基于植物的用于改善皮肤水分、纹理和外观的制剂的利记博彩app

专利名称：基于植物的用于改善皮肤水分、纹理和外观的制剂的利记博彩app
背景技术：
证据提示在整个个人的寿命中皮肤老化的各种征兆和结果可以转化成蓄积的氧化损伤。不良膳食、缺乏锻炼和接触过度的紫外光可以导致氧化损伤。例如，已知过度的紫外光在皮肤中产生活性氧簇(ROS)，诸如超氧化物、单线态氧、羟基自由基和过氧化氢。已知这些ROS可降解皮肤中的胶原蛋白并降低成纤维细胞产生胶原蛋白的能力。
胶原蛋白是结缔组织，包括软骨、骨、腱、牙齿和皮肤的主要蛋白。胶原蛋白(称作前胶原蛋白的预加工形式)在细胞中装配并且由三股螺旋形式中彼此缠绕的三种多肽类组成，它被链内二硫键稳定。在细胞中装配螺旋分子并修饰后，它被分泌入胞外介质并进一步被加工成成熟形式(原胶原)。
成熟的胶原蛋白分子在胞外空间内以交错、平行方式装配成原纤维，其中所述分子在这种原纤维中通过一个分子的N-末端与另一个分子的C-末端之间的共价交联键而得到稳定。胶原蛋白原纤维在皮肤中交织并且分支。
实际上，交织、分支的胶原蛋白原纤维为皮肤提供了形状和硬度，而另一种皮肤蛋白质弹性蛋白为皮肤提供了弹性。弹性蛋白如弹簧样卷曲或再卷曲并且构成了诸如皮肤、血管、心脏、肺、肠、腱和韧带这类结构的弹性。弹性蛋白通常不由青春期后的人体产生且老化开始。
如所有其它人体中的蛋白质一样，胶原蛋白和弹性蛋白恒定降解。降解胶原蛋白和弹性蛋白的酶称作基质金属蛋白酶(MMP)。这些酶可以受到ROS刺激。某些已知的MMP包括胶原酶、弹性蛋白酶、MMP-1和MMP-9。胶原酶是由降解胶原蛋白的成纤维细胞，如滑膜细胞产生的酶。弹性蛋白酶降解弹性蛋白。MMP-1裂解原纤维胶原蛋白，诸如I、II和III型，产生进一步被MMP-9降解的变性胶原蛋白(明胶)，其中MMP-9降解基底膜成分层粘连蛋白和IV型胶原蛋白。因此，这些MMP酶涉及皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白的减少，导致细线、皱纹、老年斑和沉降皮肤。
如由于因ROS和MMP导致的氧化损伤导致的胶原蛋白和弹性蛋白丧失一样，皮肤水分的丧失也导致皮肤老化。实际上，皮肤的保水能力随年龄的增加而降低，使得皮肤更易于受到脱水和变皱的损伤。皮肤中的脂质和脂肪有助于通过提供表皮屏障而抗击水的丧失。这种屏障还阻止了可以产生皮肤刺激和敏感性的细菌的生长，而皮肤刺激和敏感性均可以导致皮肤老化。
因此，含有抗ROS、氧化损伤和胶原蛋白和弹性蛋白丧失的可氧化或抗氧化剂营养物以及使皮肤水化或增加皮肤中脂质合成的活性剂的制剂可以用于改善皮肤的外观、纹理和水分并维持全身皮肤健康。
发明简述皮肤老化直接与许多原因相关，包括皮肤的氧化应激、水分从皮肤中丧失和皮肤中重要的蛋白质，诸如胶原蛋白和弹性蛋白降解。本发明为含有包括氨基酸、碳水化合物、植物提取物和维生素在内的组分的独特组合的制剂和使用这些组分改善皮肤水分、纹理和外观的方法。本发明的特定制剂通过增加皮肤蛋白质，诸如胶原蛋白和弹性蛋白的合成和/或通过预防或减缓这类蛋白质降解而起作用。另外，本发明的制剂具有增加皮肤中脂质合成和/或预防或减缓其降解的独特能力，从而有助于皮肤的水分。可以通过局部、口服给予、通过注射给予、通过腹膜给予或其任意的组合给予本发明的制剂。
因此，本发明在一个实施方案中提供了一种制剂，它包括花粉(王浆(royal jelly))、西方雪果(wolfberry)提取物、当归(Chinese angelica)提取物、葡萄子(grape seed)提取物、类胡萝卜素、蔷薇果(rose hip)、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
本发明的另一个实施方案为使用制剂改善皮肤外观、纹理或水分的方法，所述制剂包括花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、黄体素、蔷薇果、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
本发明的另一个实施方案为使用制剂刺激皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白形成的方法，所述制剂包括花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、黄体素、蔷薇果、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
