专利名称：由延胡索和独一味制成的药物组合物及其制备方法和用途的利记博彩app
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种由延胡索或其提取物、独一味或其提取物制成的药物组合物及其制备方法和用途。
2、背景技术延胡索(Rhizoma Corydalis)为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎。别名元胡、玄胡索。苦、微辛，温。入肝、脾经，具有活血，利气，止痛之功效。用于胸胁、脘腹疼痛、经闭痛经，产后瘀阻，跌扑肿痛。延胡索含多种生物碱，其中延胡索甲素(延胡索碱d-CorydalLne)、乙素(消旋四氢掌叶防已碱d1-Tetrahydropalmatine)、丑素(CorydalisL)及癸素(CorydalisJ)具有镇痛作用，以乙素最强。乙素为消旋体，其有效成分为左旋乙素，即左旋延胡索乙素(左旋四氢掌叶防已碱、颅痛定、Rotundine)，现已可人工合成，其镇痛作用较乙素强而毒性小。药理试验表明延胡索有良好的镇痛作用，另外还有镇静、催眠作用。
独一味系藏族习用药材，为唇形科独一味属植物独一味Lamiophlomis rotate(Benth)Kudo的干燥全草，又名毛膏药、地膏药。具有活血止血，祛风止痛、干黄水之功效。用于跌打损伤，外伤出血，风湿痹痛，黄水病。主要化学成分为黄酮或皂苷。药理作用主要有(1)镇痛作用对小鼠有明显的镇痛作用，能显著延长小鼠热板的镇痛阈时间，还能显著减少腹腔注射醋酸溶液所致小鼠扭体反应次数。(2)止血作用可显著缩短出血时间，还有局部止血作用。(3)提高免疫功能的作用独一味皂苷腹腔注射，能显著提高巨噬细胞吞噬活性，并能显著提升E-花环形成率及酸性α-萘酚醋酸酯酶染色阳性率，表明独一味能显著提高非特异性免疫和特异性免疫的作用。(4)抗菌作用独一味皂苷对痢疾杆菌、绿脓杆菌、产气杆菌、枯草杆菌和乙型溶血型链球菌有显著的抑制作用。(5)抗肿瘤作用独一味皂苷对S180、艾氏癌、肝癌均有一定的抑制作用，可使荷瘤小鼠的脾脏和胸腺增重。
现利用延胡索和独一味的相互作用，配伍组方用于治疗妇科、外科等疾病还未见报道。
3、发明内容为了满足临床需要，本发明提供了一种新的具有活血化瘀、行气止痛功效的药物组合物及其制备方法和用途，它主要由延胡索或其提取物、独一味或其提取物制成，在用于治疗经闭痛经、外伤和术后镇痛止血等方面产生了意想不到的疗效。
本发明药物组合物，其原料药重量份数为延胡索0.4～10份，独一味1～25份；优选份数为延胡索1～4份，独一味2～10份；最佳份数为延胡索2份，独一味5份。
上述药物组合物中的原药材可以用适宜的溶剂和方法单提或混提制备得到提取物，总提取物再与药学上可接受的辅料混合制成任一制剂。组合物中总提取物的主要的有效成分为延胡索总碱、独一味总黄酮，总提取物中主要有效成分的总含量不低于20％，最好不低于50％。
上文所述的延胡索可以用适宜的溶剂经过提取加工得到延胡索提取物，提取溶剂优选水或乙醇，提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法，提取物的主要有效成分为延胡索总碱。
本发明提供了延胡索的优选提取工艺，具体过程如下取延胡索药材，粉碎成粗粉，加水适量及1/2量稀盐酸，浸泡0.5小时后，煎煮1.5小时滤过，继续加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，再加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，合并三次滤液，浓缩至每毫升药液中含生药1g，用10％氢氧化钠溶液调pH至9～10，静置，离心，取沉淀，加80％乙醇加热使溶解，滤过，滤液加烯盐酸调pH值至2～3，精制，离心，取沉淀，真空干燥即得。
通过本工艺制得的延胡索提取物得率为0.5％～3％，提取物中延胡索总碱的含量不低于50％，延胡索乙素的含量不低于1.5％。
除采用上述方法外，还可通过以下方法提取制备，但不仅限于下述方法方法一取延胡索药材，粉碎成粗粉，加水适量及1/2量烯盐酸，浸泡0.5小时后，煎煮1.5小时滤过，继续加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，合并提取液，浓缩至每毫升药液中含生药1g，冷后加入乙醇，使含醇量达65％，冷藏12小时，过滤，回收乙醇并浓缩至每毫升药液含生药2g，冷却后再加乙醇使含醇量达85％，冷藏12小时，滤过，回收乙醇并浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制得的延胡索提取物得率为2.5～4％，提取物中延胡索总碱的含量不低于20％，延胡索乙素的含量不低于0.5％。
方法二取延胡索药材，粉碎成粗粉，加水适量及1/2量烯盐酸，浸泡0.5小时后，煎煮1.5小时滤过，继续加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，再加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，合并三次滤液，浓缩至每毫升药液中含生药1g，冷后加入乙醇，使含醇量达85％，冷藏12小时，过滤，回收乙醇并浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制得的延胡索提取物得率为2～5％，提取物中延胡索总碱的含量不低于30％，延胡索乙素的含量不低于0.6％。
上文所述的独一味可以用适宜的溶剂经过提取加工得到提取物，其中的溶剂优选水或乙醇，提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法，提取物的主要有效成分为独一味总黄酮。
