、乙醇、95～70％乙醇溶液，将提取液过滤、浓缩，即得糙叶败酱药材苷元提取液。
(2)分离纯化将糙叶败酱苷元提取液经分离纯化步骤，得到糙叶败酱苷元提取物。
这里所说的提取、分离纯化方法包括溶剂提取法、溶剂萃取法、柱层析法等本领域公知的提取、分离纯化方法。
例如，将糙叶败酱苷元提取液加水混悬，用石油醚或己烷萃取，得到石油醚或己烷层和水层。水层用乙醚或氯仿或乙酸乙酯萃取，减压回收乙醚或氯仿或乙酸乙酯，得到浸膏，浸膏用硅胶拌样，蒸干，装硅胶柱，依次用石油醚，乙酸乙酯依次洗脱，乙酸乙酯洗脱部位蒸干得到糙叶败酱苷元提取物，具体见实施例。
具体来说在步骤(1)中①在所采用的溶剂提取法中，提取溶剂是包括水、醇类或其他有机溶剂等中的一种或多种，所述的醇类提取溶剂包括甲醇、乙醇、乙醇水溶液、丙醇或丁醇等中的一种或多种，所述的其他有机溶剂包括乙酸乙酯、丙酮等，优选水、甲醇、乙醇、乙醇水溶液、丙醇、丁醇、乙酸乙酯、丙酮等有机溶剂或其混合溶剂中的一种或多种，进一步优选包括乙醇或乙醇水溶液等中的一种，特别优选60％～90％乙醇水溶液。
②所采用的溶剂提取法中，提取方法优选超声提取法、渗漉提取法或加热回流提取法等中的一种或多种，进一步优选加热回流提取法；提取次数可以为一次或多次。
在步骤(2)中所采用的分离纯化方法优选溶剂萃取法，即将糙叶败酱药材苷元提取物用水分散，用石油醚脱脂后，再采用适当的有机溶剂萃取以除去脂溶性成分，得到萃取残留物；或直接用适当的有机溶剂进行萃取以除去脂溶性成分，得到萃取残留物；所述的适当的有机溶剂可以选用氯仿、二氯甲烷、乙醚或乙酸乙酯等中的一种或多种进行萃取；萃取次数可以为一次或多次。分取有机溶剂层，减压浓缩至干，即得糙叶败酱苷元提取物。此时，糙叶败酱苷元提取物的得率为1％～10％，即糙叶败酱苷元提取物占糙叶败酱药材总重量的1％～10％。
总而言之，在糙叶败酱苷元提取物的制备方法中，是以糙叶败酱新鲜药材或市售药材为原料为主；原料粉碎后，顺次采用溶剂提取法、溶剂萃取法或大孔吸附树脂法等中的一种或多种，即得糙叶败酱苷元提取物的粗品；如果结合减压浓缩干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等常用干燥方法中的一种或多种，则可制备得到糙叶败酱苷元提取物粗品的浸膏或干燥物。
如果进一步采用柱层析法等分离纯化方法，则能够得到糙叶败酱苷元提取物；此时，得到的总环烯醚萜苷元占糙叶败酱苷元提取物的含量在40％～60％(W/W)。
如果需要该提取物的干浸膏或粉末的话，可以进一步进行干燥(3)干燥干燥如喷雾干燥或减压干燥，得到提取物的干浸膏或粉末，即为本发明的该提取物的干浸膏或粉末。
在步骤(3)中步骤2得到的该提取物进行干燥处理，得到干燥形式的提取物，所用的干燥方法包括真空干燥、喷雾干燥和冷冻干燥等。
下面以几个典型的剂型为例，详细阐述糙叶败酱苷元提取物各种剂型的具体制备方法。
本发明制备粉针剂一般采用常规的冷冻干燥法，以水作为溶媒，其步骤为取糙叶败酱苷元提取物，加入赋形剂，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，灌装，半轧塞，冷冻干燥，压塞轧盖即可。所用的赋形剂选自甘露醇、水解明胶、葡萄糖、乳糖或右旋糖苷等中的一种或几种。每瓶含糙叶败酱苷元提取物10～100mg。
本发明制备粉针剂也可采用喷雾干燥法，以水作为溶媒，其步骤为取糙叶败酱苷元提取物，加或不加赋形剂(赋形剂同上)，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，喷雾干燥，无菌分装，压塞轧盖即可。每瓶含糙叶败酱苷元提取物10～100mg。
本发明制备小针剂时，以注射用水作为溶媒配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸苄酯或二甲基乙酰胺等中的一种或几种。每支含糙叶败酱苷元提取物10～100mg。
本发明制备葡萄糖输液或氯化钠输液，以注射用水作为溶媒，加入适量葡萄糖或氯化钠配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸苄酯或二甲基乙酰胺等中的一种或几种。每瓶含糙叶败酱苷元提取物10～100mg。
本发明制备片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等口服制剂，辅料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸盐等，按常规技术制备。
