专利名称：卵铁离子传递蛋白补铁剂及其制备方法和应用的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种铁离子传递蛋白，特别是卵铁离子传递蛋白，具体属于一种卵铁离子传递蛋白补铁剂及其制备方法和应用。
背景技术：
缺铁性贫血(IDA)是最常见的贫血，严重影响人类的健康。世界卫生组织2002年发布的严重影响人类健康的危险因素中第九位即为缺铁。IDA至今仍是世界各国普遍而严重的健康问题，改善铁营养状况，是世界也是我国迫切需要解决的公共卫生问题。
铁营养强化剂的发展经历了三个阶段是以硫酸亚铁为代表的无机铁盐，即第一代强化剂产品。其副作用如恶心、呕吐、腹泻、金属异味等，甚至铁中毒等发生率为10％-15％，甚至大于70％，多数病人难以忍受。
包括乳酸亚铁、葡萄糖酸亚铁等有机酸铁盐的第二代产品。但此类药物依赖胃酸释放铁，所以胃酸缺乏患者吸收较差，个体对于药物的生物利用度差异较大，同时亚铁盐性质较不稳定，生产或储存都很困难，可溶性铁化合物和食品中某些物质结合，引起食品颜色改变，易产生异味，导致补铁效果仍然不太理想。
目前较多使用的是螯合物配体如EDTA，因为EDTA可以形成具有较高稳定性常数的铁螯合物。然而，尽管铁EDTA螯合物可以从肠顺利地吸收入血，但是，高的稳定性产生了与铁EDTA螯合物相关的问题，稳定性过高以至于机体不能轻易的将铁从配体上分离出来。而且，即使金属离子和EDTA配体能够分开，但由于EDTA是很强的螯合剂，该物质也会对身体造成损害。
基于现有的技术，合成一种比现有无机铁化合物、具有更强生物活性的有机铁化合物是非常必要的。而且，合成一种结构稳定、配体对身体小或无副作用，同时能使铁轻易的释放，被组织和器官利用的化合物，更加能够满足广大临床的需求。
据钱忠明主编的《铁代谢—基础与临床》(科学出版社2000年)，转铁蛋白(Transfeerins)是脊椎动物体内Fe3+的运输者，通过与细胞表面转铁蛋白受体的结合，将其携带的铁转入细胞内。转铁蛋白是一大类遗传相关、基本结构和生物功能相似的铁结合蛋白。典型转铁蛋白如在脊椎动物血浆、脊髓液、精液以及鸟类和哺乳动物的神经元中存在的血清转铁蛋白(Serotansferrin)，一般简称转铁蛋白(用Tf表示)，在禽蛋和爬虫蛋蛋白中存在的卵转铁蛋白(Ovotransferrin，用OTf表示，也称卵铁离子传递蛋白)，以及哺乳动物乳汁、胰腺液、泪液和白细胞胞浆内存在的乳转铁蛋白(Loactofeerin用LTf表示)。
从铁的代谢来看，药物口服后，从胃肠道吸收，但在胃(批pH1.6～7)内滞留时间较短，故主要的吸收部位在小肠(十二指肠pH6.0～6.5，空肠pH6.5～7)。作为补铁剂释放的铁离子，如Fe2+必须通过细胞膜才能进入血浆，氧化成Fe3+，与去铁转铁蛋白(apotransgerrin，简称apo-Tf)结合形成铁转铁蛋白(transferrin)，这样，以apoTf为载体的Fe(血浆铁)被分别运送到骨髓以制造血红蛋白及到肝、脾、骨等储铁组织中与去铁铁蛋白结合称为铁蛋白而储存之。排列在肠壁上的细胞象一层混合溶剂(脂质和蛋白质)，细胞膜也是带电荷的大分子类脂体，蛋白质和粘多糖所组成，他们会吸收或排斥离子，使离子不易通过细胞膜。所以，按照药理学和生物化学的观点，Fe2+和Fe3+必须首先为肠溶液中的配体配合，生成具有适当稳定性的非解离形式而具有脂溶性才易透过黏膜进入血浆。进入血浆后，Fe2+和Fe3+必须被释放，Fe2+在血液pH7.4条件下氧化成Fe3+，才能与apoTf结合，根据这种观点，不管是Fe2+还是Fe3+，只要有适当的配体与之结合形成相当稳定的配合物，能有效防止或抑制Fe3+(在肠pH条件下)聚合，又能与apoTf顺利交换铁离子，作为补铁剂即铁代谢中的铁离子给予体的设想是合理可行的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，这种补铁剂不仅使用安全、效果明显，而且补铁剂制备方法简单。