在备选的实施方案中，本发明为使用制剂减少皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白降解的方法，所述制剂包括花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、黄体素、蔷薇果、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
本发明的另一个实施方案为使用本发明制剂增加皮肤中脂质合成的方法，所述制剂包括花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、黄体素、蔷薇果、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
在备选的实施方案中，本发明为使用本发明制剂减少皮肤中脂质降解的方法，所述制剂包括花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、黄体素、蔷薇果、维生素C或其衍生物、生物素、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、葡糖胺、pickled ume或其组合。
附图简述附

图1为解释胶原蛋白和弹性蛋白、原纤维和纤维结构的示意图。附图1(A)解释了彼此缠绕的三条延伸的蛋白质链形成的胶原蛋白的三股螺旋结构。胶原蛋白原纤维上的剥离是因原纤维内胶原蛋白分子有规则的重复排列造成的。
附图1(B)解释了弹性蛋白多肽链与胶原蛋白原纤维彼此交联成橡胶样弹性纤维。每一弹性蛋白分子在纤维伸展时解螺旋成更延伸的构象，并且一旦伸展力松弛，则会自发反冲。
附图2是解释本发明单一或组合形式的不同组分对胶原蛋白合成的作用的示意图。将数据表示为来自未处理的对照细胞的胶原蛋白控制％。附图2解释了当归提取物和金樱子在单独使用时为最有效的胶原蛋白合成诱导物。附图2还解释了金樱子(“蔷薇果”或“RH”)和Pickled Ume(“Ume”)在组合使用时为最有效的胶原蛋白合成诱导物，其后是金樱子和西方雪果提取物(“Wolf”)；金樱子、西方雪果提取物和当归提取物(“Ang”)；和金樱子和当归提取物。在附图2中，“GS”表示葡萄子提取物。
附图3是解释本发明单一或组合形式的不同组分对弹性蛋白合成的作用的示意图。将数据表示为来自未处理的对照细胞的弹性蛋白控制％。附图3解释了当归提取物(“Ang”)和金樱子(“蔷薇果”或“RH”)在单独使用时为最有效的弹性蛋白合成诱导物。附图3还解释了金樱子和Pickled Ume(“Ume”)在组合使用时为最有效的弹性蛋白合成诱导物，其后是葡萄子提取物(“GS”)、Pickled Ume、西方雪果提取物(“Wolf”)和当归提取物；和葡萄子提取物、当归提取物和西方雪果提取物。
附图4是解释本发明单一或组合形式的不同组分对透明质酸合成的作用的示意图。将数据表示为来自未处理的对照细胞的透明质酸控制％。附图4解释了单独使用的组分中没有一种诱导显著水平的透明质酸合成。然而，附图4还解释了金樱子(“蔷薇果”或“RH”)、西方雪果提取物(“Wolf”)和当归提取物(“Ang”)在组合使用时为最有效的透明质酸合成诱导物，其后是金樱子(“蔷薇果”或“RH”)和当归提取物；和葡萄子提取物(“GS”)、当归提取物和西方雪果提取物。
附图5是解释本发明的不同组分对MMP-1(黑色)、MMP-9(浅灰色)和弹性蛋白酶(灰色)的酶活性的作用的示意图。将数据表示为对每种酶的控制％。附图5解释了王浆为最有效的MMP-1和弹性蛋白酶的抑制剂，而Pickled Ume为最有效的MMP-9的抑制剂。葡萄子提取物对三种酶中的任意种均具有抑制作用，其后是金樱子。
附图6是解释本发明的组分转移通过Caco-2单层的示意图。将数据表示为在Caco-2细胞基底外侧上保温的共培养效应细胞分泌的胶原蛋白控制％并将它们与未处理的对照细胞进行比较。
发明详述应理解本发明并不限于本文所述的特定方法或方案。此外，除非另有说明，本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。还应理解本文所用的术语的目的仅在于描述具体的实施方案，而目的并不在于限定本发明的范围，本发明的范围仅由权利要求来限定。
