抗菌酰胺大环类iv的利记博彩app

专利名称：抗菌酰胺大环类iv的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及抗菌酰胺大环类和它们的制备方法，它们在治疗和/或预防疾病中的应用，和它们在制备用于治疗和/或预防疾病、特别是细菌感染的药物中的应用。
WO 03/106480和WO 04/012816描述了双苯霉素B型大环类，其具有抗菌活性并且分别具有酰胺和酯取代基。
US 3,452,136，德国斯图加特大学R.U.Meyer的论文(1991)，德国斯图加特大学V.Leitenberger的论文(1991)，Synthesis(1992)，(10)，1025-30，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1992)，(1)，123-30，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1991)，(10)，744，Synthesis(1991)，(5)，409-13，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1991)，(5)，275-7，J.Antibiot.(1985)，38(11)，1462-8，J.Antibiot.(1985)，38(11)，1453-61描述了天然产物双苯霉素B具有抗菌活性。合成双苯霉素B的一些步骤在Synlett(2003)，4，522-526中描述。
Chirality(1995)，7(4)，181-92，J.Antibiot.(1991)，44(6)，674-7，J.Am.Chem.Soc.(1989)，111(19)，7323-7，J.Am.Chem.Soc.(1989)，111(19)，7328-33，J.Org.Chem.(1987)，52(24)，5435-7，Anal.Biochem.(1987)，165(1)，108-13，J.Org.Chem.(1985)，50(8)，1341-2，J.Antibiot.(1993)，46(3)，C-2，J.Antibiot.(1993)，46(1)，135-40，Synthesis(1992)，(12)，1248-54，Appl.Environ.Microbiol.(1992)，58(12)，3879-8，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1992)，(13)，951-3描述了结构相关的天然产物，双苯霉素A，其在大环上进一步被羟基基团取代。
这些天然产物在它们性质方面不符合对抗菌药物的要求。尽管在市场上可获得具有抗菌活性的结构不同的药剂，抗性的发展是经常可能的。因此，需要用于好的和更有效治疗的新型药剂。
因此，本发明的一个目的是提供新的和备选的化合物，其对于治疗人和动物中的细菌性疾病具有相同或改善的抗菌效果。
已经意外地发现这些天然产物的某些衍生物对双苯霉素-抗性的金黄色葡萄球菌(S.aureus)菌株(RN4220BiR和T17)具有抗菌活性，在所述衍生物中天然产物的羧基被包含碱性基团的酰胺基团替代。
另外，所述衍生物显示对金黄色葡萄球菌野生型菌株和双苯霉素-抗性的金黄色葡萄球菌菌株的改善的自发抗性率。
本发明涉及式(I)的化合物， 其中R7表示下式的基团 其中R1表示氢或羟基，*是与碳原子的键合位点，R2表示氢，甲基或乙基，R3表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，A表示一个键或苯基，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团 其中*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或下式的基团*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，R8和R12彼此独立地表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，
kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且
i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是数字0，1，2或3，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是与碳原子的键合位点，Z1是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，并且h是1，2，3或4的数字，R10表示氨基或羟基，R16和R17彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，
R4b表示氢，氨基或羟基，R5b表示氢，甲基或氨基乙基，R6b表示氢或氨基乙基，或R5b和R6b与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8b和R12b彼此独立地表示*-(CH2)Z1b-OH，*-(CH2)Z2b-NHR13b，*-CONHR14b或*-CH2CONHR15b，其中*是与碳原子的键合位点，R13b表示氢或甲基，并且Z1b和Z2b彼此独立地是1，2或3的数字，并且R14b和R15b彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4g表示氢，氨基或羟基，R5g表示氢，甲基或氨基乙基，R6g表示氢或氨基乙基，kg是0或1的数字，并且lg是1，2，3或4的数字，R9b和R11b彼此独立地表示氢或甲基，R10b表示氨基或羟基，kb是0或1的数字，lb，wb，xb和yb彼此独立地是1，2，3或4的数字，R18和R19彼此独立地表示氢或下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R4e表示氢，氨基或羟基，R5e表示氢，甲基或氨基乙基，R6e表示氢或氨基乙基，或R5e和R6e与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8e和R12e彼此独立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是与碳原子的键合位点，R13e表示氢或甲基，并且Z1e和Z2e彼此独立地是1，2或3的数字，R9e和R11e彼此独立地表示氢或甲基，R10e表示氨基或羟基，ke是0或1的数字，并且le，we，xe和ye彼此独立地是1，2，3或4的数字，其中R18和R19不同时为氢，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，并且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf是0或1的数字，并且lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，d和e彼此独立地是1，2或3的数字，k是0或1的数字，l，w，x和y彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w，x或y等于3时， 彼此独立地可以携带羟基基团，和它们的盐、它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
本发明的化合物是式(I)的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，由式(I)包括的并且以下作为例举性实施方案提及的化合物、和盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，如果由式(I)所涵盖并且在下文提及的化合物还不是盐、溶剂合物、所述盐的溶剂合物。
取决于它们的结构，本发明的化合物以立体异构型(对映异构体，非对映异构体)存在。因此，本发明涉及对映异构体或非对映异构体及其各自的混合物。从对映异构体和/或非对映异构体的这些混合物中，立体异构纯的组分可以以已知方法分离出来是可能的，所述方法如在手性相上的色谱分离或使用手性胺或手性酸的结晶。
取决于化合物的结构，本发明还涉及化合物的互变异构体。
优选用于本发明的目的盐是本发明的化合物的生理可接受的盐。
化合物(I)的生理可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸、三氟乙酸和苯甲酸的盐。
化合物(I)的生理可接受的盐还包括常用的碱的盐，诸如，作为实例，并且优选地碱金属盐(例如，钠和钾盐)，碱土金属盐(例如钙和镁盐)和衍生自氨或具有1-16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺诸如作为实例，并且优选地，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、二氢枞胺(Dihydroabietylamine)、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和甲基哌啶。
对于本发明的目的而言，溶剂合物指通过与溶剂分子的配位作用形成固体或液体状态的复合物的化合物的那些形式。水合物是溶剂合物的特殊形式，其中与水发生配位作用。
碳原子上的符号#是指化合物相对于该碳原子上的构型是对映异构纯的形式，在本发明上下文是指对映异构体超过多于90％(＞90％ee)。
在R3可以表示的各式基团中，旁边存在*的线的端点不表示碳原子或CH2基团，而是与R3键合的氮原子的键的一部分。
在R7可以表示的各式基团中，旁边存在*的线的端点不表示碳原子或CH2基团，而是与R7键合的氮原子的键的一部分。
在本发明上下文中优选式(I)的化合物，其中R7表示下式的基团 其中R1表示氢或羟基，*是与碳原子的键合位点，R2表示氢，甲基或乙基，R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，A表示一个键或苯基，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团
其中*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或下式的基团*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，R8和R12彼此独立地表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，
其中*是与碳原子键合的点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且R14a和R15a彼此独立地是下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，
ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是0，1，2或3的数字，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是与碳原子的键合位点，Z1是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，并且h是1，2，3或4的数字，R10表示氨基或羟基，R16和R17彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4b表示氢，氨基或羟基，R5b表示氢，甲基或氨基乙基，R6b表示氢或氨基乙基，或R5b和R6b与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8b和R12b彼此独立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是与碳原子的键合位点，R13b表示氢或甲基，并且Z1b和Z2b彼此独立地是1，2或3的数字，R9b和R11b彼此独立地表示氢或甲基，R10b表示氨基或羟基，kb是0或1的数字，lb，wb，xb和yb彼此独立地是1，2，3或4的数字，R18和R19彼此独立地表示氢或下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R4e表示氢，氨基或羟基，R5e表示氢，甲基或氨基乙基，R6e表示氢或氨基乙基，或R5e和R6e与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8e和R12e彼此独立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是与碳原子的键合位点，R13e表示氢或甲基，并且Z1e和Z2e彼此独立地是1，2或3的数字，R9e和R11e彼此独立地表示氢或甲基，R10e表示氨基或羟基，ke是0或1的数字，并且le，we，xe和ye彼此独立地是1，2，3或4的数字，其中R18和R19不同时为氢，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，并且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf是0或1的数字，并且lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，d和e彼此独立地是1，2或3的数字，k是0或1的数字，l，w，x和y彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w，x或y等于3时， 彼此独立地可以携带羟基基团，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中还优选式(Ia)的化合物， 其中R1表示氢或羟基，R2表示氢，甲基或乙基，R3如上定义，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中还优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团 其中
*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或下式的基团*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，R8表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，
并且R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，
R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是数字0，1，2或3，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH其中*是与碳原子的键合位点，Z1是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，并且
h是1，2，3或4的数字，R10表示氨基或羟基，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，并且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf是0或1的数字，并且
lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，k是0或1的数字，l，w和x 彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w或x等于3时， 彼此独立地可以携带羟基基团，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中特别优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团 其中*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或下式的基团*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，k是0或1的数字，l是1，2，3或4的数字，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中还特别优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R8表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且
R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是数字0，1，2或3，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是与碳原子的键合位点，Z1是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，并且h是1，2，3或4的数字，
R10表示氨基或羟基，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，并且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf是0或1的数字，并且lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，
w和x彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w或x等于3时 彼此独立地可以携带羟基基团，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中还优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R12表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，
R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，
并且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，y是1，2，3或4的数字，当y等于3时 可以携带羟基基团，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
在本发明中还优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，A表示一个键或苯基，R16和R17彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4b表示氢，氨基或羟基，R5b表示氢，甲基或氨基乙基，R6b表示氢或氨基乙基，或
R5b和R6b与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8b和R12b彼此独立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是与碳原子的键合位点，R13b表示氢或甲基，并且Z1b和Z2b彼此独立地是1，2或3的数字，R9b和R11b彼此独立地表示氢或甲基，R10b表示氨基或羟基，kb是0或1的数字，lb，wb，xb和yb彼此独立地是1，2，3或4的数字，d是1，2或3的数字，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
这些之中，特别优选的化合物是那些化合物，其中R3表示下式的基团 特别是下式的基团 在本发明中还优选式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基团
其中*是与氮原子的键合位点，R18和R19彼此独立地表示氢或下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4e表示氢，氨基或羟基，R5e表示氢，甲基或氨基乙基，R6e表示氢或氨基乙基，或R5e和R6e与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8e和R12e彼此独立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是与碳原子的键合位点，R13e表示氢或甲基，并且Z1e和Z2e彼此独立地是1，2或3的数字，R9e和R11e彼此独立地表示氢或甲基，R10e表示氨基或羟基，ke是0或1的数字，并且le，we，xe和ye彼此独立地是1，2，3或4的数字，其中R18和R19不同时为氢，e是1，2或3的数字，和它们的盐，它们的溶剂合物和它们的盐的溶剂合物。
本发明还涉及制备式(I)化合物或它们的盐、它们的溶剂合物或它们的盐的溶剂合物的方法，其中按照该方法[A]式(II)的化合物， 其中R2和R7具有以上所述含义，和boc是叔丁氧羰基，在两步方法中首先在一种或多种脱水剂的存在下与式(III)的化合物反应，H2NR3(III)，其中R3具有以上所述含义，并随后与酸反应和/或通过氢解反应，或[B]式(IV)的化合物， 其中R2和R7具有以上所述含义，和Z是苄氧羰基，在两步方法中首先在一种或多种脱水剂的存在下与式(III)的化合物反应，H2NR3(III)，其中R3具有以上所述含义，并随后与酸反应和/或通过氢解反应。
所述盐的游离碱例如可以通过在反相柱上的色谱法而获得，所述色谱法使用乙腈-水梯度并加入碱，特别是通过使用RP18 Phenomenex LunaC18(2)柱和作为碱的二乙胺。
本发明还涉及制备如权利要求1中要求保护的式(I)化合物或它们的溶剂合物的方法，其中将所述化合物的盐或所述化合物的盐的溶剂合物在加入碱的情况下通过色谱法转化为所述化合物。
当适当时，在与式(III)化合物的反应过程中将R1上的羟基基团用叔丁基二甲基甲硅烷基基团保护，该叔丁基二甲基甲硅烷基在第二个反应步骤中去除。
将式(III)化合物的基团R3中的反应性官能度引入已经保护的合成，优选酸不稳定的保护基(例如boc)。在已经反应获得式(I)化合物后，可以通过脱保护反应去除保护基。这可以通过保护基化学的标准方法进行。优选在酸性条件下的脱保护反应或通过氢解。
在方法[A]和[B]的第一步中的反应通常在惰性溶剂中、当适当时在碱的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内并且在大气压力下进行。
就此而论，适合的脱水剂的实例包括碳二亚胺诸如N，N′-二乙基-，N，N，′-二丙基-，N，N′-二异丙基-，N，N′-二环己基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基异丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，N-环己基碳二亚胺-N‘-丙基氧基甲基聚苯乙烯(PS-碳二亚胺)或羰基化合物诸如羰二咪唑，或1，2-噁唑鎓(oxazolium)化合物诸如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-硫酸盐或2-叔-丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰基氨基化合物诸如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉，或丙烷膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或二(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯，或苯并三唑基氧基-三-(二甲基氨基)六氟膦酸鏻，或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)，2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TPTU)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，或1-羟基苯并三唑(HOBt)，或苯并三唑-1-基氧基三-(二甲基氨基)六氟膦酸鏻(BOP)，或其混合物，或其与碱的混合物。
碱的实例包括碱金属碳酸盐，诸如，例如，碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢钠或碳酸氢钾，或有机碱诸如三烷基胺，例如，三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶或二异丙基乙胺。
与HATU的缩合优选在碱(特别是二异丙基乙胺)的存在下、或与EDC和HOBt在碱(特别是三乙胺)的存在下进行。
惰性溶剂的实例包括卤代烃如二氯甲烷或三氯甲烷，烃如苯，或硝基甲烷，二噁烷，二甲基甲酰胺或乙腈。同样可以使用溶剂的混合物。特别优选二甲基甲酰胺。
在方法[A]和[B]的第二步与酸的反应优选在0℃至40℃的温度范围内、在大气压力下进行。
就此而论，适当的酸包括二噁烷中的氯化氢，乙酸中的溴化氢或二氯甲烷中的三氟乙酸。
在方法[B]的第二步中的氢解通常在溶剂中在氢和活性炭上的钯的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压力下进行。
溶剂的实例包括醇如甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇，与水和冰醋酸混合，优选与乙醇、水和冰醋酸的混合物。
式(III)的化合物是已知的或者可以类似于已知方法制备。
式(II)的化合物是已知的或者可以通过将式(V)的化合物与二(叔丁基)二碳酸酯在碱的存在下反应来制备， 其中R2和R7具有以上所述含义。
反应通常在溶剂中、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下进行。
碱的实例包括碱金属氢氧化物如氢氧化钠或氢氧化钾，或碱金属碳酸盐如碳酸铯、碳酸钠或碳酸钾，或其它碱如DBU、三乙胺或二异丙基乙胺，优选氢氧化钠或碳酸钠。
溶剂的实例包括卤代烃如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，醇如甲醇、乙醇或异丙醇，或水。
反应优选与水中的氢氧化钠或甲醇中的碳酸钠进行。
式(V)的化合物是已知的或者可以如下制备将式(VI)的化合物 其中R2和R7具有以上所述含义，并且R26表示苄基，甲基或乙基，与酸或通过氢解反应，如关于方法[B]的第二步所述，当适当时随后与碱反应以水解甲酯或乙酯。
该水解可以例如如关于将式(VI)化合物反应以获得式(IV)化合物所述来进行。
式(IV)的化合物是已知的或者可以通过水解式(VI)化合物中的苄酯、甲酯或乙酯来制备。
该反应通常在溶剂中在碱的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下进行。
碱的实例包括碱金属氢氧化物如氢氧化锂、钠或钾，优选氢氧化锂。
溶剂的实例包括卤代烃如二氯甲烷或三氯甲烷，醚类，如四氢呋喃或二噁烷，或醇类，如甲醇、乙醇或异丙醇，或二甲基甲酰胺。同样可以使用溶剂的混合物或溶剂与水的混合物。四氢呋喃或甲醇和水的混合物是特别优选的。
式(VI)的化合物是已知的或者可以如下制备将式(VII)的化合物
其中R2，R7和R26具有以上所述含义，在第一步中与酸反应，如关于方法[A]和[B]的第二步所述，和在第二步中与碱反应。
在第二步中与碱的反应通常在溶剂中、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下进行。
碱的实例包括碱金属氢氧化物如氢氧化钠或氢氧化钾，或碱金属碳酸盐如碳酸铯、碳酸钠或碳酸钾，或其它碱如DBU、三乙胺或二异丙基乙胺，优选三乙胺。
溶剂的实例包括卤代烃如氯仿、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，或四氢呋喃，或溶剂的混合物，优选二氯甲烷或四氢呋喃。
式(VII)的化合物是已知的或者可以如下制备式(VIII)的化合物 其中R2，R7和R26具有以上所述含义，与五氟苯酚在脱水剂的存在下反应，如关于方法[A]和[B]的第一步所述。
该反应优选与DMAP和EDC在二氯甲烷中、在-40℃至40℃的温度范围内在大气压下进行。
式(VIII)化合物是已知的或者可以如下制备式(IX)的化合物 其中R2，R7和R26具有以上所述含义，与氟化物、特别是与氟化四丁铵反应。
该反应通常在溶剂中、优选在-10℃至30℃的温度范围内在大气压下进行。
惰性溶剂的实例包括卤代烃如二氯甲烷，或烃如苯或甲苯，或醚类如四氢呋喃或二噁烷，或二甲基甲酰胺。同样可以使用溶剂的混合物。四氢呋喃和二甲基甲酰胺是优选的溶剂。
式(IX)的化合物是已知的或者可以如下制备式(X)的化合物 其中R2和R26具有以上所述含义，与式(XI)的化合物在脱水剂的存在下反应，如关于方法[A]和[B]的第一步所述，
其中R7具有上述含义。
式(X)化合物是已知的或者可以类似于实施例部分所述方法制备。
式(XI)化合物是已知的或者可以类似于已知方法制备。
本发明的化合物显示不能被预测的有价值的药理学和药物动力学作用范围。
它们因此适用于用作治疗和/或预防人和动物中疾病的药物。
由于它们的药理学性质，本发明的化合物可以单独或者与其它活性成分组合用于治疗和/或预防感染性疾病，特别是细菌感染。
例如，可以治疗和/或预防由下列病原体或下列病原体的混合物导致的局部和/或系统疾病革兰氏阳性球菌例如葡萄球菌(Staphylococci)(金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis))和链球菌属(streptococci)(无乳链球菌(S.agalactiae)、粪链球菌(Strept.faecalis)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)、化脓链球菌(S.pyogenes))；革兰氏阴性球菌(淋病奈瑟氏菌(neisseriagonorrhoeae))和革兰氏阴性杆菌诸如肠杆菌科(enterobacteriaceae)，例如大肠杆菌(Escherichia coli)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)(弗氏柠檬酸杆菌(Citrob.freundii)、Citrob.divernis)、沙门氏菌属(Salmonella)和志贺氏杆菌属(Shigella)；还有克雷伯氏菌(klebsiellas)(肺炎克雷伯氏菌(Klebs.pneumoniae)、产酸克雷伯氏菌(Klebs.oxytocy))、肠杆菌属(Enterobacter)(产气肠杆菌(E.aerogenes)、成团肠杆菌(E.agglomerans)、哈夫尼菌属(Hafnia)、沙雷氏菌属(Serratia)(粘质沙雷氏菌(Serr.marcescens))、变形菌属(Proteus)(奇异变形菌(Pr.mirabilis)、Pr.rettgeri，普通变形菌(Pr.vulgaris))、普罗威登斯菌属(Providencia)、耶尔森氏菌属(Yersinia)，和不动杆菌属(Acinetobacter)。抗菌范围另外包括假单胞菌属(Pseudomonas)(铜绿假单胞菌(Ps.Aeruginosa)，(Ps.Maltophilia))和严格厌氧菌如脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)，消化球菌属(Peptococcus)的代表，消化链球菌属(Peptostreptococcus)，和梭状芽胞杆菌属(Clostridium)；还有枝原菌属(mycoplasmas)(肺炎枝原体(M.pneumoniae)，人型枝原体(M.hominis)，M.urealyticum)和分枝杆菌属(Mycobacteria)，例如结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)。
上述病原体列表仅应被解释为是例举性的而绝非限制性的。可以提到的由所述病原体或混合感染所引起并且可以通过本发明的制剂(可以局部使用)预防、改善或治愈的疾病例如有在人中的感染性疾病，如例如，脓毒性感染，骨和关节感染，皮肤感染，手术后伤口感染，脓肿，蜂窝织炎，伤口感染，感染的烧伤，烧伤创伤，口部区域的感染，牙科手术后的感染，脓毒性关节炎，乳腺炎，扁桃体炎，生殖器感染和眼部感染。
除人之外，还可以在其它物种中治疗细菌感染。可以提到的实例是猪大肠杆菌性腹泻、肠原性毒血症、败血症、痢疾、沙门氏菌病、子宫炎-乳腺炎-乳泌缺乏综合征(agalactiae syndrome)、乳腺炎；反刍动物(牛、绵羊、山羊)腹泻、败血症、支气管性肺炎、沙门氏菌病、巴斯德菌病、支原体病、生殖器感染；马支气管性肺炎、关节病、分娩的和分娩后感染、沙门氏菌病；狗和猫支气管肺炎、腹泻、皮炎、耳炎、尿路感染、前列腺炎；家禽(小鸡、火鸡、鹌鹑、鸽子、观赏鸟类及其它)支原体病、大肠杆菌感染、慢性呼吸道疾病、沙门氏菌病、巴斯德菌病、鹦鹉热。
它同样可以在饲养和管理生产性和观赏用鱼类中治疗细菌病，在该情形中所述抗菌谱从而在上述病原体上还延伸到病原体诸如，例如，巴斯德菌属(Pasteurella)、布鲁氏菌属(Brucella)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、李斯特菌属(Listeria)、丹毒丝菌属(Erysipelothris)、棒状杆菌(Corynebacteria)、疏螺旋体属(Borellia)、密螺旋体(Treponema)、诺卡氏菌属(Nocardia)、立克次氏体(Rickettsia)、耶尔森氏菌属(Yersinia)。
本发明还涉及本发明的化合物在治疗和/或预防疾病、优选细菌感染性疾病、特别是细菌感染中的应用。
本发明还涉及本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病，特别是上述疾病的应用。
本发明还涉及本发明的化合物用于生产治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的药物的应用。
本发明还涉及利用抗菌有效量的本发明化合物治疗和/或预防疾病的方法，所述疾病特别是上述疾病。
本发明的化合物可以全身和/或局部起作用。为此目的，它们可以以适合的方式进行施用，所述方式诸如，例如通过口服的、肠胃外的、经肺的、经鼻的、舌下的、舌的、颊的、直肠的、皮肤的、透皮的、结膜的或耳的途径，或作为植入物或支架。
本发明的化合物可以以适合于这些给药途径的给药形式进行施用。
适合于口服给药的是这样的给药形式，其按照现有技术发挥功能并且快速地和/或以改进的方式递送本发明的化合物，并且其包括晶体形式和/或非晶形形式和/或溶解形式的本发明的化合物，诸如，例如片剂(未包衣的或包衣片剂，例如具有这样的包衣，所述包衣对胃液具有抗性或是不溶的或延缓溶解并且控制本发明的化合物的释放)，快速在口腔中崩解的片剂或薄膜/糯米纸囊剂，薄膜/冻干物(lyophilisates)，胶囊(例如硬或软明胶胶囊)，糖衣片剂，颗粒剂，丸剂，粉末，乳剂，混悬剂，气溶胶或溶液。
肠胃外给药的发生可以避免吸收步骤(例如，静脉内、动脉内、心脏内、脊髓内或腰椎内)，或包含吸收(例如，肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内)。适合于肠胃外给药的给药形式特别是，用于注射和输注的，以溶液、混悬液、乳剂、冻干物或无菌粉末存在的制剂。
适合于其它给药途径的实例是用于吸入的药物形式(特别是粉末吸气器，喷雾器)，滴鼻剂，溶液，喷雾剂；可以通过舌、舌下或颊施用的片剂、薄膜/糯米纸囊剂或胶囊；栓剂，用于眼和耳的制剂，阴道胶囊，水性混悬液(洗剂，振摇混合物)，亲脂性混悬液，软膏剂，乳膏剂，透皮治疗系统(如，例如贴片)，乳，糊剂，泡沫，扑粉，植入物或支架。
可以将本发明的化合物转化成为列出的给药形式。其可以以本身已知的方式通过混合以惰性、非毒性的药用的赋形剂来进行。这些赋形剂包括，特别是，载体(例如微晶纤维素，乳糖，甘露醇)，溶剂(例如液体聚乙二醇)，乳化剂和分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠，聚氧基失水山梨糖醇油酸酯)，粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)，合成的和天然的聚合物(例如白蛋白)，稳定剂(例如抗氧化剂诸如抗坏血酸)，颜料(例如无机颜料诸如氧化铁)或味道和/或气味矫正剂本发明还涉及这样的药物和将其用于前述目的应用，所述药物包括至少一种本发明的化合物，以及通常地一种或多种惰性、非毒性药用的赋形剂。
对于肠胃外给药，每24小时施用约5至250mg/kg体重的量从而获得有效结果通常证明是有利的。口服给药的量约为每24小时5至100mg/kg体重。
然而，可能需要的是，当需要时偏离提及的量，其具体地作为体重、给药途径、对活性成分的个体反应、制剂性质和给药发生过程中的时间或间隔的函数。因此，在某些情形中以少于前述最少量进行的施用可以是充分的，而在其它情形中，必须超过提及的上限。在更大量的施用的情形中，可以推荐将这些分成一天内的多个单独剂量。
在下述测试和实施例中的百分比数据是重量百分比，除非另外指出；份是重量份。液体/液体溶液的溶剂比率、稀释比率和浓度数据在每种情形中是基于体积。
A.实施例所用缩略语abs.绝对的aq. 含水的Bn 苄基boc 叔丁氧羰基CDCl3氯仿CH 环己烷d 双峰(在1H NMR中)dd 多个双峰中的双峰(在1H NMR中)DCC 二环己基碳二亚胺DIC 二异丙基碳二亚胺DIEA二异丙基乙胺(Hünig’s碱)DMSO二甲亚砜
DMAP 4-N，N-二甲基氨基吡啶DMF二甲基甲酰胺EA 乙酸乙酯(乙酸乙酯)EDCN’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺×HClESI电喷雾电离(在MS中)Fmoc 9-芴基甲氧羰基HATU 邻-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N‘，N‘-四甲基脲鎓六氟磷酸盐HBTU O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐HOBt 1-羟基-1H-苯并三唑×H2Oh 小时HPLC 高压，高效液相色谱法LC-MS 偶联液相色谱-质谱法m 多重峰(在1H NMR中)min分钟MS 质谱法NMR核磁共振光谱法MTBE 甲基叔丁基醚Pd/C 钯/碳q 四重峰(在1H NMR中)Rf保留指数(在TLC中)RP 反相(在HPLC中)RT 室温Rt保留时间(在HPLC中)s 单峰(在1H NMR中)sat饱和的t 三重峰(在1H NMR中)TBS叔丁基二甲基甲硅烷基TFA三氟乙酸THF四氢呋喃TLC薄层色谱法
TMSE2-(三甲基甲硅烷基)乙基TPTU2-(2-氧代-1(2H)-吡啶基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓四氟硼酸盐Z 苄氧羰基LC-MS和HPLC方法方法1(HPLC)仪器HP1100，具有DAD检测；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脱剂A5ml的高氯酸/l水，洗脱剂B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，6.5min 90％B；流速0.75ml/min；炉30℃；UV检测210nm.