本发明提供了独一味的优选提取工艺，具体过程如下取独一味药材，粉碎，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.03～1.08的稀浸膏，将此稀浸膏加于已处理好的大孔树脂(D101型，乙醇湿法装柱，乙醇适量预洗，再用水洗至无醇味，备用)上，先用2倍柱体积的水冲洗，再用2倍柱体积的20％乙醇冲洗，弃去冲洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.08～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。
通过本工艺制得的提取物得率为0.5～2％，独一味提取物中总黄酮的含量不低于50％，木犀草素的含量不低于不低于1％。
除采用上述方法外，还可通过以下方法提取制备，但不仅限于下述方法
方法一取独一味药材，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.03～1.08的稀浸膏，将此稀浸膏加于已处理好的大孔树脂(D101型，乙醇湿法装柱，乙醇适量预洗，再用水洗至无醇味，备用)上，先用2倍柱体积的水冲洗，弃去冲洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度1.08～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。通过本工艺制得的独一味提取物得率为1.5～3％，提取物中总黄酮的含量不低于35％，木犀草素的含量不低于0.7％。
方法二取独一味药材，粉碎，加水煎煮二次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.03～1.08的稀浸膏，将此稀浸膏加于已处理好的大孔树脂(D101，乙醇湿法装柱，乙醇适量预洗，再用水洗至无醇味，备用)上，先用2倍柱体积的20％乙醇冲洗，弃去冲洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度1.08～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。通过本工艺制得的独一味提取物得率为3～6％，提取物中总黄酮的含量不低于30％，木犀草素的含量不低于0.5％。
本发明药物组合物除可用上述药材直接投料制得外，还可以由延胡索提取物、独一味提取物投料制成，其中延胡索提取物中延胡索总碱含量不低于20％，最好不低于50％，延胡索乙素的含量不低于0.5％，最好不低于1.5％；独一味提取物中独一味总黄酮含量不低于30％，最好不低于50％，木犀草素的含量不低于0.5％，最好不低于1％。按照提取物相对于药材的得率计算，其重量份数为延胡索提取物2～300份，独一味提取物5～500份；优选份数为延胡索提取物5～120份，独一味提取物10～200份；最佳份数为延胡索提取物10～60份，独一味提取物25～100份。
以上组成是按重量份作为配比的，如大规模生产可以千克或以吨为单位，小规模生产也可以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间重量配比的比例不变。
以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，可以相应调整组成的比例，增加或者减少不超过100％。
本发明药物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在上述重量份范围内都具有较好的疗效。
上述药物组合物，可以制成任一临床上或药学上可接受的剂型，如注射剂、口服常释剂型、缓释控释剂型、颗粒剂、丸剂、口服液体剂、滴眼剂、滴鼻剂、滴耳剂、吸入剂、栓剂、软膏剂等。本发明药物组合物优选剂型为注射剂或口服制剂。
本发明的药物组合物可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述的载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、粘合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
本发明药物组合物在制成注射剂时，为了增加其溶解度，可以加入聚山梨酯-80等增溶剂。输液中可以加入用于调节渗透压的等渗调节剂，例如氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、乳酸纳、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，优选氯化钠或葡萄糖。粉针中可加入赋形剂，例如甘露醇、葡萄糖等。
上述药物组合物，具有活血、止血、行气、止痛、抗菌、抗炎、抗肿瘤、提高免疫功能、利尿利胆等作用。
本发明组合物的优点在于1、提供了一种新的用于治疗妇科和外科等疾病的中药复方，满足了临床的需要。
2、对延胡索和独一味的相互作用和配伍组方进行了药理学研究，结果表明与单用延胡索或独一味相比，本发明组合物可显著增高小鼠的痛阈值，可使脾脏和胸腺的系数明显增大，可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数明显增高，可明显缩短正常小鼠的出血时间。
3、通过对本发明组合物不同配比的小鼠醋酸扭体药效学研究，筛选出了本发明组合物的优选配比。
4、本发明组合物既可由延胡索和独一味药材直接投料制成任一制剂，也可由延胡索、独一味单提或混提物投料加工制成任一制剂，满足了大生产的需要。
5、对本发明组合物进行了急性毒性试验，结果表明本发明组合物毒性小，安全范围大。
6、对本发明药物组合物进行的稳定性试验结果表明各项指标均比较稳定，保证了临床用药的安全。
