专利名称：补血中药制剂及其生产方法
技术领域：
本发明涉及一种具有补血、升高白细胞、促进造血系统功能改善的中药制剂及其生产方法。
背景技术：
贫血是指外周血中的单位容积内血红蛋白浓度(Hb)红细胞计数(RBC)和(或)血细胞比容(HCT)，低于相同年龄、性别和地区的正常标准。贫血的病因很多，主要有造血原料缺乏、骨髓造血不良、血液系统其他疾病、红细胞破坏过多、失血性贫血、其他慢性疾病等。现代医学的一些疗法如放疗、化疗，亦可引起贫血。
鸡血藤是一种沿用千年的行血补血，舒筋活络中药，其性温、味苦、微甘，归肝、肾经，有活血、补血、通络等功效。《本草纲目拾遗》认为鸡血藤“大补气血，与老人妇女更为得益……统治百病，能生血、和血、补血、破血；又能通七窍，走五脏，宣筋络”，《饮片新参》谓其可“去瘀血、生新血、流利经脉”。临床上常用于治疗月经不调、血虚萎黄、麻木瘫痪、风湿痹痛等病症，近年来也用来治疗各种原因引起的白细胞、红细胞等全血象减少和再生障碍性贫血等疾病。从公开文献中我们检索到一些有关鸡血藤治疗贫血的内容有以下一些1、苏尔云，陈辉树.鸡血藤复方治疗再生障碍性贫血临床观察[J].中国中西医结合杂志，1997，17(4)213。2、梁耀君，胡冀.鸡血藤防治肿瘤化疗后白细胞减少的临床研究[J].辽宁中医杂志，1998，25(5)227。3、许宝丽，许志诚.鸡血藤汤治疗类风湿性关节炎30例[J].包头医学院学报，1997，13(2)58。鸡血藤是广西的道地药材，产销量占全国的90％以上。鸡血藤的成分很多，黄酮类是其活性成分之一。市面上有许多以鸡血藤为原料的补血药，但鸡血藤总黄酮未见有报道。传统的鸡血藤提取液口感差，携带不便，不易储存，影响了其疗效及其应用。开发中药有效部位，提高对作用靶点的生物利用度，以满足治疗需要，是中药新药开发中的重要问题。
发明内容
本发明提供一种具有补血作用的中药制剂，由鸡血藤提取物及辅料组成。其中具有补血作用的成分为鸡血藤总黄酮，辅料只起赋形、防腐、赋香、矫味等作用。
本发明的中药制剂的成分和重量百分含量如下(以干物质计) 鸡血藤总黄酮 0.01-100％ 辅料 0-99.99％ 鸡血藤的品种很多，《中国药典》2005年版规定鸡血藤原植物为密花豆Spatholobussuberectus Dunn，主要分布在广西、广东。密花豆是多年生豆科木本植物，为广西道地药材。
本发明的目的是提供一种针对贫血和白细胞减少症，具有补血、升白，促进造血系统功能改善的鸡血藤总黄酮化合物。
本发明的药理实验结果表明，以鸡血藤总黄酮制成的中药制剂，应用于血虚动物模型，显示有良好的补血效果。
本发明的技术路线如下鸡血藤一定浓度醇类溶液回流提取，回收溶剂，浓缩至成稠膏。稠膏经过水溶解，抽滤处理，成样品液。上大孔树脂，用一定浓度醇类溶液洗脱，TLC检识，收集洗脱液。浓缩、干燥得鸡血藤总黄酮，总黄酮与辅料混合、压制或调配成产品。
本发明的实质性特点和显著的进步 1.本发明采用了大孔树脂方法，纯化鸡血藤提取物得到总黄酮。该工艺简单、成本低，有利于工业化生产。
2.市面上有许多以鸡血藤为原料的补血药，但鸡血藤总黄酮未见有报道。
具体实施例方式 一、制备鸡血藤总黄酮
具体实施例方式 下列实施例子用于举例说明本发明，并不是对本发明保护范围的任何限制。
实施例1 把装有100g鸡血藤粗粉与1000ml浓度为70％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清过滤。再加入800ml浓度为70％的乙醇回流提取1h，合并滤液。减压回收乙醇，将提取液置于蒸发皿中挥发至无醇味，用10倍体积水溶解，抽滤后，上大孔树脂。用蒸馏水洗至几乎无色，用30％乙醇液洗脱，TLC检识。合并洗脱液，蒸发至浸膏状。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到鸡血藤总黄酮。
实施例2 把装有100g鸡血藤粗粉与1000ml浓度为50％的甲醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清过滤。再加入800ml浓度为50％的甲醇回流提取1h，合并滤液。减压回收甲醇，将提取液置于蒸发皿中挥发至无醇味，用10倍体积水溶解，抽滤后，上大孔树脂。用蒸馏水洗至几乎无色，用40％甲醇液洗脱，TLC检识。合并洗脱液，蒸发至浸膏状。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到鸡血藤总黄酮。
实施例3 把装有100g鸡血藤粗粉与1000ml浓度为60％的丙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清过滤。再加入800ml浓度为60％的丙醇回流提取1h，合并滤液。减压回收乙醇，将提取液置于蒸发皿中挥发至无醇味，用10倍体积水溶解，抽滤后，上大孔树脂。用蒸馏水洗至几乎无色，用50％丙醇液洗脱，TLC检识。合并洗脱液，蒸发至浸膏状。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到鸡血藤总黄酮。