本发明基于令人意外的发现，即更完整地在表1中所述的下列组分的独特组合改善皮肤水分、纹理和外观花粉(王浆)、西方雪果提取物、当归提取物、葡萄子提取物、蔷薇果、Pickled Ume、类胡萝卜素、生物素、维生素C或其衍生物、维生素E或其衍生物、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸和葡糖胺。更具体地说，本发明的制剂通过增加皮肤中蛋白质，诸如胶原蛋白或弹性蛋白的合成和/或通过预防或减缓这类蛋白质的降解改善皮肤水分、纹理和外观。另外，本发明的制剂基于增加皮肤中脂质合成和/或预防或减缓其降解的能力，这有助于皮肤水分。
表1本发明制剂中使用的组分






本发明的制剂将本发明的制剂设计成用于提供组分的组合而非仅是草药提取物。特别地，本发明的制剂包括维生素、氨基酸、天然产物和植物提取物的组合。这些组分的独特组合靶向涉及皮肤健康的许多关键酶并且还调节皮肤细胞的细胞活性以促进皮肤健康的改善。特别是包括各种组分的本发明制剂刺激胶原蛋白和/或弹性蛋白的合成和/或抑制其降解。例如，金樱子和当归提取物单独或以组合形式为胶原蛋白合成的有效抑制剂，而其它化合物，做任何王浆和Pickled Ume可有效抑制MMP的活性。
本文所用的“刺激胶原蛋白(或弹性蛋白)合成”以其最广泛的含义使用并且指的是胶原蛋白或弹性蛋白产生、将其引入含有胶原蛋白或弹性蛋白的组织(包括例如胶原蛋白原纤维或弹性蛋白纤维的合成、加工、交联、分泌和装配)和存在含有健康胶原蛋白或弹性蛋白的组织。“刺激”或“诱导”胶原蛋白或弹性蛋白合成由此指的是本文所述的制剂积极影响胶原蛋白或弹性蛋白产生的能力。刺激胶原蛋白或弹性蛋白合成可以由本文所述制剂促进步骤，诸如生物化学步骤的能力产生，从而导致胶原蛋白原纤维或弹性蛋白纤维形成。
“抑制胶原蛋白(或弹性蛋白)降解”指的是本文所述的制剂例如通过抑制MMP(抑制胶原蛋白或弹性蛋白)或通过给组织补充胶原蛋白或弹性蛋白保护存在的含健康胶原蛋白或弹性蛋白的组织的能力，其中胶原蛋白或弹性蛋白被天然过程与疾病相关的过程分解。
本文所用的“刺激脂质合成”以其最广泛的含义使用并且指的是皮肤中脂质的产生。“刺激”或“诱导”脂质合成由此指的是本文所述的制剂积极影响皮肤中脂质产生的能力。刺激脂质合成可以由本文所述制剂促进步骤，诸如生物化学步骤的能力产生，从而导致皮肤中脂质形成。
本发明的制剂基于包括为20∶1提取物比例的植物提取物的组分的组合，并且其中使用常用于制备中药的草药提取物的水提取法生产提取物。参见Wang等“来自选择的中草药和其它药用植物中的活性成分的提取和色谱-质谱分析”2003.Am.J.Chin.31(6)927-44。
在本发明的一个实施方案中，制剂包括如下量的下列活性组分王浆(花粉)30-1500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；金樱子30-500mg；维生素C或其衍生物40-70mg；生物素600-900mg；维生素E或其衍生物3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在另一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分王浆(花粉)30-1500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；和当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；金樱子30-500mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在另一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分王浆(花粉)30-1500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；和金樱子(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；金樱子30-500mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在备选的实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg和金樱子(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在另一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分金樱子(20∶1提取比例)30-500mg和Pickled