7、延胡索和独一味临床用药疗效确切，且两者合并用药后用药量减少，具有广阔的应用前景。
以下试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试验例包括本发明药物组合物的药效学试验，本发明药物组合物以下简称YD。以下试验例中延胡索药材均根据实施例1中延胡索提取物的制备工艺制备，独一味药材根据实施例2中独一味提取物的制备工艺制备。
试验例1 药效学试验——YD对小鼠醋酸扭体的影响受试动物 昆明小鼠，130只，雌雄各半，随机分为13组，每组10只，体重22～26g。
供试品 空白对照组氯化钠注射液，山东长富洁晶药业有限公司；阳性对照组盐酸曲马多注射液，辽宁天龙药业有限公司，规格2ml0.1g；延胡索组延胡索注射液，自制；独一味组独一味注射液，自制；YD组延胡索和独一味重量比分别为1g+2g、1g+5g、1g+10g、2g+2g、2g+5g、2g+10g、4g+2g、4g+5g、4g+10g，各剂量组注射液自制。
方法 将小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、延胡索组、独一味组、YD各剂量注射液组，每组10只，雌雄各半。按下表所示剂量，试验组腹腔注射给药，空白对照组腹腔注射等容积生理盐水，阳性对照组于试验前腹腔注射盐酸曲马多注射液，均给药一次。各组动物给药1h后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.2ml/只。以腹部内凹，臀部提高，伸展后肢为扭体指标，观察注射后15min内扭体反应次数和第一次扭体出现时间(潜伏期)，并按下式计算镇痛率。镇痛率＝(对照组扭体次数-给药组扭体次数)/对照组扭体次数×100％。
表1 组合物对小鼠醋酸扭体的影响(x±s，n＝10)
注与空白对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；与延胡索组相比，ap＜0.01；与独一味组相比，bp＜0.01；试验结果与结论 试验结果见表1。
与空白对照组相比，延胡索组、独一味组可显著延长小鼠扭体的潜伏期(p＜0.01)，显著减少小鼠的扭体次数(p＜0.01)，镇痛率显著提高(p＜0.01)；YD各剂量组可极显著延长小鼠扭体的潜伏期(p＜0.001)，极显著减少小鼠的扭体次数(p＜0.001)，镇痛率极显著提高(p＜0.001)。YD各剂量组分别与延胡索组、独一味组相比显著延长小鼠扭体的潜伏期(p＜0.01)，显著减少小鼠的扭体次数(p＜0.01)，镇痛率显著提高(p＜0.01)，提示延胡索与独一味两者合用有协同增效的作用。且当延胡索与独一味重量配比为延胡索(1～4g)+独一味(2～10g)时效果显著，尤其以延胡索(2g)+独一味(5g)时效果最好。
试验例2 YD对小鼠痛阈值的影响受试动物 选痛阈值在5～30S的雄性小鼠70只，体重23～29g，随机分为7组，每组10只。
供试品 空白对照组氯化钠注射液，山东长富洁晶药业有限公司；阳性对照组盐酸吗啡注射液，东北制药集团公司沈阳第一制药厂，规格1ml∶10mg；延胡索组延胡索注射液，自制；独一味组独一味注射液，自制；YD组自制(处方和制备方法参见实施例4水针剂处方2)，分为低、中、高三个剂量组。
方法 将将小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、延胡索组、独一味组、YD低剂量组、YD中剂量组、YD高剂量组，每组10只。按下表所示剂量试验组腹腔注射给药，空白对照组不予给药给予等容积生理盐水。给受试组于给药后1、2、3小时分别测定小鼠的痛阈值二次，取平均值，记录结果。
试验结果与结论 试验结果见表2。
(1)与空白对照组相比，延胡索组和独一味组可使小鼠的痛阈值明显增高(p＜0.05)；阳性对照组、YD低剂量组可使小鼠的痛阈值显著增高(p＜0.01)；YD中、高剂量组可使小鼠的痛阈值极显著增高(p＜0.001)。
(2)与阳性对照组相比，YD中剂量组可使小鼠的痛阈值明显增高(p＜0.05)；YD高剂量组可使小鼠的痛阈值显著增高(p＜0.01)。
(3)与延胡索组相比，YD低、中、高剂量组均可显著增高小鼠的痛阈值(p＜0.01)。
(4)与独一味组相比，YD低、中、高剂量组均可显著增高小鼠的痛阈值(p＜0.01)。
试验结果表明，延胡索和独一味配伍用药后可显著增高小鼠的痛阈值，疗效明显优于单用延胡索和独一味，提示两者有协同增效的作用。
表2 组合物对小鼠痛阈值的影响(x±s，n＝10)
注与空白对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；与阳性对照组相比，ap＜0.05，bp＜0.01；与延胡索组相比，cp＜0.01；与独一味组相比，dp＜0.01。
试验例3 YD对幼年小鼠免疫功能的影响受试动物 幼年雄鼠70只，每只8～12g，每组10只供试品 空白对照组氯化钠注射液，山东长富洁晶药业有限公司；阳性对照组地塞米松磷酸钠注射液，上海通用药业股份有限公司，规格1ml∶2mg；延胡索组延胡索注射液，自制；独一味组独一味注射液，自制；YD组自制(处方和制备方法参见实施例4水针剂处方2)，分为低、中、高三个剂量组。
方法 将幼鼠随机分为空白对照组，阳性对照组，延胡索组，独一味组，YD低剂量组，YD中剂量组、YD高剂量组。各给药组每日腹腔注射给药，给药量如表3所示。给药第13天，所有动物腹腔注射给予等体积的淀粉溶液。第14天，所有动物腹腔注射给予0.5％鸡红细胞0.1ml/10g。1h时后，处死动物。取腹腔液涂片，甲醇固定，姬氏染色，在油镜下观察100个腹腔巨噬细胞有多少吞噬了鸡红细胞，吞噬多少个鸡红细胞，计数吞噬率和吞噬指数。剪开胸腔和腹腔一摘取脾脏和胸腺，剔除周围的结缔组织后，在1g/万的电子天秤上称各个动物的脾脏和胸腺重量。
