专利名称：(r/s)利福霉素衍生物，它们的制备和药物组合物的利记博彩app
背景技术：
本申请要求2004年7月22日提交的题目为“具有改进的靶选择性的4H-4-氧喹嗪衍生物”的美国临时专利申请、系列号60/590,190的优先权，其全部内容在此并入作为参考。
本发明涉及具有抗微生物活性的利福霉素源的化合物，它们的组合物、制备方法及治疗或预防传染性疾病的方法。更特别地，本发明的利福霉素衍生物含有一个利福霉素部分，其与连接物(linker)在利福霉素部分的C-3碳处共价结合，连接物又共价结合4H-4-氧喹嗪部分。本发明涉及在连接物的前手性的碳中心连接物的优选的手性，其有助于化合物的抗菌活性。这个发明还包括针对连接物的手性以及化合物的合成化学过程。本发明的利福霉素衍生物对付耐药的微生物是有效的，具有减少频率的发展突变的耐药性。
利福霉素是具有潜在的抗微生物活性的天然产物。天然来源的利福霉素的实例是利福霉素B、利福霉素O、利福霉素R、利福霉素U、利福霉素S、利福霉素SV和利福霉素Y(Brufani，M.，Cerrini，S.，Fedeli，W.，Vaciago，A.J.Mol.Biol.1974，87，409-435)。天然来源的利福霉素的治疗应用是受限制的，因为它们差的药物代谢动力学和口服生物利用度、抗革兰氏阴性病原体的弱活性和感染组织中的低分布。化学修饰产生了多种半合成的具有改进的抗菌谱和药理学性质的利福霉素衍生物。在这些半合成的化合物中，利福平、利福布汀和rifapetine已经开发成治疗药，当前用于治疗结核病和其他微生物感染(Farr，B.M.Rifamycins，in Principles and Practice ofInfectious Diseases；Mandell，G.L.，Bennett，J.E.，Dolin，R.，Eds.；Churchhill LivingstonePhiladelphia；第348-361页)。
然而，与当前的利福霉素类的抗微生物剂如利福平有关的一个主要障碍是它们快速发展的微生物耐药性。在它们抗菌的靶RNA聚合酶中的突变是对利福霉素类高频率的微生物耐药性的主要原因。因此，需要新的化合物解决利福霉素缺陷(liability)。本发明的化合物是用化学方法设计来解决利福霉素和喹诺酮类的抗生素的药物耐药性，通过稳定的二价的连接物来把利福霉素和喹诺酮的抗菌的药效基团化学联接在一起。新发明的利福霉素化合物通过靶向细菌RNA聚合酶、DNA促旋酶和DNA拓扑异构酶IV的多重的抗菌机理，发挥其抗微生物活性，因此，它们表现出减少频率的耐药性，减缓或消除了药物耐药性的发展。
参考PCT申请WO 03/045319 A2，其公开了结合利福霉素和一种治疗药形成的利福霉素衍生物，以及其作为载体传送治疗药的应用。
然而，这个参考没有描述引入利福霉素分子的C-3位置的任何药物。此参考也未能通过实施例证明，喹诺酮抗生素或其药效团结构是连接于利福霉素分子的任何位置。
发明概述 当前发明的一个方面是涉及一种通式I的化合物(氢醌或相应的醌(C1-C4)形式) 或其盐类、水合物类或前药类，其中，优选的R1包括氢或乙酰基；优选的R2包括氢、甲基或其他的低级烷基；其中星号(*)表示具有(bearing)手性中心的碳，其中绝对构型指定为R或S。
这些新化合物表现出抗菌的性质。它们可以用于控制或预防哺乳动物如人类和非人类中的感染性疾病。特别地，它们表现出显著的抗菌活性，甚至对抗微生物的多重抗药菌株，例如喹诺酮和利福霉素耐药性菌株。化合物还可以与已知的抗菌物质联合给药，表现出协同效应，已知的抗菌物质的实例包括β-内酰胺的那些，如头孢曲松；噁唑烷酮类类，如利奈唑胺；抗菌肽类如万古霉素、dalbavancin、达托霉素和多霉素B。
通式(I)的化合物具有星号(*)标记的一个手性中心，其可以具有(R)或(S)构型。本发明还公开了制备通式(I)的(R/S)型的化合物的新化学方法。
附图简述
图1显示了制备通式I化合物的流程图A。
图2显示了制备式(AF1)化合物的流程图B。
图3显示了制备式(BF1)化合物的流程图C。
发明详述 本发明的一个方面是关于一种通式I的化合物(氢醌和相应的醌(C1-C4)形式) 或其盐类、水合物类或前药类；其中R1包括氢或乙酰基，R2包括氢、甲基或2-10个碳形成的其他低级烷基。
其中星号(*)表示具有手性中心的碳，其中绝对构型指定为R或S。
这些新化合物表现出抗生素的性质。它们可以用于控制或预防哺乳动物如人类和非人类中的感染性疾病。特别地，它们表现出显著的抗菌活性，甚至对抗微生物的多重抗药菌株，特别是利福平-耐药性和喹诺酮-耐药性的金色葡萄球菌。化合物还可以与已知的抗菌物质联合给药，表现出协同效应，抗菌物质的实例包括β-内酰胺的那些，如头孢曲松；噁唑烷酮类类，如利奈唑胺；抗菌肽类如万古霉素、dalbavancin、达托霉素和多霉素B。
本发明的一个目的是提供式I的化合物，其容易水解的前药形式，例如酯类和其药物上可接受的盐类，并用作治疗活性物质；基于这些物质的药剂(medicaments)；任选地联合其他类的抗生素及其制剂；这些物质作为医药的应用和制备有效的抗菌药物的用途；以及制备式I的化合物及其药物上可接受的盐和中间体。
术语“低级烷基”表示在所述的组中碳原子数不超过10个。优选的低级烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基及其异构体和正戊基及其异构体。低级的烷基的实例还有环丙基、环丁基、环戊基和环己基。本发明的烷基类可以任选地用1-3个取代基取代。
如本文所用的术语“水合物”，指的是已经与水化合的分子，或在水合反应中与水反应的分子。在水合反应中，水分子与化合物反应，但是H-OH键不断裂。水通常靠加热从水合的化合物中分离，得到无水的化合物。
如本文所用的术语“前药”，指的是当前发明的化合物的前药，其适于在人类和动物中使用，具有可接受的毒性、刺激、过敏反应等，与合理的利益风险比成比例，预期使用有效。如本文所用的术语“前药”表示在体内可以转化成以上定义的式(I)的活性化合物的化合物。
如本文所用的术语“盐”指的是适于在人类或动物中使用并具有可接受的毒性、刺激性和过敏反应等的那些盐，与合理的利益风险比成比例。药物上可接受的盐是本领域已知的。盐可以在本发明化合物的分离和纯化的最后步骤的原处制备，或者通过本发明的化合物与酸或碱的反应分别制得。盐的实例是氨基与无机酸如盐酸、氢溴酸、磷酸和硫酸，或与有机酸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸形成的盐。盐的实例是酸基与无机碱如氢氧化钠、碳酸钾、磷酸钠等形成的盐。其他金属盐包括锂、钾、钙和镁。另外的药物上可接受的盐包括铵阳离子与带相反电荷的离子如卤化物、氢氧化物、羧化物、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的盐。