Ume(20∶1提取比例)10-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在备选的实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg和金樱子(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在另一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg；和金樱子(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；葡萄子提取物100-150mg；黄体素2-5mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在另一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分葡萄子提取物100-150mg；Pickled Ume 10-500mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；和西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；黄体素2-5mg；金樱子30-500mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；葡糖胺5-300mg；和明胶30-500mg。
在一个实施方案中，本发明的制剂包括如下量的下列活性组分葡萄子提取物100-150mg；当归提取物(20∶1提取比例)30-500mg；和西方雪果提取物(20∶1提取比例)30-500mg。或者，该制剂还可以含有如下量的下列活性组分中的一种或多种王浆(花粉)30-1500mg；黄体素2-5mg；金樱子30-500mg；维生素C 40-70mg；生物素600-900mg；维生素E 3-7mg；α-硫辛酸1-4mg；透明质酸4-60mg；甘氨酸30-200mg；Pickled Ume 10-500mg；葡糖胺5-100mg；和明胶30-500mg。
给药方法可以通过体外、体内或其一定的组合给予本发明的制剂实现改善的皮肤外观、纹理和水分。优选使用可接受的载体给予本发明的制剂。例如，可以使用可接受的载体以凝胶、洗剂、霜剂、补药、乳剂等的形式经体外给予本发明的制剂。作为另一个实例，可以使用可接受的载体以丸剂、粉剂、棒、饮料等的形式经体内给予本发明的制剂。因此，本文所述的制剂可以以各种成品形式使用，包括药物产品、食品和饮料组合物。优选所述产品用于提供给具有改善的纹理、外观和增加的水分的哺乳动物的皮肤。
在本发明的一个实施方案中，可以以Beauty Shot Drink的形式经口服给予本发明的制剂。本发明制剂的口服给药可以使皮肤即刻增加水分并且维持年轻的皮肤。
当可以通过口服给予液体形式的本发明制剂时，该液体可以是基于水的、基于奶的、基于茶的、基于果汁的或其某些的组合。本发明体内给药用的固体和液体制剂可以还包括增稠剂，包括黄原胶(xanthum gum)；羧甲基纤维素；羧乙基纤维素；羟丙基纤维素；甲基纤维素；微晶纤维素；淀粉；糊精；发酵乳清；豆腐；麦芽糖糊精；多元醇类，包括糖醇类(例如山梨醇和甘露糖醇)；碳水化合物(例如乳糖)；丙二醇藻酸盐；胞外多糖胶；瓜尔胶；果胶；黄芪胶；阿拉伯胶(gum acacia)；刺槐豆胶；阿拉伯树胶(gum arabic)；明胶；以及这些增稠剂的混合物。这些增稠剂一般包括在本发明的制剂，其水平最高可达0.1％，这取决于涉及的具体增稠剂和所需的粘性作用。
本发明的固体和液体(食品和饮料)制剂可以并且一般是含有有效量的一种或多种增甜剂，包括碳水化合物增甜剂和/或人工无/低卡路里增甜剂。本发明制剂中所用的增甜剂的量可变，但一般取决于所用增甜剂的类型和所需的增甜强度。