表3 YD对幼鼠免疫器官重量系数的影响(n＝10，X±S)
注与空白对照组相比，*p＜0.01，**p＜0.001；与阳性对照组相比，&p＜0.001；与延胡索组相比，ap＜0.05，bp＜0.01；与独一味组相比，cp＜0.05，dp＜0.01。
表4 YD对幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(n＝10，X±S)
注与空白对照组相比，*p＜0.01，**p＜0.001；与阳性对照组相比，&p＜0.001；与延胡索组相比，ap＜0.05，bp＜0.01；与独一味组相比，cp＜0.05，dp＜0.01。
试验结果与结论 试验结果见表3、表4。
(1)对幼鼠免疫器官重量系数的影响与空白对照组相比，延胡索组、独一味组均可使脾脏和胸腺的系数显著增大(p＜0.01)；YD低、中、高剂量组均可使脾脏和胸腺的系数极显著增大(p＜0.001)。与阳性对照组相比，延胡索组、独一味组和YD低、中、高剂量组均可使脾脏和胸腺的系数极显著增大(p＜0.001)。与延胡索、独一味组相比，YD低剂量组均可使脾脏和胸腺的系数明显增大(p＜0.05)；YD中、高剂量组组均可使脾脏和胸腺的系数显著增大(p＜0.01)。
(2)对幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响与空白对照组相比，延胡索组、独一味组均可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著增高(p＜0.01)；YD低、中、高剂量组均可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数极显著增高(p＜0.001)。与阳性对照组相比，延胡索组、独一味组和YD低、中、高剂量组均可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数极显著增高(p＜0.001)。与延胡索、独一味组相比，YD低剂量组均可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数明显增高(p＜0.05)；YD中、高剂量组组均可使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著增高(p＜0.01)。
试验结果表明，延胡索和独一味配伍用药可使幼鼠的脾脏和胸腺的系数显著增大，使幼鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著增高，且效果明显优于单用延胡索和独一味。提示两者有协同增效的作用。
试验例4 YD对正常小鼠出血时间的影响受试动物 昆明种小白鼠，18～22g，共60只，随机分为6组，每组10只供试品 空白对照组氯化钠注射液，山东长富洁晶药业有限公司；延胡索组延胡索注射液，自制；独一味组独一味注射液；YD组自制(处方和制备方法参见实施例4水针剂处方2)，分为低、中、高三个剂量组。
方法 将小鼠随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组、延胡索组、独一味组和YD低、中、高剂量组，称重，标记，连续给药7天，末次给药后固定，测定小鼠尾长度并标记，30～40分钟后分别将小鼠尾尖3mm处横断，待血液自行溢出开始计时，每隔30s用滤纸吸去血滴，直至血液自然停止，计算出血时间。
表5 YD对正常小鼠出血时间的影响(n＝10，X±S)
注与空白对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；与延胡索组相比，ap＜0.05，bp＜0.01；与独一味组相比，cp＜0.05，dp＜0.01。
试验结果与结论 试验结果见表5。
(1)与空白对照组相比，延胡索组、独一味组可明显缩短正常小鼠的出血时间(p＜0.05)；YD低剂量组可显著缩短正常小鼠的出血时间(p＜0.01)；(2)与延胡索组、独一味组相比，YD低剂量组可明显缩短正常小鼠的出血时间(p＜0.05)；YD中、高剂量组可显著缩短正常小鼠的出血时间(p＜0.01)。
试验结果表明，延胡索与独一味配伍应用后可缩短正常小鼠的出血时间，疗效优于单用延胡索或独一味，提示两者有协同增效的作用。
试验例5 小鼠注射给药急性毒性试验(1)试验方法供试品组合物注射液，来源于实施例4水针剂处方2。
受试动物小鼠，每组雌雄各60只，雄性体重25～28g，雌性体重21～24g。
给药途径静脉注射、腹腔注射。
观察项目死亡数、一般状态、体重、剖检、半数致死剂量。
(2)试验结果按照急性毒性试验要求进行预试，腹腔注射及静脉注射两给药途径皆无法测出药物的半数致死量，也未见明显的毒性反应，故进行日最大给药量试验。给药剂量尾静脉注射0.2ml/10g，腹腔注射0.2ml/10g，一日1次。
死亡数未出现死亡。
一般状态未见异常变化。
体重于给药前1天，给药日，给药后2、4、6、8、10、12、14天测量；未见异常变化。
剖检心、肝、肺、肾等组织未见异常变化。
(3)结论本实验中未出现死亡，本组合物注射液对雌雄小鼠静脉和腹腔注射给药的最大耐受量为0.2ml/10g，相当于50kg体重人日最大用量10ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。
试验例6 组合物注射液稳定性试验供试品组合物注射液，来源于实施例4水针剂处方2。
考察项目性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量；并在加速试验6个月和长期试验期末增加无菌和热原检查。
1、影响因素试验强光照射试验取供试品，置照度为4500Lx的光照箱内放置10天。
高温试验取供试品，分别置于40℃、60℃条件下放置10天。