式(I)化合物优选的组包括其中R1是H或乙酰基；R2是H或甲基的那些。最优选的化合物是在其氢醌的形式中R1是H或乙酰基，R2是H或甲基的那些，其中星号(*)表示(R)-手性构型。
特别地，本发明的一个方面涉及以下的化合物(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV、(S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV、(R/S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV、(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素S、(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-25-脱乙酰-利福霉素SV、或(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV。
式(I)的化合物可以根据以下流程图A所示的方法制得，其中R1、R2和星号(*)表示与以上和全篇说明书相同。
流程图A式I化合物的制备 方法包括，在0-50℃下，式(AF2)的肼与式(3FRF)的3-甲酰利福霉素在溶剂如水、乙醇、甲醇、THF、丙酮、乙酸或其混合物中偶合。选择性的添加剂包括但不限于NaOH、抗坏血酸或其盐、以及乙酸钠。式(A2)的肼可以是其游离碱或其酸式盐的形式，如HCl。肼可以是在碱性溶剂如水性的1N的NaOH中使用胺化试剂如H2NOSO3H的式(AF1)的二氨基酸在原处制得。
式(AF2)的肼及其前体式(AF1)的二氨基酸同它们的对映异构体都是新的。式(AF1)的二氨基酸的制备在流程图B中说明(R3是H或低级烷基)。
流程图B式(AF1)的化合物的制备 式(AF1)的二氨基酸可以是由选择性保护的式(BF1)的三胺制得。三胺与根据已知的方法(参见Li，Qun.等人，Hetereocycles，1999，Vol.51，1345-1353)制得的已知的式(BF2)的4H-4-氧喹嗪，在20-100℃下在存在碱如NaHCO3的溶剂如乙腈中反应，生成式(BF3)的化合物。如果需要，水解可以在醇溶剂如乙醇中，通过碱如LiOH来完成，生成式(BF4)的化合物。使用酸如三氟乙酸可以方便地除去保护基，从而产生式(AF1)的化合物。
式(BF1)的受保护的三胺和式(BF3)的化合物及其对映异构体也是新的。式(BF1)的受保护三胺的制备在流程图C中说明。
流程图C式(BF1)的化合物的制备 式(BF1)的三胺的制备可以通过商业上可购得的1-苄基-3-羟基吡咯烷的反应完成。1-苄基-3-羟基吡咯烷的R和S-对映异构体是商业上可购得的。式(BF1)的R和S-对映异构体可以从1-苄基-3-羟基吡咯烷的S或R-对映异构体起始制得。立体化学的反转在氰基置换反应中发生，其是建立三胺绝对构型的阶段。因此，1-苄基-3-羟基吡咯烷可以转化成其甲磺酸盐，在存在碱如三乙胺的溶剂如甲苯或乙酸乙酯中使用甲磺酸化试剂如甲磺酰氯化物或甲磺酰酸酐。甲磺酸盐随后的氰基置换，可以在约20℃-70℃的温度下，在存在相转移催化剂如氰化四丁基铵的溶剂如乙腈，或DMSO中，使用氰化物如氰化四丁基铵、氰化三乙基苄基铵或无机氰化物如氰化钠来实现。获得环丙胺的环丙烷化反应可以是在四异丙氧化钛存在下使用溴化乙基镁，接着用路易斯酸如BF3醚合物处理来完成。反应可以在-78℃至室温的温度下的溶剂如THF、醚或二噁烷或它们的混合物中完成。产生环丙胺的此过程是对映选择性的，而且环丙胺的对映选择性可以从80％ee变化至大于95％ee的高度。在溶剂如THF、二氯甲烷、乙酸或其混合物中，用N-BOC 4-哌啶酮还原胺化环丙胺，接着加入醛，使用还原氢化物如三乙酰氧基硼氢化钠，产生式(CF1)的化合物。氢化脱苄基反应可以是在溶剂如乙醇、甲醇、乙酸或其混合物中使用钯催化剂如10％碳载钯或20％氢氧化钯完成，氢气压力可以是60-100PSI大气压。所有的胺通过加入酸如HCl、乙酸、MeSO3H等可以转化成其酸式盐。
环丙胺和式(CF1)的化合物及它们的对映异构体也是新的。
可包含碱性部分诸如但不限于胺的式I的化合物，可以与多种有机酸和无机酸形成盐。酸加成盐的实例包括乙酸盐(如与乙醋酸或三卤乙酸例如三氟乙酸形成的那些)、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡糖庚酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(与盐酸形成的)、氢溴酸盐(与溴化氢形成的)、氢碘化物、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐(与马来酸形成的)、甲磺酸盐(与甲磺酸形成的)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、pectinates、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(如与硫酸形成的那些)、磺酸盐(如本文涉及的那些)、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐如甲苯磺酸盐、十一酸盐等等。
可含有酸部分，诸如但不限于羧酸的式I的化合物，可以与多种有机碱和无机碱形成盐。碱式盐的实例包括铵盐，碱金属盐如钠盐、锂盐和钾盐，碱土金属盐如钙盐和镁盐，与有机碱(例如，有机胺)如苄星青霉素(benzathines)、二环己胺、哈胺(与N，N-二(去氢枞基)乙二胺形成的)、N-甲基-D-葡萄糖胺、N-甲基-D-葡萄糖酰胺、叔丁基胺形成的盐，以及与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。含氮的碱性基团可以用试剂如低级烷基卤化物(如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、二烷基硫酸盐(例如，二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐)、长链卤化物(例如，癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物)、芳基烷基卤化物(例如，苄基和苯乙基溴化物)，及其他的来季铵化。
例如，本发明化合物的个别的立体异构体可以是基本上不含其他异构体，或可以是混合的，例如，作为外消旋化合物或含有所有其他的，或其他选择的，立体异构体。本发明的手性中心可以具有如IUPAC 1974建议定义的S或R构型。