在本发明中，以上所述的具体实施方式
和以下所述的实例均是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制发明的范围。
下面通过实施例对本发明作详细描述。
实施例1、糙叶败酱苷元提取物的制备方法(一)糙叶败酱苷元提取物的制备干燥的糙叶败酱根茎50公斤，粉碎后，用甲醇润湿后，装入渗漉桶中，用甲醇渗漉。50℃减压浓缩，加入50℃左右的热水，混悬。用石油醚(60～90)萃取。得到石油醚层和水层。石油醚层浓缩后得到石油醚部分浸膏。取200ml水层依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别减压回收，得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分。
取乙酸乙酯浸膏250g，用氯仿-甲醇10∶1溶解，硅胶(100-200目)500g拌样，60℃蒸干。装硅胶柱，装柱用硅胶为2000g。依次用石油醚，乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇4∶1依次洗脱，每种极性的溶剂用量均为20L。石油醚洗脱得到1.6g，乙酸乙酯洗脱得到97.4g，乙酸乙酯-甲醇4∶1洗脱得到53.8g.。薄层检测，苷元存在于乙酸乙酯洗脱部位。
(二)糙叶败酱苷元提取物的含量测定紫外分光光度法测定糙叶败酱苷元提取物的含量。
(1)仪器与试剂Varian Cary 100紫外分光光度仪；水为蒸馏水，其余为分析纯。天平十万分之一。
(2)对照品苷元BJ3401。
(3)对照品溶液的制备精密秤取对照品5.14mg，于25ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度。取5ml至50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
(4)样品溶液的制备精密秤取糙叶败酱苷元提取物10.83mg，于25ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度。取5ml至50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
(5)吸收波长考察测定对照品溶液于200nm～500nm范围内紫外吸收曲线，在281nm波长处有最大吸收峰，因此采用281nm检测。结果见图1。
(6)三批样品的含量测定 取本品三批各8mg，精密称定，用甲醇定容于25ml容量瓶，准确移取5ml至50ml容量瓶，用甲醇定容至刻度。取对照品5mg同法配制。分别测定紫外吸收，外标法计算含量。结果见下表1。
表1、三批原料糙叶败酱苷元提取物含量测定
实施例2、糙叶败酱苷元提取物及单体(PS-I、BJ3401)对小鼠结肠癌细胞株C26的影响1材料和方法1.1药物糙叶败酱苷元提取物参照实施例1提取，PS-I、BJ3401为其中含有的单体，通过HPLC从糙叶败酱苷元提取物中分离制备。
1.2瘤株小鼠结肠癌细胞株C26由上海市医工院提供1.3试剂及仪器MTT(购于Sigma公司)；DMEM、胰蛋白酶、小牛血清(购于GIBCO公司)。Multiskan MK3型酶标仪(Labsystems Dragon公司)表2、糙叶败酱中环烯醚萜苷元(PS-I、BJ3401)对小鼠结肠癌细胞株C26的生长影响(x±S，n＝3)
与对照组比*p＜0.05，**p＜0.01
1.4MTT法测细胞增殖抑制率分别收集对数生长期的小鼠结肠癌细胞株C26(2×104/ml)，种入96孔培养板，每孔100μl，分别按设计加入药液，阴性对照用相应培养液代之，置5％CO2、37℃的培养箱中培养24h。处理后的细胞，移去DMEM培养基，D-Hank′s液洗2次，每孔加入100μlDMEM培养基和10μlMTT(5mg/ml)，37℃孵育4h。弃去液体，每孔加入100μlDMSO，放置数分钟，使MTT结晶溶解，在酶标仪上540nm处测吸收值。
1.5统计学处理数据用±S表示，显著性差异采用student’s-t检验评价。
2结果PS-I、BJ3401小鼠结肠癌细胞株C26的生长均有抑制作用，且具有一定的浓度依赖关系。浓度为10-5mg/ml时，对C26的抑制率分别为60.44％和53.34％。结果见表2。