低温试验取供试品，在4℃冰箱中放置10天。
上述试验，分别于第5、10天取样测定。比较性状后测试各项指标，并将结果与0天比较。
结果光照4500Lx条件下放置10天，除有关物质略有升高外，其它各项指标均无明显变化。高温60℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。高温40℃、低温4℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。
2、加速试验方法置温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月。在试验期间分别于第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在6个月末增加无菌和热原检查。
结果温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，除有关物质略有增加，标示含量略有下降外，其它各项指标均无明显变化，加速试验6个月末，热原、无菌检查均符合规定。
3、长期试验方法置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月、18个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在18个月末增加无菌和热原检查。
结果温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月，各项指标均无明显变化，长期试验18个月末，热原、无菌检查均符合规定。
结论由上述考察结果得出结论，各项试验中，组合物注射液均比较稳定。
综上所述，本发明提供的由延胡索或其提取物与独一味或其提取物制成的组合物具有协同增效作用，明显优于延胡索或独一味单独给药的药效。对组合物进行的急性毒性试验表明本发明组合物低毒，安全性高；对组合物注射液进行的稳定性试验结果表明，本发明提供的组合物注射液的各项指标均比较稳定，可以用于放大生产。
具体实施方式
以下通过实施例来进一步阐述本发明药物组合物的制备方法，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。
以下实施例3～10中的延胡索提取物源于实施例1中三批延胡索提取物中的第二批，独一味提取物源于实施例2中三批独一味提取物中的第二批。
实施例1 延胡索提取物的制备取延胡索药材，粉碎成粗粉，加水适量及1/2量稀盐酸，浸泡0.5小时后，煎煮1.5小时滤过，继续加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，再加水适量及1/4量稀盐酸，煎煮1小时滤过，合并三次滤液，浓缩至每毫升药液中含生药1g，用10％氢氧化钠溶液调pH至9～10，静置，离心，取沉淀，加80％乙醇加热使溶解，滤过，滤液加烯盐酸调pH值至2～3，精制，离心，取沉淀，真空干燥即得。
延胡索提取物的鉴别取延胡索对照药材1g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。另取延胡索提取物0.1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液即得。吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一用0.1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中在与对照药材、对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
延胡索提取物的含量测定延胡索总碱的含量测定吸收波长的选择 取延胡索乙素标准液，按标准曲线项下操作，于53W紫外可见分光光度计测定波长在350～500nm范围内的吸收度，结果在405nm处有最大吸收。
标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重的延胡索乙素标准品10mg，置100ml容量瓶中，加0.05M的硫酸溶液0.1ml，加少许水使溶解，加水至刻度，摇匀，使每ml相当于100ug。精密量取配制好的标准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，置60ml分液漏斗中，加水至5ml，加入缓冲液5ml，溴麝香草酚蓝溶液1ml，精密加入氯仿10ml，振摇，放置使分层，分取氯仿层于具塞试管中，离心。领取5ml水以同样操作作空白对照。置53W紫外可见分光光度计于波长405nm处测定吸收度。计算回归方程。
样品测定 取延胡索提取物0.1g，置100ml容量瓶中加水至刻度，摇匀，使溶解，然后精密量取稀释液2ml，置60ml分液漏斗中，按标准曲线下操作，测定样品中总碱的含量。
延胡索乙素的含量测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液(三乙胺调pH值6.0)(55∶45)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素的对照品适量，加甲醇制成每1ml含46ug的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取延胡索提取物50mg，加甲醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解转移至5ml容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液即得。
按照上述工艺制得三批延胡索提取物，其含量和得率见表6。
表6 延胡索提取物的含量测定结果和得率