方法2(LC-MS)仪器Micromass Platform LCZ；柱Symmetry C18，50mm×2.1mm，3.5μm；温度40℃；流速0.5ml/min；洗脱剂A乙腈+0.1％甲酸，洗脱剂B水+0.1％甲酸，梯度0.0min 10％A→4min90％A→6min 90％A.
方法3(LC-MS)仪器Waters Alliance 2790 LC；柱Symmetry C18，50mm×2.1mm，3.5μm；洗脱剂A水+0.1％甲酸，洗脱剂B乙腈+0.1％甲酸；梯度0.0min 5％B→5.0min 10％B→6.0min 10％B；温度50℃；流速1.0ml/min；UV检测210nm.
方法4(LC-MS)ZMD Waters；柱Inertsil ODS3 50mm×2.1mm，3μm；温度40℃；流速0.5ml/min；洗脱剂A水+0.05％甲酸，洗脱剂B乙腈+0.05％甲酸，梯度0.0min 5％B→12min→100％B→15min100％B.
方法5(LC-MS)MAT 900，Finnigan MAT，Bremen；柱X-terra 50mm×2.1mm，2.5μm；温度25℃；流速0.5ml/min；洗脱剂A水+0.01％甲酸，洗脱剂B乙腈+0.01％甲酸，梯度0.0min 10％B→15min→90％B→30min 90％B.
方法6(LC-MS)TSQ 7000，Finnigan MAT，Bremen；柱Inertsil ODS350mm×2.1mm，3μm；温度25℃；流速0.5ml/min；洗脱剂A水+0.05％甲酸，洗脱剂B乙腈+0.05％甲酸，梯度0.0min 15％B→15min→100％B→30min 100％B.
方法7(LC-MS)7 Tesla Apex II，具有外部电喷雾离子源，BrukerDaltronics；柱X-terra C18 50mm×2.1mm，2.5μm；温度25℃；流速0.5ml/min；洗脱剂A水+0.1％甲酸，洗脱剂B乙腈+0.1％甲酸，梯度0.0min 5％B→13min→100％B→15min 100％B.
方法8(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号WatersAlliance 2795；柱Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50×4.6mm；洗脱剂A水+500μl的50％ 甲酸/l；洗脱剂B乙腈+500μl的50％ 甲酸/l；梯度0.0min 10％B→2.0min 95％B→4.0min 95％B；炉35℃；流速0.0min 1.0ml/min→2.0min 3.0ml/min→4.0min 3.0ml/min；UV检测210nm.
方法9(LC-MS)仪器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Grom-SIL120 ODS-4 HE，50mm×2.0mm，3μm；洗脱剂A1l水+1ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；炉55℃；流速0.8ml/min；UV检测210nm.
方法10(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号WatersAlliance 2795；柱Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50×4.6mm；洗脱剂A水+500μl的50％ 甲酸/l；洗脱剂B乙腈+500μl的50％ 甲酸/l；梯度0.0min 10％B→3.0min 95％B→4.0min 95％B；炉35℃；流速0.0min 1.0ml/min→3.0min 3.0ml/min→4.0min 3.0ml/min；UV检测210nm.
方法11(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号WatersAlliance 2790；柱Uptisphere C 18，50mm×2.0mm，3.0μm；洗脱剂B乙腈+0.05％甲酸，洗脱剂A水+0.05％甲酸；梯度0.0min 5％B→2.0min 40％B→4.5min 90％B→5.5min 90％B；炉45℃；流速0.0min0.75ml/min→4.5min 0.75ml/min→5.5min 1.25ml/min；UV检测210nm.
方法12(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号WatersAlliance 2795；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20×4mm；洗脱剂A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A(流速1ml/min)→2.5min 30％A(流速2ml/min)→3.0min 5％A(流速2ml/min)→4.5min 5％A(流速2ml/min)；炉50℃；UV检测210nm.
方法13(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号HP1100系列；UV DAD；柱Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50×2mm，3.0μm；洗脱剂A水+500μl的50％甲酸/l，洗脱剂B乙腈+500μl的50％甲酸/l；梯度0.0min 70％B→4.5min 90％B；炉50℃，流速0.8ml/min，UV检测210nm.
方法14(LC-MS)仪器Micromass Quattro LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Grom-SIL120 ODS-4 HE，50mm×2.0mm，3μm；洗脱剂A1l水+1ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；炉55℃；流速0.8ml/min；UV检测208-400nm.
方法15(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号WatersAlliance 2790；柱Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50×2mm，3.0μm；洗脱剂A水+500μl的50％甲酸；洗脱剂B乙腈+500μl的50％甲酸/l；梯度0.0min 5％B→2.0min 40％B→4.5min 90％B→5.5min 90％B；炉45℃；流速0.0min 0.75ml/min→4.5min 0.75ml 5.5min→5.5min 1.25ml；UV检测210nm.
方法16(HPLC)仪器HP1100，具有DAD检测；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脱剂A5ml的高氯酸/l水，洗脱剂B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，15min 90％B；流速0.75ml/min；炉30℃；UV检测210nm.
方法17(LC-MS)MS仪器型号Micromass ZQ；HPLC仪器型号HP1100系列；UV DAD；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury20mm×4mm；洗脱剂A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min5％A→4.5min 5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；炉50℃；UV检测210nm.
方法18(LC-MS)仪器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；洗脱剂A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min 5％A→4.5min5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；炉50℃；UV检测210nm.
方法19(LC-MS)仪器Micromass Quattro LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；洗脱剂A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min 5％A→4.5min 5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；炉50℃；UV检测208-400nm.
方法20(LC-MS)仪器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱ThermoHypersil-Keystone HyPurity Aquastar，50mm×2.1mm，3μm；洗脱剂A1l水+1ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；炉55℃；流速0.8ml/min；UV检测210nm.
方法21(制备HPLC/RP-HPLC)柱RP18 Phenomenex Luna C18(2)(New柱)，250mm×21.2mm，5μm(Phenomenex，Aschaffenburg，Germany)，洗脱剂乙腈-水梯度with addition的0.2％di乙基amine.
方法22(HPLC)仪器HP1100，具有DAD检测；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脱剂A5ml的高氯酸/l水，洗脱剂B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，9min 90％B；流速0.75ml/min；炉30℃；UV检测210nm.
方法23(LC-MS)仪器Micromass Platform LCZ，具有HPLC agilent系列1100；柱Thermo Hypersil GOLD-3μ 20×4mm；洗脱剂A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→5.5min10％A；炉50℃；流速0.8ml/min；UV检测210nm.
实施例的化学合成起始化合物的合成使用(-)-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸[(-)-6A]作为实例，合成取代的苯丙氨酸衍生物 使用5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酸(14A)作为实例，合成保护的羟基鸟氨酸衍生物 使用2-(苄氧基)-N-[(苄氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸甲酯](56A)作为实例，合成取代的苯丙氨酸衍生物
使用2(S)-三甲基硅烷基乙基2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4′-双-苄氧基-3′-(2(S)-苄氧羰基-2(S)-叔丁氧羰基氨基乙基)联苯基-3-基]丙酸酯(12A)作为实例，合成保护的联苯基二氨基酸 联苯基二氨基酸的环化
起始化合物实施例1A
2-羟基-5-碘苯甲醛 在热干燥烧瓶中在氩气下将250g(1.54mol)的氯化碘在600ml的无水二氯甲烷中的溶液在2小时的期间内滴加到188g(1.54mol)的水杨醛在1l的无水二氯甲烷中的溶液中。在RT下搅拌3天后，在剧烈搅拌下加入饱和亚硫酸钠水溶液。分离有机相，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤一次，通过硫酸钠干燥。蒸发溶剂，从乙酸乙酯中再结晶残余物。获得216g(理论值的57％)的产物。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝246(M-H)-.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝6.7(d，1H)，7.77(dd，1H)，7.85(d，1H)，9.83(s，1H)，10.95(s，1H).
实施例2A2-苄氧基-5-碘苯甲醛 将67.2g(0.48mol)的碳酸钾加至100g(0.40mol)的2-羟基-5-碘苯甲醛(实施例1A)在1.5l的二甲基甲酰胺中的溶液，几分钟后，加入51ml(0.44mol)的苄基氯。在120℃下回流搅拌反应混合物24小时。在RT下搅拌另外24小时和加入1.5l水后，有固体结晶出来。通过抽吸过滤收集沉淀，用水洗涤两次并真空干燥。从230ml的乙醇中再结晶所述固体。获得122.9g(理论值的90％)的产物。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝338(M+H)+.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝5.18(s，2H)，6.84(d，1H)，7.33-7.45(m，5H)，7.78(dd，1H)，8.12(d，1H)，10.4(s，1H).
实施例3A(2-苄氧基-5-碘苯基)甲醇 将100ml的二异丁基铵氢化物在二氯甲烷中的1M溶液加入冷却至0℃的33.98g(100.5mmol)的2-苄氧基-5-碘苯甲醛(实施例2A)在200ml的二氯甲烷中的溶液。在0℃下搅拌2小时后，在冷却下加入饱和酒石酸钠钾溶液(高放热反应)，将反应混合物搅拌另外2小时。在分离各相后，用水洗涤有机相两次并用饱和氯化钠水溶液洗涤一次，通过硫酸钠干燥。真空蒸发溶剂。获得31.8g(理论值的93％)的产物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝2.17(t，1H)，4.68(d，2H)，5.1(s，2H)，6.72(d，1H)，7.32-7.42(m，5H)，7.54(dd，1H)，7.63(d，1H).
实施例4A1-苄氧基-2-溴甲基-4-碘苯 在40℃下将3.3ml(35mmol)的三溴化磷滴加到35g(103mmol)的(2-苄氧基-5-碘苯基)甲醇(实施例3A)在350ml的甲苯中的溶液。在15分钟期间内将反应混合物的温度升至100℃，在该温度下搅拌反应混合物另外10分钟。在冷却后，分离两相。用蒸馏水洗涤有机相两次并用饱和氯化钠水溶液洗涤一次。通过硫酸钠干燥有机相并蒸发。产率达到41g(理论值的99％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝4.45(s，2H)，5.06(s，2H)，7.30(m，8H).
实施例5A2-(2-苄氧基-5-碘苄基)-2-叔丁氧羰基氨基丙二酸二乙酯 将41g(101.7mmol)的1-苄氧基-2-溴甲基-4-碘苯(实施例4A)加至28g(101.7mmol)的2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙二酸二乙酯和7.9ml(101.7mmol)的乙氧钠在300ml的乙醇中的溶液。在RT下搅拌3小时后，通过抽吸过滤收集沉淀的产物。在真空干燥后，分离55g(理论值的90％)的产物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.12(t，6H)，1.46(s，9H)，3.68(s，2H)，3.8-3.9(m，2H)，4.15-4.25(m，2H)，5.0(s，2H)，5.7(s，1H)，6.58(d，1H)，7.28-7.4(m，6H)，7.4(dd，1H).
实施例6A(+/-)-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2-叔丁氧羰基氨基丙酸 将400ml的1N氢氧化钠溶液加至58g(97mmol)的2-(2-苄氧基-5-碘苄基)-2-叔丁氧羰基氨基丙二酸二乙酯(实施例5A)在800ml的乙醇和水(7∶3)的混合物中的悬浮液。在回流下搅拌3小时后和冷却至室温后，用浓盐酸将反应混合物的pH调节至约pH2。蒸发反应混合物。将残余物置入MTBE和水中。用MTBE萃取水相三次。通过硫酸钠干燥合并的有机相，过滤并浓缩。在真空干燥后，获得47g(理论值的97％)的产物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.32(s，9H)，2.68(dd，1H)，3.18(dd，1H)，4.25(m，1H)，5.15(s，2H)，6.88(d，1H)，7.08(d，1H)，7.30-7.40(m，3H)，7.45-7.55(m，3H).
实施例(-)-6A3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸 将来自实施例6A[(+/-)-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸]的外消旋物在手性固定硅胶相上分离，其基于来自聚(N-异丁烯酰基-L-亮氨酸二环丙基甲酰胺)的选择物(selector)，使用异己烷/乙酸乙酯混合物作为洗脱剂。首先洗脱的对映体(98.9％ee)是在二氯甲烷中右旋的([α]D21+3.0°，c＝0.54，二氯甲烷)和对应于(R)对映体实施例(+)-6A，如通过单晶X-射线结构分析所测定。第二种左旋对映体实施例(-)-6A，即(S)对映体的纯度＞99％ee。
实施例7A3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸苄基酯 在氩气下，将10g(20.11mmol)的(-)-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸(实施例(-)-6A)溶解在200ml的乙腈中。向其中加入246mg(2.01mmol)的4-二甲基氨基吡啶和4.16ml(40.22mmol)的苄基醇。将混合物冷却至-10℃，加入4.63g(24.13mmol)的EDC。使得混合物缓慢达到RT并搅拌过夜。在约16小时后，混合物在旋转式蒸发仪上真空浓缩，通过硅胶柱色谱法(流动相二氯甲烷)纯化残余物。产率10.65g(理论值的88％)。
HPLC(方法1)Rt＝6.03min；LC-MS(方法3)Rt＝4.70minMS(DCI)m/z＝605(M+NH4)+.
1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝1.38(s，9H)，2.97(dd，1H)，3.12(dd，1H)，4.50-4.70(m，1H)，5.00-5.10(m，4H)，5.22(d，1H)，6.64(d，1H)，7.28-7.36(m，7H)，7.37-7.52(m，5H).
实施例8A3-[2-苄氧基-5-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二噁戊硼烷(dioxaborolan)-2-基)苯基]-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸苄基酯 将5.15g(52.60mmol)的乙酸钾加至10.30g(17.53mol)的3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸苄基酯(实施例7A)在70ml的DMSO中的溶液。通过将氩气通过剧烈搅拌的溶液15分钟，将混合物去氧。然后加入5.17g(20.16mmol)的双(频哪根合)乙硼烷和515mg(0.70mmol)的双(二苯基膦)二茂铁钯(II)氯化物。然后将混合物在和缓的氩气流下加热至80℃，在6小时后再次冷却。将混合物过滤通过硅胶(流动相二氯甲烷)。通过硅胶柱色谱法纯化残余物(流动相环己烷∶乙酸乙酯4∶1)。
产率8.15g(理论值的79％)HPLC(方法1)Rt＝6.26minLC-MS(方法2)Rt＝5.93和6.09minMS(EI)m/z＝588(M+H)+
1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝1.26(s，6H)，1.33(s，9H)，1.36(s，6H)，2.91-3.10(m，1H)，3.12-3.28(m，1H)，4.49-4.68(m，1H)，5.05(dd，2H)，5.11(dd，2H)，5.30(d，1H)，6.90(d，1H)，7.27-7.37(m，7H)，7.38-7.42(m，3H)，7.55-7.62(m，1H)，7.67(dd，1H).
实施例9A2(S)-氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)丙酸盐酸盐 将12g(24.13mmol)的3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸(实施例(-)-6A)在氩气下加入60ml的氯化氢在二噁烷中的4M溶液并在RT下搅拌2小时。浓缩反应溶液并在高真空下干燥。
产率10.47g(理论值的100％)HPLC(方法1)Rt＝4.10minMS(EI)m/z＝398(M+H-HCl)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝3.17-3.31(m，1H)，3.33-3.47(m，1H)，4.22(t，1H)，5.13(s，2H)，6.69(d，1H)，7.24-7.40(m，2H)，7.41-7.45(m，2H)，7.48(d，1H)，7.52(d，1H)，7.60(d，1H)，8.66(br.s，2H).
实施例10A2(S)-苄氧羰基氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)丙酸 将9.25ml(53.09 mol)的N，N-二异丙基乙胺加入10.46g(24.13mmol)的2(S)-氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)丙酸盐酸盐(实施例9A)在DMF中的溶液。向其中加入6.615g(26.54mmol)的N-(苄氧羰基)琥珀酰亚胺(Z-OSuc)。将获得的溶液搅拌过夜，然后在旋转蒸发仪上真空浓缩。将残余物置入二氯甲烷中并分别用0.1N盐酸溶液和饱和氯化钠水溶液萃取两次。干燥有机相，过滤和浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化混合物(流动相环己烷/二乙基醚9∶1至8∶2)。
产率8.30g(理论值的65％)HPLC (方法1)Rt＝5.01minMS(EI)m/z＝532(M+H)+1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝3.14-3.3(m，2H)，4.25-4.45(m，1H)，4.97(s，2H)，5.14(s，2H)，6.88(d，1H)，7.20-7.56(m，12H)，7.62(d，1H)，12.73(br.s，1H).