此外，式(I)的化合物可以有前药的形式。将要在体内转化提供生物活性剂(即，式I的化合物)的任何化合物是前药。例如，式I的前药化合物可以是羧酸酯部分。羧酸(carboxylate ester)可以是便利地通过酯化羧酸形成，或在分离制备中产生。
式I的化合物是利福霉素衍生物，氢醌及其C-1和C-4的醌形式。式I在C-1、C-3、C-4和C-25位置标记，用于说明目的。氢醌和醌形式的式I的化合物在其氧化态是不同的，而且通过利用由试剂如抗坏血酸或高锰酸钾(KMnO4)影响的氧化或还原反应，可以是从一种转化为另一种。
生物学活性 如已经提及的，式I的化合物或其盐具有抗菌的性质并对利福平和喹诺酮抗性株起作用。它们对大量的致病的微生物例如，金黄色葡萄球菌、肺炎葡萄球菌、流感嗜血杆菌等表现出活性。式(I)代表性的化合物按照如下来检定抗微生物活性最小抑菌浓度(MICs)是通过如根据NCCLS指南(National Committee for ClinicalLaboratory Standards，2000)的微量肉汤培养基稀释方法确定。所有的生长孵育在37下进行。细菌培养物在以下的细菌介质中试验阳离子调节的马-欣二氏肉汤培养基中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌；5％CO2大气下添加1mg/mL过氧化氢酶的THY肉汤培养基中的肺炎链球菌，THY肉汤培养基中的化脓性链球菌，BHI肉汤培养基中的粪肠球菌，每5mL添加0.75μL的1mg/mL的NAD和150μL的1mg/ml的血色素的BHI肉汤培养基中的流感杆菌。当前发明的抗微生物活性如表1所示。
金黄色葡萄球菌ATCC 29213、表皮葡萄球菌ATCC 12228、肺炎链球菌ATCC 6303、化脓性链球菌ATCC 19615和粪肠球菌ATCC29212是利福平敏感性的革兰氏阳性菌株。利福平对这些生物表现出极好的活性，MICs介于0.008-1μg/ml之间。当前发明的化合物对这些菌株显示出相似的活性。流感杆菌ATCC 10211是革兰氏阴性菌。利福平对这些生物具有固有的较弱的活性，MICs介于0.24-16μg/ml之间。本发明的化合物证实对这些菌株具有相似的活性。最重要的是，当前发明的化合物证实对利福平耐药性生物有极好的活性。金黄色葡萄球菌ATCC 29213 rpooBD417V是高水平的利福平耐药性菌株，由于RNA聚合酶突变，对于利福平的MIC＞256μg/ml。MICs为0.5μg/ml水平时，当前发明的化合物有效地对抗这种高度利福平耐药菌株。此外，同环丙沙星在8μg/ml时相比，当前发明的化合物证实对喹诺酮耐药的菌株金黄色葡萄球菌MT 1222有极好的活性，MIC介于0.06-0.24μg/ml之间。
式(I)化合物的抗菌活性是受连接物的手性影响的。在星号(*)标记的前手性的连接物碳上，具有(R)-绝对构型的(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV(实施例1)，与具有(S)-绝对构型的(S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV(实施例2)相比，具有令人惊讶的活性。
表1 所选化合物的抗微生物活性(MIC，mcg/ml)
a菌株MT1222，参见Ince & Hooper，Antimicrobial Agents andChemotherapy，2000，44，3344-50。
本发明的化合物可以用作医药，例如肠内或胃肠外给药的单位剂量的药物制剂形式。例如，式I的化合物可以是口服给药，例如单位剂型的片剂、包衣片、糖衣片、硬和软明胶胶囊剂、溶液、乳液或混悬液，经直肠给药，例如栓剂的形式，或胃肠外给药，例如注射液的形式。
药物制剂的制备可以本领域技术人员熟悉的方式进行，使本发明的物质任选地组合其他治疗有效的物质，加之有或没有适合的、无毒的、惰性的、治疗上配伍的固体或液体载体材料，如果期望，还有常用的药用佐剂，得到给药剂型。常用的防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、芳香剂、改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂和抗氧化剂如抗坏血酸、甲醛合次硫酸氢钠被考虑为药用佐剂。无机和有机的载体材料是适合作为这样的载体材料。因此，例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐可以用作片剂、包衣片、糖衣片和硬明胶胶囊的载体材料。适用于软明胶胶囊的载体是，例如植物油、蜡、脂肪和半固体和液体多元醇(然而，根据活性成分的性质，在软明胶胶囊的情况下不需要载体)。适于制备溶液和糖浆剂的载体材料是例如，水、多元醇、蔗糖、转化糖和葡萄糖。适用于注射液的载体材料是例如，水、乙醇、多元醇、甘油和植物油。适用于栓剂的载体材料是例如，天然油或硬化油、蜡、脂肪和半液体或液体多元醇。
对于胃肠外给药而言，式I的化合物及其盐优选是提供为用常用载体如水或等渗盐水稀释的冻干产物或干粉。常用防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、着色剂、改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂和抗氧化剂如抗坏血酸、甲醛合次硫酸氢钠可以考虑为药用佐剂。
因此，例如，无菌的冷冻干产物可以通过用乙醇润湿式I的化合物，混合以转化成它们的盐的量的1M的碳酸钠溶液或NaOH水溶液制得。然后溶液中加入甲醛合次硫酸氢钠，冷冻并低压冻干得到药剂。
局部或经皮给药的此发明化合物的剂型包括软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗液、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴剂。活性组分在无菌条件下与药物上可接受的载体混合，可以需要任何需要的防腐剂或缓冲剂。在此发明的范围内，还关注眼科制剂、滴耳剂、眼膏、粉剂和溶液。软膏剂、糊剂、乳膏和凝胶剂可以包含除本发明的活性化合物之外的赋形剂如动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、西黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或其混合物。
粉剂和喷雾剂可以包含除本发明的活性化合物之外的赋形剂如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾剂可以另外包含常规的抛射剂如氯氟烃。