本发明的目的是这样实现的一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，其中含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物，该配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为1∶0.5--2，最佳为1∶2；该配合物在465nm处有最大吸收峰(见图1、图2)。
本发明卵铁离子传递蛋白补铁剂的制备方法，包括如下步骤(1)将禽蛋清经10-40MPa均质后，用1-6倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比0.1％-5％铁盐溶液，在室温下滴定到上述稀释后的蛋清溶液中，均匀搅拌，直至蛋清溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和；
(3)待反应溶液澄清后，经透析或超滤，得到初品；(4)初品经冷冻干燥得到补铁剂原粉，并在4-8℃条件下密封保存，防止吸潮并隔绝氧气。
所述的禽蛋清可以是鸡蛋清、鸭蛋清、鹅蛋清或鹌鹑蛋清。
所述的铁盐，为三价铁盐，可以选自三氯化铁、硫酸铁或柠檬酸铁等。
以本发明中的补铁剂原粉为主要活性成分，可以和医药上可接受的辅料配置成片剂、胶囊、口服颗粒剂等剂型。各种剂型的本发明补铁剂可通过本领域常规方法制备得到。
本发明补铁制剂的原粉以及用原粉进一步制备的各种剂型，可用于制备治疗或辅助治疗铁缺乏症以及与缺铁有关的其它疾病药物中的应用。使用此制剂可以满足生命体对铁的需求。
与现有技术相比，本发明补铁剂中含有Fe3+与卵铁离子传递蛋白合成的蛋白铁配合物，它结构稳定、直接对机体补充三价铁，无刺激性气味，具有在动物体内不沉淀和易吸收的特点，配体不仅对身体无副作用，而且能提高机体的免疫力，促进核酸和蛋白质的代谢，减少机体内氧化导致的副作用，对机体的细胞损伤具有保护作用。本发明补铁剂可用于治疗铁缺乏症，并可辅助治疗与铁有关的其它疾病如缺铁性贫血等。
图1卵铁离子传递蛋白补铁剂的紫外吸收光谱，它在465nm处有最大吸收峰。
图2Fe3+滴定卵铁离子传递蛋白的曲线，该配合物中铁离子与卵铁离子传递蛋白的摩尔比为2∶1。
图3质量比1％三氯化铁溶液滴定鸡蛋清溶液的曲线。
具体实施例方式
以下结合实施例进一步说明本发明。
实施例1卵铁离子传递蛋白补铁剂原粉的制备原料三氯化铁、鸡蛋清制备方法包括如下步骤(1)将鸡蛋清经30MPa均质后，用4倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比1％三氯化铁溶液，在室温下将0.44ml三氯化铁溶液滴加到10ml上述稀释后的蛋清中，均匀搅拌，卵铁离子传递蛋白可使铁离子饱和(见图3)；(3)待反应溶液澄清后，用玻璃纸透析，得到初品，其中铁的含量0.465mg/ml；(4)初品放入冷冻干燥机干燥，制得补铁剂原粉。
实施例2卵铁离子传递蛋白补铁剂动物试验(对贫血模型小鼠红细胞数量(RBC)及肝脏SOD、血清MDA活性的影响)实验材料昆明种小鼠，8周龄，体重(20.0±2.0)g，雌雄各半；本补铁剂含Fe量为3.1mg/ml；红细胞稀释液；超氧化物歧化酶(SOD)测试盒和丙二醛(MDA)测试盒。
实验方法将50只小鼠随机分为阳性对照组(I)、阳性对照组(II)、实验组及阴性对照组等四组，每组雌雄对半。按0.04ml/kg体重计量进行皮下注射2％苯肼，小鼠活动正常无死亡，从而建立小鼠贫血模型。分组、灌服方法及剂量，见表1。注射2d后测定小鼠红细胞含量。10天后，检测了小鼠肝脏SOD和血清MDA的活性。各组上述指标的变化如下(见表2、表3)表1、小鼠分组、饲养、灌服方法与剂量
表2、制剂对贫血模型小鼠RBC的影响(￣±s)×1012/L
注与阴性对照组相比*P＜0.05
表3、制剂对贫血模型小鼠肝脏SOD，血清MDA的影响
注与阴性对照组相比*P＜0.05；与空白对照组相比**P＜0.05结论制剂对贫血模型小鼠补铁后，通过检测RBC，可直接反映出各组的恢复情况。比较实验组与阳性、阴性对照组的RBC含量的差别，反映出实验组RBC恢复情况较好，结果表明补铁制剂对缺铁性贫血有一定的补血作用。通过检测了小鼠肝脏SOD和血清MDA的活性，结果显示制剂有较明显的抗氧化和抗脂质过氧化的作用，可以为其临床用于治疗或辅助治疗缺铁性贫血提供一定依据。