在另一个实施方案中，一般通过局部给予如下形式的本发明制剂溶液、凝胶、洗剂、霜剂、软膏剂、水包油型乳剂、油包水型乳剂、棒、喷雾剂、糊剂、摩丝、补药和其它美容和局部适宜的剂型。
优选将适合于局部给药的本发明制剂与可接受的载体混合。可接受的载体可以以不同方式起构成组合物成分的溶剂、载体、稀释剂或分散剂的作用，并且使得以适当稀释的形式将所述成分均匀施用在皮肤表面上。可接受的载体还可以促进组合物渗透入皮肤。
在局部施用制剂的一个实例中，可接受的载体占总组成重量的约90％-约99.99％。在其它实例中，可接受的载体占总组成重量的约97％-约99％。可接受的载体还可以占总组成重量的约91％-约98％；总组成重量的约92％-约97％；总组成重量的约93％-约96％；或总组成重量的约94％-约95％。可接受的载体在没有其它化妆品附加剂或添加剂存在下时占组合物的差额。
用于实施本发明的各种组分可溶于或不溶于可接受的载体。如果制剂的组分溶于可接受的载体，那么载体起溶剂作用。然而，如果制剂的所有或某些组分不溶于可接受的载体，那么借助于例如混悬液、乳剂、凝胶、霜剂或糊剂等将那些组分分散于载体中。
因此，可能使用可接受载体的范围极为广泛，这对本领域技术人员而言显而易见。例如，可接受的载体可以包括水、乙醇、丁二醇或其它有助于皮肤渗透的各种溶剂。合适的载体的某些实例描述在美国专利US6,184,247和US6,579,516中，将这两篇文献的全部内容引入本文作为参考。
优选用于实施本发明的可接受的载体包括水和乙醇。优选可接受的载体还含有丁二醇和/或frescolate MGA。例如，可接受的载体可以包括占组合物重量40-60％的水、45-55％的乙醇和5-10％的丁二醇。在实施本发明的过程中，优选将这种可接受的载体与占总组成重量2％的本发明制剂混合。在其它实施方案中，将这种可接受的载体与占总组成重量0.99％-10％、占总组成重量1％-9％、占总组成重量2％-8％、占总组成重量3％-7％或占总组成重量4％-6％的本发明制剂混合然而，一般来说，本发明可接受的载体可以包括，但不限于包括如下实例中的任意种水；蓖麻油；乙二醇一丁醚；二甘醇一乙醚；玉米油；二甲亚砜；乙二醇；异丙醇；大豆油；甘油；可溶性胶原蛋白；氧化锌；二氧化钛；或高岭土。
另外，用于本发明的可接受的载体可以可选地包括一种或多种保湿剂，包括，但不限于邻苯二甲酸二丁酯；可溶性胶原蛋白；山梨醇；或2-吡咯烷酮-5-甲酸钠。可以用于实施本发明的的其它保湿剂的实例可以在CFTA Coemetic Ingredient Handbook中找到，将该文献的相关部分引入本文作为参考。
另外，用于本发明的可接受的载体可任选包括一种或多种软化剂，包括，但不限于丁-1，3-二醇；棕榈酸鲸蜡酯；二甲基聚硅氧烷；甘油单蓖麻油酸酯；甘油单硬脂酸酯；棕榈酸异丁酯；硬脂酸异鲸蜡酯；棕榈酸异丙酯；硬脂酸异丙酯；硬脂酸丁酯；月桂酸异丙酯；月桂酸己酯；油酸癸酯；肉豆蔻酸异丙酯；乳酸月桂酯；十八烷-2-醇；辛酸甘油三酯；癸酸甘油三酯；聚乙二醇；丙-1，2-二醇；三乙二醇；芝麻油；椰子油；红花油；月桂酸异戊酯；壬苯醇醚-9；泛醇；氢化植物油；醋酸维生素E；尿囊素；亚油酸异丙酯；乳酸月桂酯；乳酸肉豆蔻酯；油酸癸酯；或肉豆蔻酸肉豆蔻酯。可以用于实施本发明的的其它保湿剂的实例可以在CFTA Coemetic Ingredient Handbook中找到，将该文献的相关部分引入本文作为参考。
另外，用于本发明的可接受的载体可以可选地包括一种或多种渗透促进剂，包括，但不限于吡咯烷酮类，例如2-吡咯烷酮；醇类；诸如乙醇；链烷醇类，诸如癸醇；乙二醇类，诸如丙二醇、二丙二醇、丁二醇；表面活性剂；或萜类。
可以用于实施本发明的其它可接受的载体对本领域技术人员而言显而易见并且包括在本发明范围内。
例如，可接受的载体可以为局部施用的洗剂，该洗剂可以包括卡波姆981、水、甘油、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、牛油果油、硬脂酸乙二醇酯、鲸蜡醇、二甲硅油、防腐剂、茶和本发明制剂中的各种组分。