经皮的贴剂具有提供控制传送化合物至身体的更多的优点。这样的剂型可以通过把化合物溶解或分散于适合的介质中制得。吸收增强剂还可以用于增强化合物穿过皮肤的通量。通过提供速率控制膜或把化合物分散于聚合物基质或凝胶，可以控制速率。
根据本发明的治疗的方法，通过以获得期望的治疗效果所需的量和时间向患者给药治疗有效量的本发明的化合物来治疗或预防患者如人或动物中的细菌感染或传染病。本发明化合物的术语“治疗有效量”指的是在可适用于任何的医学治疗的合理的利益风险比下足以治疗细菌感染的化合物的量。然而，应当理解，发明的化合物和组合物的总的每日使用，将由主治医师在可靠的医学判断的范围决定。任何具体患者的特定的治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括要治疗的疾病、病症的严重度、所用特定化合物的活性、所用的特定组合物，患者的年龄、体重、全身健康、性别和饮食，给药的时间、给药的途径、以及所用特定化合物的排泄的速率，治疗的持续时间，与所用的特定化合物联合或同时使用的药物，和医药领域熟知的类似因素。
式I的化合物是以它们抑制三种细菌酶的能力著名，因此表现出高的抗菌活性，可以分别地与其他类的已知抗菌药物表现出协同效应。实例是β-内酰胺类如头孢曲松、噁唑烷酮类类如利奈唑胺，抗菌肽类如万古霉素、dalbavancin、达托霉素和多霉素B。它们同membrance-活性的聚阳离子肽多霉素如粘菌素在治疗由革兰氏阴性细菌如埃布氏菌、绿脓杆菌引起的感染中，可以产生协同效应。在人医学中，口服、直肠或胃肠外给药开始考虑本发明的式I的一个或多个化合物的这样组合的。式子I化合物与已知抗生素的的组合比例可以在宽泛的范围内变化，可使适于各个特定病例中的个体需要量。
以单一剂量或分开的剂量给药与人或动物的此发明化合物的总的日剂量可以是总计，例如0.1-100mg/kg体重或优选是0.25-25mg/kg体重。约10mg-约2g的本化合物的每日剂量可以是给药于普通成人。单一剂量组合物可以包含这样的量或其约数来组成日剂量。通常，本发明的治疗法包括给予感染的患者这样的治疗，每日单一剂量或多剂量的约10mg-约2000mg的此发明的化合物。目前发明的化合物可以是口服、直肠、胃肠外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部、颊给药或作为口腔或鼻腔喷雾给药。
缩写 本文所用的缩写具有本领域技术人员已知的含义。特别地，Ac表示乙酰基、AOC表示烯丙氧基羰基、BOC表示正丁氧基羰基、Bn表示苄基、Bu表示丁基、Bz表示苯甲酰基、Cbz表示苄氧羰基、CDI表示羰二咪唑、DCM表示二氯甲烷、DMAP表示4-N，N-二甲氨基吡啶、DME表示1，2-二甲氧基乙烷、DMF表示N，N-二甲基甲酰胺、DMSO表示二甲亚砜、Et表示乙基、EtOAc表示乙酸乙酯、Me表示甲基、MEM表示2-甲氧基乙氧基甲基、MOM表示甲氧基甲基、NMP表示N-甲基吡咯烷酮、Ph表示苯基、Pr表示丙基、TEA表示三乙胺、TFA表示三氟乙酸、THF表示四氢呋喃、TMS表示三甲基硅烷基和Ts表示对甲苯磺酰基。
特定的组合物 可参考以下的实施例来更好地理解目前发明的化合物，其代表本发明的某些实施方案，不是想要用于限制本发明。
在这些实施例中使用的所有起始原料是从商业来源购得或根据公开的文献制得。涉及湿气和/或氧气敏感的材料的操作是在氮保护气下进行。使用硅胶60作为正相吸附剂或C18硅胶作为反相吸附剂，进行快速色谱法。使用从E.Merck购得的预涂层板完成薄层色谱法(″TLC″)和制备薄层色谱法(″PTLC″)，使用适合的染色剂之后，斑在紫外线下显影。核磁共振(″NMR″)谱记录在Varian 400MHz磁共振谱仪中。1H NMR化学位移是从TMS获得百万分之一(δ)的低磁场，使用残留溶剂信号(CHCl3＝δ7.27，CH3OH＝δ3.31)作为内标。1H NMR信息以下列的格式显示质子数、多倍(s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；t d，两合三重峰；dt，三合双峰)，赫兹计的偶合常数(J)。前缀app是临时应用在真实信号重合不能分解的情况下，前缀br表示宽的信号。电喷射离子化质谱记录在Finnegan LCQadvantage spectrometer中。
实施例1 (R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基]哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV
步骤1.(S)-甲磺酸1-苄基-吡咯烷-3-基酯 (S)-1-苄基-3-羟基吡咯烷(20.2g，114mmol)溶解于甲苯(200mL)中。向此搅拌的溶液中，加入三乙胺(20mL，142mmol)，接着在0℃下的40分钟内加入甲磺酰氯(10.5mL，136mmol)。所得浆液在0℃下搅拌2小时，再向反应混合物中加入7％的碳酸氢钠(200mL)。分离有机层，水层用甲苯(3×100mL)萃取。合并的有机层用饱和的碳酸氢钠(3×200mL)洗，通过Na2SO4干燥，并减压浓缩得到(S)-甲磺酸1-苄基-吡咯烷-3-基酯，为黄色油(28g，96％)。物质直接用于下一步，无需纯化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-7.17(m，5H)，5.24-5.18(m，IH)，3.71(d，JAB＝13.0Hz，1H)，3.64(d，JAB＝13.0Hz，IH)，3.01(s，3H)，2.89-2.80(m，3H)，2.56-2.50(m，1H)，2.38-2.31(m，1H)，2.14-2.07(m，1H)。
步骤2.(R)-1-苄基-3-氰基吡咯烷 在室温下，(S)-甲磺酸1-苄基-吡咯烷-3-基酯(28g，110mmol)溶解于无水乙腈(60mL)中，一次性加入固体氰化四丁基铵(59g，220mmol)。所得的混合物在65℃下加热16小时并冷却至室温。加入饱和的NaHCO3(100mL)溶液。分离有机层，水层用甲苯萃取(3×100mL)。合并的有机层用水(3×100mL)、盐水洗，通过Na2SO4干燥，减压浓缩至获得(R)-1-苄基-3-氰基吡咯烷，为褐色油(21g)，其在150℃/5mmHg的真空下蒸馏获得无色液体(19g，85％)[α]23-22.0(c＝2.5，MeOH)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.17(m，5H)，3.66(app s，2H)，3.05-2.99(m，1H)，2.93(app t，J＝8.8Hz，1H)，2.72-2.60(m，3H)，2.31-2.22(m，1H)，2.17-2.11(m，1H)。