实施例11A2(S)-苄氧羰基氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)-丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙基酯 将8.35g(15.7mmol)的2(S)-苄氧羰基氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)丙酸(实施例10A)提供在150ml的THF中，并加入2.14g(18.07mmol)的2-三甲基甲硅烷基乙醇和250mg(2.04mmol)的4-二甲基氨基吡啶。将混合物冷却至0℃，加入溶解在40ml的THF中的2.38g(2.95ml，18.86mmol)的N，N’-二异丙基碳二亚胺。将混合物在RT下搅拌过夜并在旋转式蒸发仪上真空浓缩以便后加工(work-up)。将残余物置入二氯甲烷中并分别用0.1N盐酸溶液和饱和氯化钠水溶液萃取两次。干燥有机相，过滤并蒸发。通过柱色谱法纯化混合物(硅胶，流动相环己烷/二乙基醚9∶1至8∶2)。
产率8.2g(理论值的83％)
HPLC(方法1)Rt＝6.42minMS(EI)m/z＝532(M+H)+1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝0.01(s，9H)，0.88(t，2H)，2.96(dd，1H)，3.13(dd，1H)，4.04-4.17(m，2H)，4.51-4.62(m，1H)，4.95-5.05(m，4H)，5.44(d，1H)，6.64(d，1H)，7.25-7.33(m，7H)，7.37(dd，4H)，7.45(dd，1H).
实施例12A2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基乙基)联苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 在氩气下在RT下将45.8mg(0.05mmol)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物(PdCl2(dppf))和0.325g(1.0mmol)的碳酸铯加至0.316g(0.5mmol)的2(S)-苄氧羰基氨基-3-(2-苄氧基-5-碘苯基)丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙基酯(实施例11A)在2.5ml的脱气的DMF中的溶液。将反应混合物加热至40℃。在30分钟期间内，滴加0.294g(0.5mmol)的3-[2-苄氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二噁戊硼烷-2-基)苯基]-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸苄基酯(实施例8A)在2.5ml的脱气的DMF中的溶液。将反应混合物在40℃下搅拌4小时和在50℃下搅拌另外2小时。蒸发溶剂，将残余物置入乙酸乙酯中。用水萃取有机相两次，通过硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物，使用二氯甲烷/乙酸乙酯(30/1)。获得0.320g(66％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝7.65minMS(EI)m/z＝987(M+Na)，965(M+H)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝0.00(s，9H)，0.90(t，2H)，1.37(s，9H)，3.02-3.35(m，4H)4.06-4.25(m，2H)，4.55-4.73(m，2H)，4.98-5.18(m，8H)，5.40(d，1H)，5.63(d，1H)，6.88-7.00(m，2H)，7.19-7.39(m，20H)，7.42-7.53(m，4H).
实施例13A({(2R，4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-氧代四氢呋喃-2-基}甲基)氨基甲酸苄酯 将7.60g(17.3mmol)的5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酸叔丁酯(Org.Lett.，2001，3，20，3153-3155)在516ml的二氯甲烷中的溶液和516ml的三氟乙酸在RT下搅拌2h。蒸发溶剂。将剩余的粗产物溶解在2.6l的无水甲醇中，在0℃下搅拌同时，加入6.3g(28.8mmol)的二碳酸二叔丁酯和7.3ml(52.43mmol)的三乙胺。在15小时后，蒸发反应溶液并将残余物置入1l的乙酸乙酯中。在分离各相后，用5％柠檬酸溶液萃取有机相两次，用水萃取两次和用饱和氯化钠水溶液萃取一次，通过硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶色谱法使用甲苯/丙酮(5/1)纯化粗产物。获得4.92g(78％理论值)的产物。
LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理论值C18H28N3O6(M+NH4)+382.19726实验值382.197031H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.45(s，9H)，2.3-2.4(m，1H)，2.45-2.55(m，1H)，3.3-3.4(m，1H)，3.5-3.6(m，1H)，4.17-4.28(m，1H)，4.7-4.8(m，1H)，5.0-5.15(m，4H)，7.3-7.4(m，5H).
实施例14A5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸
方法A在0℃下将2ml的1M氢氧化钠溶液加入0.73g(2mmol)的来自实施例13A的化合物在50ml的1，4-二噁烷中的溶液。将反应溶液搅拌2小时，然后蒸发。将残余物置入50ml的二氯甲烷中。将1.12ml(8mmol)的三乙胺加入该溶液中，在短时间后，滴加1.38ml(6mmol)的叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯。在RT下搅拌3小时后，用二氯甲烷稀释反应混合物。用1N碳酸氢钠溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。将粗产物溶解在7.4ml的1，4-二噁烷中，加入36.2ml的0.1N氢氧化钠溶液。在RT下搅拌3小时后，蒸发反应溶液，和将残余物置入水和乙酸乙酯中。用乙酸乙酯萃取有机相三次。将合并的有机相通过硫酸钠干燥并蒸发。获得0.90g(90％理论值)的产物。
方法B将14.0g(38mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基-5-硝基戊酸苄酯(实施例22A)在840ml的乙醇/水9/1中的溶液与1.96g的披钯碳(10％)混合并在大气压下在RT下氢化24小时。将混合物过滤通过硅藻土，将滤液与14.7g(114mmol)的二异丙基乙胺混合。然后加入11.4g(45.6mmol)的N-(苄氧羰基氧基)琥珀酰亚胺，将混合物在RT下搅拌4小时。浓缩溶液，将残余物置入二氯甲烷中并用0.1N盐酸萃取两次。分离有机相并用14.7g(114mmol)的二异丙基胺变为碱性。将溶液冷却至0℃，加入30.1g(114mmol)的二甲基-叔丁基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，将混合物在RT下搅拌2.5小时。用饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。将残余物溶解在50ml的二噁烷中，与200ml的0.1N氢氧化钠溶液混合并在RT下搅拌3小时。将混合物用乙酸乙酯萃取数次，收集的有机相通过硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶(流动相二氯甲烷/乙醇20/1，9/1)上色谱分离。获得8.11g(43％理论值)的产物。
MS(ESI)m/z＝497(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝0.00(s，6H)，0.99(s，9H)，1.33(s，9H)，1.59(m，1H)，1.80(m，1H)，2.75-3.15(m，2H)，3.81(m，1H)，3.98(m，1H)，4.96(m，2H)，7.04(d，1H)，7.19(m，1H)，7.30(m，5H)，12.37(br.s，1H).
实施例15A3-[3’-2(S)-氨基-2-苄氧羰基乙基]-4，4’-二苄氧基联苯基-3-基]-2(S)-苄氧羰基氨基丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯盐酸盐 将50ml的氯化氢在二噁烷中的4M溶液在约20分钟的期间内加入冷却至0℃的2.65g(2.75mmol)的2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基乙基)联苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯(实施例 12A)在50ml的无水二噁烷中的溶液。在搅拌3小时后，蒸发反应溶液并在高真空下干燥。
产率100％理论值HPLC(方法1)Rt＝5.96minMS(EI)m/z＝865(M+H)+实施例16A2(S)-[5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酰基氨基]-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]联苯基-3-基}丙酸苄酯
将0.219g(0.58mmol)的HATU和0.082g(0.63mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至冷却至0℃的3-[3’-(2(S)-氨基-2-苄氧羰基乙基)-4，4’-二苄氧基联苯基-3-基]-2(S)-苄氧羰基氨基丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙酯盐酸盐(实施例15A)和0.287g(0.58mmol)的5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酸(实施例14A)在7.3ml的无水DMF中的溶液。在0℃搅拌30分钟后，加入另外0.164g(1.26mmol)的N，N-二异丙基乙胺。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂，将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相用水洗涤三次和用饱和氯化钠水溶液洗涤一次，通过硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法纯化，所述色谱法使用二氯甲烷/乙酸乙酯(梯度30/1→20/1→10/1)。获得533mg(66％理论值)的产物。
LC-MS(ESI，方法6)m/z＝1342(M+H)+，1365(M+Na)+实施例17A2(S)-苄氧羰基氨基-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基-2-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基氨基)乙基]联苯基-3-基}丙酸 在RT下将1.8ml的在THF中的1N氟化四丁铵滴加到800mg(0.6mmol)的2(S)-[5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酰基氨基]-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]联苯基-3-基}丙酸苄酯(实施例16A)在26ml的无水DMF中的溶液中。在RT下25分钟后，将混合物冷却至0℃并加入大量冰-水。立即加入乙酸乙酯和少量1N盐酸溶液；有机相用硫酸镁干燥，浓缩和在高真空下干燥1小时。粗产物在不进一步纯化下反应。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝1129(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理论值C65H69N4O14(M+H)+1129.48048实验值1129.48123.
实施例18A2(S)-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯 将691mg(粗制混合物，约0.6mmol)的2(S)-苄氧羰基氨基-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基-2-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基氨基)乙基]联苯基-3-基}丙酸(实施例17A)提供到25ml的二氯甲烷中，加入溶解在6ml的二氯甲烷中的547.6mg(2.98mmol)的五氟苯酚。加入7.3mg(0.06mmol)的DMAP，将混合物冷却至-25℃(乙醇/二氧化碳浴)。在-25℃，加入148mg(0.774mmol)的EDC。将混合物缓慢升温至RT过夜。将反应混合物真空浓缩并在高真空下短暂干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
LC-MS(ESI，方法5)m/z＝1317(M+Na)+，1295(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理论值C71H68F5N4O14(M+H)+1295.46467实验值1295.46430.
实施例19A5，17-二苄氧基-14(S)-苄氧羰基氨基-11(S)-(3-苄氧羰基氨基-2(R)-羟基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯(hexaene)-8(S)-羧酸苄基酯 方法A将4ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加入119.3mg的2(S)-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯(实施例18A)在2.7ml的1，4-二噁烷中的溶液。直至反应完成，加入另外1.5ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液。蒸发反应溶液并与氯仿共蒸馏两次。将粗产物(LC-HR-FT-ICR-MS，方法7理论值C66H60F5N4O12(M+H)+1195.41224，实验值1195.41419)溶解在100ml的氯仿中并在3小时的期间内滴加到极其剧烈搅拌的200ml的氯仿悬浮液和100ml的饱和碳酸氢钠水溶液中。将反应混合物剧烈搅拌2小时。在分离两相后，用氯仿萃取水相。用5％柠檬酸水溶液洗涤合并的有机相，通过硫酸镁干燥并蒸发至干。将粗产物用乙腈洗涤并在高真空下干燥。
产率60.5mg(65％理论值)LC-MS(ESI，方法5)m/z＝1011(M+H)+方法B将771mg(0.595mmol)的2(S)-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯(实施例18A)溶解在8ml的二噁烷中，然后在0℃下滴加在二噁烷中的16ml的4N氯化氢溶液。在45min后，再次加入6ml的氯化氢在二噁烷中的4N溶液，在15min后加入另外8ml。将混合物在0℃下搅拌30分钟，之后将反应溶液在温和条件下浓缩，与氯仿共蒸馏(两次)和在高真空下简短干燥。将粗产物(732mg，0.59mmol)溶解在1000ml的氯仿中，滴加6ml三乙胺在50ml的氯仿中的溶液。将混合物在RT下搅拌过夜。为了后处理，将混合物在温和条件下在旋转蒸发仪上真空浓缩，将残余物在乙腈中搅拌。获得的晶体通过抽吸过滤收集，用乙腈洗涤并在高真空下干燥。
产率360mg(60％理论值)MS(EI)m/z＝1011(M+H)+HPLC(方法1)Rt＝5.59min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.52-1.65(m，1H)，1.73-1.84(m，1H)，2.82-3.01(m，3H)，3.02-3.11(m，1H)，3.46(s，1H)，3.57-3.68(m，1H)，4.47-4.56(m，1H)，4.64-4.71(m，1H)，4.73-4.85(m，2H)，4.88-5.00(m，4H)，5.09(s，2H)，5.14-5.20(m，4H)，6.29(d，1H)，7.00-7.11(m，4H)，7.21-7.40(m，20H)，7.41-7.48(m，9H)，8.77(d，1H)，8.87(d，1H).
实施例20A14(S)-氨基-11(S)-(3-氨基-2(R)-羟基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸二盐酸盐(双苯霉素B)
将200mg(0.20mmol)的5，17-二苄氧基-14(S)-苄氧羰基氨基-11(S)-(3-苄氧羰基氨基-2(R)-羟基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸苄酯(实施例19A)加至220ml的乙酸/水/乙醇4∶1∶1混合物(乙醇可以被THF替代)。加入73mg的10％钯/碳(10％Pd/C)，将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。将残余物与4.95ml的0.1N盐酸水溶液混合并浓缩。将残余物与10ml的二乙基醚搅拌并滗析。将剩余的固体在高真空下干燥。
产率103mg(95％理论值).
HPLC(方法1)Rt＝3.04minLC-MS(方法2)Rt＝0.38minMS(EI)m/z＝473(M+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝2.06-2.20(m，1H)，2.74-2.89(m，1H)，2.94-3.05(m，1H)，3.12-3.25(m，2H)，3.53(d，1H)，3.61-3.72(m，1H)，3.97-4.07(m，1H)，4.53(s，1H)，4.61(d，1H)，4.76-4.91(m，12H)，7.01-7.05(m，2H)，7.07(s，1H)，7.40-7.45(m，2H)，7.51(d，1H).
实施例21A2(S)-叔丁氧羰基氨基-5-硝基-4-氧代戊酸苄酯
将10g(30.9mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基琥珀酸1-苄酯和5.27g(32.5mmol)的1，1’-羰二咪唑在100ml的四氢呋喃中的溶液A在RT下搅拌5小时。在0℃下将18.8g(30.9mmol)的硝基甲烷滴加到3.2g(34.2mmol)的叔丁醇钾在100ml的四氢呋喃中的溶液B中。将溶液B搅拌，同时升温至RT，然后在RT下将溶液A滴加。将获得的混合物在RT下搅拌16小时并使用20％盐酸调节至pH2。蒸发溶剂。将剩余的粗产物置入乙酸乙酯/水中。在分离各相后，用水萃取有机相两次，通过硫酸钠干燥并浓缩。获得13g(99％理论值)的产物。
MS(ESI)m/z＝334(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.37(s，9H)，2.91(m，1H)，3.13(m，1H)，4.44(m，1H)，5.12(s，2H)，5.8 1(m，2H)，7.2-7.5(m，5H).
实施例22A2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基-5-硝基戊酸苄酯 将11.3g(30.8mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基-5-硝基-4-氧代戊酸苄酯在300ml的四氢呋喃中的溶液冷却至-78℃，滴加30.8ml的L-Selectride在四氢呋喃中的1M溶液，将混合物在-78℃下搅拌1小时。在升温至RT后，将饱和氯化铵溶液小心加入该溶液。将反应溶液浓缩，将残余物置入水和乙酸乙酯中。将水相用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相通过硫酸钠干燥并蒸发。将粗产物在硅胶60(流动相环己烷/乙酸乙酯10/1)上纯化，将收集的级分浓缩并与环己烷/乙酸乙酯5/1搅拌。将剩余的晶体通过抽吸过滤收集并干燥。获得2.34g(21％理论值)的所需非对映异构体。在Lichrospher Diol 10μm(流动相乙醇/异己烷5/95)上色谱分离母液获得另外0.8g(6.7％理论值)产物。
MS(ESI)m/z＝369(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.38(s，9H)，1.77(m，1H)，1.97(m，1H)，4.10-4.44(m，3H)，4.67(m，1H)，5.12(m，2H)，5.49(d，1H)，7.25-7.45(m，5H).
实施例23A2(S)-[S-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊酰基氨基]-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]联苯基-3-基}丙酸苄酯 类似于实施例16A，由0.47g(0.51mmol)的来自实施例15A的化合物和0.19g(0.51mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸与0.19g(0.51mmol)的HATU和0.35ml(1.65mmol)的N，N-二异丙基乙胺，在5.55ml的无水DMF中进行制备。
产率0.58g(92％理论值)LC-MS(方法10)Rt＝3.46minMS(ESI)m/z＝1212(M+H)+实施例24A2(S)-苄氧羰基氨基-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基-2-(5-苄氧羰基氨基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊酰基氨基]乙基}联苯基-3-基}-丙酸
类似于实施例17A，由0.82g(0.68mmol)的来自实施例23A的化合物和2当量(1.3ml)的氟化四丁铵(1M在THF中)，在30ml的无水DMF进行制备。
产率772mg(94％理论值)LC-MS(方法11)Rt＝1.62minMS(ESI)m/z＝1112(M+H)+实施例25A2(S)-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯 类似于实施例18A，由422mg(0.38mmol)的来自实施例24A的化合物和349mg(1.9mmol)的五氟苯酚和80mg(0.42mmol)的EDC和4.63mg(0.04mmol)的DMAP，在4ml的二氯甲烷中进行制备。
产率502mg(95％理论值)LC-MS(方法11)Rt＝3.13min
MS(ESI)m/z＝1278(M+H)+实施例26A2(S)-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-氨基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯盐酸盐 将5ml的氯化氢在二噁烷中的4N溶液加入215mg(0.17mmol)的来自实施例25A的化合物，同时在冰浴中搅拌。将混合物搅拌1小时并在真空中蒸发至恒重。
产率200mg(92％理论值)LC-MS(方法11)Rt＝4.25minMS(ESI)m/z＝1178(M-HCl+H)+实施例27A5，17-二苄氧基-14(S)-苄氧羰基氨基-11(S)-(3-苄氧羰基氨基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸苄酯
将1.35g(0.91mmol)的来自实施例26A的化合物提供在3l的氯仿中，在剧烈搅拌同时，在20分钟期间在RT下加入在50ml的氯仿中的2.54ml(18.2mmol)的三乙胺。搅拌混合物过夜并真空蒸发干燥。将残余物与5ml的乙腈搅拌并过滤，干燥残余物至恒重。
产率890mg(93％理论值)LC-MS(方法11)Rt＝5.10minMS(ESI)m/z＝994(M+H)+实施例28A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，6，18-六烯-8-羧酸二盐酸盐 将50mg(0.05mmol)的来自实施例27A的化合物悬浮在50ml的冰醋酸/水/乙醇(4/1/1)中，加入30mg的Pd/C(10％)晶体，将混合物在RT下氢化20小时。在通过过滤通过硅藻土去除晶体后，将滤液真空蒸发至干，在搅拌同时，加入2.5ml的0.1N盐酸。将混合物在真空中蒸发至干并干燥至恒重。
产率17mg(63％理论值)TLC(甲醇/二氯甲烷/25％氨水＝5/3/2)Rf＝0.6LC-MS(方法3)Rt＝0.28minMS(ESI)m/z＝457(M-2HCl+H)+实施例29A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基-11-[3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将600mg(1.13mmol)的来自实施例28A的化合物溶解在6ml(5.66mmol)的1N氢氧化钠溶液中，在搅拌同时在室温下加入溶解在5ml甲醇中的740.8mg(3.39mmol)的二碳酸二叔丁酯。在1小时后反应完成(TLC检查，流动相二氯甲烷/甲醇/氨＝80/20/2)。通过滴加0.1N盐酸将pH调节至3。将混合物每次用20ml的乙酸乙酯萃取三次，通过硫酸钠干燥并真空蒸发至恒重。
产率622mg(84％理论值)LC-MS(方法10)Rt＝1.96minMS(ESI)m/z＝656(M+H)+实施例30A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-甲基-L-苯丙氨酸
在氩气气氛下，将500mg(1mmol)的来自实施例(-)-6A的化合物溶解在20ml的THF中，加入90.5mg(3.02mmol)的氢化钠和0.51ml(1141.6mg；8.04mmol)的甲基碘(80％纯)，将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用25ml的乙酸乙酯和25ml水稀释并用0.1N盐酸调节至pH＝9。将混合物真空浓缩至小体积。加入10ml的乙酸乙酯和10ml水，剧烈振荡混合物，分离有机相。用硫酸钠干燥并真空浓缩，获得140mg的产物(19％理论值)。将水相酸化(pH＝3)并用20ml的乙酸乙酯萃取三次。真空浓缩和真空干燥，获得351mg的产物(68％理论值)。
LC-MS(方法9)Rt＝3.9minMS(EI)m/z＝511(M+H)+实施例31A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-甲基-L-苯基丙氨酸苄酯 类似于实施例7A，由350mg(0.68mmol)的来自实施例30A的化合物，8.29mg(0.07mmol)的DMAP，148mg(1.37mmol)的苄基醇和157.46mg(0.82mmol)的EDC，在3ml的乙腈中进行制备。
产率382mg(93％理论值)LC-MS(方法9)Rt＝4.8minMS(EI)m/z＝601(M+H)+
实施例32A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸苄酯 类似于实施例8A，将380mg(0.63mmol)的来自实施例31A的化合物提供在热干燥的烧瓶中的4ml的DMF中，在搅拌同时在室温下，加入184.5mg(0.73mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷，186mg(1.9mmol)的乙酸钾和23.15mg(0.03mmol)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物。使得反应在80℃下进行4小时。在后加工和色谱分离(硅胶60，流动相环己烷/乙酸乙酯＝4/1)后获得产物。
产率196mgLC-MS(方法9)Rt＝4.9minMS(EI)m/z＝601(M+H)+实施例33A2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基-(2-叔丁氧羰基-2-甲基)氨基乙基)联苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 类似于实施例12A，由190mg(0.32mmol)的来自实施例32A的化合物，199.5mg(0.32mmol)的来自实施例11A的化合物，195.5mg(0.63mmol)的碳酸铯和23.15mg(0.03mmol)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在1.5ml的DMF中在氩气气氛下进行制备。
产率212mg(66％理论值)LC-MS(方法13)Rt＝4.86minMS(EI)m/z＝978(M+H)+实施例34A2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基-2-甲基氨基乙基联苯基-3-基)丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯盐酸盐 类似于实施例15A，由930mg(0.95mmol)的来自实施例33A的化合物和22.14ml的氯化氢在二噁烷中的4M溶液，在15ml的二噁烷中进行制备。
产率915mg(78％理论值)LC-MS(方法13)Rt＝2.53minMS(EI)m/z＝878(M-HCl+H)+实施例35A2(S)-{甲基-[5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酰基]氨基}-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]联苯基-3-基}丙酸苄酯
类似于实施例16A，由922mg(1.01mmol)的来自实施例34A的化合物，0.5g(1.01mmol)的来自实施例14A的化合物，421mg(1.11mmol)的HATU和0.7ml(518mg；3.27mmol)的DIEA，在4.2ml的DMF中进行制备。
产率703mg(51％理论值)LC-MS(方法8)Rt＝3.17minMS(EI)m/z＝1356(M+H)+实施例36A2(S)-苄氧羰基氨基-3-{4，4’-二苄氧基-3’-[2(S)-苄氧羰基-2-{甲基-(5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基)氨基}乙基]联苯基-3-基}丙酸 类似于实施例17A，由360mg(0.27mmol)的来自实施例35A的化合物和0.8ml(3当量)的1M氟化四丁铵溶液(THF)，在20ml的DMF中进行制备。
产率159mg(53％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝3.19minMS(EI)m/z＝1142(M+H)+实施例37A2(S)-[甲基-(5-苄氧羰基氨基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羟基戊酰基]氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯 类似于实施例18A，由330mg(0.29mmol)的来自实施例36A的化合物，265.6mg(1.44mmol)的五氟苯酚，3.53mg(0.03mmol)的DMAP和60.87mg(0.32mmol)的EDC，在10ml的二氯甲烷中进行制备。
产率271mg(69％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝3.38minMS(EI)m/z＝1308(M+H)+实施例38A2(S)-[甲基-(5-苄氧羰基氨基)-2(S)-氨基-4(R)-羟基-戊酰基]氨基-3-[4，4’-二苄氧基-3’-(2(S)-苄氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)联苯基-3-基]丙酸苄酯盐酸盐
将130mg(0.1mmol)的来自实施例37A的化合物溶解在0.5ml的二噁烷中，并小心加入5ml的氯化氢在二噁烷中的4N溶液(冰浴)。在30分钟后，使得反应在室温下继续另外2小时。将混合物在真空中蒸发至干并在高真空下干燥至恒重。