本发明的制剂还可以含有各种已知和常用的化妆品佐剂，条件是它们不会对由制剂提供的所需皮肤改善和增湿作用产生不良影响。例如，本发明的制剂可以还包括一种或多种添加剂或其它本领域中公知的可选组分，它们可以包括，但不限于填充剂(例如固体、半固体、液体等)；载体；稀释剂；增稠剂；胶凝剂；维生素；类视色素和视黄醇(例如维生素B3、维生素A等)；色素；香料；防晒剂和防晒乳；抗氧化剂和自由基清除剂；有机羟基酸；表皮剥脱剂；皮肤调节剂；增湿剂；神经酰胺类、假神经酰胺类、磷脂类、神经鞘脂类、胆固醇、葡糖胺、药物上可接受的渗透剂(例如正癸基甲基亚砜、卵磷脂有机凝胶、酪氨酸、赖氨酸等)；防腐剂；抗菌剂；氨基酸，诸如脯氨酸、吡咯烷酮甲酸、其衍生物和盐、糖异构体、泛醇、含有诸如三乙醇胺或氢氧化钠这类碱的缓冲剂；蜡，诸如蜂蜡、地蜡、石蜡；植物提取物，诸如芦荟、矢车菊、北美金缕梅、接骨木花或黄瓜及其组合。其它合适的添加剂和/或佐剂描述在美国专利US6,184,247中，将该文献的全部内容引入本文作为参考。
本发明的制剂可以包括其它非活性组分，包括，但不限于表面活性剂、共溶剂和赋形剂。表面活性剂，诸如亲水性和疏水性表面活性剂可以包括在制剂中。可以基于制剂的总体组成和制剂的目的递送使用特定的表面活性剂有用的表面活性剂包括聚乙氧基化(PEG)脂肪酸类、PEG-脂肪酸二酯类、PEG-脂肪酸一-和二酯混合物、聚乙二醇甘油脂肪酸酯类、醇-油酯交换产物、聚甘油化脂肪酸类、丙二醇脂肪酸酯类、丙二醇酯类-甘油酯类的混合物、单酸甘油酯类和甘油二酯类、甾醇和甾醇衍生物、聚乙二醇脱水山梨醇脂肪酸酯类、聚乙二醇烷基醚类、多糖酯类、聚乙二醇烷基苯酚类、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、脱水山梨醇脂肪酸酯类、低级醇脂肪酸酯类、离子型表面活性剂及其混合物。
本发明的制剂还可以包括共溶剂，诸如醇类和多元醇类、聚乙二醇醚类、酰胺类、酯类、其它合适的共溶剂及其混合物。这些制剂还可以包括赋形剂或添加剂，诸如增甜剂、矫味剂、着色剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、粘度调节剂、张力剂、芳香剂、遮光剂、悬浮剂、粘合剂及其混合物。
一般来说，至少基于每日通过局部或口服将本发明的制剂给予足以引起所需水平的皮肤外观、纹理和水分改善的时间期限。局部施用或口服给予本发明的制剂可以持续任意合适的时间期限。更具体地说，在开始施用或摄入的几小时或几天内，使用者可以注意到皮肤具有改善的外观、纹理和水分。应理解本发明制剂所应施用或摄入的频率随外观、纹理和水分所需改善水平的不同而改变。特别地，促进美容的程度制剂随所用组合物总量的不同而改变。
可以通过为本领域技术人员众所周知的且可以包括在生产片剂、胶囊或液体剂型中使用的其它组分的方法和技术制备其它有用的剂型。
将上述详细描述看作是解释性的而非限制性的。通过下列实验研究和实施例进一步解释本发明，不应将这些实验研究和实施例视为限制性的。将本专利上下文中引述的所有参考文献、专利和公布的申请的内容引入本文作为参考。
实施例实施例1施用本发明制剂的组分刺激前胶原蛋白合成在24孔平板上建立人成纤维细胞培养物Hs27和人角质细胞培养物HEK。使细胞接触浓度为10mg/ml的本发明制剂中所用的各种组分。然后将共培养物保温过夜。第2天收集上清液。分析上清液中存在的前胶原蛋白，即由胶原蛋白合成过程中成纤维细胞形成的胶原蛋白可溶性前体。使用商购的ELISA试剂盒检测前胶原蛋白合成。例如，参见Hasan A，Murata H，Falabella A，Ochoa S，Zhou L，BadiavasE，Falanga V“来自静脉溃疡的真皮成纤维细胞对转化生长因子-β1的作用无反应”-J.Dermatol.Sci.1997.16(1)59-66。
正如附图2中解释的，pickled ume、蔷薇果和当归提取物在单独使用时为最有效的成纤维细胞/角质细胞共培养物中前胶原蛋白合成的刺激剂。另外，附图2解释了蔷薇果与pickled ume、西方雪果提取物和当归提取物组合诱导高于单独化合物中任意种的水平的胶原蛋白合成。
实施例2施用本发明制剂的组分刺激弹性蛋白合成在24孔平板上建立人成纤维细胞培养物Hs27和人角质细胞培养物HEK。使细胞接触浓度为10mg/ml的本发明制剂中所用的各种组分。然后将共培养物保温过夜。第2天收集上清液。使用来自Biocolor的Fastin Elastin试剂盒分析上清液中存在的弹性蛋白。Lao J.，VesselyI.2004.“二尖瓣腱索中胶原蛋白原纤维、糖胺聚糖类与应力松弛之间的关系”-Ann.Biomed.Eng.32(7)977-983。
正如附图3中证实的，当归提取物在单独使用或以组合形式使用时为最有效的弹性蛋白合成诱导物。