实施例3补铁制剂口服片剂的制备原料配方补铁剂原粉 1重量份维生素B12 0.02～0.05重量份硬脂酸镁0.08～0.2重量份微晶纤维素 0.5～0.6重量份可压性淀粉 0.5～0.6重量份制法将补铁剂原粉、维生素B12、硬脂酸镁、微晶纤维素和可压性淀粉充分混合以后，加入适量水混后，制粒，干燥、整粒压片。
实施例4补铁制剂口服胶囊的制备(用于治疗或辅助治疗单纯性缺铁性贫血)原料配方补铁剂原粉制法将补铁剂原粉作为活性成份与药用载体进一步超滤浓缩，粉碎干燥，加入医学上可接受的润滑剂，按重量比为补铁剂原粉0.01～99.9％与含润滑剂99.9％～0.01％以任意比例制备而成100％的组成，进行80目筛分，制粒，均匀混合后装入胶囊填充，抛光。
实施例5补铁制剂口服液的制备原料配方补铁剂原粉制法(1)按所需体积及设定的浓度称取补铁剂原粉，然后添加注射用水至预配量体积的70-90％；(2)用5％-30％碱性溶液和5％-10％酸性溶液以滴加或喷洒方式调节pH至7.0-9.0，按设定的浓度加水定容并静置72小时，即100毫升含设定值的补铁剂原粉，测渗透压合格；(3)添加适量矫味剂和防腐剂，搅拌均匀后，进行过滤，在无菌条件下，经过滤除菌，分装于无菌、洁净、干燥的玻璃容器内，密封。
实施例6补铁制剂颗粒剂的制备原料配方补铁剂原粉、糊精、蔗糖粉制法将补铁剂原粉、糊精、蔗糖粉分别过120目筛称重备用，取补铁剂原粉、糊精、蔗糖粉充分混合均匀；用蒸馏水制成软材，用18目尼龙筛网制粒，在温度40℃以下干燥，并过12目筛，包装待用。
权利要求
1.一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，特征在于，其中含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物。
2.如权利要求1的补铁剂，特征在于，所述的配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为1∶0.5-2。
3.如权利要求1的补铁剂的制备方法，包括如下步骤(1)将禽蛋清经10-40MPa均质后，用1-6倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比0.1％-5％铁盐溶液，在室温下滴定到上述稀释后的蛋清溶液中，均匀搅拌，直至蛋清溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和；(3)待反应溶液澄清后，经透析或超滤，得到初品；(4)初品经冷冻干燥得到补铁剂原粉，并在4-8℃条件下密封保存。
4.如权利要求3的补铁剂的制备方法，特征在于，所述的禽蛋清是鸡蛋清、鸭蛋清、鹅蛋清或鹌鹑蛋清。
5.如权利要求3的补铁剂的制备方法，特征在于，所述的铁盐是三氯化铁、硫酸铁或柠檬酸铁。
6.如权利要求3的补铁剂的制备方法，特征在于，所述的补铁剂原粉可以和医药上可接受的辅料配置成片剂、胶囊、口服颗粒剂剂型。
7.如权利要求1的补铁剂的用途，特征在于，在制备治疗或辅助治疗铁缺乏症以及与缺铁有关的其它疾病药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及卵铁离子传递蛋白补铁剂，该补铁剂含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物，该配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为1∶0.5－2，该配合物在465nm处有最大吸收峰。其制备方法用生理盐水稀释禽蛋清；将三氯化铁溶液加入其中直至溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和；然后经透析或超滤得到初品；经冷冻干燥后得到补铁剂原粉；进而制得各种制剂产品。这种补铁剂不仅制备方法简单，而且补铁效果明显、使用安全。
文档编号A61P7/00GK1850270SQ20061001276
公开日2006年10月25日 申请日期2006年5月26日 优先权日2006年5月26日
发明者黄登宇, 赵艮贵, 宗艳, 杨斌盛, 张立伟, 宋强, 任瑞霞, 刘超, 卢臣 申请人:山西大学