实施例4 把装有100g鸡血藤粗粉与1000ml浓度为80％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清过滤。再加入800ml浓度为80％的乙醇回流提取1h，合并滤液。减压回收乙醇，将提取液置于蒸发皿中挥发至无醇味，用10倍体积水溶解，抽滤后，上大孔树脂。用蒸馏水洗至几乎无色，用60％乙醇液洗脱，TLC检识。合并洗脱液，蒸发至浸膏状。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到鸡血藤总黄酮。
实施例5 把装有100g鸡血藤粗粉与1000ml浓度为90％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清过滤。再加入800ml浓度为90％的乙醇回流提取1h，合并滤液。减压回收乙醇，将提取液置于蒸发皿中挥发至无醇味，用10倍体积水溶解，抽滤后，上大孔树脂。用蒸馏水洗至几乎无色，用70％乙醇液洗脱，TLC检识。合并洗脱液，蒸发至浸膏状。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到鸡血藤总黄酮。
二、补血中药制剂
具体实施例方式 下列实施例子用于举例说明本发明，并不是对本发明保护范围的任何限制。
实施例1 提取实例1所得鸡血藤总黄酮，加入2倍量的白糖细粉，用70％酒精湿润，制成颗粒，分装，即得鸡血藤总黄酮颗粒剂。
实施例2 提取实例2所得鸡血藤总黄酮，加入适量淀粉和滑石粉，用70％酒精湿润，制成颗粒，用压片机压片，即得鸡血藤总黄酮片。
实施例3 提取实例3所得鸡血藤总黄酮，加入适量结晶山梨醇，制成口含片。
实施例4 提取实例4所得鸡血藤总黄酮，与单硬脂酸甘油酯加热熔融混匀后，滴入不相混溶的冷凝液中，收缩冷凝制成球形，制成滴丸。
实施例5 提取实5所得鸡血藤总黄酮，干燥、粉碎，加入辅料适量，混匀，分装在空心胶囊或密封于软质囊材中，制成胶囊。
鸡血藤总黄酮药效学作用试验 1实验材料与仪器 1.1药品与试剂 鸡血藤总黄酮，邓家刚提供；盐酸苯肼(PHH)，上海元越化工有限公司，批号20051030；阿胶，山东东阿阿胶股份有限公司生产，批号20040730；环磷酰胺(CTX)，上海华联制药有限公司生产，批号20050914。
1.2动物昆明种小鼠，(清洁级)，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证号SCXK桂2003-0003。
1.3仪器血球计数仪(sysmex KX-21型)、吉尔森微量取样器(法国Pipetman公司)、钴60放射源(加拿大Nurdion公司) 1.4统计学处理使用SPSS10.0分析系统，数据以
表示，组间差异用t检验。
2方法和结果 2.1鸡血藤总黄酮对CTX所致小鼠骨髓抑制模型的影响[1] 取小鼠60只，体重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，随机分为6组(空白对照组、模型组、阿胶组、高剂量、中剂量、低剂量组)，以上各组i.g.给药，qd×8d，给药容量为0.2ml/10g，空白对照组、模型组i.g.蒸馏水。造血虚模型除空白对照组外，给药后第3、4天i..p环磷酰胺(100mg/kg)，第8天药后1h分别取血进行外周血计数及有核细胞(BMNC)计数小鼠脱臼处死，取右侧完整股骨，除净软组织，用3％醋酸液5ml冲出全部骨髓，过4号针头，使成单细胞悬液，显微镜下计数BMNC，结果见表1 表1 STF对CTX所致小鼠骨髓抑制模型WBC和BMNC的影响(
n＝10) 注与空白对照组比较，①表示P＜0.05；②P＜0.01；与模型组比较，③表示P＜0.05；④P＜0.01。(下同) 结果表明各组剂量药物对贫血小鼠WBC和BMNC的下降有拮抗作用，与模型组对比有显著差异。
2.2STF对PHH所致小鼠血虚模型的影响[1] 取小鼠60只，体重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，随机分为6组(空白对照组、模型组、阿胶组、高剂量、中剂量、低剂量组)，以上各组ig给药，qd×8d，给药容量为0.2ml/10g，空白对照组、模型组i.g.蒸馏水。造血虚模型除空白对照组组外，给药后第2天s.c.PHH(20mg/kg)、第4天s.c.PHH(40mg/kg)，第4、5、6、7天i.p.CTX(40mg/kg)，第8天末次给药后1小时，取血进行RBC、HGB、HCT计数，结果见表2。
表2 STF对PHH所致小鼠血虚模型的影响(
n＝10) 结果表明各组剂量药物对血虚动物RBC、HGB、HCT的下降有拮抗作用，与模型组对比有显著差异。