实施例2 独一味提取物的制备取独一味药材，粉碎，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.03～1.08的稀浸膏，将此稀浸膏加于已处理好的大孔树脂(D101型，乙醇湿法装柱，乙醇适量预洗，再用水洗至无醇味，备用)上，先用2倍柱体积的水冲洗，再用2倍柱体积的20％乙醇冲洗，弃去冲洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.08～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。
独一味提取物的鉴别取独一味提取物50mg，加乙醇5ml，超声处理25分钟，滤过滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取独一味对照药材1g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在105℃加热约15分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
独一味提取物的含量测定总黄酮的含量测定对照品溶液的制备 取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇70ml，置水浴上微热使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水芦丁0.2mg)。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml量瓶中，再加水6ml，再加5％亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，再加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的溶液为空白。照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。
测定法 取独一味提取物50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇70ml，置水浴微热，并时时振摇30分钟，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，放置4小时，精密量取上清夜1ml，置25ml量瓶中，照标准曲线项下的制备方法，自“加水6ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上，读出供试品溶液的量，计算，即得。
木犀草素含量测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)为流动相，检测波长为350nm。理论板数按木犀草素峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备 精密称取木犀草素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10ug的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取独一味提取物50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加2.5mol/L盐酸甲醇溶液20ml，超声处理30分钟，放冷，用2.5mol/L盐酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置50ml圆底烧瓶中，于90℃水浴中加热水解30分钟，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
按照上述工艺制得三批独一味提取物，其含量和得率见表7。
表7 独一味提取物的含量测定结果和得率
实施例3 YD粉针剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)聚山梨酯80 50g甘露醇 200g无菌注射用水加至2000ml共制备 1000支处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)聚山梨酯80 80g甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)聚山梨酯80 100g甘露醇 500g无菌注射用水加至5000ml共制备 1000支制备工艺1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将延胡索提取物、独一味提取物加入配液量30％无菌注射用水中加热溶解完全。甘露醇加配液量30％的无菌注射用水加热搅拌溶解完全，聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液，合并上述溶液，补加无菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.22um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。
9)冻干结束，压塞，轧盖。
10)成品全检，包装入库。
实施例4 YD水针剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)聚山梨酯80 50g注射用水加至2000ml共制备 1000支处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)聚山梨酯80 80g注射用水加至2000ml共制备 1000支处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)聚山梨酯80 100g注射用水加至2000ml共制备 1000支制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将延胡索提取物、独一味提取物加入配液量20％的注射用水中加热搅拌溶解完全。将聚山梨酯80加热使溶解完全。