产率130mg(70％理论值)LC-MS(方法15)Rt＝2.68minMS(EI)m/z＝1208(M-HCl+H)+实施例39A(8S，11S，14S)-5，17-二(苄氧基)-14-{[(苄氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-羟基丙基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸苄酯 将130mg(0.1mmol)的来自实施例38A的化合物提供在220ml的无水氯仿中。在搅拌同时在室温下，在20分钟期间内加入在5ml的二氯甲烷中的23ml(20eq.)的三乙胺。将混合物搅拌过夜。然后将混合物真空蒸发至干。将残余物与乙腈搅拌。在干燥残余物后获得44mg产物。通过RP-HPLC从母液中获得另外的产物(30mg)。
产率74mg(69％理论值)LC-MS(方法15)Rt＝3.13minMS(EI)m/z＝1024(M+H)+实施例40A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-羧酸二(三氟乙酸氢盐) 将33mg(0.032mmol)的来自实施例39A的化合物小心用稀三氟乙酸处理。将获得的澄清溶液随后冻干。
产率23mg(定量)LC-MS(方法15)Rt＝0.92minMS(EI)m/z＝486(M-2CF3CO2H+H)+实施例41A(8S，11S，14S)-5，17-二(苄氧基)-14-{[苄氧羰基]氨基}-11-(2R)-3-{[苄氧羰基]氨基}-2-羟基丙基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸
将37mg(0.04mmol)的来自实施例39A的化合物溶解在2ml的THF中，加入0.14ml的1N氢氧化锂溶液，将混合物在室温下搅拌3小时。然后将混合物用1N盐酸酸化并在高真空下蒸发至干。
产率33mg(71％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.90minMS(EI)m/z＝934(M+H)+类似于上述详述方法，由适当的原材料制备下表中列出的实施例42A至48A
实施例49A(2Z)-3-[2-(苄氧基)-5-溴苯基]-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}丙烯酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯
将7.5g(25.8mmol)的2-(苄氧基)-5-溴苯甲醛(Synthesis，1992，10，1025-30)和11.8g(28.3mmol)的{[(苄氧基)羰基]氨基}(二甲氧基磷酰基)乙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯(Tetrahedron，1999，55，10527-36)提供在150ml的THF中，在丙酮/干冰中-78℃下冷却同时，加入3.26g(28.3mmol)的1，1，3，3-四甲基胍。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌另外12小时。将溶剂在真空中蒸馏掉，将粗产物置入乙酸乙酯中并用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液各自洗涤一次。将有机相通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩至干燥。从乙酸乙酯/环己烷(1∶20)中再结晶粗产物。
产率13g(88％理论值)HPLC(方法16)Rt＝6.06minMS(DCI(NH3))m/z＝599(M+NH4)+实施例50A(8S，11S，14S)-5，17-二(苄氧基)-14-{[(苄氧基)羰基]氨基}-11-(3-{[(苄氧基)羰基]氨基}丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将200mg(0.2mmol)的来自实施例27A的化合物提供在8ml的THF和4ml的DMF中，在搅拌同时，加入0.8ml的1M氢氧化锂水溶液(4当量)。在室温下搅拌2小时后形成凝胶。加入0.8ml的1N盐酸和少量水。然后将混合物真空蒸发至干，与水搅拌，将沉淀过滤并干燥。
产率140mg(77％理论值)LC-MS(方法10)Rt＝2.83minMS(EI)m/z＝904(M+H)+实施例51A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸
将11mg(0.02mmol)的来自实施例47A的化合物溶解在0.5ml水中，加入12.27mg(0.08mmol)的碳酸钠，将混合物在冰浴中冷却，在搅拌同时，加入在0.2ml的甲醇中的13.25mg(0.06mmol)的二碳酸二叔丁酯。将混合物在RT下搅拌过夜，真空蒸发至干，溶解在0.5ml水中，用1N盐酸酸化至pH＝2，用乙酸乙酯萃取获得的悬浮液。用硫酸钠干燥，接着真空蒸发至干。
产率10mg(51％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.92minMS(EI)m/z＝670(M+H)+实施例52A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-5，17-二羟基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将90mg(0.16mmol)的来自实施例40A的化合物溶解在2.5ml水中，加入85.3mg(0.8mmol)的碳酸钠，将混合物在冰浴中冷却，加入在1.2ml的甲醇中的105.3mg(0.48mmol)的二-(叔丁基)二碳酸酯。将混合物在室温下搅拌过夜，真空浓缩至小体积，并用1N盐酸酸化至pH＝2。获得的沉淀通过过滤收集并干燥。
产率89mg(73％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.8minMS(EI)m/z＝686(M+H)+实施例53A2-(苄氧基)-N-[(苄氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 将930mg(1.6mmol)的来自实施例49A的化合物溶解在100ml的乙醇和10ml的二噁烷中。在氩气气氛下，加入20mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(环辛二烯)铑(I)三氟甲磺酸盐，将溶液放入超声波浴中15分钟。然后将混合物在3巴的氢气压力下氢化5天。将混合物过滤通过硅胶并小心用乙醇洗涤。将滤液真空浓缩，将粗产物在高真空下干燥。
产率900mg(96％理论值)ee＝98.8％(Chiralcel OD(Daicel)；洗脱剂异己烷和乙醇(5/1 vol/vol)加入0.2体积％的二乙胺)HPLC(方法16)Rt＝6.08minMS(DCI(NH3))m/z＝601(M+NH4)+
实施例54A(2Z)-3-[2-(苄氧基)-5-溴苯基]-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}丙烯酸甲酯 类似于实施例49A，由7.5g(25.8mmol)的2-(苄氧基)-5-溴苯甲醛和8.4g(28.3mmol)的2-(三甲基甲硅烷基)乙基{[苄氧基]羰基}氨基}(二甲氧基磷酰基)乙酸酯(J.Prakt.Chem.，2000，342，736-44)和3.3g(28.3mmol)的1，1，3，3-四甲基胍，在150ml的THF中进行制备。
产率10g(87％理论值)HPLC(方法16)Rt＝5.42minMS(DCI(NH3))m/z＝479(M+NH4)+实施例55A2-(苄氧基)-N-[(苄氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸甲酯 类似于实施例53A，由1.96g(4.2mmol)的来自实施例54A的化合物和15mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(环辛二烯)铑(I)三氟甲磺酸盐，在100ml的乙醇和20ml的二噁烷中进行制备。
产率1.96g(99％理论值)ee＝97.6％(Chiralcel OD(Daicel)；洗脱剂异己烷和乙醇(5/1 vol/vol)加入0.2体积％二乙胺)LC-MS(方法17)Rt＝3.05min
MS(DCI(NH3))m/z＝481(M+NH4)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.32(s，9H)，2.72(mc，1H)，3.17(mc，1H)，3.60(s，3H)，4.32(mc，1H)，5.13(s，2H)，7.01(mc，1H)，7.22(mc，1H)，7.28-7.58(mc，6H).
实施例56A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸甲酯 将0.23g(2.31mmol)的乙酸钾和4mg(0.08mmol)的氢氧化钾加至0.36g(0.77mmol)的来自实施例55A的化合物在5ml的DMF中的溶液。将混合物通过将氩气通过剧烈搅拌的溶液15分钟去氧。然后加入0.25g(1.0mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷和0.023g(0.03mmol，0.04当量)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物。将混合物在轻柔氩气流下加热至60℃并在该温度下搅拌1.5小时。随后将混合物在80℃下搅拌30分钟，然后冷却至RT。将溶剂在真空下蒸馏掉，将粗产物置入乙酸乙酯中并用饱和氯化钠溶液洗涤两次。将有机相通过硫酸镁干燥，过滤和真空蒸发至干。残余物通过色谱法(RP-HPLC，乙腈，水)纯化。
产率0.219g(56％理论值)MS(EI)m/z＝512(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.27(mc，12H)，1.29(s，9H)，2.75(mc，1H)，3.19(mc，1H)，3.57(s，3H)，4.30(mc，1H)，5.19(mc，2H)，7.04(mc，1H)，7.24(mc，1H)，7.28-7.58(m，6H).
实施例57A
2-(苄氧基)-N-[(苄氧基)羰基]-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 类似于实施例8A，由2.0g(3.17mmol)的来自实施例11A的化合物，0.924g(3.64mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷，0.932g(9.50mmol)的乙酸钾和0.116g(0.160mmol，0.05当量)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在30ml的二甲亚砜中进行制备。
产率1.12g(56％理论值)LC-MS(方法13)Rt＝4.50minMS(EI)m/z＝632(M+H)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝0.92(dd，2H)，1.31(s，12H)，2.95-3.95(m，2H)，4.11(mc，2H)，4.55(11(mc，1H)，4.99(s，2H)，5.08(s，2H)，5.53(d，1H)，6.90(d，1H)，7.15-7.47(m，10H)，7.58(d，1H)，7.67(dd，1H).
实施例58A(2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-3-(4，4’-二(苄氧基)-3’-{(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲氧基-3-氧代丙基}联苯基-3-基)丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯 方法A类似于实施例12A，由0.46g(0.79mmol)的来自实施例53A的化合物，0.41g(0.79mmol)的来自实施例56A的化合物，0.52g(1.58mmol)的碳酸铯和0.023g(0.032mmol，0.04当量)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在12ml的DMF中进行制备。
产率0.34g(48％理论值)方法B类似于实施例53A，由0.59g(0.67mmol)的来自实施例69A的化合物和10mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(环辛二烯)铑(I)三氟甲磺酸盐，在100ml的乙醇和30ml的二噁烷中进行制备。
产率0.60g(99％理论值)ee＝99.5％(手性固定硅胶相，基于选择物聚(N-甲基丙烯酰基-L-亮氨酸L-薄荷基(menthyl)酰胺)；洗脱剂异己烷和乙酸乙酯(2/1 vol/vol))HPLC(方法16)Rt＝6.54minMS(EI)m/z＝890(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝0.00(s，9H)，0.83(mc，2H)，1.31(s，9H)，2.86(m，2H)，3.25(m，2H)，3.62(s，3H)，4.09(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.98(mc，2H)，5.22(m，4H)，7.12(m，2H)，7.29(m，2H)，7.33-7.59(m，20H)，7.78(d，1H).
类似于以上详述的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例59A至64A
实施例65A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将50mg(0.09mmol)的来自实施例20A的化合物提供在8ml的甲醇/水(9∶1)混合物中。加入1ml的1N碳酸氢钠溶液和然后在2ml的甲醇/水(9∶1)中的80mg(0.37mmol)的二碳酸二叔丁酯。将混合物在RT下搅拌过夜。对于后加工，将60ml的乙酸乙酯和30ml水加至该溶液。将有机相用0.1N盐酸洗涤一次，干燥和在旋转蒸发仪上真空浓缩。
产率49mg(79％理论值)LC-MS(方法3)Rt＝2.56minMS(EI)m/z＝673(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS理论值C33H44N4O11(M+H)+673.3079实验值673.3082.
实施例66A(8S，11S，14S)-5，17-二(苄氧基)-14-{[(苄氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸苄酯
将200mg(0.20mmol)的来自实施例19A的化合物溶解在50ml的无水DMF中，在0℃下，加入210mg(0.79mmol)的叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，0.11ml(0.79mmol)的三乙胺和20mg(0.20mmol)的DMAP。将混合物在RT下搅拌2天。在加入20ml的二氯甲烷后，将溶液小心用10ml的饱和碳酸氢钠溶液和10ml水洗涤。将有机相浓缩至干燥，将残余物在高真空下干燥。
产率215mg(96％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝3.43minMS(EI)m/z＝1125(M+H)+实施例67A(8S，11S，14S)-5，17-二(苄氧基)-14-{[(苄氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基-2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将210mg(0.19mmol)的来自实施例66A的化合物溶解在2ml的THF中，和分别加入1ml水和甲醇。在加入13mg(0.56mmol)的氢氧化锂后，将混合物在RT下搅拌12小时。然后将反应溶液用30ml水稀释并通过加入1N盐酸调节至pH＝3。沉淀通过过滤收集并在高真空下干燥。
产率192mg(99％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝3.24minMS(EI)m/z＝1135(M+H)+实施例68A(2Z)-3-[2-(苄氧基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)苯基]-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丙烯酸甲酯 类似于实施例8A，由1.0g(2.16mmol)的来自实施例54A的化合物，0.63g(2.5mmol)的4，4，4‘，4‘，5，5，5‘，5‘-八甲基-2，2‘-二-1，3，2-二噁戊硼烷，0.64g(6.50mmol)的乙酸钾和0.063g(0.087mmol，0.04当量)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在14ml的二甲亚砜中进行制备。
产率0.832g(76％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.96min.
MS(EI)m/z＝510(M+H)+实施例69A(2Z)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-3-(4，4′-二(苄氧基)-3′-{(1Z)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基}联苯基-3-基)丙烯酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基-酯
类似于实施例12A，由0.42g(0.82mmol)的来自实施例68A的化合物，0.48g(0.82mmol)的来自实施例49A的化合物，0.54g(1.65mmol)的碳酸铯和0.024g(0.033mmol，0.04当量)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在12ml的DMF中进行制备。
产率0.47g(64％理论值)HPLC(方法16)Rt＝6.57minMS(EI)m/z＝886(M+H)+实施例70A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-乙基-L-苯丙氨酸 在氩气气氛下，将1.0g(2.01mmol)的来自实施例(-)-6A的化合物溶解在40ml的THF中，和加入241mg(6.03mmol)的氢化钠(60％分散体，在矿物油中)，1.0g(6.03mmol)的碘化钾和1.29ml(2509mg；16.1mmol)的乙基碘，将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物真空浓缩，将粗产物置入乙酸乙酯中，有机相用水洗涤数次，通过硫酸钠干燥并真空浓缩。将粗产物通过RP-HPLC色谱法(流动相乙腈/水梯度)纯化。
产率470mg(44％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝2.79min.
MS(EI)m/z＝526(M+H)+
实施例71A2-(苄氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-乙基-L-苯基丙氨酸苄酯 类似于实施例7A，由420mg(0.68mmol)的来自实施例70A的化合物，9.77mg(0.08mmol)的DMAP，173mg(1.6mmol)的苄基醇和184mg(0.96mmol)的EDC，在8ml的乙腈中进行制备。
产率375mg(76％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝3.26min.
MS(EI)m/z＝616(M+H)+1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝0.80(mc，3H)，1.4(mc，9H)2.75(mc，1H)，3.07(mc，1H)，3.22(mc，1H)，3.47(mc，1H)，4.23(mc，1H)，5.06(s，2H)，5.15(mc，2H)，6.65(d，1H)，7.25-7.5(m，12H).
实施例72A2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4‘-双-苄氧基-3‘-(2(S)-苄氧羰基-(2-叔丁氧羰基-2-乙基)氨基乙基)联苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯 类似于实施例12A，由343mg(0.54mmol)的来自实施例57A的化合物，334mg(0.54mmol)的来自实施例71A的化合物，35 mg(1.09mmol)的碳酸铯和40mg(0.05mmol)的双(二苯膦)二茂铁钯(II)氯化物，在8ml的DMF中在氩气气氛下进行制备。
产率216mg(40％理论值)
LC-MS(方法12)Rt＝3.54min.
MS(EI)m/z＝893(M-boc+H)+实施例73A2(S)-苄氧羰基氨基-3-[4，4‘-双-苄氧基-3‘-(2(S)-苄氧羰基-2-乙基氨基乙基联苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯盐酸盐 类似于实施例15A，由210mg(0.211mmol)的来自实施例72A的化合物和15ml的氯化氢在二噁烷中的4N溶液，在4ml的二噁烷中进行制备。
产率定量LC-MS(方法12)Rt＝3.01min.
MS(EI)m/z＝893(M-HCl+H)+类似于以上详述的方法，由适当的原材料制备下表所列实施例74A至78A
实施例79A
{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯 在氩气下，将300mg(0.82mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和171mg(1.06mmol)的叔丁基-(2-氨基乙基)氨基甲酸酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入204mg(1.06mmol)的EDC和33mg(0.25mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。将溶液真空浓缩并将残余物置入乙酸乙酯中。有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸镁干燥并真空干燥。剩余的固体在高真空下干燥。
产率392mg(94％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.36min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+实施例80A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由300mg(0.82mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和202mg(1.06mmol)的叔丁基(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸酯，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入204mg(1.06mmol)的EDC和33mg(0.25mmol)的HOBt进行制备。
产率412mg(93％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.23min.
MS(EI)m/z＝539(M+H)+实施例81AN5-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 将390mg(0.77mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯(实施例79A)在50ml的乙醇中的溶液在加入活性炭上的40mg的钯(10％)后在RT下在大气压下氢化4小时。将混合物过滤通过硅藻土，残余物用乙醇洗涤。将滤液真空蒸发至干。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率263mg(91％理论值)MS(ESI)m/z＝375(M+H)+；397(M+Na)+.
实施例82AN5-(叔丁氧羰基)-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-L-鸟氨酰胺 类似于实施例81A，由412mg(0.76mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯(实施例80A)在50ml的乙醇中，加入41mg的披钯活性炭(10％)进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率306mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝405(M+H)+.
实施例83A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丁基]氨基甲酸叔-丁酯 在-10℃下将91mg(0.90mmol)的4-甲基吗啉和98mg(0.90mmol)的氯甲酸乙酯加至300mg(0.90mmol)的N2，N5-二(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在10ml的四氢呋喃中的溶液；搅拌混合物30分钟。在该温度下，缓慢滴加1.81ml(1.81mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。在冰中冷却同时，小心加入0.1ml水和0.15ml的4.5％氢氧化钠溶液，将混合物在RT下搅拌另外3小时。将混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯中，用水洗涤，通过硫酸镁干燥并再次真空蒸发至干。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率239mg(83％理论值)MS(ESI)m/z＝319(M+H)+；341(M+Na)+.
实施例84A甲磺酸(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊酯 将103mg(0.90mmol)的甲磺酰氯和0.21ml(1.5mmol)的三乙胺加至240mg(0.75mmol)的[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(实施例83A)在20ml的二氯甲烷中的溶液，将混合物在RT下搅拌16小时。将混合物用二氯甲烷稀释并用0.1N盐酸洗涤两次。有机相通过硫酸镁干燥并真空蒸发至干。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率218mg(73％理论值)MS(ESI)m/z＝419(M+Na)+.
实施例85A叔丁基-{(4S)-5-叠氮基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸酯 将218mg(0.55mmol)的甲磺酸(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊酯(实施例84A)在15ml的二甲基甲酰胺中的溶液与36mg(0.55mmol)的叠氮化钠混合物并在70℃下搅拌12小时。大多数溶剂通过真空蒸馏去除，将残余物用乙酸乙酯稀释。混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤数次，通过硫酸镁干燥并真空蒸发至干。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率188mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝344(M+H)+.
实施例86A{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 将188mg(0.55mmol)的{(4S)-5-叠氮基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例85A)在乙醇中的溶液在加入20mg的披钯活性炭(10％)后在RT下在大气压下氢化12小时。将混合物过滤通过硅藻土，将残余物用乙醇洗涤。将滤液真空蒸发至干。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率102mg(59％理论值)MS(ESI)m/z＝318(M+H)+；340(M+Na)+.
实施例87A-1-(羟基甲基)丙基]氨基甲酸苄酯 类似于实施例83A，由300mg(0.85mmol)的(2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸，在10ml的四氢呋喃中，使用86mg(0.85mmol)的4-甲基吗啉，92mg(0.85mmol)的氯甲酸乙酯和1.7ml(1.70mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率229mg(80％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝339(M+H)+；239(M-C5H8O2+H)+.
实施例88A[(3S)-3-氨基-4-羟基丁基]氨基甲酸叔丁酯盐酸盐 类似于实施例81A，由229mg(0.68mmol)的[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丙基]氨基甲酸苄酯(实施例87A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披钯活性炭(10％)进行制备。粗产物在1ml的1N盐酸中搅拌和真空蒸发并在高真空下干燥至恒重。
产率183mg(90％理论值)MS(ESI)m/z＝205(M-HCl+H)+.
实施例89A{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基甲酸叔丁酯
类似于实施例83A，由300mg(0.60mmol)的(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-环己基环己胺(1∶1)，在10ml的四氢呋喃中，和61mg(0.60mmol)的4-甲基吗啉，65mg(0.60mmol)的氯甲酸乙酯和1.2ml(1.20mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率174mg(95％理论值)MS(ESI)m/z＝305(M+H)+.
实施例90A甲磺酸(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酯 类似于实施例84A，从250mg(0.81mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基甲酸叔丁酯(实施例89A)，在20ml的二氯甲烷中，以及110mg(0.97mmol)的甲磺酰氯和0.23ml(1.6mmol)的三乙胺进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率200mg(64％理论值)MS(ESI)m/z＝383(M+H)+；400(M+Na)+.
实施例91A{(3S)-4-叠氮基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例85A，从200mg(0.52mmol)的甲磺酸(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酯(实施例90A)，在15ml的二甲基甲酰胺中，以及34mg(0.52mmol)的叠氮化钠进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率171mg(99％理论值)
实施例92A{(3S)-4-氨基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 制备的进行类似于实施例86A，171mg(0.52mmol)的{(3S)-4-叠氮基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯(实施例91A)，在10ml的乙醇中，加入20mg的披钯活性炭(10％)。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率117mg(75％理论值)MS(ESI)m/z＝304(M+H)+；326(M+Na)+.