步骤3.(R)-1-(1-苄基-吡咯烷-3-基)-环丙胺 向(R)-1-苄基-3-氰基吡咯烷(10g，53.4mmol)的无水醚(200mL)溶液中加入Ti(OiPr)4(17.2mL，58.8mmol)，所得的溶液冷却至-78℃。在-78℃下的40分钟内滴加EtMgBr(3.0M的Et2O，35mL，105mmol，Aldrich)。无水的THF*(50mL)加入所得的黄色悬浮液中，促进搅拌，溶液在-78℃下搅拌20分钟。反应混合物缓慢加热至室温，然后加入BF3·Et2O(13.4mL，107mmol)，得到的深褐色混悬液在室温下搅拌2小时。接着把1N HCl(100mL)和Et2O(200mL)引入反应混合物，保持搅拌20分钟，直至有机相和水相变得澄清。使用20％NaOH水溶液(100mL)将其碱化，搅拌30分钟。分离有机相，水相用Et2O(2×100mL)萃取。合并的有机相通过Na2SO4干燥，减压浓缩获得(R)-1-(1-苄基-吡咯烷-3-基)-环丙胺，为褐色油(10.5g，90％)，真空蒸馏获得无色液体(9g，77％)。相对于下一步的使用，产品是足够纯的。就特征而言，少量的样品通过PTLC纯化，使用溶剂NH4OH/MeOH/CH2Cl2(1/60/340)[α]23-10.0(c＝2.5，MeOH)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.23(m，5H)，3.62(d，JAB＝12.8Hz，1H)，3.56(d，JAB＝12.8Hz，1H)，2.66-2.57(m，3H)，2.40-2.37(m，1H)，1.96-1.91(m，2H)，1.69-1.62(m，1H)，0.55-0.48(m，2H)，0.41-0.36(m，2H)。
步骤4.(R)-4-{[1-(1-苄基-吡咯烷-3-基)-环丙基]-甲基-氨基}-哌啶-1-羧酸叔丁基酯
向含(R)-1-(1-苄基-吡咯烷-3-基)-环丙胺(18.6g，87mmol)和4-氧-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(22.7g，113mmol)的THF(500mL)溶液中，加入冰HOAc(31mL)。溶液在室温下搅拌1小时，再加入NaBH(OAc)3(65g，306mmol)。在37％的甲醛(30mL，262mmol)水溶液加入之前，所得的混悬液在室温下搅拌整夜。反应混合物搅拌3小时并反应完全，然后在0℃下加入20％NaOH水溶液(300mL)。混合物搅拌2h，层分离。水层用EtOAc萃取(3×300mL)。合并的有机相通过硫酸钠干燥，真空下浓缩。残留物用快速色谱法纯化(梯度洗脱液，含1％-10％甲醇的二氯甲烷)获得标题化合物，为浅黄色油(27g)ESI MS m/z 414.3(M+H+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.23(m，5H)，4.24-4.02(m，2H)，3.88-3.80(m，1H)，3.60(d，JAB＝12.8Hz，1H)，3.53(d，JAB＝12.8Hz，1H)，2.82-2.57(m，5H)，2.31(s，3H)，2.28-2.22(m，1H)，1.94-1.80(m，4H)，1.44(s，9H)，1.42-1.28(m，3H)，0.55-0.53(m，4H)。产物的手性纯度通过手性的-Cel OD柱(0.46cm×25cm，Daicel Chemical industries，Ltd，柱产品目录号OD00CE-E1031)分析，为95％ee，使用含0.1％二乙胺的乙腈作为流动相(流速1mL/min；期望的保留时间5.23min，5.93异构体)。
步骤5.(R)-4-[甲基-(1-吡咯烷-3-基-环丙基)-氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯 (R)-4-{[1-(1-苄基-吡咯烷-3-基)-环丙基]-甲基-氨基}-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(14g)在室温下溶解于氢化烧瓶中的150mL冰醋酸中，烧瓶中的空气被抽空，充满氮气。向其中加入30％Pd/C(5g)，烧瓶架在Parr振荡器上，抽空氮气，充入氢气，在氢保护气氛60psi下，混合物在Parr中振摇18小时。反应混合物用甲苯(300mL)稀释，通过硅藻土垫过滤。滤液在真空下浓缩，残留物在0℃下的冷的30％NaOH中水解，产物用乙酸乙酯萃取。合并的乙酸乙酯溶液装载50g的木炭(Darco G-60)，搅拌2小时，过滤，浓缩得浅黄色油，其可以真空蒸馏获得澄清的油(9.6g)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ4.04(br s，1H)，3.01(dd，J＝10.4Hz和7.6Hz，1H)，2.84(dd，J＝8.0Hz和5.2Hz，2H)，2.64-2.55(m，3H)，2.48-2.43(m，2H)，2.30(s，3H)，2.28-2.23(m，1H)，2.23-1.74(m，3H)，1.40(s，9H)，1.35-1.28(m，2H)，1.18-1.12(m，2H)，0.53-0.45(m，4H)。
步骤6.8-(3-{1-[(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-甲基-氨基]-环丙基}-吡咯烷-1-基)-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸乙酯 存在碳酸氢钠(8g)下的含8氯-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪酮-3-羧酸乙酯(8.4g，25mmol)和4-[甲基-(1-吡咯烷-3-基-环丙基)-氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(10.6g，25mmol)的乙腈(150mL)的搅拌溶液在圆底烧瓶中加热回流5小时。真空下除去溶剂，残留物分配于1N NaOH和乙酸乙酯中，并很好地振摇。有机层分离，用盐水洗，通过硫酸钠干燥，在真空下浓缩。残留物通过快速色谱法(含75％乙酸乙酯的己烷，再含10％MeOH的二氯甲烷)获得黄色固体(15g，99％)。ESI MS m/z 611.3(M+H+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.25(d，J＝10.8Hz，1H)，8.18(s，1H)，4.42-4.37(m，2H)，4.15-4.10(m，3H)，3.92-3.88(m，1H)，3.58-3.56(m，2H)，3.48-3.44(m，1H)，2.73-2.62(m，5H)，2.57(s，3H)，2.39(s，3H)，2.18-2.13(m，1H)，2.00-1.94(m，1H)，1.84-1.78(m，2H)，1.46(s，9H)，1.42(t，J＝7.2Hz，3H)，1.28-1.25(m，1H)，1.07-0.93(m，2H)，0.84-0.68(m，4H)，0.60-0.52(m，2H)。