3)合并上述两溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)将溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽灭菌30分钟。
10)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。
11)灯检，成品全检，包装入库。
实施例5 YD输液的制备氯化钠输液处方
处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)聚山梨酯80 50g氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)聚山梨酯80 80g氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)聚山梨酯80 100g氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶制备工艺1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将延胡索提取物、独一味提取物加入配液量20％注射用水加热搅拌溶解完全，将氯化钠用配液量20％的注射用水溶解完全。聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液加入木犀草素加热溶解。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
葡萄糖输液处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)聚山梨酯80 25g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)聚山梨酯80 100g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)将延胡索提取物、独一味提取物加入配液量20％注射用水中加热搅拌溶解完全，将葡萄糖用配液量20％的注射用水溶解完全，加热煮沸15分钟，聚山梨酯80加20％的无菌注射用水后制成水溶液。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例6 本发明组合物片剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)淀粉40.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g羧甲淀粉钠 12.0g共制备 1000片处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)淀粉40.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g羧甲淀粉钠 12.0g共制备 1000片处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)淀粉40.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g羧甲淀粉钠 12.0g共制备 1000片制备工艺1)将延胡索提取物和独一味提取物粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将延胡索提取物、独一味提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的片重压片。
10)成品全检，包装入库。
实施例7 YD胶囊剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)淀粉40.0g微晶纤维素 100.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g共制备 1000粒处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)淀粉20.0g微晶纤维素 60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g共制备 1000粒处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)淀粉20.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁6.0g共制备 1000粒制备工艺1)将延胡索提取物和独一味提取物粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将延胡索提取物、独一味提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的装量装入胶囊。
10)成品全检，包装入库。