实施例93A((4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-{[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由140mg(0.38mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和120mg(0.50mmol)的[(3S)-3-氨基-4-羟基丁基]氨基甲酸叔丁酯盐酸盐(实施例88A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入96mg(0.50mmol)的EDC，16mg(0.12mmol)的HOBt和0.17ml(1.00mmol)的二异丙基乙胺进行制备。产物通过制备RP-HPLC纯化(流动相水/乙腈梯度90∶10→10∶90)。
产率50mg(23％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.24min.
MS(EI)m/z＝553(M+H)+实施例94A
N2-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丙基]-L-鸟氨酰胺 类似于实施例81A，由50mg(0.09mmol)的((4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-{[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸苄酯(实施例93A)，在50ml的乙醇中，加入5mg的披钯活性炭(10％)。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率37mg(98％理论值)MS(ESI)m/z＝419(M+H)+实施例95A{2-[((2S，4R)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}戊酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯 85mg(0.17mmol)的5-苄氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸(实施例14A)，67.1mg(0.29mmol)的苄基-(2-氨基乙基)氨基甲酸酯盐酸盐和0.05ml(0.29mmol)的二异丙基乙胺，溶解在3ml的DMF中并冷却至0℃。加入55.8mg(0.29mmol)的EDC和7.6mg(0.06mmol)的HOBT，并且将混合物升温至室温并搅拌过夜。然后将混合物真空浓缩并通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇20∶1)产率73mg(59％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝3.04min.
MS(EI)m/z＝673(M+H)+.
实施例96A{2-[((2S，4R)-2-氨基-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}戊酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯盐酸盐 将53mg(0.08mmol)的来自实施例95A的化合物冷却至0℃，加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氢。在1小时后，真空浓缩，获得标题化合物。产率41mg(90％理论值).
LC-MS(方法17)Rt＝1.60min.
MS(EI)m/z＝459(M-HCl+H)+.
实施例97A(2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸 将500mg(1.98mmol)的(2S)-4-氨基-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}丁酸溶解在5ml水和5ml的1N氢氧化钠溶液中。加入在2ml的甲醇中的649mg(2.97mmol)的二碳酸二叔丁酯。将混合物在水浴中简短加热至30℃，并在室温下搅拌过夜。在真空浓缩后，通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇/浓氨水溶液85∶15∶3)获得标题化合物。
产率740mg(99％理论值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.08min.
MS(EI)m/z＝353(M+H)+.
实施例98A{(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)羰基]丙基}氨基甲酸苄酯 将44mg(0.12mmol)的来自实施例97A的化合物和40mg(0.21mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在1ml的DMF中并冷却至0℃，连续加入和40.3mg(0.21mmol)的EDC和5.51mg(0.04mmol)的HOBt。使得混合物升温至室温并搅拌过夜。在真空浓缩后，通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇20∶1 )获得标题化合物。
产率38mg(59％理论值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.25min.
MS(EI)m/z＝525(M+H)+.
实施例99A[3-({(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)-2-羟基丙基]氨基甲酸叔丁酯 将38mg(0.12mmol)的来自实施例98A的化合物溶解在10ml的甲醇中，和加入10mg的披钯活性炭(10％)。将混合物在大气压下氢化2小时并过滤通过硅藻土，将母液真空浓缩。
产率26mg(75％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.10min.
MS(EI)m/z＝391(M+H)+.
实施例100A[(1S)-2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯 将362.8mg(0.954mmol)的HATU和123.3mg(0.954mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至207.5mg(0.867mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-L-丝氨酸在10ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟，加入165mg(0.867mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发并将残余物置入二氯甲烷中。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率175mg(49％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.56min.
MS(EI)m/z＝412(M+H)+.
实施例101AN-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-L-丝氨酰胺 将131mg(0.318mmol)的[(1S)-2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯(实施例100A)溶解在20ml的乙醇中。向其中加入20mg的披钯活性炭(10％)，将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土，将滤液在旋转蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率63mg(71％理论值).
LC-MS(方法19)Rt＝0.53minMS(EI)m/z＝278(M+H)+.
实施例102A(2-{[N5-[{[(苄氧基)羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯 将419.3mg(1.1mmol)的HATU和258.5mg(2mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至408.4mg(1mmol)的N5-[{[(苄氧基)羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在15ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入253.76mg(1.1mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂并将残余物置入二氯甲烷中。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率334mg(41％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.94MS(EI)m/z＝585(M+H)+.
实施例103A[(6S)-6-氨基-7，12-二氧代-14-苯基-13-氧杂-2，8，11-三氮杂十四碳烷-1-亚氨基]氨基甲酸苄酯盐酸盐 将334mg(0.417mmol)的(2-{[N5-[{[(苄氧基)羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯(实施例102A)和17ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液的混合物在RT下搅拌4小时。
将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次，并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.05min.
MS(EI)m/z＝485(M-HCl+H)+.
实施例104A[2-({(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄酯 将549.7mg(1.446mmol)的HATU和339.7mg(2.629mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至在25ml的无水DMF中的500mg(1.31mmol)的(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸。在RT下搅拌15分钟后，加入333.5mg(1.446mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发，将残余物置入二氯甲烷。将有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率556.6mg(44％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.41min.
MS(EI)m/z＝557(M+H)+.
实施例105A((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸苄酯盐酸盐
在0℃下将8ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至320mg(0.287mmol)的[2-({(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄酯(实施例104A)在2ml的二噁烷中的溶液。在RT下1小时后，将反应溶液真空浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次，和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法20)Rt＝2.84min.
MS(EI)m/z＝457(M-HCl+H)+.
实施例106A{2-[((3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-{[N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}己酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯 将89.5mg(0.235mmol)的HATU和55.3mg(0.428mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至78.4mg(0.214mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在5ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入116mg(0.235mmol)的((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸苄酯盐酸盐(实施例105A)在5ml的无水DMF中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂并将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率48mg(28％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.33min.
MS(EI)m/z＝805(M+H)+.
实施例107A
((4S，10S)-4-氨基-10-{[(苄氧基)羰基]氨基}-5，12，17-三氧代-19-苯基-18-氧杂-6，13，16-三氮杂十九烷-1-基)氨基甲酸苄酯盐酸盐 在RT下将2.5ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至48mg(0.060mmol)的{2-[((3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-{[N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}己酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯(实施例106A)在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下4小时后，将反应溶液真空浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.69min.
MS(EI)m/z＝70 5(M-HCl+H)+.
实施例108A{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸苄酯 将658.5mg(1.8mmol)的HATU和129.2mg(1mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至366mg(1mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在15ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入182.2mg(1mmol)的3-氨基丙-1，2-二醇。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂和将残余物置入二氯甲烷中。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率135mg(30％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.79min.
MS(EI)m/z＝440(M+H)+.
实施例109A{(4S)-4-氨基-5-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸苄酯盐酸盐 在0℃下将4ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至135mg(0.31mmol)的{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸苄酯(实施例108A)在0.5ml的二噁烷中的溶液。在RT下1小时后，将反应溶液真空浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.01min.
MS(EI)m/z＝340(M-HCl+H)+.
实施例110A[2-({(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄酯
将321.9mg(0.847mmol)的HATU和199.3mg(1.534mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至410.8mg(0.770mmol)的(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-环己基环己胺(1∶1)在25ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入195.3mg(0.847mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂，将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率270mg(66％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝529(M+H)+.
实施例111A{2-[((2S)-2-氨基-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯盐酸盐 将270mg(0.511mmol)的[2-({(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄基-酯(实施例110A)和9ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液的混合物在RT下搅拌2小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.58min.
MS(EI)m/z＝429(M-HCl+H)+.
实施例112A{2-[((2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-{[N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯 将217.0mg(0.467mmol)的HATU和109.7mg(1.534mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至155.4mg(0.770mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在5ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入195.3mg(0.849mmol)的{2-[((2S)-2-氨基-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯盐酸盐(实施例111A)在5ml的无水DMF中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率71mg(21％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.42min.
MS(EI)m/z＝777(M+H)+实施例113A[(4S，7S)-4-氨基-7-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-5，8，13-三氧代-15-苯基-14-氧杂-6，9，12-三氮杂十五烷基-1-基]氨基甲酸苄酯盐酸盐
在RT下将3.7ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至71mg(0.091mmol)的{2-[((2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-{[N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸苄酯(实施例112A)在1.5ml的二噁烷中的溶液。在RT下4小时后，将反应溶液真空浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.70min.
MS(EI)m/z＝677(M-HCl+H)+实施例114A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸苄酯 将836.5mg(2.2mmol)的HATU和517.0mg(4mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至760.9mg(2mmol)的(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸在25ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入352.5mg(2.2mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率400mg(38％理论值)
LC-MS(方法19)Rt＝2.33min.
MS(EI)m/z＝523(M+H)+.
实施例115A[(4S)-4-氨基-6-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸叔丁酯
将400mg(0.765mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸苄酯(实施例114A)溶解在50ml的乙醇中。向其中加入80mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.42minMS(EI)m/z＝389(M+H)+.
类似于以上详述的实施例83A的方法，由适当的起始化合物制备在下表中详述的实施例116A和117A
实施例118A[(1S)-2-氨基-1-(羟基甲基)乙基]氨基甲酸苄酯盐酸盐 将269mg(0.83mmol)的苄基叔丁基[(2S)-3-羟基丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯(实施例117A)和5ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液的混合物在RT下搅拌2h。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率212mg(98％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝0.55min.
MS(EI)m/z＝225(M-HCl+H)+.
实施例119A{(1S)-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由120mg(0.33mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N2-[(苄氧基)羰基]-L-鸟氨酸和136mg(0.43mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入82mg(0.43mmol)的EDC和13mg(0.1mmol)的HOBt进行制备。将产物通过制备RP-HPLC纯化(流动相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)。
产率132mg(61％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.68min.
MS(EI)m/z＝666(M+H)+实施例120A[(4S)-4-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例81A，由132mg(0.20mmol)的{(1S)-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸苄酯(实施例119A)，在50ml的乙醇中，加入13mg的披钯活性炭(10％)进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率quant.
MS(ESI)m/z＝532(M+H)+实施例121A[2-({(2S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由300mg(0.82mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和246mg(1.06mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入204mg(1.06mmol)的EDC，33mg(0.25mmol)的HOBt和148mg(1.15mmol)的N，N-二异丙基乙胺进行制备。
产率397mg(89％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.20min.
MS(EI)m/z＝543(M+H)+实施例122A{(4S)-4-氨基-5-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸苄酯盐酸盐
将400mg(0.73mmol)的[2-({(2S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊酰基}氨基)乙基]氨基甲酸苄酯(实施例121A)和1ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液的混合物在RT下搅拌2小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次和在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quantLC-MS(方法19)Rt＝1.61min.
MS(EI)m/z＝443(M-HCl+H)+.
实施例123AN5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基-N5-[(苄氧基)羰基]-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鸟氨酰胺 在0℃下将350mg(0.92mmol)的HATU和330mg(2.56mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至320mg(0.88mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和350mg(0.73mmol)的{(4S)-4-氨基-5-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸苄酯(实施例122A)在5ml的无水DMF中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后蒸发溶剂，将残余物与水搅拌，通过过滤收集并在高真空下干燥。
产率480mg(68％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.61min.
MS(EI)m/z＝791(M+H)+.
实施例124AN5-[(苄氧基)羰基]-L-鸟氨酰基-N5-[(苄氧基)羰基]-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鸟氨酰胺盐酸盐 类似于实施例122A，由70mg(0.09mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基-N5-[(苄氧基)羰基]-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鸟氨酰胺(实施例123A)，在0.68ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液中进行制备。
产率65mg(98％理论值)MS(ESI)m/z＝691(M-HCl+H)+实施例125A[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由92mg(0.44mmol)的N-[(苄氧基)羰基]甘氨酸和181mg(0.57mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺，加入110mg(0.57mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt进行制备。产物通过制备RP-HPLC(流动相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)纯化。
产率105mg(47％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.12min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+
实施例126A{(4S)-5-[(氨基乙酰基)氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例81A，由105mg(0.21mmol)的[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯(实施例125A)，在50ml的乙醇中，加入11mg的披钯活性炭(10％)进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率64mg(83％理论值)MS(ESI)m/z＝375(M+H)+实施例127A[(1S)-1-[(苄氧基)甲基]-2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯 类似于实施例79A，由150mg(0.46mmol)的O-苄基-N-[(苄氧基)羰基]-L-丝氨酸和188mg(0.59mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入114 mg(0.57mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt进行制备。产物通过制备RP HPLC(流动相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)纯化。
产率129mg(45％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.81min.
MS(EI)m/z＝629(M+H)+
实施例128A{(4S)-5-{[(2S)-2-氨基-3-羟基丙酰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 将128mg(0.77mmol)的[(1S)-1-[(苄氧基)甲基]-2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯(实施例127A)在50ml的乙醇中的溶液在加入13mg的披钯活性炭(10％)后在RT下在大气压下氢化48小时。将混合物过滤通过硅藻土并将残余物用乙醇洗涤。将滤液真空蒸发至干。产物通过制备RP-HPLC(流动相水/乙腈 梯度90∶10→5∶95)纯化。
产率22mg(27％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝1.43min.
MS(EI)m/z＝405(M+H)+实施例129A{(1S)-4-氨基-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-氧代丁基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯 在0℃下将129mg(0.34mmol)的HATU和133mg(0.95mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至100mg(0.27mmol)的N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-谷氨酸和112mg(0.35mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)在5ml的无水DMF中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发并将残余物用水搅拌，通过过滤收集并在高真空下干燥。
产率45mg(25％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.27min.
MS(EI)m/z＝668(M+H)+.
实施例130A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2，5-二氨基-5-氧代戊酰基]氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯
将33mg(0.05mmol)的{(1S)-4-氨基-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-氧代丁基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例129A)在1ml的二甲基甲酰胺中的溶液在加入4mg(0.05mmol)的哌啶后在室温下搅拌45分钟。将溶剂蒸发并将粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
MS(ESI)m/z＝446(M+H)+类似于以上详述的实施例79A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例131A至135
类似于以上详述的实施例129A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例136A至141A
类似于以上详述的实施例81A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例142A至148A
类似于以上详述的实施例130A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例149A至153A
实施例154A[(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酸苄酯
将104.5mg(0.275mmol)的HATU和64.6mg(0.500mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至133.4mg(0.25mmol)的(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-环己基环己胺(1∶1)在10ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入52.3mg(0.275mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率25mg(19％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.23min.
MS(EI)m/z＝525(M+H)+实施例155A[3-({(2S)-4-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)-2-羟基丙基]氨基甲酸叔丁酯 将25mg(0.048mmol)的[(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酸苄酯(实施例154A)溶解在10ml的乙醇中。向其中加入10mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.10minMS(EI)m/z＝391(M+H)+实施例156A[2-({(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)丙-1，3-二基]双氨基甲酸二-叔丁酯
将11.9mg(0.294mmol)的HATU和64.1mg(0.535mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至142.7mg(0.267mmol)的(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基氨基)丁酸-N-环己基环己胺(1∶1)在10ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入100mg(0.294mmol)的(2-氨基丙-1，3-二基)双氨基甲酸二-叔丁酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率116mg(70％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.71min.
MS(EI)m/z＝624(M+H)+实施例157A[2-({(2S)-4-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)丙-1，3-二基]双氨基甲酸二-叔丁酯 将116mg(0.186mmol)的[2-({(2S)-4-{{(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)丙-1，3-二基]双氨基甲酸二-叔丁酯(实施例156A)溶解在20ml的乙醇中。向其中加入30mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率72mg(80％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.75minMS(EI)m/z＝490(M+H)+实施例158A(2-{[N-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酰基(seryl)]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯 将627.4mg(1.650mmol)的HATU和387.7mg(3.0mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至307.8mg(1.50mmol)的N-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酸在25ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入380.6mg(1.650mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率49mg(7％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝382(M+H)+实施例159A[2-(L-丝氨酰基氨基)乙基]氨基甲酸苄酯盐酸盐 将1.5ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至49mg(0.128mmol)的(2-{[N-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯(实施例158A)在1ml的二噁烷中的溶液。将混合物在RT下搅拌2小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率33mg(91％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝0.89min.
MS(EI)m/z＝282(M-HCl+H)+实施例160A{(1S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-1-[2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-2-氧代乙基]戊基}氨基甲酸苄酯 将418.2mg(1.1mmol)的HATU和258.7mg(2mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至428.5mg(1mmol)的(3S)-3，7-双{[(苄氧基)羰基]氨基}庚酸在30ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入209.2mg(1.1mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率310mg(47％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.38min.
MS(EI)m/z＝601(M+H)+实施例161A((5S)-7-[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-7-氧代庚基)氨基甲酸苄酯盐酸盐 在0℃下将11ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至160mg(0.267mmol)的{(1S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-1-[2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)-2-氧代乙基]戊基}氨基甲酸苄酯(实施例160A)在5.5ml的二噁烷中的溶液。将混合物在RT下搅拌1小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.77min.
MS(EI)m/z＝501(M-HCl+H)+.
实施例162A[(1S)-2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯 将1.05g(2.759mmol)的HATU和648.3mg(5.016mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至600mg(2.5mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-L-丝氨酸在25ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入442.0mg(2.76mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率295mg(31％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.63min.
MS(EI)m/z＝382(M+H)+实施例163A[(1S)-2-[(2-氨基乙基)氨基]-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯盐酸盐
将在25ml的二噁烷中的58mg(0.152mmol)的[(1S)-2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸苄酯(实施例162A)在二噁烷中的4M氯化氢溶液的混合物在RT下搅拌2小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率42mg(65％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝0.59min.
MS(EI)m/z＝282(M-HCl+H)+.
实施例164AN5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-丝氨酰胺 在0℃下将2.76g(7.27mmol)的HATU和1.71g(13.22mmol)的N，N-二异丙基乙胺加至2.42g(6.61mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸在10ml的无水DMF中的溶液。在RT下搅拌15分钟后，加入2.1g(6.61mmol)的[2-(L-丝氨酰基氨基)乙基]氨基甲酸苄酯盐酸盐(实施例159A)。将反应混合物在RT下搅拌15小时。然后将溶剂蒸发和将残余物置入二氯甲烷。有机相用水洗涤，通过硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化。
产率122mg(3％理论值)
LC-MS(方法17)Rt＝2.25min.
MS(EI)m/z＝630(M+H)+实施例165AN5-[(苄氧基)羰基]-L-鸟氨酰基-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-丝氨酰胺盐酸盐 在RT下将10ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加至120mg(0.191mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-丝氨酰胺(实施例164A)在5ml的二噁烷中的溶液。将混合物在RT下搅拌1小时。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法19)Rt＝1.63min.
MS(EI)m/z＝530(M-HCl+H)+.
实施例166A(3-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将50mg(0.076mmol)的来自实施例29A的化合物和40mg(0.10mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-L-鸟氨酰胺(实施例82A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。将溶液真空浓缩，并将残余物用水搅拌。剩余固体通过抽吸过滤收集并通过硅胶色谱法纯化(流动相二氯甲烷/异丙醇30∶1至10∶1)。
产率47mg(48％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.40min.
MS(EI)m/z＝1043(M+H)+实施例167A(2-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将50mg(0.076mmol)的来自实施例29A的化合物和37mg(0.10mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺(实施例81A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBT。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。将溶液真空浓缩，并将残余物用水搅拌。剩余固体通过抽吸过滤收集并通过硅胶色谱法纯化(流动相二氯甲烷/异丙醇30∶1至10∶1)。
产率43mg(55％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.29min.
MS(EI)m/z＝1013(M+H)+实施例168A((3S)-3-{[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-1 1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将50mg(0.076mmol)的来自实施例29A的化合物和42mg(0.10mmol)的N2-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)丙基]-L-鸟氨酰胺(实施例94A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBT。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。将溶液真空浓缩，并将残余物用水搅拌。剩余固体通过抽吸过滤收集并通过硅胶色谱法纯化(流动相二氯甲烷/异丙醇30∶1至10∶1)。
产率25mg(31％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.18min.
MS(EI)m/z＝1057(M+H)+实施例169A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸二盐酸盐
将930mg(0.91mmol)的来自实施例78A的化合物悬浮在260ml的冰醋酸/水/乙醇(4/1/1)中，与270mg的披钯活性炭(10％)混合并其大气压下在室温下氢化24小时。通过过滤通过硅藻土去除晶体，接着真空蒸发滤液至干燥并在搅拌同时加入36.5ml的0.1N盐酸。将混合物在真空中蒸发至干并干燥至恒重。
产率500mg(98％理论值)LC-MS(方法20)Rt＝2.45min.
MS(ESI)m/z＝485(M-2HCl+H)+实施例170A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 将710mg(1.27mmol)的来自实施例169A的化合物溶解在15ml水和6.5ml(6.5mmol)的1N氢氧化钠溶液中，在搅拌同时在室温下，加入溶解在5.5ml的甲醇中的834mg(3.82mmol)的二碳酸二叔丁酯。在1小时后反应完成(通过分析RP-HPLC检查，流动相乙腈/水)。通过滴加0.1N盐酸将pH调节至3。每次用20ml的乙酸乙酯萃取三次，接着用硫酸钠干燥并真空蒸发至恒重。
产率770mg(88％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.16min.
MS(ESI)m/z＝685(M+H)+
实施例171A(2-{[(2S，4R)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-4-羟基戊酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯 将44mg(0.07mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(实施例65A)溶解在3ml的DMF中，并加入38.9mg(0.08mmol)的来自实施例96A的化合物。将混合物冷却至0℃和连续加入29.8mg(0.08mmol)的HATU和13mg(0.1mmol)的二异丙基乙胺。在0℃下30分钟后，使得混合物升温至室温，并且在加入另外26mg(0.2mmol)的二异丙基乙胺后，搅拌过夜。真空浓缩，接着通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇9∶1)，然后通过制备HPLC纯化。
产率14mg(20％理论值).
LC-MS(方法19)Rt＝2.42min.
MS(EI)m/z＝1114(M+H)+.