实施例3、糙叶败酱苷元提取物小鼠结肠癌(C26)移植性肿瘤的影响1材料和方法1.1实验动物小鼠结肠癌细胞株C26由上海市医工院提供；BABL/C+ICR＝F1小鼠，19～22克，购自由上海斯莱克实验动物有限公司提供，许可证号SCXK(沪)2003-0003。
1.2试剂及仪器环磷酰胺(规格200mg/瓶，批号050206，上海华联制药有限公司)；天平(JA2003A，上海精天电子仪器有限公司)1.3小鼠结肠癌(C26)移植性肿瘤模型建立及药物作用选生长旺盛之小鼠结肠癌(C26)瘤源，以匀浆法(1∶8)制备成细胞悬液，每只小鼠右腋皮下接种0.2ml。同时每天灌胃糙叶败酱苷元提取物(200mg/kg、800mg/kg)，阳性对照药腹腔注射环磷酰胺(25mg/kg)，每天1次。接种后10天处死动物，解剖，取皮下小鼠肿瘤，称瘤重。
1.4统计学处理数据用±S表示，显著性差异采用student’s-t检验评价。
表3、对移植小鼠结肠癌(C26)荷瘤小鼠肿瘤重量的影响(x±S，n＝10)
与生理盐水组比较，**P＜0.012结果生理盐水组移植小鼠结肠癌(C26)荷瘤肿瘤重量可达1.555±0.258g，糙叶败酱中环烯醚萜苷元可显著减小移植小鼠结肠癌(C26)荷瘤小鼠肿瘤，非常显著减轻肿瘤重量(P＜0.01)，低、高剂量组(200mg/kg、800mg/kg)抑制率分别为27.4％和41.4％，表明糙叶败酱中环烯醚萜苷元对移植小鼠结肠癌(C26)荷瘤小鼠肿瘤有抑制作用。结果见表3。
结论经体外和体内试验表明糙叶败酱中环烯醚萜苷元具有抗结肠癌作用。
实施例4、糙叶败酱苷元提取物片剂的制备处方糙叶败酱苷元提取物 500g淀粉30g乳糖40g羧甲基淀粉钠5g淀粉浆(7％) 适量硬脂酸镁1％(1.45g)制成1000片工艺取处方量糙叶败酱苷元提取物，粉碎过100目筛，再将处方量的淀粉、乳糖粉碎过100目筛，混匀。将预知子总皂苷加入混匀的淀粉和乳糖中，混匀。加入适量50％乙醇拌匀，经16目铁筛丝网制粒，60℃以下干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁混匀，分析含量后压片。可制成1000片每片含500mg糙叶败酱苷元提取物的片剂。
实施例5、糙叶败酱苷元提取物胶囊剂的制备处方糙叶败酱苷元提取物 500g淀粉 140g微粉硅胶 10g制成1000粒工艺取处方量糙叶败酱苷元提取物，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含500mg糙叶败酱苷元提取物的胶囊剂。
实施例6、糙叶败酱苷元提取物注射剂的制备处方糙叶败酱苷元提取物 50g乙醇(95％) 4000g
丙二醇(C.P.) 1000g注射用水 加至10000ml制成1000支工艺取20℃乙醇(95％)5000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量糙叶败酱苷元提取物加入上述乙醇4000g中，加热至约50℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每只10ml含糙叶败酱苷元提取物50mg的注射剂。
权利要求
1.糙叶败酱苷元提取物，其特征在于，该苷元提取物包括总环烯醚萜苷元以及其他成分，其中总环烯醚萜苷元的含量为40％～99.5％(重量百分比，下同)，其他成分的含量是0.5％以下；在该总环烯醚萜苷元中，是包括PS-I、G7-C、G7-E、G7-Z、BJ3401、G9-A、G9-C或G9-D中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物，其特征在于，所述的该苷元提取物的总环烯醚萜苷元的含量为50％～60％。
3.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物，其特征在于，所述的其他成分是包括鞣质、单糖或多糖、呫吨酮类或类胡萝卜素等中的一种或多种。
4.根据权利要求1～3任一项所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤(1)提取取糙叶败酱原料若干，提取，得提取液，即糙叶败酱苷元提取物；(2)分离纯化将提取液分离纯化，即得糙叶败酱苷元提取物；所述的糙叶败酱原料包括糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge.)或同属植物的根或根茎；所述的提取方法包括溶剂提取法等本领域公知的所有可以使用的方法；这里所说的提取、分离纯化方法是包括本领域公知的溶剂提取法、溶剂萃取法或柱层析法中的一种。