实施例8 YD颗粒剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)糖粉2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 适量共制备 1000包处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)糖粉2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 适量共制备 1000包处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)糖粉2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 适量共制备 1000包制备工艺1)将蔗糖、延胡索提取物和独一味提取物粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将延胡索提取物、独一味提取物与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
4)过20目筛制颗粒。
5)颗粒在60℃的条件下烘干。
6)干颗粒过18目筛整粒。
7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。
8)包装，成品全检，包装入库。
实施例9 YD软胶囊剂的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)大豆油 1000.0g大豆磷脂600g蜂蜡500g共制备 1000粒处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)大豆油 1000.0g大豆磷脂500g蜂蜡500g共制备 1000粒处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)大豆油 1000.0g大豆磷脂300g蜂蜡500g共制备 1000粒制备工艺将处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷，加入延胡索提取物、独一味提取物研匀，压制成软胶囊即可。
实施例10 YD口服液的制备处方处方1延胡索提取物9.3g(相当于延胡索药材1kg)独一味提取物17.0g(相当于独一味药材2kg)尼泊金甲酯 1.0g甜菊甙 20g纯化水 加至10000ml共制备 1000支处方2延胡索提取物18.6g(相当于延胡索药材2kg)独一味提取物42.5g(相当于独一味药材5kg)尼泊金甲酯 1.0g甜菊甙 20g纯化水 加至10000ml共制备 1000支处方3延胡索提取物37.2g(相当于延胡索药材4kg)独一味提取物85.0g(相当于独一味药材10kg)尼泊金甲酯 1.0g甜菊甙 20g纯化水 加至10000ml共制备 1000支制备工艺1)将延胡索提取物、独一味提取物加入配液量50％的纯化水中加热搅拌溶解完全。将尼泊金甲酯和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
2)合并上述溶液，补加纯化水水至全量。
3)过0.8um的微孔滤膜过滤。
4)半成品化验。
5)灌装。成品全检，包装入库。
权利要求
1.一种新的用于妇科和外科疾病的药物组合物，其特征在于其原料药的重量份数为延胡索0.4～10份，独一味1～25份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其原料药的重量份数为延胡索1～4份，独一味2～10份。
3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于其原料药的重量份数为延胡索2份，独一味5份。
4.如权利要求1～3所述的任一药物组合物，其特征在于延胡索、独一味可以用适宜的溶剂和方法通过单提或混提制备得到提取物，总提取物再与药学上可接受的辅料混合制成任一制剂。
5.如权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，总提取物中所含的主要有效成分为延胡索总碱、独一味总黄酮，总提取物中主要有效成分的总含量不低于20％。
6.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于还可以由下列原料药制成延胡索提取物2～300份，独一味提取物5～500份。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于其原料药重量份数为延胡索提取物5～120份，独一味提取物10～200份。
8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于其原料药重量份数为延胡索提取物10～60份，独一味提取物25～100份。
9.如权利要求6～8所述的任一药物组合物，其特征在于，所述的延胡索提取物中延胡索总碱的含量不低于20％，延胡索乙素的含量不低于0.5％；独一味提取物中总黄酮的含量不低于30％，木犀草素的含量不低于0.5％。
10.如权利要求1、2、3、6、7、8所述的任一药物组合物，其特征在于，该药物组合物可以与药学上可接受的辅料混合制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，公开了一种新的药物组合物及其制备方法和用途，包括延胡索、独一味，其重量份数为延胡索0.4～10份，独一味1～25份；该药物组合物也可以延胡索和独一味的单提或混提物投料制得，其重量份数为延胡索提取物2～300份，独一味提取物5～500份。该药物组合物可制成各种临床上或药学上可接受的剂型，优选注射剂和口服制剂；具有活血、止血、行气、止痛、抗菌、抗炎、抗肿瘤、提高免疫功能、利尿利胆等作用。
文档编号A61P15/00GK101028344SQ200610042439
公开日2007年9月5日 申请日期2006年2月27日 优先权日2006年2月27日
发明者黄振华 申请人:黄振华