实施例172A{(2R)-3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羟基丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]-2-羟基丙基}氨基甲酸叔丁酯二盐酸盐 将23mg(0.02mmol)的来自实施例171A的化合物溶解在20ml的冰醋酸/甲醇/水混合物(4/1/1)中，和加入12mg的披钯活性炭(10％)。将混合物在大气压下氢化4小时，然后通过过滤去除晶体。将如此获得的母液真空蒸发至干，与2ml的0.1N盐酸搅拌并再次蒸发至干。如此获得的粗产物在不进一步纯化下反应。
产率16mg(83％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.23min.
MS(EI)m/z＝845(M-2HCl+H)+.
实施例173A(3-{[(2S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)丁酰基]氨基}-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯
将36mg(0.06mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基-11-[3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(实施例29A)和26mg(0.07mmol)的[3-({(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)-2-羟基丙基]氨基甲酸叔丁酯(实施例99A)溶解在1ml的DMF中并冷却至0℃，和连续加入18mg(0.09mmol)的EDC和2mg(0.02mmol)的HOBt。使得混合物升温至室温并搅拌过夜。将残余物与水搅拌，由此获得的沉淀通过过滤收集，干燥并通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇100∶7).
产率9mg(14％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝2.22min.
MS(EI)m/z＝1029(M+H)+.
实施例174A(2-{[(2S，4R)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧-羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基丙基]}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-4-羟基戊酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯
将30mg(0.05mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基丙基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(实施例29A)溶解在1ml的DMF中，加入27mg(0.05mmol)的来自实施例96A的化合物。将混合物冷却至0℃，连续加入21mg(0.05mmol)的HATU和10mg(0.07mmol)的二异丙基乙胺。在0℃下30min后，使得混合物升温至室温，在加入另外0.20mg(0.14mmol)的二异丙基乙胺后，搅拌过夜。真空浓缩，接着通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇/浓氨水溶液90∶10∶1)。在浓缩级分后，在乙腈中搅拌残余物并将沉淀通过过滤收集并真空干燥。
产率16mg(30％理论值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.52min.
MS(EI)m/z＝1197(M+H)+.
实施例175A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羟基丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯
将16mg(0.01mmol)的来自实施例174A的化合物溶解在10ml的甲醇中，并加入8mg的披钯活性炭(10％)。将混合物在大气压下氢化4小时，然后通过过滤去除晶体。将如此获得的母液真空蒸发至干。如此获得的粗产物在不进一步纯化下反应。
产率10mg(74％理论值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.18min.
MS(EI)m/z＝829(M+H)+.
实施例176A(2-{[(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己酰基]-氨基}乙基)氨基甲酸苄酯 在氩气下，将30mg(0.044mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(实施例170A)和80mg(0.162mmol)的苄基-((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸酯盐酸盐(实施例105A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入31.16mg(0.162mmol)的EDC和1.95mg(0.014mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在50℃下搅拌3天。将溶液真空浓缩并将残余物通过制备HPLC纯化。
产率14.5mg(30％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.55min.
MS(EI)m/z＝1123(M+H)+.
实施例177A[(4S)-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-4-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 在氩气下，将50mg(0.076mmol)的来自实施例29A的化合物和53mg(0.10mmol)的[(4S)-4-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(实施例120A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12小时。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率40mg(45％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.46min.
MS(EI)m/z＝1170(M+H)+实施例178A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)乙酰基]氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 在氩气下，将43mg(0.066mmol)的来自实施例29A的化合物和32mg(0.085mmol)的{(4S)-5-[(氨基乙酰基)氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例126A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入16mg(0.085mmol)的EDC和2.7mg(0.02mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率11.5mg(17％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.47min.
MS(EI)m/z＝1013(M+H)+
实施例179A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，1 8-六烯-8-基]羰基}氨基)-3-羟基丙酰基]氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 在氩气下，将28mg(0.042mmol)的来自实施例29A的化合物和22mg(0.055mmol)的{(4S)-5-{[(2S)-2-氨基-3-羟基丙酰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例128A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入11mg(0.055mmol)的EDC和1.7mg(0.013mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过色谱法纯化(Sephadex LH20，流动相甲醇/乙酸(0.25％))。
产率18.4mg(42％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.43min.
MS(EI)m/z＝1043(M+H)+实施例180A{(1S)-1-({[(2S)-5-氨基-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-5-氧代戊酰基]氨基}甲基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将27mg(0.042mmol)的来自实施例29A的化合物和21mg(0.047mmol)的[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2，5-二氨基-5-氧代戊酰基]氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(实施例130A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入10mg(0.053mmol)的EDC和1.7mg (0.013mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过色谱法纯化(Sephadex LH20，流动相甲醇/乙酸(0.25％))。
产率16mg(36％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.38min.
MS(EI)m/z＝1084(M+H)+实施例181AN5-[(苄氧基)羰基]-N2-{[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鸟氨酰基-N5-[(苄氧基)羰基]-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鸟氨酰胺
在氩气下，将40mg(0.061mmol)的来自实施例29A的化合物和66mg(0.091mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-L-鸟氨酰基-N5-[(苄氧基)羰基]-N-(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鸟氨酰胺(实施例124A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入15mg(0.079mmol)的EDC和2.5mg(0.018mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过制备HPLC纯化(流动相乙腈/水梯度)。
产率25mg(26％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.73min.
MS(EI)m/z＝1330(M+H)+实施例182A(2-{[2-({[(8S，11S)，14-[-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)乙基]氨基}-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将34mg(0.052mmol)的来自实施例29A的化合物和17mg(0.078mmol)的{2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}氨基甲酸叔丁酯(Russ.J.Bioorg.Chem.1994，20，397-405)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入13mg(0.068mmol)的EDC和2.1mg(0.016mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过色谱法纯化(Sephadex LH20，流动相甲醇/乙酸(0.25％))。
产率23mg(50％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.16min.
MS(EI)m/z＝856(M+H)+类似于实施例166A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例183A至203A
实施例204A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯 将14.5mg(0.013mmol)的(2-{[(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[1 4.3.1.12，6]he-nicosa-1(20)，2(2 1)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己酰基]氨基}乙基)-氨基甲酸苄酯(实施例176A)溶解在3ml的乙醇中。向其中加入15mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率8mg(73％理论值).
LC-MS(方法19)Rt＝1.59min.
MS(EI)m/z＝855(M+H)+.
实施例205A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(1S)-4-氨基-1-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]丁基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氢盐)
将9mg(0.007mmol)的((1S)-4-{[(2S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸苄酯(实施例189A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物中。向其中加入1mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在RT下在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.33min.
MS(EI)m/z＝941(M-3HOAc+H)+实施例206A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氢盐)
将12mg(0.011mmol)的(2-{[(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯(实施例190A)加入3ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物中。向其中加入1.5mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在RT下在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.48min.
MS(EI)m/z＝827(M-2HOAc+H)+实施例207A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氢盐)
将29mg(0.027mmol)的(2-{[(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)丁酰基]氨基}乙基)氨基甲酸苄酯(实施例191A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入2.5mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在RT下在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。
产率16mg(74％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝1.48min.
MS(EI)m/z＝799(M-2HOAc+H)+实施例208A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)氨基]羰基}-1 4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氢盐)
将12mg(0.009mmol)的{(3S)-3-{[(2S)-5-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-4-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-4-氧代丁基}氨基甲酸苄酯(实施例192A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入1mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在RT下在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。
产率7mg(84％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.31min.
MS(EI)m/z＝913(M-3HOAc+H)+实施例209A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亚氨基)甲基]氨基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(三氟乙酸氢盐)
将13.4mg(0.012mmol)的[(6S)-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-7，12-二氧代-14-苯基-13-氧杂-2，8，11-三氮杂十四碳烷-1-亚氨基]氨基甲酸苄酯(实施例194A)加入5ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入1mg的披钯活性炭(10％)，将混合物然后在RT下在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。纯化目标产物并通过制备HPLC转化为二(三氟乙酸氢盐)(Kromasil，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率5.3mg(41％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.19min.
MS(EI)m/z＝855(M-2TFA+H)+实施例210AN2-{[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鸟氨酰基-N-(2-氨基乙基)-L-鸟氨酰胺三(乙酸氢盐)
将25mg(0.02mmol)的来自实施例181A的化合物加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入3mg的披钯活性炭(10％)，并将混合物然后在RT下在大气压下氢化48h。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土并用乙醇洗涤，并将滤液真空蒸发至干。
产率8.5mg(41％理论值)LC-MS (方法20)Rt＝2.63min.
MS(EI)m/z＝927(M-3HOAc+H)+类似于实施例166A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例211A至215A。
类似于实施例205A的方法，由适当的原材料制备在下表中列出的实施例216A至220A。
实施例221A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸氢盐
将45mg(0.057mmol)的来自实施例183A的化合物溶解在1ml的乙-1，2-二胺中，在加入0.75mg的氰化钾后，在RT下搅拌12h。然后将混合物用15ml水稀释，用乙酸乙酯萃取一次。有机相用水洗涤，将合并的水相真空蒸发至干。将残余物通过RP-HPLC(Kromasil 100C18，流动相乙腈/三氟乙酸(0.2％)5∶95至95∶5)纯化。
产率6.4mg(15％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝1.69min.
MS(EI)m/z＝756(M-TFA+H)+实施例222A苄基叔丁基-[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯 在氩气下，将0.208g(0.40mmol)的3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-N-(叔丁氧羰基)-L-丙氨酸-N-环己基环己胺(1∶1)，126mg(0.40mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)和0.21ml的三乙胺(1.48mmol)溶解在5ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入130mg(0.68mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸镁干燥并真空蒸发。粗产物通过制备HPLC(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)纯化。
产率88mg(35％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.65min.
MS(EI)m/z＝638(M+H)+实施例223A{(4S)-5-({(2S)-3-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丙酰基}氨基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯乙酸氢盐 将110mg(0.172mmol)的苄基叔丁基[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯(实施例222A)溶解在25ml的冰醋酸/水混合物(4∶1)中。向其中加入20mg的披钯活性炭(10％)，和然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率85mg(93％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.67min.
MS(EI)m/z＝503(M-HOAc+H)+实施例224A[(5S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-7-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-7-氧代庚基]氨基甲酸苄酯
在氩气下，将1g(2.54mmol)的(3S)-7-{[(苄氧基)羰基]氨基}-3-[(叔丁氧羰基)氨基]庚酸，406mg(2.54mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯和0.96ml的三乙胺(6.85mmol)溶解在20ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入826mg(4.3mmol)的EDC和113mg(0.84mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝2.21min.
MS(EI)m/z＝537(M+H)+实施例225A((1S)-5-氨基-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}戊基)氨基甲酸叔丁酯乙酸氢盐 将1.3g(2.42mmol)的[(5S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-7-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-7-氧代庚基]氨基甲酸苄酯(实施例224A)溶解在100ml的冰醋酸/水混合物(4∶1)中。向其中加入70mg的披钯活性炭(10％)，和然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过预洗涤的硅藻土将滤液在旋转式蒸发仪上真空浓缩。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法19)Rt＝1.35min.
MS(EI)m/z＝403(M-HOAc+H)+实施例226A((1S，8S)-8-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-17，17-二甲基-2，10，15-三氧代-16-氧杂-3，11，14-三氮杂octadec-1-基)氨基甲酸苄酯
在氩气下，将0.397g(1.08mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸，0.500g(1.08 mmol)的((1S)-5-氨基-1-{2-[(2-{[(苄氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}戊基)氨基甲酸叔丁酯(实施例225A)和0.56ml的三乙胺(4.0mmol)溶解在10ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入352mg(1.84mmol)的EDC和48.2mg(0.36mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率290mg(36％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.30min.
MS(EI)m/z＝751(M+H)+实施例227A{(4S，11S)-4-氨基-11-[(叔丁氧羰基)氨基]-20，20-二甲基-5，13，18-三氧代-19-氧杂-6，14，17-三氮杂henicos-1-基}氨基甲酸叔丁酯乙酸氢盐 将290mg(0.390mmol)的((1S，8S)-8-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-17，17-二甲基-2，10，15-三氧代-16-氧杂-3，11，14-三氮杂-十八烷-1-基)氨基甲酸苄酯(实施例226A)溶解在10ml的4/1冰醋酸/水混合物中。向其中加入75mg的披钯活性炭(10％)，然后将混合物在大气压下氢化15小时。将反应混合物过滤通过Millipore滤器并将滤液浓缩，在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.72min.
MS(EI)m/z＝617(M-HOAc+H)+实施例228AN5-[N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-D-鸟氨酰基]-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 在氩气下，将286mg(0.78mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-D-鸟氨酸和439mg(1.17mmol)的来自实施例143A的化合物溶解在16ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入255mg(1.33mmol)的EDC和106mg(0.78mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌48h。真空浓缩溶液和将残余物置入二氯甲烷，用饱和碳酸氢钠水溶液，0.1N盐酸和水洗涤。将合并的有机相真空浓缩，如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率0.58g(quant.)LC-MS(方法17)Rt＝2.59min.
MS(EI)m/z＝723(M+H)+实施例229AN5-[N5-(叔丁氧羰基)-D-鸟氨酰基]-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 将0.58g(0.80mmol)的来自实施例228A的化合物溶解在27ml的乙醇中，加入0.06g(0.06mmol)的Pd/C。将混合物在大气压下氢化12小时，在过滤通过硅藻土后，真空浓缩滤液。如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率0.47g(97％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝1.61min.
MS(EI)m/z＝589(M+H)+实施例230A{(4S)-6-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.1g(0.263mmol)的(3S)-6-{[(苄氧基)羰基]氨基}-3-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸(Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，8，1477-1482)和0.108g(0.342mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.066g(0.342mmol)的EDC和0.011g(0.079mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.127g(71％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.36min.
MS(EI)m/z＝680(M+H)+实施例231A{(1S)-4-氨基-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 将20mg的披钯活性炭(10％)加至0.127g(0.19mmol)的来自实施例230A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
MS(EI)m/z＝546(M+H)+实施例232A苄基叔丁基[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯 在氩气下，将0.127g(0.37mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)-氨基]-L-丙氨酸和0.193g(0.49mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.093g(0.49mmol)的EDC和0.015g(0.11mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.126g(53％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.65min.
MS(EI)m/z＝638(M+H)+实施例233A[(2S)-2-氨基-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯 将20mg的披钯活性炭(10％)加至0.122g(0.19mmol)的来自实施例232A的化合物在50ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化4小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
MS(EI)m/z＝504(M+H)+实施例234A{(1S)-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸苄酯
在氩气下，将0.1g(0.26mmol)的(3S)-3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸(J.Med.Chem.2002，45，4246-4253)和0.11g(0.34mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.065g(0.34mmol)的EDC和0.011g(0.079mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.146g(82％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.5min.
MS(EI)m/z＝680(M+H)+实施例235A[(4S)-4-氨基-6-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸叔丁酯 将22mg的披钯活性炭(10％)加至0.146g(0.22mmol)的来自实施例234A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
MS(EI)m/z＝546(M+H)+实施例236A{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基甲酸苄酯 类似于实施例83A，由300mg(0.85mmol)的(2S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸，在10ml的四氢呋喃中，以及86mg(0.85mmol)的4-甲基吗啉，92mg(0.85mmol)的氯甲酸乙酯和1.7ml(1.70mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液进行制备。在不进一步纯化下使得产物反应。
产率238mg(82％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝339(M+H)+实施例237A[(1S)-3-氨基-1-(羟基甲基)丙基]氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例81A，由237mg(0.7mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基甲酸苄酯(实施例236A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披钯活性炭(10％)进行制备。
产率177mg(quant.)MS(ESI)m/z＝205(M+H)+.
实施例238A
{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.082g(0.22mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和0.059g(0.29mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}氨基甲酸苄酯(实施例237A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.056g(0.29mmol)的EDC和0.009g(0.067mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.088g，(72％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.04min.
MS(EI)m/z＝553(M+H)+实施例239AN5-(叔丁氧羰基)-N-{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羟基丁基}-L-鸟氨酰胺 将17mg的披钯活性炭(10％)加至0.088g(0.16mmol)的来自实施例238A的化合物在10ml的乙醇中的混合物中，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.064g(96％理论值)MS(EI)m/z＝419(M+H)+实施例240A苄基叔丁基-[5-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-5-氧代戊-1，3-二基]双氨基甲酸酯 在氩气下，将0.20g(0.55mmol)的3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-5-[(叔丁氧-羰基)氨基]戊酸(Bioorg.Chem.Med.Lett.2003，13，241-246)和0.114g(0.71mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.136g(0.71mmol)的EDC和0.022g(0.164mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.074g(27％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.37min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+实施例241A[3-氨基-5-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯
将15mg的披钯活性炭(10％)加至0.074g(0.15mmol)的来自实施例240A的化合物在10ml的乙醇中的混合物中，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.050g(92％理论值)MS(EI)m/z＝375(M+H)+实施例242A[3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.10g(0.45mmol)的N-[(苄氧基)羰基]β-丙氨酸和0.185g(0.58mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.112g(0.58mmol)的EDC和0.018g(0.134mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.215g(92％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝523(M+H)+
实施例243A{(4S)-5-[(3-氨基丙酰基)氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 将40mg的披钯活性炭(10％)加至0.215g(0.41mmol)的来自实施例242A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.160g(quant.)MS(EI)m/z＝389(M+H)+实施例244A苄基叔丁基-[5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊-1，3-二基]双氨基甲酸酯 在氩气下，将0.146g(0.40mmol)的3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-5-[(叔丁氧羰基)氨基]戊酸和0.164g(0.52mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(实施例86A)溶解在8ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.10g(0.52mmol)的EDC和0.009g(0.12mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.232g，(87％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.73min.
MS(EI)m/z＝666(M+H)+实施例245A[3-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 将35 mg的披钯活性炭(10％)加至0.232g(0.35mmol)的来自实施例244A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.175g(94％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.8min.
MS(EI)m/z＝532(M+H)+实施例246A{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羟基戊基}氨基甲酸苄酯 类似于实施例83A，由1.0g(2.73mmol)的N5-[(苄氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸，在35ml的四氢呋喃中，以及0.276g(2.73mmol)的4-甲基吗啉，0.296g(2.73mmol)的氯甲酸乙酯和5.5ml(5.5mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液进行制备。将产物通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.398g(41％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.84min.
MS(EI)m/z＝354(M+H)+实施例247A[(1S)-4-氨基-1-(羟基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例81A，由0.232g(0.66mmol)的{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羟基戊基}氨基甲酸苄酯(实施例246A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披钯活性炭(10％)。
产率135mg(94％理论值)MS(ESI)m/z＝219(M+H)+.
实施例248A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羟基戊基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.155g(0.42mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和0.12g(0.55mmol)的[(1S)-4-氨基-1-(羟基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(实施例247A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.105g(0.55mmol)的EDC和0.017g(0.13mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.164g(69％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.05min.
MS(EI)m/z＝567(M+H)+实施例249AN5-(叔丁氧羰基)-N-{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羟基戊基}-L-鸟氨酰胺 将30mg的披钯活性炭(10％)加至0.164g(0.29mmol)的来自实施例248A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.125g(quant.)MS(EI)m/z＝433(M+H)+实施例250A苄基叔丁基-[(2S)-3-羟基丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯 类似于实施例83A，由0.40g(1.18mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-丙氨酸，在20ml的四氢呋喃中，以及0.12g(1.18mmol)的4-甲基吗啉，0.13g(1.18mmol)的氯甲酸乙酯和2.4ml(2.4mmol)的在四氢呋喃中的1M氢化铝锂溶液进行制备。将产物通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.193g(50％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.79min.
MS(EI)m/z＝325(M+H)+实施例251A[(2S)-2-氨基-3-羟基丙基]氨基甲酸叔丁酯 类似于实施例81A，由0.193g(0.59mmol)的苄基叔丁基-[(2S)-3-羟基丙-1，2-二基]双氨基甲酸酯(实施例250A)在10ml的乙醇加入23mg的披钯活性炭(10％)进行制备。
产率112mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝191(M+H)+.
实施例252A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(1S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)乙基]氨基}羰基)丁基]氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.18g(0.49mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和0.122g(0.64mmol)的[(2S)-2-氨基-3-羟基丙基]氨基甲酸叔丁酯(实施例251A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.123g(0.64mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.216g(81％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.07min.
MS(EI)m/z＝539(M+H)+实施例253AN5-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羟基甲基)乙基]-L-鸟氨酰胺 将40mg的披钯活性炭(10％)加至0.216g(0.40mmol)的来自实施例252A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
MS(EI)m/z＝405(M+H)+实施例254A[3-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.20g(0.90mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-β-丙氨酸和0.187g(1.17mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.223g(1.17mmol)的EDC和0.036g(0.27mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.30g(82％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝1.93min.
MS(EI)m/z＝366(M+H)+实施例255AN-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-β-丙氨酰胺 将80mg的披钯活性炭(10％)加至0.30g(0.82mmol)的来自实施例254A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.190g(quant.)MS(EI)m/z＝232(M+H)+实施例256A((6S)-6-{[(苄氧基)羰基]氨基}-10-羟基-15，15-二甲基-7，13-二氧代-14-氧杂-2，8，12-三氮杂十六烷-1-亚氨基)亚氨基二碳酸二-叔丁酯
在氩气下，将0.30g(0.49mmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-N5-[[二(叔丁氧羰基)氨基](亚氨基)甲基]-L-鸟氨酸-环己胺(1∶1)和0.12g(0.64mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.123g(0.64mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体通过制备HPLC纯化(Kromasil，流动相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
产率0.183g(54％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.58min.
MS(EI)m/z＝681(M+H)+实施例257AN5-[[二(叔丁氧羰基)氨基](亚氨基)甲基]-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}-L-鸟氨酰胺 将28mg的披钯活性炭(10％)加至0.182g(0.27mmol)的来自实施例256A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率0.138g(94％理论值)MS(EI)m/z＝547(M+H)+实施例258A
{(1S)-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羟基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.20g(0.50mmol)的N2，N5-二[(苄氧基)羰基]-L-鸟氨酸和0.124g(0.65mmol)的(3-氨基-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.124g(0.65mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.245g(86％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.15min.
MS(EI)m/z＝573(M+H)+实施例259A((4S)-5-[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]-4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸苄酯盐酸盐 在0℃下将6.8ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至0.263g(0.46mmol)的来自实施例258A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.205g(88％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.47min.
MS(EI)m/z＝473(M-HCl+H)+实施例260A[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸苄酯 在氩气下，将0.50g(0.96mmol)的3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-N-(叔丁氧-羰基)-L-丙氨酸-N-环己基环己胺(1∶1)和0.154g(0.96mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在10ml的二甲基甲酰胺和0.5ml的三乙胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.314g(1.64mmol)的EDC和0.043g(0.32mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物置入乙酸乙酯中。将有机相连续用饱和碳酸氢钠和氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并真空蒸发。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率0.41g(88％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝2.17min.