5.根据权利要求4所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的提取方法中，如果需要该提取物的干浸膏或粉末的话，可以进一步进行干燥。
6.根据权利要求4所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的提取方法是包括溶剂提取法在内的本领域公知的所有可以使用的方法。
7.根据权利要求6所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的提取方法是溶剂提取法。
8.根据权利要求7所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的溶剂提取法是包括常用的热回流提取、连续逆流提取、超声提取法、浸渍提取法、渗漉提取法、煎煮提取法或连续回流提取法中的一种或多种；提取次数是一次或多次。
9.根据权利要求8所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的溶剂提取法是包括超声提取法、渗漉提取法、连续逆流提取或加热回流提取法中的一种；提取次数是多次。
10.根据权利要求9所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的溶剂提取法是加热回流提取法；提取次数是多次。
11.根据权利要求10所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的加热回流提取法所使用的提取溶剂是包括常见的水试剂、亲水性的有机溶剂或亲脂性的有机溶剂三类提取溶剂中的一种或多种。
12.根据权利要求11所述的糙叶败酱苷元提取物的制备方法，其特征在于，所述的水试剂是包括水、酸水或碱水中的一种；所述的亲水性的有机溶剂是包括乙醇、乙醇水溶液或甲醇中的一种或多种；所述的亲脂性的有机溶剂是包括石油醚、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯甲烷或二氯乙烷中的一种或多种。
13.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物在制备抗结肠癌产品中的应用。
14.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物的组合物在制备抗结肠癌产品中的应用。
15.根据权利要求13或14所述的糙叶败酱苷元提取物的应用，其特征在于，所述的抗结肠癌产品是包括医药、食品或饮料领域产品中的一种或多种。
16.根据权利要求15所述的糙叶败酱苷元提取物的应用，其特征在于，所述的抗结肠癌产品是包括药物、试剂、食品、保健食品、添加剂或饮料中的一种或多种。
17.根据权利要求16所述的糙叶败酱苷元提取物的应用，其特征在于，所述的抗结肠癌产品是抗结肠癌药物、抗结肠癌试剂、抗结肠癌食品或抗结肠癌饮料中的一种或多种。
18.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物的原料在制备抗结肠癌产品中的应用。
19.根据权利要求1所述的糙叶败酱苷元提取物的原料的组合物在制备抗结肠癌产品中的应用。
20.根据权利要求18或19所述的糙叶败酱苷元提取物的原料在制备抗结肠癌产品中的应用，其特征在于，所述的糙叶败酱苷元提取物的原料是包括根、根茎、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一种。
全文摘要
本发明涉及一种治疗结肠癌的药物及其制备方法，即从中药糙叶败酱中提取分离得到的糙叶败酱苷元提取物及其制备方法，该药物中的有效成分是来自于中药糙叶败酱的总环烯醚萜苷元，其含量＞40％。本发明还提供了该药物的制剂和剂型及糙叶败酱的总环烯醚萜苷元的制备方法。经药理学试验证明本发明所涉及的糙叶败酱总环烯醚萜苷元制成的药物使用安全，有抑制移植小鼠结肠癌(C26)荷瘤小鼠肿瘤的重量的作用，是一种具有良好开发前景的治疗结肠癌的药物，应用糙叶败酱苷元提取物可制成片剂、胶囊、滴丸、颗粒剂或口服液。
文档编号A61P35/00GK101057876SQ20071003898
公开日2007年10月24日 申请日期2007年4月3日 优先权日2007年4月3日
发明者李铁军, 顾正兵, 邱彦, 毛俊琴, 陈强, 芮耀诚 申请人:中国人民解放军第二军医大学