2.3STF对CTX所致小鼠白细胞减少模型的影响[3] 取小鼠60只，体重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，随机分为6组(空白对照组、模型组、阿胶组、高剂量、中剂量、低剂量组)，以上各组ig给药，qd×8d，给药容量为0.2ml/10g，空白对照组、模型组i.g.蒸馏水。造血虚模型除空白对照组组外，给药后第2、3天i.p.CTX(100mg/kg)，第4、6、8天给药后1h分别取血进行WBC计数，结果见表3。
表3 STF对CTX所致小鼠白细胞减少模型的影响(
n＝10)单位(×109/L) 结果表明各组剂量药物(除第5d小剂量组外)对小鼠WBC的下降有拮抗作用，与模型组对比有显著差异。
2.4STF对钴60所致小鼠血虚模型的影响[4] 取小鼠60只，体重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，随机分为6组(空白对照组、模型组、阿胶组、高剂量、中剂量、低剂量组)，以上各组i.g.给药，qd×14d，给药容量为0.2ml/10g，空白对照组、模型组i.g.蒸馏水。造血虚模型除空白对照组外，给药后第6天照射钴60(照射剂量为3GY，源距0.7m，照射时间3分30秒)，造模后第3、7、14、21、30天分别取血进行WBC、RBC计数，结果见表4、5。
表4 STF对钴60照射小鼠WBC减少的影响(
n＝10)单位(×109/L) 结果表明STF高剂量及模型组于钴60照射后7、14、21、30天，低剂量组、中剂量组于钴60照射后第7、14、21天，WBC明显高于照射模型组，差异有显著性，提示STF对钴60照射后小鼠WBC下降有拮抗作用。
表5 STF对钴60照射小鼠RBC减少的影响(
n＝10)单位(×1012/L) 结果表明STF各剂量组及模型组于钴60照射后7、14天，RBC明显高于照射模型组，差异有显著性，提示STF对钴60照射后小鼠RBC下降有拮抗作用。
2.5STF对失血性小鼠血虚模型的影响[4] 取小鼠60只，体重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，随机分为6组(空白对照组、模型组、阿胶组、高剂量、中剂量、低剂量组)，以上各组ig给药，qd×7d，给药容量为0.2ml/10g，空白对照组、模型组i.g.蒸馏水。6组动物先测造血虚模型前的RBC、HGB值。除空白对照组外，其余5组均眼球后静脉丛放血(5滴/10g体重)造成血虚模型，连续3天。第7天测定小鼠血液RBC、HGB值。与模型组比较，作组间t检验，结果见表6、7。
表6 STF对失血性小鼠血虚模型RBC的影响(
n＝10)单位(×1012/L) 结果表明各组剂量药物对失血性贫血小鼠RBC的下降有拮抗作用，与模型组对比有显著差异。
表7 STF对失血性小鼠血虚模型HGB的影响(
n＝10)单位(×g/L) 结果表明各组剂量药物对失血性贫血小鼠HGB的下降有拮抗作用，与模型组对比有显著差异。
3结论 鸡血藤总黄酮具有促进血虚模型小鼠造血功能恢复的作用。
权利要求
1.一种具有补血作用的中药制剂，由鸡血藤提取的鸡血藤总黄酮及辅料组成。其重量百分比如下
鸡血藤总黄酮 0.05-100％
辅料 0-99.99％
2.根据权利要求1所述的鸡血藤总黄酮，是指从密花豆Spatholobussuberectus Dunn提取，主要由表儿茶素等黄酮类化合物组成。
3.根据权利要求1所述的补血中药制剂，辅料是从国际或我国药品监督管理部门认可的药用辅料中选用。辅料起赋形、赋香、防腐、填充等作用。
4.根据权利要求1所述的鸡血藤总黄酮的生产方法，其特征在于工艺流程为鸡血藤→打粉→醇类溶液提取→提取液上大孔树脂柱→收集洗脱液→浓缩→鸡血藤总黄酮。
5.根据权利要求1所述的补血中药制剂，生产工艺采用惯常的、通用的制药工艺完成，工艺包括从鸡血藤提取鸡血藤总黄酮、总黄酮与辅料混合、压制或调配成产品等几个过程。
6.根据权利要求1所述的补血中药制剂，其剂型为口服药物剂型的一种或几种，一般有片剂、颗粒剂、口服液、口含片、滴丸、胶囊等。
7.根据权利要求4所述的大孔树脂，其特征在于指AB-8、D101、HPD100、HP20等型号的大孔树脂。
8.根据权利要求4所述的醇类，其特征在于指甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇等低级醇。
全文摘要
本发明涉及到一种具有补血作用的中药制剂及其生产方法，该制剂中起补血作用的成分是鸡血藤黄酮类化合物，以鸡血藤总黄酮为基础，不加或只加适量的药用辅料，按通常的制药工艺制备而成。本发明的实验结果表明，以鸡血藤总黄酮为原料制成的中药制剂，应用于血虚小鼠模型，显示有较好的补血效果。
文档编号A61K9/08GK1969945SQ20061016440
公开日2007年5月30日 申请日期2006年12月1日 优先权日2006年12月1日
发明者邓家刚, 梁宁 申请人:广西中医学院