MS(EI)m/z＝481(M+H)+实施例261A3-氨基-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-丙氨酰胺乙酸氢盐 将50mg的披钯活性炭(10％)加至0.41g(0.847mmol)的来自实施例260A的化合物在80ml的乙酸/乙醇/水(4∶1∶1)中的混合物，并然后将混合物在大气压下氢化12小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，将滤液在真空中浓缩并在高真空下干燥。粗产物在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.09min.
MS(EI)m/z＝347(M-HOAc+H)+实施例262A{3-[(8S，11S，14S)-8-{(6S，11S)-6，11-二[(叔丁氧羰基)氨基]-18，18-二甲基-8，16-二氧代-17-氧杂-2，9，15-三氮杂十九碳烷-1-酰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯 在氩气下，将20mg(0.03mmol)的来自实施例29A的化合物和22mg(0.04mmol)的{(1S)-4-氨基-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代-乙基]丁基}氨基甲酸叔丁酯(实施例231A)溶解在1ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入7.6mg(0.04mmol)的EDC和1.24mg (0.009mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌12h。真空浓缩溶液并将残余物用水搅拌。剩余的固体通过抽吸过滤收集并通过色谱法纯化(Sephadex LH20，流动相甲醇/乙酸(0.25％))。
产率25.4mg(70％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝2.81min.
MS(EI)m/z＝1184(M+H)+
实施例263AN5-{N-[(苄氧基)羰基]甘氨酰基}-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 在氩气下，将300mg(1.43mmol)的N-[(苄氧基)羰基]甘氨酸和830mg(2.15mmol)的来自实施例143A的化合物溶解在28ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入467mg(2.44mmol)的EDC和194mg(1.43mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌48小时。真空浓缩溶液并将残余物置入二氯甲烷中并用饱和碳酸氢钠溶液，0.1N盐酸和水洗涤。将合并的有机相真空浓缩，将如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.98min.
MS(EI)m/z＝566(M+H)+实施例264AN5-甘氨酰基-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 将1030mg(1.82mmol)的来自实施例263A的化合物溶解在60ml的乙醇中，加入100mg(0.09mmol)的Pd/C(10％)。将混合物在大气压下氢化过夜，在通过硅藻土过滤后，将滤液真空浓缩。如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率693mg(84％理论值)
LC-MS(方法17)Rt＝1.41min.
MS(EI)m/z＝432(M+H)+实施例265AN5-[N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 在氩气下，将1.95g(5.31mmol)N2-[(苄氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酸和3.12g(7.97mmol)的来自实施例143A的化合物溶解在100ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入1.73g(9.03mmol)的EDC和0.72g(5.31mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌48小时。真空浓缩溶液并将残余物置入二氯甲烷中并用饱和碳酸氢钠水溶液，0.1N盐酸和水洗涤。将合并的有机相真空浓缩，将如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率4.23g(96％理论值)LC-MS(方法19)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝723(M+H)+实施例266AN5-[N5-(叔丁氧羰基)-L-鸟氨酰基]-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺
将4.23g(5.09mmol)的来自实施例265A的化合物溶解在250ml的乙醇中，加入0.42g(0.39mmol)的Pd/C(10％)。将混合物在大气压下氢化6小时，在过滤通过硅藻土后，将滤液真空浓缩。如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率2.4g(72％理论值)LC-MS(方法12)Rt＝1.31min.
MS(EI)m/z＝589(M+H)+实施例267A((1S，7S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-15，15-二甲基-2，8，13-三氧代-14-氧杂-3，9，12-三氮杂十六碳烷-1-基)氨基甲酸苄酯 在氩气下，将250mg(0.71mmol)的(2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸和410mg(1.06mmol)的来自实施例143A的化合物溶解在14ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入231mg(1.21mmol)的EDC和96mg(0.71mmol)的HOBt。将混合物缓慢升温至RT并在RT下搅拌48小时。真空浓缩溶液并将残余物置入二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液，0.1N盐酸和水洗涤。将合并的有机相真空浓缩，将如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率355mg(66％理论值)
LC-MS(方法12)Rt＝2.32min.
MS(EI)m/z＝709(M+H)+实施例268AN5-{(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鸟氨酰胺 将355mg(0.5mmol)的来自实施例267A的化合物溶解在17ml的乙醇中，加入36mg(0.03mmol)的Pd/C(10％)。将混合物在大气压下氢化过夜，并且在过滤通过硅藻土后，将滤液真空浓缩。如此获得的固体在不进一步纯化下反应。
产率304mg(82％理论值)LC-MS(方法17)Rt＝1.64min.
MS(EI)m/z＝575(M+H)+类似于实施例262A的方法，制备下表中列出的实施例269A至286A。
类似于实施例171A的方法，制备下表列出的实施例294A至297A。
类似于实施例205A的方法，制备下表详细列出的实施例298A。
例举性实施方案从部分保护的双苯霉素衍生物(如，例如，29A)起始，可以合成例举性的实施方案。

实施例1(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺(carboxamide)四盐酸盐 将36mg(0.035mmol)的(3-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例166A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氢中并在室温下搅拌2h。将溶剂真空蒸发和将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率25mg(92％理论值).
MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-2.05(m，8H)，2.75-3.15(m，8H)，3.17-3.45(m，3H)，3.54(mc，1H)，3.73(mc，1H)，3.87-4.0(m，2H)，4.23(mc，1H)，4.41(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.83-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.36(d，1H)，7.42(d，1H).
将四盐酸盐通过制备HPLC(Reprosil ODS-A，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)转化为四(三氟乙酸氢盐)。
实施例2(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四(三氟乙酸氢盐) 将29.7mg(0.029mmol)的(2-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例167A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氢中并在室温下搅拌2小时。将溶剂真空蒸发和将剩余的固体通过制备HPLC(ReprosilODS-A，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)转化为四(三氟乙酸氢盐)。
产率20mg(64％理论值).
MS(ESI)m/z＝613(M-4TFA+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.53-1.93(m，8H)，2.32(mc，1H)，2.93(mc，4H)，3.02(mc，1H)，3.08(mc，2H)，3.23(mc，1H)，3.35-3.60(m，3H)，4.23(mc，2H)，4.40(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.82-6.93(m，2H)，6.97(s，1H)，7.25(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例3(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((4S)-4-氨基-5-{[(1S)-3-氨基-1-(羟基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
将24.9mg(0.024mmol)的((3S)-3-{[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯(实施例168A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氢中并在室温下搅拌2小时。将溶剂真空蒸发和将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率17mg(90％理论值).
MS(ESI)m/z＝657(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.95(m，10H)，2.75-3.05(m，7H)，3.08-3.18(m，2H)，3.3(mc，1H)，3.43-3.61(m，3H)，3.87-3.97(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.83-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.34(d，1H)，7.42(d，1H).
将四盐酸盐通过制备HPLC(Reprosil ODS-A，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)转化为四(三氟乙酸氢盐)。
实施例4(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羟基丁基)-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
将16mg(0.02mmol)的来自实施例172A的化合物提供在0.5ml的二噁烷中并冷却至0℃，加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氢。使得混合物升温至室温并搅拌1小时。将混合物然后真空浓缩，将残余物在高真空下干燥。与乙腈搅拌并收集沉淀，其通过过滤分离出来，获得标题化合物，为固体。
产率8mg(42％理论值).
LC-MS(方法20)Rt＝1.03min.
MS(EI)m/z＝645(M-4HCl+H)+.
实施例5(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-3-氨基-1-{[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]羰基}丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 将9mg(0.01mmol)的来自实施例173A的化合物冷却至0℃并加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氢。在1小时后，真空浓缩混合物。将残余物置入乙腈并再次浓缩。
产率7mg(98％理论值).
LC-MS(方法20)Rt＝0.95min.
MS(EI)m/z＝629(M-4HCl+H)+.
实施例6(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羟基丁基)-11-[3-氨基丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 将8mg(0.01mmol)的来自实施例175A的化合物在0℃下与0.5ml的在二噁烷中的4N氯化氢混合。使得混合物升温至室温并搅拌1小时。然后将混合物真空浓缩，将残余物在高真空下干燥。与乙腈搅拌，收集沉淀，其通过过滤分离出来，获得标题化合物，为固体。
产率7mg(59％理论值).
LC-MS(方法20)Rt＝0.90min.
MS(EI)m/z＝630(M-4HCl+H)+.
实施例7(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-11-(3-氨基丙基)-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
在0℃下将0.1ml的在二噁烷中的4M氯化氢溶液加入7.5mg(0.009mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-9-乙基-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯(实施例204A)在0.1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小时后，将反应溶液真空浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。将残余物与二乙基醚混合并浓缩。
产率4.9mg(70％理论值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝0.87(m，3H)，1.10-1.27(m，2H)，1.5-1.9(m，8H)，2.53-3.80(m，14H)，4.47(m，1H)，4.96(m，1H)，5.65(m，1H)，6.90(d，2H)，7.06(s，1H)，7.21(s，1H)，7.45(d，1H)，7.53(d，1H).
实施例8(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-2-[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺三盐酸盐
将12.7mg(0.014mmol)的(3-{[(2S)-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-3-羟基丙酰基]氨基}-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例188A)在1ml的二噁烷中的4M氯化氢溶液中的混合物在RT下搅拌20分钟。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率9.1mg(90％理论值)LC-MS(方法20)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝616(M-3HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.56-1.90(m，4H)，2.78-3.82(m，14H)，3.96(m，1H)，4.42(m，1H)，4.88(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例9(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
将30mg(0.029mmol)的(2-{[(3S)-6-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己酰基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例193A)在2ml的二噁烷中的4M氯化氢溶液中的混合物在RT下搅拌20分钟。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率quant.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.0(m，8H)，2.18-3.53(m，20H)，4.25(m，1H)，4.45(m，1H)，6.69(d，2H)，6.76(s，1H)，7.07(s，1H)，7.15(s，1H)，7.22(d，1H)，7.63(s，1H).
实施例10(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(1S)-4-氨基-1-[({(4R)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]丁基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
将6mg(0.006mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-({[(1S)-4-氨基-1-({[(4S)-4，8-二氨基-6-氧代辛基]氨基}羰基)丁基]氨基}羰基)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氢盐)(实施例205A)加入0.3ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，并在RT下搅拌30min。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率5mg(85％理论值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.7(m，13H)，2.52-3.75(m，17H)，4.22(m，1H)，4.45(m，1H)，4.50(m，1H)，4.83(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例11(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
将8mg(0.010mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氢盐)(实施例206A)加入0.4ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，并在RT下搅拌30min。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝0.20min.
MS(EI)m/z＝627(M+-4HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.19(m，1H)，1.25(m，2H)，1.5-1-9(m，8H)，2.53-2.71(m，1H)，2.79-3.64(m，15H)，4.44(m，1H)，6.90(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例12(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
将15mg(0.019mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基-乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氢盐)(实施例207A)加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，并在RT下搅拌20min。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率12mg(86％理论值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.6-2.0(m，5H)，2.07-2.30(m，2H)，2.84-3.23(m，10H)，3.33(m，1H)，3.51-3.83(m，4H)，4.50(m，1H)，4.90(m，1H)，6.98(d，2H)，7.06(s，1H)，7.35(s，1H)，7.45(d，1H)，7.52(d，1H).
实施例13(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
将7mg(0.008mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氢盐)(实施例208A)加入0.6ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，并在RT下搅拌30min。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率6.1mg(89％理论值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.3(m，11H)，2.80-3.70(m，14H)，4.29-4.48(m，3H)，4.85(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.44(d，1H).
实施例14(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亚氨基)甲基]氨基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
将5.3mg(0.005mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亚氨基)甲基]氨基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(三氟乙酸氢盐)(实施例209A)加入0.4ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，并在RT下搅拌30分钟。将反应溶液浓缩，与二氯甲烷共蒸发数次并在高真空下干燥。
产率quant.
LC-MS(方法20)Rt＝1.75min.
MS(EI)m/z＝655(M-5HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.8 1-3.75(m，13H)，4.25(m，1H)，4.44(m，1H)，4.84(m，1H)，6.86(d，1H)，6.90(d，2H)，6.97(s，1H)，7.28(s，1H)，7.36(d，1H)，7.45(m，2H).
实施例15N2-{[(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-N1-[(2S)-2，5-二氨基戊基]-L-谷氨酰胺四盐酸盐
将7mg(0.01mmol)的来自实施例180A的化合物与0.1ml的在二噁烷中的4N氯化氢混合。将混合物在RT下搅拌4小时。然后将混合物真空浓缩，将残余物在高真空下干燥。
产率4.2mg(78％理论值).
MS(ESI)m/z＝684(M-4HCl+H)+.
实施例16(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将40mg(0.034mmol)的来自实施例177A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.5ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，将混合物在RT下搅拌2小时。将混合物在真空中蒸发至干将残余物在高真空下干燥至恒重。
产率26mg(88％理论值).
MS(ESI)m/z＝670(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.45-1.95(m，12H)，2.8-3.05(m，6H)，3.1-3.4(m，4H)，3.42(mc，2H)，3.54(mc，1H)，3.97(mc，1H)，4.41(mc，1H)，4.6-4.8(m，2H，under D2O)，6.83-6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.24(s，1H)，7.32(d，1H)，7.4(d，1H).
实施例17(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-(2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将11.5mg(0.011mmol)的来自实施例178A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.2ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，将混合物在RT下搅拌2小时。将混合物在真空中蒸发至干，将残余物在高真空下干燥至恒重。
产率8.5mg(99％理论值).
MS(ESI)m/z＝613(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.75-3.05(m，6H)，3.24(mc，1H)，3.3-3.43(m，2H)，3.45-3.55(m，2H)，3.87-3.97(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.7(m，1H，under D2O)，4.83(mc，1H)，6.83-6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.23(s，1H)，7.3(d，1H)，7.4(d，1H).
实施例18(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-[(1S)-2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-1-(羟基甲基)-2-氧代乙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将18.4mg(0.018mmol)的来自实施例179A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.26ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液，将混合物在RT下搅拌4小时。将混合物在真空中蒸发至干，将残余物在高真空下干燥至恒重。
产率13mg(93％理论值).
MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.85(m，8H)，2.75-3.05(m，6H)，3.26(mc，1H)，3.35-3.85(m，7H)，4.41(mc，1H)，4.7(m，1H，under D2O)，4.87(mc，1H)，6.85-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.22(s，1H)，7.32(d，1H)，7.4(d，1H).
实施例19N2-{[(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鸟氨酰基-N-(2-氨基乙基)-L-鸟氨酰胺五盐酸盐
将8.5mg(0.008mmol)的来自实施例210A的化合物与0.2ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液混合，并在RT下搅拌3h。将混合物在真空中蒸发至干，将残余物在高真空下干燥至恒重。
产率quant.
MS(ESI)m/z＝727(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-1.95(m，12H)，2.75-3.15(m，10H)，3.25(mc，1H)，3.35-3.75(m，3H)，4.25-4.35(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
类似于实施例1的方法，按照各自的分离方法制备下表所列实施例20至39，为盐酸盐或三氟乙酸氢盐。
实施例40(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((4S)-4-氨基-6-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-6-氧代己基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐 在0℃下将0.32ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至25mg(0.021mmol)的来自实施例262A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率17.8mg(96％理论值)MS(ESI)m/z＝684(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.9(m，12H)，2.5-3.2(m，10H)，3.3-3.7(m，6H)，4.4 1(mc，1H)，4.7-4-9(m，2H，under D2O)，6.85-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
实施例41(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-(氨基甲基)-2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
在0℃下将0.62ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至47mg(0.021mmol)的来自实施例269A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率33mg(98％理论值)MS(ESI)m/z＝642(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.8-3.1(m，6H)，3.2-3.7(m，8H)，4.41(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，7.0(s，1H)，7.27(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
实施例42(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-(2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
在0℃下将0.22ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至17mg(0.014mmol)的来自实施例270A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率12mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝684(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.9(m，12H)，2.37(mc，1H)，2.55(mc，1H)，2.7-3.2(m，7H)，3.2-3.7(m，6H)，4.22(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.42(d，1H).
实施例43(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丁基)-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.83ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至57mg(0.014mmol)的来自实施例271A的化合物中。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率44mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝629(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.1(m，6H)，2.7-3.2(m，8H)，3.28(mc，1H)，3.37-3.62(m，3H)，3.86(mc，1H)，4.27(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.99(s，1H)，7.29(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
实施例44(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(3S)-3-氨基-4-羟基丁基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.27ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至19mg(0.018mmol)的来自实施例272A的化合物。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率14mg(97％理论值)MS(ESI)m/z＝657(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-1.95(m，10H)，2.75-3.1(m，4H)，3.2-3.4(m，4H)，3.5-3.6(m，2H)，3.7-3.8(m，2H)，3.93(mc，1H)，4.21(mc，1H)，4.45(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
实施例45(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{1-(2-氨基乙基)-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
在0℃下将0.41ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至28mg(0.028mmol)的来自实施例273A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率12mg(58％理论值)MS(ESI)m/z＝627(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.0(m，6H)，2.3-2.65(m，2H)，2.7-3.2(m，8H)，3.3-3.8(m，4H)，4.28(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例46(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-(3-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-3-氧代丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.30ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至20.7mg(0.020mmol)的来自实施例274A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率15mg(98％理论值)MS(ESI)m/z＝627(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.35-2.55(m，2H)，2.7-3.2(m，7H)，3.3-3.7(m，6H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.35(d，1H)，7.42(d，1H).
实施例47(8S，11S，14S)-1 4-氨基-N-(1-(2-氨基乙基)-3-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-3-氧代丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐 在0℃下将0.355ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至27.7mg(0.024mmol)的来自实施例275A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率20mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝670(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，10H)，2.3-2.7(m，2H)，2.7-3.7(m，13H)，4.24(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.26(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例48(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(4S)-4-氨基-5-羟基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.11ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至7.8mg(0.007mmol)的来自实施例276A的化合物。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率5.8mg(99％理论值)MS(ESI)m/z＝671(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.95(m，12H)，2.75-3.4(m，10H)，3.5-3.8(m，3H)，4.20(mc，1H)，4.44(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
实施例49(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(1S)-2-氨基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
在0℃下将0.56ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至39mg(0.037mmol)的来自实施例277A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率25mg(85％理论值)MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.83(mc，1H)，2.9-3.1(m，6H)，3.15-3.3(m，2H)，4.19(mc，1H)，4.29(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.26(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
实施例50(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五盐酸盐
在0℃下将0.30ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至24mg(0.02mmol)的来自实施例278A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率17mg(97％理论值)MS(ESI)m/z＝686(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.3-1.9(m，10H)，2.5-2.95(m，7H)，2.95-3.25(m，3H)，3.3-3.5(m，2H)，3.62(mc，1H)，4.06(mc，1H)，4.18(mc，1 H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.67(mc，2H)，6.75(s，1H)，7.05(s，1H)，7.14(d，1H)，7.21(d，1H).
实施例51(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺三盐酸盐
在0℃下将0.36ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至21mg(0.024mmol)的来自实施例279A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率16mg(98％理论值)LC-MS(方法23)Rt＝1.84min.
MS(ESI)m/z＝570(M-3HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，4H)，2.3-2.6(m，2H)，2.7-3.2(m，7H)，3.3-3.7(m，5H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.95(s，1H)，7.25(s，1H)，7.34(d，1H)，7.42(d，1H).
实施例52rel-(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-{[(3-氨基-2-羟基丙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亚氨基)甲基]氨基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.52ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至41mg(0.035mmol)的来自实施例280A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率28.5mg(99％理论值)
MS(ESI)m/z＝685(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.7-3.4(m，11H)，3.5-3.7(m，1H)，3.97(mc，1H)，4.28(mc，1H)，4.47(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.94(mc，2H)，7.01(s，1H)，7.31(s，1H)，7.40(d，1H)，7.48(d，1H).
实施例53rel-(8S，11S，14S)-14-氨基-1 1-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-N-[2-羟基-3-(L-鸟氨酰基氨基)丙基]-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四三氟乙酸氢盐 在0℃下将1.52ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至98mg(0.101mmol)的来自实施例281A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体通过制备HPLC(Reprosil ODS-A，流动相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)转化为四(三氟乙酸氢盐)。
产率24.6mg(22％理论值)MS(ESI)m/z＝643(M-4TFA+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-2.0(m，8H)，2.8-3.5(m，11H)，3.56(mc，1H)，3.86(mc，1H)，3.97(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.44(d，1H).
实施例54(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(1S)-2-氨基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}羰基)丁基]-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐 在0℃下将0.31ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至22mg(0.021mmol)的来自实施例282A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率16mg(98％理论值)MS(ESI)m/z＝659(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.6-2.05(m，6H)，2.8-3.15(m，6H)，3.2-3.35(m，2H)，3.5-3.7(m，3H)，3.87(mc，1H)，4.21(mc，1H)，4.31(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.92(mc，2H)，6.99(s，1H)，7.29(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
实施例55(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(2S)-2-氨基-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-[(2R)-3-氨基-2-羟基丙基]-5，17-二羟基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
在0℃下将2ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至19.4mg(0.019mmol)的来自实施例292A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率12mg(81％理论值)LC-MS(方法23)Rt＝0.47min.
MS(ESI)m/z＝615(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.92-2.12(m，2H)，2.9-3.3(m，8H)，3.4-3.9(m，7H)，4.0(mc，1H)，4.17(mc，1H)，4.51(mc，1H)，5.15(mc，1H)，5.70(mc，1H)，6.97(mc，2H)，7.03(s，1H)，7.10(s，1H)，7.49(d，1H)，7.56(d，1H).
实施例56(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(2S)-2-氨基-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羟基-10，13-二氧代-9，12-二氮杂三环[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四盐酸盐
在0℃下将2ml的在二噁烷中的4N氯化氢溶液加至18.2mg(0.018mmol)的来自实施例293A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小时后，将反应溶液真空浓缩和与二氯甲烷共蒸发数次。将剩余的固体在高真空下干燥至恒重。
产率13mg(98％理论值)LC-MS(方法23)Rt＝0.43min.
MS(ESI)m/z＝585(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，4H)，2.8-3.3(m，7H)，3.4-3.9(m，5H)，4.12(mc，1H)，4.45(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.25(s，1H)，7.37(d，1H)，7.44(d，1H).