步骤7.8-(3-{1-[(1-叔丁氧羰基-哌啶-4-基)-甲基-氨基]-环丙基}-吡咯烷-1-基)-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸 向圆底烧瓶里的8-(3-{1-[(1-叔丁氧羰基-哌啶-4-基)-甲基-氨基]-环丙基}-吡咯烷-1-基)-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸乙酯(15g，24mmol)的乙醇(200mL)溶液中加入LiOH(10g，238mmol)的水(100mL)溶液。溶液在60℃下加热1小时。所得溶液分配于二氯甲烷(400mL)和饱和的NH4Cl(200mL)水溶液之间，很好地振摇。分离有机层，用盐水洗，通过硫酸钠干燥，真空下浓缩得黄色固体(14g)。其无需进一步纯化即可使用。
步骤8.1-环丙基-7-氟-9-甲基-8-{3-[1-(甲基-哌啶-4-基-氨基)-环丙基]-吡咯烷-1-基}-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸 在0℃下，向搅动的含8-(3-{1-[(1-叔丁氧羰基-哌啶-4-基)-甲基-氨基]-环丙基}-吡咯烷-1-基)-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸(14g)的二氯乙烷(100mL)溶液中缓慢加入三氟乙酸(30mL)。所得的溶液在1小时内从0℃搅动至室温。真空除去溶剂，得到黄色油，其溶解于含20％IPA的二氯甲烷中，溶液用饱和的NaHCO3水溶液中和，得到两个澄清的相，两个相很好地振荡。分离有机层，水相用20％IPA/CH2Cl2萃取。合并的有机萃取物用盐水洗，通过硫酸钠干燥并在真空下浓缩得黄色固体(10g)，固体从甲醇/水中结晶获得结晶固体(8g)。ESI MS m/z 483.3(M+H+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.88(d，J＝10.0Hz，IH)，7.93(s，1H)，4.03-3.98(m，1H)，3.79-3.75(m，1H)，3.66-3.62(m，1H)，3.58-3.52(m，1H)，3.47-3.44(m，2H)，3.05-2.88(m，4H)，2.62(s，3H)，2.49(s，3H)，2.35-2.23(m，3H)，2.06-2.02(m，1H)，1.70-1.58(m，2H)，1.51-1.44(m，1H)，0.93-0.64(m，8H)。
步骤9.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV 1-环丙基-7-氟-9-甲基-8-{3-[1-(甲基-哌啶-4-基-氨基)-环丙基]-吡咯烷-1-基}-4-氧-4H-喹嗪-3-羧酸(9.2g，19mmol)在室温下溶解于1N NaOH溶液(120mL)中。其在氩保护气下冷却至0℃。在0℃下，向此均相溶液中滴加入新鲜配制的羟胺-O-硫酸(H2N-OSO3H，2g，18.5mmol)的H2O(10mL)溶液。所得的溶液在此温度下搅拌1小时，加入过量的乙酸(22mL)酸化至pH 5，接着加入抗坏血酸(1g)。溶液然后用甲醇(280mL)稀释。在室温下30分钟内向搅拌所得溶液中缓慢加入3-甲酰利福霉素(8.2g，40mL的甲醇/THF(3∶1)中11.3mmol)的均相溶液。产物缓慢从均相反应混合物中沉淀出。加入后，在室温下保持搅拌反应混合物30分钟，1小时内冷却至0℃，收集沉淀物，用冷甲醇(3×20mL)洗得到9.5g。收集的沉淀溶解于二氯甲烷(100mL)中，此溶液用含0.5％抗坏血酸的5％柠檬酸溶液(100mL)搅拌2小时，振动两相。分离有机相，用相同的水性溶液洗，通过硫酸钠干燥。向干燥的滤液中加入一半容量的乙醇，并在真空下浓缩得有机固体(8.5g)。1克的有机固体按照如下结晶固体(1克)溶解于5mL的丙酮与水(95∶5)中，搅拌后的溶液在55-60℃的油浴中加热直到均相。溶液在搅拌(200rpm)下缓慢冷却至室温。一旦形成沉淀，使混合物在室温下搅拌2小时，使用布氏漏斗在冷溶剂的帮助下收集沉淀之前，在冰浴中2小时内冷却至0℃。滤饼压干，用5mL的冷丙酮/水(95∶5)洗，再压干。滤饼真空干燥至常量(获得830mg)得到标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ13.82(s，1H)，13.52(br s，1H)，13.25(单峰，1H)，11.98(单峰，1H)，9.04(d，J-9.2Hz，1H)，8.22(s 1H)，7.97(s，1H)，6.58-6.50(m，1H)，6.37-6.34(m，1H)，6.18(d，J＝12.4Hz，1H)，5.94-5.87(m，1H)，5.07(dd，J＝6.8，12.8Hz，1H)，4.89(d，J＝10.8Hz，1H)，3.93-3.87(m，1H)，3.72(d，J＝9.6Hz，1H)，3.66-3.52(m，4H)，3.48-3.42(m，3H)，3.00(s，3H)，3.00-2.95(m，1H)，2.65-2.50(m，6H)，2.37(s，3H)，2.36-2.30(m，1H)，2.19(s，3H)，2.18-2.10(m，1H)，2.02(app s，6H)，2.00-1.82(m，2H)，1.76(s，3H)，1.65-1.40(m，10H)，1.32-1.17(m，2H)，1.08-1.02(m，IH)，0.96(d，J＝6.8Hz，3H)，0.90-0.85(m，1H)，0.82(d，J＝6.8Hz，3H)，0.78-0.62(m，3H)，0.56(d，J＝6.4Hz，3H)，-0.35(d，J＝6.8Hz，3H)；MSESI m/z 1173.6(M-MeO，最大量)+，1205.6(M+H，母液)+；HPLC分析保留时间17.8分，等度洗脱30分钟内47％B(分析柱Agilent，Zorbax SB-aq，5mc-m，4.6×150mm；溶剂A含0.1％TFA的HPLC水；溶剂B含0.1％TFA的HPLC乙腈)。