实施例3施用本发明制剂的组分刺激透明质酸合成在24孔平板上建立人成纤维细胞培养物Hs27和人角质细胞培养物HEK。使细胞接触浓度为10mg/ml的本发明制剂中所用的各种组分。然后将共培养物保温过夜。第2天收集上清液。分析上清液中存在的透明质酸。使用商购的ELISA试剂盒检测透明质酸合成。LindqvistU.，Chichibu K.，Delpech B.，Goldberg RL，Knudson W.，Pool AR，Laurent TC.1992.“为临床应用而比较的透明质烷的7种不同试验”-Clin.Chem.38(1)127-32。
正如附图4中解释的，没有一种组分单独诱导显著水平的透明质酸合成，而蔷薇果和西方雪果或蔷薇果、西方雪果和当归提取物的组合诱导高于未处理的对照细胞的水平的透明质酸。
实施例4用本发明制剂的组分抑制MMP-1、MMP-9和弹性蛋白酶商购试剂盒用于测试本发明制剂中所用的各种组分对MMP-1、MMP-9和弹性蛋白酶活性的作用。Gould LJ，Yager DR，McGeenhanGM，Diegelmann RF.1999“使用培养物中的成纤维细胞分析胶原蛋白酶和明胶酶活性的方法”-In Vitro Cell.Dev.Biol.Anim.35(2)75-79。就MMP-1而言，按照制造商的说明书使用来自Amersham的试剂盒。就MMP-9和弹性蛋白酶而言，使用来自Molecular Probes的试剂盒。在储备溶剂中制备储备浓度为100mg/ml的样品。使用PBS将样品稀释至100μg/ml。
附图5解释了这些分析的结果。王浆是最有效的MMP-1和弹性的抑制剂，而Pickled Ume是最有效的MMP-9抑制剂。葡萄子提取物对这三种酶中的任意种均具有最小抑制作用，其后是金樱子。
实施例5用本发明制剂的组分刺激脂质合成将人HEK001细胞以2×104/孔平板固定在96孔平板上并保温过夜。第2天使细胞接触甘氨酸、金樱子、葡萄子提取物、西方雪果提取物、Pickled Ume、抗坏血酸、当归提取物、王浆和α-生育酚，将它们以0.005％、0.05％和0.5％稀释入细胞培养基中。
然后将细胞再次保温过夜。第2天，将细胞固定在1％甲醛中。然后用Oil Red O染色剂对细胞脂质染色。参见Ramizrez JL，Castro-Munnozledo F，Kuri-Harusch W.1992.“通过用Oil Red O染色胞质内脂质对脂肪转化和甘油三酯类进行定量”-Histochemistry.97493-497。染色后，用异丙醇提取脂质结合的染色剂。在515nm处读取提取的染色剂的OD。
葡萄子提取物为最有效的脂质合成诱导物，而金樱子和α-生育酚也表现出诱导脂质合成的能力。
实施例6不同组分对胶原蛋白、弹性蛋白、MMP-1、MMP-9和脂质形成的作用表2中概括了实施例1-5中所讨论的生物试验的结果并解释了甘氨酸、金樱子、葡萄子提取物、西方雪果提取物、pickled ume、抗坏血酸、当归提取物、王浆和α-生育酚对胶原蛋白、弹性蛋白、MMP-1、MMP-9和脂质形成的作用。在表2中，“+”号表示合成增加，其中多个“+”号表示合成增加的较高，而“-”号表示合成减少，其中多个“-”号表示合成显著减少。“NT”表示未测试化合物对胶原蛋白、弹性蛋白、MMP-1、MMP-9和脂质形成的特定作用。
表2本发明制剂中所用组分的作用

实施例7制剂的组分通过Caco-2单层的输送高度口服吸收对任何口服给予本发明制剂的成功均是关键的。分化的Caco-2细胞单层表现出人小肠的形态和生理特性，例如屏障功能、微绒毛、刷状缘酶、活性输送系统和流出系统。因此，Caco-2细胞提供了预测体内肠吸收的可靠体外模型。
使Caco-2细胞在横向孔聚碳酸酯插入物上生长21天。通过测定培养过程中跨上皮电阻来监测生长和分化。以一式三份将测试化合物加入到供体室内。在特定的时间点时从接受室内收集样品。为了评价P-糖蛋白对化合物输送过程的影响，比较底端到基底外侧与基底外侧到顶端的输送。为了进行质量控制和对测试化合物分类，每次实验中均包括具有高和低跨上皮流量的参比化合物。参比化合物选自由Pharmacelsus提供的化合物目录。在每次试验后，通过测定荧光黄的渗透系数值(Papp)来检查各细胞单层的完整性。
通过UV-光谱法或通过LC-MS/MS测定接受室和供体室内的化合物浓度。将这些浓度值用于计算表观渗透性和化合物的收率。