类似于实施例56的方法，制备下表中列出的实施例57至69。

B.评估生理学活性所用缩略语AMP腺苷一磷酸ATP腺苷三磷酸BHI培养基 脑心浸液培养基CoA辅酶ADMSO 二甲亚砜DTT二硫苏糖醇EDTA 乙二胺四乙酸KCl氯化钾KH2PO4磷酸二氢钾MgSO4硫酸镁MIC最低抑制浓度MTP微量滴定板NaCl 氯化钠Na2HPO4磷酸氢二钠NH4Cl 氯化铵NTP核苷酸三磷酸盐PBS磷酸盐缓冲盐水PCR聚合酶链式反应PEG聚乙二醇PEP磷酸烯醇丙酮酸Tris 三[羟基甲基]氨基甲烷本发明化合物的体外效果可以在下列测定中显示使用大肠杆菌提取物的体外转录-翻译为了制备S30提取物，收获对数期生长的大肠杆菌MRE600(M.Müller；Freiburg University)，洗涤并如关于体外转录-翻译测定(Müller，M.和Blobel，G.Proc Natl Acad Sci USA(1984)81，pp.7421-7425)所述使用。
每50μl的反应混合物，另外将1μl的cAMP(11.25mg/ml)加入反应混合物以进行体外转录-翻译测定。测定混合物总计105μl，含有5μl在5％DMSO中提供的待检测的物质。将1μg质粒pBESTluc(Promega，Germany)/100μl混合物用作转录模板。在30℃下温育60分钟后，加入50μl的荧光素溶液(20mM tricine，2.67mM MgSO4，0.1mM EDTA，33.3mM DTT pH7.8，270μM CoA，470μM荧光素，530μM ATP)，将产生的生物发光在光度计上测量1分钟。导致荧火虫荧光素酶的翻译50％抑制的抑制剂的浓度被称为IC50。
使用金黄色葡萄球菌提取物的体外转录-翻译构建金黄色葡萄球菌荧光素酶报道质粒为了构建可以用于金黄色葡萄球菌的体外转录-翻译测定的报道质粒，使用质粒pBESTluc(Promega Corporation，USA)。在荧火虫荧光素酶之前的存在于该质粒中的大肠杆菌tac启动子被具有适当的来自金黄色葡萄球菌的Shine-Dalgarno序列的capA1启动子替换。为此使用引物CAPFor5’-CGGCCAAGCTTACTCGGATCCAGAGTTTGCAAAATATACAGGGGATTATATATAATGGAAAACAAGAAAGGAAAATAGGAGGTTTATATGGAAGACGCCA-3’和CAPRev 5’-GTCATCGTCGGGAAGACCTG-3’。引物CAPFor含有capA1启动子，核糖体结合位点和荧光素酶的5’区域。在使用pBESTluc作为模板的PCR后，可以分离PCR产物，其含有具有融合capA1启动子的荧火虫荧光素酶。在用ClaI和HindIII限制酶切后，将这连接到同样用ClaI和HindIII消化的载体pBESTluc中。获得的质粒p1a能够在大肠杆菌中复制并且可以用作金黄色葡萄球菌的体外转录-翻译测定中的模板。
制备金黄色葡萄球菌的S30提取物将6升的BHI培养基与250ml的金黄色葡萄球菌菌株的过夜培养物温育，并使得在37℃下生长直至OD600nm为2-4。通过离心收集细胞并在500ml的冷缓冲液A(10mM Tris乙酸盐，pH8.0，14mM乙酸镁，1mMDTT，1M KCl)中洗涤。在再次离心后，将细胞在250ml的含有50mM KCl的冷缓冲液A中洗涤，将获得的沉淀在-20℃下冷冻60分钟。将沉淀在冰上解冻30至60min并置入缓冲液B(10mM Tris乙酸盐，pH8.0，20mM乙酸酯，1mM DTT，50mM KCl)中直至总体积为99ml。将在缓冲液B中的1.5ml份的溶葡萄球菌素(0.8mg/ml)引入3个预冷却的离心杯中并各自与33ml的细胞悬浮液混合。样品在37℃下温育，偶尔振荡，45至60min，之后加入150μl的0.5M DTT溶液。将裂解的细胞在30000×g和4℃下离心30分钟。将细胞沉淀置入缓冲液B中，然后在相同条件下再次离心，合并收集的上清液。将上清液在相同条件下再次离心，将0.25体积的缓冲液C(670mM Tris乙酸盐，pH8.0，20mM乙酸镁，7mM Na3磷酸烯醇丙酮酸，7mM DTT，5.5mM ATP，70μM氨基酸(完全来自Promega)，75μg的丙酮酸激酶(Sigma，德国))/ml加至上清液的上部2/3。将样品在37℃下温育30分钟。将上清液在具有3500 Da截止值的渗析管中对2l的渗析缓冲液(10mM Tris乙酸盐，pH8.0，14mM乙酸镁，1mM DTT，60mM乙酸钾)4℃渗析过夜，更换缓冲液1次。通过在4℃下用冷PEG 8000粉末(Sigma，Germany)覆盖渗析管，将渗析液浓缩至蛋白浓度约为10mg/ml。S30提取物可以以等分试样保存在-70℃。
在金黄色葡萄球菌的体外转录-翻译测定中测定IC50化合物对蛋白质的生物合成的抑制可以在体外转录-翻译测定中显示。该测定是基于荧火虫荧光素酶的无细胞转录和翻译，使用报道质粒p1a作为模板和来自金黄色葡萄球菌的无细胞的S30提取物。获得的荧光素酶的活性可以通过测量发光来检测。
待使用的S30提取物或质粒p1a的量分别必须重新对于每个制备进行测试，以便确保测定中的最适浓度。3μl的待检测的物质，溶解在5％DMSO中，引入MTP。然后加入10μl适当浓缩的质粒溶液p1a。然后加入46μl的23μl的预混物(500mM乙酸钾，87.5mM Tris乙酸盐，pH8.0，67.5mM乙酸铵，5mM DTT，50μg的叶酸/ml，87.5mg的PEG 8000/ml，5mM ATP，1.25mM每种NTP，20μM每种氨基酸，50mM PEP(Na3盐)，2.5mM cAMP，250μg每种E.coli tRNA/ml)和23μl的适量的S.aureus S30提取物的混合物，并混合。在30℃下温育60分钟后，加入50μl的荧光素溶液(20mM tricine，2.67mM MgSO4，0.1mM EDTA，33.3mM DTTpH7.8，270μM CoA，470μM荧光素，530μM ATP)，将获得的生物发光在光度计上测量1分钟。导致荧火虫荧光素酶的翻译50％抑制的抑制剂的浓度被称为IC50。
最低抑制浓度(MIC)的测定最低抑制浓度(MIC)是测试微生物的生长被抑制18-24h以上的抗生素的最低浓度。在这些情形中抑制剂浓度可以通过标准微生物学方法测定(参见，例如，The National Committee for Clinical Laboratory Standards。对于需氧生长的细菌的稀释抗微生物敏感性测试的方法；批准的标准第五版。NCCLS文献M7-A5[ISBN 1-56238-394-9].NCCLS，940 West Valley Road，Suite 1400，Wayne，宾夕法尼亚19087-1898 USA，2000)。本发明化合物的MIC在液体稀释试验中在96-孔微量滴定板规模上测定。将细菌微生物在基本培养基(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mMMgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素盐酸盐，1.2μg/ml烟酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的各种来自蛋白的(proteinogenic)氨基酸，除了苯丙氨酸；[H.-P.Kroll；未出版])中培养，加入0.4％BH肉汤(测试培养基)。在屎肠球菌L4001的情形中，将热灭活的胎牛血清(FCS；GibcoBRL，Germany)加入测试培养基至终浓度为10％。测试微生物的过夜培养物在新鲜测试培养基终稀释至OD578为0.001(在肠球菌的情形中为0.01)，并与在测试培养基(200μl终体积)中的测试物质的稀释液(1∶2稀释梯级)1∶1温育。培养物在37℃下温育18-24小时；肠球菌在5％CO2的存在下。
在每种情形中再没有可见细菌生长出现的最低物质浓度被定义为MIC。
测定最低抑制浓度(MIC)的备选方法最低抑制浓度(MIC)是测试微生物的生长被抑制18-24小时以上的抗生素的最低浓度。在这些情形中抑制剂浓度可以通过标准微生物学方法测定，在琼脂稀释测定中使用改进的培养基(参见，例如，The NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards。对于需氧生长的细菌的稀释抗微生物敏感性测试的方法；批准的标准第五版。NCCLS文献M7-A5[ISBN1-56238-394-9].NCCLS，940 West Valley Road，Suite 1400，Wayne，宾夕法尼亚19087-1898 USA，2000)。将细菌微生物培养在含有20％的去纤维蛋白马血的1.5％琼脂平板上。测试微生物，其在哥伦比亚血琼脂平板(Becton-Dickinson)上温育过夜，在PBS中稀释，调节至微生物数目为约5×105微生物/ml并逐滴放置(1-3μl)在测试平板上。测试物质包含不同稀释度的测试物质(1∶2稀释梯级)培养物在37℃下在5％CO2的存在下温育18-24小时。
在每种情形中再没有可见细菌生长出现的最低物质浓度被定义为MIC并且以μg/ml报道。
表A(具有比较例20A(双苯霉素B))
浓度数据MICμg/ml；IC50μM.
金黄色葡萄球菌133的全身感染本发明化合物对于治疗细菌感染的适用性可以在各种动物模型中显示。为此，动物通常用适当的有毒力的微生物感染和然后用待检测的化合物处理，所述化合物在适合于具体治疗模型的制剂中。本发明化合物的适用性可以在治疗用金黄色葡萄球菌感染后的小鼠脓毒病模型中的细菌感染中特别显示。
为此，将金黄色葡萄球菌(S.aureus)133的细胞在BH肉汤(Oxoid，Germany)中过夜培养。将过夜的培养物在新鲜BH肉汤中1∶100稀释并扩大3小时。将在对数生长期中的细菌离心出并用缓冲的生理盐水溶液洗涤两次。然后将盐水溶液中的细胞悬浮液在光度计(Dr Lange LP 2W)中调节到50个消光单位。在稀释步骤(1∶15)后，将所述悬浮液与10％粘蛋白溶液1∶1混合。腹膜内给药0.25ml/20g小鼠的该感染溶液。这相当于约1-2×106微生物/小鼠的细胞数量。在感染后30分钟进行静脉内治疗。将雌性CFW1小鼠用于感染试验。在6天的时期内记录所述动物的存活率。调整动物模型以便未处理的动物在感染后24小时内死亡。可以显示在该模型中，对于实施例2的化合物的ED100＝1.25mg/kg的治疗效果。
测定对金黄色葡萄球菌自发抗性率如下测定本发明化合物的自发抗性率(spontaneous resistance rate)将细菌微生物在37℃下培养在30ml的基本培养基(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mM MgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素盐酸盐，1.2μg/ml烟酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的每种来自蛋白质的氨基酸，加入0.4％BH肉汤)中过夜，在6000×g下离心10min并再悬浮在2ml的磷酸盐-缓冲生理NaCl溶液(约2×109微生物/ml)中。将100μl的该细胞悬浮液，和1∶10和1∶100稀释液铺平板在预干燥的琼脂平板(1.5％琼脂，20％去纤维蛋白马血，或1.5％琼脂，20％牛血清，在用PBS稀释的1/10 Müller-Hinton培养基中)上，所述琼脂平板含有浓度分别等于5×MIC或10×MIC的待检测的本发明化合物，并在37℃下温育48小时。对获得的菌落(cfu)计数。
分离双苯霉素-抗性金黄色葡萄球菌菌株RN4220BiR和T17体外分离金黄色葡萄球菌菌株RN4220BiR。为此，将100μl份的金黄色葡萄球菌RN4220细胞悬浮液(约1.2×108cfu/ml)铺平板在不含抗生素的琼脂平板(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mMMgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素盐酸盐，1.2μg/ml烟酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的每种来自蛋白质的氨基酸，加入0.4％BH肉汤和1％琼脂)和含有2μg/ml双苯霉素B(10×MIC)的琼脂平板上，并在37℃下温育过夜。约1×107细胞生长在不含抗生素的平板上，而约100个菌落生长在含有抗生素的平板上，相当于1×10-5的抗性率。检测一些生长在含有抗生素平板上的菌落的双苯霉素B MIC。选择一个MIC的＞50μM的菌落用于进一步使用，该菌株称为RN4220BiR。
体内分离金黄色葡萄球菌菌株T17。将CFW1小鼠每只小鼠用4×107金黄色葡萄球菌133细胞腹膜内感染。在感染后0.5小时，动物用50mg/kg双苯霉素B静脉内处理。在感染后第3天从存活的动物中摘除肾脏。在均化器官后，将匀浆如关于RN4220BiR所述铺平板在不含抗生素和含有抗生素的琼脂平板上，并在37℃下温育过夜。从肾脏分离的菌落中约一半显示在含有抗生素的平板上生长(2.2×106菌落)，显示在处理的动物的肾脏中双苯霉素B-抗性金黄色葡萄球菌细胞的积累。检测这些菌落中的约20个的双苯霉素B MIC，MIC的＞50μM的菌落被选择用于进一步培养，该菌株称为T17。
C.药物组合物的例举性实施方案本发明的化合物可以以下列方式转化为药用制剂可以静脉内施用的溶液组成1mg的实施例1的化合物，15g的聚乙二醇400和250g注射用水。
制备在搅拌下将本发明的化合物与聚乙二醇400一起溶解在水中。通过过滤(孔径0.22μm)将所述溶液消毒并在无菌条件之下分配到热灭菌的输液瓶中。将这些用输注塞和卷曲帽封闭。
权利要求
1.式(I)化合物， 其中R7表示下式的基团 或 其中R1是氢或羟基，*是与碳原子的键合位点，R2表示氢，甲基或乙基，R3表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，A表示一个键或苯基，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团 其中*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或式*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2的基团，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，R8和R12彼此独立地表示式*-CONHR14或*-CH2CONHR15的基团，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，且R14a和R15a彼此独立地表示下式基团， 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团， 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团， 或 其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是数字0，1，2或3，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是与碳原子的键合位点，Z1是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，和h是1，2，3或4的数字，R10表示氨基或羟基，R16和R17彼此独立地表示下式的基团， 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4b表示氢，氨基或羟基，R5b表示氢，甲基或氨基乙基，R6b表示氢或氨基乙基，或R5b和R6b与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8b和R12b彼此独立地表示*-(CH2)Z1b-OH，*-(CH2)Z2b-NHR13b，*-CONHR14b或*-CH2CONHR15b，其中*是与碳原子的键合位点，R13b表示氢或甲基，且Z1b和Z2b彼此独立地是1，2或3的数字，并且R14b和R15b彼此独立地表示下式的基团， 其中*是与氮原子的键合位点，R4g表示氢，氨基或羟基，R5g表示氢，甲基或氨基乙基，R6g表示氢或氨基乙基，kg是0或1的数字，和lg是1，2，3或4的数字，R9b和R11b彼此独立地表示氢或甲基，R10b表示氨基或羟基，kb是0或1的数字，lb，wb，xb和yb彼此独立地是1，2，3或4的数字，R18和R19彼此独立地表示氢或下式的基团， 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4e表示氢，氨基或羟基，R5e表示氢，甲基或氨基乙基，R6e表示氢或氨基乙基，或R5e和R6e与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8e和R12e彼此独立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是与碳原子的键合位点，R13e表示氢或甲基，并且Z1e和Z2e彼此独立地是1，2或3的数字，R9e和R11e彼此独立地表示氢或甲基，R10e表示氨基或羟基，ke 是0或1的数字，且le，we，xe和ye彼此独立地是1，2，3或4的数字，其中R18和R19不同时为氢，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25表示下式的基团， 或 其中*是与氮原子的键合点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf 是0或1的数字，且lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，d和e彼此独立地是1，2或3的数字，k 是0或1的数字，l，w，x和y彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w，x或y等于3时， 彼此独立地可以携带羟基，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
2.根据权利要求1的化合物，其特征在于它对应于下式 其中R1表示氢或羟基，R2表示氢，甲基或乙基，R3如权利要求1中所定义，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
3.根据权利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4表示氢，氨基或羟基，R5表示下式的基团 其中*是与碳原子的键合位点，R23表示氢或式*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2的基团，其中*是与碳原子的键合位点，n和o彼此独立地是1，2，3或4的数字，m是0或1的数字，R8表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，ka是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，R9和R11彼此独立地表示氢，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R20表示氢或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氢或甲基，并且i是1，2或3的数字，R21表示氢或甲基，f是数字0，1，2或3，g是1，2或3的数字，并且h是1，2，3或4的数字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH其中*是与碳原子的键合位点，Z1 是1，2或3的数字，并且R9表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，并且h是1，2，3或4的数字，R10表示氨基或羟基，R24表示下式的基团*-CONHR25，其中*是与碳原子的键合位点，R25是下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4f表示氢，氨基或羟基，R5f表示氢，甲基或氨基乙基，R6f表示氢或氨基乙基，或R5f和R6f与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8f和R12f彼此独立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是与碳原子的键合位点，R13f表示氢或甲基，并且Z1f和Z2f彼此独立地是1，2或3的数字，R9f和R11f彼此独立地表示氢或甲基，R10f表示氨基或羟基，kf是0或1的数字，并且lf，wf，xf和yf彼此独立地是1，2，3或4的数字，k 是0或1的数字，l，w和x彼此独立地是1，2，3或4的数字，当w或x等于3时， 彼此独立地可以携带羟基基团，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
4.根据权利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R12表示下式的基团*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是与碳原子的键合位点，R14和R15彼此独立地表示下式的基团 或 其中* 是与氮原子的键合位点，R4a表示氢，氨基或羟基，R5a表示氢，甲基或氨基乙基，R6a表示氢或氨基乙基，或R5a和R6a与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8a和R12a彼此独立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是与碳原子的键合位点，Z1a和Z2a彼此独立地是1，2或3的数字，R13a表示氢或甲基，并且R14a和R15a彼此独立地表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4c表示氢，氨基或羟基，R5c表示氢，甲基或氨基乙基，R6c表示氢或氨基乙基，kc是0或1的数字，并且lc是1，2，3或4的数字，R9a和R11a彼此独立地表示氢或甲基，R10a表示氨基或羟基，R16a表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R4d表示氢，氨基或羟基，R5d表示氢，甲基或氨基乙基，R6d表示氢或氨基乙基，kd是0或1的数字，并且ld是1，2，3或4的数字，ka 是0或1的数字，并且la，wa，xa和ya彼此独立地是1，2，3或4的数字，y 是1，2，3或4的数字，当y等于3时 可以携带羟基基团，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
5.根据权利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，A表示一个键或苯基，R16和R17彼此独立地表示下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4b表示氢，氨基或羟基，R5b表示氢，甲基或氨基乙基，R6b表示氢或氨基乙基，或R5b和R6b与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8b和R12b彼此独立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是与碳原子的键合位点，R13b表示氢或甲基，并且Z1b和Z2b彼此独立地是1，2或3的数字，R9b和R11b彼此独立地表示氢或甲基，R10b表示氨基或羟基，kb是0或1的数字，lb，wb，xb和yb彼此独立地是1，2，3或4的数字，d是1，2或3的数字，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
6.根据权利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基团 其中*是与氮原子的键合位点，R18和R19彼此独立地表示氢或下式的基团 或 其中*是与氮原子的键合位点，R4e表示氢，氨基或羟基，R5e表示氢，甲基或氨基乙基，R6e表示氢或氨基乙基，或R5e和R6e与它们键合的氮原子一起形成哌嗪环，R8e和R12e彼此独立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是与碳原子的键合位点，R13e表示氢或甲基，并且Z1e和Z2e彼此独立地是1，2或3的数字，R9e和R11e彼此独立地表示氢或甲基，R10e表示氨基或羟基，ke 是0或1的数字，并且le，we，xe和ye彼此独立地是1，2，3或4的数字，其中R18和R19不同时为氢，e 是1，2或3的数字，或它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种。
7.用于制备根据权利要求1的式(I)化合物或者它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物中的一种的方法，其特征在于[A]式(II)的化合物， 其中R2和R7具有权利要求1所示含义，并且boc表示叔丁氧羰基，在两步方法中首先在一种或多种脱水剂的存在下与式(III)的化合物反应，H2NR3(III)，其中R3具有权利要求1中所示含义，并随后与酸反应和/或通过氢解反应，或[B]式(IV)的化合物， 其中R2和R7具有权利要求1中所示含义，并且Z表示苄氧羰基，在两步方法中首先在一种或多种脱水剂的存在下与式(III)的化合物反应，H2NR3(III)，其中R3具有权利要求1中所示含义，并随后与酸反应和/或通过氢解反应。
8.用于制备根据权利要求1的式(I)化合物或者它的溶剂合物之一的方法，其特征在于将所述化合物的盐或所述化合物的盐的溶剂合物在加入碱的情况下通过色谱法转化为所述化合物。
9.用于治疗和/或预防疾病的根据权利要求1至6中任何一项的化合物。
10.根据权利要求1至6中任何一项的化合物在制备用于治疗和/或预防疾病的药物中的应用。
11.根据权利要求1至6中任何一项的化合物在制备用于治疗和/或预防细菌性疾病的药物中的应用。
12.药物，其包含与惰性的、非毒性的药用赋形剂组合的至少一种根据权利要求1至6中任何一项的化合物。
13.根据权利要求12的药物，其用于治疗和/或预防细菌感染。
14.用于在人和动物中控制细菌感染的方法，该方法施用抗菌有效量的根据权利要求1至6任一项的至少一种化合物或根据权利要求12或13的药物。
全文摘要
本发明涉及抗菌的酰胺大环类和它们的制备方法，它们在治疗和/或预防疾病中的应用和它们在制备用于治疗和/或预防疾病、特别是细菌感染的药物中的应用。
文档编号A61K38/06GK101090909SQ200580040096
公开日2007年12月19日 申请日期2005年9月15日 优先权日2004年9月24日
发明者赖纳·恩德曼, 克斯廷·埃勒特, 克里斯托夫·弗赖贝格, 西格弗里德·拉达茨, 马丁·米克尔斯, 约兰多·坎乔-格朗德, 约阿希姆·舒马赫尔, 斯泰芬·韦甘德 申请人:艾库里斯有限及两合公司