实施例2 (S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV 标题化合物根据与(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV的制备相同的流程图来制得，除了用(R)-1-苄基-3-羟基吡咯烷替换实施例1步骤1中的(S)-1-苄基-3-羟基吡咯烷。HPLC分析保留时间20.5分钟等度洗脱30分钟内47％B(分析柱Agilent，Zorbax SB-aq，5mc-m，4.6×150mm；溶剂A含0.1％TFA的HPLC水；溶剂B含0.1％TFA的HPLC乙腈)。
实施例3 (R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素S 向含(R)-3-[(4-{1-{1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-9-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV(250mg，0.207mmol)的乙酸乙酯(50ml)溶液中加入溶解了六氰基高铁酸钾(potassium hexacyanoferrate)(III)(500mg，1.52mmol)的pH 7.4的水性磷酸盐缓冲剂的溶液(50ml)。混合物在23℃下剧烈搅拌1小时，再加入另外部分的六氰基高铁酸钾(III)(500mg，1.52mmol)，继续搅拌1小时。分离有机层，通过无水硫酸钠干燥，浓缩得产物，为深色油。该油溶解于二氯甲烷中，用己烷稀释，缓慢浓缩得产物，为深色细粉177mg(71％)。ESIMS m/z 1171(M-MeO最大量)，1203.3(M+H+)；HPLC分析保留时间14.45分钟等度洗脱30分钟内47％B(分析柱Agilent，ZorbaxSB-aq，5μm，4.6×150mm；溶剂A含0.1％TFA的HPLC水；溶剂B含0.1％TFA的HPLC乙腈)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ13.72(brs，1H)，12.63(s，1H)，10.4-10.2(m，2H)，8.98-8.92(m，1H)，8.10(s，1H)，7.60(s，1H)，6.8-6.6(m，2H)，6.30-6.20(m，1H)，6.09-5.95(m，1H)，5.95-5.80(m，1H)，5.05-4.84(m，2H)，3.95-3.20(m，8H)，2.95(s，3H)，2.82-2.62(m，7H)，2.60-2.40(m，1H)，2.42(s，3H)，2.25(s，3H)，2.20-2.15(s，3H)，1.91(s，3H)，2.05-1.72(m，6H)，1.72-1.20(m，18H)，1.09-1.00(s，3H)，0.99-0.40(m，4H)，0.1-0.1(s，3H)。
实施例4 (R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基)-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-25-脱乙酰-利福霉素SV 在0℃下，向如上制得的(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素S(267mg，0.22mmol)的MeOH(5.0mL)与THF(5.0mL)溶液中，加入LiOH·H2O(37.0mg，0.88mL)的H2O(2.0mL)溶液。所得的溶液在相同的温度下搅拌约5小时，用CH2Cl2稀释，用5％的AcOH/H2O溶液洗两次，通过Na2SO4干燥。除去溶剂，残留物通过采用10％MeOH/CH2Cl2的制备薄层色谱纯化，得到深褐色固体。固体溶解于MeOH(10mL)中，向其中加入含抗坏血酸(100mg，0.57mmol)的H2O(2.0mL)溶液。混合物在室温下搅拌2小时，用CH2Cl2稀释，用水洗三次，通过Na2SO4干燥。除去溶剂得到标题化合物，为橙色固体(136mg，53％收率)。ESI MS m/z 1131.5(M-MeO)+；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ13.87(s，1H)，13.53(br s，1H)，13.34(s，1H)，13.24(s，1H)，12.12(s，1H)，9.02(d，J＝9.2Hz，1H)，8.27(s 1H)，8.16(s，1H)，6.81-6.72(m，1H)，6.43(d，J＝12.8Hz，1H)，6.23(d，J＝12.8Hz，1H)，5.88-5.81(m，1H)，5.21(dd，J＝6.8，12.8Hz，1H)，4.82(br s，IH)，3.98-3.90(m，2H)，3.75-3.50(m，8H)，3.39(d，J＝12.0Hz，3H)，3.24(s，3H)，3.23-3.20(m，IH)，3.20(br s，1H)，2.74-2.52(m，6H)，2.44(s，3H)，2.38-2.30(m，2H)，2.23(s，3H)，2.18(s，1H)，2.08(s，3H)，2.07-1.90(m，4H)，1.80(s，3H)，1.66-1.50(m，2H)，1.12-1.07(m，1H)，1.03(d，J＝7.2Hz，3H)，1.02-0.95(m，1H)，0.92-0.78(m，5H)，0.76-0.60(m，7H)，0.47(d，J＝6.8Hz，3H)；HPLC分析保留时间9.3分钟等度洗脱30分钟内47％B(分析柱Agilent，Zorbax SB-aq，5μm，4.6×150mm；溶剂A含0.1％TFA的HPLC水；溶剂B含0.1％TFA的HPLC乙腈)。
实施例5 (R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV 标题化合物根据与(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV(实施例1)相同的流程图制得，除了在实施例1的第4步未加入甲醛。ESI MS m/z 1159.6(M-MeO)+；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ13.88(s，1H)，13.51(br s，1H)，13.28(s，1H)，13.04(br s，1H)，12.01(s，1H)，9.03(d，J＝10.8Hz，1H)，8.26(s 1H)，8.18(s，1H)，6.62-6.55(m，1H)，6.41(d，J＝11.2Hz，1H)，6.23(d，J＝12.4Hz，1H)，5.95(d，J＝16.4Hz，1H)，5.11(dd，J＝6.8，12.0Hz，1H)，4.93(d，J＝10.8Hz，1H)，3.97(br s，1H)，3.76(d，J＝9.2Hz，1H)，3.66-3.46(m，8H)，3.05(s，3H)，3.04-2.92(m，2H)，2.84-2.64(m，3H)，2.62(s，6H)，2.41-2.37(m，1H)，2.23(s，3H)，2.19-2.15(m，1H)，2.07(apps，6H)，2.04-1.96(m，4H)，1.87-1.82(m，1H)，1.81(s，3H)，1.70-1.36(m，4H)，1.12-1.07(m，1H)，1.01(d，J＝6.4Hz，3H)，1.00-0.92(m，1H)，0.86(d，J＝6.4Hz，3H)，0.71-0.52(m，7H)，-0.31(d，J＝6.4Hz，3H)。