附图6解释了金樱子、西方雪果提取物、pickled ume、葡萄子提取物、当归提取物和王浆通过Caco-2单层的输送。将数据表示为在Caco-2细胞基底外侧上保温的共培养效应细胞分泌的胶原蛋白控制％并将它们与未处理的对照共培养物进行比较。
权利要求
1.制剂，包括葡萄子提取物、α-生育酚或其衍生物、蔷薇果和可接受的载体，其中该制剂有效刺激皮肤细胞中的脂质合成。
2.权利要求1所述的制剂，其中葡萄子提取物的存在量为100-150mg、α-生育酚或其衍生物的存在量为3-7mg且蔷薇果的存在量为30-500mg。
3.增加个体皮肤中脂质合成的方法，包括对该个体给予权利要求1所述的制剂。
4.权利要求3所述的方法，其中通过口服给予液体形式的所述制剂。
5.权利要求4所述的方法，其中所述的液体是基于水的、基于奶的、基于茶的、基于果汁的或其某些的组合。
6.权利要求5所述的方法，其中所述的液体还包括增稠剂、增甜剂或其某些的组合。
7.权利要求3所述的方法，其中局部给予凝胶、洗剂、霜剂、软膏剂、乳剂、糊剂或摩丝形式的所述制剂。
8.制剂，包括葡萄子提取物、西方雪果提取物、蔷薇果、pickledume提取物、当归提取物和可接受的载体，其中该制剂有效刺激皮肤细胞中的脂质合成。
9.权利要求8所述的制剂，其中葡萄子提取物的存在量为100-150mg、西方雪果提取物的存在量为30-500mg、蔷薇果的存在量为30-500mg、pickled ume提取物的存在量为10-500mg且当归提取物的存在量为30-500mg。
10.权利要求8所述的制剂，还包括透明质酸。
11.权利要求9所述的制剂，还包括存在量为4-40mg的透明质酸。
12.增加个体皮肤中脂质合成的方法，包括对该个体给予权利要求8所述的制剂。
13.权利要求12所述的方法，其中通过口服给予液体形式的所述制剂。
14.权利要求13所述的方法，其中所述的液体是基于水的、基于奶的、基于茶的、基于果汁的或其某些的组合。
15.权利要求14所述的方法，其中所述的液体还包括增稠剂、增甜剂或其某些的组合。
16.权利要求12所述的方法，其中局部给予凝胶、洗剂、霜剂、软膏剂、乳剂、糊剂或摩丝形式的所述制剂。
17.权利要求1所述的制剂，还包括王浆、西方雪果提取物、当归提取物、黄体素、抗坏血酸或其衍生物、生物素、α-硫辛酸、透明质酸、甘氨酸、明胶、pickled ume提取物或其组合。
18.权利要求17所述的制剂，其中王浆的存在量为30-1500mg、西方雪果提取物的存在量为30-500mg、当归提取物的存在量为30-500mg、黄体素的存在量为2-5mg、抗坏血酸或其衍生物的存在量为40-70mg、生物素的存在量为600-900mg、α-硫辛酸的存在量为1-4mg、透明质酸的存在量为4-40mg、甘氨酸的存在量为30-200mg、明胶的存在量为30-500mg且pickled ume提取物的存在量为10-500mg。
19.增加个体皮肤中脂质合成的方法，包括对该个体给予权利要求17所述的制剂。
20.权利要求19所述的方法，其中通过口服给予液体形式的所述制剂。
21.权利要求20所述的方法，其中所述的液体是基于水的、基于奶的、基于茶的、基于果汁的或其某些的组合。
22.权利要求21所述的方法，其中所述的液体还包括增稠剂、增甜剂或其某些的组合。
23.权利要求19所述的方法，其中局部给予凝胶、洗剂、霜剂、软膏剂、乳剂、糊剂或摩丝形式的所述制剂。
24.刺激皮肤细胞中胶原蛋白或弹性蛋白合成的方法，包括对所述皮肤细胞给予权利要求17所述的制剂。
25.抑制皮肤细胞中胶原蛋白或弹性蛋白降解的方法，包括对所述皮肤细胞给予权利要求17所述的制剂。
26.抑制皮肤细胞中MMP-1、MMP-9或弹性蛋白酶的方法，包括对所述皮肤细胞给予权利要求17所述的制剂。
全文摘要
本发明涉及用于改善皮肤外观、纹理和/或湿度的组分的制剂。特别地，本发明的制剂刺激胶原蛋白、弹性蛋白和脂质合成和/或抑制皮肤胶原蛋白、弹性蛋白和脂质的损耗或将其损耗减少到最低限度。另外，本发明的制剂抑制基质金属蛋白酶，诸如MMP－1、MMP－9、胶原酶或弹性蛋白酶。
文档编号A61P17/16GK1899257SQ200610059438
公开日2007年1月24日 申请日期2006年3月7日 优先权日2005年3月7日
发明者M·A·默里, A·W·克劳福德, D·J·法斯特, 董美仙, M·黄, L·M·康纳 申请人:捷通国际有限公司