实施例6 (R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV，二钠(药剂)。
在室温下，把(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基)-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基)-利福霉素SV(115mg，0.095mmol)放置于圆底烧瓶中，向其中加入乙醇(0.2mL)并很好混合，加入0.22mL的1M碳酸钠溶液，混合物搅拌5分钟，用4.5mL的水稀释，搅拌30分钟或直至均相，加入甲醛合次硫酸氢钠(HOCH2SO2Na·2H2O)(1.2mg)，搅拌5分钟，过滤均相溶液。滤液放置于氮保护气下的无水冰-丙酮浴中30分钟。冻结的固体冻干得到松散的橙色固体(137mg，82.7％药物效能)。
实施例7冻干法 式I的化合物，例如(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV混合下表7.1所示的组分后冻干。
表7.1重量式I的化合物 120mg氢氧化钠 8mg甲醛合次硫酸氢钠 1.2mg总重 122mg 组分的混合物然后冷冻并冻干。
本领域技术人员容易理解，公开的发明很好地适于实现提及和固有的目的。本发明描述的实施例、药物组合物、药剂、方法、操作和技术作为代表优选的实施方式，并不想要作为本发明范围的限制。因此，本领域技术人员想到的其他应用包括于本发明描述的精神和范围之内。
权利要求
1.一种通式I的化合物(氢醌或相应的醌(C1-C4)形式) 或其盐类、水合物类或前药类；其中R1包括氢或乙酰基，R2包括氢、甲基或其他低级烷基；其中星号(*)表示具有手性中心的碳，其中绝对构型指定为R或S。
2.一种具有选自下式的化合物a.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV b.(S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV c.(R/S)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV d.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素S e.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-25-脱乙酰-利福霉素SV f.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基1-氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV g.(R)-3-[(4-{1-[1-(3-羧基-1-环丙基-7-氟-9-甲基-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)-吡咯烷-3-基-环丙基]-甲氨基}-哌啶-1-基亚氨基)-亚甲基]-利福霉素SV
3.一种制备氢醌或相应醌(C1-C4)形式的通式I化合物的方法 或其盐类、水合物类或前药类；其中R1包括氢或乙酰基，R2包括氢、甲基或其他低级烷基；其中星号(*)表示具有手性中心的碳，其中绝对构型指定为R或S，包括在约0℃-约50℃的溶剂中，式AF2的肼偶合 式3FRF的3-甲酰利福霉素
4.权利要求3的方法，其中溶剂是水、乙醇、甲醇、THF、丙酮、乙酸或其混合物。
5.权利要求3的方法，进一步包括加入选自氢氧化钠、抗坏血酸、抗坏血酸的盐或醋酸钠的添加剂。
6.一种制备式AF1的二氨基酸的方法 包括在约20℃-约100℃的温度下，在存在第一个碱的溶剂中，式BF1的三胺 与式BF2的4H-4-氧代喹嗪反应 生成式BF3的化合物 ，向式BF3的化合物中加入含第二个碱的醇溶剂，生成式BF4的化合物 向式BF4的化合物中加入酸，生成式AF1的二氨基酸。
7.权利要求6的方法，其中溶剂是乙腈，第一个碱是NaHCO3，第二个碱是LiOH，醇溶剂是乙醇，酸是三氟乙酸。
8.一种制备受保护的式BF1的三胺的方法， 包括1-苄基-3-羟基吡咯烷和甲磺酸化试剂在存在碱并在第一个溶剂中反应生成甲磺酸盐；在约20℃-约70℃的温度下，甲磺酸盐和氰化物在存在相转移催化剂在第二个溶剂中反应，生成氰基化合物；氰基化合物和溴化乙基镁在四异丙氧钛的存在下，反应生成中间体氰基化合物；在约-78℃至约室温的温度下，中间体氰基化合物和路易斯酸在第三个溶剂中反应，生成环丙胺；环丙胺和N-BOC 4-哌啶酮反应生成中间体胺化的环丙胺；中间体胺化的环丙胺和还原氢化物在第四个溶剂中反应，生成式CF1的化合物 式CF1的化合物和钯催化剂在第五个溶剂中反应，生成受保护的三胺。
9.权利要求8的方法，其中甲磺酸化试剂是甲磺酰氯化物或甲磺酰酸酐，碱是三乙胺，第一个溶剂是甲苯或乙酸乙酯。
10.权利要求8的方法，其中氰化物是氰化四丁基铵、氰化三乙基苄基铵或无机氰化物，其中相转移催化剂是氰化四丁基铵，其中第二个溶剂是乙腈。
11.权利要求8的方法，其中路易斯酸是BF3醚合物，第三个溶剂是THF、醚、二噁烷或其混合物。
12.权利要求8的方法，其中还原氢化物是三乙酰氧基硼氢化钠和第四个溶剂是THF、二氯甲烷、乙酸或其混合物。
13.权利要求8的方法，其中钯催化剂是10％的碳载钯或20％氢氧化钯，其中第四个溶剂是乙醇、甲醇、乙酸或其混合物。
14.药剂包含权利要求1的化合物，有或没有治疗上的惰性成分。
15.权利要求1的化合物治疗或预防传染病的用途。
全文摘要
具有以下通式(I)结构的利福霉素衍生物(氢醌和相应的醌(C
文档编号A61P31/04GK101031572SQ200580030859
公开日2007年9月5日 申请日期2005年7月21日 优先权日2004年7月22日
发明者C·Z·丁, 马振坤, 李静, S·哈兰, 何勇, K·P·迈纳, I·H·金, J·C·朗古德, 靳亚非, K·D·康姆布林克 申请人:坎布里制药公司